Researcher Database

Norio Amizuka
Faculty of Dental Medicine Division of Dental Medicine Department of Health Science
Professor

Researcher Profile and Settings

Affiliation

  • Faculty of Dental Medicine Division of Dental Medicine Department of Health Science

Job Title

  • Professor

Degree

  • Doctor of Dental Science(Niigata University)
  • Doctor of Dental Surgery(Niigata University)

Research funding number

  • 30242431

J-Global ID

Research Interests

  • 形態系基礎歯科学   Oral Anatomy and Morphological Basic Dentistry   

Research Areas

  • Life sciences / Oral medicine

Academic & Professional Experience

  • 2018/04 - Today 北海道大学大学院歯学研究院 副歯学研究院長 副歯学院長 副歯学部長 兼任
  • 2017/04 - Today 北海道大学大学院歯学研究院 教授
  • 2009/05 - 2017/03 Hokkaido University Graduate School of Dental Medicine
  • 2005/09 - 2009/04 Niigata University Center for Transdisciplinary Research
  • 2003/05 - 2005/08 Niigata University Center for Transdisciplinary Research
  • 2002/01 - 2003/04 Niigata University Graduate School of Medical and Dental Sciences
  • 1992/04 - 2001/12 Niigata University Faculty of Dentistry

Education

  •        - 1992  Niigata University
  •        - 1992  Niigata University  Graduate School, Division of Dental Research
  •        - 1988  Niigata University  Faculty of Dentistry  School of Dentistry
  •        - 1988  Niigata University  Faculty of Dentistry

Association Memberships

  • 国際骨代謝学会   日本骨粗鬆症学会   THE JAPANESE SOCIETY OF MICROSCOPY   日本骨形態計測学会   アメリカ骨代謝学会   国際歯科研究学会   日本解剖学会   日本骨代謝学会   歯科基礎医学会   

Research Activities

Published Papers

  • Kitagawa Y, Ohga N, Asaka T, Sato J, Hata H, Helman J, Tsuboi K, Amizuka N, Kuge Y, Shiga T
    The Japanese dental science review 55 (1) 65 - 70 1882-7616 2019/11 [Refereed][Not invited]
  • Hasegawa T, Miyamoto-Takasaki Y, Abe M, Qiu Z, Yamamoto T, Yoshida T, Yoshino H, Hongo H, Yokoyama A, Sasaki M, Kuroshima S, Hara K, Kobayashi M, Akiyama Y, Maeda T, Luiz de, Freitas PH, Li M, Amizuka N
    Microscopy (Oxford, England) 68 (5) 349 - 358 2050-5698 2019/10 [Refereed][Not invited]
  • Eldecalcitol effects on osteoblastic differentiation and function in the presence or absence of osteoclastic bone resorption.
    Bu J, Du J, Shi L, Feng W, Wang W, Guo J, Hasegawa T, Liu H, Wang X, Li M
    Exp Ther Med. 18 (3) 2111 - 2121 2019/09 [Refereed][Not invited]
  • Diallyl Disulfide Induces Apoptosis and Autophagy in Human Osteosarcoma MG-63 Cells through the PI3K/Akt/mTOR Pathway.
    Yue Z, Guan X, Chao R, Huang C, Li D, Yang P, Liu S, Hasegawa T, Guo J, Li M
    Molecules. 24 (14) E2665  2019/07 [Refereed][Not invited]
  • Silencing FOXO1 attenuates dexamethasone-induced apoptosis in osteoblastic MC3T3-E1 cells.
    Xing L, Zhang X, Feng H, Liu S, Li D, Hasegawa T, Guo J, Li M
    Biochem Biophys Res Commun. 513 (4) 1019 - 1026 2019/06 [Refereed][Not invited]
  • Toriu N, Ueno T, Mizuno H, Sekine A, Hayami N, Hiramatsu R, Sumida K, Yamanouchi M, Hasegawa E, Suwabe T, Hoshino J, Sawa N, Takaichi K, Fujii T, Hasegawa T, Amizuka N, Yanagita M, Ubara Y
    Bone reports 10 100187  2019/06 [Refereed][Not invited]
  • Yamamoto T, Hasegawa T, Hongo H, Amizuka N
    Microscopy (Oxford, England) 68 (3) 243 - 253 2050-5698 2019/06 [Refereed][Not invited]
  • Yamamoto T, Hasegawa T, Hongo H, Amizuka N
    Journal of oral biosciences 61 (2) 105 - 114 1349-0079 2019/06 [Refereed][Not invited]
  • Sakai S, Hongo H, Yamamoto T, Hasegawa T, Takeda S, Saito H, Endo K, Yogo K, Amizuka N
    Calcified tissue international 104 (3) 251 - 261 0171-967X 2019/03 [Refereed][Not invited]
  • Ohshima H, Amizuka N
    Journal of oral biosciences 61 (1) 1 - 4 1349-0079 2019/03 [Refereed][Not invited]
  • Role of sodium-dependent Pi transporter/Npt2c on Pi homeostasis in klotho knockout mice different properties between juvenile and adult stages.
    Hanazaki A, Sasaki S, Koike M, Tanifuji K, Arima Y, Kaneko T, Shiozaki Y, Hasegawa T, Amizuka N, Miyamoto K, Segawa H
    2019 [Refereed][Not invited]
  • Hasegawa T, Miyamoto Y, Yamamoto T, Amizuka N
    Nihon yakurigaku zasshi. Folia pharmacologica Japonica 153 (1) 16 - 21 0015-5691 2019 [Refereed][Not invited]
  • Khadiza N, Hasegawa T, Nagai T, Yamamoto T, Miyamoto-Takasaki Y, Hongo H, Abe M, Haraguchi M, Yamamoto T, Yimin, Qiu Z, Sasaki M, Kuroshima S, Ohshima H, Freitas PHL, Li M, Yawaka Y, Amizuka N
    Biomedical research (Tokyo, Japan) 40 (4) 133 - 143 0388-6107 2019 [Refereed][Not invited]
  • Siglec-15-Targeting Therapy Increases Bone Mass in Rats and Is a Potential Therapeutic Strategy for Juvenile Osteoporosis
    Sato Dai, Takahata Masahiko, Ota Masahiro, Fukuda Chie, Tsuda Eisuke, Shimizu Tomohiro, Hamano Hiroki, Hiratsuka Sigeto, Okada Akiko, Fujita Ryo, Amizuka Norio, Hasegawa Tomoka, Iwasaki Nrimasa
    JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH 33 34  0884-0431 2018/11 [Refereed][Not invited]
  • Biological Effects of Abaloparatide on Bone Mass and Bone Turnover in Mice, a Comparison with Teriparatide.
    Makino Akito, Hasegawa Tomoka, Amizuka Norio
    JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH 33 295  0884-0431 2018/11 [Refereed][Not invited]
  • Sato D, Takahata M, Ota M, Fukuda C, Tsuda E, Shimizu T, Okada A, Hiruma Y, Hamano H, Hiratsuka S, Fujita R, Amizuka N, Hasegawa T, Iwasaki N
    Bone 116 172 - 180 8756-3282 2018/11 [Refereed][Not invited]
  • Hasegawa T, Yamamoto T, Sakai S, Miyamoto Y, Hongo H, Qiu Z, Abe M, Takeda S, Oda K, de Freitas PHL, Li M, Endo K, Amizuka N
    The journal of histochemistry and cytochemistry : official journal of the Histochemistry Society 67 (3) 22155418806865 - 184 0022-1554 2018/10 [Refereed][Not invited]
  • Zhang X, Feng H, Du J, Sun J, Li D, Hasegawa T, Amizuka N, Li M
    International journal of molecular medicine 42 (6) 3135 - 3148 1107-3756 2018/09 [Refereed][Not invited]
  • Akemi Shimada, Hisashi Ideno, Yoshinori Arai, Koichiro Komatsu, Satoshi Wada, Teruhito Yamashita, Norio Amizuka, Ernst Pöschl, Bent Brachvogel, Yoshiki Nakamura, Kazuhisa Nakashima, Hiroaki Mizukami, Yoichi Ezura, Akira Nifuji
    Journal of bone and mineral research : the official journal of the American Society for Bone and Mineral Research 33 (8) 1532 - 1543 0884-0431 2018/08 [Refereed][Not invited]
     
    Little is known about the molecular mechanisms of enthesis formation in mature animals. Here, we report that annexin A5 (Anxa5) plays a critical role in the regulation of bone ridge outgrowth at the entheses. We found that Anxa5 is highly expressed in the entheses of postnatal and adult mice. In Anxa5-deficient (Anxa5-/- ) mice, the sizes of bone ridge outgrowths at the entheses of the tibias and femur were increased after age 7 weeks. Bone overgrowth was not observed at the fibrous enthesis where the fibrocartilage layer does not exist. More ALP-expressing cells were observed in the fibrocartilage layer in Anxa5-/- mice than in wild-type (WT) mice. Calcein and Alizarin Red double labeling revealed more mineralized areas in Anxa5-/- mice than WT mice. To examine the effects of mechanical forces, we performed tenotomy in which transmission of contractile forces by the tibial muscle was impaired by surgical muscle release. In tenotomized mice, bone overgrowth at the enthesis in Anxa5-/- mice was decreased to a level comparable to that in WT mice at 8 weeks after the operation. The tail-suspended mice also showed a decrease in bone overgrowth to similar levels in Anxa5-/- and WT mice at 8 weeks after hindlimb unloading. These results suggest that bone overgrowth at the enthesis requires mechanical forces. We further examined effects of Anxa5 gene knockdown (KD) in primary cultures of osteoblasts, chondrocytes, and tenocytes in vitro. Anxa5 KD increased ALP expression in tenocytes and chondrocytes but not in osteoblasts, suggesting that increased ALP activity in the fibrocartilaginous tissue in Anxa5-/- mice is directly caused by Anxa5 deletion in tenocytes or fibrocartilage cells. These data indicate that Anxa5 prevents bone overgrowth at the enthesis, whose formation is mediated through mechanical forces and modulating expression of mineralization regulators. © 2018 American Society for Bone and Mineral Research.
  • Kaneko I, Segawa H, Ikuta K, Hanazaki A, Fujii T, Tatsumi S, Kido S, Hasegawa T, Amizuka N, Saito H, Miyamoto KI
    Endocrinology 159 (7) 2741 - 2758 0013-7227 2018/07 [Refereed][Not invited]
  • Liu B, Feng W, Hasegawa T, Amizuka N, Li M
    Histology and histopathology 34 (1) 18024 - 67 0213-3911 2018/07 [Refereed][Not invited]
  • Zhang X, Feng H, Li D, Liu S, Amizuka N, Li M
    International journal of molecular sciences 19 (6) 1422-0067 2018/06 [Refereed][Not invited]
  • Ota M, Takahata M, Shimizu T, Momma D, Hamano H, Hiratsuka S, Amizuka N, Hasegawa T, Iwasaki N
    Journal of bone and mineral metabolism 37 (2) 256 - 263 0914-8779 2018/05 [Refereed][Not invited]
  • Feng H, Li Z, Du J, Sun J, Feng W, Li D, Liu S, Wang W, Liu H, Amizuka N, Li M
    Cell death discovery 4 47  2018/04/27 [Refereed][Not invited]
  • Hasegawa T, Yamamoto T, Hongo H, Qiu Z, Abe M, Kanesaki T, Tanaka K, Endo T, de Freitas PHL, Li M, Amizuka N
    Histochemistry and cell biology 149 (4) 423 - 432 0948-6143 2018/04 [Refereed][Not invited]
  • Amizuka N, Kitazawa S
    Histochemistry and cell biology 149 (4) 287 - 288 0948-6143 2018/04 [Refereed][Not invited]
  • Omiya T, Hirose J, Hasegawa T, Amizuka N, Omata Y, Izawa N, Yasuda H, Kadono Y, Matsumoto M, Nakamura M, Miyamoto T, Tanaka S
    Bone 107 18 - 26 8756-3282 2018/02 [Refereed][Not invited]
  • Pingping Cui, Hongrui Liu, Jing Sun, Norio Amizuka, Qinfeng Sun, Minqi Li
    HISTOLOGY AND HISTOPATHOLOGY 33 (1) 89 - 99 0213-3911 2018/01 [Refereed][Not invited]
     
    Nitrogen-containing bisphosphonates (N-BPs) are potent antiresorptive drugs and their actions on osteoclasts have been studied extensively. Recent studies have suggested that N-BPs also target bone-forming cells. However, the precise mechanism of N-BPs in osteoblasts is paradoxical, and the specific role of osteocytes is worthy of in-depth study. Here, we investigated the cellular mechanisms of N-BPs regulating bone defect healing by zoledronate (ZA). Bone histomorphometry confirmed an increase in new bone formation by systemic ZA administration. ZA induced more alkaline phosphatase-positive osteoblasts and tartrate-resistant acid phosphatase-positive osteoclasts residing on the bone surface. Inexplicably, ZA increased SOST expression in osteocytes embedded in the bone matrix, which was not compatible with the intense osteoblast activity on the bone surface. ZA induced heterogeneous osteocytes and disturbed the distribution of the osteocytic-canalicular system (OLCS). Furthermore, according to the degree of OLCS regularity, dentin matrix protein 1 reactivity had accumulated around osteocytes in the ZA group, but it was distributed evenly in the OLCS of the control group. The control group showed a dense array of the gap junction protein connexin 43. However, connexin 43 was extremely sparse after ZA administration. In summary, ZA treatment reduces gap junction connections and blocks cellular communication between osteocytes and osteoblasts. Retaining SOST expression in osteocytes leads to activation of the Wnt signaling pathway and subsequent bone formation.
  • Anti-Siglec-15 antibody reduces bone resorption while maintaining bone formation in ovariectomized (OVX) rats and monkeys.
    Chie Fukuda, Eisuke Tsuda, Akiko Okada, Norio Amizuka, Tomoka Hasegawa, Tsuyoshi Karibe, Yoshiharu Hiruma, Nana Takagi, Seiichiro Kumakura
    JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH 32 S112 - S113 0884-0431 2017/12 [Refereed][Not invited]
  • Shusuke Murakami, Hirofumi Miyaji, Erika Nishida, Kohei Kawamoto, Saori Miyata, Hiroko Takita, Tsukasa Akasaka, Bunshi Fugetsu, Toshihiko Iwanaga, Hiromi Hongo, Norio Amizuka, Tsutomu Sugaya, Masamitsu Kawanami
    Dental materials journal 36 (5) 573 - 583 0287-4547 2017/09/26 [Refereed][Not invited]
     
    Three-dimensional collagen scaffolds coated with beta-tricalcium phosphate (β-TCP) nanoparticles reportedly exhibit good bioactivity and biodegradability. Dose effects of β-TCP nanoparticles on biocompatibility and bone forming ability were then examined. Collagen scaffold was applied with 1, 5, 10, and 25 wt% β-TCP nanoparticle dispersion and designated TCP1, TCP5, TCP10, and TCP25, respectively. Compressive strength, calcium ion release and enzyme resistance of scaffolds with β-TCP nanoparticles applied increased with β-TCP dose. TCP5 showed excellent cell-ingrowth behavior in rat subcutaneous tissue. When TCP10 was applied, osteoblastic cell proliferation and rat cranial bone augmentation were greater than for any other scaffold. The bone area of TCP10 was 7.7-fold greater than that of non-treated scaffold. In contrast, TCP25 consistently exhibited adverse biological effects. These results suggest that the application dose of β-TCP nanoparticles affects the scaffold bioproperties; consequently, the bone conductive ability of TCP10 was remarkable.
  • Tingting Luo, Hongrui Liu, Wei Feng, Di Liu, Juan Du, Jing Sun, Wei Wang, Xiuchun Han, Jie Guo, Norio Amizuka, Xianqi Li, Minqi Li
    CELL PROLIFERATION 50 (3) 0960-7722 2017/06 [Refereed][Not invited]
     
    Objectives: The purpose of this study was to investigate effects of adipocytes on osteoclast adhesion-related molecules. Materials and methods: ST2 cells, a cloned stromal cell line from mouse bone marrow, able to differentiate into adipocytes, were cultured in serum-free alpha-MEM which was then collected to be used as adipocyte-conditioned medium (ADIPO CM). RAW264.7 cells were cultured in ADIPO CM in the presence of RANKL, and bone marrow-derived macrophages were cultured in ADIPO CM in the presence of RANKL and macrophage-colony stimulating factor to induce osteoclast differentiation. TRAP staining, resorption pit assay, qRT-PCR and western blotting assays were performed. Results: ELISAs revealed that CXCL12 was abundant in ADIPO CM and CCK-8 assay revealed no proliferation of RAW264.7 cells after exogenous CXCL12 treatment. ADIPO CM enhanced osteoclast formation and resorption, both by RAW264.7 cells and BMMs. In addition, exogenous CXCL12 efficiently potentiated formation of TRAP-positive osteoclast and resorption by RAW264.7 cells. Western blotting and qRT-PCR suggested that ADIPO CM or combined treatment with exogenous CXCL12 caused significant increase in expression of NFAT2, src and osteoclast adhesion-related molecules, including beta 3 integrin, CD44 and osteopontin. However, these promotional effects were largely abrogated on treatment of AMD3100, a CXCR4 antagonist. Conclusions: Adipocytes promoted osteoclast differentiation, function and expression of adhesion-related molecules through the CXCL12/CXCR4 signalling pathway.
  • Hasegawa T, Yamamoto T, Tsuchiya E, Hongo H, Tsuboi K, Kudo A, Abe M, Yoshida T, Nagai T, Khadiza N, Yokoyama A, Oda K, Ozawa H, de Freitas PHL, Li M, Amizuka N
    The Japanese dental science review 53 (2) 34 - 45 1882-7616 2017/05 [Refereed][Not invited]
  • Michihito Kono, Tomoka Hasegawa, So Nagai, Toshio Odani, Kazumasa Akikawa, Yukiko Nomura, Hidetsugu Sato, Keisuke Kikuchi, Norio Amizuka, Hideaki Kikuchi
    MEDICINE 96 (21) e6968  0025-7974 2017/05 [Refereed][Not invited]
     
    Rationale: Palisaded neutrophilic and granulomatous dermatitis (PNGD) is a benign, inflammatory dermatosis with distinct histopathological features often observed in patients with systemic diseases. There were no reports of PNGD without underlying systemic diseases as an underlying cause of hypercalcemia. Herein, we report a case of a 62-year-old man with hypercalcemia due to PNGD, but with no underlying systemic diseases, including tuberculosis, sarcoidosis, or vasculitis. Patient concerns: Laboratory tests showed an elevated C-reactive protein level, an elevated corrected calcium level, a normal 25-hydroxyvitamin D level, and an elevated 1,25-dihydroxyvitamin D level. There were no other abnormalities to explain the hypercalcemia. Positron emission tomography-computed tomography showed abnormal uptake in his skin. Histopathological examination of the skin showed palisaded granulomatous infiltrate in the dermis. Neutrophils, degenerated collagen, and fibrin were present in the centers of the palisades without prominent mucin. There were no eosinophils, central necrosis, or necrotizing vasculitides. These features were consistent with PNGD. Diagnoses: A diagnosis of PNGD with hypercalcemia was established. Interventions: Oral prednisolone was administered to the patient. Outcomes: After treatment, his symptoms resolved, and his calcium, 1,25-dihydroxyvitamin D and CRP levels returned to normal. Skin specimens before and after treatment were assessed using immunohistochemistry for 1a-hydroxylase. Granuloma and epidermal cells were 1a-hydroxylase- positive before treatment. After treatment, the granuloma diminished in size and the 1ahydroxylase-positive areas of the epidermal cells decreased. Lessons: This case was particularly unique because increased 1a-hydroxylase expression in the granuloma and epidermal cells seemed to result in hypercalcemia due to excessive transformation of 25-hydroxyvitamin D to 1,25-dihydroxyvitamin D. Physicians should consider PNGD as an underlying cause of hypercalcemia.
  • Junko Shimomura-Kuroki, Muhammad Farooq, Tsuneo Sekimoto, Norio Amizuka, Yutaka Shimomura
    ODONTOLOGY 105 (2) 150 - 154 1618-1247 2017/04 [Refereed][Not invited]
     
    Parathyroid hormone and parathyroid hormonerelated peptide (PTHrP), and its receptor (PTH1R) play an important role in differentiation of bone and cartilage in the developing stages. Constitutive dimers of PTH1R are believed to be dissociated by ligand binding, and monomeric PTH1R is capable of activating G protein. Jansen type metaphyseal chondrodysplasia is caused by missense mutations in PTH1R, which are constitutively active even without the presence of the ligands. However, the underlying pathomechanisms remained largely unknown. In this study, we have attempted to further characterize a PTH1R missense mutation H223R responsible for Jansen type metaphyseal chondrodysplasia. cDNAs encoding wild-type (Wt)- and H223R mutant (Mut)-PTH1R were transfected into HEK293T cells, and as a consequence of western blots, both the Wt- and Mut-PTH1R proteins showed several fragments between 55 and 65 kDa in size, while the patterns of N-glycosylation were distinct between them. Then we hypothesized that the Mut-PTH1R might physically interact with the Wt-PTH1R, leading to affect the downstream cAMP accumulation. Co-immunoprecipitation assays clearly showed that interaction occurred not only between the Wt-PTH1R themselves, but also between the Wt- and Mut-PTH1R. Furthermore, we performed CRE reporter assays to investigate cAMP accumulation. Constitutive, ligand-independent cAMP accumulation was observed in HEK293T cells expressing the Mut-PTH1R. Interestingly, there was a statistically lower constitutive activity in HEK293T cells co-expressing the Wt- and Mut-PTH1R proteins. Summarizing, it seems likely that Mut-PTH1R may be, at least in part, co-localized with Wt-PTH1R by forming a heterodimer, leading to affect the function to each other.
  • Jing Sun, Juan Du, Wei Feng, Boyao Lu, Hongrui Liu, Jie Guo, Norio Amizuka, Minqi Li
    JOURNAL OF MOLECULAR HISTOLOGY 48 (2) 73 - 81 1567-2379 2017/04 [Refereed][Not invited]
     
    This study evaluated the effects of metformin on orthodontic tooth movement in a rat model of type 2 diabetes mellitus. Rats were fed a high-fat diet for 4 weeks to induce fat accumulation and insulin resistance, and then injected with a low dose of streptozotocin (35 mg/kg) intraperitoneally to induce type 2 diabetes. An orthodontic appliance was placed in normoglycemic, type 2 diabetes, and type 2 diabetes with metformin-administrated rats. After 14 days, type 2 diabetes rats exhibited greater orthodontic tooth movement and had a higher number of tartrate-resistant acid phosphatase-positive osteoclasts, stronger cathepsin K expression, and weaker alkaline phosphatase immunostaining than normoglycemic rats. Metformin administration resulted in normalization of osteoclast numbers, cathepsin K immunostaining, and of tooth movement as well as partly recovery of alkaline phosphatase expression in diabetic rats. Metformin also reduced sclerostin expression and improved the immunolocalization of dentin matrix protein 1 in osteocytes of type 2 diabetes rats. These results suggest that metformin administration reversed the adverse effects of diabetes on orthodontic tooth movement.
  • Kumiko Hikone, Tomoka Hasegawa, Erika Tsuchiya, Hiromi Hongo, Muneteru Sasaki, Tomomaya Yamamoto, Ai Kudo, Kimimitsu Oda, Mai Haraguchi, Paulo Henrique Luiz de Freitas, Minqi Li, Junichiro Iida, Norio Amizuka
    JOURNAL OF HISTOCHEMISTRY & CYTOCHEMISTRY 65 (4) 207 - 221 0022-1554 2017/04 [Refereed][Not invited]
     
    To elucidate which of elevated serum concentration of inorganic phosphate (Pi) or disrupted signaling linked to alpha klotho/fibroblast growth factor 23 (FGF23) is a predominant regulator for senescence-related degeneration seen in alpha Klotho-deficient mice, we have examined histological alteration of the periodontal tissues in the mandibular interalveolar septum of alpha Klotho-deficient mice fed with Pi-insufficient diet. We prepared six groups of mice: wild-type, kl/kl, and alpha Klotho(-/-) mice with normal diet or low-Pi diet. As a consequence, kl/kl(norPi) and alpha Klotho(-/-norPi) mice showed the same abnormalities in periodontal tissues: intensely stained areas with hematoxylin in the interalveolar septum, dispersed localization of alkaline phosphatase-positive osteoblasts and tartrate-resistant acid phosphatase-reactive osteoclasts, and accumulation of dentin matrix protein 1 in the osteocytic lacunae. Although kl/kl(lowPi) mice improved these histological abnormalities, alpha Klotho(-/-lowPi) mice failed to normalize those. Gene expression of alpha Klotho was shown to be increased in kl/kl(lowPi) specimens. It seems likely that histological abnormalities of kl/kl mice have been improved by the rescued expression of alpha Klotho, rather than low concentration of serum Pi. Thus, the histological malformation in periodontal tissues in alpha Klotho-deficient mice appears to be due to not only increased concentration of Pi but also disrupted alpha klotho/FGF23 signaling.
  • Issei Takayama, Hideyuki Tanabe, Takashi Nishiyama, Harumi Ito, Norio Amizuka, Minqi Li, Ken-ichi Katsube, Isao Kii, Akira Kudo
    JOURNAL OF CELL COMMUNICATION AND SIGNALING 11 (1) 5 - 13 1873-9601 2017/03 [Refereed][Not invited]
     
    CCN3 is a matricellular protein that belongs to the CCN family. CCN3 consists of 4 domains: insulin-like growth factor-binding protein-like domain (IGFBP), von Willebrand type C-like domain (VWC), thrombospondin type 1-like domain (TSP1), and the C-terminal domain (CT) having a cysteine knot motif. Periostin is a secretory protein that binds to extracellular matrix proteins such as fibronectin and collagen. In this study, we found that CCN3 interacted with periostin. Immunoprecipitation analysis revealed that the TSP1-CT interacted with the 4 repeats of the Fas 1 domain of periostin. Immunofluorescence analysis showed co-localization of CCN3 and periostin in the periodontal ligament of mice. In addition, targeted disruption of the periostin gene in mice decreased the matricellular localization of CCN3 in the periodontal ligament. Thus, these results indicate that periostin was required for the matricellular localization of CCN3 in the periodontal ligament, suggesting that periostin mediated an interaction between CCN3 and the extracellular matrix.
  • Xiuchun Han, Juan Du, Di Liu, Hongrui Liu, Norio Amizuka, Minqi Li
    JOURNAL OF MOLECULAR HISTOLOGY 48 (1) 41 - 51 1567-2379 2017/02 [Refereed][Not invited]
     
    The aim of this experiment was to elucidate the histological alterations after systemic administration of eldecalcitol (ELD) combined with guided bone regeneration during the restoration of bone defect healing in rats. The femurs of 8-week-old Wister rats were used to generate bone defect models. The defect was covered with a collagen membrane, and ELD group was administrated with eldecalcitol (50 ng/kg body weight) intragastrically once every other day. Femora were harvested at 1, 2, 4 and 8 weeks post-surgery. Decalcify tissue slices were made and used for histological and immunohistochemical examination. Bone biomarkers of RANKL, OPG and osteocalcin (OCN) were detected by western blot. The results revealed that the system administration of ELD could improve new bone formation demonstrated by the increased bone volume/tissue volume ratio and accelerated mineralization. ELD suppressed osteoclastic bone resorption by reducing the number of osteoclasts, decreasing the expression of cathepsin-K and the ratio of RANKL/OPG at the early stage of bone defect restoration (1 and 2 weeks) and upregulating OCN expression at the later stage of bone defect healing (4 and 8 weeks). These data suggested that systemic administration of eldecalcitol accelerated bone formation and promoted bone maturation by decreasing bone resorption and promoting bone mineralization during bone defect restoration.
  • Hasegawa Tomoka, Endo Takashi, Tsuchiya Erika, Kudo Ai, Shen Zhao, Moritani Yasuhito, Abe Miki, Yamamoto Tomomaya, Hongo Hiromi, Tsuboi Kanako, Yoshida Taiji, Nagai Tomoya, Khadiza Naznin, Yokoyama Ayako, Luiz de Freitas, Paulo Henrique, Li Minqi, Amizuka Norio
    JOURNAL OF ORAL BIOSCIENCES 59 (1) 55 - 62 1880-3865 2017/02 [Refereed][Not invited]
  • Wei Feng, Hongrui Liu, Tingting Luo, Di Liu, Juan Du, Jing Sun, Wei Wang, Xiuchun Han, Kaiyun Yang, Jie Guo, Norio Amizuka, Minqi Li
    SCIENTIFIC REPORTS 7 41411  2045-2322 2017/01 [Refereed][Not invited]
     
    Interleukin (IL)-6 is known to indirectly enhance osteoclast formation by promoting receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand (RANKL) production by osteoblastic/stromal cells. However, little is known about the direct effect of IL-6 on osteoclastogenesis. Here, we determined the direct effects of IL-6 and its soluble receptor (sIL-6R) on RANKL-induced osteoclast formation by osteoclast precursors in vitro. We found IL-6/sIL-6R significantly promoted and suppressed osteoclast differentiation induced by low-(10 ng/ml) and high-level (50 ng/ml) RANKL, respectively. Using a bone resorption pit formation assay, expression of osteoclastic marker genes and transcription factors confirmed differential regulation of RANKL-induced osteoclastogenesis by IL-6/sIL-6R. Intracellular signaling transduction analysis revealed IL-6/sIL-6R specifically upregulated and downregulated the phosphorylation of NF-kappa B (nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells), ERK (extracellular signal-regulated kinase) and JNK (c-Jun N-terminal kinase) induced by low-and high level RANKL, respectively. Taken together, our findings demonstrate that IL-6/sIL-6R differentially regulate RANKL-induced osteoclast differentiation and activity through modulation of NF-kappa B, ERK and JNK signaling pathways. Thus, IL-6 likely plays a dual role in osteoclastogenesis either as a pro-resorption factor or as a protector of bone, depending on the level of RANKL within the local microenvironment.
  • Atsunaka Sakurai, Tomoka Hasegawa, Ai Kudo, Zhao Shen, Tomoya Nagai, Miki Abe, Taiji Yoshida, Hiromi Hongo, Tomomaya Yamamoto, Tsuneyuki Yamamoto, Kimimitsu Oda, Paulo Henrique Luiz de Freitas, Minqi Li, Hidehiko Sano, Norio Amizuka
    BIOMEDICAL RESEARCH-TOKYO 38 (4) 257 - 267 0388-6107 2017 [Refereed][Not invited]
     
    To assess the chronological participation of sclerostin and FGF23 in bone metabolism, this study tracked the immunolocalization of sclerostin and FGF23 in the metaphyses of murine long bones from embryonic day 18 (E18) through 1 day after birth, 1 week, 2 weeks, 4 weeks, 8 weeks, and 20 weeks of age. We have selected two regions in the metaphyseal trabeculae for assessing sclerostin and FGF23 localization: close to the chondro-osseous junction, i.e., bone modeling site even in the adult animals, and the trabecular region distant from the growth plate, where bone remodeling takes place. As a consequence, sclerostin-immunopositive osteocytes could not be observed in both close and distant trabecular regions early at the embryonic and young adult stages. However, osteocytes gradually started to express sclerostin in the distant region earlier than in the close region of the trabeculae. Immunoreactivity for FGF23 was observed mainly in osteoblasts in the early stages, but detectable in osteocytes in the later stages of growth in trabecular and cortical bones. Fgf23 was weakly expressed in the embryonic and neonatal stages, while the receptors, Fgfr1c and alpha Klotho were strongly expressed in femora. At the adult stages, Fgf23 expression became more intense while Fgfr1c and alpha Klotho were weakly expressed. These findings suggest that sclerostin is secreted by osteocytes in mature bone undergoing remodeling while FGF23 is synthesized by osteoblasts and osteocytes depending on the developmental/growth stage. In addition, it appears that FGF23 acts in an autocrine and paracrine fashion in fetal and neonatal bones.
  • Tabeta, K., Du, X., Arimatsu, K., Yokoji, M., Takahashi, N., Amizuka, N., Hasegawa, T., Crozat, K., Maekawa, T., Miyauchi, S., Matsuda, Y., Ida, T., Kaku, M., Hoebe, K., Ohno, K., Yoshie, H., Yamazaki, K., Moresco, E.M.Y., Beutler, B.
    Scientific Reports 7 (1) 11717  2045-2322 2017 [Refereed][Not invited]
  • [Bone remodeling and modeling/mini-modeling.]
    Hasegawa T, Amizuka N
    Clinical calcium 27 (12) 1713 - 1722 0917-5857 2017 [Refereed][Not invited]
  • Hisashi Toraya, Tomoka Hasegawa, Naoko Sakagami, Erika Tsuchiya, Ai Kudo, Shen Zhao, Yasuhito Moritani, Miki Abe, Taiji Yoshida, Tomomaya Yamamoto, Tsuneyuki Yamamoto, Kimimitsu Oda, Nobuyuki Udagawa, Paulo Henrique Luiz de Freitas, Minqi Li, Norio Amizuka
    BIOMEDICAL RESEARCH-TOKYO 38 (2) 123 - 134 0388-6107 2017 [Refereed][Not invited]
     
    Since osteoblastic activities are believed to be coupled with osteoclasts, we have attempted to his-tologically verify which of the distinct cellular circumstances, the presence of osteoclasts themselves or bone resorption by osteoclasts, is essential for coupled osteoblastic activity, by examining c-fos(-/-) or c-src(-/-) mice. Osteopetrotic c-fos deficient (c-fos(-/-)) mice have no osteoclasts, while c-src deficient (c-src(-/-)) mice, another osteopetrotic model, develop dysfunctional osteoclasts due to a lack of ruffled borders. c-fos(-/-) mice possessed no tartrate-resistant acid phosphatase (TRAPase)-reactive osteoclasts, and showed very weak tissue nonspecific alkaline phosphatase (TNALPase)-reactive mature osteoblasts. In contrast, c-src(-/-) mice had many TNALPase-positive osteoblasts and TRAPase-reactive osteoclasts. Interestingly, the parallel layers of TRAPase-reactive/osteopontin- positive cement lines were observed in the superficial region of c-src(-/-) bone matrix. This indicates the possibility that in c-src(-/-) mice, osteoblasts were activated to deposit new bone matrices on the surfaces that osteoclasts previously passed along, even without bone resorption. Transmission electron microscopy demonstrated cell-to-cell contacts between mature osteoblasts and neighboring ruffled border-less osteoclasts, and osteoid including many mineralized nodules in c-src(-/-) mice. Thus, it seems likely that osteoblastic activities would be maintained in the presence of osteoclasts, even if they are dysfunctional.
  • Yusuke Tanaka, Tomoka Hasegawa, Tamaki Yamada, Tomomaya Yamamoto, Muneteru Sasaki, Hiromi Hongo, Kanako Tsuboi, Mai Haraguchi, Paulo Henrique Luiz de Freitas, Minqi Li, Kimimitsu Oda, Yasunori Totsuka, Kanchu Tei, Norio Amizuka
    HISTOLOGY AND HISTOPATHOLOGY 31 (12) 1315 - 1326 0213-3911 2016/12 [Refereed][Not invited]
     
    In order to provide a clue to understand the interplay between leptin and estrogen, we have examined femoral metaphyses of ovariectomized db/db mice carrying a mutated leptin receptor. We performed ovariectomy (OVX) or sham-operation (sham) on 12week old female wild-type and db/db mice, and then, after 8 weeks, divided the animals into four groups: wild-type sham, wild-type OVX, db/db sham and db/db OVX. Samples from all groups were prepared for histochemical and ultrastructural examinations. As a result, db/db sham mice showed a reduced number and thickness of metaphyseal trabeculae and excessive adipose tissue when compared to wild-type sham mice. The wild-type OVX group exhibited markedly diminished trabecular number, as well as lower populations of osteoblasts and osteoclasts in comparison to wild-type sham group. On the other hand, trabecular numbers were similar for the two db/db groups, suggesting that the effect of the ovariectomy, i.e., estrogen deficiency may be lessened in this animal model. Leptin receptor was mainly found in osteoblasts and in bone marrow stromal cells including adipocytes. In addition, the expression of estrogen receptor did not seem to change after OVX in wild-type mice and in db/db mice. Both db/db sham and OVX mice featured many adipocytes close to the metaphyseal chondro-osseous junction, while osteoblasts accumulated glycogen granules and lipid droplets. Therefore, it seems likely that the disruption of leptin signaling in db/db mice shifts the cell differentiation cascade towards the adipocyte lineage, resulting in an osteoporotic bone independently of estrogen deficiency.
  • Roscher A, Hasegawa T, Dohnke S, Ocaña-Morgner C, Amizuka N, Jessberger R, Garbe AI
    Bone reports 5 214 - 221 2016/12 [Refereed][Not invited]
  • Hikata T, Hasegawa T, Horiuchi K, Fujita N, Iwanami A, Watanabe K, Ishii K, Nakamura M, Amizuka N, Matsumoto M
    Bone reports 5 286 - 291 2016/12 [Refereed][Not invited]
  • Hiromi Hongo, Muneteru Sasaki, Sachio Kobayashi, Tomoka Hasegawa, Tomomaya Yamamoto, Kanako Tsuboi, Erika Tsuchiya, Tomoya Nagai, Naznin Khadiza, Miki Abe, Ai Kudo, Kimimitsu Oda, Paulo Henrique Luiz de Freitas, Minqi Li, Hisayoshi Yurimoto, Norio Amizuka
    The journal of histochemistry and cytochemistry : official journal of the Histochemistry Society 64 (10) 601 - 22 0022-1554 2016/10 [Refereed][Not invited]
     
    Minodronate is highlighted for its marked and sustained effects on osteoporotic bones. To determine the duration of minodronate's effects, we have assessed the localization of the drug in mouse bones through isotope microscopy, after labeling it with a stable nitrogen isotope ([(15)N]-minodronate). In addition, minodronate-treated bones were assessed by histochemistry and transmission electron microscopy (TEM). Eight-week-old male ICR mice received [(15)N]-minodronate (1 mg/kg) intravenously and were sacrificed after 3 hr, 24 hr, 1 week, and 1 month. Isotope microscopy showed that [(15)N]-minodronate was present mainly beneath osteoblasts rather than nearby osteoclasts. At 3 hr after minodronate administration, histochemistry and TEM showed osteoclasts with well-developed ruffled borders. However, osteoclasts were roughly attached to the bone surfaces and did not feature ruffled borders at 24 hr after minodronate administration. The numbers of tartrate-resistant acid phosphatase-positive osteoclasts and alkaline phosphatase-reactive osteoblastic area were not reduced suddenly, and apoptotic osteoclasts appeared in 1 week and 1 month after the injections. Von Kossa staining demonstrated that osteoclasts treated with minodronate did not incorporate mineralized bone matrix. Taken together, minodronate accumulates in bone underneath osteoblasts rather than under bone-resorbing osteoclasts; therefore, it is likely that the minodronate-coated bone matrix is resistant to osteoclastic resorption, which results in a long-lasting and bone-preserving effect.
  • Juan Du, Wei Feng, Jing Sun, Cuijie Kang, Norio Amizuka, Minqi Li
    SCIENTIFIC REPORTS 6 35995  2045-2322 2016/10 [Refereed][Not invited]
     
    Peroxiredoxin (PRX), a family of peroxidases, is associated with various biological processes such as the detoxification of oxidants and cell apoptosis. Besides, the anti-apoptosis effect of estrogen results partially from its anti-oxidant function. The purpose of this study was to investigate the expression of PRXs in ovariectomy (OVX) mice and the related anti-oxidative mechanism of estrogen. Eight-weekold mice were subjected to ovariectomy. MC3T3-E1 cells were pretreatment with 17b-estradiol and N-acetyl cysteine followed by oxidative injury induced with H2O2. Western blot and real time-PCR were applied to clarify the expressions of PRX1 and caspase-3, with both wild-type and PRX1 knockout MC3T3-E1 cells generated by CRISPR/Cas9 technology. The results showed PRX1 and PRX5 were upregulated in osteoblasts in the proximal tibial metaphysis of ovariectomy mice. Interestingly, PRX1 and PRX5 showed different distribution patterns, with PRX1 mainly accumulated in cell nuclei and PRX5 in the cytoplasm. Gene expression analysis showed significantly reduced expressions of PRX1 and caspase-3 in the pretreatment groups when compared with cells treated with H2O2 alone. Also, a decrease of caspase-3 expressions was observed in PRX1 knockout MC3T3-E1 cells with or without H2O2 in comparison to wild-type cells. These findings suggested that PRX may play important roles in estrogen-deficient osteoporosis.
  • Kanako Tsuboi, Tomoka Hasegawa, Tomomaya Yamamoto, Muneteru Sasaki, Hiromi Hongo, Paulo Henrique Luiz de Freitas, Tomohiro Shimizu, Masahiko Takahata, Kimimitsu Oda, Toshimi Michigami, Minqi Li, Yoshimasa Kitagawa, Norio Amizuka
    HISTOCHEMISTRY AND CELL BIOLOGY 146 (3) 337 - 350 0948-6143 2016/09 [Refereed][Not invited]
     
    In order to determine whether osteoclastic bone resorption is restarted after withdrawn of bisphosphonates, we conducted histological examinations on murine osteoclasts, osteoblasts and osteocytes after discontinuation of a daily regimen of alendronate (ALN) with a dosage of 1 mg/kg/day for 10 days. After drug discontinuation, metaphyseal trabecular number and bone volume remained unaltered for the first 4 days. Osteoclast number did not increase, while the number of apoptotic osteoclasts was elevated. On the other hand, tissue non-specific alkaline phosphatase-immunoreactive area was markedly reduced after ALN discontinuation. In addition, osteocytes showed an atrophic profile with empty lacunar areas during and after ALN treatment. Interestingly, as early as 36 h after a single ALN injection, osteocytes show signs of atrophy despite the presence of active osteoblasts. Structured illumination microscopy system showed shortening of osteocytic cytoplasmic processes after drug cessation, suggesting a possible morphological and functional disconnection between osteocytes and osteoblasts. Taken together, it appears that osteoclastic bone resorption is not resumed after ALN discontinuation; also, osteoblasts and osteocytes hardly seem to recover once they are inactivated and atrophied by ALN. In summary, it seems that one must pay more attention to the responses of osteoblasts and osteocytes, rather focusing on the resuming of osteoclastic bone resorption after the ALN discontinuation.
  • Jing Sun, Bao Sun, Wei Wang, Xiuchun Han, Hongrui Liu, Juan Du, Wei Feng, Bo Liu, Norio Amizuka, Minqi Li
    JOURNAL OF MOLECULAR HISTOLOGY 47 (4) 389 - 399 1567-2379 2016/08 [Refereed][Not invited]
     
    Vitamin D has an anabolic effect on bone developmental processes and is involved in maintaining skeletal integrity. In recent years, pediatric cases of vitamin D intoxication have attracted attention. Therefore, the aim of this study was to investigate the influence of long-term administration of physiologically-high-dose calcitriol (1,25(OH)(2)D-3) on bone remodeling in young developing rats. Neonatal rats received once-daily subcutaneous injection of calcitriol (250 ng/kg body weight), or PBS only as a control, for 3 weeks. At 1, 2 and 4 weeks' post-administration, rats were sacrificed and fixed by transcardial perfusion with 4 % paraformaldehyde, following which tibiae were extracted for histochemical analysis. Compared with the control group, the number of tartrate-resistant acid phosphatase- and Cathepsin K-positive osteoclasts were significantly increased, and the expression of alkaline phosphatase in osteoblasts was decreased in trabecular bone of rats administered high-dose 1,25(OH)(2)D-3, leading to decreased trabecular bone volume. In addition, the expression of receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand (RANKL) was increased, while that of osteoprotegerin was weaker in osteoblasts in the experimental group compared with the control group. Moreover, there was weaker immunoreactivity for EphrinB2 in osteoclasts and EphB4 in osteoblasts of trabecular bone in the experimental group compared with the control group. These findings suggest that long-term use of physiologically-high dose calcitriol may result in bone loss through RANKL/RANK/osteoprotegerin and EphrinB2-EphB4 signaling pathways, and that these negative effects could continue after drug withdrawal. Therefore, optimal limits for vitamin D administration need to be established for children and adolescents.
  • Bo Liu, Jian Cui, Jing Sun, Juan Li, Xiuchun Han, Jie Guo, Min Yi, Norio Amizuka, Xin Xu, Minqi Li
    MOLECULAR MEDICINE REPORTS 14 (2) 1099 - 1106 1791-2997 2016/08 [Refereed][Not invited]
     
    The aim of the present study was to investigate the expression of matrix metalloproteinase (MMP) 9 and MMP2, and their potential roles in bone metastasis nests using a well-standardized model of breast cancer bone metastasis in nude mice. BALB/c nu/nu mice (5-week-old; n=10) were subjected to intracardiac injection of MDA-MB-231 human breast cancer cells. After 4 weeks, the mice exhibiting radiolucent lesions in tibiae were sacrificed, and the tibiae were removed for histochemical analysis. The gene expression of MMP2 and MMP9 in the tumor cells, metaphysis and diaphysis of normal BALB/c nu/nu mice were determined using reverse transcription-polymerase chain reaction analysis. The metastatic tumor tissue occupied almost the entire bone marrow cavity. Numerous tartrate-resistant acid phosphatase-positive osteoclasts were found in the metastasized lesions. The invaded tumor cells positive for mammaglobin 1 exhibited different proliferation activities and apoptosis between the metaphysis and diaphysis. Proliferating cell nuclear antigen was expressed at high levels in the metaphyseal area, whereas TdT-mediated dUTP nick-end labeling (TUNEL) -positive cells were more evident in the diaphysis area. Of note, MMP9 was expressed predominantly in the proliferating cell nuclear antigen-positive area, whereas the expression of MMP2 was observed predominantly in the diaphysis, which had more TUNEL-positive cells. Taken together, the results suggested that MMP9 and MMP2 may have their own importance in extracellular matrix degradation and trabecular bone damage in different zones of bone metastasis, including the metaphysis and diaphysis.
  • Amizuka N
    Journal of orthopaedic trauma 30 (8) S2  0890-5339 2016/08 [Refereed][Not invited]
  • Yamamoto T, Hasegawa T, Yamamoto T, Hongo H, Amizuka N
    The Japanese dental science review 52 (3) 63 - 74 1882-7616 2016/08 [Refereed][Not invited]
  • Tomomaya Yamamoto, Tomoka Hasegawa, Muneteru Sasaki, Hiromi Hongo, Kanako Tsuboi, Tomohiro Shimizu, Masahiro Ota, Mai Haraguchi, Masahiko Takahata, Kimimitsu Oda, Paulo Henrique Luiz de Freitas, Aya Takakura, Ryoko Takao-Kawabata, Yukihiro Isogai, Norio Amizuka
    ENDOCRINOLOGY 157 (7) 2604 - 2620 0013-7227 2016/07 [Refereed][Not invited]
     
    Evidence supports that daily and once-weekly administration of teriparatide, human (h) PTH(1-34), enhance bone mass in osteoporotic patients. However, it is uncertain whether different frequencies of hPTH(1-34) administration would induce bone formation similarly in terms of quantity and quality. To investigate that issue, mice were subjected to different frequencies of PTH administration, and their bones were histologically examined. Frequencies of administration were 1 time/2 days, 1 time a day, and 2 and 4 times a day. Mice were allocated to either to control or to 3 different dosing regimens: 80 mu g/kg of hPTH(1-34) per injection (80 mu g/kg per dose), 80 mu g/kg of hPTH(1-34) per day (80 mu g/kg.d), or 20 mu g/kg of hPTH(1-34) per day (20 mu g/kg.d). With the regimens of 80 mu g/kg per dose and 80 mu g/kg.d, high-frequency hPTH(1-34) administration increased metaphyseal trabecular number. However, 4 doses per day induced the formation of thin trabeculae, whereas the daily PTH regimen resulted in thicker trabeculae. A similar pattern was observed with the lower daily hPTH(1-34) dose (20 mu g/kg.d): more frequent PTH administration led to the formation of thin trabeculae, showing a thick preosteoblastic cell layer, several osteoclasts, and scalloped cement lines that indicated accelerated bone remodeling. On the other hand, low-frequency PTH administration induced new bone with mature osteoblasts lying on mildly convex surfaces representative of arrest lines, which suggests mini-modeling-based bone formation. Thus, high-frequency PTH administration seems to increase bone mass rapidly by forming thin trabeculae through accelerated bone remodeling. Alternatively, low-frequency PTH administration leads to the formation of thicker trabeculae through bone remodeling and minimodeling.
  • Bao Sun, Jing Sun, Xiuchun Han, Hongrui Liu, Juan Li, Juan Du, Wei Feng, Bo Liu, Jian Cui, Jie Guo, Norio Amizuka, Minqi Li
    HISTOLOGY AND HISTOPATHOLOGY 31 (6) 647 - 656 0213-3911 2016/06 [Refereed][Not invited]
     
    Long-term use of glucocorticoids (GC) causes rapid bone loss and increases the risk of osteoporotic fractures. Matrix metalloproteinase (MMPs), the most prominent kind of proteases implicated in the proteolytic degradation of the extracellular matrix (ECM), have been reported to be involved in pathological process of GC induced osteoporosis. However, the underlining mechanisms are still unclear. The aim of this study was to investigate the spatial expression and the potential function of MMP 2, 9 and 13 in osteoporosis induced by prednisolone in the tibiae of mice. In this experiment, mice were given prednisolone (15 mg/kg body weight) in PBS intragastrically every other day, or only PBS as control. Two weeks later, mice were fixed with transcardial perfusion of 4% paraformaldehyde in 0.1 M phosphate buffer (pH 7.4), and tibiae were extracted for histochemical analysis. Compared with control group, the number of TRAP-positive osteoclasts and the immunoreactivity of MMP 2, 9 and 13 were significantly increased in the trabecular bone of mice administered with prednisolone, leading to the decrease of trabecular bone volume. On the other hand, lighter eosin staining areas containing numerous empty lacunae of osteocytes and crevices were seen in the narrowing cortical bone. Furthermore, intense immunoreaction of MMP 2 and MMP 13 were found in the enlarged lacunae and the crevices, respectively. Taken together, we concluded that prednisolone administration induced the increase of MMP 2, 9 and 13 expressions, while MMP 2 and MMP 13 played essential roles in the osteocytic osteolysis and the early impaired areas in the cortical bone. Therefore, MMPs might be new potential therapeutic targets for prevention and treatment of glucocorticoid induced osteoporosis, especially osteocytic osteolysis.
  • Bo Liu, Xiuchun Han, Wei Feng, Jian Cui, Tomoka Hasegawa, Norio Amizuka, Xin Xu, Minqi Li
    ARCHIVES OF ORAL BIOLOGY 65 82 - 86 0003-9969 2016/05 [Refereed][Not invited]
     
    Objective: Ghrelin, an appetite-stimulating hormone, plays diverse regulatory functions in cell growth, proliferation, differentiation and apoptosis during mammalian development. There is limited information currently available regarding Ghrelin expression during mammalian tooth development, thus we aimed to establish the spatiotemporal expression of Ghrelin during murine molar odontogenesis. Design: Immunohistochemistry was performed to detect the expression pattern of Ghrelin in mandible molar from E15.5 to PN7 during murine tooth development. Results: The results showed that Ghrelin initially expressed in the inner enamel epithelium and the adjacent mesenchymal cells below, further with persistent expression in the ameloblasts and odontoblasts throughout the following developmental stages. In addition, Ghrelin was also present in Hertwig's epithelial root sheath at the beginning of tooth root formation. Conclusions: These results suggest that Ghrelin was present in tooth organs throughout the stages of tooth development, especially in ameloblasts and odontoblasts with little spatiotemporal expression differences. However, the potential regulatory roles of this hormone in tooth development still need to be validated by functional studies. (C) 2016 Elsevier Ltd. All rights reserved.
  • [Cellular interplay of bone cells and vascular endothelial cells in bone].
    Hasegawa T, Tsuchiya E, Abe M, Amizuka N
    Clinical calcium 26 (5) 677 - 682 0917-5857 2016/05 [Refereed][Not invited]
  • Jian Cui, Juan Li, Wei Wang, Xiuchun Han, Juan Du, Jing Sun, Wei Feng, Bo Liu, Hongrui Liu, Norio Amizuka, Minqi Li
    JOURNAL OF MOLECULAR HISTOLOGY 47 (2) 221 - 228 1567-2379 2016/04 [Refereed][Not invited]
     
    High mobility group box 1 (HMGB1) is a late inflammatory cytokine that plays an important role in periodontal tissue remodeling during orthodontic tooth movement. Calcitriol (1,25-dihydroxyvitamin D-3 [1 alpha,25 (OH)(2)D-3]) is a systemic calcium-regulating hormone shown to downregulate expression of multiple proinflammatory cytokines in human periodontal ligament cells in response to orthodontic force. The purpose of this study was to investigate the effect of 1 alpha,25(OH)(2)D-3 on the expression of HMGB1 in periodontal ligament (PDL) cells during orthodontic tooth movement. Seven-week-old male Wistar rats were used for experimentation. Tooth movement was assessed using a nickel-titanium coil spring to apply mechanical loading to the tooth for 5 days. This was followed by administration of either 1 alpha,25(OH)(2)D-3 or normal saline by gavage every other day for up to 28 days. Immunohistochemistry was used to analyze the expression of tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha), interleukin (IL)-6 and HMGB1. After discontinuation of orthodontic force, expression of the early inflammatory cytokines IL-6 and TNF-alpha were time-dependently reduced in the 1 alpha,25(OH)(2)D-3 group compared with the control group at each time point. Similarly, expression of HMGB1 was decreased over time in both the 1 alpha,25(OH)(2)D-3 and normal saline groups, and 1 alpha,25(OH)(2)D-3 administration enhanced this decline. These findings indicate that administration of 1 alpha,25(OH)(2)D-3 might provide a favorable microenvironment for orthodontic tooth movement by downregulating expression of HMGB1 in PDL cells.
  • Wei Feng, Bo Liu, Di Liu, Tomoka Hasegawa, Wei Wang, Xiuchun Han, Jian Cui, Yimin, Kimimitsu Oda, Norio Amizuka, Minqi Li
    JOURNAL OF HISTOCHEMISTRY & CYTOCHEMISTRY 64 (1) 42 - 53 0022-1554 2016/01 [Refereed][Not invited]
     
    In this study, we aimed to evaluate the influence of diet-induced obesity on IL-6 deficiency-induced bone remodeling abnormality. Seven-week-old IL-6(-/-) mice and their wild type (WT) littermates were fed a standard diet (SD) or high-fat diet (HFD) for 25 weeks. Lipid formation and bone metabolism in mice tibiae were investigated by histochemical analysis. Both IL-6(-/-) and WT mice fed the HFD showed notable body weight gain, thickened cortical bones, and adipose accumulation in the bone marrow. Notably, the HFD normalized the bone phenotype of IL-6(-/-) mice to that of their WT counterpart, as characterized by a decrease in bone mass and the presence of an obliquely arranged, plate-like morphology in the trabecular bone. Alkaline phosphatase and osteocalcin expressions were attenuated in both genotypes after HFD feeding, especially for the IL-6(-/-) mice. Meanwhile, tartrate-resistant acid phosphatase staining was inhibited, osteoclast apoptosis rate down-regulated (revealed by TUNEL assay), and the proportion of cathepsin K (CK)-positive osteoclasts significantly increased in IL-6(-/-) mice on a HFD as compared with IL-6(-/-) mice on standard chow. Our results demonstrate that HFD-induced obesity reverses IL-6 deficiency-associated bone metabolic disorders by suppressing osteoblast activity, upregulating osteoclastic activity, and inhibiting osteoclast apoptosis.
  • Tanaka M, Yamada H, Nishikawa S, Mori H, Ochi Y, Horai N, Li M, Amizuka N
    International journal of rheumatology 2016 8938916  1687-9260 2016 [Refereed][Not invited]
  • Zhusheng Liu, Tomomaya Yamamoto, Tomoka Hasegawa, Hiromi Hongo, Kanako Tsuboi, Erika Tsuchiya, Mai Haraguchi, Miki Abe, Paulo Henrique Luiz de Freitas, Akira Kudo, Kimimitsu Oda, Minqi Li, Norio Amizuka
    BIOMEDICAL RESEARCH-TOKYO 37 (2) 141 - 151 0388-6107 2016 [Refereed][Not invited]
     
    We employed a well-standardized murine rib fracture model to assess the distribution, in the cortical bone, of three important osteocyte-derived molecules-dentine matrix protein 1 (DMP1), sclerostin and fibroblast growth factor 23 (FGF 23). Two days after the fracture, the periosteum thickened, and up to the seventh day post-fracture, the cortical surfaces were promoting neoformation of two tissue types depending on the distance from the fracture site: chondrogenesis was taking place near the fracture, and osteogenesis distant from it. The cortical bones supporting chondrogenesis featured several empty lacunae, while in the ones underlying newly-formed woven bone, empty lacunae were hardly seen. DMP1-immunopositive osteocytic lacunae and canaliculi were seen both close and away from the fracture. In contrast, the region close to the fracture had only few sclerostin-and FGF23-immunoreactive osteocytes, whereas the distant region revealed many osteocytes immunopositive for these markers. Mature cortical bone encompassing the native cortical bone was observed at two-, three-and four-weeks post-fracture, and the distribution of DMP1, sclerostin and FGF23 appeared to have returned to normal. In summary, early stages of fracture healing seem to be important for triggering chondrogenesis and osteogenesis that may be regulated by osteocytes via their secretory molecules.
  • Histology and ultrastructure of bone -microscopic aspects-
    Hasegawa Tomoka, Amizuka Norio
    PAIN RESEARCH 31 (4) 210 - 219 0915-8588 2016 [Refereed][Not invited]
  • Bingzi Dong, Itsuro Endo, Yukiyo Ohnishi, Takeshi Kondo, Tomoka Hasegawa, Norio Amizuka, Hiroshi Kiyonari, Go Shioi, Masahiro Abe, Seiji Fukumoto, Toshio Matsumoto
    JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH 30 (11) 1980 - 1993 0884-0431 2015/11 [Refereed][Not invited]
     
    Activating mutations of calcium-sensing receptor (CaSR) cause autosomal dominant hypocalcemia (ADH). ADH patients develop hypocalcemia, hyperphosphatemia, and hypercalciuria, similar to the clinical features of hypoparathyroidism. The current treatment of ADH is similar to the other forms of hypoparathyroidism, using active vitamin D-3 or parathyroid hormone (PTH). However, these treatments aggravate hypercalciuria and renal calcification. Thus, new therapeutic strategies for ADH are needed. Calcilytics are allosteric antagonists of CaSR, and may be effective for the treatment of ADH caused by activating mutations of CaSR. In order to examine the effect of calcilytic JTT-305/MK-5442 on CaSR harboring activating mutations in the extracellular and transmembrane domains in vitro, we first transfected a mutated CaSR gene into HEK cells. JTT-305/MK-5442 suppressed the hypersensitivity to extracellular Ca2+ of HEK cells transfected with the CaSR gene with activating mutations in the extracellular and transmembrane domains. We then selected two activating mutations locating in the extracellular (C129S) and transmembrane (A843E) domains, and generated two strains of CaSR knock-in mice to build an ADH mouse model. Both mutant mice mimicked almost all the clinical features of human ADH. JTT-305/MK-5442 treatment in vivo increased urinary cAMP excretion, improved serum and urinary calcium and phosphate levels by stimulating endogenous PTH secretion, and prevented renal calcification. In contrast, PTH(1-34) treatment normalized serum calcium and phosphate but could not reduce hypercalciuria or renal calcification. CaSR knock-in mice exhibited low bone turnover due to the deficiency of PTH, and JTT-305/MK-5442 as well as PTH(1-34) increased bone turnover and bone mineral density (BMD) in these mice. These results demonstrate that calcilytics can reverse almost all the phenotypes of ADH including hypercalciuria and renal calcification, and suggest that calcilytics can become a novel therapeutic agent for ADH. (c) 2015 American Society for Bone and Mineral Research.
  • Wei Feng, Shengyu Lv, Jian Cui, Xiuchun Han, Juan Du, Jing Sun, Kefeng Wang, Zhenming Wang, Xiong Lu, Jie Guo, Kimimitsu Oda, Norio Amizuka, Xin Xu, Minqi Li
    MATERIALS SCIENCE & ENGINEERING C-MATERIALS FOR BIOLOGICAL APPLICATIONS 54 133 - 141 0928-4931 2015/09 [Refereed][Not invited]
     
    The purpose of this study was to evaluate the effects of osteogenic differentiated adipose-derived stem cell (ADSC) loaded beta-tricalcium phosphate (beta-TCP) in the restoration of bone defects under intraperitoneal administration of 1 alpha,25-dihydroxyvitamin D3(1 alpha,25 (OH)(2)D-3). ADSCs were isolated from the fat tissue of 8 week old Wister rats and co-cultured with beta-TCP for 21 days under osteogenic induction. Then the ADSC-13-TCP complexes were implanted into bone defects in the femora of rats. 1 alpha,25(OH)(2)D-3 (VD) or normal saline (NS) was administrated intraperitoneally every other day after the surgery. Femora were harvested at day 7, day 14 and day 28 post-surgery. There were 4 groups for all specimens: beta-TCP-NS group; beta-TCP-ADSC-NS group; beta-TCP-VD group and beta-TCP-ADSC-VD group. Alkaline phosphatase (ALP) was up-regulated obviously in ADSC groups compared with non-ADSC groups at day 7, day 14 and day 28, although high expression of runt-related transcription factor 2 (RUNX2) was only seen at day 7. Furthermore, the number of TRAP-positive osteoclasts and the expression of cathepsin K (CK) were significantly decreased in VD groups compared with non-VD groups at day 7 and day 14. As a most significant finding, the beta-TCP-ADSC-VD group showed the highest BV/TV ratio compared with the other three groups at day 28. Taken together, ADSC-loaded beta-TCP under the administration of 1 alpha,25(OH)(2)D-3 made a promising therapy for bone defects restoration. (C) 2015 Elsevier B.V. All rights reserved.
  • Kotaro Azuma, Sachiko Shiba, Tomoka Hasegawa, Kazuhiro Ikeda, Tomohiko Urano, Kuniko Horie-Inoue, Yasuyoshi Ouchi, Norio Amizuka, Satoshi Inoue
    JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH 30 (7) 1245 - 1254 0884-0431 2015/07 [Refereed][Not invited]
     
    Vitamin K is a fat-soluble vitamin that is necessary for blood coagulation. In addition, it has bone-protective effects. Vitamin K functions as a cofactor of -glutamyl carboxylase (GGCX), which activates its substrates by carboxylation. These substrates are found throughout the body and examples include hepatic blood coagulation factors. Furthermore, vitamin K functions as a ligand of the nuclear receptor known as steroid and xenobiotic receptor (SXR) and its murine ortholog, pregnane X receptor (PXR). We have previously reported on the bone-protective role of SXR/PXR signaling by demonstrating that systemic Pxr-knockout mice displayed osteopenia. Because systemic Ggcx-knockout mice die shortly after birth from severe hemorrhage, the GGCX-mediated effect of vitamin K on bone metabolism has been difficult to evaluate. In this work, we utilized Ggcx-floxed mice to generate osteoblast-specific GGCX-deficient (Ggcx(obl/obl)) mice by crossing them with Col1-Cre mice. The bone mineral density (BMD) of Ggcx(obl/obl) mice was significantly higher than that of control Col1-Cre (Ggcx(+/+)) mice. Histomorphometrical analysis of trabecular bones in the proximal tibia showed increased osteoid volume and a higher rate of bone formation in Ggcx(obl/obl) mice. Histomorphometrical analysis of cortical bones revealed a thicker cortical width and a higher rate of bone formation in Ggcx(obl/obl) mice. Electron microscopic examination revealed disassembly of mineralized nodules and aberrant calcification of collagen fibers in Ggcx(obl/obl) mice. The mechanical properties of bones from Ggcx(obl/obl) mice tended to be stronger than those from control Ggcx(+/+) mice. These results suggest that GGCX in osteoblasts functions to prevent abnormal mineralization in bone formation, although this function may not be a prerequisite for the bone-protective effect of vitamin K. (c) 2015 American Society for Bone and Mineral Research. (c) 2015 American Society for Bone and Mineral Research.
  • Wu Hao, Syoichi Tashiro, Tomoka Hasegawa, Yuiko Sato, Tami Kobayashi, Toshimi Tando, Eri Katsuyama, Atsuhiro Fujie, Ryuichi Watanabe, Mayu Morita, Kana Miyamoto, Hideo Morioka, Masaya Nakamura, Morio Matsumoto, Norio Amizuka, Yoshiaki Toyama, Takeshi Miyamoto
    JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY 290 (28) 17106 - 17115 0021-9258 2015/07 [Refereed][Not invited]
     
    Diabetes mellitus (DM) is frequently accompanied by complications, such as peripheral nerve neuropathy. Schwann cells play a pivotal role in regulating peripheral nerve function and conduction velocity; however, changes in Schwann cell differentiation status in DM are not fully understood. Here, we report that Schwann cells de-differentiate into immature cells under hyperglycemic conditions as a result of sorbitol accumulation and decreased Igf1 expression in those cells. We found that dedifferentiated Schwann cells could be re-differentiated in vitro into mature cells by treatment with an aldose reductase inhibitor, to reduce sorbitol levels, or with vitamin D-3, to elevate Igf1 expression. In vivo DM models exhibited significantly reduced nerve function and conduction, Schwann cell de-differentiation, peripheralnervede-myelination, and all conditions were significantly rescued by aldose reductase inhibitor or vitamin D-3 administration. These findings reveal mechanisms underlying pathological changes in Schwann cells seen in DM and suggest ways to treat neurological conditions associated with this condition.
  • Juan Li, Wei Feng, Bo Liu, Bao Sun, Xiuchun Han, Juan Du, Jing Sun, Yimin, Jian Cui, Jie Guo, Akira Kudo, Norio Amizuka, Minqi Li
    JOURNAL OF MOLECULAR HISTOLOGY 46 (3) 303 - 311 1567-2379 2015/06 [Refereed][Not invited]
     
    Periostin is essential for the integrity and function of the periodontal ligament (PDL), and periostin knockout is related to an enhanced inflammatory status in PDL. High mobility group box 1 (HMGB1), a late inflammatory cytokine, is up-regulated in PDL cells in response to mechanical stress. This study aimed to investigate the effect of periostin deficiency (Pn-/-) on HMGB1 expression in PDL during orthodontic tooth movement. We used 8-week-old male mice homozygous for the disrupted periostin gene and their wild-type (WT) littermates. Tooth movement was performed according to Waldo's method, in which 0.5-mm-thick elastic bands were inserted between the first and second upper molars of anesthetized mice. After 3 days of mechanical loading, mice were fixed by transcardial perfusion of 4 % paraformaldehyde in phosphate buffer, and the maxilla was extracted for histochemical analyses. Compared with the WT group, Pn-/- mice showed higher basal expression of HMGB1 in the absence of mechanical loading. Following 3 days of orthodontic tooth movement, the PDL in the compression side of both groups was almost replaced by cell-free hyaline zones, and Pn-/- mice showed a much wider residual PDL than WT mice. In the tension side, the number of HMGB1-positive cells in PDL in both Pn-/- and WT groups increased remarkably without a significant difference between the two groups. Our findings suggest an inhibitory effect of periostin on HMGB1 production by PDL and confirmed the critical role of periostin in integrity of PDL collagen fibrils during orthodontic tooth movement, although mechanical loading is the predominant stimulant of HMGB1 expression relative to periostin deficiency.
  • Hongrui Liu, Jian Cui, Jing Sun, Juan Du, Wei Feng, Bao Sun, Juan Li, Xiuchun Han, Bo Liu, Yimin, Kimimitsu Oda, Norio Amizuka, Minqi Li
    JOURNAL OF MOLECULAR HISTOLOGY 46 (3) 313 - 323 1567-2379 2015/06 [Refereed][Not invited]
     
    The purpose of this study was to investigate the effect of zoledronate (ZA) on osteoclast functions and viability in the tibiae of 8-week-old male mice. After weekly intravenous administration of ZA (125 mu g/kg body weight) for 8 weeks, the mice were fixed by transcardial perfusion of 4 % paraformaldehyde under anesthesia, and their tibiae were extracted for histochemical analysis. Compared with the control group, many tartrate-resistant acidic phosphatase-positive osteoclasts were found on the surface of the trabecular bone, but cartilage cores were obviously increased in the metaphysis of the ZA group. Osteoclasts of both groups showed similar expression of cathepsin K and matrix metalloproteinase-9. However, hardly any expression of c-src, a gene necessary for ruffled border formation and bone resorption, was found in osteoclasts of the ZA group. Moreover, no expression of CD44 or osteopontin (OPN) was observed in osteoclasts of the ZA group. Taken together, our findings suggest that ZA administration decreases the bone resorption ability of osteoclasts by inhibiting c-src expression and suppressing osteoclast adhesion by interfering with CD44/OPN binding.
  • [Vascular Calcification - Pathological Mechanism and Clinical Application - . Vascular calcification in klotho deficient environment].
    Hasegawa T, Yamamoto T, Hongo H, Tsuboi K, Amizuka N
    Clinical calcium 25 (5) 693 - 699 0917-5857 2015/05 [Refereed][Not invited]
  • Mitsuru Saito, Marc D. Grynpas, David B. Burr, Matthew R. Allen, Susan Y. Smith, Nancy Doyle, Norio Amizuka, Tomoka Hasegawa, Yoshikuni Kida, Keishi Marumo, Hitoshi Saito
    BONE 73 8 - 15 8756-3282 2015/04 [Refereed][Not invited]
     
    Eldecalcitol (ELD), an active form of vitamin D analog approved for the treatment of osteoporosis in Japan, increases lumbar spine bone mineral density (BMD), suppresses bone turnover markers, and reduces fracture risk in patients with osteoporosis. We have previously reported that treatment with ELD for 6 months improved the mechanical properties of the lumbar spine in ovariectomized (OVX) cynomolgus monkeys. ELD treatment increased lumbar BMD, suppressed bone turnover markers, and reduced histomorphometric parameters of both bone formation and resorption in vertebral trabecular bone. In this study, we elucidated the effects of ELD on bone quality (namely, mineralization, microarchitecture, microdamage, and bone collagen crosslinks) in OVX cynomolgus monkeys in comparison with OVX-vehicle control monkeys. Density fractionation of bone powder prepared from lumbar vertebrae revealed that ELD treatment shifted the distribution profile of bone mineralization to a higher density, and backscattered electron microscopic imaging showed improved trabecular bone connectivity in the ELD-treated groups. Higher doses of ELD more significantly reduced the amount of microdamage compared to OVX-vehicle controls. The fractionated bone powder samples were divided according to their density, and analyzed for collagen crosslinks. Enzymatic crosslinks were higher in both the high-density (>= 2.0 mg/mL) and low-density (<2.0 mg/mL) fractions from the ELD-treated groups than in the corresponding fractions in the OVX-vehicle control groups. On the other hand, non-enzymatic crosslinks were lower in both the high- and low-density fractions. These observations indicated that ELD treatment stimulated the enzymatic reaction of collagen crosslinks and bone mineralization, but prevented non-enzymatic reaction of collagen crosslinks and accumulation of bone microdamage. Bone anti-resorptive agents such as bisphosphonates slow down bone remodeling so that bone mineralization, bone microdamage, and non-enzymatic collagen crosslinks all increase. Bone anabolic agents such as parathyroid hormone decrease bone mineralization and bone microdamage by stimulating bone remodeling. ELD did not fit into either category. Histological analysis indicated that the ELD treatment strongly suppressed bone resorption by reducing the number of osteoclasts, while also stimulating focal bone formation without prior bone resorption (bone minimodeling). These bidirectional activities of ELD may account for its unique effects on bone quality. (C) 2014 The Authors. Published by Elsevier Inc.
  • Hongrui Liu, Jian Cui, Wei Feng, Shengyu Lv, Juan Du, Jing Sun, Xiuchun Han, Zhenming Wang, Xiong Lu, Yimin, Kimimitsu Oda, Norio Amizuka, Minqi Li
    MATERIALS SCIENCE & ENGINEERING C-MATERIALS FOR BIOLOGICAL APPLICATIONS 49 14 - 24 0928-4931 2015/04 [Refereed][Not invited]
     
    The aim of this study was to investigate the influence of calcitriol on osteoinduction following local administration into mandibular bone defects. Calcitriol-loaded absorbable collagen membrane scaffolds were prepared using the polydopamine coating method and characterized by scanning electron microscopy. Composite scaffolds were implanted into rat mandibular bone defects in the following groups: no graft material (control), bare collagen membrane (CM group), collagen membrane bearing polydopamine coating (DOP/CM group), and collagen membrane bearing polydopamine coating absorbed with calcitriol (CAL/DOP/CM group). At 1, 2, 4 and 8 weeks post-surgery, the osteogenic potential of calcitriol was examined by histological and immunohistochemical methods. Following in vivo implantation, calcitriol-loaded composite scaffolds underwent rapid degradation with pronounced replacement by new bone and induced reunion of the bone marrow cavity. Calcitriol showed strong potential in inhibiting osteoclastogenesis and promotion of osteogenic differentiation at weeks 1, and 2. Furthermore, statistical analysis revealed that the newly formed bone volume in the CAL/DOP/CM group was significantly higher than other groups at weeks 1, and 2. At weeks 4, and 8, the CAL/DOP/CM group showed more mineralized bone and uniform collagen structure. These data suggest that local administration of calcitriol is promising in promoting osteogenesis and mineralization for restoration of mandibular bone defects. (C) 2014 Elsevier B.V. All rights reserved.
  • Yasuhisa Abe, Kousuke Iba, Koichi Sasaki, Hironori Chiba, Kumiko Kanaya, Tomoyuki Kawamata, Kimimitsu Oda, Norio Amizuka, Muneteru Sasaki, Toshihiko Yamashita
    JOURNAL OF BONE AND MINERAL METABOLISM 33 (2) 125 - 134 0914-8779 2015/03 [Refereed][Not invited]
     
    The aim of this study was to evaluate skeletal pain associated with osteoporosis and to examine the inhibitory effect of bisphosphonate (BP) on pain in an ovariectomized (OVX) mouse model. We evaluated skeletal pain in OVX mice through an examination of pain-like behavior as well as immunohistochemical findings. In addition, we assessed the effects of alendronate (ALN), a potent osteoclast inhibitor, on those parameters. The OVX mice showed a decrease in the pain threshold value, and an increase in the number of c-Fos immunoreactive neurons in laminae I-II of the dorsal horn of the spinal cord. Alendronate caused an increase in the pain threshold value and inhibited c-Fos expression. The serum level of tartrate-resistant acid phosphatase 5b, a marker of osteoclast activity, was significantly negatively correlated with the pain threshold value. Furthermore, we found that an antagonist of the transient receptor potential channel vanilloid subfamily member 1, which is an acid-sensing nociceptor, improved pain-like behavior in OVX mice. These results indicated that the inhibitory effect of BP on osteoclast function might contribute to an improvement in skeletal pain in osteoporosis patients.
  • Shengyu Lv, Juan Li, Wei Feng, Hongrui Liu, Juan Du, Jing Sun, Jian Cui, Bao Sun, Xiuchun Han, Kimimitsu Oda, Norio Amizuka, Xin Xu, Minqi Li
    JOURNAL OF MOLECULAR HISTOLOGY 46 (1) 107 - 114 1567-2379 2015/02 [Refereed][Not invited]
     
    Recent studies indicate that high mobility group box protein 1 (HMGB1) originating from periodontal ligament (PDL) cells can be a potential regulator in the process of orthodontic tooth movement and periodontal tissue remodeling. The aim of this study is to investigate HMGB1 expression in periodontal tissue during orthodontic tooth movement in mice according to Waldo's method. Six 7-week-old C57BL6 mice were used in these experiments. The elastic band was inserted into the teeth space between the right first and second maxillary molars. After 3 days of mechanical loading, mice were fixed with transcardial perfusion of 4 % paraformaldehyde in 0.1 M phosphate buffer (pH 7.4), and the maxillary was extracted for histochemical analyses. The histological examination revealed local PDL tear at the tension side and the formation of extensive cell-free hyaline zones at the compression side. The immunolocalization of HMGB1 was significantly presented at tension side of PDL, apical area and dental pulp, whereas at the compression side of PDL, the labeling of HMGB1 was almost undetectable as the presence of hyaline zone. Taken together, we concluded that the orthodontic tooth movement by Waldo's method leads to histological changes and HMGB1 expression pattern that differ from those of coil spring method, including PDL tear and extensive hyaline zone which may severely destroy periodontal tissue and in turn impede tooth movement.
  • Hongrui Liu, Jie Guo, Shanliang Wei, Shengyu Lv, Wei Feng, Jian Cui, Tomoka Hasegawa, Hiromi Hongo, Yang Yang, Xiangzhi Li, Kimimitsu Oda, Norio Amizuka, Minqi Li
    HISTOLOGY AND HISTOPATHOLOGY 30 (1) 77 - 85 0213-3911 2015/01 [Refereed][Not invited]
     
    This study aimed to investigate the expression of matrix Gla protein (MGP) and osteocalcin (OCN) in the tibial epiphysis of developing mice. At 1, 2, 3, and 4 weeks after birth, tibiae were removed and processed for histochemical observations and western blot analyses under anesthesia. To evaluate bone volume, the specimens were scanned with Micro CT Scanner from the articular cartilage through the growth plate, along the long axis of tibia. At 1 week after birth, OCN reactivity was faint in the region of vascular invasion, while hardly any MGP reactivity was discernible. Subsequently, MGP reactivity was seen on the cartilaginous lacunar walls of hypertrophic chondrocytes, while OCN reactivity was evenly found not only in the bone matrix, but also in the cartilaginous lacunar walls and on the bone surfaces. Furthermore, double-immunostaining clearly showed that MGP reactivity appeared closer to the cartilage matrix than OCN reactivity until postnatal week 3. Interestingly, the immunoreactivities for MGP and OCN both showed tidemarks in the articular cartilage at postnatal week 4, and MGP reactivity was more intense than OCN reactivity. Statistical analyses showed an overall upward trend in MGP and OCN expression levels during tibial epiphysis development, even though OCN was more abundant than MGP at every time-point. Taken together, our findings suggest that the expression of MGP and OCN increased gradually in the murine developing tibial epiphysis, and the two mineral-associated proteins may occur at the same location during a particular period, but at different levels.
  • Tsuneyuki Yamamoto, Tamaki Yamada, Tomomaya Yamamoto, Tomoka Hasegawa, Hiromi Hongo, Kimimitsu Oda, Norio Amizuka
    ACTA HISTOCHEMICA ET CYTOCHEMICA 48 (3) 95 - 101 0044-5991 2015 [Refereed][Not invited]
     
    To elucidate the fate of the epithelial root sheath during initial cellular cementogenesis, we examined developing maxillary first molars of rats by immunohistochemistry for keratin, vimentin, and tissue non-specific alkaline phosphatase (TNALP) and by TdT-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL). The advancing root end was divided into three sections, which follow three distinct stages of initial cellular cementogenesis: section 1, where the epithelial sheath is intact; section 2, where the epithelial sheath becomes fragmented; and section 3, where initial cellular cementogenesis begins. After fragmentation of the epithelial sheath, many keratin-positive epithelial sheath cells were embedded in the rapidly growing cellular cementum. A few unembedded epithelial cells located on the cementum surface. Dental follicle cells, precementoblasts, and cementoblasts showed immunoreactivity for vimentin and TNALP. In all three sections, there were virtually no cells possessing double immunoreactivity for vimentin-keratin or TNALP-keratin and only embedded epithelial cells showed TUNEL reactivity. Taken together, these findings suggest that: (1) epithelial sheath cells divide into two groups; one group is embedded in the cementum and thereafter dies by apoptosis, and the other survives on the cementum surface as epithelial cell rests of Malassez; and (2) epithelial sheath cells do not undergo epithelial-mesenchymal transition during initial cellular cementogenesis.
  • Tsuneyuki Yamamoto, Tomomaya Yamamoto, Tamaki Yamada, Tomoka Hasegawa, Hiromi Hongo, Kimimitsu Oda, Norio Amizuka
    HISTOCHEMISTRY AND CELL BIOLOGY 142 (5) 489 - 496 0948-6143 2014/11 [Refereed][Not invited]
     
    This study was designed to examine developing acellular cementum in rat molars by immunohistochemistry, to elucidate (1) how Hertwig's epithelial root sheath disintegrates and (2) whether epithelial sheath cells transform into cementoblasts through epithelial-mesenchymal transition (EMT). Initial acellular cementogenesis was divided into three developmental stages, which can be seen in three different portions of the root: portion 1, where the epithelial sheath is intact; portion 2, where the epithelial sheath becomes fragmented; and portion 3, where acellular cementogenesis begins. Antibodies against three kinds of matrix proteinases, which degrade epithelial sheath-maintaining factors, including basement membrane and desmosomes, were used to investigate proteolytic activity of the epithelial sheath. Tissue non-specific alkaline phosphatase (TNALP) and keratin were used to investigate EMT. Epithelial sheath cells showed immunoreactivity for all three enzymes at fragmentation, which suggests that epithelial sheath disintegration is enzymatically mediated. Dental follicle cells and cementoblasts showed intense immunoreactivity for TNALP, and from portion 1 through to 3, the reaction extended from the alveolar bone-related zone to the root-related zone. Cells possessing keratin/TNALP double immunoreactivity were virtually absent. Keratin-positive epithelial sheath cells showed negligible immunoreactivity for TNALP, and epithelial cells did not appear to migrate to the dental follicle. Together, these findings suggest that a transition phenotype between epithelial cells and cementoblasts does not exist in the developing dental follicle and hence that epithelial sheath cells do not undergo EMT during initial acellular cementogenesis. In brief, this study supports the notion that cementoblasts derive from the dental follicle.
  • Sachiko Shiba, Kazuhiro Ikeda, Kotaro Azuma, Tomoka Hasegawa, Norio Amizuka, Kuniko Horie-Inoue, Satoshi Inoue
    BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS 453 (3) 350 - 355 0006-291X 2014/10 [Refereed][Not invited]
     
    Vitamin K-dependent gamma-glutamyl carboxylase (GGCX) is an enzyme that catalyzes the conversion of glutamic acid to gamma-carboxyglutamic acid in substrate proteins. Among GGCX target proteins, recent evidence indicates that osteocalcin regulates insulin sensitivity and secretion. However, the precise contribution of GGCX to glucose metabolism remains to be clarified. To address this question, we generated osteoblast-specific Ggcx-deficient (i.e., conditional knockout [cKO]) mice using collagen type 1 alpha 1 (Col1)-Cre mice. Ggcx cKO mice exhibited altered metabolism compared with, their controls; serum glucose levels could be maintained with low amounts of insulin, and the weight of white adipose tissue (WAT) significantly decreased in Ggcx cKO mice. Our findings suggest that GGCX expressed in osteoblasts is critical for the maintenance of blood glucose and WAT. (C) 2014 Elsevier Inc. All rights reserved.
  • Hongrui Liu, Wei Feng, Yimin, Jian Cui, Shengyu Lv, Tomoka Hasegawa, Bao Sun, Juan Li, Kimimitsu Oda, Norio Amizuka, Minqi Li
    JOURNAL OF HISTOCHEMISTRY & CYTOCHEMISTRY 62 (8) 556 - 564 0022-1554 2014/08 [Refereed][Not invited]
     
    Interleukin-6 (IL-6) is a multifunctional cytokine considered to modulate bone homeostasis. Based on previous contradictory studies, we aimed to verify the influence of IL-6 deficiency on bone remodeling using an IL-6 knockout (IL-6-/-) murine model. Eight-month-old male mice, homozygous for the disrupted IL-6 gene, and their wild type (WT) littermates (control), were used. After transcardiac perfusion, tibiae were removed for histochemical analysis. Compared with the control group, IL-6 deficiency increased tartrate resistant acid phosphatase (TRAP)-positive osteoclast numbers and up-regulated the alkaline phosphatase (ALP) activity of osteoblasts in the metaphysis of the tibia. However, further analysis of serial histological sections from IL-6-/- ice found a significant discrepancy in osteoclast number, with the higher number of TRAP-positive osteoclasts conflicting with the lower number of cathepsin K-positive osteoclasts. Moreover, TUNEL staining identified a significantly higher rate of osteoclast apoptosis in IL-6-/- ice as compared with their WT controls. IL-6 deficiency induced abundant TRAP-positive osteoclasts but delayed bone remodeling by significantly inhibiting the bone resorption activity of osteoclasts and promoting osteoclast apoptosis.
  • Shengyu Lv, Hongrui Liu, Jian Cui, Tomoka Hasegawa, Hiromi Hongo, Wei Feng, Juan Li, Bao Sun, Akira Kudo, Norio Amizuka, Minqi Li
    JOURNAL OF MOLECULAR HISTOLOGY 45 (3) 303 - 309 1567-2379 2014/06 [Refereed][Not invited]
     
    The purpose of this study was to investigate immunolocalization of collagenolytic enzymes including cathepsin K, matrix metalloproteinase (MMP) 1 and 2 in the compressed periodontal ligament (PDL) during orthodontic tooth movement using a periostin deficient (Pn-/-) mouse model. Twelve-week-old male mice homozygous for the disrupted periostin gene and their wild type (WT) littermates were used in these experiments. The tooth movement was performed according to Waldo's method, in which elastic bands of 0.5 mm thickness were inserted between the first and second upper molars of mice under anesthesia. At 1 and 3 days after orthodontic force application, mice were fixed with transcardial perfusion of 4 % paraformaldehyde in 0.1 M phosphate buffer (pH 7.4), and the first molars and peripheral alveolar bones were extracted for histochemical analyses. Compared with WT mice, immunolocalization of cathepsin K, MMP1 and MMP2 was significantly decreased at 1 and 3 days after orthodontic tooth movement in the compressed PDL of Pn-/- mice, although MMP1-reactivity and MMP2-reactivity decreased at different amounts. Very little cathepsin K-immunoreactivity was observed in the assessed regions of Pn-/- mice, both before and after orthodontic force application. Furthermore, Pn-/- mice showed a much wider residual PDL than WT mice. Taken together, we concluded that periostin plays an essential role in the function of collagenolytic enzymes like cathepsin K, MMP1 and MMP2 in the compressed PDL after orthodontic force application.
  • Chihiro Tabata, Hiromi Hongo, Muneteru Sasaki, Tomoka Hasegawa, Paulo Henrique Luiz de Freitas, Tamaki Yamada, Tomomaya Yamamoto, Reiko Suzuki, Tsuneyuki Yamamoto, Kimimitsu Oda, Minqi Li, Akira Kudo, Junichiro Iida, Norio Amizuka
    HISTOLOGY AND HISTOPATHOLOGY 29 (6) 731 - 742 0213-3911 2014/06 [Refereed][Not invited]
     
    Verifying whether periostin affects the distribution of type I collagen, fibronectin and tenascin C in the periodontal ligament (PDL) is important to contribute to a more thorough understanding of that protein's functions. In this study, we have histologically examined incisor PDL of mandibles in 20 week-old male wild-type and periostin-deficient (periostin(-/-)) mice, by means of type I collagen, fibronectin, tenascin C, proliferating cell nuclear antigen, matrix metalloproteinase (MMP)-1 and F4/80-positive monocyte/ macrophage immunostaining, transmission electron microscopy and quantitative analysis of cell proliferation. Wild-type PDL featured well-arranged layers of collagen bundles intertwined with PDL cells, whose longitudinal axis ran parallel to the collagen fibers. However, cells in the periostin(-/-) PDL were irregularly distributed among collagen fibrils, which were also haphazardly arranged. Type I collagen and fibronectin reactivity was seen throughout the wild-type PDL, while in the periostin(-/-) PDL, only focal, uneven staining for these proteins could be seen. Similarly, tenascin C staining was evenly distributed in the wildtype PDL, but hardly seen in the periostin(-/-) PDL. MMP1 immunoreactivity was uniformly distributed in the wild-type PDL, but only dotted staining could be discerned in the periostin(-/-) PDL. F4/80-positive monocyte/macrophages were found midway between tooth-and bone-related regions in the wild-type PDL, a pattern that could not be observed in the periostin(-/-) PDL. In summary, periostin deficiency may not only cause PDL collagen fibril disorganization, but could also affect the distribution of other major extracellular matrix proteins such as fibronectin and tenascin C.
  • [Bone and Stem Cells. Cellular network in bone micro-environment - histological and ultrastructural aspects -].
    Amizuka N, Yamamoto T, Hasegawa T
    Clinical calcium 24 (4) 475 - 485 0917-5857 2014/04 [Refereed][Not invited]
  • [Microscopic aspects on biomineralization in bone].
    Amizuka N, Hasegawa T, Yamamoto T, Oda K
    Clinical calcium 24 (2) 203 - 214 0917-5857 2014/02 [Refereed][Not invited]
  • [Tissue-nonspecific alkaline phosphatase and hypophosphatasia].
    Oda K, Kinjoh NN, Sohda M, Komaru K, Amizuka N
    Clinical calcium 24 (2) 233 - 239 0917-5857 2014/02 [Refereed][Not invited]
  • Effect of a Calcilytic Compound in Autosomal Dominant Hypocalcemia Model Mice.
    Bingzi Dong, Itsuro Endo, Takeshi Kondo, Yukiyo Ohnishi, Masahiro Abe, Seiji Fukumoto, Tomoka Hasegawa, Norio Amizuka, Shin-ichi Aizawa, Toshio Matsumoto
    JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH 29 S75 - S75 0884-0431 2014/02 [Refereed][Not invited]
  • Eldecalcitol, a new-generation vitamin D3 analog, increases trabecular bone via "minimodeling'' in ovariectomized cynomolgus monkeys.
    Tomoka Hasegawa, Saito Mitsuru, Doyle Nancy, Chouinard Luc, Smith Susan, Yamamoto Tomomaya, Oda Kimimitsu, Saito Hitoshi, Amizuka Norio
    JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH 29 S106 - S106 0884-0431 2014/02 [Refereed][Not invited]
  • The Importance of Activated Vitamin D for the Mineralization by the Osteocyte in Patients with Renal Hyperparathyroidism.
    Aiji Yajima, Ken Tsuchiya, Kosaku Nitta, Masaaki Inaba, Yoshihiro Tominaga, Norio Amizuka, Akemi Ito, Hironari Shindo
    JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH 29 S173 - S173 0884-0431 2014/02 [Refereed][Not invited]
  • Combination Treatment of 1-34 PTH and Eldecalcitol Showed Synergistic Effect on BMD without Severe Hypercalcemia.
    Sadaoki Sakai, Satoshi Takeda, Tomomaya Yamamoto, Tomoka Hasegawa, Norio Amizuka, Koichi Endo
    JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH 29 S263 - S264 0884-0431 2014/02 [Refereed][Not invited]
  • Effects of the Combination of Eldecalcitol, an Analog of Active Vitamin D-3, and Parathyroid Hormone in Ovariectomized Rat Bones
    Tomomaya Yamamoto, Tomoka Hasegawa, Sadaoki Sakai, Satoshi Takeda, Kimimitsu Oda, Minqi Li, Koichi Endo, Norio Amizuka
    JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH 29 S314 - S315 0884-0431 2014/02 [Refereed][Not invited]
  • Kimie Nakagawa, Natsumi Sawada, Yoshihisa Hirota, Yuri Uchino, Yoshitomo Suhara, Tomoka Hasegawa, Norio Amizuka, Tadashi Okamoto, Naoko Tsugawa, Maya Kamao, Nobuaki Funahashi, Toshio Okano
    PloS one 9 (8) e104078  1932-6203 2014 [Refereed][Not invited]
     
    UbiA prenyltransferase domain containing 1 (UBIAD1) is a novel vitamin K2 biosynthetic enzyme screened and identified from the human genome database. UBIAD1 has recently been shown to catalyse the biosynthesis of Coenzyme Q10 (CoQ10) in zebrafish and human cells. To investigate the function of UBIAD1 in vivo, we attempted to generate mice lacking Ubiad1, a homolog of human UBIAD1, by gene targeting. Ubiad1-deficient (Ubiad1(-/-)) mouse embryos failed to survive beyond embryonic day 7.5, exhibiting small-sized body and gastrulation arrest. Ubiad1(-/-) embryonic stem (ES) cells failed to synthesize vitamin K2 but were able to synthesize CoQ9, similar to wild-type ES cells. Ubiad1(+/-) mice developed normally, exhibiting normal growth and fertility. Vitamin K2 tissue levels and synthesis activity were approximately half of those in the wild-type, whereas CoQ9 tissue levels and synthesis activity were similar to those in the wild-type. Similarly, UBIAD1 expression and vitamin K2 synthesis activity of mouse embryonic fibroblasts prepared from Ubiad1(+/-) E15.5 embryos were approximately half of those in the wild-type, whereas CoQ9 levels and synthesis activity were similar to those in the wild-type. Ubiad1(-/-) mouse embryos failed to be rescued, but their embryonic lifespans were extended to term by oral administration of MK-4 or CoQ10 to pregnant Ubiad1(+/-) mice. These results suggest that UBIAD1 is responsible for vitamin K2 synthesis but may not be responsible for CoQ9 synthesis in mice. We propose that UBIAD1 plays a pivotal role in embryonic development by synthesizing vitamin K2, but may have additional functions beyond the biosynthesis of vitamin K2.
  • Muneteru Sasaki, Tomoka Hasegawa, Tamaki Yamada, Hiromi Hongo, Paulo Henrique Luiz de Freitas, Reiko Suzuki, Tomomaya Yamamoto, Chihiro Tabata, Satoru Toyosawa, Tsuneyuki Yamamoto, Kimimitsu Oda, Minqi Li, Nobuo Inoue, Norio Amizuka
    BONE 57 (1) 206 - 219 8756-3282 2013/11 [Refereed][Not invited]
     
    In an attempt to identify the histological properties of the klotho-deficient (kl/kl) bone matrix, bone mineralization and the localization of Ca2+-binding bone matrix proteins - osteocalcin, dentin matrix protein-1 (DMP-1) and matrix Gla protein (MGP) - were examined in kl/kl tibiae. While a widespread osteocalcin staining could be verified in the wild-type bone matrix, localization of the same protein in the kl/kl tibiae seemed rather restricted to osteocytes with only a faint staining of the whole bone matrix. In wild-type mice, MGP immunoreactivity was present at the junction between the epiphyseal bone and cartilage, and at the insertion of the cruciate ligaments. In kl/kl mice, however, MGP was seen around the cartilaginous cores of the metaphyseal trabeculae and in the periphery of some cells of the bone surface. DMP-1 was identified in the osteocytic canalicular system of wild-type tibiae, but in the kl/kl tibiae this protein was mostly found in the osteocytic lacunae and in the periphery of some cells of the bone surface. Mineralization of the kl/kl bone seemed somewhat defective, with broad unmineralized areas within its matrix. In these areas, mineralized osteocytes along with their lacunae and osteocytic cytoplasmic processes were found to have intense osteocalcin and DMP-1 staining. Taken together, it might be that the excessive production of Ca2+-binding molecules such as osteocalcin and DMP-1 by osteocytes concentrates mineralization around such cells, disturbing the completeness of mineralization in the kl/kl bone matrix. (C) 2013 Elsevier Inc. All rights reserved.
  • Koichiro Komatsu, Akemi Shimada, Tatsuya Shibata, Satoshi Wada, Hisashi Ideno, Kazuhisa Nakashima, Norio Amizuka, Masaki Noda, Akira Nifuji
    JOURNAL OF ENDOCRINOLOGY 219 (2) 145 - 158 0022-0795 2013/11 [Refereed][Not invited]
     
    Bisphosphonates (BPs) are a major class of antiresorptive drug, and their molecular mechanisms of antiresorptive action have been extensively studied. Recent studies have suggested that BPs target bone-forming cells as well as bone-resorbing cells. We previously demonstrated that local application of a nitrogen-containing BP (N-BP), alendronate (ALN), for a short period of time increased bone tissue in a rat tooth replantation model. Here, we investigated cellular mechanisms of bone formation by ALN. Bone histomorphometry confirmed that bone formation was increased by local application of ALN. ALN increased proliferation of bone-forming cells residing on the bone surface, whereas it suppressed the number of tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP)-positive osteoclasts in vivo. Moreover, ALN treatment induced more alkaline phosphatase-positive and osteocalcin-positive cells on the bone surface than PBS treatment. In vitro studies revealed that pulse treatment with ALN promoted osteocalcin expression. To track the target cells of N-BPs, we applied fluorescence-labeled ALN (F-ALN) in vivo and in vitro. F-ALN was taken into bone-forming cells both in vivo and in vitro. This intracellular uptake was inhibited by endocytosis inhibitors. Furthermore, the endocytosis inhibitor dansylcadaverine (DC) suppressed ALN-stimulated osteoblastic differentiation in vitro and it suppressed the increase in alkaline phosphatase-positive bone-forming cells and subsequent bone formation in vivo. DC also blocked the inhibition of Rap1A prenylation by ALN in the osteoblastic cells. These data suggest that local application of ALN promotes bone formation by stimulating proliferation and differentiation of bone-forming cells as well as inhibiting osteoclast function. These effects may occur through endocytic incorporation of ALN and subsequent inhibition of protein prenylation.
  • [Updates on rickets and osteomalacia: biological function of osteocyte and FGF23/klotho system].
    Amizuka N, Hasegawa T, Sasaki M, Yamamoto T, Yamamoto T
    Clinical calcium 23 (10) 1453 - 1461 0917-5857 2013/10 [Refereed][Not invited]
  • Hitoshi Saito, Satoshi Takeda, Norio Amizuka
    JOURNAL OF STEROID BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY 136 178 - 182 0960-0760 2013/07 [Refereed][Not invited]
     
    Vitamin D is known as a potent stimulator of bone resorption. The active form of vitamin D-3, calcitriol (1 alpha,25-dihydroxyvitamin D-3), stimulates release of calcium (Ca) from bone in ex vivo organ culture, and treatment with large amounts of an active Vitamin D-3 analog induces hypercalcemia and bone resorption in mice in vivo. Calcitriol strongly induces both receptor activator of NF-kappa B ligand (RANKL) and macrophage colony-stimulating factor (M-CSF) in osteoblasts in vitro. On the other hand, it has been reported that active vitamin D-3 inhibits bone resorption in Various experimental animal Models. We previously Showed that eldecalcitol [1 alpha,25-dihydroxy-2 beta-(3-hydrOXy-prOpylOXy)vitamin D-3; ED-71] suppresses bone resorption and increases bone mineral density (BMD) to a greater extent than alfacalcidol (la-hydroxyvitamin D-3) in ovariectomized (OVX) rats in vivo. To elucidate the histological events that follow administration of eldecalcitol compared to calcitriol, OVX rats were given either vehicle, eldecalcitol (10, 30, or 90 ng/kg), or calcitriol (33.3, 100, 300, or 900 ng/kg), and sham-operated control animals were given vehicle, 5-times per week for 12 weeks. The lumbar spine and femur were removed and processed for bone mineral density (BMD) assessments and the femur for histomorphometrical analyzes. Both eldecalcitol and calcitriol increased the lumbar and femoral BMD in a dose dependent manner. Bone histomorphometry revealed that osteoclast surface (Oc.S/BS) and eroded surface (ES/BS) were dose-dependently suppressed in the trabecular region of the femur. Both calcitriol and eldecalcitol dose-dependently stimulated focal bone formation that started without prior bone resorption, a process known as bone minimodeling. Both reduction of bone resorption and stimulation of focal bone formation were more clearly observed in the eldecalcitol-treated rats than in the calcithol-treated rats. Taken together, these findings suggest that eldecalcitol is a more potent vitamin D-3 analog that stimulates focal bone formation (minimodeling) and suppresses bone resorption more strongly than does calcitriol. This article is part of a Special Issue entitled 'Vitamin D Workshop'. (C) 2012 Elsevier Ltd. All rights reserved.
  • Sara Sultana, Hiba A. Al-Shawafi, Saori Makita, Miwa Sohda, Norio Amizuka, Ritsuo Takagi, Kimimitsu Oda
    MOLECULAR GENETICS AND METABOLISM 109 (3) 282 - 288 1096-7192 2013/07 [Refereed][Not invited]
     
    Various loss-of function mutations in the tissue-nonspecific alkaline phosphatase (TNSALP) gene cause a rare genetic disorder called hypophosphatasia (HPP), which is characterized by defective mineralization in the bones and teeth and a deficiency in serum alkaline phosphatase. A point mutation (c.1250A>G), which leads to replacement of an asparagine at position 417 of TNSALP with serine [TNSALP (N417S)], has been reported in a patient diagnosed with perinatal HPP (Sergi C. et al. Am, J. Med. Genet. 103, 235-240, 2001). In order to characterize the molecular properties of TNSALP (N417S), we expressed and analyzed TNSALP (N417S) both in COS-1 cells (transient expression) and CHO K1 Tet-On cells (inducible cell system). In contrast to wild-type TNSALP [TNSALP (W)], cells expressing TNSALP (N417S) lacked its alkaline phosphatase activity. However, this mutant underwent N-linked oligosaccharide processing and appeared on the cell surface similar to TNSALP (W). Importantly, this mutant failed to assemble into a dimer structure, which is needed for the catalytic function of TNSALP, as evidenced by newly developed SDS-PAGE as well as sucrose-density-gradient centrifugation. Substitution of the asparagine at position 417 with structurally related amino acids such as an aspartate and a glutamine also abolished the dimerization of TNSALP without perturbing its cell surface localization. Taken together, the asparagine at position 417 is crucial for the assembly and function of TNSALP, which may explain the severity of the N417S mutation. (C) 2013 Elsevier Inc. All rights reserved.
  • Taku Kojima, Tomoka Hasegawa, Paulo Henrique Luiz de Freitas, Tomomaya Yamamoto, Muneteru Sasaki, Keisuke Horiuchi, Hiromi Hongo, Tamaki Yamada, Naoko Sakagami, Naoaki Saito, Michiko Yoshizawa, Tadaharu Kobayashi, Takeyasu Maeda, Chikara Saito, Norio Amizuka
    BIOMEDICAL RESEARCH-TOKYO 34 (3) 119 - 128 0388-6107 2013/06 [Refereed][Not invited]
     
    We have histologically examined vascular invasion and calcification of the hypertrophic zone during endochondral ossification in matrix metalloproteinase (MMP)-9 deficient (MMP-9(-/-)) mice and in their littermates at 3 days, 3 weeks and 6 weeks after birth. Capillaries and osteoclasts at the chondro-osseous junction showed an intense MMP-9 immunopositivity, suggesting that they recognize chemical properties of cartilaginous matrices, and then release MMP-9 for cartilage degradation. CD31-positive capillaries and tartrate-resistant acid phosphatase-reactive osteoclasts could be found in the close proximity in the region of chondro-osseous junction in MMP-9(-/-) mice, while in wild-type mice, vascular invasion preceded osteoclastic migration into the epiphyseal cartilage. Although MNP-9(-/-) mice revealed larger hypertrophic zones, the index of calcified area was significantly smaller in MMP-9(-/-) mice. Interestingly, the lower layer of the MMP-9(-/-) hypertrophic zone showed intense MMP-13 staining, which could not be observed in wild-type mice. This indicates that MMP-13 may compensate for MMP-9 deficiency at that specific region, but not to a point at which the deficiency could be completely rescued. In conclusion, it seems that MMP-9 is the optimal enzyme for cartilage degradation during endochondral ossification by controlling vascular invasion and subsequent osteoclastic migration.
  • Tomoka Hasegawa, Norio Amizuka, Tamaki Yamada, Zhusheng Liu, Yukina Miyamoto, Tomomaya Yamamoto, Muneteru Sasaki, Hiromi Hongo, Reiko Suzuki, Paulo Henrique Luiz de Freitas, Tsuneyuki Yamamoto, Kimimitsu Oda, Minqi Li
    BIOMEDICAL RESEARCH-TOKYO 34 (3) 153 - 159 0388-6107 2013/06 [Refereed][Not invited]
     
    Sclerostin, an osteocyte-derived molecule, has been reported to serve as a negative regulator of osteoblastic activity as well as bone remodeling. However, there is no report that verified the regional difference for sclerostin synthesis, and in this study we have investigated immunolocalization of sclerostin by comparing dentin matrix protein (DMP) 1, an osteocyte-derived factor broadly expressed in tibial metaphyses and cortical bone. In metaphyseal primary trabecules, a site of bone modeling, strong DMP1-reactivity was observed in osteocytic lacunar-canalicular system (OLCS), while faint staining for sclerostin was visible only in a few osteocytes. In secondary trabecules, in which bone remodeling begins, some osteocytes showed intense sclerostin-immunopositivity, though there were many DMP1-positive osteocytes. In cortical bone, there were more osteocytes reactive for sclerostin, when compared with those in the secondary trabecules. Silver impregnation verified that immature, primary trabecules contained randomly-oriented OLCS, while mature, cortical bone showed geometrically well-arrangement of OLCS. Taken together, though DMP1 is broadly synthesized in bone, sclerostin appears to be abundantly synthesized in regular OLCS of cortical bone, but less produced in irregular OLCS as seen in primary trabecules, indicating the regional difference for sclerostin synthesis.
  • Minqi Li, Tomoka Hasegawa, Hiromi Hogo, Sawako Tatsumi, Zhusheng Liu, Ying Guo, Muneteru Sasaki, Chihiro Tabata, Tsuneyuki Yamamoto, Kyoji Ikeda, Norio Amizuka
    HISTOLOGY AND HISTOPATHOLOGY 28 (3) 327 - 335 0213-3911 2013/03 [Refereed][Not invited]
     
    The purpose of this study was to examine histological alterations on osteoblasts from the alveolar bone of transgenic mice with targeted ablation of osteoctyes. Eighteen weeks-old transgenic mice based on the diphtheria toxin (DT) receptor-mediated cell knockout (TRECK) system were used in these experiments. Mice were injected intraperitoneally with 50 mu g/kg of DT in PBS, or only PBS as control. Two weeks after injections, mice were subjected to transcardiac perfusion with 4% paraformaldehyde in 0.1M phosphate buffer (pH 7.4), and the available alveolar bone was removed for histochemical analyses. Approximately 75% of osteocytes from alveolar bones became apoptotic after DT administration, and most osteocytic lacunae became empty. Osteoblastic numbers and alkaline phosphatase (ALP) activity were markedly reduced at the endosteum of alveolar bone after DT administration compared with the control. Osteoblastic ALP activity in the periodontal ligament region, on the other hand, hardly showed any differences between the two groups even though numbers were reduced in the experiment group. Silver impregnation showed a difference in the distribution of bone canaliculi between the portions near the endosteum and the periodontal ligament: the former appeared regularly arranged in contrast to the latter's irregular distribution. Under transmission electron microscopy (TEM), the osteoblasts in the periodontal ligament showed direct contact with the Sharpey's fibers. Thus, osteoblastic activity was affected by osteocyte ablation in general, but osteoblasts in contact with the periodontal ligament were less affected than endosteal osteoblasts.
  • [Bone histology after intermittent PTH treatment - animal models -].
    Sasaki M, Hasegawa T, Hongo H, Yamamoto T, Amizuka N
    Clinical calcium 23 (3) 347 - 353 0917-5857 2013/03 [Refereed][Not invited]
  • [Encouragement for developing research mind of dental students].
    Amizuka N, Hongo H, Miyamoto Y, Hasegawa T, Sasaki M, Yamada T, Yamamoto T
    Kaibogaku zasshi. Journal of anatomy 88 (1-2) 25 - 28 0022-7722 2013/03 [Refereed][Not invited]
  • Rikako Hiramatsu, Yoshifumi Ubara, Noriko Hayami, Masayuki Yamanouchi, Eiko Hasegawa, Keiichi Sumida, Tatsuya Suwabe, Junichi Hoshino, Naoki Sawa, Norio Amizuka, Kenmei Takaichi
    BONE 52 (2) 684 - 688 8756-3282 2013/02 [Refereed][Not invited]
     
    A 55-year-old woman who had been on hemodialysis for 5 years was admitted for evaluation of a hard mass in the right hip region. Her serum calcium (Ca)-phosphate (P) product was elevated. Radiographs showed periarticular calcified masses in the soft tissues around both hips and shoulders, which were characteristic of uremic tumoral calcinosis (UTC). Biopsy specimens were obtained from both right hip mass and the right iliac crest. Histological examination of hip mass revealed bone-like tissue with marrow, as well as calcified material. The bone-like tissue was categorized as heterotopic ossification (HO), because it had been formed inside soft tissue where bone-like tissue does not normally exist. Histological analysis of HO showed the formation of cancellous bone-like tissue. Woven mineralized bone-like tissue was predominant over lamellar bone-like tissue. High bone turnover combined with osteitis fibrosa-like lesion was diagnosed because of an increase of the fibrous volume, as well as clear double tetracycline labeling. Near a site of HO, numerous ALP- and Runx2-positive cuboidal osteoblast-like cells and TRAP- and cathepsin K-positive multinucleated osteoclast-like cells were noted. Histomorphometric analysis of the right iliac crest revealed osteitis fibrosa. This is the first report of HO in a patient with UTC. After parathyroidectomy, the patient's Ca-P imbalance was corrected and UTC subsided. Although the mechanism by which new bone-like tissue formation arises in the soft tissues has not yet been determined, secondary hyperparathyroidism may have contributed to the progression of UTC in this patient. (C) 2012 Elsevier Inc. All rights reserved.
  • Ying Guo, Minqi Li, Liu Zhusheng, Tamaki Yamada, Muneteru Sasaki, Tomoka Hasegawa, Hiromi Hongo, Chihiro Tabata, Reiko Suzuki, Kimimitsu Oda, Tsuneyuki Yamamoto, Masamitsu Kawanami, Norio Amizuka
    JOURNAL OF ELECTRON MICROSCOPY 61 (5) 309 - 320 0022-0744 2012/10 [Refereed][Not invited]
     
    This study aimed at elucidating whether estrogen deficiency would affect the synthesis of an osteocyte-derived factor, sclerostin, in the mesial region of alveolar bone. Eight 9-week-old Wistar female rats were ovariectomized (OVX) and eight other rats were Sham-operated (Sham). After 4 weeks, the interradicular septa of mandibular first molar were embedded in paraffin and then histochemically examined. Sclerostin-positive osteocytes were located in the superficial layer of the mesial region of Sham bones, whereas the OVX mesial region showed less sclerostin-reactive osteocytes. There was no significant difference in the distribution of estrogen receptor alpha and terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridinetriphosphate nick end-labeling -positive cells in the groups studied. The Sham mesial region featured many osteoclasts, and OVX specimens showed numerous osteoclasts in association with intense immunolabeling of the receptor activator of the nuclear factor kB ligand. Contrary to the observations in Sham specimens, a complex meshwork of cement lines was seen in the OVX mesial region, accompanied by an irregularly distributed osteocytic lacunar-canalicular system. In conclusion, estrogen deficiency appears to inhibit osteocyte-derived sclerostin synthesis in the mesial region of the interradicular septum, in a process that seems to be mediated by accelerated bone remodeling rather than by direct effects on osteocytes.
  • Tsuneyuki Yamamoto, Tomoka Hasegawa, Muneteru Sasaki, Hiromi Hongo, Chihiro Tabata, Zhusheng Liu, Minqi Li, Norio Amizuka
    JOURNAL OF ELECTRON MICROSCOPY 61 (2) 113 - 121 0022-0744 2012/04 [Refereed][Not invited]
     
    This study was designed to elucidate details of the structure and formation process of the alternate lamellar pattern known to exist in lamellar bone. For this purpose, we examined basic internal lamellae in femurs of young rats by transmission and scanning electron microscopy, the latter employing two different macerations with NaOH at concentrations of 10 and 24%. Observations after the maceration with 10% NaOH showed that the regular and periodic rotation of collagen fibrils caused an alternation between two types of lamellae: one consisting of transversely and nearly transversely cut fibrils, and the other consisting of longitudinally and nearly longitudinally cut fibrils. This finding confirms the consistency of the twisted plywood model. The maceration method with 24% NaOH removed bone components other than cells, thus allowing for three-dimensional observations of osteoblast morphology. Osteoblasts extended finger-like processes paralleling the inner bone surface, and grouped in such a way that, within a group, the processes arranged in a similar direction. Transmission electron microscopy showed that newly deposited fibrils were arranged alongside these processes. For the formation of the alternating pattern, our findings suggest that: (1) osteoblasts control the collagen fibril arrangement through their finger-like process position; (2) osteoblasts behave similarly within a group; (3) osteoblasts move their processes synchronously and periodically to promote alternating different fibril orientation; and (4) this dynamic sequential deposition of fibrils results in the alternate lamellar (or twisted plywood) pattern.
  • [Biological function of bone cells on the PTH-driven anabolic effect].
    Hasegawa T, Hongo H, Sasaki M, Yamada T, Amizuka N
    Clinical calcium 22 (3) 373 - 379 0917-5857 2012/03 [Refereed][Not invited]
  • Histology of epiphyseal cartilage calcification and endochondral ossification.
    Amizuka N, Hasegawa T, Oda K, Luiz de Freitas PH, Hoshi K, Li M, Ozawa H
    Frontiers in bioscience (Elite edition) 4 2085 - 2100 1945-0494 2012/01 [Refereed][Not invited]
  • Assessment of histological alterations in cartilage and extracellular matrix driven by collagen-induced arthritis in Macaca fascicularis
    Norio Amizuka, Hiromi Hongo, Muneteru Sasaki, Tomoka Hasegawa, Paulo Henrique Luiz de Freitas, Hiroshi Mori, Minqi Li
    ARTHRITIS RESEARCH & THERAPY 14 1478-6354 2012 [Refereed][Not invited]
  • [Frontiers in vitamin D; basic research and clinical application. A review on histological findings in bones administered with eldecalcitol].
    Hongo H, Sasaki M, Hasegawa T, Amizuka N
    Clinical calcium 21 (11) 63 - 70 0917-5857 2011/11 [Refereed][Not invited]
  • Paulo Henrique Luiz de Freitas, Tomoka Hasegawa, Satoshi Takeda, Muneteru Sasaki, Chihiro Tabata, Kimimitsu Oda, Minqi Li, Hitoshi Saito, Norio Amizuka
    BONE 49 (3) 335 - 342 8756-3282 2011/09 [Refereed][Not invited]
     
    To elucidate the histological events that follow administration of eldecalcitol, a second-generation of vitamin D analog currently awaiting approval as a drug for treatment of osteoporosis, we employed the ovariectomy (OVX) rat model. OVX rats received vehicle or 30 ng/kg of eldecalcitol, and sham-operated animals received vehicle only. Rats were sacrificed after 12 weeks and had their femora and tibiae removed and processed for histochemical and histomorphometrical analyses. When compared with OVX group, osteoclastic number and bone resorption parameters were significantly reduced in eldecalcitol-treated rats, accompanied by decreased bone formation parameters. The preosteoblastic layer, with which osteoclastic precursors interact for mutual differentiation, was poorly developed in the eldecalcitol group, indicating less cell-to-cell contact between preosteoblasts and osteoclast precursors. Interestingly, eldecalcitol did promote a type of focal bone formation that is independent of bone resorption, a process known as bone minimodeling. While the number of ED-1-positive macrophages was higher in the bone marrow of treated rats, though osteoclastic number was deceased. Taken together, our findings suggest that eldecalcitol stimulates preosteoblastic differentiation rather than their proliferation, which in turn may prevent or diminish cell-to-cell contact between preosteoblasts and osteoclastic precursors, and therefore, lead to lower osteoclast numbers and decreased bone resorption. (C) 2011 Elsevier Inc. All rights reserved.
  • Tomoka Hasegawa, Minqi Li, Kuniko Hara, Muneteru Sasaki, Chihiro Tabata, Paulo Henrique Luiz de Freitas, Hiromi Hongo, Reiko Suzuki, Masatoshi Kobayashi, Kiichiro Inoue, Tsuneyuki Yamamoto, Noboru Oohata, Kimimitsu Oda, Yasuhiro Akiyama, Norio Amizuka
    BIOMEDICAL RESEARCH-TOKYO 32 (4) 259 - 269 0388-6107 2011/08 [Refereed][Not invited]
     
    Osteogenic disorder shionogi (ODS) rats carry a hereditary defect in ascorbic acid synthesis, mimicking human scurvy when fed with an ascorbic acid-deficient (aa-def) diet. As aa-def ODS rats were shown to feature disordered bone formation, we have examined the bone mineralization in this rat model. A fibrous tissue layer surrounding the trabeculae of tibial metaphyses was found in aa-def ODS rats, and this layer showed intense alkaline phosphatase activity and proliferating cell nuclear antigen-immunopositivity. Many osteoblasts detached from the bone surfaces and were characterized by round-shaped rough endoplasmic reticulum (rER), suggesting accumulation of malformed collagen inside the rER. Accordingly, fine, fragile fibrillar collagenous structures without evident striation were found in aa-def bones, which may result from misassembling of the triple helices of collagenous a-chains. Despite a marked reduction in bone formation, ascorbic acid deprivation seemed to have no effect on mineralization: while reduced in number, normal matrix vesicles and mineralized nodules could be seen in aa-def bones. Fine needle-like mineral crystals extended from these mineralized nodules, and were apparently bound to collagenous fibrillar structures. In summary, collagen mineralization seems unaffected by ascorbic acid deficiency in spite of the fine, fragile collagenous fibrils identified in the bones of our animal model.
  • Maiko Haga, Kayoko Nozawa-Inoue, Minqi Li, Kimimitsu Oda, Sumio Yoshie, Norio Amizuka, Takeyasu Maeda
    ANATOMICAL RECORD-ADVANCES IN INTEGRATIVE ANATOMY AND EVOLUTIONARY BIOLOGY 294 (6) 1074 - 1082 1932-8486 2011/06 [Refereed][Not invited]
     
    Osseointegration is the most preferable interface of dental implants and newly formed bone. However, the cavity preparation for dental implants often gives rise to empty lacunae or pyknotic osteocytes in bone surrounding the dental implant. This study aimed to examine the chronological alternation of osteocytes in the bone surrounding the titanium implants using a rat model. The distribution of the osteocytic lacunar canalicular system (OLCS) in bone around the titanium implants was examined by silver impregnation according to Bodian's staining. We also performed double staining for alkaline phosphatase (ALP) and tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP), as well as immunohistochemistry for fibroblast growth factor (FGF) 23-a regulator for the serum concentration of phosphorus-and sclerostin, which has been shown to inhibit osteoblastic activities. Newly formed bone and the injured bone at the early stage exhibited an irregularly distributed OLCS and a few osteocytes positive for sclerostin or FGF23, therefore indicating immature bone. Osteocytes in the surrounding bone from Day 20 to Month 2 came to reveal an intense immunoreactivity for sclerostin. Later on, the physiological bone remodeling gradually replaced such immature bone into a compact profile bearing a regularly arranged OLCS. As the bone was remodeled, FGF23 immunoreactivity became more intense, but sclerostin became less so in the well-arranged OLCS. In summary, it seems likely that OLCS in the bone surrounding the dental implants is damaged by cavity formation, but later gradually recovers as bone remodeling takes place, ultimately inducing mature bone. Anat Rec, 294:1074-1082, 2011. (C) 2011 Wiley-Liss, Inc.
  • ELDECALCITOL SUPRESSES BONE RESORPTION INDEPENDENT OF ITS CALCEMIC EFFECT BY DIMINISHING OSTEOCLAST ON BONE SURFACE
    Hitoshi Saito, Satoshi Takeda, Fumiaki Takahashi, Paulo Luiz de Freitas, Norio Amizuka
    OSTEOPOROSIS INTERNATIONAL 22 62 - 63 0937-941X 2011/03 [Refereed][Not invited]
  • ELDECALCITOL SUPRESSES BONE RESORPTION INDEPENDENT OF ITS CALCEMIC EFFECT BY DIMINISHING OSTEOCLAST ON BONE SURFACE
    Hitoshi Saito, Satoshi Takeda, Fumiaki Takahashi, Paulo Luiz de Freitas, Norio Amizuka
    OSTEOPOROSIS INTERNATIONAL 22 206 - 207 0937-941X 2011/03 [Refereed][Not invited]
  • [Animal models for bone and joint disease. Bone disease of osteoprotegerin deficient mouse].
    Hasegawa T, Sasaki M, Tabata C, Masuki H, Li M, Amizuka N
    Clinical calcium 21 (2) 190 - 196 0917-5857 2011/02 [Refereed][Not invited]
  • Yumi Watanabe, Kosei Takeuchi, Susumu Higa Onaga, Michiko Sato, Mika Tsujita, Manabu Abe, Rie Natsume, Minqi Li, Tatsuya Furuichi, Mika Saeki, Tomomi Izumikawa, Ayumi Hasegawa, Minesuke Yokoyama, Shiro Ikegawa, Kenji Sakimura, Norio Amizuka, Hiroshi Kitagawa, Michihiro Igarashi
    BIOCHEMICAL JOURNAL 432 (1) 47 - 55 0264-6021 2010/11 [Refereed][Not invited]
     
    CS (chondroitin sulfate) is a glycosaminoglycan species that is widely distributed in the extracellular matrix. To understand the physiological roles of enzymes involved in CS synthesis, we produced CSGalNAcT1 (CS N-acetylgalactosaminyltransferase 1)-null mice. CS production was reduced by approximately half in CSGalNAcT1-null mice, and the amount of short-chain CS was also reduced. Moreover, the cartilage of the null mice was significantly smaller than that of wild-type mice. Additionally, type-II collagen fibres in developing cartilage were abnormally aggregated and disarranged in the homozygous mutant mice. These results suggest that CSGalNAcT1 is required for normal CS production in developing cartilage.
  • Kaya Narimatsu, Minqi Li, Paulo Henrique Luiz de Freitas, Sara Sultana, Sobhan Ubaidus, Taku Kojima, Liu Zhucheng, Guo Ying, Reiko Suzuki, Tsuneyuki Yamamoto, Kimimitsu Oda, Norio Amizuka
    JOURNAL OF ELECTRON MICROSCOPY 59 (5) 427 - 436 0022-0744 2010/10 [Refereed][Not invited]
     
    Preosteoblasts are currently defined as the precursors of mature osteoblasts. These cells are morphologically diverse and may represent a continuum during osteoblast differentiation. We have attempted to categorize the different preosteoblastic phenotypes in vivo by examining bone cells expressing the runt-related transcription factor 2, alkaline phosphatase and BrdU incorporation - histological traits of a preosteoblast - under transmission electron microscopy (TEM). TEM observations demonstrated, at least, in part two preosteoblastic subtypes: (i) a cell rich in cisterns of rough endoplasmic reticulum (rER) with vesicles and vacuoles and (ii) a subtype featuring extended cytoplasmic processes that connect with distant cells, with a small amount of scattered cisterns of rER and with many vesicles and vacuoles. ER-rich cells, whose cellular machinery is similar to that of an osteoblast, were often seen adjacent to mature osteoblasts, and therefore, may be ready for terminal differentiation. In contrast, ER-poor and vesicle-rich cells extended their cytoplasmic processes to mature osteoblasts and, frequently, to bone-resorbing osteoclasts. The abundant vesicles and vacuoles identified in this cell type indicate that this cell is involved in vesicular transport rather than matrix synthesis activity. In summary, our study verified the morphological diversity and the ultrastructural properties of osteoblastic cells in vivo.
  • Hideo Masuki, Minqi Li, Tomoka Hasegawa, Reiko Suzuki, Guo Ying, Liu Zhusheng, Kimimitsu Oda, Tsuneyuki Yamamoto, Masamitsu Kawanami, Norio Amizuka
    BIOMEDICAL RESEARCH-TOKYO 31 (5) 307 - 318 0388-6107 2010/10 [Refereed][Not invited]
     
    In order to define the osteocytic function in accelerated bone remodeling, we examined the distribution of the osteocytic lacunar-canalicular system (OLCS) and osteocyte-secreting molecules dentin matrix protein (DMP) 1 and sclerostin-in the epiphyses and cortical bones of osteoprotegerin deficient (OPG(-/-)) mice. Silver impregnation visualized a well-arranged OLCS in the wild-type epiphyses and cortical bone, whereas OPG(-/-) mice had an irregular OLCS in the epiphyses, but well-arranged canaliculi in the cortical bone. DMP1-positive osteocytes were evenly distributed throughout the wild-type epiphyses and cortical bone, as well as the OPG(-/-) cortical bone. However, OPG(-/-) epiphyses revealed weak DMP1-immunoreactivity. Thus, osteocytes appear to synthesize more DMP1 as the OLCS becomes regular. In contrast, sclerostin-immunoreactivity was significantly diminished in the OPG(-/-) epiphyses and cortical bone. In OPG(-/-) epiphyses and cortical bone, triple staining demonstrated few sclerostin-positive osteocytes in the periphery of a thick cell layer of alkaline phosphatase-positive osteoblasts and many tartrate resistant acid phosphatase-positive osteoclasts. Summarizing, the regular distribution of OLCS may affect DMP1 synthesis, while the cellular activities of osteoclasts and osteoblasts rather than the regularity of OLCS may ultimately influence sclerostin synthesis.
  • Hideyuki Tanabe, Issei Takayama, Takashi Nishiyama, Masashi Shimazaki, Isao Kii, Minqi Li, Norio Amizuka, Ken-ichi Katsube, Akira Kudo
    PLOS ONE 5 (8) e12234  1932-6203 2010/08 [Refereed][Not invited]
     
    Background: Matricellular proteins, including periostin, modulate cell-matrix interactions and cell functions by acting outside of cells. Methods and Findings: In this study, however, we reported that periostin physically associates with the Notch1 precursor at its EGF repeats in the inside of cells. Moreover, by using the periodontal ligament of molar from periostin-deficient adult mice (Pn(-/-) molar PDL), which is a constitutively mechanically stressed tissue, we found that periostin maintained the site-1 cleaved 120-kDa transmembrane domain of Notch1 (N1 (TM)) level without regulating Notch1 mRNA expression. N1 (TM) maintenance in vitro was also observed under such a stress condition as heat and H(2)O(2) treatment in periostin overexpressed cells. Furthermore, we found that the expression of a downstream effector of Notch signaling, Bcl-xL was decreased in the Pn(-)(-/) molar PDL, and in the molar movement, cell death was enhanced in the pressure side of Pn(-/-) molar PDL. Conclusion: These results suggest the possibility that periostin inhibits cell death through up-regulation of Bcl-xL expression by maintaining the Notch1 protein level under the stress condition, which is caused by its physical association with the Notch1 precursor.
  • Tsuneyuki Yamamoto, Minqi Li, Zhucheng Liu, Ying Guo, Tomoka Hasegawa, Hideo Masuki, Reiko Suzuki, Norio Amizuka
    ODONTOLOGY 98 (2) 102 - 109 1618-1247 2010/07 [Refereed][Not invited]
     
    Cementum is mineralized tissue with collagen fibrils as its major organic component, and it can be roughly classified into acellular and cellular cementum. The latter generally consists of a stack of cellular intrinsic fiber cementum layers, in which intensely and weakly stained lamellae (each about 2.5 mu m thick) alternate in light microscopic observations. It has been suggested that the alternate lamellar pattern results from periodic changes of the intrinsic fiber arrangement, but owing to the difficulty of observing the fibril arrangement three dimensionally, details were not understood until recently. The NaOH-maceration method has been developed to overcome this difficulty. For the past two decades, we have studied the structure and development of cementum by scanning electron microscopy using NaOH-maceration, as well as by light and transmission electron microscopy, and have accumulated a significant amount of data with regard to the structure and formation of cementum. In light of these data, we have arrived at the following conclusions: (1) The alternate lamellar pattern conforms to the twisted plywood model, in which collagen fibrils rotate regularly in the same direction to form two alternating types of lamellae; one type consists of transversely and almost transversely cut fibrils and the other consists of longitudinally and almost longitudinally cut fibrils. (2) The development of the intrinsic fiber arrangement may be controlled by cementoblasts; the cementoblasts move finger-like processes synchronously and periodically to create alternate changes in the intrinsic fiber arrangement, and this dynamic sequence results in the alternate lamellar pattern.
  • Minqi Li, Yukie Seki, Paulo H. L. Freitas, Masaki Nagata, Taku Kojima, Sara Sultana, Sobhan Ubaidus, Takeyasu Maeda, Junko Shimomura, Janet E. Henderson, Masato Tamura, Kimimitsu Oda, Zhusheng Liu, Ying Guo, Reiko Suzuki, Tsuneyuki Yamamoto, Ritsuo Takagi, Norio Amizuka
    JOURNAL OF ELECTRON MICROSCOPY 59 (3) 227 - 236 0022-0744 2010/06 [Refereed][Not invited]
     
    The signaling axis comprising the parathyroid hormone (PTH)-related peptide (PTHrP), the PTH/PTHrP receptor and the fibroblast growth factor receptor 3 (FGFR3) plays a central role in chondrocyte proliferation. The Indian hedgehog (IHH) gene is normally expressed in early hypertrophic chondrocytes, and its negative feedback loop was shown to regulate PTH/PTHrP receptor signaling. In this study, we examined the regulation of PTH/PTHrP receptor gene expression in a FGFR3-transfected chondrocytic cell line, CFK2. Expression of IHH could not be verified on these cells, with consequent absence of hypertrophic differentiation. Also, expression of the PTH/PTHrP receptor (75% reduction of total mRNA) and the PTHrP (50% reduction) genes was reduced in CFK2 cells transfected with FGFR3 cDNA. Interestingly, we verified significant reduction in cell growth and increased apoptosis in the transfected cells. STAT1 was detected in the nuclei of the CFK2 cells transfected with FGFR3 cDNA, indicating predominance of the JAK/STAT signaling pathway. The reduction in PTH/PTHrP receptor gene in CFK2 cells overexpressing FGFR3 was partially blocked by treatment with an inhibitor of JAK3 (WHI-P131), but not with an inhibitor of MAPK (SB203580) or JAK2 (AG490). Altogether, these findings suggest that FGFR3 down-regulates PTH/PTHrP receptor gene expression via the JAK/STAT signaling in chondrocytic cells.
  • Histological assessment for PTH/PTHrP signaling on osteoblasts
    Norio Amizuka, Minqi Li, Paulo H. L. D. Freitas, Zhucheng Liu, Ying Guo, Reiko Suzuki, Tsuneyuki Yamamoto
    ENDOCRINE JOURNAL 57 S244 - S245 0918-8959 2010/03 [Refereed][Not invited]
  • Isao Kii, Takashi Nishiyama, Minqi Li, Ken-ichi Matsumoto, Mitsuru Saito, Norio Amizuka, Akira Kudo
    JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY 285 (3) 2028 - 2039 0021-9258 2010/01 [Refereed][Not invited]
     
    Extracellular matrix (ECM) underlies a complicated multicellular architecture that is subjected to significant forces from mechanical environment. Although various components of the ECM have been enumerated, mechanisms that evolve the sophisticated ECM architecture remain to be addressed. Here we show that periostin, a matricellular protein, promotes incorporation of tenascin-C into the ECM and organizes a meshwork architecture of the ECM. We found that both periostin null mice and tenascin-C null mice exhibited a similar phenotype, confined tibial periostitis, which possibly corresponds to medial tibial stress syndrome in human sports injuries. Periostin possessed adjacent domains that bind to tenascin-C and the other ECM protein: fibronectin and type I collagen, respectively. These adjacent domains functioned as a bridge between tenascin-C and the ECM, which increased deposition of tenascin-C on the ECM. The deposition of hexabrachions of tenascin-C may stabilize bifurcations of the ECM fibrils, which is integrated into the extracellular meshwork architecture. This study suggests a role for periostin in adaptation of the ECM architecture in the mechanical environment.
  • Sobhan Ubaidus, Minqi Li, Sara Sultana, Paulo Henrique Luiz de Freitas, Kimimitsu Oda, Takeyasu Maeda, Ritsuo Takagi, Norio Amizuka
    JOURNAL OF ELECTRON MICROSCOPY 58 (6) 381 - 392 0022-0744 2009/12 [Refereed][Not invited]
     
    This study aimed to evaluate whether the immunolocalization of fibroblast growth factor (FGF) 23 and dentin matrix protein 1 (DMP1) is associated with the spatial regularity of the osteocyte lacunar canalicular system(s) (OLCS). Femora of 12-weeks-old male ICR mice were fixed with 4% paraformaldehyde, decalcified with a 10% EDTA solution and then embedded in paraffin. We have devised a triple staining procedure that combines silver impregnation, alkaline phosphatase (ALPase) immunohistochemistry and tartrate-resistant acid phosphatase (TRAPase) enzyme histochemistry on a single paraffin section. This procedure permitted the visualization of ALPase-positive plump osteoblasts and several TRAPase-positive osteoclasts on those bone matrices featuring irregularly arranged OLCS, and of ALPase-positive bone lining cells on the bone matrix displaying the well-arranged OLCS. As observations proceeded from the metaphysis toward the diaphysis, the endosteal cortical bone displayed narrower bands of calcein labeling, accompanied by increased regularity of the OLCS. This implies that the speed of bone deposition during bone remodeling would affect the regularity of the OLCS. While DMP1 was evenly localized in all regions of the cortical bones, FGF23 was more abundantly localized in osteocytes of cortical bones with regularly arranged OLCS. In cortical bones, the endosteal area featuring regular OLCS exhibited more intense FGF23 immunoreaction when compared to the periosteal region, which tended to display irregular OLCS. In summary, FGF23 appears to be synthesized principally by osteocytes in the regularly distributed OLCS that have been established after bone remodeling.
  • [Biological effects of vitamin K2 on bone quality].
    Amizuka N, Li M, Guo Y, Liu Z, Suzuki R, Yamamoto T
    Clinical calcium 19 (12) 1788 - 1796 0917-5857 2009/12 [Refereed][Not invited]
  • Paulo Henrique Luiz de Freitas, Minqi Li, Tadashi Ninomiya, Midori Nakamura, Sobhan Ubaidus, Kimimitsu Oda, Nobuyuki Udagawa, Takeyasu Maeda, Ritsuo Takagi, Norio Amizuka
    JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH 24 (9) 1586 - 1597 0884-0431 2009/09 [Refereed][Not invited]
     
    This study aimed to investigate the behavior and ultrastructure of osteoblastic cells after intermittent PTH treatment and attempted to elucidate the role of osteoclasts on the mediation of PTH-driven bone anabolism. After administering PTH intermittently to wildtype and c-fos(-/-) mice, immunohistochemical, histomorphometrical, ultrastructural, and statistical examinations were performed. Structural and kinetic parameters related to bone formation were increased in PTH-treated wildtype mice, whereas in the osteoclast-deficient c-fos(-/-) mice, there were no significant differences between groups. In wildtype and knockout mice, PTH administration led to significant increases in the number of cells double-positive for alkaline phosphatase and BrdU, suggesting active pre-osteoblastic proliferation. Ultrastructural examinations showed two major pre-osteoblastic subtypes: one rich in endoplasmic reticulum (ER), the hypER cell, and other with fewer and dispersed ER, the misER cell. The latter constituted the most abundant preosteoblastic phenotype after PTH administration in the wildtype mice. In c-fos(-/-) mice, misER cells were present on the bone surfaces but did not seem to be actively producing bone matrix. Several misER cells were shown to be positive for EphB4 and were eventually seen rather close to osteoclasts in the PTH-administered wildtype mice. We concluded that the absence of osteoclasts in c-fos(-/-) mice might hinder PTH-driven bone anabolism and that osteoclastic presence may be necessary for full osteoblastic differentiation and enhanced bone formation seen after intermittent PTH administration. J Bone Miner Res 2009;24:1586-1597. Published online on April 27, 2009; doi: 10.1359/JBMR.090413
  • Hiroko Segawa, Akemi Onitsuka, Junya Furutani, Ichiro Kaneko, Fumito Aranami, Natsuki Matsumoto, Yuka Tomoe, Masashi Kuwahata, Mikiko Ito, Mitsuru Matsumoto, Minqi Li, Norio Amizuka, Ken-ichi Miyamoto
    AMERICAN JOURNAL OF PHYSIOLOGY-RENAL PHYSIOLOGY 297 (3) F671 - F678 1931-857X 2009/09 [Refereed][Not invited]
     
    Segawa H, Onitsuka A, Furutani J, Kaneko I, Aranami F, Matsumoto N, Tomoe Y, Kuwahata M, Ito M, Matsumoto M, Li M, Amizuka N, Miyamoto K. Npt2a and Npt2c in mice play distinct and synergistic roles in inorganic phosphate metabolism and skeletal development. Am J Physiol Renal Physiol 297: F671-F678,2009. First published July 1, 2009; doi:10.1152/ajprenal.00156.2009.-Hereditary hypophosphatemic rickets with hypercalciuria (HHRH) is a rare autosomal recessively inherited disorder, characterized by hypophosphatemia, short stature, rickets and/or osteomalacia, and secondary absorptive hypercalciuria. HHRH is caused by a defect in the sodium-dependent phosphate transporter (NaP(i)-IIc/Npt2c/NPT2c), which was thought to have only a minor role in renal phosphate (P(i)) reabsorption in adult mice. In fact, mice that are null for Npt2c (Npt2c(-/-)) show no evidence for renal phosphate wasting when maintained on a diet with a normal phosphate content. To obtain insights and the relative importance of Npt2a and Npt2c, we now studied Npt2a(+/+) Npt2c(+/+), Npt2a(+/-) Npt2c(-/-), and Npt2a(-/-) Npt2c(-/-) double-knockout (DKO). DKO mice exhibited severe hypophosphatemia, hypercalciuria, and rickets. These findings are different from those in Npt2a KO mice that show only a mild phosphate and bone phenotype that improve over time and from the findings in Npt2c KO mice that show no apparent abnormality in the regulation of phosphate homeostasis. Because of the nonreddundant roles of Npt2a and Npt2c, DKO animals showed a more pronounced reduction in P(i) transport activity in the brush-border membrane of renal tubular cells than that in the mice with the single-gene ablations. A high-P(i) diet after weaning rescued plasma phosphate levels and the bone phenotype in DKO mice. Our findings thus showed in mice that Npt2a and Npt2c have independent roles in the regulation of plasma P(i) and bone mineralization.
  • Paulo Henrique Luiz de Freitas, Minqi Li, Tadashi Ninomiya, Midori Nakamura, Sobhan Ubaidus, Kimimitsu Oda, Nobuyuki Udagawa, Takeyasu Maeda, Ritsuo Takagi, Norio Amizuka
    JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH 24 (9) 1586 - 1597 0884-0431 2009/09 [Refereed][Not invited]
     
    This study aimed to investigate the behavior and ultrastructure of osteoblastic cells after intermittent PTH treatment and attempted to elucidate the role of osteoclasts on the mediation of PTH-driven bone anabolism. After administering PTH intermittently to wildtype and c-fos(-/-) mice, immunohistochemical, histomorphometrical, ultrastructural, and statistical examinations were performed. Structural and kinetic parameters related to bone formation were increased in PTH-treated wildtype mice, whereas in the osteoclast-deficient c-fos(-/-) mice, there were no significant differences between groups. In wildtype and knockout mice, PTH administration led to significant increases in the number of cells double-positive for alkaline phosphatase and BrdU, suggesting active pre-osteoblastic proliferation. Ultrastructural examinations showed two major pre-osteoblastic subtypes: one rich in endoplasmic reticulum (ER), the hypER cell, and other with fewer and dispersed ER, the misER cell. The latter constituted the most abundant preosteoblastic phenotype after PTH administration in the wildtype mice. In c-fos(-/-) mice, misER cells were present on the bone surfaces but did not seem to be actively producing bone matrix. Several misER cells were shown to be positive for EphB4 and were eventually seen rather close to osteoclasts in the PTH-administered wildtype mice. We concluded that the absence of osteoclasts in c-fos(-/-) mice might hinder PTH-driven bone anabolism and that osteoclastic presence may be necessary for full osteoblastic differentiation and enhanced bone formation seen after intermittent PTH administration. J Bone Miner Res 2009;24:1586-1597. Published online on April 27, 2009; doi: 10.1359/JBMR.090413
  • [Hormones and osteoporosis update. Histological aspects on the action of parathyroid hormone (PTH) and PTH-related peptide (PTHrP) on bone and cartilage].
    Amizuka N, Li M, Tamura M, Oda K
    Clinical calcium 19 (7) 935 - 943 0917-5857 2009/07 [Refereed][Not invited]
  • [Ultrastructure and biological function of osteocytes].
    Amizuka N, Ubaidus S, de Freitas PH, Sultana S, Li M
    Nihon rinsho. Japanese journal of clinical medicine 67 (5) 868 - 871 0047-1852 2009/05 [Refereed][Not invited]
  • Norio Amizuka, Minqi Li, Kuniko Hara, Masatoshi Kobayashi, Paulo H. L. de Freitas, Sobhan Ubaidus, Kimimitsu Oda, Yasuhiro Akiyama
    JOURNAL OF ELECTRON MICROSCOPY 58 (2) 55 - 65 0022-0744 2009/04 [Refereed][Not invited]
     
    This study aimed to elucidate the ultrastructural role of Gla proteins in bone mineralization by means of a warfarin-administration model. Thirty-six 4-week-old male F344 rats received warfarin (warfarin group) or distilled water (control group), and were fixed after 4, 8 and 12 weeks with an aldehyde solution. Tibiae and femora were employed for histochemical analyses of alkaline phosphatase, osteocalcin and tartrate-resistant acid phosphatase, and for bone histomorphometry and electron microscopy. After 4, 8 and 12 weeks, there were no marked histochemical and histomorphometrical differences between control and warfarin groups. However, osteocalcin immunoreactivity was markedly reduced in the warfarin-administered bone. Mineralized nodules and globular assembly of crystalline particles were seen in the control osteoid. Alternatively, warfarin administration resulted in crystalline particles being dispersed throughout the osteoid without forming mineralized nodules. Immunoelectron microscopy unveiled lower osteocalcin content in the warfarin-administered osteoid, which featured scattered crystalline particles, whereas osteocalcin was abundant on the normally mineralized nodules in the control osteoid. In summary, Gla proteins appear to play a pivotal role in the assembly of mineralized nodules.
  • Hiroko Segawa, Akemi Onitsuka, Masashi Kuwahata, Etsuyo Hanabusa, Junya Furutani, Ichiro Kaneko, Yuka Tomoe, Fumito Aranami, Natsuki Matsumoto, Mikiko Ito, Mitsuru Matsumoto, Minqi Li, Norio Amizuka, Ken-ichi Miyamoto
    JOURNAL OF THE AMERICAN SOCIETY OF NEPHROLOGY 20 (1) 104 - 113 1046-6673 2009/01 [Refereed][Not invited]
     
    Primary renal inorganic phosphate (Pi) wasting leads to hypophosphatemia, which is associated with skeletal mineralization defects. In humans, mutations in the gene encoding the type IIc sodium-dependent phosphate transporter lead to hereditary hypophophatemic rickets with hypercalciuria, but whether Pi wasting directly causes the bone disorder is unknown. Here, we generated Npt2c-null mice to define the contribution of Npt2c to Pi homeostasis and to bone abnormalities. Homozygous mutants (Npt2c(-/-)) exhibited hypercalcemia, hypercalciuria, and elevated plasma 1,25-dihydroxyvitamin D(3) levels, but they did not develop hypophosphatemia, hyperphosphaturia, renal calcification, rickets, or osteomalacia. The increased levels of 1,25-dihydroxyvitamin D, in Npt2c(-/-) mice compared with age-matched Npt2c(+/+) mice may be the result of reduced catabolism, because we observed significantly reduced expression of renal 25-hydroxyvitamin D-24-hydroxylase mRNA but no change in 1 alpha-hydroxylase mRNA levels. Enhanced intestinal absorption of calcium (Ca) contributed to the hypercalcemia and increased urinary Ca excretion. Furthermore, plasma levels of the phosphaturic protein fibroblast growth factor 23 were significantly decreased in Npt2c(-/-) mice. Sodium-dependent Pi co-transport at the renal brush border membrane, however, was not different among Npt2c(+/+), Npt2c(+/-) and Npt2c/ mice. In summary, these data suggest that Npt2c maintains normal Ca metabolism, in part by modulating the vitamin D/fibroblast growth factor 23 axis.
  • Norio Amizuka, Minqi Li, Masatoshi Kobayashi, Kuniko Hara, Shoji Akahane, Kiichi Takeuchi, Paulo H. L. Freitas, Hidehiro Ozawa, Takeyasu Maeda, Yasuhiro Akiyama
    HISTOLOGY AND HISTOPATHOLOGY 23 (11) 1353 - 1366 0213-3911 2008/11 [Refereed][Not invited]
     
    It has been reported that the Mg-insufficient bone is fragile upon mechanical loading, despite its high bone mineral density, while vitamin K2 (MK-4: menatetrenone) improved the mechanical strength of Mg-insufficient bone. Therefore, we aimed to elucidate the ultrastructural properties of bone in rats with dietary Mg insufficiency with and without MK-4 supplementation. Morphological examinations including histochemistry, transmission electron microscopy, electron probe microanalysis (EPMA) and X-ray diffraction were conducted on the femora and tibiae of 4-week-old Wistar male rats fed with 1) a normal diet (control group, 0.09% Mg), 2) a Mg-insufficient diet (low Mg group, 0.006% Mg), or 3) a Mg-insufficient diet supplemented with MK-4 (MK-4 group, 0.006% Mg, 0.03% MK-4). MK-4 appeared to inhibit the osteoclastic bone resorption that is stimulated by Mg insufficiency. EPMA analysis, however, revealed an increased concentration of Ca paralleling Mg reduction in the low Mg group. Assessment by X-ray diffraction revealed an abundance of a particular synthetic form of hydroxyapatite in the low Mg group, while control bones featured a variety of mineralized crystals. In addition, Mg-deficient bones featured larger mineral crystals, i.e., crystal overgrowth. This crystalline aberration in Mg-insufficient bones induced collagen fibrils to mineralize easily, even in the absence of mineralized nodules, which therefore led to an early collapse of the fibrils. MK-4 prevented premature collagen mineralization by normalizing the association of collagen fibrils with mineralized nodules. Thus, MK-4 appears to rescue the impaired collagen mineralization caused by Mg insufficiency by promoting a re-association of the process of collagen mineralization with mineralized nodules.
  • Junko Shimomura-Kuroki, Sobhan Ubaidus, Paulo H. L. Freitas, Minqi Li, Yoko Ishida, Naoaki Saito, Kimimitsu Oda, Shohachi Shimooka, Norio Amizuka
    BIOMEDICAL RESEARCH-TOKYO 29 (2) 61 - 69 0388-6107 2008/04 [Refereed][Not invited]
     
    A replacement of proline with leucine at position 132 of the receptor for parathyroid hormone (PTH)/parathyrold hormone-related peptide (PTHrP), i.e., PTH-R, has been discovered in human Blomstrand's lethal chondrodysplasia. As skeletal deformities in this type of chondrodysplasia appear to compromise the receptor binding to its ligands, we examined the possibility that rat PTH-R carrying P132L mutation (PTH-R-P132L) would result in abnormal intracellullar localization. Osteoblastic MC3T3-E1 cells were transfected with expression vectors containing cDNAs encoding either wild-type PTH-R or mutant PTH-R-P132L. The cells expressing the wild-type PTH-R produced a receptor protein with a molecular mass of 66.3 kDa, which localized its immunoreactivity mainly on the cell surfaces. In contrast, the PTH-R-P132L was hardly detected on the cell surfaces, but accumulated within the rough-surfaced endoplasmic reticulum.. Consistent with this localization, the cells expressing the mutant receptor failed to generate cyclic AMP in response to PTH. Furthermore, a remarkably weaker intensity of the 66.3 KDa band compared with the wild-type counterpart suggests that PTH-R-P132L is prone to degradation in the transfected cells. In summary, these findings indicate that defective transport of PTH-R-P132L to the cell surface Would be a molecular basis for Blomstrand's chondrodysplasia.
  • Hironobu Suzuki, Norio Amizuka, Kimimitsu Oda, Masaki Noda, Hayato Ohshima, Takeyasu Maeda
    JOURNAL OF ANATOMY 212 (3) 275 - 285 0021-8782 2008/03 [Refereed][Not invited]
     
    The klotho gene-deficient mouse is known as an animal model for an accelerated gerontic state, mimicking osteoporosis, skin atrophy, ectopic calcification, and gonadal dysplasia. To elucidate the influence of klotho deficiency on bone mineralization, we examined the ultrastructures of osteoblasts and bone matrices in addition to performing the elemental mapping of calcium, phosphorus, and magnesium in the bone. Under anesthesia, 4- and 5-week-old klotho-deficient mice (klotho(-/-) mice) and their wild-type littermates were perfused with either 4% paraformaldehyde for light microscopic observation or 4% paraformaldehyde and 0.0125% glutaraldehyde for electron microscopic observation. The femurs and tibiae were processed for both observations. Paraffin sections were subject to alkaline phosphatase and tartrate resistant acid phosphatase histochemistry. Semithin and ultrathin sections obtained from epoxy resin-embedded specimens were used for detecting mineralization - according to von Kossa's staining method - and for elemental mapping by electron probe micro-analyzer, respectively. Alkaline phosphatase-positive plump osteoblasts adjacent to the growth plate normally developed cell organelles in the klotho(-/-) metaphyses. This, however, contrasted with the flattened osteoblasts covering the metaphyseal trabeculae and accompanied by small tartrate resistant acid phosphatase-positive osteoclasts. The wild-type mice displayed the mineralized matrix at the zone of hypertrophic chondrocyte of the growth plate and well-mineralized metaphyseal trabeculae parallel to the longitudinal axis of the bone. Alternatively, the klotho(-/-) mice demonstrated a thick mineralized matrix from the proliferative zone of the growth plate as well as the large non-mineralized area in the metaphyseal trabeculae. Consistently, electron probe micro-analysis verified sporadic distributions of higher or lower concentrations of calcium and phosphorus in each trabecule of the klotho(-/-) mice. The distribution of magnesium, however, was almost uniform. Under transmission electron microscopy, osteoblasts on the metaphyseal trabeculae displayed less-developed cell organelles in the klotho(-/-) mice. Thus, the klotho deficiency appears not only to reduce osteoblastic population, but also to disturb bone mineralization.
  • [Assessment of bone quality. Bone quality of steroid-induced osteoporosis].
    Li M, Saito T, Amizuka N
    Clinical calcium 18 (3) 328 - 335 0917-5857 2008/03 [Refereed][Not invited]
  • Masayoshi Nakadate, Norio Amizuka, Minqi Li, Paulo H. L. Freitas, Kimimitsu Oda, Shuichi Nomura, Katsumi Uoshima, Takeyasu Maeda
    MICROSCOPY RESEARCH AND TECHNIQUE 71 (2) 93 - 104 1059-910X 2008/02 [Refereed][Not invited]
     
    This study aimed to evaluate the histological characteristics of the new bone formed at dental implant placement sites concomitantly grafted with a self-setting tricalcium phosphate cement (BIOPEX-R (R)). Standardized defects were created adjacent to the implants in maxillae of 4-week-old male Wistar rats, and were concomitantly filled with BIOPEX-R (R). Osteogenesis was examined in two sites of extreme clinical relevance: (1) the BIOPEX-R (R)-grafted surface corresponding to the previous alveolar ridge (alveolar ridge area), and (2) the interface between the grafting material and implants (interface area). At the alveolar ridge area, many tartrate-resistant acid phosphatase (TRAPase)-reactive osteoclasts had accumulated on the BIOPEX-R (R) surface and were shown to migrate toward the implant. After that, alkaline phosphatase (ALPase)-positive osteoblasts deposited new bone matrix, demonstrating their coupling with osteoclasts. On the other hand, the interface area showed several osteoclasts initially invading the narrow gap between the implant and graft material. Again, ALPase-positive osteoblasts were shown to couple with osteoclasts, having deposited new bone matrix after bone resorption. Transmission electron microscopic observations revealed direct contact between the implant and the new bone at the interface area, although few thin cells could still be identified. At both the alveolar ridge and the interface areas, newly formed bone resembled compact bone histologically. Also, concentrations of Ca, P, and Mg were much alike with those of the preexistent cortical bone. In summary, when dental implant placement and grafting with BIOPEX-R (R) are done concomitantly, the result is a new bone that resembles compact bone, an ideal achievement in reconstructive procedures for dental implantology.
  • Hironobu Suzuki, Norio Amizuka, Kimimitsu Oda, Masaki Noda, Hayato Ohshima, Takeyasu Maeda
    ANATOMICAL RECORD-ADVANCES IN INTEGRATIVE ANATOMY AND EVOLUTIONARY BIOLOGY 291 (2) 183 - 190 1932-8486 2008/02 [Refereed][Not invited]
     
    Klotho-deficient mice exhibit multiple pathological conditions resembling human aging. Our previous study showed alterations in the distribution of osteocytes and in the bone matrix synthesis in klotho-deficient mice. Although the bone and tooth share morphological features such as mineralization processes and components of the extracellular matrix, little information is available on how klotho deletion influences tooth formation. The present study aimed to elucidate the altered histology of incisors of klotho-deficient mice-comparing the findings with those from their wild-type litter-mates, by using immunohistochemistry for alkaline phosphatase (ALP), osteopontin, and dentin matrix protein-1 (DMP-1), terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridinetriphosphate nick end-labeling (TUNEL) detection for apoptosis, and electron probe microanalyzer (EPMA) analysis on calcium (Ca), phosphate (P), and magnesium (Mg). Klotho-deficient incisors exhibited disturbed layers of odontoblasts, predentin, and dentin, resulting in an obscure dentin-predentinal border at the labial region. Several odontoblast-like cells without ALP activity were embedded in the labial dentin matrix, and immunopositivity for DMP-1 and osteopontin was discernible in the matrix surrounding these embedded odontoblast-like cells. TUNEL detection demonstrated an apoptotic reaction in the embedded odontoblast-like cells and pulpal cells in the klotho-deficient mice. EPMA revealed lower concentrations of Ca, P, and Mg in the klotho-deficient dentin, except for the dentin around abnormal odontoblast-like cells. These findings suggest the involvement of the klotho gene in dentinogenesis and its mineralization.
  • Masashi Shimazaki, Kazuto Nakamura, Isao Kii, Takeshi Kashima, Norio Amizuka, Minqi Li, Mitsuru Saito, Keiichi Fukuda, Takashi Nishiyama, Satoshi Kitajima, Yumiko Saga, Masashi Fukayama, Masataka Sata, Akira Kudo
    JOURNAL OF EXPERIMENTAL MEDICINE 205 (2) 295 - 303 0022-1007 2008/02 [Refereed][Not invited]
     
    Acute myocardial infarction (AMI) is a common and lethal heart disease, and the recruitment of fibroblastic cells to the infarct region is essential for the cardiac healing process. Although stiffness of the extracellular matrix in the infarct myocardium is associated with cardiac healing, the molecular mechanism of cardiac healing is not fully understood. We show that periostin, which is a matricellular protein, is important for the cardiac healing process after AMI. The expression of periostin protein was abundant in the infarct border of human and mouse hearts with AMI. We generated periostin(-/-) mice and found no morphologically abnormal cardiomyocyte phenotypes; however, after AMI, cardiac healing was impaired in these mice, resulting in cardiac rupture as a consequence of reduced myocardial stiffness caused by a reduced number of alpha smooth muscle actin-positive cells, impaired collagen fibril formation, and decreased phosphorylation of FAK. These phenotypes were rescued by gene transfer of a spliced form of periostin. Moreover, the inhibition of FAK or alpha v-integrin, which blocked the periostin-promoted cell migration, revealed that alpha v-integrin, FAK, and Akt are involved in periostin signaling. Our novel findings show the effects of periostin on recruitment of activated fibroblasts through FAK-integrin signaling and on their collagen fibril formation specific to healing after AMI.
  • Tatsuya Ohashi, Masahiko Sunaga, Toshihide Miura, Kumiko Sasagawa, Yasuhito Sato, Wataru Ohashi, Ken Katagiri, Yoshinori Katano, Iwao Kiyokawa, Ryo Kojima, Takeshi Tomonaga, Fumio Nomura, Norio Amizuka, Kimimitsu Oda, Toyoji Sato, Katsuhiro Katayama
    HYBRIDOMA 26 (6) 401 - 406 1554-0014 2007/12 [Refereed][Not invited]
     
    Tissue-nonspecific alkaline phosphatase (TNSALP) in serum comprises liver alkaline phosphatase (liver-ALP) and bone alkaline phosphatase (bone-ALP). Liver-ALP is a marker of liver disease; thus a specific method for its measurement would be useful. Measurement of ALP by electrophoresis is difficult, although all of the isozymes can be assessed simultaneously. Total ALP can also be measured by automated analyzer, but it is difficult to determine the cause of a high ALP value because bone-, intestine-, placenta-, and tumor-ALP are measured together. Thus, anti-TNSALP monoclonal antibodies that can resolve these problems are needed. Here we have generated an anti-TNSALP monoclonal antibody, 3-29-3R. This clone has specificity to liver-ALP rather than to bone-ALP. In electrophoresis, 3-29-3R reacted with TNSALP and shifted the bands. The use of 3-29-3R enabled easy interpretation of the results. Furthermore, we tested 3-29-3R by developing an immunocapture enzymatic assay (IEA). Preliminary results of the IEA show that this method is effective for measurement of liver-ALP. Thus, the monoclonal antibody that we have established may be a useful tool for clinical diagnosis.
  • Taku Kojima, Norio Amizuka, Akiko Suzuki, Paulo Henrique, Luiz de Freitas, Michiko Yoshizawa, Akira Kudo, Chikara Saito, Takeyasu Maeda
    JOURNAL OF BONE AND MINERAL METABOLISM 25 (6) 361 - 373 0914-8779 2007/11 [Refereed][Not invited]
     
    In this study, we present a novel guided bone regeneration (GBR) concept that consists of combining Boneject, a bone substitute containing atelocollagen and bovine hydroxyapatite particles, with thermoplastic, bioresorbable plates (DeltaSystem) known to resist mechanical loading. In rat calvariae, standardized bone defects were filled with Boneject and covered with a convex DeltaSystem plate. Tissue from rats at 1, 2, 4, 8, and 12 weeks postoperation were fixed with an aldehyde solution, and the new bone formed at the defects was histologically assessed. At 1 week, alkaline phosphatase (ALP)-negative cells deriving from the bottom region of the defect could be found up to half the height of the cavity. Boneject particle surfaces in the bottom region revealed an intense osteopontin immunopositivity whereas those in the upper region did not. Tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP)-positive osteoclasts accumulated on the surfaces of osteopontin-coated particles. A newly formed, woven-like bone featuring ALP-positive osteoblasts extended from the native bone. At the second week, the newly formed woven bone had surrounded the Boneject particles. Cement lines, which indicate active bone remodeling, could be observed in the new bone despite its immaturity. Four weeks after surgery, the new bone had reached the height of the DeltaSystem plate, and just beneath it a periostin-positive fibrous layer covered the mix of new bone and Boneject particles. By then, despite having acceptable histological features, electron probe microanalyzer (EPMA) and transmission electron microscope (TEM) analyses revealed that the new bone could not be regarded as compact bone. At 8 and 12 weeks, the new bone showed compact bone-like features according to TEM and EPMA assessments. Summarizing, the combination of a bone substitute such as Boneject and a rigid, bioresorbable plate appears to be osteoconductive and to promote bone remodeling, leading to the genesis of a tissue similar to the one that is regarded as the "gold standard" for bone regeneration: the compact bone.
  • Satoshi Hirose, Minqi Li, Taku Kojima, Paulo Henrique, Luiz de Freitas, Sobhan Ubaidus, Kimimitsu Oda, Chikara Saito, Norio Amizuka
    JOURNAL OF BONE AND MINERAL METABOLISM 25 (6) 374 - 382 0914-8779 2007/11 [Refereed][Not invited]
     
    Giving the complexity that characterizes the mechanisms of bone remodeling and the number of events that have to be in absolute harmony for it to occur flawlessly, the postulation that temporospatial distribution of osteocytes and their lacunar canalicular system might influence and be influenced by bone remodeling can be regarded, at least, as feasible. In this study, using Schoen's silver staining, we have examined the distribution of the osteocytic lacunar canalicular system (OLCS) in bones of developing mice. Trabecular bones of 3-day-old, 2-week-old, and 3-week-old mice displayed osteocytic cytoplasmic processes without any perceptible alignment. Also, many plump osteocytes were embedded in the mineralized bone matrix in a disorderly manner. At 4 weeks of age, however, mice bones showed some osteocytic processes that reached the bone surface on a right angle, while other osteocytes displayed the same features seen on 3-week specimens. Samples at 8 weeks of age featured osteocytes with their usual spindle shape, organized so as to parallel the longitudinal axis of trabecular bone. They also extended their cytoplasmic processes perpendicularly to the bone surface. However, several osteocytes immersed in older bone, i.e., a residual mix of cartilage and bone matrices, still showed a random pattern of distribution of their cytoplasmic processes. Up to 12 weeks of age, the majority of the osteocytes became flattened and were shown to be aligned with their long axis paralleling the bone surface. This tendency for such a gradual arrangement was also observed in cortical bones. We have further demonstrated that 8-week-old osteoprotegerin-deficient mice, which demonstrated histological evidence of higher than average bone turnover, revealed a disorganized OLCS. Given the data gathered in this work, the OLCS appears to assume an organized, probably function-related spatial distribution as normal bone remodeling goes on.
  • [Mineralization in bone].
    Amizuka N, Freitas PH, Kojima T, Ubaidus S, Shang G
    Nihon rinsho. Japanese journal of clinical medicine 65 Suppl 9 194 - 201 0047-1852 2007/11 [Refereed][Not invited]
  • Nagako Yoshiba, Kunihiko Yoshiba, Akihiro Hosoya, Masahiro Saito, Takamasa Yokoi, Takashi Okiji, Norio Amizuka, Hidehiro Ozawa
    CELL AND TISSUE RESEARCH 330 (1) 133 - 145 0302-766X 2007/10 [Refereed][Not invited]
     
    Matrix remodeling is regulated by matrix metalloproteinases (MMPs) and tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMPs). Periostin, originally identified in a mouse osteoblastic library, plays a role in cell adhesion and migration and in mechanical stress-induced matrix remodeling. In this study, we analyzed and compared the distribution patterns of TIMP-2 and periostin during mouse mandible development. Immunohistochemical staining for TIMP-2 and periostin was carried out on serial cryosections obtained from mice at embryonic days 13-16, postnatal day 2 (P2), P35, and 12 weeks of age. TIMP-2 and periostin exhibited a strikingly similar protein distribution during mandible development. From bud to early bell stages of molars, TIMP-2 and periostin were highly expressed on the lingual and anterior sides of the basement membrane and on the adjacent jaw mesenchyme. In pre- and postnatal incisors, the basement membrane of the apical loop and dental follicle was immunostained for TIMP-2 and periostin. At postnatal stages, TIMP-2 and periostin were prominently confined to the extracellular matrix (ECM) of gingival tissues, periodontal ligaments, and tendons (all recipients of mechanical strain). However, periostin was solely detected in the lower portion of the inner root sheath of hair follicles. Gingiva of P2 cultured in anti-TIMP-2 antibody-conditioned medium showed markedly reduced staining of periostin. We suggest that TIMP-2 and periostin are co-distributed on ECM exposed to mechanical forces and coordinately function as ECM modulators.
  • Paulo Henrique Luiz de Freitas, Taku Kojima, Soblian Ubaidus, Minqi Li, Guangwei Shang, Ritsuo Takagi, Takeyasu Maeda, Kimimitsu Oda, Hidehiro Ozawa, Norio Amizuka
    BIOMEDICAL RESEARCH-TOKYO 28 (4) 191 - 203 0388-6107 2007/08 [Refereed][Not invited]
     
    We have examined the morphological changes in chondrocytes after exposure to experimental hypergravity. Tibial epiphyseal cartilages of 17-days-old mouse fetuses were exposed to centrifugation at 3G for 16 It mimicking hypergravitational environment (experimental group), or subjected to stationary cultures (control group). Centrifugation did not affect the sizes of epiphyseal cartilage, chondrocyte proliferation, type X collagen-positive hypertrophic zone, and the mRNA expressions of parathyroid hormone-related peptide and fibroblast growth factor receptor Ill. However, centrifuged chondrocytes showed abnormal morphology and aberrant spatial arrangements, resulting in disrupted chondrocytic columns. Through histochemical assessments, actin filaments were shown to distribute evenly along cell membranes of control proliferative chondrocytes, while chondrocytes subjected to centrifugal force developed a thicker layer of actin filaments. Transmission electron microscopic observations revealed spotty electron-dense materials underlying control chondrocytes' cell membranes, while experimental chondrocytes showed their thick layer. In the intracolumnar regions of the control cartilage, longitudinal electron-dense fibrils were associated with short cytoplasmic processes of normal chondrocytes, indicating assumed cell-to-matrix interactions. These extracellular fibrils were disrupted in the centrifuged samples. Summarizing, altered actin filaments associated with cell membranes, irregular cell shape and disappearance of intracolumnar extracellular fibrils suggest that hypergravity disturbs cell-to-matrix interactions in our cartilage model.
  • Taku Kojima, Paulo H. L. Freitas, Sobhan Ubaidus, Akiko Suzuki, Minqi Li, Michiko Yoshizawai, Kimimitsu Oda, Takeyasu Maeda, Akira Kudo, Chikara Saito, Norio Amizuka
    BIOMEDICAL RESEARCH-TOKYO 28 (4) 219 - 229 0388-6107 2007/08 [Refereed][Not invited]
     
    We aimed to histologically elucidate whether bioresorbable plates (DeltaSystem (R)) can induce cortical bone formation, which is essential for long-lasting bone augmentation. Standardized bone defects in rat calvariae were covered with a convexly-shaped DeltaSystem (R) plate, and then processed for histological observations. At 1 week, alkaline phosphatase-positive osteoblasts were seen in the newly-formed bone extending from the cavity's bottom, indicating accelerated osteogenesis. A thick layer of soft connective tissue positive for periostin, a hallmark of periosteum, covered this new bone. At 2 weeks, a spongy bone had filled the cavity up to half its height. The inner layer of the soft tissue facing the spongy bone revealed abundant periostin and osteopontin, and had many tartrate-resistant acid phosphatase-positive osteoclasts. At 4 weeks, this layer had given rise to thin new bony matrices without relation to the spongy bone arising from the cavity. These bone matrices had been thickened by 8 weeks, and turned into a thick cortical bone outlining the regenerated bone at 12 weeks. Thus, our study has provided histological evidences of cortical osteogenesis when DeltaSystem (R) plates are used for bone augmentation procedures.
  • Naoki Sawada, Yutaka Taketani, Norio Amizuka, Masako Ichikawa, Chiharu Ogawa, Kaori Nomoto, Kunitaka Nashiki, Tadatoshi Sato, Hidekazu Arai, Masashi Isshiki, Hiroko Segawa, Hironori Yamamoto, Ken-ichi Miyamoto, Eiji Takeda
    BONE 41 (1) 52 - 58 8756-3282 2007/07 [Refereed][Not invited]
     
    Caveolin-1 is an essential and signature protein of caveolae, which are small invaginations of the plasma membrane enriched in cholesterol and sphingolipids. Although high levels of expression of caveolin-1 have been demonstrated in osteoblasts as welt as endothelial cells, fibroblasts, and muscular cells, the role of caveolin-1 in osteoblasts has not been clarified. Here, we show that caveolin-1 is secreted from osteoblasts in the form of matrix vesicles; extracellular vesicles released from the plasma membrane of osteoblasts. In this study, caveolae and matrix vesicles were similarly enriched in cholesterol and sphingomyelin in fractions isolated from mineralizing MC3T3-E1 cells. Interestingly, in the MC3T3-E1 cells caveolin-1 was enriched in the matrix vesicle fraction as well as the caveolar membrane fraction, and the amount of caveolin-1 in the matrix vesicle fraction increased as differentiation progressed. Localization of caveolin-1 in matrix vesicles was also confirmed in murine tibia. Furthermore, overexpression of caveolin-1 enhanced matrix calcification in MC3T3-E1 cells, whereas knockdown of caveolin-1 diminished it. These results suggest that secreted caveolin-1 as a component of matrix vesicles may play an important role in osteoblast calcification. (c) 2007 Elsevier Inc. All rights reserved.
  • Zenjiro Maruyama, Carolina A. Yoshida, Tatsuya Furuichi, Norio Amizuka, Masako Ito, Ryo Fukuyama, Toshihiro Miyazaki, Hideki Kitaura, Kouhei Nakamura, Takashi Fujita, Naoko Kanatani, Takeshi Moriishi, Kei Yamana, Wenguang Liu, Hiroshi Kawaguchi, Kozo Nakamura, Toshihisa Komori
    DEVELOPMENTAL DYNAMICS 236 (7) 1876 - 1890 1058-8388 2007/07 [Refereed][Not invited]
     
    Runx2 is an essential transcription factor for osteoblast differentiation. However, the functions of Runx2 in postnatal bone development remain to be clarified. Introduction of dominant-negative (dn)-Runx2 did not inhibit Col1a1 and osteocalcin expression in mature osteoblastic cells. In transgenie mice that expressed dn-Runx2 in osteoblasts, the trabecular bone had increased mineralization, increased volume, and features of compact bone, and the expression of major bone matrix protein genes was relatively maintained. After ovariectomy, neither osteolysis nor bone formation was enhanced and bone was relatively conserved. In wild-type mice, Runx2 was strongly expressed in immature osteoblasts but downregulated during osteoblast maturation. These findings indicate that the maturity and turnover rate of bone are determined by the level of functional Runx2 and Runx2 is responsible for bone loss in estrogen deficiency, but that Runx2 is not essential for maintenance of the expression of major bone matrix protein genes in postnatal bone development and maintenance. Developmental Dynamics 236:1876-1890, 2007. (c) 2007 Wiley-Liss, Inc.
  • Sawako Tatsumi, Kiyoaki Ishii, Norio Amizuka, Minqi Li, Toshihiro Kobayashi, Kenji Kohno, Masako Ito, Sunao Takeshita, Kyoji Ikeda
    CELL METABOLISM 5 (6) 464 - 475 1550-4131 2007/06 [Refereed][Not invited]
     
    Bone remodeling is performed by osteoclasts and osteoblasts at the bone surface. Inside of bone is a network of numerous osteocytes, whose specific function hasremained anenigma. Here we describe a transgenic mouse model in which inducible and specific ablation of osteocytes is achieved in vivo through targeted expression of diphtheria toxin (DT) receptor. Following a single injection of DT, approximately 70%-80% of the osteocytes, but apparently no osteoblasts, were killed. Osteocyte-ablated mice exhibited fragile bone with intracortical porosity and microfractures, osteolblastic dysfunction, and trabecular bone loss with microstructural deterioration and adipose tissue proliferation in the marrow space, all of which are hallmarks of the aging skeleton. Strikingly, these "osteocyte-less" mice were resistant to unloading-induced bone loss, providing evidence for the role of osteocytes in mechano-transduction. Thus, osteocytes represent an attractive target for the development of diagnostics and therapeutics for bone diseases, such as osteoporosis.
  • Minqi Li, Tomoyo Sasaki, Katsuhiro Ono, Paulo Henrique Luiz de Freitas, Ubaidus Sobhan, Taku Kojima, Junko Shimomura, Kimimitsu Oda, Norio Amizuka
    BIOMEDICAL RESEARCH-TOKYO 28 (3) 127 - 137 0388-6107 2007/06 [Refereed][Not invited]
     
    The purpose of this study was to examine the localization of macrophages, B-lymphocytes and osteoclasts in tumoral lesions of mammary carcinoma metastasized to bone of non-immunocompromised mice. Mouse mammary carcinoma cells (BALB/c-MC) were injected through the left cardiac ventricle into 5-week-old female wild-type Balb/c truce. The femora and tibiae of mice with metastasized cancer were extracted, and thereafter processed for histochemical analyses. The foci of metastasized tumor cells occupied the metaphyseal area, and the cell death zones could be identified within the tumor mass. Abundant tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP)-positive osteoclasts were found among the alkaline phosphatase (ALP)-reactive osteoblastic cell layer that covered the bone surface neighboring the metastatic lesion. In contrast, F4/80-positive rnacrophages/rnonocytes were localized adjacent to, or invading the metastatic tissue. In addition, son-ie F4/80-positive cells were found in the aforementioned cell death zones. Unlike F4/80-positive cells, CD45R-positive B-lymphocytes did not accumulate at the surfaces of the tumor lesions, nor infiltrate into them, but were found scattered over bone mat-row. Interestingly, some CD45R-positive cells were observed close to TRAP-positive osteoclasts in the stromal tissue surrounding the tumor lesion. Our findings suggest that, in the bone metastatic lesions of non-immunocompromised mice, F4/80-positive macrophages/monocytes accumulated on and/or infiltrated into the tumor nests, while CD45R-positive B-lymphocytes were associated with osteoclasts, rather than attacking metastatic tumor cells.
  • Naoto Kosaki, Hironari Takaishi, Satoru Kamekura, Tokuhiro Kimura, Yasunori Okada, Li Minqi, Norio Amizuka, Ung-il Chung, Kozo Nakamura, Hiroshi Kawaguchi, Yoshiaki Toyama, Jeanine D'Armiento
    BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS 354 (4) 846 - 851 0006-291X 2007/03 [Refereed][Not invited]
     
    Vascular and cellular invasion into the cartilage is a critical step in the fracture healing. Matrix metalloprotemase-13 (MMP-13) is a member of the zinc-dependent endopeptidase family and plays an important role in remodeling of extracellular matrix. Therefore we investigated the possible involvement of MMP-13 in a murine model of stabilized bone fracture healing. Repair of the fracture in MMP-13 deficient (MMP-13(-/-)) mice was significantly delayed and characterized by a retarded cartilage resorption in the fracture callus. Immunohistochemistry indicated severe defects in vascular penetration and chondroclast recruitment to the fracture callus in MMP-13(-/-) mice. Consistent with the observations, the chondrocyte pellets cultured from the MMP13(-/-) mice exhibited diminished angiogenic activities when the pellets were co-cultured with endothelial cells. These results suggest that MMP-13 is crucial to the process of angiogenesis during healing of fracture, especially in the cartilage resorption process. (c) 2007 Elsevier Inc. All rights reserved.
  • Junichiro James Kazama, Norio Amizuka, Masafumi Fukagawa
    THERAPEUTIC APHERESIS AND DIALYSIS 10 S34 - S38 1744-9979 2006/12 [Refereed][Not invited]
     
    Vascular calcification is observed frequently in hemodialysis patients. The guidelines for kidney disease outcomes quality initiative recommend a strict control of serum calcium and phosphorus concentrations. Calcium-phosphorus product in extracellular fluids is almost at an oversaturation level in dialysis patients and in healthy individuals as well, but crystallization of hydroxyapatite does not occur in healthy individuals. Presumably, some systemic mechanism that has yet to be defined works to block the formation of hydroxyapatite crystals in healthy individuals, whereas in dialysis patients this defense mechanism is disrupted in hard tissues, leading to progressive biomineralization. Matrix vesicles released from specialized mesenchymal cells such as osteoblasts, play a central role in disrupting the putative defense mechanism against calcification. Matrix vesicles are internally in a highly favorable environment for progressive calcification, and essentially a nidus for hydroxyapatite crystal nucleation and its external growth through disruption of the defense mechanism. Osteoblastic cells release matrix vesicles that form initial crystal hydroxyapatite by condensation of phosphate and calcium, referred to as matrix vesicle calcification. Hydroxyapatite crystals break through vesicular membranes to reach a nearby collagen fiber network and form a continuous layer of calcified bone matrix. Thereafter follows the formation of additive bone matrix by osteoblasts and the advance of the calcification front. Therefore, ectopic calcification arises mechanistically from: (i) disruption of a systemic defense mechanism against calcification; and (ii) appearance of osteoblast-like cells in hard tissues that normally are localized in soft tissues. Abnormal accumulation of calcium/inorganic phosphate in dialysis patients is accounted for by the former disruption of systemic defense mechanism against calcification, and arterial calcification in dialysis patients by the latter osteoblast-like cells transformed from tunica media or vascular smooth muscle cells.
  • Oshima Shigeki, Onodera Shin, Amizuka Norio, Li Minqi, Irie Kazuharu, Watanabe Satoshi, Koyama Yoshikazu, Nishihira Jun, Yasuda Kazunori, Minami Akio
    FEBS LETTERS 580 (27) 6519  1873-3468 2006/11/27 [Refereed][Not invited]
  • Naoki Kondo, Kunihiko Tokunaga, Tomoyuki Ito, Katsumitsu Arai, Norio Amizuka, Li Minqi, Hiroshi Kitahara, Masayuki Ito, Makoto Naito, Jiang Shu-Ying, Kimimitsu Oda, Takehiro Murai, Reiko Takano, Akira Ogose, Naoto Endo
    MICROSCOPY RESEARCH AND TECHNIQUE 69 (10) 839 - 846 1059-910X 2006/10 [Refereed][Not invited]
     
    We analyzed the effect of glucocorticoid on bone regeneration after bone marrow ablation in tibiae of 8-week-old rats. Methylprednisolone sodium succinate (MPSS) was injected intramuscularly at a dose of 100 mg/kg/day for 3 days. Tibiae on days 1, 3, 5, 7, 10, 12, and 14 after ablation were subjected to tartrate-resistant acid phosphatase staining, immunohistochemistry, in situ hybridization, and transmission electron microscopy (TEM), and measurement of the volume of newly-formed bone and the osteoclast number. MPSS significantly decreased the newly-formed bone volume on day 7, and immature bone still remained on day 10 in the MPSS-treated group. The volume of this bone was significantly higher than that in the control group. However, there were no differences between the groups in the osteoclast number, the expression of mRNAs for osteoblast differentiation markers, and alkaline phosphatase and cathepsin K judged by immunohistochemistry. TEM findings showed no difference in the form of osteoblasts, whereas osteoclasts in the MPSS-treated group had less developed ruffled borders, compared to those in the control group. These results suggest that MPSS treatment affects neither the differentiation nor the shape of osteoblasts, and does not change the osteoclast number or the cathepsin K level. However, high dose MPSS inhibits both bone formation and resorption during bone regeneration after rat tibial bone marrow ablation, and inhibits ruffled border formation in osteoclasts. These data will be useful to develop bone regenerative therapies for bone diseases due to high dose steroid administration.
  • K Ono, S Kamiya, T Akatsu, C Nakamura, MQ Li, N Amizuka, K Matsumoto, T Nakamura, N Kugai, S Wada
    BONE 39 (1) 27 - 34 8756-3282 2006/07 [Refereed][Not invited]
     
    Some cancers frequently affect the skeleton, and the bone microenvironment supports growth of certain cancer cells. After tumors metastasize to bone, they stimulate osteoclastogenesis and expand in the bone tissue. Hepatocyte growth factor (HGF), which was originally identified as a potent mitogen for hepatocytes, promotes tumor growth, invasion and metastasis. HGF is mainly produced by cells of mesenchymal origin, and osteoblasts/osteocytes and bone marrow stromal cells originate from mesenchymal cells. However, it is not clear what effect HGF has on tumor progression in bone metastasis. In the present study, we investigated the roles of HGF in bone metastasis using the mouse mammary cancer cell line BALB/c-MC. Cancer cells injected into hearts of mice metastasized to bone in their hind limbs. HGF immunoreactivity was detected in the stroma surrounding the tumor nests, and blood vessels expressing CD31 (a marker of endothelial cells) were observed in the HGF-positive area. To identify the cells producing HGF, we measured concentration of HGF in culture media. HGF concentration was elevated in osteoblast cultures (3.13 +/- 0.25 ng/ml), whereas HGF was undetectable (< 0.4 ng/ml) in BALB/c-MC and bone marrow cell cultures. HGF concentration in osteoblast cultures increased 2.5-fold in response to 10(-6) M PGE(2). Addition of HGF to BALB/c-MC cultures caused doubling of the cell number. Moreover, Western blot analysis revealed expression of c-Met/HGF receptor by BALB/c-MC. In the Matrigel invasion chamber assay, addition of HGF to the bottom well increased the rate at which BALB/c-MC invaded the bottom well through the membrane. Furthermore, when osteoblasts were cultured in the bottom well, the number of BALB/c-MC cells that invaded the bottom well through the membrane increased 3.7-fold, compared to assays without osteoblasts. Addition of NK4, an inhibitor of HGF, completely abolished the enhancement of the invasive potential of the BALE/c-MC cells in the presence of osteoblasts. These findings suggest that HGF produced by osteoblasts induces migration of cancer cells from sinusoidal capillaries to bone marrow space and stimulates growth of cancer cells in the bone microenvironment. Thus, osteoblasts appear to promote bone metastasis of some cancers via HGF-c-Met signaling. (c) 2005 Elsevier Inc. All rights reserved.
  • K Tsukiyama, Y Yamada, C Yamada, N Harada, Y Kawasaki, M Ogura, K Bessho, MQ Li, N Amizuka, M Sato, N Udagawa, N Takahashi, K Tanaka, Y Oiso, Y Seino
    MOLECULAR ENDOCRINOLOGY 20 (7) 1644 - 1651 0888-8809 2006/07 [Refereed][Not invited]
     
    Calcium plays a fundamental role as second messenger in intracellular signaling and bone serves as the body's calcium reserve to tightly maintain blood calcium levels. Calcium in ingested meal is the main supply and inadequate calcium intake causes osteoporosis and bone fracture. Here, we describe a novel mechanism of how ingested calcium is deposited on bone. Meal ingestion elicits secretion of the gut hormone gastric inhibitory polypeptide (GIP) from endocrine K cells in the duodenum. Bone histomorphometrical analyses revealed that bone formation parameters in the mice lacking GIP receptor (GIPR(-/-)) were significantly lower than those of wild-type (GIPR(+/+)) mice, and that the number of osteoclasts, especially multinuclear osteoclasts, was significantly increased in GIPR(-/-) mice, indicating that GIPR(-/-) mice have high-turnover osteoporosis. In vitro examination showed the percentage of osteoblastic cells undergoing apoptosis to be significantly decreased in the presence of GIP. Because GIPR(-/-) mice exhibited an increased plasma calcium concentration after meal ingestion, GIP directly links calcium contained in meal to calcium deposition on bone.
  • [Histological function of PTHrP in cartilage].
    Li M, Amizuka N
    Clinical calcium 16 (7) 1221 - 1227 0917-5857 2006/07 [Refereed][Not invited]
  • A Suzuki, K Nozawa-Inoue, N Amizuka, K Ono, T Maeda
    ANATOMICAL RECORD PART A-DISCOVERIES IN MOLECULAR CELLULAR AND EVOLUTIONARY BIOLOGY 288A (6) 646 - 652 1552-4884 2006/06 [Refereed][Not invited]
     
    Previous studies have pointed out a lack of adhesion structures in the synovial lining layer of the rat temporomandibular joint (TMJ) despite showing an epithelial arrangement. CD44, a major cell adhesion molecule, plays crucial roles as an anchor between cells and extracellular matrices by binding hyaluronan (HA) for the development of organs or the metastasis of tumors. The present study examined the localization of CD44 in the synovial membrane of the rat TMJ by immunocytochemistry for OX50, ED1, and Hsp25, which are markers for the rat CD44, macrophage-like type A, and fibroblast-like type B synoviocytes, respectively. Histochemistry for HA-binding protein (HABP) was also employed for the detection of HA. OX50 immunoreactions were found along the cell surface and, in particular, accumulated along the surface of the articular cavity. Observations by a double immunostaining and immunoelectron microscopy revealed that all the OX50-immunopositive cells were categorized as fibroblastic type B cells, which had many caveolae and a few vesicles reactive to intense OX50. However, the macrophage-like type A cells did not have any OX50 immunoreaction in the synovial lining layer. A strong HABP reaction was discernable in the extracellular matrix surrounding both OX50-positive and -negative cells in the synovial lining layers, exhibiting a meshwork distribution, but weak in its sublining layer. This localization pattern of CD44 and HABP might be involved in the formation of the epithelial arrangement of the synovial lining layer. Furthermore, OX50 immunonegativity in the type A cells suggests their low phagocytotic activity in the rat TMJ under normal conditions.
  • Shin Onodera, Satoshi Sasaki, Shigeki Ohshima, Norio Amizuka, Minqi Li, Nobuyuki Udagawa, Kazuharu Irie, Jun Nishihira, Yoshikazu Koyama, Ayako Shiraishi, Harukazu Tohyama, Kazunori Yasuda
    JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH 21 (6) 876 - 885 0884-0431 2006/06 [Refereed][Not invited]
     
    The bone phenotype of mice overexpressing MIF was studies. These mice showed decreased trabecular bone, increased bone formation rate, and increased MMP-3, -9, and -13 mRNA expression in the femora and tibias. This model provides evidence of the role played by MIF in bone remodeling and balance in vivo.
  • Hironobu Suzuki, Norio Amizuka, Masaki Noda, Osamu Aman, Takeyasu Maeda
    ARCHIVES OF HISTOLOGY AND CYTOLOGY 69 (2) 119 - 128 0914-9465 2006/06 [Refereed][Not invited]
     
    The submandibular gland (SMG) has been regarded as an age-stable organ in spite of reports on its structural changes with aging. Although the klotho gene is involved in aging, little information is available regarding its effects on morphological changes of SMGs. The present study examined the histological and immunohistochemical features of SMGs in klotho-deficient mice - which are well-established aging models - by immunohistochemical and histochemical techniques. Five kinds of cellular markers - against NGF, EGF, Mn- and Cu/Zn-SOD, and RITC-conjugated phalloidin were used for the identification of cell types. In klotho-deficient mice, the SMGs lost their granular ducts and each lobe diminished. The granular duct showed strong immunoreactivities for NGF and EGF in the wild-type mice, but the NGF- and EGF-immunopositive ducts decreased in number remarkably in klotho-deficient mice. Interestingly, instead of a loss of the granular duct, the striated duct located on the distal portion in the homozygous mice came to show NGF- and EGF-immunoreactions. Neither Mn- and Cu/Zn-SOD immunoreactivities in the duct system nor the phalloidin-reaction in the myoepithelial cells differed between the wild-type and klotho-deficient mice. Our findings suggest that the klotho gene inhibited the differentiation of the granular duct from the striated duct due to the repression and/or down-regulation of sexual and growth hormones.
  • Kii, I, N Amizuka, L Minqi, S Kitajima, Y Saga, A Kudo
    BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS 342 (3) 766 - 772 0006-291X 2006/04 [Refereed][Not invited]
     
    A characteristic tooth of rodents, the incisor continuously grows throughout life by the constant formation of dentin and enamel. Continuous eruption of the incisor is accompanied with formation of shear zone, in which the periodontal ligament is remodeled. Although the shear zone plays a role in the remodeling, its molecular biological aspect is barely understood. Here, we show that periostin is essential for formation of the shear zone. Periostin(-/-) mice showed an eruption disturbance of incisors. Histological observation revealed that deletion of periostin led to disappearance of the shear zone. Electron microscopy revealed that the disappearance of the shear zone resulted from a failure in digestion of collagen fibers in the periostin(-/-) mice. Furthermore, immunohistochemical analysis using anti-periostin antibodies demonstrated the restricted localization of periostin protein in the shear zone. Periostin is an extracellular matrix protein, and immunoelectron microscopy showed a close association of periostin with collagen fibrils in vivo. These results suggest that periostin functions in the remodeling of collagen matrix in the shear zone. (c) 2006 Elsevier Inc, All rights reserved.
  • [Histopathological observations on osteolytic bone metastasis].
    Li M, Amizuka N
    Clinical calcium 16 (4) 591 - 597 0917-5857 2006/04 [Refereed][Not invited]
  • S Oshima, S Onodera, N Arnizuka, MQ Li, K Irie, S Watanabe, Y Koyama, J Nishihira, K Yasuda, A Minami
    FEBS LETTERS 580 (5) 1251 - 1256 0014-5793 2006/02 [Refereed][Not invited]
     
    A link between macrophage migration inhibitory factor (MIF) and estrogen has recently emerged. We examined the involvement of MIF in osteoporotic changes in bone after ovariectomy (OVX), and revealed that MIF-deficient mice (MIF-KO) were completely protected from this phenomenon. The increase in osteoclast number per bone surface and serum IL1 beta levels, which were observed in wild-type mice after OVX, did not occur in MIF KO. Our data suggest that MIF plays an important role in the pathogenesis of postmenopausal osteoporosis, and could be a novel target for the treatment of this disease. (c) 2006 Federation of European Biochemical Societies. Published by Elsevier B.V. All rights reserved.
  • MQ Li, N Amizuka, K Takeuchi, PHL Freitas, Y Kawano, M Hoshino, K Oda, K Nozawa-Inoue, T Maeda
    MICROSCOPY RESEARCH AND TECHNIQUE 69 (2) 73 - 83 1059-910X 2006/02 [Refereed][Not invited]
     
    The aim of this study was to assess the dynamics of osteoclast migration and the degradation of unmineralized extracellular matrix in an osteolytic metastasis by examining a well-standardized lung cancer metastasis model of nude mice. SBC-5 human lung small carcinoma cells were injected into the left cardiac ventricle of 6-week-old BALB/c nu/nu mice under anesthesia. At 25-30 days after injection, the animals were sacrificed and their femora and/or tibiae were removed for histochemical analyses. Metastatic lesions were shown to occupy a considerable area extending from the metaphyses to the bone marrow region. Tartrate resistant acid phosphatase (TRAPase)-positive osteoclasts were found in association with an alkaline phosphatase (ALPase)positive osteoblastic layer lining the bone surface, but could also be localized in the ALPase-negative stromal tissues that border the tumor nodules. These stromal tissues were markedly positive for osteopontin, and contained a significant number of TRAPase-positive osteoclasts expressing immunoreactivity for CD44. We thus speculated that, mediating its affinity for CD44, osteopontin may serve to facilitate osteoclastic migration after their formation associated with ALPase-positive osteoblasts. We next examined the localization of cathepsin K and matrix metallo-proteinase-9 (MMP-9) in osteoclasts. Osteoclasts adjacent to the bone surfaces were positive for both proteins, whereas those in the stromal tissues in the tumor nests showed only MMP-9 immunoreactivity. Immunoelectron microscopy disclosed the presence of MMP-9 in the Golgi apparatus and in vesicular structures at the baso-lateral cytoplasmic region of the osteoclasts found in the stromal tissue. MMP-9-positive vesicular structures also contained fragmented extracellular materials. Thus, osteoclasts appear to either select an optimized function, namely secreting proteolytic enzymes from ruffled borders during bone resorption, or recognize the surrounding extracellular matrix by mediating osteopontin/CD44 interaction, and internalize the extracellular matrices.
  • K Nozawa-Inoue, A Suzuki, N Amizuka, T Maeda
    ANATOMICAL RECORD PART A-DISCOVERIES IN MOLECULAR CELLULAR AND EVOLUTIONARY BIOLOGY 288A (1) 8 - 12 1552-4884 2006/01 [Refereed][Not invited]
     
    This immunocytochemical study revealed the expression of caveolin-1, a major protein of caveolae, in the rat temporomandibular joint. In the synovial lining layer, immunoreactive products for caveolin-1 were detected on the cell membrane of the fibroblast-like type B cells, as confirmed by immunocytochemistry for heat shock protein 25. The cells in the articular disk, the articular layer, and zone of proliferation of the mandibular condyle also showed intense immunoreactions for caveolin-1. (C) 2005 Wiley-Liss, Inc.
  • H Suzuki, N Amizuka, K Oda, MQ Li, H Yoshie, H Ohshima, M Noda, T Maeda
    ARCHIVES OF HISTOLOGY AND CYTOLOGY 68 (5) 371 - 381 0914-9465 2005/12 [Refereed][Not invited]
     
    Mice homozygous for klotho gene deletion are well established aging models as they mimic certain aspects of human senescence e.g. osteoporosis. Induced senescence may affect cellular functions and alter the histological properties of the extracellular matrices. The present study examined the histological and ultrastructural features of osteocytes and the surrounding bone matrix in klotho-deficient mice. As expected, osteoblasts showed a flattened shape with a weak immunoreactivity for alkaline phosphatase, and the bone matrix contained many empty osteocytic lacunae. The walls of both normal and empty lacunae were intensely immunopositive for osteopontin and dentin matrix protein-1, but featured an inconsistent immunoreactivity for osteocalcin and type I collagen. Not surprisingly, TUNEL-positivity, indicative of apoptosis, was found in many osteoblasts, osteocytes, and bone marrow cells of the klotho-deficient mice. In transmission electron microscopy, an amorphous matrix containing non-collagenous organic materials was recognizable around osteoblasts and in the osteocytic lacunae. Some osteoblasts on the bone surface featured these amorphous materials in vacuoles associated with their trans-Golgi network, indicating that, under klotho-deficient conditions, they synthesize and secrete the non-collagenous structures. Some osteocytes displayed pyknosis or degenerative traits. Thus, our findings provide histological evidence that klotho gene deletion influences the spatial distribution of osteocytes and the synthesis of bone matrix proteins in addition to the accelerated aging of bone cells.
  • Y Taguchi, N Amizuka, M Nakadate, H Ohnishi, N Fujii, K Oda, S Nomura, T Maeda
    BIOMATERIALS 26 (31) 6158 - 6166 0142-9612 2005/11 [Refereed][Not invited]
     
    This study was designed to evaluate the histological changes during ossification and cellular events including osteogenic differentiation responding to collagenous bioresorbable membranes utilized for GBR. Standardized artificial bony defects were prepared at rat maxillae, and covered with a collagenous bioresorbable membrane. These animals were sacrificed at 1, 2, 3 and 4 weeks after the GBR-operation. The paraffin sections were subject to tartrate resistant acid phosphatase (TRAP) enzyme histochemistry and immunohistochemistry for alkaline phosphatase (ALP), osteopontin (OP) and osteocalcin (OC). In the first week of the experimental group, woven bone with ALP-positive osteoblasts occupied the lower half of the cavity. The collagenous membrane included numerous ALP-negative cells and OP-immunoreactive extracellular matrices. At 2 weeks, the ALP-, OP- and OC-immunoreactivity came to be recognizable in the region of collagenous membrane. Since ALP-negative soft tissue separated the collagenous membrane and the new bone originating from the cavity bottom, the collagenous membrane appeared to induce osteogenesis in situ. At 3 weeks, numerous collagen fibers of the membrane were embedded in the adjacent bone matrix. At 4 weeks, the membrane-associated and the cavity-derived bones had completely integrated, showing the same height of the periosteal ridge as the surrounding alveolar bones. The collagen fibers of a GBR-membrane appear to participate in osteogenic differentiation. (c) 2005 Elsevier Ltd. All rights reserved.
  • [Calcitonin receptor gene recombinant animals].
    Suzuki H, Amizuka N, Maeda T
    Nihon rinsho. Japanese journal of clinical medicine 63 Suppl 10 188 - 193 0047-1852 2005/10 [Refereed][Not invited]
  • [Parathyroid hormone (PTH)/PTH-related peptide (PTHrP) receptor and the signal transduction].
    Amizuka N, Li M
    Nihon rinsho. Japanese journal of clinical medicine 63 Suppl 10 278 - 283 0047-1852 2005/10 [Refereed][Not invited]
  • [Parathyroid hormone (PTH)/PTH-related peptide (PTHrP) receptor gene recombinant mice].
    Amizuka N, Li M
    Nihon rinsho. Japanese journal of clinical medicine 63 Suppl 10 300 - 305 0047-1852 2005/10 [Refereed][Not invited]
  • [Parathyroid hormone-related peptide (PTHrP) gene recombinant mice].
    Amizuka N, Li M
    Nihon rinsho. Japanese journal of clinical medicine 63 Suppl 10 382 - 386 0047-1852 2005/10 [Refereed][Not invited]
  • [The interplay of magnesium and vitamin K2 on bone mineralization].
    Amizuka N, Li M, Maeda T
    Clinical calcium 15 (7) 57 - 61 0917-5857 2005/07 [Refereed][Not invited]
  • Nozawa-Inoue K, Amizuka N, Suzuki A, Maeda T
    The anatomical record. Part A, Discoveries in molecular, cellular, and evolutionary biology 284 (2) 522 - 528 1552-4884 2005/06 [Refereed][Not invited]
  • N Sakagami, N Amizuka, MQ Li, K Takeuchi, M Hoshino, M Nakamura, K Nozawa-Inoue, N Udagawa, T Maeda
    MICRON 36 (7-8) 688 - 695 0968-4328 2005 [Refereed][Not invited]
     
    Osteopetrotic (op/op) mice fail to exhibit bone remodeling because of a defective osteoclast formation due to a lack of macrophage colony-stimulating factor. In this study, we investigated the femora of op/op mice to clarify whether the osteoblastic population and bone mineralization are involved in osteoclasts or their bone resorption. The op/op mice extended the meshwork of trabecular bones from the chondro-osseous junction to the diaphyseal region. In the femoral metaphyses of op/op mice, intense alkaline phosphatase (ALPase)-positive osteoblasts were observed on the metaphyseal bone in close proximity to the erosion zone of the growth plates. Von Kossa's staining revealed scattered mineralized nodules and a fine meshwork of mineralized bone matrices while the wild-type littermates developed well-mineralized trabeculae parallel to the longitudinal axis. In contrast to the metaphysis, some op/op diaphyses showed flattened osteoblasts with weak ALPase-positivity, and the other diaphyses displayed bone surfaces without a covering by osteoblasts. It is likely, therefore, that the osteoblastic population and activity were lessened in the op/op diaphyses. Despite the osteopetrotic model, von Kossa's staining demonstrated patchy unmineralized areas in the op/op diaphyses, indicating that a lower population and/or the activity of osteoblasts resulted in defective mineralization in the bone. Transmission electron microscopy disclosed few osteoblasts on the diaphyseal bones, and instead, bone marrow cells and vascular endothelial cells were often attached to the unmineralized bone. Osteocytes were embedded in the unmineralized bone matrix. Thus, osteoclasts appear to be involved in the osteoblastic population and activity as well as subsequent bone mineralization. (c) 2005 Elsevier Ltd. All rights reserved.
  • Kii, I, N Amizuka, J Shimomura, Y Saga, A Kudo
    JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH 19 (11) 1840 - 1849 0884-0431 2004/11 [Refereed][Not invited]
     
    We studied cadherin-11 function in the differentiation of mesenchymal cells. Teratomas harboring the cadherin-11 gene generated bone and cartilage preferentially. Cadherin-11 transfectants of C2C12 cells and cadherin-11 and/or N-cadherin transfectants of L cells showed that cadherin-11 together with N-cadherin-induced expression of ALP and FGF receptor 2. These results suggest that cadherin-11 directly regulates the differentiation of mesenchymal cells into the cells of the osteo-lineage and the chondro-lineage in a different manner from N-cadherin.
  • FI Tapety, N Amizuka, K Uoshima, S Nomura, T Maeda
    CLINICAL ORAL IMPLANTS RESEARCH 15 (3) 315 - 324 0905-7161 2004/06 [Refereed][Not invited]
     
    This study was designed to investigate the responses of bone cells to a deproteinized bovine bone material, Bio-Oss(R) (Geistlich-Pharma, Wolhunsen, Switzerland), which was grafted in artificial bone defects of rat femurs. Standardized bone defects in the cortical bone of the right femurs were grafted with Bio-Oss(R) particles. Narrow penetrations were prepared on the bottom of the cavity, enabling osteogenic cells to migrate from the bone marrow. A defect in the left femur without Bio-Oss(R) was used as a control. The treated femurs were histochemically examined at 1, 3, 5, 7, and 14 days after the operation. At day 1, no osteogenic migration into the cavities occurred in either the control or experimental groups. At day 3, alkaline phosphatase (ALPase) immunohistochemistry showed a migration of the positive cells at the bottom of the cavities of the experimental groups, but not in the control ones. At day 5, new bone formation was recognized at the bottom of the cavity of both groups. In the experimental group, ALPase-positive cells were localized on Bio-Oss(R) and/or on the thin bone matrix that covered this material. The superficial layer of Bio-Oss(R) underlying the newly formed bone exhibited osteocalcin immunoreactivity. Transmission electron microscopy revealed osteoblasts depositing bone matrices - including collagen fibers - on the surface of Bio-Oss(R). At days 7 and 14, woven bone occupied the previous cavities of both control and experimental groups, accompanied by osteoclasts. Thus, Bio-Oss(R) appears to serve as a scaffold for osteogenic cells as well as to promote osteoblastic differentiation and matrix synthesis.
  • [Bone quality in the respect of bone matrix].
    Amizuka N
    Clinical calcium 14 (4) 589 - 593 0917-5857 2004/04 [Refereed][Not invited]
  • H Kudo, N Amizuka, K Araki, K Inohaya, A Kudo
    DEVELOPMENTAL BIOLOGY 267 (2) 473 - 487 0012-1606 2004/03 [Refereed][Not invited]
     
    The myoseptum of fishes, composed of dense collagen, is a connective tissue layer that forms in the embryo, dividing somites from the trunk, and its structure and function are similar to those of the mammalian tendon. Both the myoseptum and tendon serve as the transmitter of muscular contractility to bones and adjoining muscles, and their structure is indispensable for movement of vertebrate animals. We cloned the zebrafish periostin gene and examined its expression and function in the myoseptum. The expression in embryos started in the rostral part of each segmented somite in the early segmentation stage; and consequently, metameric stripes were observed. At the end of segmentation, the expression region shifted to the transverse myoseptum and the myotome-epidermis boundary, and each myotome was surrounded by periostin. Using a polyclonal antibody, we found that the periostin protein was localized to the transverse myoseptum. Consistently, periostin morpholino antisense oligonucleotide led to defects in myoseptum formation, a delay in the differentiation of myofibers, and disorder of connection between myofibrils and myoseptum. We demonstrated here that periostin is the first molecule involved in myoseptum formation and propose that periostin secretion on the surface of the myoseptum is required for the adhesion of muscle fiber bundles to the myoseptum and the differentiation of muscle fibers. (C) 2004 Elsevier Inc. All rights reserved.
  • H Hao, N Amizuka, K Oda, N Fujii, H Ohnishi, A Okada, S Nomura, T Maeda
    BIOMATERIALS 25 (3) 431 - 442 0142-9612 2004/02 [Refereed][Not invited]
     
    This study aimed to elucidate the biological effects of a self-setting tricalcium phosphate bone substitute (BIOPEX(R)) applied in rat femoral cortical bone cavities. Narrow penetrations through the cavity and bone marrow were prepared to obtain cellular sources. In the experimental group at day 1, a thin cell layer intruded into a narrow space between the grafted BIOPEX(R) and the bottom of the cavity. From days 5 to 10, a range of tartrate-resistant acid phosphatase (TRAPase)-reactive osteoclasts accumulated on the surface of the BIOPEX(R) facing the bottom of the cavity, whilst many alkaline phosphatase (ALPase)-positive osteoblasts were localized on the bone surface opposing the BIOPEX(R). However, at day 20, osteoblasts were localized neighboring the osteoclasts on the BIOPEX(R), and deposited bone matrices onto this material, implying a coupling between osteoclasts and osteoblasts. At days 30 and 40 post-operation, small remnants of BIOPEX(R) particles were present in the new bone with a profile of compact bone. Thus, BIOPEX(R) is resorbed by osteoclasts, and succeeded by osteoblastic bone apposition with a coupling of osteoclasts and osteoblasts at the later stage. In conclusion, the use of BIOPEX(R) provides adequate bone regeneration with the profile of compact bone. (C) 2003 Elsevier Ltd. All rights reserved.
  • Yamada K, Nozawa-Inoue K, Kawano Y, Kohno S, Amizuka N, Iwanaga T, Maeda T
    The anatomical record. Part A, Discoveries in molecular, cellular, and evolutionary biology 274 (2) 934 - 941 1552-4884 2003/10 [Refereed][Not invited]
  • K Nozawa-Inoue, N Amizuka, N Ikeda, A Suzuki, Y Kawano, T Maeda
    ARCHIVES OF HISTOLOGY AND CYTOLOGY 66 (4) 289 - 306 0914-9465 2003/10 [Refereed][Not invited]
     
    This paper reviews recent findings of the synovial membrane, in particular the morphology, function and development of synovial lining cells, in the temporomandibular joint (TMJ). Electron microscopic studies have confirmed the synovial membrane in TMJ consists of macrophage-like type A cells and fibroblast-like type B cells identical to those in other systematic joints. The macrophage-like type A cells react with anti-macrophage and macrophage-derived substances including the major histocompatibility class IT molecule, and show a drastic increase in their number in the inflamed synovial membrane. In addition, they have the ability to produce substances involved in the progression of TMJ inflammation such as nitric oxide and inducible nitric oxide synthase. Observation of osteopetrotic mice revealed that macrophage-like type A cells in TMJ are derived from monocyte lineage. Immunocytochemistry for 25kDa heat shock protein was able to depict the entire shape of fibro-blast-like type B cells including their unique processes. The expression of an estrogen receptor alpha-immunoreaction in the fibroblast-like type B cells may explain the etiology of temporomandibular disorders at a higher frequency in females than in males, suggesting that TMJ is a target tissue for estrogen. Furthermore, fibroblast-like type B cells are equipped with a basement membrane to serve as an adhesion molecule for the fibroblast-like type B cells to keep their epithelial arrangement. A clear understanding of the morphology of the intact synovial membrane will serve to clarify the etiology and development of temporomandibular disorders.
  • [Mineralization and vascular invasion during endochondral bone formation].
    Amizuka N, Shimomura J, Maeda T, Ozawa H
    Clinical calcium 13 (4) 405 - 412 0917-5857 2003/04 [Refereed][Not invited]
  • Ota H, Azuma K, Horiuchi T, Kazama H, Araki A, Hosoi T, Sawabe M, Amizuka N, Orimo H
    Nihon Ronen Igakkai zasshi. Japanese journal of geriatrics 40 (2) 167 - 171 0300-9173 2003/03 [Refereed][Not invited]
  • M Ito, N Amizuka, S Tanaka, Y Funatsu-Ozawa, S Kenmotsu, K Oda, T Nakajima, H Ozawa
    JOURNAL OF BONE AND MINERAL METABOLISM 21 (6) 353 - 362 0914-8779 2003 [Refereed][Not invited]
     
    Parathyroid hormone-related peptide (PTHrP) induces pathological bone resorption in an endocrine manner, resulting in hypercalcemia of malignancy. However, the histopathological aspect of the action of PTHrP secreted by tumor cells on bone resorption has not well been documented. Therefore, we studied cell-cell interactions between bone cells, stromal cells, and PTHrP-secreting tumor cells (EC-GI-10) morphologically. Tumor cells injected subcutaneously into the parietal region formed a tumor mass, invading the bone marrow. The tumor mass was surrounded by a membrane structure consisting of stromal cells. These stromal cells were positive for alkaline phosphatase (ALPase). Tartrate-resistant acid phosphatase (TRAPase)-positive osteoclasts were localized close to the ALPase-positive cells, and numerous osteoclasts were observed on the neighboring bone surfaces. PTHrP, vascular endothelial growth factor (VEGF), and matrix metalloproteinase (MMP)-9 were detected in the tumor cells. Using RT-PCR, expression of interleukin (IL)-1alpha, IL-1beta, and PTHrP, which are strong bone resorption factors, was detected in the tumor cells. Some ALPase-positive cells localizing on the neighboring bone surfaces and endothelial cells revealed PTH/PTHrP receptor immunoreactivity. Ultrastructurally, numerous blood vessels were observed between the tumor nests and the stromal cells. The nests were surrounded by a basement membrane, but it was discontinuous, therefore permitting direct contact between the tumor cells and the stromal cells. These results indicate that PTHrP secreted by tumor cells appears to stimulate osteoclast differentiation and bone resorption in a paracrine manner through PTH/PTHrP receptor-immunopositive cells. IL-1alpha, IL-1beta, VEGF, and MMP-9 may also be involved in facilitating osteoclast formation and the subsequent bone resorption.
  • N Amizuka, J Shimomura, MQ Li, Y Seki, M Oda, JE Henderson, A Mizuno, H Ozawa, T Maeda
    JOURNAL OF ELECTRON MICROSCOPY 52 (6) 503 - 513 0022-0744 2003 [Refereed][Not invited]
     
    Previous studies have reported enhanced osteoclastogenesis, increased bone resorption and osteoporosis in osteoprotegerin (OPG)-deficient mice. In the present study, we show that the tibial epiphyses contain abundant, thin trabeculae lined with numerous osteoclasts and cuboidal osteoblasts. The increase in osteoblasts and osteoclasts was associated with a dramatic increase in calcein labelling of the mineralization fronts and replacement of much of the intertrabecular marrow with numerous alkaline phosphatase-positive preosteoblasts. Furthermore, the discrete, linear cement lines seen in wild-type mice were replaced by a randomly oriented meshwork of cement lines that were stained intensely for tartrate-resistant acid phosphatase and osteopontin in the OPG(-/-) mice. These indices of accelerated bone remodelling in mutant bone were associated with irregular trabecular surfaces, a disorganized collagen matrix interspersed with amorphous ground substance and numerous fissures between old and new bone. In total, these observations indicate that enhanced osteoclastic activity in OPG(-/-) epiphyses led to a coupled increase in osteoblast differentiation and activity and an increase in bone remodelling. The high bone turnover, disorganized matrix and impaired attachment of new to old bone in the cement lines in OPG(-/-) mice appear to cause bone fragility.
  • Amizuka N, Oda K, Shimomura J, Maeda T
    Anatomical science international 77 (4) 225 - 236 1447-6959 2002/12 [Refereed][Not invited]
  • R Lin, N Amizuka, T Sasaki, MM Aarts, H Ozawa, D Goltzman, JE Henderson, JH White
    JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH 17 (9) 1604 - 1612 0884-0431 2002/09 [Refereed][Not invited]
     
    Vitamin D deficiency results in defects in endochondral bone development characteristic of rickets, which include elongation of the cartilaginous growth plates and disorganization of the primary spongiosa. These defects are caused in part by impaired cartilage mineralization and vascularization of the chondro-osseous junction. Blood vessel invasion of mineralized cartilage is an essential step in endochondral ossification, providing access for cells that degrade cartilage as well as those that form bone. Vascular endothelial growth factor (VEGF) was shown to be a key regulator of this process when infusion of a dominant negative VEGF receptor effectively blocked vascular invasion and endochondral ossification in the growth plates of juvenile mice. Here, we show that the active metabolite of vitamin D 1alpha,25-dihydroxyvitamin D-3 [1alpha,25(OH)(2)D-3] directly stimulates transcription of mRNAs encoding VEGF121 and -165 isoforms in the CFK2 chondrogenic cell line. Enhanced VEGF expression also was evident in growth plate chondrocytes and osteoblasts in the tibia of juvenile mice treated systemically with 1alpha,25(OH)(2)D-3. This was seen in conjunction with enhanced expression of matrix metalloproteinase (MMP) 9, which activates VEGF stored in the cartilage matrix, in osteoclastic cells adjacent to the chondro-osseous junction. The alterations in VEGF and MMP-9 expression were accompanied by enhanced vascular invasion,of mineralized cartilage, as assessed by CD31 immunoreactivity. These results provide evidence that 1alpha,25(OH)(2)D-3 signaling stimulates VEGF and MMP-9 gene expression and promotes neovascularization of the epiphyseal growth plate in vivo through increased availability of active growth factor.
  • [Not Available].
    Amizuka N, Seki Y, Maeda T
    Clinical calcium 12 (6) 835 - 843 0917-5857 2002/06 [Refereed][Not invited]
  • K Ono, T Akatsu, T Murakami, R Kitamura, M Yamamoto, N Shinomiya, M Rokutanda, T Sasaki, N Amizuka, H Ozawa, N Nagata, N Kugai
    JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH 17 (5) 774 - 781 0884-0431 2002/05 [Refereed][Not invited]
     
    We previously reported that mouse mammary carcinoma cell lines (MMT060562 and BALB/c-MC) induced osteoclast formation through production of prostaglandin E-2 (PGE(2)) in cocultures with mouse bone marrow cells, but the mechanism(s) of PG production remained unclear. In the present in vitro and in vivo studies, we tested the involvement of cyclo-oxygenase-2 (COX-2), an inducible rate-limiting enzyme in PG biosynthesis, in the stimulation of osteoclast formation by mouse mammary carcinoma cell lines. Addition of a selective COX-2 inhibitor, JTE-522, to cocultures of mammary carcinoma cell lines and bone marrow cells lowered PGE(2) concentration in the culture media and inhibited osteoclast formation in a dose-dependent manner. Northern blotting showed a very high level of COX-2 messenger RNA (mRNA) expression in MMT060562. The mRNA expression was low in BALB/c-MC, but it increased when BALB/c-MC and bone marrow cells were cocultured. The results of immunocytochemistry for COX-2 protein in respective cultures were compatible with the results of COX-2 mRNA. In vivo, BALB/c-MC injected into the heart of Balb/c mice metastasized to bone and formed osteolytic lesions in their hindlimbs. Histological examination revealed that tumor cells had metastasized to the bone marrow cavity and destroyed the bone trabeculae. Immunohistochemistry demonstrated that bone marrow stromal cells adjacent to tumor cells expressed COX-2 protein. These findings suggest that COX-2 plays an important role in the osteolysis of bone metastasis in vivo as well as in osteoclast formation in cocultures used as an in vitro model of metastatic bone disease.
  • [The biological role of blood vessels during endochondral bone formation].
    Amizuka N, Sasaki T, Maeda T
    Clinical calcium 12 (3) 327 - 336 0917-5857 2002/03 [Refereed][Not invited]

Books etc

  • 副甲状腺・骨代謝疾患診療マニュアル改訂第2版
    網塚 憲生 (Joint work12 PTHrPと骨・ミネラル代謝)
    診断と治療社 2019
  • 村上 伸也, 網塚 憲生, 齋藤 正寛, 松本 卓也 
    医歯薬出版 2019 (ISBN: 9784263458389)
  • CKD-MBD 3rd Edition
    網塚憲生, 邱 紫璇, 長谷川智香 (ミネラル代謝の生理)
    日本メディカルセンター 2018
  • ファーマナビゲーター抗RANKL抗体編
    網塚憲生, 長谷川智香, 本郷裕美, 山本知真也, 原口真衣 (RANKL欠損状態における骨組織異常)
    メディカルレビュー社 2016
  • 骨・臓器ネットワークとオステオサイト
    網塚憲生, 原口真衣, 本郷裕美, 坪井香奈子, 山本知真也, 長谷川智香 (Overview 骨細胞の形態学的知見)
    メディカルビュー社 2016
  • 須田 立雄, 小澤 英浩, 高橋 栄明, 田中 栄, 中村 浩彰, 森 諭史, 高橋 直之, 網塚 憲生, 遠藤 直人, 竹澤 保政 
    医歯薬出版 2016 (ISBN: 9784263457955)
  • 脇田 稔, 前田 健康, 中村 浩彰, 網塚 憲生 (Joint editor)
    医歯薬出版 2015/02 (ISBN: 4263457846) 384
  • 「骨」を知る53の質問~ウェルエイジングをサポートするために~
    網塚憲生, 長谷川智香, 原口真衣, 山本知真也, 本郷裕美 (モデリングとリモデリングの違いは何ですか)
    医薬ジャーナル社 2015
  • 骨ペディア 骨疾患・骨代謝キーワード事典
    網塚憲生, 長谷川智香 (モデリング、リモデリングとミニモデリング・軟骨内骨化と膜性骨化・骨・硬組織の染色法・微細構造解析)
    羊土社 2015
  • 脇田 稔, 前田 健康, 中村 浩彰, 網塚 憲生 
    医歯薬出版 2015 (ISBN: 9784263457849)
  • 新しい骨形態計測~ Modern Bone Histomorphometry ~
    長谷川智香, 網塚憲生 (電子顕微鏡 Electron Microscopy)
    ウィネット出版 2014
  • 口腔科学
    網塚 憲生 (骨の解剖生理)
    朝倉書院 2014
  • ビタミンDと疾患 改訂版 -基礎の理解と臨床への応用-
    網塚憲生, 長谷川智香, 山本知真也, 宮本幸奈, 佐々木宗輝, 本郷裕美 (Ⅲ.ビタミンDの作用 活性型ビタミンD3製剤(エルデカルシトール)による骨リモデリング制御)
    医薬ジャーナル社 2014
  • 網塚 憲生, 中村 浩彰, 星 和人, 小澤 英浩 
    メディカルレビュー社 2014 (ISBN: 9784779211829)
  • CKD-MBDハンドブック2nd Edition
    網塚憲生, 長谷川智香, 佐々木宗輝 (第1章 ミネラル代謝の生理 6.骨代謝回転と石灰化)
    日本メディカルセンター 2013
  • ガイドラインサポートハンドブック 慢性腎臓病に伴う骨ミネラル代謝異常(CKD-MBD)
    長谷川智香, 佐々木宗輝, 山田珠希, 網塚憲生 (CKD-MBDと骨細胞)
    医薬ジャーナル社 2013
  • 最新の骨粗鬆症学-骨粗鬆症の最新知見
    網塚憲生, 佐々木宗輝, 山田珠希, 山本恒之 (骨の細胞と組織)
    日本臨牀社 2013
  • がん骨転移のバイオオロジーとマネージメント
    長谷川智香, 佐々木宗輝, 本郷裕美, 山田珠希, 山本恒之, 網塚憲生 (転移標的臓器としての骨の解剖学・組織学)
    医薬ジャーナル社 2012
  • トートラ解剖学 第2版
    網塚 憲生 (骨組織)
    丸善株式会社 2010
  • 副甲状腺ホルモン/副甲状腺ホルモン関連ペプチド受容体とシグナル伝達
    臨床内分泌学3-甲状腺・副甲状腺・骨内分泌代謝系- 2005
  • 副甲状腺ホルモン/副甲状腺ホルモン関連ペプチド受容体遺伝子改変マウス
    臨床内分泌学3-甲状腺・副甲状腺・骨内分泌代謝系- 2005
  • 副甲状腺ホルモン関連ペプチド遺伝子改変動物
    臨床内分泌学3-甲状腺・副甲状腺・骨内分泌代謝系- 2005
  • 骨の細胞の形態と機能
    新しい透析骨症 日本メデイカルセンター 2003
  • 軟骨の形態学
    骨・関節疾患 朝倉書店 2003
  • カルシトニンの標的組織と作用「カルシウムと骨」
    朝倉書店 2001
  • 骨原生細胞「カルシウムと骨」
    朝倉書店 2001
  • 副甲状腺ホルモン関連ペプチド遺伝子組み替えマウスの軟骨・骨の異常
    医学のあゆみ 2000
  • 副甲状腺ホルモン/副甲状腺ホルモン関連タンパク受容体の機能「新・分子骨代謝学と骨粗鬆症」
    メディカルレビュー社 2000
  • The Bipartite action of parathyroid hormone(PTH)-related peptide(PTHrP)mediating by binding PTH/PTHrP receptor and translocation to nucleolus. In Recent Research Development of Endocrinology.
    Transworld Research Network. India. 2000
  • 骨端軟骨異常と副甲状腺ホルモン関連ペプチド
    骨と関節 協和企画通信 1996
  • 副甲状腺ホルモン関連ペプチド(PTHRP)と骨, 軟骨の異常について
    メディカルレビュー社 1996
  • 骨組織におけるオステオポンティンの局在について
    骨と関節 協和企画通信 1995
  • カルシトニン遺伝子関連ペプチド(CGRP)陽性神経の分布と破骨細胞(共著)
    メディカルレビュー社 1995
  • マイクロウェーブを用いた骨組織の迅速固定, 迅速脱灰(共著)
    マイクロウェーブ照射による生物試料の固定・染色法の基本とその応用 1993
  • 骨芽細胞におけるビタミンDレセプターの細胞内局在と細胞内移動
    THE BONE メディカルレビュー社 1992
  • 破骨細胞と骨芽細胞の分化・活性化における細胞間,細胞・基質間相互作用に関する形態学的見解
    骨代謝調節因子-最近の進歩羊土社 1991
  • Ultrastructural Observation of Enamel Tufts in Human Permanent Teeth
    Proceedings of Tooth Enamel V Florence Publishers 1989
  • 口腔組織発生学 第3版
    網塚 憲生 (Single work第11章 歯の研究法)
    医歯薬出版株式会社

Conference Activities & Talks

  • Microscopic imaging of osteoblasts/osteocytes in bone.  [Not invited]
    網塚 憲生
    第60回日本組織細胞化学会総会・学術集会/第13回日中合同組織細胞化学セミナー  2019/09
  • 骨粗鬆症治療薬における細胞組織・微細構造in vivo解析  [Not invited]
    網塚 憲生
    第39回日本骨形態計測学会  2019/07
  • Histological Assessment for Osteocyte Function. Special Lecture.  [Not invited]
    網塚 憲生
    International Collaborative Symposium on Development of Human Resources in Practical Oral Health and Treatment  2019/02
  • 顕微鏡の世界に魅せられて  [Not invited]
    網塚 憲生
    第20回日本骨粗鬆症学会  2018/10
  • 骨における組織化学・電顕イメージング  [Not invited]
    網塚 憲生
    第36回日本骨代謝学会学術集会  2018/07
  • 骨基質石灰化におけるリン-FGF23-Klotho axis  [Not invited]
    網塚 憲生
    第63回日本透析医学会学術集会・総会  2018/06
  • 細胞組織学・微細構造学からみた骨形成  [Not invited]
    網塚 憲生
    第38回日本骨形態計測学会  2018/06
  • テリパラチドの骨形成作用における細胞組織学的検索  [Not invited]
    網塚 憲生
    第38回日本骨形態計測学会  2018/06
  • 骨質に関する骨の微細構造と細胞群の役割  [Not invited]
    網塚 憲生
    公益社団法人日本補綴歯科学会第127回学術大会  2018/06
  • Morphological assessment for osteocyte function in bone.  [Not invited]
    網塚 憲生
    KSBMR-JSBMR joint symposium The 6th Seoul Symposium on Bone Health  2018/05
  • 顕微鏡解析からみたビスホスホネート製剤の作用機序  [Not invited]
    網塚 憲生
    第19回日本骨粗鬆症学会  2017/10
  • Osteocyte Biologyオーバービュー  [Not invited]
    網塚 憲生
    第59回歯科基礎医学会学術大会  2017/09
  • ミニモデリングと骨リモデリングにおける骨形成-組織化学・微細構造学的知見-  [Not invited]
    網塚 憲生
    第37回日本骨形態計測学会  2017/06
  • 骨の細胞に対するPTH作用の組織学的知見  [Not invited]
    網塚 憲生
    第62回日本透析医学会学術集会・総会  2017/06
  • 骨ネットワークと他臓器連関:オーバービュー  [Not invited]
    網塚 憲生
    第122回日本解剖学会総会・全国学術集会  2017/03
  • 骨質に影響を及ぼす骨の微細構造と細胞群の役割  [Not invited]
    網塚 憲生
    第16回日本再生医療学会総会  2017/03
  • 骨粗鬆症治療薬における骨の細胞・組織学的知見について-動物モデルを用いた基礎研究-  [Not invited]
    網塚 憲生
    第31回日本整形外科学会基礎学術集会  2016/10
  • 骨の細胞における微細構造・組織化学的知見  [Not invited]
    網塚 憲生
    第31回日本整形外科学会基礎学術集会  2016/10
  • 骨基質石灰化異常における微細構造学的知見  [Not invited]
    網塚 憲生
    第36回日本骨形態計測学会  2016/06
  • Overview:骨基質石灰化における微細構造学  [Not invited]
    網塚 憲生
    第121回日本解剖学会総会全国学術集会  2016/03
  • オーバービュー:骨を観る -組織化学・微細構造学からバイオイメージングへの展開-  [Not invited]
    網塚 憲生
    第57回歯科基礎医学会学術大会  2015/09
  • 骨粗鬆症治療薬における基礎から得られた新たな知見-ビスホスホネート製剤を中心として-  [Not invited]
    網塚 憲生
    第35回日本骨形態計測学会  2015/06
  • 細胞組織学からみた骨粗鬆症治療薬の作用機序  [Not invited]
    網塚 憲生
    第35回日本骨形態計測学会  2015/06
  • FIB-SEM を用いた骨組織の微細構造解析  [Not invited]
    網塚 憲生
    日本顕微鏡学会第71回学術講演会  2015/05
  • Morphological examination on anabolic effects of intermittent administration of PTH in bone.  [Not invited]
    網塚 憲生
    13th Congress of the International Societyof Bone Morphometry  2015/04
  • Histological aspects on the biological function of osteocytes.  [Not invited]
    網塚 憲生
    13th Congress of the International Society of Bone Morphometry  2015/04
  • 副甲状腺ホルモン製剤に対する骨の細胞群の反応 -組織学的知見-  [Not invited]
    網塚 憲生
    第32回日本骨代謝学会学術集会  2014/07
  • 骨細胞・ 骨細管系における形態学的アプローチ  [Not invited]
    網塚 憲生
    第32回日本骨代謝学会学術集会  2014/07
  • Histopathological examination on bisphosphonate-related osteonecrosis of the jaw (BRONJ).  [Not invited]
    網塚 憲生
    The 9th Scientific Meeting of the Asian Academy of Osseointegration  2014/07
  • Localization of 15N-minodronate by isotope microscopy and histochemical assessment for the biological effects of minodronate to bone cells in mice.  [Not invited]
    網塚 憲生
    SISS-16  2014/06
  • 骨基質石灰化の形態学  [Not invited]
    網塚 憲生
    第34回日本骨形態計測学会  2014/06
  • オーバービュー: 骨の司令塔-骨細胞-  [Not invited]
    網塚 憲生
    第55回歯科基礎医学会学術大会・総会  2013/09
  • リモデリング・ミニモデリングの観点からみたエルデカルシトールとテリパラチドの骨形成作用  [Not invited]
    網塚 憲生
    第31回日本骨代謝学会学術集会/国際骨代謝学会・日本骨代謝学会第2回合同国際会議  2013/05
  • マグネシウムは骨組織に必要か  [Not invited]
    網塚 憲生
    第32回日本マグネシウム学会学術集会  2012/11
  • 新規活性型ビタミンD₃製剤エルデカルシトールの作用機序-動物実験モデルにおける組織学的解析-  [Not invited]
    網塚 憲生
    第27回日本整形外科学会基礎学術集会  2012/10
  • 骨粗鬆症のモデル動物における骨の細胞群  [Not invited]
    網塚 憲生
    第27回日本整形外科学会基礎学術集会  2012/10
  • Bisphosphonate投与およびPTH投与モデル動物の組織学的解析-骨質変化に付随する現象-  [Not invited]
    網塚 憲生
    第30回日本骨代謝学会学術集会  2012/07
  • エルデカルシトールがin vivoの骨に及ぼす組織細胞学的作用について  [Not invited]
    網塚 憲生
    第30回日本骨代謝学会学術集会  2012/07
  • PTH投与における骨の細胞群の動向について  [Not invited]
    網塚 憲生
    第32回日本骨形態計測学会  2012/06
  • klotho欠損マウスにおける骨・血管石灰化のカルシウムパラドックス  [Not invited]
    網塚 憲生
    日本顕微鏡学会第68回学術講演会  2012/05
  • 骨細胞の細胞生理学における形態学的アプローチ  [Not invited]
    網塚 憲生
    第89回日本生理学会大会  2012/03
  • 将来の解剖学・組織学を担う歯学部学生に対する期待と取り組み  [Not invited]
    網塚 憲生
    第117回日本解剖学会総会・全国学術集会  2012/03
  • Assessment of histological alterations in cartilage and extracellular matrix driven by collagen-induced arthritis in Macaca fascicularis.  [Not invited]
    網塚 憲生
    The 1st Bio-Rheumatology International Congress (BRIC2011)  2011/11
  • Histochemical imaging of bone forming cells.  [Not invited]
    網塚 憲生
    12th Chitose International Forum on Photonics Science & Technology  2011/10
  • 血管石灰化の機序における微細構造学的アプローチ  [Not invited]
    網塚 憲生
    第53回歯科基礎医学会学術大会  2011/09
  • 骨細胞機能における形態学的アプローチ  [Not invited]
    網塚 憲生
    第29回日本骨代謝学会学術集会  2011/07
  • Histological assessment for the biological functions of PTH and PTHrP in skeletal tissue.  [Not invited]
    網塚 憲生
    Research Unit of Metabolic bone disease in Korean Endocrine Society  2011/07
  • 骨形成におけるPTHと活性型ビタミンDの作用-形態学的知見-  [Not invited]
    網塚 憲生
    第31回日本骨形態計測学会  2011/05
  • 骨細胞の機能における形態学的知見  [Not invited]
    網塚 憲生
    第88回日本生理学会大会第116回日本解剖学会総会・全国学術集会合同大会  2011/03
  • 石灰化基質に対する骨細胞の作用  [Not invited]
    網塚 憲生
    第52回歯科基礎医学会学術大会  2010/09
  • ビスフォスフォネート関連顎骨壊死(BRONJ)に対する形態学的考察  [Not invited]
    網塚 憲生
    日本学術会議会・第64回日本口腔科学会学術大会共催市民公開シンポジウム  2010/06
  • Histological assessment for PTH/PTHrP signaling on osteoblasts.  [Not invited]
    網塚 憲生
    14th international congress of endocrinology (ICE 2010)  2010/03
  • Histological assessment for biological function of osteocytic lacunar-canalicular system.  [Not invited]
    網塚 憲生
    連携機能を活用した口腔からQOL向上を目指す連携研究・国際シンポジウム  2010/02
  • 骨組織における組織化学の実際  [Not invited]
    網塚 憲生
    第27回日本骨代謝学会  2009/07
  • 骨・軟骨組織における免疫組織化学  [Not invited]
    網塚 憲生
    第29回日本骨形態計測学会  2009/05
  • 骨質を石灰化基質の微細構造から考える  [Not invited]
    網塚 憲生
    第29回日本骨形態計測学会  2009/05

Works

  • FGFR3-/-/PTHrP-/-マウスの骨格異常
    2001
  • Skeletal Abnormalities of FGFR3-/-/PTHrP-/- mouse
    2001

MISC

  • 森本康仁, 長谷川智香, 本郷裕美, 吉田靖弘, 網塚憲生, 菅谷勉  日本歯周病学会会誌(Web)  61-  142  2019/10/01  [Not refereed][Not invited]
  • 長谷川智香, 山本知真也, 本郷裕美, 宮本幸奈, 網塚憲生  季刊腎と骨代謝  32-  (4)  275‐283  2019/10/01  [Not refereed][Not invited]
  • 佐藤大, 高畑雅彦, 太田昌博, 清水智弘, 藤田諒, 小林英之, 岩崎倫政, 福田千恵, 津田英資, 網塚憲生, 長谷川智香  日本整形外科学会雑誌  93-  (8)  S1810  2019/09/09  [Not refereed][Not invited]
  • 骨代謝研究による骨粗鬆症治療の改革 小児ステロイド性骨粗鬆症に対するSiglec-15分子標的治療の有用性
    佐藤 大, 高畑 雅彦, 太田 昌博, 清水 智弘, 藤田 諒, 小林 英之, 岩崎 倫政, 福田 千恵, 津田 英資, 網塚 憲生, 長谷川 智香  日本整形外科学会雑誌  93-  (8)  S1810  -S1810  2019/09  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚憲生, 長谷川智香, 槙野彰人, 槙野彰人, 本郷裕美, 山本知真也  日本骨形態計測学会雑誌  29-  (1)  S61  2019/05/29  [Not refereed][Not invited]
  • 長谷川智香, 邱紫せん, 宮本幸奈, 山本知真也, 網塚憲生  日本骨形態計測学会雑誌  29-  (1)  S65  2019/05/29  [Not refereed][Not invited]
  • 吉野弘菜, 山本知真也, 宮本幸奈, 邱紫せん, 網塚憲生, 長谷川智香  日本骨形態計測学会雑誌  29-  (1)  S141  -S141  2019/05/29  [Not refereed][Not invited]
  • 渡邉駿, 平松里佳子, 山内真之, 諏訪部達也, 澤直樹, 平井利英, 森川鉄平, 長谷川智香, 網塚憲生, 乳原善文  日本骨形態計測学会雑誌  29-  (1)  S134  -S134  2019/05/29  [Not refereed][Not invited]
  • 長谷川智香, 山本知真也, 宮本幸奈, 邱紫せん, 網塚憲生  Bone  33-  (1)  3‐8  2019/05/20  [Not refereed][Not invited]
  • Jansen型PTH/PTHrP受容体の骨系細胞における機能異常解析
    下村 淳子, 黒木, 林 幸子, 坂井, 梨田 智子, 森田 貴雄, 網塚 憲生, 下村 裕  小児歯科学雑誌  57-  (2)  245  -245  2019/05  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン(PTH)製剤と活性型ビタミンD3製剤(エルデカルシトール)の併用投与による骨形成作用
    長谷川 智香, 山本 知真也, 宮本 幸奈, 邱 紫せん, 網塚 憲生  THE BONE  33-  (1)  3  -8  2019/05  [Not refereed][Not invited]
  • 『骨形態計測データから骨粗鬆症治療を吟味する』骨粗鬆症治療薬における細胞組織・微細構造in vivo解析
    網塚 憲生, 長谷川 智香, 槙野 彰人, 本郷 裕美, 山本 知真也  日本骨形態計測学会雑誌  29-  (1)  S61  -S61  2019/05  [Not refereed][Not invited]
  • 『画像解析技術による骨組織評価』骨特異的血管と骨細胞における組織化学・電顕イメージング
    長谷川 智香, 邱 紫せん, 宮本 幸奈, 山本 知真也, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  29-  (1)  S65  -S65  2019/05  [Not refereed][Not invited]
  • 【進化する骨粗鬆症治療薬 国内患者1,300万人のQOL向上へ】副甲状腺ホルモン製剤の骨形成作用について
    長谷川 智香, 宮本 幸奈, 山本 知真也, 網塚 憲生  日本薬理学雑誌  153-  (1)  16  -21  2019/01  [Not refereed][Not invited]
     
    骨粗鬆症治療薬の副甲状腺ホルモン(PTH)製剤として、遺伝子組み換え型ヒトPTH[1-34]であるテリパラチドが用いられている。我が国においては、連日製剤と週1回製剤の2種類が存在しており、そのどちらも骨量を増加させ、また、骨折率を低下させることが報告されている。一般的にPTHを持続投与すると骨吸収を誘導するのに対して、PTH間歇投与では骨量増加につながることが知られている。その細胞学的メカニズムとして、PTHは骨芽細胞の前駆細胞である前骨芽細胞に対して細胞増殖を亢進する一方、成熟型骨芽細胞に対しては破骨細胞とのカップリングに依存して、骨形成を促進することが報告されている。さらに、我々は、PTH間歇投与の頻度(投与間隔)の違いにより、骨の細胞群の挙動が異なることを明らかにした。PTH高頻度投与では、成熟型骨芽細胞が活発に骨基質合成を行うだけでなく、前骨芽細胞の増殖が亢進して厚い細胞性ネットワークを形成し、その中で多数の破骨細胞が誘導されていた。その結果、高骨代謝回転の骨リモデリングにより骨形成が誘導されていた。しかし、PTH低頻度投与では、成熟型骨芽細胞による骨形成が亢進するが、前骨芽細胞はあまり増加せず、よって破骨細胞形成の誘導も上昇しなかった。この場合、骨リモデリングとミニモデリングの両方によって骨形成が誘導されることが明らかにされた。このように、PTH製剤の投与頻度が異なると、骨の形態や形成のされ方が違うことが強く示唆された。以上より、PTH製剤の投与頻度によって骨形成促進における作用機序が異なると思われる。(著者抄録)
  • 津田英資, 福田千恵, 宇田川信之, 高橋直之, 長谷川智香, 網塚憲生, 佐藤大, 高畑雅彦  Journal of Oral Biosciences Supplement (Web)  2019-  43 (WEB ONLY)  2019  [Not refereed][Not invited]
  • 山本知真也, 山本知真也, 長谷川智香, 網塚憲生  日本解剖学会総会・全国学術集会講演プログラム・抄録集  124th-  163  2019  [Not refereed][Not invited]
  • 松本愛子, 松本愛子, NAZNIN Khadiza, 長谷川智香, 網塚憲生  日本解剖学会総会・全国学術集会講演プログラム・抄録集  124th-  218  2019  [Not refereed][Not invited]
  • 邱紫せん, 伊敏, 山本知真也, 李敏啓, 森本景之, 網塚憲生, 長谷川智香  日本解剖学会総会・全国学術集会講演プログラム・抄録集  124th-  142  2019  [Not refereed][Not invited]
  • 下村(黒木)淳子, 梨田智子, 森田貴雄, 大島勇人, 網塚憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement (Web)  2019-  337 (WEB ONLY)  2019  [Not refereed][Not invited]
  • 森本康仁, 長谷川智香, 邱紫せん, 松本愛子, 桐越晶子, 森谷康人, 橋本圭司, 趙申, 前壮功仁, 本郷裕美, 菅谷勉, 吉田靖弘, 網塚憲生  日本解剖学会総会・全国学術集会講演プログラム・抄録集  124th-  162  2019  [Not refereed][Not invited]
  • 宮本幸奈, 宮本幸奈, 阿部未来, 邱紫せん, 宇田川信之, 網塚憲生, 長谷川智香  日本解剖学会総会・全国学術集会講演プログラム・抄録集  124th-  142  2019  [Not refereed][Not invited]
  • 山本恒之, 長谷川智香, 本郷裕美, 網塚憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement (Web)  2019-  338 (WEB ONLY)  2019  [Not refereed][Not invited]
  • 橋本圭司, 橋本圭司, 長谷川智香, 藤澤俊明, 網塚憲生  日本解剖学会総会・全国学術集会講演プログラム・抄録集  124th-  163  2019  [Not refereed][Not invited]
  • 吉野弘菜, 吉田泰士, 宮本幸奈, QIU Z, 網塚憲生, 長谷川智香  Journal of Oral Biosciences Supplement (Web)  2019-  417 (WEB ONLY)  2019  [Not refereed][Not invited]
  • 長谷川智香, 山本知真也, 本郷裕美, 坂井貞興, 與語健二, 網塚憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement (Web)  2019-  227 (WEB ONLY)  2019  [Not refereed][Not invited]
  • 吉田泰士, 吉田泰士, 本郷裕美, 阿部未来, 阿部未来, 吉野弘菜, 吉野弘菜, 邱紫せん, 網塚憲生, 長谷川智香  日本解剖学会総会・全国学術集会講演プログラム・抄録集  124th-  125  2019  [Not refereed][Not invited]
  • 吉野弘菜, 吉野弘菜, 宮本幸奈, 邱紫せん, 阿部未来, 阿部未来, 吉田泰士, 吉田泰士, 網塚憲生, 長谷川智香  日本解剖学会総会・全国学術集会講演プログラム・抄録集  124th-  125  2019  [Not refereed][Not invited]
  • 長谷川智香, 網塚憲生  日本解剖学会総会・全国学術集会講演プログラム・抄録集  124th-  99  2019  [Not refereed][Not invited]
  • 森谷康人, 森谷康人, 伊敏, 邱紫せん, 山本知真也, 鄭漢忠, 網塚憲生, 長谷川智香  日本解剖学会総会・全国学術集会講演プログラム・抄録集  124th-  162  2019  [Not refereed][Not invited]
  • 北川 善政, 浅香 卓哉, 佐藤 淳, 秦 浩信, 坪井 香奈子, 網塚 憲生, 久下 裕司, 志賀 哲  臨床放射線  63-  (10)  1071  -1081  2018/10/10  [Not refereed][Not invited]
  • 長谷川智香, 宮本幸奈, 本郷裕美, 阿部未来, 阿部未来, 網塚憲生  日本組織細胞化学会総会・学術集会講演プログラム・予稿集  59th-  43  2018/09/29  [Not refereed][Not invited]
  • 邱紫せん, 邱紫せん, 長谷川智香, 本郷裕美, 山本知真也, 李敏啓, 伊敏, 網塚憲生  日本骨粗鬆症学会雑誌  4-  (Suppl.1)  294  2018/09/26  [Not refereed][Not invited]
  • 槙野彰人, 槙野彰人, 長谷川智香, 網塚憲生  日本骨粗鬆症学会雑誌  4-  (Suppl.1)  293  2018/09/26  [Not refereed][Not invited]
  • 長谷川智香, 宮本幸奈, 邱紫セン, 邱紫セン, 山本知真也, 本郷裕美, 松井功, 網塚憲生  日本骨粗鬆症学会雑誌  4-  (Suppl.1)  294  2018/09/26  [Not refereed][Not invited]
  • 本郷裕美, 坪井香奈子, 長谷川智香, 網塚憲生  日本骨粗鬆症学会雑誌  4-  (Suppl.1)  294  2018/09/26  [Not refereed][Not invited]
  • 小澤英浩, 長谷川智香, 網塚憲生  Bone  32-  (2)  139‐144  -144  2018/09/20  [Not refereed][Not invited]
  • 骨基質石灰化の微細構造学
    小澤 英浩, 長谷川 智香, 網塚 憲生  THE BONE  32-  (2)  139  -144  2018/09  [Not refereed][Not invited]
  • 組織化学イメージングで探る硬組織の細胞機能 電子顕微鏡を駆使した骨の細胞組織学的アプローチ
    長谷川 智香, 宮本 幸奈, 本郷 裕美, 阿部 未来, 網塚 憲生  日本組織細胞化学会総会・学術集会講演プログラム・予稿集  59回-  43  -43  2018/09  [Not refereed][Not invited]
  • 骨改造制御の新局面:骨吸収から骨形成・骨再生への橋渡し機構を探る 組織学的知見からみる骨改造
    長谷川 智香, 宮本 幸奈, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2018-  122  -122  2018/09  [Not refereed][Not invited]
  • 長谷川智香, 宮本幸奈, 本郷裕美, 山本知真也, 網塚憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement (Web)  2018-  ROMBUNNO.P1‐50 (WEB ONLY)  -270  2018/09  [Not refereed][Not invited]
  • 山本恒之, 長谷川智香, 本郷裕美, 網塚憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement (Web)  2018-  ROMBUNNO.P2‐13 (WEB ONLY)  -369  2018/09  [Not refereed][Not invited]
  • 下村(黒木)淳子, 梨田智子, 森田貴雄, 網塚憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement (Web)  2018-  ROMBUNNO.P3‐13 (WEB ONLY)  -446  2018/09  [Not refereed][Not invited]
  • 本郷裕美, 坪井香奈子, 長谷川智香, 網塚憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement (Web)  2018-  ROMBUNNO.P1‐51 (WEB ONLY)  -271  2018/09  [Not refereed][Not invited]
  • 佐藤大, 高畑雅彦, 太田昌博, 清水智弘, 福田千恵, 岡田顕子, 津田英資, 濱野博基, 長谷川智香, 網塚憲生, 岩崎倫政  日本整形外科学会雑誌  92-  (8)  S1704  -S1704  2018/08/30  [Not refereed][Not invited]
  • 長谷川智香, 宮本幸奈, 邱紫せん, 阿部未来, 本郷裕美, 網塚憲生  日本骨粗鬆症学会雑誌  4-  (3)  394‐396  -396  2018/08/28  [Not refereed][Not invited]
     
    生後7週齢aklotho遺伝子変異(kl/kl)マウス、aklotho遺伝子欠損マウスの大腿骨・脛骨及び大動脈を用い、FGF23/klothoシグナルが与える基質石灰化への影響について検討した。大腿骨、脛骨、大動脈は組織化学的、微細構造学的な解析を行った。また、2種類のマウスの基質石灰化異常を引き起こすのが血中リン・カルシウム濃度異常おるいはFGF23/klothoシグナルの局所作用であるかを明らかにする目的で、血中リン濃度離乳後3週間低リン食で飼育したkl/klマウス、aklotho遺伝子欠損マウスについても同様に解析した。その結果、FGF23/klothoシグナルの破綻は、骨組織では骨細胞および骨芽細胞の機能異常を生じて骨基質の石灰化異常を誘導し、大動脈では血管平滑筋細胞が骨芽細胞様細胞に変化し血管石灰化及び血管骨化を誘導することを示唆した。これらの異常は血中リン濃度の是正で回復しないことより、FGF23/klothoシグナル自体が影響していると考えられた。
  • イメージング最前線 骨における組織化学・電顕イメージング
    網塚 憲生, 長谷川 智香  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  36回-  119  -119  2018/07  [Not refereed][Not invited]
  • 小児骨粗鬆症に対するSiglec-15分子標的治療の有用性 成長骨格発達に影響の生じない骨吸収抑制薬の開発
    佐藤 大, 高畑 雅彦, 太田 昌博, 清水 智弘, 福田 千恵, 津田 英資, 濱野 博基, 平塚 重人, 藤田 諒, 網塚 憲生, 長谷川 智香, 岡田 顕子, 岩崎 倫政  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  36回-  160  -160  2018/07  [Not refereed][Not invited]
  • Fgf23遺伝子欠損マウスの骨基質石灰化異常におけるSIBLING familyの局所作用
    長谷川 智香, 邱 紫セン, 山本 知真也, 本郷 裕美, 松井 功, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  36回-  170  -170  2018/07  [Not refereed][Not invited]
  • マウスにabaloparatideまたはteriparatideを皮下投与した時の骨量及び骨代謝に及ぼす作用の比較
    槙野 彰人, 長谷川 智香, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  36回-  184  -184  2018/07  [Not refereed][Not invited]
  • イメージング最前線 骨における組織化学・電顕イメージング
    網塚 憲生, 長谷川 智香  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  36回-  119  -119  2018/07  [Not refereed][Not invited]
  • 槙野彰人, 槙野彰人, 長谷川智香, 網塚憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  36th-  184  -184  2018/07  [Not refereed][Not invited]
  • 長谷川智香, QIU Zixuan, 山本知真也, 本郷裕美, 松井功, 網塚憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  36th-  170  -170  2018/07  [Not refereed][Not invited]
  • 佐藤大, 高畑雅彦, 太田昌博, 清水智弘, 福田千恵, 津田英資, 濱野博基, 平塚重人, 藤田諒, 網塚憲生, 長谷川智香, 岡田顕子, 岩崎倫政  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  36th-  160  -160  2018/07  [Not refereed][Not invited]
  • 補綴治療に求められる骨質を科学する 骨質に関する骨の微細構造と細胞群の役割
    網塚 憲生, 長谷川 智香  日本補綴歯科学会誌  10-  (特別号)  85  -85  2018/06  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚憲生, 長谷川智香, 邱紫旋, 本郷裕美  日本透析医学会雑誌  51-  (Supplement 1)  387  2018/05/28  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚憲生, 長谷川智香, 山本知真也, 本郷裕美  日本骨形態計測学会雑誌  28-  (2)  S100  -S100  2018/05/25  [Not refereed][Not invited]
  • 長谷川智香, 邱紫せん, 山本知真也, 本郷裕美, 松井功, 網塚憲生  日本骨形態計測学会雑誌  28-  (2)  S155  -S155  2018/05/25  [Not refereed][Not invited]
  • 阿部未来, 長谷川智香, 網塚憲生  日本骨形態計測学会雑誌  28-  (2)  S164  -S164  2018/05/25  [Not refereed][Not invited]
  • 佐藤大, 高畑雅彦, 太田昌博, 清水智弘, 福田千恵, 岡田顕子, 津田英資, 長谷川智香, 網塚憲生, 岩崎倫政  日本骨形態計測学会雑誌  28-  (2)  S145  -S145  2018/05/25  [Not refereed][Not invited]
  • 長谷川智香, 本郷裕美, 邱紫せん, 網塚憲生, 阿部未来  Bone  32-  (1)  3‐8  -8  2018/05/25  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚憲生, 山本知真也, 本郷裕美, 邱紫せん, 長谷川智香  日本骨形態計測学会雑誌  28-  (2)  S89  -S89  2018/05/25  [Not refereed][Not invited]
  • リン-FGF23-Klotho axis:臨床から基礎へ 骨基質石灰化におけるリン-FGF23-Klotho axis
    網塚 憲生, 長谷川 智香, 邱 紫旋, 本郷 裕美  日本透析医学会雑誌  51-  (Suppl.1)  387  -387  2018/05  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺摘除後に顕在化した長期透析患者のBrown tumorの一例
    鳥生 直哉, 上野 智敏, 水野 裕樹, 渡邉 駿, 小黒 昌彦, 大島 洋一, 井熊 大輔, 関根 章成, 早見 典子, 住田 圭一, 山内 真之, 長谷川 詠子, 星野 純一, 澤 直樹, 乳原 善文, 高市 憲明, 藤井 丈士, 長谷川 智香, 網塚 憲生  日本透析医学会雑誌  51-  (Suppl.1)  543  -543  2018/05  [Not refereed][Not invited]
  • リン-FGF23-Klotho axis:臨床から基礎へ 骨基質石灰化におけるリン-FGF23-Klotho axis
    網塚 憲生, 長谷川 智香, 邱 紫旋, 本郷 裕美  日本透析医学会雑誌  51-  (Suppl.1)  387  -387  2018/05  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺摘除後に顕在化した長期透析患者のBrown tumorの一例
    鳥生 直哉, 上野 智敏, 水野 裕樹, 渡邉 駿, 小黒 昌彦, 大島 洋一, 井熊 大輔, 関根 章成, 早見 典子, 住田 圭一, 山内 真之, 長谷川 詠子, 星野 純一, 澤 直樹, 乳原 善文, 高市 憲明, 藤井 丈士, 長谷川 智香, 網塚 憲生  日本透析医学会雑誌  51-  (Suppl.1)  543  -543  2018/05  [Not refereed][Not invited]
  • 坪井香奈子, 長谷川智香, 邱紫せん, 網塚憲生  Bone  31-  (4)  345‐350  -350  2018/01/31  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚憲生, QIU Zixuan, 山本知真也, 長谷川智香  バイオマテリアル  36-  (1)  34‐37  -37  2018/01/19  [Not refereed][Not invited]
     
    骨再生を誘導するバイオマテリアルには骨誘導能あるいは骨伝導能を有するものがあり、骨欠損の大きさや形状、また、欠損部の微細環境に適応した様々なバイオマテリアルが開発されている。一方で、骨形成には、骨の形づくりであるモデリングと骨の置換えである骨リモデリングがある。骨を再生する場合、破骨細胞と骨芽細胞との細胞学的カップリングを基盤とした骨リモデリングによって、幼弱骨から緻密骨へと成熟させてゆく必要がある。再生骨の最終的なゴールは、力学負荷の感知や骨強度を備えた成熟骨の形成にあると思われる。(著者抄録)
  • 網塚 憲生, 邱 紫璇, 山本 知真也, 長谷川 智香  バイオマテリアル = Journal of Japanese Society for Biomaterials : 生体材料  36-  (1)  34  -37  2018/01  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚憲生, 長谷川智香  日本補綴歯科学会誌(Web)  10-  85 (WEB ONLY)  2018  [Not refereed][Not invited]
  • 長谷川智香, 宮本幸奈, 網塚憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement (Web)  2018-  ROMBUNNO.UDS09‐1 (WEB ONLY)  2018  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚憲生, 長谷川智香  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  36th-  119  2018  [Not refereed][Not invited]
  • 前壮功仁, 前壮功仁, 山本知真也, 趙申, 邱紫せん, 長谷川智香, 山崎裕, 網塚憲生  日本解剖学会総会・全国学術集会講演プログラム・抄録集  123rd-  178  2018  [Not refereed][Not invited]
  • 吉野弘菜, 吉野弘菜, 長谷川智香, 邱紫せん, 坪井香奈子, 本郷裕美, 網塚憲生  日本解剖学会総会・全国学術集会講演プログラム・抄録集  123rd-  179  2018  [Not refereed][Not invited]
  • 佐藤大, 高畑雅彦, 太田昌博, 清水智弘, 福田千恵, 津田英資, 濱野博基, 平塚重人, 藤田諒, 網塚憲生, 長谷川智香, 岡田顕子, 岩崎倫政  北海道整形災害外科学会  135th-  21  2018  [Not refereed][Not invited]
  • 長谷川智香, 網塚憲生  日本解剖学会総会・全国学術集会講演プログラム・抄録集  123rd-  98  2018  [Not refereed][Not invited]
  • 長谷川 智香, 宮本 幸奈, 邱 紫璇, 阿部 未来, 本郷 裕美, 網塚 憲生  日本骨粗鬆症学会雑誌 = The journal of Japan Osteoporosis Society  4-  (3)  394  -396  2018  [Not refereed][Not invited]
  • 長谷川智香, 網塚憲生  Clinical Calcium  27-  (12)  1713‐1722  -1722  2017/11/28  [Not refereed][Not invited]
     
    ヒトの発生期や成長期では骨の形づくりであるモデリングが主に認められるが,成人では骨の置き換えである骨リモデリングが優位を占める。また,モデリングは骨全体の形づくりであるマクロモデリングと顕微レベルでの形づくりであるミニモデリングに分けて考えることができる。ミニモデリングとは,破骨細胞の骨吸収に依存せず,休止期骨芽細胞が活性化し活性型骨芽細胞となって,既存骨の上に新しい骨を添加してゆく現象である。骨粗鬆症治療薬であるエルデカルシトール(ビタミンDアナログ製剤)とテリパラチド(遺伝子組換えヒト副甲状腺ホルモン1-34)はミニモデリングを誘導することが知られている。ミニモデリングを組織学的に観察すると,基質合成を盛んに行う活性型骨芽細胞が新生骨の表面に局在するが,その周囲では,前骨芽細胞の厚い細胞性ネットワークの発達が悪く,また,破骨細胞もあまり誘導されない。ここでは,骨リモデリングとモデリング・ミニモデリングにおける組織学的特徴を述べたい。(著者抄録)
  • 網塚 憲生  日本骨粗鬆症学会雑誌  3-  (4)  427  -430  2017/11  [Not refereed][Not invited]
     
    骨粗鬆症と関連する歯科領域の最新の研究を取り上げた。本稿では以下の項目で述べた。1)歯周組織の再生、2)歯科領域の細胞生物学、3)薬剤関連顎骨壊死。歯科領域における骨再生は、複雑な形状を示す歯槽骨が足場となること、その一方で上皮組織の侵入や口腔内細菌からの感染を防ぐ必要があることから、さまざまな組織再生技術が開発されてきた。近年では、患者の自家血からplatelet-rich plasma(PRP)を作成し、それを抜歯窩に充填することで抜歯窩の治癒促進および良好な骨再生が可能となっている。また、2017年には、歯のエナメル質形成や象牙質形成にかかわる新しい因子や既知の因子の新規作用が発見されている。
  • 長谷川智香, 網塚憲生  Bone  31-  (3)  239‐244  -244  2017/10/10  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚憲生  日本骨粗鬆症学会雑誌  3-  (Suppl.1)  220  -220  2017/09/20  [Not refereed][Not invited]
  • 土屋恵李佳, 土屋恵李佳, 長谷川智香, 北川善政, 網塚憲生  北海道歯学雑誌  38-  (1)  59‐60  2017/09/15  [Not refereed][Not invited]
  • 八木沼 洋行, 松村 讓兒, 藤山 文乃, 中村 桂一郎, 網塚 憲生, 一條 裕之, 瀬藤 光利, 柴田 昌宏, 渡辺 雅彦  解剖学雑誌 = Acta anatomica Nipponica  92-  2  -8  2017/09  [Not refereed][Not invited]
     
    日本解剖学会教育・若手育成委員会は、研究医の養成に関する取組の実施状況と、若手研究者のキャリアアップを解剖学会としてどのように支援すべきかについての会員の意向を知ることを目的としてアンケート調査を行った。研究医の養成に関する取組で、この5年間の変化で特筆すべきことは、希望する学生を対象とした研究医養成コースの実施が、医学部では半数以上、歯学部でも4分の1程度までに増えており、履修者も多い状況となっていることである。多くの場合、このコースの履修によって大学院の履修期間の短縮、入学金や授業料の減免、奨学会や学会参加費の支援が行われ、さらに、大学間の連携で研修やリトリートも行われている。分野別認証評価導入の影響については、過度の臨床中心のカリキュラムを懸念する回答が多かったが、良い結果となったとする回答もあった。新専門医制度の導入については、回答者の約6割が、研究医を目指す人材がさらに少なくなることを懸念していた。今後の若手育成における学会の役割については、以下のような意見が寄せられた。(1)これまでの取組の維持・発展、(2)表彰制度の拡充、(3)経済的支援や負担軽減、(4)若手間や他分野の研究者との交流促進(若手の会の結成)、(5)研究情報交流の促進、(6)教育能力向上のための各種セミナーや合宿の実施、(7)教育能力に関する認定制度の導入、(8)キャリアアップ支援の強化、(9)その他。(著者抄録)
  • 土屋 恵李佳, 長谷川 智香, 北川 善政, 網塚 憲生  北海道歯学雑誌  38-  (1)  59  -60  2017/09  [Not refereed][Not invited]
     
    骨形成の機序は,骨の発生・成長の場で生じるモデリングと古い骨を新しい骨に置き換えるリモデリング(骨改造)に大別される. 成長期の長骨(長管骨)における軟骨内骨化では,血管の軟骨侵入により石灰化軟骨基質が露出し,そこに骨芽細胞が骨形成を行うといったモデリングが認められる.本稿では,軟骨内骨化のモデリングにより骨形成が誘導される領域,すなわち,骨幹端領域において,近年,注目を集めている骨特異性血管の存在や,septoclast(別名:perivascular cell)について紹介する.
  • 最新の歯学 軟骨内骨化における骨特異的血管とseptoclastの組織学的知見
    土屋 恵李佳, 長谷川 智香, 北川 善政, 網塚 憲生  北海道歯学雑誌  38-  (1)  59  -60  2017/09  [Not refereed][Not invited]
  • Osteocyte Biologyアップデート 骨芽細胞から骨細胞へ 微細構造学的知見
    長谷川 智香, 永井 伯弥, 本郷 裕美, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2017-  147  -147  2017/09  [Not refereed][Not invited]
  • 骨代謝調節機構における新しい研究展開 骨基質石灰化における局所リン酸供与とFGF23/klothoシグナル
    長谷川 智香, 本郷 裕美, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2017-  170  -170  2017/09  [Not refereed][Not invited]
  • 骨端板に侵入する毛細血管の形態に関する走査型電子顕微鏡観察
    山本 恒之, 長谷川 智香, 本郷 裕美, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2017-  419  -419  2017/09  [Not refereed][Not invited]
  • 大宮俊宣, 廣瀬旬, 宮本健史, 長谷川智香, 網塚憲生, 田中栄  日本整形外科学会雑誌  91-  (8)  S1648  -S1648  2017/08/31  [Not refereed][Not invited]
  • kl/klマウスにおける基質小胞性石灰化の抑制メカニズムについて
    長谷川 智香, 山本 知真也, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  35回-  168  -168  2017/07  [Not refereed][Not invited]
  • 腱・靱帯付着部(enthesis)においてAnnexin A5は線維軟骨の分化を負に制御する
    島田 明美, 新井 嘉則, 小松 浩一郎, 和田 悟史, 出野 尚, 中島 和久, 山下 照仁, 江面 陽一, 網塚 憲生, 中村 芳樹, 二藤 彰  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  35回-  170  -170  2017/07  [Not refereed][Not invited]
  • 骨芽細胞特異的PTHrP過剰発現マウスの骨における組織化学・微細構造学的解析
    山本 知真也, 長谷川 智香, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  35回-  175  -175  2017/07  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚憲生, 長谷川智香  日本透析医学会雑誌  50-  (Supplement 1)  385  2017/05/28  [Not refereed][Not invited]
  • 工藤愛, 長谷川智香, 網塚憲生  日本骨形態計測学会雑誌  27-  (1)  S114  -S114  2017/05/22  [Not refereed][Not invited]
  • 長谷川智香, 網塚憲生  日本骨形態計測学会雑誌  27-  (1)  S109  -S109  2017/05/22  [Not refereed][Not invited]
  • 山本知真也, 山本知真也, 長谷川智香, 網塚憲生  日本骨形態計測学会雑誌  27-  (1)  S99  -S99  2017/05/22  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚憲生, 長谷川智香, 山本知真也  日本骨形態計測学会雑誌  27-  (1)  S88  -S88  2017/05/22  [Not refereed][Not invited]
  • 長谷川智香, 網塚憲生  日本骨形態計測学会雑誌  27-  (1)  S57  2017/05/22  [Not refereed][Not invited]
  • 電子顕微鏡・光学顕微鏡による最先端・骨イメージング FIB-SEMを用いた骨の細胞群の三次元微細構造イメージング
    長谷川 智香, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  27-  (1)  S57  -S57  2017/05  [Not refereed][Not invited]
  • 二次性副甲状腺機能亢進症治療の新たな知見 骨の細胞に対するPTH作用の組織学的知見
    網塚 憲生, 長谷川 智香  日本透析医学会雑誌  50-  (Suppl.1)  385  -385  2017/05  [Not refereed][Not invited]
  • 長谷川智香, 彦根久美子, 土屋恵李佳, 工藤愛, 山本恒之, 網塚憲生  Bone  31-  (1)  3‐8  -8  2017/04/20  [Not refereed][Not invited]
  • エルデカルシトールは閉経後骨粗鬆症患者においてミニモデリング骨形成を誘導する
    堀内 圭輔, 日方 智宏, 長谷川 智香, 藤田 順之, 岩波 明生, 渡邉 航太, 石井 賢, 中村 雅也, 網塚 憲生, 松本 守雄  日本整形外科学会雑誌  91-  (2)  S640  -S640  2017/03  [Not refereed][Not invited]
  • ミノドロネートの骨組織分布および破骨細胞に対する作用
    本郷 裕美, 佐々木 宗輝, 長谷川 智香, 坪井 香奈子, 網塚 憲生  THE BONE  30-  (4)  303  -307  2017/01  [Not refereed][Not invited]
  • 骨・運動器領域の基礎研究の国内外の動向
    高橋 直之, 西村 理行, 竹田 秀, 網塚 憲生, 高柳 広  THE BONE  30-  (4)  389  -397  2017/01  [Not refereed][Not invited]
  • 骨の組織・微細構造 顕微解剖学的知見
    長谷川 智香, 網塚 憲生  PAIN RESEARCH  31-  (4)  210  -219  2016/12  [Not refereed][Not invited]
     
    骨組織は、骨基質や血管、神経に加えて、骨芽細胞、破骨細胞、骨細胞といった様々な細胞から構成される複雑な組織である。近年、骨組織に存在する神経が、これら骨の細胞群の機能を調節する可能性が示唆されており、骨に分布する神経は多彩な機能を有していると考えられる。骨に存在する細胞群の構造と役割を中心に概説すると共に、現在考えられている骨痛に対する考察、そして、骨に分布する感覚神経が骨の細胞群に与える影響について概説した。
  • 接着性を有するMTA含有直接覆髄材の開発
    戸井田 侑, 川野 晋平, 丁 世俊, 長谷川 智香, チョウドリ・アルマス, サイケオ・ピポップ, アハメッド・ズバエル, 成徳 英理, 勝俣 愛一郎, 福澤 尚幸, 松本 真理子, 角田 晋一, 星加 修平, 池田 考績, 田中 享, 島田 康史, 田上 順次, 網塚 憲生, 吉田 靖弘, 佐野 英彦  特定非営利活動法人日本歯科保存学会学術大会プログラムおよび講演抄録集  145回-  24  -24  2016/10  [Not refereed][Not invited]
  • 内眼解剖学教育に関するアンケート調査結果(平成26年3月)
    八木沼 洋行, 松村 讓兒, 佐藤 洋一, 飯野 哲, 鶴尾 吉宏, 大和田 祐二, 藤山 文乃, 網塚 憲生, 日本解剖学会教育, 若手育成委員会  解剖学雑誌  91-  (4)  33  -40  2016/09  [Not refereed][Not invited]
     
    日本解剖学会教育・若手育成委員会は、(1)肉眼解剖学教育の現状と課題の把握、(2)肉眼解剖学教育における教育効果を高めるための取組に関する情報交換の促進を目的として、平成25年9月にアンケート調査を行った。肉眼解剖学の授業と実習は、多くの大学で第2学年に行われており、肉眼解剖学実習の平均回数は医学部で34.6回、歯学部で27.4回、正規の平均総時間数は125時間と97時間であった。ただし、8割の大学で正規時間だけでは足らず、実習時間の相当の延長を行っていた。教育認証制度の導入に対応するためのカリキュラム改訂が進んでいるが、今のところ、実習時期が早くなる以外の影響は少ないという結果であった。医学部の入学定員増の影響として、教員増なしの教育負担増による研究等への影響を心配する声が多かった。また、設備や献体数の制約から一体あたりの学生数を増やさざるを得なかったという回答もあった。教育上有効と思われる取組として、教材や剖出手順の工夫、臨床医による関連の講義や実習指導の導入、高学年での2回目の解剖学実習の採用など、他の参考となる多数の実践例が寄せられた。自由意見として、解剖学教育を担う若手人材の育成システムの必要性、教育に関する情報交換の機会の重要性を訴える声が多かった。(著者抄録)
  • II型糖尿病モデルSDT fattyラットにおける下顎骨歯周組織の組織化学的検索
    吉田 泰士, 本郷 裕美, 坪井 香奈子, 長谷川 智香, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2016-  418  -418  2016/09  [Not refereed][Not invited]
  • c-fos遺伝子欠損マウスの骨細胞における微細構造学的検索
    阿部 未来, 長谷川 智香, 山本 知真也, 土屋 恵李佳, 宇田川 信之, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2016-  421  -421  2016/09  [Not refereed][Not invited]
  • 骨組織におけるFGF23産生細胞の経時的局在変化について
    櫻井 敦中, 長谷川 智香, 山本 知真也, 佐野 英彦, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2016-  480  -480  2016/09  [Not refereed][Not invited]
  • オスミウム浸軟法による破骨細胞のゴルジ装置の立体微細構造および分布に関する走査型電子顕微鏡観察
    山本 恒之, 坪井 香奈子, 長谷川 智香, 本郷 裕美, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2016-  492  -492  2016/09  [Not refereed][Not invited]
  • 八木沼 洋行, 松村 讓兒, 佐藤 洋一, 飯野 哲, 鶴尾 吉宏, 大和田 祐二, 藤山 文乃, 網塚 憲生  解剖学雑誌 = Acta anatomica Nipponica  91-  (4)  33  -40  2016/09  [Not refereed][Not invited]
  • 骨粗鬆症治療薬における骨の細胞・組織学的知見について 動物モデルを用いた基礎研究
    網塚 憲生  日本整形外科学会雑誌  90-  (8)  S1439  -S1439  2016/08  [Not refereed][Not invited]
  • 骨の細胞における微細構造・組織化学的知見
    網塚 憲生, 長谷川 智香  日本整形外科学会雑誌  90-  (8)  S1653  -S1653  2016/08  [Not refereed][Not invited]
  • 低リン食給餌がkl/klマウスおよびa klotho-/-マウスの骨・血管石灰化に及ぼす組織学的影響
    長谷川 智香, 山本 知真也, 本郷 裕美, 坪井 香奈子, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  34回-  184  -184  2016/07  [Not refereed][Not invited]
  • 軟骨内骨化における血管内皮細胞とperivascular cellの細胞間連携に関する組織化学的検索
    土屋 恵李佳, 本郷 裕美, 山本 知真也, 長谷川 智香, 宇田川 信之, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  34回-  186  -186  2016/07  [Not refereed][Not invited]
  • ステロイド長期使用の関節リウマチ患者は骨粗鬆症治療に関わらず骨質異常が生じ骨脆弱性を引き起こす
    清水 智弘, 高畑 雅彦, 山田 悟史, 山本 知真也, 長谷川 智香, 濱野 博基, 太田 昌博, 平塚 重人, 亀田 裕亮, 但野 茂, 網塚 憲生, 岩崎 倫政  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  34回-  208  -208  2016/07  [Not refereed][Not invited]
  • Annexin a5による腱・靱帯付着部(enthesis)における軟骨層の肥大化と石灰化の調節
    島田 明美, 新井 嘉則, 和田 悟史, 出野 尚, 中島 和久, 小松 浩一郎, 山下 照仁, 江面 陽一, 網塚 憲生, 中村 芳樹, 二藤 彰  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  34回-  214  -214  2016/07  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン(PTH)単回投与後における骨の細胞群の組織化学的変化について
    山本 知真也, 長谷川 智香, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  34回-  216  -216  2016/07  [Not refereed][Not invited]
  • 新規肥満2型糖尿病モデルSDT fattyラットの骨組織の組織化学的変化について
    坪井 香奈子, 本郷 裕美, 山本 知真也, 長谷川 智香, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  34回-  218  -218  2016/07  [Not refereed][Not invited]
  • III型Na依存性リン酸輸送担体による過剰なリン酸負荷は大動脈壁における弾性線維の構造を劣化させる
    吉野 寧維, 半田 佐保子, 四馬田 恵, 鈴木 敦詞, 長谷川 智香, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  34回-  219  -219  2016/07  [Not refereed][Not invited]
  • 授乳期のカルシウム欠乏食給餌マウスにおける骨細胞周囲の骨基質の微細構造学的変化について
    本郷 裕美, 佐々木 宗輝, 斎藤 雅美, 宇田川 信之, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  34回-  228  -228  2016/07  [Not refereed][Not invited]
  • 骨の痛み 骨の組織・微細構造 顕微解剖学的知見
    長谷川 智香, 網塚 憲生  PAIN RESEARCH  31-  (2)  52  -52  2016/06  [Not refereed][Not invited]
  • クル病、骨軟化症を考える 骨基質石灰化異常における微細構造学的知見
    網塚 憲生, 長谷川 智香  日本骨形態計測学会雑誌  26-  (1)  S71  -S71  2016/06  [Not refereed][Not invited]
  • 骨芽細胞特異的PTHrP過剰発現マウスの下顎骨・長管骨における組織化学・微細構造学的解析
    山本 知真也, 長谷川 智香, 小守 壽文, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  26-  (1)  S115  -S115  2016/06  [Not refereed][Not invited]
  • 軟骨内骨化における血管内皮細胞とperivascular cell(septoclast)の組織化学・微細構造学的検索
    土屋 恵李佳, 本郷 裕美, 山本 知真也, 長谷川 智香, 北川 善政, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  26-  (1)  S123  -S123  2016/06  [Not refereed][Not invited]
  • ステロイド長期使用のRA患者は骨粗鬆症治療に関わらず骨質異常が生じ骨脆弱性を引き起こす
    清水 智弘, 高畑 雅彦, 山田 悟史, 山本 知真也, 長谷川 智香, 亀田 裕亮, 太田 昌博, 但野 茂, 網塚 憲生, 岩崎 倫政  日本骨形態計測学会雑誌  26-  (1)  S157  -S157  2016/06  [Not refereed][Not invited]
  • 【骨免疫学〜境界を越えて!〜】骨組織を構成する細胞群と血管系の連関
    長谷川 智香, 土屋 恵李佳, 阿部 未来, 網塚 憲生  Clinical Calcium  26-  (5)  677  -682  2016/04  [Not refereed][Not invited]
     
    骨の長軸方向の成長は軟骨内骨化によって成し遂げられ、そこには、血管内皮細胞を中心とした複雑な細胞連関や微細環境が形成されている。血管内皮細胞は石灰化軟骨基質の間に存在する未石灰化横隔壁を壊しながら進むことで、石灰化軟骨基質が露出し、その表面に骨芽細胞が骨基質合成を行う。骨・軟骨移行部では、マクロファージではなくperivascular cellが存在し、細胞・基質の残渣を処理すると考えられている。さらに、この部位では破骨細胞から骨芽細胞へのカップリングを基盤とした骨リモデリングではなく、モデリングによって骨芽細胞が新生骨を形成している。近年、骨に特異的な血管のサブタイプが報告されている。それは、CD31hi Emcnhiを示すtype H血管であり、その周囲にosterix陽性の骨原性細胞やPDGFRβ(platelet-derived growth factor receptor β)陽性間葉系細胞が近接しており、type H血管は血管新生能力を有しているという。このtype H血管は、Hif1αがその形成に重要な因子であることを推察している。ここでは、特に軟骨内骨化における血管内皮細胞の組織学的・微細構造学的特徴と、近年の報告をご紹介する。(著者抄録)
  • Hasegawa Tomoka, Amizuka Norio  PAIN RESEARCH  31-  (4)  210  -219  2016  [Not refereed][Not invited]
     
    <p>Bone is a supporting tissue consisting of a variety of bone cells (osteo blasts,osteoclasts, osteocytes), calcified bone matrix, blood vessels, nerves and so forth.<b> </b>Bone diseases — osteoporosis, bone fracture, arthritis, bone metastasis — often induce bone pain, presumably due to various kinds of nociceptors linked to the signaling in sensory nerves.<b> </b>Nociceptive pain in bone is caused by several stimuli of acid secreted by osteoclasts, physiochemical damaging on peripheral nerves, ATPs, prostaglandins, and so forth.<b> </b>However, precious knowledge on the biological function of bone cells may provide a clue for better understanding on the cellular mechanism of bone pain.<b> </b>In a physiological state, normal bone is always remodeled by balanced osteoclastic bone resorption and subsequent osteoblastic bone formation.<b> </b>Osteocytes connect to neighboring osteocytes and to osteoblasts on the bone surface by means of thin cytoplasmic processes that go through narrow passageways. <i>i.e., </i>osteocytic canaliculi, and thereby building functional syncytia referred to as osteocytic lacunar–canalicular system.<b> </b>Thus, osteocytes are at the center of bone turnover's mainframe.<b> </b>In this review, we will introduce histological and ultrastructural aspects of bone cells, and give a rough outline of bone pain.</p>
  • Amizuka Norio, Hongo Hiromi, Tsuboi Kanako, Hasegawa Tomoka, Yamamoto Tomomaya, Haraguchi Mai  KENBIKYO  50-  (3)  191  -196  2015/12  [Not refereed][Not invited]
     
    <p>Osteoblasts, bone-forming cells, synthesize a huge amount of type I collagen and mineralize extracellular matrix. Osteoblasts gradually differentiate into osteocytes embedded in bone matrix.  Osteoblasts and osteocytes extend their cytoplasmic processes passing through the narrow passageway referred to as osteocytic canaliculi, consequently forming the functional syncytium. Osteoclasts, multinucleated giant cells, are responsible for bone resorption. Osteoclasts secrete abundant proton and proteolytic enzymes, <i>e.g.,</i> cathepsin K and MMP-9 through the ruffled border, deeply folding of the cell membrane facing the bone surface. In a normal state, bone matrix is always metabolized: osteoclasts resorb old bone, while osteoblasts migrate and deposit new bone onto where osteoclasts previously resorbed. The replacement of old bone to new bone is called bone remodeling. Bone remodeling is based on cellular coupling between osteoclasts and osteoblasts.</p>
  • 骨の細胞イメージング-a new horizon-骨のメカニズムをどこまで観ることができるか オーバービュー 骨を観る 組織化学・微細構造学からバイオイメージングへの展開
    網塚 憲生, 長谷川 智香, 坪井 香奈子, 本郷 裕美, 原口 真衣, 山本 知真也  Journal of Oral Biosciences Supplement  2015-  98  -98  2015/09  [Not refereed][Not invited]
  • 骨の細胞イメージング-a new horizon-骨のメカニズムをどこまで観ることができるか SIM・FIB-SEM・原子間力顕微鏡・同位体顕微鏡を用いた骨組織解析への応用
    長谷川 智香, 坪井 香奈子, 本郷 裕美, 山本 知真也, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2015-  99  -99  2015/09  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン投与ならびに授乳期にカルシウム欠乏食投与によって誘導される骨細胞周囲の骨基質変化について
    本郷 裕美, 佐々木 宗輝, 斎藤 雅美, 宇田川 信之, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2015-  171  -171  2015/09  [Not refereed][Not invited]
  • 軟骨内骨化における血管内皮細胞の微細構造学的検索
    土屋 恵李佳, 本郷 裕美, 山本 知真也, 長谷川 智香, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2015-  172  -172  2015/09  [Not refereed][Not invited]
  • 糖尿病が骨細胞に与える組織化学的影響について SDT fattyラットを用いた解析
    坪井 香奈子, 本郷 裕美, 長谷川 智香, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2015-  173  -173  2015/09  [Not refereed][Not invited]
  • PTHの投与頻度の違いによるリモデリング・ミニモデリングを基盤とした骨形成
    山本 知真也, 長谷川 智香, 本郷 裕美, 原口 真衣, 織田 公光, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2015-  199  -199  2015/09  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン投与ならびに授乳期にカルシウム欠乏食投与によって誘導される骨細胞周囲の骨基質変化について
    本郷 裕美, 佐々木 宗輝, 斎藤 雅美, 宇田川 信之, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2015-  307  -307  2015/09  [Not refereed][Not invited]
  • 糖尿病が骨細胞に与える組織化学的影響について SDT fattyラットを用いた解析
    坪井 香奈子, 本郷 裕美, 長谷川 智香, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2015-  308  -308  2015/09  [Not refereed][Not invited]
  • 軟骨内骨化における血管内皮細胞の微細構造学的検索
    土屋 恵李佳, 本郷 裕美, 山本 知真也, 長谷川 智香, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2015-  311  -311  2015/09  [Not refereed][Not invited]
  • 骨芽細胞特異的副甲状腺ホルモン関連ペプチド(PTHrP)トランスジェニックマウスにおける歯胚および歯槽骨の組織化学的検索
    山崎 七愛, 山本 知真也, 長谷川 智香, 本郷 裕美, 原口 真衣, 織田 公光, 小守 壽文, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2015-  538  -538  2015/09  [Not refereed][Not invited]
  • c-fos遺伝子欠損マウスにおける骨芽細胞・骨細胞の微細構造学的検索
    阿部 未来, 本郷 裕美, 山本 知真也, 長谷川 智香, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2015-  542  -542  2015/09  [Not refereed][Not invited]
  • PTHからELDへ切替投与した閉経性骨粗鬆症モデルラットにおける骨組織検索
    本郷 裕美, 坂井 貞興, 山本 知真也, 長谷川 智香, 武田 聡, 遠藤 弘一, 斎藤 一史, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  33回-  177  -177  2015/07  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン投与ならびに授乳期・カルシウム欠乏食で誘導される骨小腔周囲の骨基質の微細構造学的検索
    本郷 裕美, 斎藤 雅美, 宇田川 信之, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  33回-  167  -167  2015/07  [Not refereed][Not invited]
  • Annexin a5による腱・靱帯付着部(enthesis)における骨形成の調節
    島田 明美, 新井 嘉則, 和田 悟史, 出野 尚, 上運天 太一, 中島 和久, 小松 浩一郎, 山下 照仁, 江面 陽一, 網塚 憲生, 中村 芳樹, 二藤 彰  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  33回-  168  -168  2015/07  [Not refereed][Not invited]
  • 骨芽細胞特異的に副甲状腺ホルモン関連ペプチドを過剰発現させたマウスの長管骨と顎骨における組織化学的解析
    山本 知真也, 長谷川 智香, 山崎 七愛, 織田 公光, 小守 壽文, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  33回-  174  -174  2015/07  [Not refereed][Not invited]
  • 各種電子顕微鏡を用いた骨細胞間ネットワークの微細構造解析
    長谷川 智香, 山本 知真也, 本郷 裕美, 坪井 香奈子, 山本 恒之, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  33回-  212  -212  2015/07  [Not refereed][Not invited]
  • 【ロコモティブシンドロームのすべて】ロコモティブシンドロームの基礎 運動器を構成する組織 骨
    網塚 憲生, 長谷川 智香  日本医師会雑誌  144-  (特別1)  S50  -S52  2015/06  [Not refereed][Not invited]
  • 骨粗鬆症治療による骨の形態と質の変化 細胞組織学からみた骨粗鬆症治療薬の作用機序
    網塚 憲生, 山本 知真也, 本郷 裕美, 長谷川 智香  日本骨形態計測学会雑誌  25-  (2)  S47  -S47  2015/05  [Not refereed][Not invited]
  • 骨粗鬆症治療における基礎から得られた新たな知見 ビスホスホネート製剤を中心として
    網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  25-  (2)  S65  -S65  2015/05  [Not refereed][Not invited]
  • 軟骨内骨化における血管内皮細胞の微細構造学的検索
    土屋 恵李佳, 本郷 裕美, 山本 知真也, 長谷川 智香, 原口 真衣, 北川 善政, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  25-  (2)  S72  -S72  2015/05  [Not refereed][Not invited]
  • OVXラットにおけるPTHからELDへの切替投与の効果の検討
    坂井 貞興, 本郷 裕美, 山本 知真也, 長谷川 智香, 武田 聡, 松本 義弘, 斎藤 一史, 網塚 憲生, 遠藤 弘一  日本骨形態計測学会雑誌  25-  (2)  S81  -S81  2015/05  [Not refereed][Not invited]
  • ラット上顎の抜歯即時埋入後早期荷重を行ったチタンインプラント周囲骨の組織学的検索
    池田 欣希, 長谷川 智香, 山内 貴紀子, 網塚 憲生, 横山 敦郎  日本補綴歯科学会誌  7-  (特別号)  229  -229  2015/05  [Not refereed][Not invited]
  • 【血管石灰化の基礎と臨床】Klotho欠損環境における血管石灰化
    長谷川 智香, 山本 知真也, 本郷 裕美, 坪井 香奈子, 網塚 憲生  Clinical Calcium  25-  (5)  693  -699  2015/04  [Not refereed][Not invited]
     
    klotho遺伝子欠損(kl/kl)マウスは、FGF23/klotho軸の破綻により著明な高リン・高カルシウム血症を呈し、動脈中膜にメンケベルグ型血管石灰化が生じるモデル動物である。近年、中膜石灰化の病理機序として、血管平滑筋細胞内にリンが流入することにより、血管平滑筋細胞が骨芽細胞の様々な表現型を獲得し、生物学的に石灰化が生じる可能性が示唆されている。血管石灰化の病理機序の詳細を明らかにすることは、本疾患の治療・予防法の開発に広く応用できると考えられる。本稿では、kl/klマウスの大動脈でみられる血管石灰化について組織学的・微細構造学的な知見を紹介する。(著者抄録)
  • Amizuka Norio  The journal of the Japanese Society for Dental Materials and Devices  34-  (2)  2015/03/25  [Not refereed][Not invited]
  • 骨の成熟度と骨細胞形態との関連性 浸軟法を用いた走査型電子顕微鏡観察
    山本 恒之, 山本 知真也, 本郷 裕美, 長谷川 智香, 網塚 憲生  THE BONE  29-  (1)  3  -7  2015/03  [Not refereed][Not invited]
  • 骨の細胞・石灰化基質および骨再生における微細構造学的知見
    網塚 憲生  日本歯科理工学会誌  34-  (2)  64  -64  2015/03  [Not refereed][Not invited]
  • 坪井 香奈子, 北川 善政, 網塚 憲生  北海道歯学雑誌  35-  (2)  176  -178  2015/03  [Not refereed][Not invited]
  • 【慢性腎臓病と老化-Phosphate connection】慢性腎臓病における骨細胞の変化
    矢島 愛治, 土谷 健, 稲葉 雅章, 冨永 芳博, 荒井 純子, 浅宮 由香理, 小俣 百世, 松上 桂子, 網塚 憲生, 伊藤 明美, 進藤 廣成, 新田 孝作  腎と骨代謝  28-  (1)  63  -67  2015/01  [Not refereed][Not invited]
     
    慢性腎臓病では,40年前から骨小腔の著明な形態学的変化が論文化されたが,その後さらなる検討は成されていなかった.2000年頃より骨細胞の詳細な研究はProfessor Lynda F. Bonewaldにより成され,この10年間における骨細胞研究はめざましいものがある.しかしながら,慢性腎臓病領域ではいまだにSherrardの分類が使用され骨細胞そのものの研究は進んでおらず,ヒト慢性腎臓病の英論文はMEDLINE上で検索したかぎりわずかに2編のみである.一方,骨細胞が発現するFGF-23, sclerostin, RANKLの研究はすさまじいものがあり,今後の慢性腎臓病領域の骨細胞研究において心強いかぎりである.本論文では,論文化された慢性腎臓病領域の骨細胞変化につき最近のtopicを交えて述べる.(著者抄録)
  • ペリオスチン欠損マウスの切歯歯根膜における組織学的検索
    田幡 千尋, 佐々木 宗輝, 工藤 明, 本郷 裕美, 長谷川 智香, 山本 知真也, 網塚 憲生  THE BONE  28-  (3)  237  -243  2014/09  [Not refereed][Not invited]
  • アレンドロネート連日投与中・投与中止後における骨の細胞群における組織化学的変化
    坪井 香奈子, 佐々木 宗輝, 長谷川 智香, 虎谷 彌, 織田 公光, 北川 善政, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2014-  106  -106  2014/09  [Not refereed][Not invited]
  • ミノドロン酸の同位体顕微鏡を用いた骨組織分布の観察と骨の細胞群に対する影響(Localization of 15N-minodronate by isotope microscopy and histochemical assessment for the biological effects of minodronate in mice)
    佐々木 宗輝, 本郷 裕美, 小林 幸雄, 圦本 尚義, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2014-  106  -106  2014/09  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン(PTH)間歇投与の投与量・投与頻度の違いによる骨の細胞群の変化について
    山本 知真也, 長谷川 智香, 佐々木 宗輝, 虎谷 彌, 織田 公光, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2014-  108  -108  2014/09  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン投与ならびに授乳期・カルシウム欠乏食で誘導される骨細胞周囲の骨基質解析について
    本郷 裕美, 佐々木 宗輝, 斎藤 雅美, 虎谷 彌, 宇田川 信之, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2014-  108  -108  2014/09  [Not refereed][Not invited]
  • 抜歯即時埋入後早期咬合負荷を与えたチタンインプラント周囲骨組織の組織学的検索(Histological examinations on bone tissue around titanium implants bearing early occlusal loading after their implantation)
    池田 欣希, 長谷川 智香, 織田 公光, 網塚 憲生, 横山 敦郎  Journal of Oral Biosciences Supplement  2014-  122  -122  2014/09  [Not refereed][Not invited]
  • αklotho-/-マウスおよびkl/klマウスの下顎臼歯部歯周組織における組織化学的解析
    彦根 久美子, 長谷川 智香, 佐々木 宗輝, 本郷 裕美, 土屋 恵李佳, 虎谷 彌, 織田 公光, 飯田 順一郎, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2014-  131  -131  2014/09  [Not refereed][Not invited]
  • 骨組織における組織非特異型アルカリフォスファターゼ(TNALP)とENPP1の免疫組織化学的解析
    小林 博和, 本郷 裕美, 織田 公光, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2014-  138  -138  2014/09  [Not refereed][Not invited]
  • アレンドロネート連日投与中・投与中止後における骨の細胞群における組織化学的変化
    坪井 香奈子, 佐々木 宗輝, 長谷川 智香, 虎谷 彌, 織田 公光, 北川 善政, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2014-  139  -139  2014/09  [Not refereed][Not invited]
  • FIB-SEMを用いた骨細胞・骨細管系の3次元微細構造解析(The analysis of three-dimensional ultrastructure of osteocyticlacunar-canalicular system(OLCS) by using FIB-SEM)
    長谷川 智香, 山本 知真也, 虎谷 彌, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2014-  141  -141  2014/09  [Not refereed][Not invited]
  • ミノドロン酸の同位体顕微鏡を用いた骨組織分布の観察と骨の細胞群に対する影響(Localization of 15N-minodronate by isotope microscopy and histochemical assessment for the biological effects of minodronate in mice)
    佐々木 宗輝, 本郷 裕美, 小林 幸雄, 圦本 尚義, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2014-  144  -144  2014/09  [Not refereed][Not invited]
  • CKDに併発する骨粗鬆症(透析骨症含む)の病態・診断 CKDでの皮質骨骨粗鬆症・骨折リスク(PTH上昇との関連で)
    矢島 愛治, 土谷 健, 伊藤 明美, 網塚 憲生, 新田 孝作, 進藤 廣成  Osteoporosis Japan  22-  (Suppl.1)  159  -159  2014/09  [Not refereed][Not invited]
  • 骨細胞性骨溶解における微細構造学的・組織化学的解析
    本郷 裕美, 佐々木 宗輝, 斎藤 雅美, 虎谷 彌, 宇田川 信之, 網塚 憲生  Osteoporosis Japan  22-  (Suppl.1)  230  -230  2014/09  [Not refereed][Not invited]
  • PTH(1-34)とエルデカルシトールの海綿骨に対する異なる作用 卵巣摘除ラットを用いたμCTによる骨構造解析
    坂井 貞興, 武田 聡, 位高 美香, 山本 知真也, 長谷川 智香, 網塚 憲生, 遠藤 弘一  Osteoporosis Japan  22-  (Suppl.1)  337  -337  2014/09  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン(PTH)とエルデカルシトール(ELD)を併用投与した骨粗鬆症モデルラットにおける骨組織化学
    山本 知真也, 長谷川 智香, 坂井 貞興, 武田 聡, 本郷 裕美, 織田 公光, 李 敏啓, 遠藤 弘一, 網塚 憲生  Osteoporosis Japan  22-  (Suppl.1)  337  -337  2014/09  [Not refereed][Not invited]
  • レプチン受容体遺伝子変異(db/db)マウスの卵巣摘出(OVX)後における骨組織の組織化学的解析
    田中 祐介, 鄭 漢忠, 網塚 憲生  日本口腔科学会雑誌  63-  (4)  353  -353  2014/09  [Not refereed][Not invited]
  • 【骨から全身へ、いま学びなおしたい よくわかるCKD-MBD】(Q9)CKD-MBDによる異所性石灰化ってどういうもの?
    矢島 愛治, 網塚 憲生, 土谷 健, 新田 孝作, 進藤 廣成, 伊藤 明美  透析ケア  20-  (7)  626  -628  2014/07  [Not refereed][Not invited]
  • 【骨から全身へ、いま学びなおしたい よくわかるCKD-MBD】(Q10)CKD-MBDだと骨折しやすいの?
    矢島 愛治, 網塚 憲生, 土谷 健, 新田 孝作, 進藤 廣成, 伊藤 明美  透析ケア  20-  (7)  629  -631  2014/07  [Not refereed][Not invited]
  • 骨代謝制御における骨細胞の役割 骨細胞・骨細管系における形態学的アプローチ
    網塚 憲生, 本郷 裕美, 坪井 香奈子, 山本 知真也, 長谷川 智香  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  32回-  163  -163  2014/07  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン製剤に対する骨の細胞群の反応 組織学的知見
    網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  32回-  193  -193  2014/07  [Not refereed][Not invited]
  • Eldecalcitolは卵巣摘出カニクイザルにおいてミニモデリングによる骨形成を誘導する
    長谷川 智香, 山本 知真也, 織田 公光, 斎藤 一史, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  32回-  221  -221  2014/07  [Not refereed][Not invited]
  • 骨芽細胞におけるビタミンK依存性γ-グルタミルカルボキシラーゼは骨代謝と糖代謝を制御する
    柴 祥子, 東 浩太郎, 長谷川 智香, 池田 和博, 堀江 公仁子, 網塚 憲生, 井上 聡  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  32回-  222  -222  2014/07  [Not refereed][Not invited]
  • 常染色体優性低Ca血症(ADH)モデルマウスに対するcalcilyticsの効果
    董 冰子, 遠藤 逸朗, 大西 幸代, 近藤 剛史, 安倍 正博, 福本 誠二, 長谷川 智香, 網塚 憲生, 相澤 慎一, 松本 俊夫  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  32回-  223  -223  2014/07  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン(PTH)とエルデカルシトール(ELD)を併用投与した骨粗鬆症モデルラットにおける骨組織解析
    山本 知真也, 田中 祐介, 長谷川 智香, 坂井 貞興, 武田 聡, 本郷 裕美, 佐々木 宗輝, 織田 公光, 李 敏啓, 遠藤 弘一, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  32回-  264  -264  2014/07  [Not refereed][Not invited]
  • 骨芽細胞および骨細胞に対するビスフォスフォネート連日投与の組織化学的作用
    坪井 香奈子, 佐々木 宗輝, 織田 公光, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  32回-  293  -293  2014/07  [Not refereed][Not invited]
  • 【骨バイオイメージング】静的イメージング 光顕と電顕による骨組織の画像イメージング
    網塚 憲生, 山本 知真也, 長谷川 智香, 本郷 裕美  THE BONE  28-  (2)  143  -152  2014/06  [Not refereed][Not invited]
     
    電子顕微鏡は真空中の電子線を利用する顕微鏡であり、最も分解能が優れた観察機器である。電子顕微鏡から得られる情報は、微細構造、元素分布、特定の蛋白や酵素活性の微細局在、さらには細胞機能にまで及ぶ。光学顕微鏡により、組織切片のさまざまなものを可視化する方法を組織化学と呼び、酵素抗体法、免疫組織化学、in situハイブリダイゼーション、オートラジオグラフィなどがあげられる。このような各種の組織化学は電子顕微鏡にも応用することができる。本稿では、光学顕微鏡の組織化学を概説した後、電子顕微鏡の種類と用途、特に一般の微細構造だけでなく免疫電顕や電顕オートラジオグラフィといった応用手法について、筆者らの所見をご紹介する。(著者抄録)
  • 腎性副甲状腺機能亢進症に対する副甲状腺全摘除術後の骨細胞数、骨細胞-骨細管系の石灰化について
    矢島 愛治, 進藤 廣成, 長谷川 智香, 稲葉 雅章, 冨永 芳博, 池田 恭治, 西澤 良記, 土谷 健, 新田 孝作, 網塚 憲生, 伊藤 明美  日本骨形態計測学会雑誌  24-  (2)  S125  -S125  2014/05  [Not refereed][Not invited]
  • 【骨代謝 つくり、壊し、変える-そのメカニズムと最新治療 分子機構から骨粗鬆症・リウマチなど骨疾患への応用まで】(第I部) 骨代謝制御機構を知る (第3章)骨をみる イメージングの現状と展望 骨形成系にかかわる細胞群の微細構造学的知見
    網塚 憲生, 山本 知真也, 長谷川 智香, 佐々木 宗輝  実験医学  32-  (7)  1044  -1053  2014/05  [Not refereed][Not invited]
     
    前骨芽細胞、骨芽細胞、骨細胞といった骨形成系細胞は1つの分化の流れに存在しているが、それぞれ特有の機能をもって骨代謝に参画している。前骨芽細胞は骨芽細胞の前駆細胞である一方、破骨細胞の分化形成に関与しており、副甲状腺ホルモン(PTH)の間歇投与により細胞増殖が亢進するが、PTH間歇投与の方法によっては、前骨芽細胞の増加や骨基質のでき方が異なる。また、骨芽細胞は破骨細胞とのカップリングを基盤にした骨リモデリングを行っているが、生体内ではミニモデリングで誘導される骨形成もあり、骨粗鬆症治療薬であるエルデカルシトールは骨芽細胞に対してミニモデリングを効率よく誘導させると考えられる。骨芽細胞から分化した骨細胞は、骨芽細胞が形成した石灰化骨基質を維持したり、また、微細環境によっては溶解する機能が備わっていると推察される。(著者抄録)
  • テリパラチドとエルデカルシトールの併用投与が卵巣摘除ラットにおよぼす影響
    坂井 貞興, 武田 聡, 山本 知真也, 長谷川 智香, 網塚 憲生, 遠藤 弘一  日本骨形態計測学会雑誌  24-  (2)  S87  -S87  2014/05  [Not refereed][Not invited]
  • 骨細胞特異的死滅マウスの骨小腔基質溶解における微細構造学的検索
    齋藤 直朗, 李 敏啓, 辰巳 佐和子, 池田 恭治, 網塚 憲生, 小林 正治  日本骨形態計測学会雑誌  24-  (2)  S100  -S100  2014/05  [Not refereed][Not invited]
  • オスミウム浸軟法による破骨細胞のゴルジ装置の立体微細形態について
    山本 恒之, 長谷川 智香, 山本 知真也, 本郷 裕美, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  24-  (2)  S102  -S102  2014/05  [Not refereed][Not invited]
  • 卵巣摘出カニクイザルにおけるエルデカルシトールの効果 組織化学的検索
    長谷川 智香, 山本 知真也, 織田 公光, 齋藤 一史, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  24-  (2)  S108  -S108  2014/05  [Not refereed][Not invited]
  • 骨粗鬆症モデルラットを用いた副甲状腺ホルモン(PTH)とエルデカルシトール併用投与の効果
    山本 知真也, 田中 祐介, 長谷川 智香, 坂井 貞興, 武田 聡, 本郷 裕美, 佐々木 宗輝, 織田 公光, 遠藤 弘一, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  24-  (2)  S109  -S109  2014/05  [Not refereed][Not invited]
  • 同位体顕微鏡を用いたミノドロン酸の局在と骨の細胞に対する組織化学的検討
    佐々木 宗輝, 本郷 裕美, 小林 幸雄, 織田 公光, 圦本 尚義, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  24-  (2)  S112  -S112  2014/05  [Not refereed][Not invited]
  • ビスフォスフォネート連日投与による骨芽細胞・骨細胞への影響について
    坪井 香奈子, 佐々木 宗輝, 織田 公光, 北川 善政, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  24-  (2)  S114  -S114  2014/05  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン(PTH)間歇投与の投与量・投与頻度の違いによる骨微細構造の変化
    山本 知真也, 佐々木 宗輝, 長谷川 智香, 織田 公光, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  24-  (2)  S115  -S115  2014/05  [Not refereed][Not invited]
  • 骨粗鬆症に伴う疼痛と骨代謝回転状態との関係
    道家 孝幸, 阿部 恭久, 金谷 久美子, 佐々木 宗輝, 網塚 憲生, 山下 敏彦  日本骨形態計測学会雑誌  24-  (2)  S118  -S118  2014/05  [Not refereed][Not invited]
  • 骨・ミネラル代謝異常症診療の進歩 Ca感知受容体関連疾患の最新の知見とその治療
    遠藤 逸朗, 董 冰子, 長谷川 智香, 網塚 憲生, 福本 誠二, 松本 俊夫  日本内分泌学会雑誌  90-  (1)  219  -219  2014/04  [Not refereed][Not invited]
  • 【骨と幹細胞】骨の微細環境における細胞性ネットワーク 組織学・微細構造学的見解から
    網塚 憲生, 山本 知真也, 長谷川 智香  Clinical Calcium  24-  (4)  475  -485  2014/03  [Not refereed][Not invited]
     
    骨の微細環境は、骨リモデリングの代謝回転の程度によって異なる組織像を示す。骨リモデリングが活発に行われている部位では、活性型骨芽細胞、活発に骨吸収を行う破骨細胞、厚い前骨芽細胞層が発達するが、骨リモデリングがあまり行われない部位では、骨芽細胞は扁平化し休止期骨芽細胞として骨表面を覆っている。そこでは前骨芽細胞の細胞層はあまり発達せず、破骨細胞前駆細胞の分布も少ないが、骨基質内部には骨細胞が幾何学的に整然と配列する傾向が認められる。このような骨の微細環境は、骨芽細胞や破骨細胞ばかりでなく、前骨芽細胞、骨髄間質細胞、血管内皮細胞などによっても調節されている。しかし、前骨芽細胞は様々な表現型が報告されており、多くの機能を有すると思われる。ここでは、骨の微細環境を形成する細胞群について組織学的・微細構造学的な知見を紹介する。(著者抄録)
  • Klotho欠損環境における骨細胞と基質石灰化
    佐々木 宗輝, 本郷 裕美, 山本 知真也, 長谷川 智香, 網塚 憲生  THE BONE  28-  (1)  7  -12  2014/02  [Not refereed][Not invited]
  • 【バイオミネラリゼーション〜結晶学から臨床まで〜】骨基質バイオミネラリゼーションの顕微解剖学
    網塚 憲生, 長谷川 智香, 山本 知真也, 織田 公光  Clinical Calcium  24-  (2)  203  -214  2014/01  [Not refereed][Not invited]
     
    骨のバイオミネラリゼーションは、骨芽細胞が分泌する基質小胞に始まる。基質小胞には様々な酵素や膜輸送体が存在しており、Ca2+やPO4-の生成やそれらを基質小胞内部に輸送する仕組みが備わっている。基質小胞内でリン酸カルシウムの核形成が誘導されると、リン酸カルシウムの結晶が放射状に成長し、基質小胞の単位膜を破り外界へ露出するようになる。その結果、リボン状・短冊状を示すリン酸カルシウム結晶塊が放射状に集積した球状の石灰化構造物、すなわち、石灰化球が形成されることになる。ここまでのプロセスは骨芽細胞が分泌した基質小胞に依存するものであることから、基質小胞性石灰化という。その後、石灰化球が、骨芽細胞が分泌したコラーゲン線維に接すると、その接触部位からコラーゲン線維に石灰化が波及してゆく。この過程をコラーゲン性石灰化という。骨芽細胞による基質小胞性石灰化とコラーゲン性石灰化は、骨形成に伴って行われる石灰化現象であり一次石灰化と呼ぶ。一方、石灰化骨基質が形成された後も、徐々に石灰化度が上昇してゆくが、この過程を二次石灰化という。本稿では、骨基質の一次石灰化におけるバイオミネラリゼーションについて、我々の顕微解剖学的な知見をもとに概説する。(著者抄録)
  • 【バイオミネラリゼーション〜結晶学から臨床まで〜】アルカリフォスファターゼと低フォスファターゼ症
    織田 公光, 沼 奈津子, 城, 相田 美和, 小丸 圭一, 網塚 憲生  Clinical Calcium  24-  (2)  233  -239  2014/01  [Not refereed][Not invited]
     
    ヒトアルカリフォスファターゼには4種類のアイソザイムが存在する:組織非特異型(TNSALP)、小腸型、胎盤型、生殖細胞型酵素。この総説では歴史的な事項を踏まえて、TNSALPに関する基礎研究と低フォスファターゼ症(HPP)の研究の進展についてレビューする。HPPは、TNSALP遺伝子上の突然変異に起因する骨や歯などの硬組織の低石灰化を主症状とする先天性遺伝疾患で、TNSALPと石灰化を結ぶ直接の証拠である。3次元モデルに加えて、細胞に発現させた個々のTNSALPの変異型酵素を解析することは、特定の変異がTNSALPの構造や機能に与える影響を分子レベルで明らかにし、HPPの分子基盤の理解に役立つ。(著者抄録)
  • マウス切歯歯根膜におけるペリオスチンの役割 細胞外マトリックスとの組織学的関連性
    田幡 千尋, 工藤 明, 網塚 憲生, 飯田 順一郎  日本矯正歯科学会大会プログラム・抄録集  72回-  179  -179  2013/10  [Not refereed][Not invited]
  • 【くる病・骨軟化症UPDATE】骨細胞の機能とFGF23/klothoシステム
    網塚 憲生, 長谷川 智香, 佐々木 宗輝, 山本 知真也, 山本 恒之  Clinical Calcium  23-  (10)  1453  -1461  2013/09  [Not refereed][Not invited]
     
    骨細胞はfibroblast growth factor 23(FGF23)を分泌し、腎臓の近位尿細管に発現するFGFR1c/klotho複合体に結合することで、リン再吸収と1α-hydroxylaseを抑制し血中リン濃度を低下させる。一方、骨細胞が骨小腔や骨細管周囲の骨基質を溶解・添加する可能性も指摘されている。緻密骨において、骨細胞は規則的な骨細管系を発達させており、その規則性は骨細胞機能に対して効率的に作用すると考えられる。つまり、骨細胞の全身的なリン濃度調節および局所的な骨基質石灰化の調節と骨細胞の規則的配列性とは、何らかの関連性があると思われる。(著者抄録)
  • 骨細胞のバイオロジー オーバービュー 骨の司令塔 骨細胞
    網塚 憲生, 宮本 幸奈, 本郷 裕美, 佐々木 宗輝, 長谷川 智香  Journal of Oral Biosciences Supplement  2013-  102  -102  2013/09  [Not refereed][Not invited]
  • 卵巣摘出レプチン受容体遺伝子変異(db/db)マウスの骨組織における組織化学的検索
    田中 祐介, 長谷川 智香, 山田 珠希, 織田 公光, 鄭 漢忠, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2013-  107  -107  2013/09  [Not refereed][Not invited]
  • RANKL遺伝子欠損マウスにおける破骨細胞様細胞の微細構造学的解析
    宮本 幸奈, 長谷川 智香, 佐々木 宗輝, 織田 公光, 宇田川 信之, 山本 恒之, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2013-  109  -109  2013/09  [Not refereed][Not invited]
  • 咬合負荷が抜歯即時埋入チタンインプラント周囲の骨組織に与える影響について
    池田 欣希, 長谷川 智香, 網塚 憲生, 横山 敦郎  Journal of Oral Biosciences Supplement  2013-  111  -111  2013/09  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン投与による骨細胞周囲の骨基質改変について
    本郷 裕美, 山田 珠希, 宇田川 信之, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2013-  119  -119  2013/09  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン間歇投与の頻度が骨の細胞動態に及ぼす影響について
    山本 知真也, 佐々木 宗輝, 本郷 裕美, 長谷川 智香, 山田 珠希, 山本 恒之, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2013-  119  -119  2013/09  [Not refereed][Not invited]
  • 乳癌骨転移巣における骨細胞産生因子の組織化学的解析
    山田 珠希, 坪井 香奈子, 平賀 徹, 山本 知真也, 田中 祐介, 長谷川 智香, 織田 公光, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2013-  125  -125  2013/09  [Not refereed][Not invited]
  • FGF23/klotho軸の破綻は血管骨化を誘導する klotho遺伝子変異マウスを用いた組織学的検索
    長谷川 智香, 山田 珠希, 佐々木 宗輝, 笹野 泰之, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2013-  126  -126  2013/09  [Not refereed][Not invited]
  • bisphosphonate投与中止後の骨の細胞群における組織化学的検索
    坪井 香奈子, 佐々木 宗輝, 長谷川 智香, 北川 善政, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2013-  134  -134  2013/09  [Not refereed][Not invited]
  • ミノドロン酸の同位体顕微鏡を用いた骨組織分布と破骨細胞に対する影響
    佐々木 宗輝, 本郷 裕美, 小林 幸雄, 圦本 尚義, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2013-  135  -135  2013/09  [Not refereed][Not invited]
  • アレンドロネート直接作用による骨芽細胞分化の制御
    小松 浩一郎, 島田 明美, 柴田 達也, 中島 和久, 網塚 憲生, 二藤 彰  Journal of Oral Biosciences Supplement  2013-  135  -135  2013/09  [Not refereed][Not invited]
  • 乳癌骨転移巣における骨細胞産生因子の組織化学的解析
    山田 珠希, 坪井 香奈子, 平賀 徹, 山本 知真也, 田中 祐介, 長谷川 智香, 織田 公光, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2013-  140  -140  2013/09  [Not refereed][Not invited]
  • FGF23/klotho軸の破綻は血管骨化を誘導する klotho遺伝子変異マウスを用いた組織学的検索
    長谷川 智香, 山田 珠希, 佐々木 宗輝, 笹野 泰之, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2013-  140  -140  2013/09  [Not refereed][Not invited]
  • bisphosphonate投与中止後の骨の細胞群における組織化学的検索
    坪井 香奈子, 佐々木 宗輝, 長谷川 智香, 北川 善政, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2013-  140  -140  2013/09  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン投与による骨細胞周囲の骨基質改変について
    本郷 裕美, 山田 珠希, 宇田川 信之, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2013-  141  -141  2013/09  [Not refereed][Not invited]
  • 卵巣摘出レプチン受容体遺伝子変異(db/db)マウスの骨組織における組織化学的検索
    田中 祐介, 長谷川 智香, 山田 珠希, 織田 公光, 鄭 漢忠, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2013-  141  -141  2013/09  [Not refereed][Not invited]
  • 咬合負荷が抜歯即時埋入チタンインプラント周囲の骨組織に与える影響について
    池田 欣希, 長谷川 智香, 網塚 憲生, 横山 敦郎  Journal of Oral Biosciences Supplement  2013-  143  -143  2013/09  [Not refereed][Not invited]
  • ミノドロン酸の同位体顕微鏡を用いた骨組織分布と破骨細胞に対する影響
    佐々木 宗輝, 本郷 裕美, 小林 幸雄, 圦本 尚義, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2013-  146  -146  2013/09  [Not refereed][Not invited]
  • セメント質初期形成における上皮鞘細胞と歯小嚢細胞の動態について
    山本 恒之, 長谷川 智香, 山本 知真也, 本郷 裕美, 山田 珠希, 織田 公光, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2013-  196  -196  2013/09  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン(PTH)間歇投与における投与量・投与頻度が骨形成に及ぼす影響について
    山本 知真也, 佐々木 宗輝, 長谷川 智香, 網塚 憲生  Osteoporosis Japan  21-  (Suppl.1)  255  -255  2013/09  [Not refereed][Not invited]
  • レプチン受容体遺伝子変異(db/db)マウスの卵巣摘出後における骨組織の変化について
    田中 祐介, 長谷川 智香, 本郷 裕美, 佐々木 宗輝, 山田 珠希, 戸塚 靖則, 鄭 漢忠, 網塚 憲生  Osteoporosis Japan  21-  (Suppl.1)  265  -265  2013/09  [Not refereed][Not invited]
  • Klotho遺伝子変異マウスで生じた血管骨化における組織学的検索
    長谷川 智香, 山田 珠希, 佐々木 宗輝, 網塚 憲生  Osteoporosis Japan  21-  (Suppl.1)  266  -266  2013/09  [Not refereed][Not invited]
  • 【骨細胞:骨を制御する司令塔】骨の微細環境における骨細胞
    網塚 憲生, 山本 知真也, 佐々木 宗輝, 長谷川 智香  THE BONE  27-  (3)  263  -269  2013/08  [Not refereed][Not invited]
     
    骨細胞は細胞突起を張り巡らせた骨細管系というグループで機能している。それは幼弱骨や緻密な成熟骨では異なる分布パターンを示し、骨基質の石灰化度やコラーゲン線維の走行を含めた組織構築に対応した配列を示していると考えられる。さらに、骨細胞だけがネットワークを形成しているのではなく、骨基質上の骨芽細胞や前骨芽細胞とも細胞間相互作用を行うと考えられ、骨細胞は骨基質の情報を周囲に伝え、また、周囲の情報を骨基質に反映させるといった重要な役割を担っていると考えられる。(著者抄録)
  • 骨粗鬆症に伴う疼痛と骨組織の酸性環境変化
    道家 孝幸, 射場 浩介, 金谷 久美子, 阿部 恭久, 佐々木 宗輝, 網塚 憲生, 山下 敏彦  日本整形外科学会雑誌  87-  (8)  S1383  -S1383  2013/08  [Not refereed][Not invited]
  • ミノドロン酸の同位体顕微鏡による骨組織分布と破骨細胞に及ぼす影響
    佐々木 宗輝, 本郷 裕美, 小林 幸雄, 圦本 尚義, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  23-  (1)  S81  -S81  2013/06  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモンの間歇投与頻度が骨の細胞群に及ぼす作用 モデル動物を用いた形態学的検索
    山本 知真也, 佐々木 宗輝, 本郷 裕美, 田中 祐介, 長谷川 智香, 山田 珠希, 山本 恒之, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  23-  (1)  S83  -S83  2013/06  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン投与による骨細胞性骨溶解に関する微細構造学的検索
    本郷 裕美, 山田 珠希, 山本 知真也, 中野 貴由, 宇田川 信之, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  23-  (1)  S84  -S84  2013/06  [Not refereed][Not invited]
  • オスミウム浸軟法による破骨細胞波状縁の立体微細形態について
    山本 恒之, 長谷川 智香, 本郷 裕美, 山本 知真也, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  23-  (1)  S97  -S97  2013/06  [Not refereed][Not invited]
  • kl/klマウスは血管石灰化だけでなく血管骨化を示す 微細構造元素分析および組織形態解析
    長谷川 智香, 大城戸 一郎, 山田 珠希, 横山 啓太郎, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  23-  (1)  S99  -S99  2013/06  [Not refereed][Not invited]
  • 骨粗鬆症治療の新展開 リモデリング・ミニモデリングの観点からみたエルデカルシトールとテリパラチドの骨形成作用
    網塚 憲生, 山本 知真也, 長谷川 智香, 佐々木 宗輝  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  31回-  63  -63  2013/05  [Not refereed][Not invited]
  • FGF23/klotho軸の破綻は血管石灰化だけでなく血管骨化を誘導する
    長谷川 智香, 大城戸 一郎, 庄司 繁市, 山田 珠希, 織田 公光, 横山 啓太郎, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  31回-  79  -79  2013/05  [Not refereed][Not invited]
  • III型Na輸送担体過剰発現ラットにおける大動脈壁の微細構造の変化について
    鈴木 敦詞, 長谷川 智香, 植田 佐保子, 平井 博之, 四馬田 恵, 網塚 憲生, 伊藤 光泰  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  31回-  81  -81  2013/05  [Not refereed][Not invited]
  • 卵巣摘出を行ったレプチン受容体遺伝子変異(db/db)マウスの骨組織における組織化学的検索
    田中 祐介, 長谷川 智香, 本郷 裕美, 佐々木 宗輝, 山田 珠希, 柳 鋳晟, 山本 恒之, 織田 公光, 戸塚 靖則, 鄭 漢忠, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  31回-  93  -93  2013/05  [Not refereed][Not invited]
  • メラノコルチン2受容体ノックアウトマウスにおける骨遺伝子発現解析
    亀田 啓, 永井 聡, 三好 秀明, 渥美 達也, 千田 大, 岩倉 洋一郎, 網塚 憲生, 清水 力  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  31回-  94  -94  2013/05  [Not refereed][Not invited]
  • 【最新の骨粗鬆症学-骨粗鬆症の最新知見】骨の基礎研究 骨の構造と機能 骨の細胞と組織
    網塚 憲生, 長谷川 智香, 佐々木 宗輝, 山田 珠希, 山本 恒之  日本臨床  71-  (増刊2 最新の骨粗鬆症学)  31  -38  2013/04  [Not refereed][Not invited]
  • 【研究医養成】将来の解剖学・組織学を担う歯学部学生に対する期待と取り組み
    網塚 憲生, 本郷 裕美, 宮本 幸奈, 長谷川 智香, 佐々木 宗輝, 山田 珠希, 山本 恒之  解剖学雑誌  88-  (1-2)  25  -28  2013/03  [Not refereed][Not invited]
     
    私たち歯学部・歯科大学の役割は歯科治療における充分な技術と知識、深い洞察を備えた歯科医師を養成することである。しかし、その一方で、多くの歯学部・歯科大学はリサーチマインドを持った歯学部学生の育成を目指して、歯科医療だけでなく基礎研究を激励するとともに、研究、あるいは、それに準じた機会を与えることが多いと思われる。北海道大学歯学部では、5年から6年生の学部学生を対象に教室配属を行っており、数名の学生が各基礎教室に配属されている。そのような基礎配属をとおして、何人かの学生が新しい発見をみいだし、また、それを学会発表する機会を得ている。その一方で、日本の多くの学会や研究会は学生セッションなどの場を設け、そこでは学部生が指導教官ともに行った研究成果を発表している。近年における歯学部・歯科大学や学会の若手研究者育成に対する努力は近い将来実を結ぶものと期待している。(著者抄録)
  • 【骨評価法の進歩】PTH治療による骨組織変化 動物実験モデル
    佐々木 宗輝, 長谷川 智香, 本郷 裕美, 山本 知真也, 網塚 憲生  Clinical Calcium  23-  (3)  347  -353  2013/02  [Not refereed][Not invited]
     
    副甲状腺ホルモン(parathyroid hormone:PTH)の間歇投与によって、骨芽細胞の骨形成および前骨芽細胞の増殖が亢進し骨形成優位となる。我々は、PTHの間歇投与による骨芽細胞系細胞の動向およびPTHの骨形成に対して破骨細胞がどのように関与するのか検索した。その結果、野生型マウスにPTHを投与すると骨形成の亢進が認められたが、破骨細胞が存在しないc-fos欠損マウスにPTHを投与しても、前骨芽細胞数が増加したにも関わらず、骨芽細胞による骨形成は誘導されなかった。したがって、破骨細胞が存在しない状況では、PTHの骨形成作用が誘導されないこと、すなわち、破骨細胞は前骨芽細胞から骨芽細胞への分化、そしてその後の骨形成に必要な存在であることが推測された。また、本稿では、PTH間歇投与における骨細胞の関与についても概説したい。(著者抄録)
  • 卵巣摘出ラットの根間中隔歯槽骨における骨改造とスクレロスチンの局在
    佐々木 宗輝, 長谷川 智香, 山本 知真也, 本郷 裕美, 虎谷 彌, 網塚 憲生  THE BONE  26-  (4)  365  -370  2012/12  [Not refereed][Not invited]
  • 骨形成と骨吸収の先端研究から探る、骨修復促進のストラテジー 骨細胞の細胞生理における形態学的アプローチ 骨細胞による石灰化骨基質の調節
    網塚 憲生, 佐々木 宗輝, 本郷 裕美, 長谷川 智香, 赤堀 永倫香, 山田 珠希  日本生理学雑誌  74-  (5)  235  -236  2012/09  [Not refereed][Not invited]
  • レプチン受容体遺伝子変異(db/db)マウスにおける骨芽細胞・骨細胞および骨基質の形態学的解析
    田中 祐介, 長谷川 智香, 本郷 裕美, 佐々木 宗輝, 山田 珠希, 山本 恒之, 戸塚 靖則, 鄭 漢忠, 網塚 憲生  北海道歯学雑誌  33-  (1)  34  -34  2012/09  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン投与による骨細胞周囲の骨基質に関する組織化学的検索
    本郷 裕美, 佐々木 宗輝, 長谷川 智香, 田幡 千尋, 川浪 雅光, 山本 恒之, 下地 伸司, 網塚 憲生  北海道歯学雑誌  33-  (1)  34  -34  2012/09  [Not refereed][Not invited]
  • インプラント周囲骨細胞の免疫組織化学的検索
    羽下 麻衣子, 辻村, 網塚 憲生, 前田 健康, 吉江 紀夫  Journal of Oral Biosciences Supplement  2012-  119  -119  2012/09  [Not refereed][Not invited]
  • Jausen型PTH/PTHrP受容体の機能異常の解析
    下村 淳子, 黒木, 竜 佑宗, 松田 貴絵, 田中 聖至, 織田 公光, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences Supplement  2012-  165  -165  2012/09  [Not refereed][Not invited]
  • 骨の微細構造学(第4回) 破骨細胞 骨を食べる巨人
    山田 珠希, 佐々木 宗輝, 長谷川 智香, 本郷 裕美, 網塚 憲生  O.li.v.e.  2-  (3)  214  -218  2012/08  [Not refereed][Not invited]
  • 骨粗鬆症の動物モデル 骨粗鬆症のモデル動物における骨の細胞群
    網塚 憲生, 長谷川 智香, 佐々木 宗輝, 本郷 裕美, 田幡 千尋, 山田 珠希, 赤堀 永倫香, 山本 恒之  日本整形外科学会雑誌  86-  (8)  S1210  -S1210  2012/08  [Not refereed][Not invited]
  • 新規活性型ビタミンD3製剤エルデカルシトールの作用機序 動物実験モデルにおける組織学的解析
    網塚 憲生  日本整形外科学会雑誌  86-  (8)  S1212  -S1212  2012/08  [Not refereed][Not invited]
  • 【ビタミンDの新たな展開】骨に対する活性型ビタミンDの直接作用 新規ビタミンD製剤の骨吸収抑制と骨形成促進
    山田 珠希, 本郷 裕美, 佐々木 宗輝, 長谷川 智香, 赤堀 永倫香, 網塚 憲生  腎と骨代謝  25-  (3)  215  -224  2012/07  [Not refereed][Not invited]
     
    新規活性ビタミンD製剤であるエルデカルシトールは,アルファカルシトールに比べて,骨折抑制および骨密度上昇作用を示す.エルデカルシトールの作用としては,破骨細胞性骨吸収の抑制にあると考えられてきたが,エルデカルシトール投与後の骨型アルカリフォスファターゼの上昇および骨吸収に依存しない骨形成(ミニモデリング)が観察されており,エルデカルシトールの骨形成作用が注目を浴びている.エルデカルシトールは,前骨芽細胞を細胞増殖ではなく活性型骨芽細胞へ分化させることで,ミニモデリングという局所的な骨形成を誘導すると推測される.(著者抄録)
  • 骨粗鬆症治療薬によるリモデリング調整を介した骨質への効果 Bisphosphonate投与およびPTH投与モデル動物の組織学的解析 骨質変化に付随する現象
    網塚 憲生, 佐々木 宗輝, 本郷 裕美, 長谷川 智香, 山本 知真也, 山田 珠希, 山本 恒之  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  30回-  108  -108  2012/07  [Not refereed][Not invited]
  • 慢性腎臓病と骨・ミネラル代謝 klotho欠損マウスにおける血管石灰化の組織化学的・微細構造学的検索
    長谷川 智香, 大城戸 一郎, 山田 珠希, 横山 啓太郎, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  30回-  115  -115  2012/07  [Not refereed][Not invited]
  • ビタミンD最前線 エルデカルシトールがin vivoの骨に及ぼす細胞学的作用について
    網塚 憲生, 長谷川 智香, 佐々木 宗輝, 本郷 裕美, 田幡 千尋, 山田 珠希, 山本 恒之  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  30回-  118  -118  2012/07  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン投与で誘導される骨小腔周囲の骨基質溶解について
    本郷 裕美, 佐々木 宗輝, 長谷川 智香, 山田 珠希, 田幡 千尋, 山本 恒之, 中野 貴由, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  30回-  215  -215  2012/07  [Not refereed][Not invited]
  • 長骨の部位による骨細胞ネットワークの立体微細形態の違いについて
    山本 恒之, 長谷川 智香, 佐々木 宗輝, 田幡 千尋, 本郷 裕美, 山田 珠希, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  30回-  239  -239  2012/07  [Not refereed][Not invited]
  • Appeal to eye 骨の微細構造学(第3回) 前骨芽細胞 その多様性と機能
    佐々木 宗輝, 本郷 裕美, 長谷川 智香, 山田 珠希, 網塚 憲生  O.li.v.e.  2-  (2)  154  -158  2012/05  [Not refereed][Not invited]
  • PTH治療と骨形態 PTH投与における骨の細胞群の動向について
    網塚 憲生, 佐々木 宗輝, 本郷 裕美, 長谷川 智香, 柳 鋳晟, 山本 知真也, 山田 珠希, 山本 恒之  日本骨形態計測学会雑誌  22-  (1)  S37  -S37  2012/05  [Not refereed][Not invited]
  • PTH間歇投与後の前骨芽細胞における組織化学的検索
    佐々木 宗輝, 長谷川 智香, 本郷 裕美, 山田 珠希, 山本 知真也, 山本 恒之, 網塚 憲生, 小澤 英浩  THE BONE  26-  (2)  125  -129  2012/04  [Not refereed][Not invited]
  • 塩酸セベラマー投与による血管石灰化抑制効果の検討
    大城戸 一郎, 横山 啓太郎, 長谷川 智香, 網塚 憲生, 細谷 龍男  日本腎臓学会誌  54-  (3)  324  -324  2012/04  [Not refereed][Not invited]
  • klotho遺伝子欠損マウスの血管石灰化における形態学的検索
    長谷川 智香, 山田 珠希, 佐々木 宗輝, 李 敏啓, 大城戸 一郎, 横山 啓太郎, 網塚 憲生  Osteoporosis Japan  20-  (2)  279  -281  2012/04  [Not refereed][Not invited]
     
    血管石灰化の病理機序を解明するため、klotho欠損マウスの大動脈を形態学的な手法を用いて検索した。Klotho欠損マウスの大動脈中膜では、血管平滑筋細胞が骨芽細胞のいくつかの性質を獲得する細胞へとtrans-differentiationし、石灰化を誘導することが示唆された。石灰化領域の血管平滑筋細胞は、基質小胞性様構造物を分泌し、骨基質にみられるような、生物学的な基質小胞性石灰化を誘導する可能性が示唆された。さらに、klotho欠損環境では、血中に豊富に存在するリンやカルシウムが、中膜に存在する有機性の不定形構造物内部へと物理的に沈着する、病理学的な石灰化も起こることが示唆された。また、matrix Gla protein(MGP)陽性反応は石灰化基質を取り囲むように局在していた。中膜石灰化によってMGPの発現が誘導され、MGPは石灰化抑制に作用する可能性が推測された。
  • KOJIMA Taku, YOSHIZAWA Michiko, ONO Yukiko, SUZUKI Akiko, SAKAGAMI Naoko, HASEGAWA Tomoka, AMIZUKA Norio, ODA Kimimitsu, MAEDA Takeyasu, SAITO Chikara  日本歯科医学会誌 = Journal of the Japanese Association for Dental Science : JJDS  31-  (31)  34  -38  2012/03/31  [Not refereed][Not invited]
     
    腫瘍、嚢胞、外傷、炎症などの疾患によって広範囲で複雑な形態の顎骨欠損が生じた場合、形態を考慮した顎骨再建が必要になる。われわれのこれまでの基礎的研究から、熱可塑性吸収性プレートと骨補填材を用いることで三次元形態を有する骨再生が可能であることが示唆されたが、さらなる骨再生の向上を目指すには、間葉系幹細胞とバイオマテリアルを組み合わせる培養技術を用いた骨再生が有用ではないかと考えた。そこで本研究では、骨髄由来間葉系幹細胞・多孔性β-TCPブロック複合体をラット頭蓋骨骨膜下に移植する動物実験モデルを用いて組織学的検討を行った。生後4週齢の雄性Fischer系ラット大腿骨から骨髄細胞を採取し、間葉系幹細胞を分離培養後、多孔性β-TCPブロックに播種して骨芽細胞様細胞への分化を誘導した。この間葉系幹細胞・多孔性β-TCPブロック複合体を生後12週齢の同系ラット頭蓋骨骨膜下に移植したものを培養群とし、β-TCPブロック単体を移植したものを対照群とした。術後2、8週目に灌流固定を行い、移植部位を組織化学的に解析した。培養群の術後2週目ではβ-TCPブロック辺縁部に新生骨を認めた。新生骨表層には多数の骨芽細胞が配列し、周囲のβ-TCP上には破骨細胞が局在していた。術後8週目ではブロック中央部にも新生骨を認め、その骨梁は太く層板様を呈していた。一方、対照群ではブロック内部は線維性結合組織で占められており、術後8週目においても新生骨はわずかしか認められなかった。以上の結果から、骨髄由来間葉系幹細胞を骨芽細胞様細胞に分化させ多孔性β-TCPブロックに播種することで、β-TCPブロック単体よりも広範囲に骨が新生されることが明らかとなった。したがって骨再生バイオマテリアルに間葉系幹細胞を供給することの有用性が示唆された。(著者抄録)
  • HONGO Hiromi, HASEGAWA Tomoka, SASAKI Muneteru, SUZUKI Reiko, MASUKI Hideo, YAMADA Tamaki, SHIMOJI Shinji, KAWANAMI Masamitsu, YAMAMOTO Tsuneyuki, AMIZUKA Norio  北海道歯学雑誌  32-  (2)  93  -103  2012/03/15  [Not refereed][Not invited]
     
    Osteocytes build up functional syncytia, i.e., the osteocytic lacunar-canalicular system(OLCS). The osteocytes are interconnected through gap junctions between their cytoplasmic processes, which pass through narrow passageways referred to as osteocytic canaliculi. There are two possible ways, in which molecules can be transported throughout the OLCS: via the cytoplasmic processes and their gap junctions, and via the pericellular space in the osteocytic canaliculi. Transport of minerals and small molecules through a spatially well-organized OLCS appears to be pivotal for bone mineral homeostasis and bone remodeling control. Recently, osteocyte-derived molecules -- sclerostin, dentin matrix protein-1, fibroblast growth factor 23(FGF23)-- have been put in evidence as they may be related to osteocytic functions such as regulation of bone remodeling and so forth. Osteocytes were shown to regulate phosphorus serum levels and osteoblastic activity through the expression of FGF23 and sclerostin. In our observations, FGF23 and sclerostin synthesis seemed to be associated with the spatial regularity of the OLCS: both proteins were consistently expressed by osteocytes in epiphyses and cortical bones showing regularly arranged OLCS. In contrast, mice bearing high bone turnover, e.g., osteoprotegerin deficient mice, revealed markedly-diminished sclerostin. This review will introduce our recent studies on the regularity of OLCS and the osteocytic function.
  • Appeal to eye 骨の微細構造学(第2回) 卵巣摘出ラット骨粗鬆症に対する新規ビタミンD製剤の効果
    佐々木 宗輝, 本郷 裕美, 長谷川 智香, 山田 珠希, 網塚 憲生  O.li.v.e.  2-  (1)  76  -80  2012/02  [Not refereed][Not invited]
  • 【骨形成促進薬としてのPTH】PTHの骨形成促進作用における骨の細胞群の役割
    長谷川 智香, 本郷 裕美, 佐々木 宗輝, 山田 珠希, 網塚 憲生  Clinical Calcium  22-  (3)  373  -379  2012/02  [Not refereed][Not invited]
     
    PTH間歇投与により骨形成が誘導される。その考え方として、骨芽細胞に作用して骨形成を亢進させるだけでなく、前骨芽細胞の細胞数を増加させることも重要であると思われる。増加した前骨芽細胞から活性型骨芽細胞への分化には、破骨細胞とのカップリングが必要と考えられ、PTHの骨形成促進作用に破骨細胞は無関係でないことが示唆される。一方、PTHは骨細胞に直接作用してスクレロスチン産生を抑制させることで、骨芽細胞を活性化し、骨形成を促進する作用も提唱されている。おそらく、骨芽細胞はPTHによる二極性の調節を受けて、骨形成促進に誘導されると推測される。(著者抄録)
  • 【FGF23/Klotho研究の進歩】骨細胞の機能とFGF23 Klotho遺伝子欠損マウスと野生型マウスとの比較
    本郷 裕美, 佐々木 宗輝, 長谷川 智香, 網塚 憲生  腎と骨代謝  25-  (1)  7  -16  2012/01  [Not refereed][Not invited]
     
    骨細胞は,骨細胞・骨細管系を発達させており,FGF23,sclerostin,DMP-1といった因子を分泌することで,血中リン濃度,骨芽細胞抑制,骨基質石灰化を調節している.klothoはFGF23の受容体を形成する因子であり,そのklotho遺伝子が欠損したマウスでは,骨細胞はDMP-1過剰産生とFGF23の産生低下を示すほか,一次骨梁では過剰な石灰化を,しかし,二次骨梁では広範囲な未石灰化領域を呈した.klotho遺伝子欠損マウスでは,高リン血症を発症するため骨形成時の石灰化は亢進するが,その後,骨細胞による骨基質ミネラル維持は破綻している可能性が考えられた.(著者抄録)
  • Appeal to eye 骨の微細構造学(第1回) 骨を支える細胞 骨細胞
    佐々木 宗輝, 本郷 裕美, 長谷川 智香, 山本 恒之, 網塚 憲生  O.li.v.e.  1-  (1)  6  -9  2011/11  [Not refereed][Not invited]
  • klotho遺伝子欠損マウスの血管石灰化における形態学的検索
    長谷川 智香, 李 敏啓, 佐々木 宗輝, 大城戸 一郎, 横山 啓太郎, 網塚 憲生  Osteoporosis Japan  19-  (Suppl.1)  299  -299  2011/11  [Not refereed][Not invited]
  • 卵巣摘出ラットにおけるエルデカルシトールの効果
    本郷 裕美, 佐々木 宗輝, 長谷川 智香, 李 敏啓, 網塚 憲生, 小澤 英浩  THE BONE  25-  (4)  351  -355  2011/10  [Not refereed][Not invited]
  • 【ビタミンDの新たな展開】エルデカルシトールによるラット骨組織微細形態の変化 エルデカルシトールの骨吸収抑制作用と骨形成作用
    本郷 裕美, 佐々木 宗輝, 長谷川 智香, 網塚 憲生  Clinical Calcium  21-  (11)  1647  -1654  2011/10  [Not refereed][Not invited]
     
    エルデカルシトールを卵巣摘出(OVX)ラットに投与すると、破骨細胞数の減少と破骨細胞性骨吸収の低下だけではなく、骨吸収に依存しない骨形成(ミニモデリング)が誘導される。組織学的には、破骨細胞数の減少および破骨細胞の骨吸収抑制、活性型マクロファージ数の増加、骨密度の上昇を認めた。ミニモデリングは破骨細胞による骨吸収に依存しない骨形成であり、その骨表面上には活性型骨芽細胞が観察された。しかし、破骨細胞分化を支持する前骨芽細胞はその数が減少しており、発達した前骨芽細胞のネットワークが観察されなかった。また、エルデカルシトールは、前骨芽細胞を、細胞増殖ではなく活性型骨芽細胞へ誘導させることでミニモデリングという局所的な骨形成を可能にすると推測された。一方、エルデカルシトールによって減少した前骨芽細胞のため、破骨細胞・マクロファージ前駆細胞との細胞間接触が低下し、破骨細胞形成が抑制されると推察された。(著者抄録)
  • klotho-/-マウスにおける骨細胞産生蛋白の局在と骨基質石灰化について
    佐々木 宗輝, 田幡 千尋, 長谷川 智香, 郭 頴, 李 敏啓, 山本 恒之, 井上 農夫男, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences  53-  (Suppl.)  113  -113  2011/09  [Not refereed][Not invited]
  • klotho遺伝子欠損マウスの血管石灰化における組織化学的検索
    長谷川 智香, 本郷 裕美, 佐々木 宗輝, 田幡 千尋, 柳 鋳晟, 山本 恒之, 李 敏啓, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences  53-  (Suppl.)  114  -114  2011/09  [Not refereed][Not invited]
  • レプチン受容体遺伝子変異マウス(db/dbマウス)における骨基質ミネラルと骨細胞産生因子の形態学的解析
    田中 祐介, 長谷川 智香, 佐々木 宗輝, 柳 鋳晟, 織田 公光, 韋 山良, 李 敏啓, 戸塚 靖則, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences  53-  (Suppl.)  117  -117  2011/09  [Not refereed][Not invited]
  • 骨代謝における新領域研究の挑戦 血管石灰化の機序における微細構造学的アプローチ
    網塚 憲生, 佐々木 宗輝, 本郷 裕美, 長谷川 智香  Journal of Oral Biosciences  53-  (Suppl.)  84  -84  2011/09  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン投与による骨細胞性骨溶解の可能性について
    本郷 裕美, 佐々木 宗輝, 長谷川 智香, 郭 頴, 虎谷 彌, 田幡 千尋, 鈴木 礼子, 李 敏啓, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences  53-  (Suppl.)  131  -131  2011/09  [Not refereed][Not invited]
  • ペリオスチン欠損がマウス切歯歯根膜の基質線維改変に与える組織学的影響について
    田幡 千尋, 佐々木 宗輝, 本郷 裕美, 長谷川 智香, 李 敏啓, 山本 恒之, 飯田 順一郎, 工藤 明, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences  53-  (Suppl.)  134  -134  2011/09  [Not refereed][Not invited]
  • 卵巣摘出ラットの下顎歯槽骨におけるsclerostinの組織学的観察
    郭 頴, 柳 鋳晟, 長谷川 智香, 織田 公光, 山本 恒之, 網塚 憲生, 李 敏啓  Journal of Oral Biosciences  53-  (Suppl.)  148  -148  2011/09  [Not refereed][Not invited]
  • マウス肋骨骨折の治癒過程におけるFGF23の組織学的検討
    柳 鋳晟, 郭 頴, 長谷川 智香, 織田 公光, 山本 恒之, 網塚 憲生, 李 敏啓  Journal of Oral Biosciences  53-  (Suppl.)  148  -148  2011/09  [Not refereed][Not invited]
  • カニクイザル関節炎モデルの第二指近位関節における組織化学的解析
    山本 知真也, 佐々木 宗輝, 本郷 裕美, 長谷川 智香, 虎谷 彌, 柳 鋳晟, 李 敏啓, 森 裕史, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences  53-  (Suppl.)  151  -151  2011/09  [Not refereed][Not invited]
  • ビタミンDアナログ(Eldecalcitol)が卵巣摘出ラットの脛骨に及ぼす効果について
    李 敏啓, 長谷川 智香, 佐々木 宗輝, 田幡 千尋, 織田 公光, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences  53-  (Suppl.)  162  -162  2011/09  [Not refereed][Not invited]
  • 層板骨基質線維の立体構築に関わる骨芽細胞の役割について
    山本 恒之, 長谷川 智香, 佐々木 宗輝, 郭 頴, 田幡 千尋, 柳 鋳晟, 李 敏啓, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences  53-  (Suppl.)  162  -162  2011/09  [Not refereed][Not invited]
  • MMP-13遺伝子欠損マウスの軟骨内骨化における組織化学的解析
    吉沢 早織, 本郷 裕美, 佐々木 宗輝, 長谷川 智香, 李 敏啓, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences  53-  (Suppl.)  167  -167  2011/09  [Not refereed][Not invited]
  • RANKL遺伝子欠損マウスの破骨細胞様大型細胞における組織化学的検索
    宮本 幸奈, 佐々木 宗輝, 長谷川 智香, 織田 公光, 宇田川 信之, 山本 恒之, 李 敏啓, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences  53-  (Suppl.)  167  -167  2011/09  [Not refereed][Not invited]
  • 骨組織におけるオステオカルシンと基質グラ蛋白の局在について
    韋 山良, 佐々木 宗輝, 柳 鋳晟, 郭 穎, 田幡 千尋, 織田 公光, 田中 祐介, 李 敏啓, 戸塚 靖則, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences  53-  (Suppl.)  192  -192  2011/09  [Not refereed][Not invited]
  • ラット臼歯歯根膜コラーゲン線維とシャーピー線維の構造について
    田幡 千尋, 李 敏啓, 長谷川 智香, 佐々木 宗輝, 山本 恒之, 飯田 順一郎, 網塚 憲生  北海道歯学雑誌  32-  (1)  76  -76  2011/09  [Not refereed][Not invited]
  • Klotho遺伝子欠損マウスにおける骨細胞の組織学的所見
    佐々木 宗輝, 田幡 千尋, 長谷川 智香, 郭 頴, 李 敏啓, 山本 恒之, 井上 農夫男, 網塚 憲生  北海道歯学雑誌  32-  (1)  76  -76  2011/09  [Not refereed][Not invited]
  • Klotho遺伝子欠損環境における骨基質石灰化について
    佐々木 宗輝, 田幡 千尋, 長谷川 智香, 郭 頴, 李 敏啓, 山本 恒之, 井上 農夫男, 網塚 憲生  北海道歯学雑誌  32-  (1)  77  -77  2011/09  [Not refereed][Not invited]
  • アスコルビン酸合成能欠如ラットの歯根膜異常における形態学的検索
    長谷川 智香, 和田 悟史, 佐々木 宗輝, 柳 鋳晟, 山本 恒之, 大畑 昇, 李 敏啓, 網塚 憲生  北海道歯学雑誌  32-  (1)  77  -77  2011/09  [Not refereed][Not invited]
  • アスコルビン酸合成能欠如ラットの骨基質石灰化における組織学的検索
    長谷川 智香, 李 敏啓, 田幡 千尋, 和田 悟史, 郭 頴, 大畑 昇, 網塚 憲生  北海道歯学雑誌  32-  (1)  78  -78  2011/09  [Not refereed][Not invited]
  • klotho欠損マウス血管石灰化における病理機序の微細構造学的解明
    長谷川 智香, 李 敏啓, 佐々木 宗輝, 田幡 千尋, 郭 頴, 柳 鋳晟, 山本 恒之, 大畑 昇, 網塚 憲生  北海道歯学雑誌  32-  (1)  78  -78  2011/09  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚 憲生  Dental medicine research  31-  (2)  2011/07/31  [Not refereed][Not invited]
  • 卵巣摘出ラット脛骨の海綿骨におけるビタミンDアナログ-Eldecalcitol-の投与効果について
    李 敏啓, 長谷川 智香, 武田 聡, 佐々木 宗輝, 田幡 千尋, 織田 公光, 斎藤 一史, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  29回-  188  -188  2011/07  [Not refereed][Not invited]
  • アルカリフォスファターゼトランスジェニックマウスにおける基質石灰化機構の解明
    長谷川 智香, 織田 公光, 佐々木 宗輝, 田幡 千尋, 柳 鋳晟, 郭 穎, 井上 貴一朗, 李 敏啓, 小守 壽文, 山本 恒之, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  29回-  192  -192  2011/07  [Not refereed][Not invited]
  • klotho-/-環境における骨細胞は基質ミネラル維持不能を示す
    佐々木 宗輝, 田幡 千尋, 長谷川 智香, 郭 頴, 柳 鋳晟, 李 敏啓, 山本 恒之, 井上 農夫男, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  29回-  195  -195  2011/07  [Not refereed][Not invited]
  • 血管石灰化における微細構造学的機序の解明 klotho-/-マウス血管平滑筋細胞のtrans-differentiationと基質小胞形成
    長谷川 智香, 李 敏啓, 佐々木 宗輝, 田幡 千尋, 大城戸 一郎, 郭 頴, 柳 鋳晟, 山本 恒之, 横山 啓太郎, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  29回-  196  -196  2011/07  [Not refereed][Not invited]
  • ペリオスチン遺伝子欠損マウスの切歯歯根膜の基質線維改変における組織化学的検索
    田幡 千尋, 佐々木 宗輝, 長谷川 智香, 李 敏啓, 山本 恒之, 飯田 順一郎, 工藤 明, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  29回-  204  -204  2011/07  [Not refereed][Not invited]
  • 層板骨における骨芽細胞突起とコラーゲン線維の立体構築形成との関係について
    山本 恒之, 長谷川 智香, 佐々木 宗輝, 郭 頴, 田幡 千尋, 柳 鋳晟, 李 敏啓, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  29回-  235  -235  2011/07  [Not refereed][Not invited]
  • マウス肋骨骨折の治癒過程におけるFGF23の組織学的観察
    柳 鋳晟, 郭 穎, 長谷川 智香, 織田 公光, 山本 恒之, 網塚 憲生, 李 敏啓  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  29回-  250  -250  2011/07  [Not refereed][Not invited]
  • 歯周組織形成過程におけるAnnexin a5の発現と機能
    島田 明美, 小松 浩一郎, 中島 和久, 網塚 憲生, ブラッハフォーゲル・ベント, 二藤 彰  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  29回-  252  -252  2011/07  [Not refereed][Not invited]
  • 卵巣摘出ラットの下顎歯槽骨におけるsclerostinの局在
    郭 穎, 柳 鋳晟, 長谷川 智香, 山本 恒之, 網塚 憲生, 李 敏啓  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  29回-  283  -283  2011/07  [Not refereed][Not invited]
  • 高骨代謝回転モデル(OPG欠損)マウスにおけるDMP-1とsclerostinの産生
    長谷川 智香, 増木 英郎, 佐々木 宗輝, 田幡 千尋, 李 敏啓, 山本 恒之, 網塚 憲生, 小澤 英浩  THE BONE  25-  (2)  95  -100  2011/05  [Not refereed][Not invited]
  • 骨形成におけるPTHと活性型ビタミンDの作用 形態学的知見
    網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  21-  (2)  S53  -S53  2011/05  [Not refereed][Not invited]
  • 糖尿病性・ステロイド性骨粗鬆症に対する骨質を踏まえた病態解明アプローチ 骨細胞の障害機序および基質ミネラルの異常について
    網塚 憲生  医科学応用研究財団研究報告  28-  355  -359  2011/02  [Not refereed][Not invited]
  • 【骨・関節疾患の動物モデル】骨粗鬆症 OPG欠損マウスの骨病態
    長谷川 智香, 佐々木 宗輝, 田幡 千尋, 増木 英郎, 李 敏啓, 網塚 憲生  Clinical Calcium  21-  (2)  190  -196  2011/01  [Not refereed][Not invited]
     
    オステオプロテジェリン(OPG)欠損マウスでは、破骨細胞形成が促進されるだけでなく、骨芽細胞による骨形成も亢進される。そのため、骨改造も亢進するため骨基質には複雑なセメントラインが形成されるが、このことは骨細胞・骨細管系の配列を著しく不規則にしてしまい、骨細胞によるsclerostin産生が低下していることが明らかとなった。OPG欠損マウスは、破骨細胞形成系に関与するモデルマウスだけでなく、骨代謝研究に広く応用できると考えられる。(著者抄録)
  • 下村 淳子, 黒木, 松田 貴絵, 網塚 憲生, 下岡 正八  小児歯科学雑誌  48-  (5)  569  -569  2010/11/10  [Not refereed][Not invited]
  • 基質からみた硬組織の調節機構 石灰化基質に対する骨細胞の作用
    網塚 憲生, 李 敏啓, 山本 恒之  Journal of Oral Biosciences  52-  (Suppl)  88  -88  2010/09  [Not refereed][Not invited]
  • オステオプロテジェリン遺伝子欠損マウスにおける骨細胞産生蛋白の局在
    増木 英郎, 李 敏啓, 郭 頴, 長谷川 智香, 柳 鋳晟, 鈴木 礼子, 織田 公光, 山本 恒之, 川浪 雅光, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences  52-  (Suppl)  102  -102  2010/09  [Not refereed][Not invited]
  • 骨芽細胞特異的PTHrPトランスジェニックマウスの骨組織における解析
    李 敏啓, 長谷川 智香, 柳 鋳晟, 増木 英郎, 佐々木 宗輝, 田幡 千尋, 山本 恒之, 小守 壽文, 織田 公光, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences  52-  (Suppl)  102  -102  2010/09  [Not refereed][Not invited]
  • Klotho遺伝子欠損マウスの脛骨骨端部における骨細胞産生蛋白の局在について
    佐々木 宗輝, 李 敏啓, 増木 英郎, 長谷川 智香, 田幡 千尋, 織田 公光, 山本 恒之, 井上 農夫男, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences  52-  (Suppl)  104  -104  2010/09  [Not refereed][Not invited]
  • 根間中隔歯槽骨の骨細胞は骨改造に応じてsclerostin産生を調節する
    郭 頴, 李 敏啓, 柳 鋳晟, 増木 英郎, 織田 公光, 山本 恒之, 川浪 雅光, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences  52-  (Suppl)  104  -104  2010/09  [Not refereed][Not invited]
  • アスコルビン酸欠乏ラットの歯根膜異常における組織化学的検索
    長谷川 智香, 李 敏啓, 井上 貴一朗, 田幡 千尋, 佐々木 宗輝, 鈴木 礼子, 織田 公光, 山本 恒之, 大畑 昇, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences  52-  (Suppl)  124  -124  2010/09  [Not refereed][Not invited]
  • ラット臼歯の歯周組織におけるペリオスチンとファイブロネクチンの局在について
    田幡 千尋, 李 敏啓, 長谷川 智香, 佐々木 宗輝, 織田 公光, 山本 恒之, 工藤 明, 飯田 順一郎, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences  52-  (Suppl)  124  -124  2010/09  [Not refereed][Not invited]
  • 歯科インプラント周囲における骨細胞・骨細管系の組織化学的変化
    羽下 麻衣子, 野澤 佳世子, 上, 李 敏啓, 吉江 紀夫, 網塚 憲生, 前田 健康  Journal of Oral Biosciences  52-  (Suppl)  128  -128  2010/09  [Not refereed][Not invited]
  • 有細胞セメント質層板構造に関する走査型および透過型電子顕微鏡検索
    山本 恒之, 李 敏啓, 郭 頴, 柳 鋳晟, 増木 英郎, 長谷川 智香, 鈴木 礼子, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences  52-  (Suppl)  147  -147  2010/09  [Not refereed][Not invited]
  • RANKL遺伝子欠損マウスにおける骨・軟骨基質を取り込む細胞と活性型骨芽細胞の組織化学的検索
    宮本 幸奈, 李 敏啓, 長谷川 智香, 柳 鋳晟, 郭 頴, 増木 英郎, 織田 公光, 宇田川 信之, 山本 恒之, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences  52-  (Suppl)  189  -189  2010/09  [Not refereed][Not invited]
  • 【骨質】骨細胞による骨基質と骨質の調節機構
    網塚 憲生, 郭 頴, 長谷川 智香, 柳 鋳晟, 佐々木 宗輝, 沢村 祥子, 鈴木 礼子, 山本 恒之, 李 敏啓  THE BONE  24-  (3)  229  -233  2010/08  [Not refereed][Not invited]
     
    骨細胞・骨細管系は骨基質内に細胞突起を張り巡らせることにより細胞性ネットワークを形成している。骨細胞の機能としては、力学的負荷の感知、骨基質ミネラルなどの物質輸送、骨改造調節などがあげられ、特に、規則的配列を示す骨細管系は、力学的負荷の感知や物質輸送にも都合がよい構造を示すと思われる。また、骨細胞から産生されるFGF23、sclerostin、DMP-1は骨基質の性状、すなわち骨質にも影響を与えると考えられる。(著者抄録)
  • Calcium Pros and Cons 骨微細構造解析に骨組織検査は必要か Histomorphometryの利点(vs Imaging)
    網塚 憲生, 李 敏啓, 長谷川 智香, 山本 恒之  Clinical Calcium  20-  (8)  1272  -1275  2010/07  [Not refereed][Not invited]
  • periostinは歯根膜においてNotch1の安定性を調節することで細胞生存を制御している
    田辺 英幸, 高山 一成, 西山 尚志, 島崎 雅司, 喜井 勲, 李 敏啓, 網塚 憲生, 勝部 憲一, 工藤 明  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  28回-  221  -221  2010/07  [Not refereed][Not invited]
  • 卵巣摘出ラットの下顎歯槽骨における骨細胞機能に関連する蛋白の局在について
    郭 穎, 李 敏啓, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  28回-  243  -243  2010/07  [Not refereed][Not invited]
  • RANKL-/-マウスにおける骨芽細胞と骨・軟骨基質を取り込む細胞の組織学的解析
    李 敏啓, 郭 頴, 宇田川 信之, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  28回-  245  -245  2010/07  [Not refereed][Not invited]
  • 骨芽細胞特異的PTHrP過剰発現マウスの骨組織における組織化学的解析
    李 敏啓, 郭 穎, 小守 壽文, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  28回-  253  -253  2010/07  [Not refereed][Not invited]
  • 新たな骨形成不全症モデルマウスに見られた選択的スプライシング sealにおけるGT-AGルールの例外
    多部田 康一, 高橋 直紀, 前川 知樹, 山崎 和久, 網塚 憲生  新潟歯学会雑誌  40-  (1)  79  -81  2010/06  [Not refereed][Not invited]
  • 卵巣摘出ラットの下顎歯槽骨における骨細胞再生蛋白の局在について
    郭 頴, 李 敏啓, 柳 鋳晟, 山本 恒之, 川浪 雅光, 網塚 憲生  北海道歯学雑誌  31-  (1)  20  -20  2010/06  [Not refereed][Not invited]
  • アスコルビン酸合成能欠如ラットの骨基質石灰化における微細構造学的観察
    李 敏啓, 原 久仁子, 秋山 康博, 織田 公光, 網塚 憲生  解剖学雑誌  85-  (2)  56  -56  2010/06  [Not refereed][Not invited]
  • LI Minqi, HASEGAWA Tomoka, MASUKI Hideo, LIU Zhusheng, GUO Ying, SUZUKI Reiko, YAMAMOTO Tsuneyuki, FREITAS Paulo HL, AMIZUKA Norio  Journal of Oral Biosciences  52-  (2)  94  -99  2010/05/20  [Not refereed][Not invited]
     
    Mineralization of bone matrix starts with the formation of matrix vesicles secreted by osteoblasts, which subsequently grow into mineralized nodules. These nodules are globular structures formed by mineral crystals assembled in a radial fashion, and appear to be the final inducers of collagen mineralization. Despite its apparent simplicity, the course of bone mineralization is tightly controlled by many factors in the microenvironment. In this review, we will present our recent experiments on the general processes of bone mineralization. First, we will discuss the ultrastructural alteration of mineral crystals in the context of magnesium (Mg) insufficiency, which causes an elevation of calcium (Ca) concentrations in bone and of the pure form of hydroxyapatite. Such elevated Ca concentrations also induced premature collagen mineralization without the mediation of mineralized nodules. This could mean that the availability of elements, such as Mg, in the bone microenvironment is important for the <i>in vivo</i> generation of the pure form of hydroxyapatite. Next, we will examine collagen mineralization in the context of ascorbic acid insufficiency. Ascorbic acid is essential for collagen formation and, when it is not available, the typical, stout collagen microfibrils with striations cannot be identified. In their place, filamentous fibrils of collagen without striations, <i>i. </i><i>e.</i>, immature collagen microfibrils, are observed. In the osteoid, however, many mineralized nodules feature some sort of &ldquo;mineral extensions&rdquo; towards the immature microfibrils. It seems that collagen microfibrils, even if immature, serve as a scaffold for the mineralization of collagen fibrils. These findings reaffirm that a sophisticated set of regulatory steps is necessary for proper mineralization in bone.
  • RANKL遺伝子欠損マウスの骨芽細胞系細胞における組織学的解析
    宮本 幸奈, 李 敏啓, 長谷川 智香, 柳 鋳晟, 郭 頴, 鈴木 礼子, 沢村 祥子, 宇田川 信之, 山本 恒之, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  20-  (1)  S73  -S73  2010/05  [Not refereed][Not invited]
  • type I collagen promoterを用いたPTHrP Tgマウスの骨芽細胞における解析
    李 敏啓, 長谷川 智香, 柳 鋳晟, 郭 頴, 鈴木 礼子, 沢村 祥子, 山本 恒之, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  20-  (1)  S74  -S74  2010/05  [Not refereed][Not invited]
  • 卵巣摘出ラットの根間中隔歯槽骨におけるDMP-1およびsclerostinの局在
    郭 穎, 李 敏啓, 柳 鋳晟, 山本 恒之, 川浪 雅光, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  20-  (1)  S75  -S75  2010/05  [Not refereed][Not invited]
  • セメント質のコラーゲン線維層板構造における走査型電子顕微鏡観察
    山本 恒之, 李 敏啓, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  20-  (1)  S80  -S80  2010/05  [Not refereed][Not invited]
  • 吸収性プレートによる顎骨の再生
    小島 拓, 網塚 憲生, 鈴木 晶子, 芳澤 享子, 齊藤 力, 前田 健康  日本歯科医学会誌  29-  118  -118  2010/03  [Not refereed][Not invited]
  • c-fos遺伝子欠損マウスにおける骨細胞の組織化学的解析
    佐々木 理絵, 李 敏啓, 齋藤 直朗, Freitas Paulo, 織田 公光, 網塚 憲生  解剖学雑誌  85-  (Suppl.)  201  -201  2010/03  [Not refereed][Not invited]
  • LI M, GUO Y, LIU Z, SUZUKI R, YAMAMOTO T, AMIZUKA N  北海道歯学雑誌  30-  (2)  119  -121  2009/12/15  [Not refereed][Not invited]
  • 最新の歯学 骨細胞・骨細管系の役割における新知見
    李 敏啓, 郭 頴, 柳 鋳晟, 鈴木 礼子, 山本 恒之, 網塚 憲生  北海道歯学雑誌  30-  (2)  119  -121  2009/12  [Not refereed][Not invited]
  • 骨の形態学から学んだこと
    網塚 憲生  北海道歯学雑誌  30-  (2)  131  -131  2009/12  [Not refereed][Not invited]
  • 熱可塑性吸収プレートとβ-TCP補填材併用による骨増生法の開発 ラット頭蓋骨を用いた実験モデルにおける組織化学的検討
    小島 拓, 網塚 憲生, 鈴木 晶子, 芳澤 享子, 齊藤 力  日本再生歯科医学会誌  7-  (1)  90  -90  2009/12  [Not refereed][Not invited]
  • 【ビタミンKと骨UPDATE】基礎的事項 ビタミンK2と骨質 構造特性
    網塚 憲生, 李 敏啓, 郭 頴, 柳 鋳晟, 鈴木 礼子, 山本 恒之  Clinical Calcium  19-  (12)  1788  -1796  2009/11  [Not refereed][Not invited]
     
    ビタミンK2によりカルボキシル化されたオステオカルシンは、ハイドロキシアパタイト結晶のカルシウム(Ca)との結合性が上昇し、骨基質の性状が向上するものと考えられる。例えば、低マグネシウム飼育ラットにおいてコラーゲン性石灰化は異常を示すが、低マグネシウムラットにビタミンK2を投与すると、石灰化球とコラーゲン線維の会合を保つことで正常な石灰化を回復させることができた。一方、ビタミンK2の結抗剤であるワーファリンを投与すると、骨基質におけるオステオカルシンの局在性が低下するばかりでなく、本来、石灰化球を構成するはずの石灰化結晶塊がほぐれて散在してしまう。従って、ビタミンK2によってカルボキシル化されたオステオカルシンなどのグラタンパクは、骨における正常な石灰化に重要な役割を演ずると考えられる。(著者抄録)
  • 骨細胞・骨細管系におけるFGF23とDMP-1の免疫局在
    Ubaidus Sobhan, Sultana Sara, 織田 公光, 小島 拓, 李 敏啓, 鈴木 礼子, 柳 鋳晟, Freitas Paulo, 網塚 憲生, 小澤 英浩, 下村 淳子  THE BONE  23-  (4)  361  -366  2009/10  [Not refereed][Not invited]
  • 目で見るBone Biology(第20回) 骨細胞の機能
    李 敏啓, 長谷川 智香, 郭 頴, 柳 鋳晟, 鈴木 礼子, 山本 恒之, 網塚 憲生  骨粗鬆症治療  8-  (4)  267  -270  2009/10  [Not refereed][Not invited]
  • β-TCP補填材を用いた骨再生におけるカップリング現象の組織化学的解明
    小島 拓, 網塚 憲生, 芳澤 享子, 齊藤 力  日本口腔科学会雑誌  58-  (4)  274  -275  2009/09  [Not refereed][Not invited]
  • 【骨質因子としてのコラーゲン研究の進歩】コラーゲン線維の石灰化とその異常 微細構造学的見地から
    網塚 憲生, Ubaidus Sobhan, Sultana Sara, Freitas Paulo, 李 敏啓  腎と骨代謝  22-  (3)  185  -194  2009/07  [Not refereed][Not invited]
     
    骨基質には,リン酸カルシウムといった石灰化結晶だけでなく多くの有機成分が存在するが,そのほとんどがコラーゲン線維である.幼若な骨基質ではさまざまな方向を示すコラーゲン線維が観察されるが,緻密骨である皮質骨などを観察すると,コラーゲン線維が束状となり規則的な走行を示す.また,電顕観察を行うと,コラーゲン細線維の横紋構造に一致してリボン状の石灰化結晶塊が配列しており,コラーゲン線維の内部構造と石灰化結晶の配列は無関係ではない.しかしながら,未だにコラーゲン線維の石灰化過程についてはさまざまな説が提唱されており,今後の詳細な研究が期待される.(著者抄録)
  • 活性型ビタミンD3は高カルシウム血症を引き起こす投与量においても骨吸収を抑制する
    武田 聡, 斎藤 一史, 田村 達也, 高橋 文明, 李 敏啓, Luiz de Freitas, Paulo Henrique, 網塚 憲生, 尾形 悦郎  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  27回-  214  -214  2009/07  [Not refereed][Not invited]
  • 【ホルモンと骨粗鬆症UPDATE】カルシウム・リン調節系ホルモンと骨 骨・軟骨に対するPTH/PTHrP作用における形態学的知見
    網塚 憲生, 李 敏啓, 田村 正人, 織田 公光  Clinical Calcium  19-  (7)  935  -943  2009/06  [Not refereed][Not invited]
     
    副甲状腺ホルモン(parathyroid hormone:PTH)および副甲状腺ホルモン関連ペプチド(parathyroid hormone-related peptide:PTHrP)は同一の受容体であるPTH/PTHrP受容体に作用することが知られており、PTHは生後の骨代謝に、PTHrPは胎生期の軟骨に対して主に影響を及ぼす。PTHは骨芽細胞前駆細胞の増殖促進に作用し、その後の細胞分化・機能には破骨細胞とのカップリングが必要になることが示唆されている。また、軟骨形成におけるPTHrPのC末端領域の作用も明らかにされつつある。ここでは、近年報告されたPTHおよびPTHrPの骨・軟骨における作用について総説する。(著者抄録)
  • 【骨粗鬆症の薬物療法 薬効評価と臨床研究の進歩】骨細胞の微細構造と機能
    網塚 憲生, Ubaidus Sobhan, Freitas Paulo, Sultana Sara, 李 敏啓  日本臨床  67-  (5)  868  -871  2009/05  [Not refereed][Not invited]
  • 骨の形態的解析法の進歩 骨・軟骨組織における免疫組織化学
    網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  19-  (1)  S31  -S31  2009/05  [Not refereed][Not invited]
  • 骨質を石灰化基質の微細構造から考える
    網塚 憲生, 李 敏啓  日本骨形態計測学会雑誌  19-  (1)  S54  -S54  2009/05  [Not refereed][Not invited]
  • 系統組織学から見た骨改造の顕微解剖学 オーバービュー 小型哺乳類の骨改造
    網塚 憲生, 李 敏啓  解剖学雑誌  84-  (Suppl.)  71  -71  2009/03  [Not refereed][Not invited]
  • 前骨芽細胞として分類される細胞群における微細構造学的検索
    成松 花弥, 李 敏啓, 織田 公光, 網塚 憲生  解剖学雑誌  84-  (Suppl.)  199  -199  2009/03  [Not refereed][Not invited]
  • 骨リモデリングを調節する細胞群の新しい展開
    網塚 憲生  新潟歯学会雑誌  38-  (2)  129  -129  2008/12  [Not refereed][Not invited]
  • ビタミンK2は骨基質石灰化の微細構造学的プロセスを正常化する
    網塚 憲生, 李 敏啓, Freitas Paulo HL, Ubaidus Sobhan, Sultana Sara, 小林 正敏, 原 久仁子, 秋山 康博, 赤羽 章司, 小澤 英浩, 前田 健康  THE BONE  22-  (6)  687  -692  2008/11  [Not refereed][Not invited]
  • 【リン代謝をめぐる諸問題 FGF23を中心として】カルシウム・リン代謝における骨細胞の役割
    網塚 憲生, Ubaidus Sobhan, Freitas Paulo, Sultana Sara, 李 敏啓  THE BONE  22-  (6)  729  -735  2008/11  [Not refereed][Not invited]
     
    骨細胞は、骨基質内で骨基質ミネラルを調節するために都合のよい骨細管系を発達させており、FGF23、sclerostin、DMP-1といった因子を分泌することによって、全身性ミネラル、骨改造、骨基質石灰化を調節している。しかし一方で、骨細胞・骨細管系がどのような微細環境を形成し、また、どのようにミネラルの流出・流入を可能にするかについては今後の解明に期待がもたれる。(著者抄録)
  • ペリオスチンは、ゴルジ体においてフィブロネクチンとテネイシン-Cの結合の足場として機能し、脛骨過労性骨膜炎の発症を抑制する
    喜井 勲, 西山 尚志, 原田 伊知郎, 李 敏啓, 松本 健一, 斉藤 充, 松本 裕子, 市川 知宏, 高山 一成, 田辺 英幸, 高久田 和夫, 網塚 憲生, 工藤 明  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  26回-  172  -172  2008/10  [Not refereed][Not invited]
  • 【バイオサイエンスの現在 骨膜シートの臨床応用法を探る】骨膜のバイオロジー
    網塚 憲生  The Quintessence  27-  (9)  46  -47  2008/09  [Not refereed][Not invited]
  • 吸収性プレートを用いた骨増生モデルにおける新生骨の組織学的解析
    小島 拓, 網塚 憲生, 芳澤 享子, 齊藤 力  日本口腔科学会雑誌  57-  (4)  553  -553  2008/09  [Not refereed][Not invited]
  • 【骨細胞】骨細胞・骨細管系の顕微解剖学
    網塚 憲生, Ubaidus Sobhan, 小島 拓, Freitas Paulo HL, 李 敏啓, 下村 淳子  腎と骨代謝  21-  (3)  183  -190  2008/07  [Not refereed][Not invited]
     
    骨細胞は骨基質に埋め込まれた細胞であり,無数に張り巡らされた細胞突起で細胞性ネットワークを形成している.この細胞性ネットワークは,グループとして機能する可能性から骨細胞・骨細管系と呼ばれ,おもに,物質輸送,力学負荷感知,骨代謝回転の調節に影響を与えると考えられている.骨細胞・骨細管系は発生段階でみられる線維性骨などでは不規則な構造を示し,骨基質がより成熟・綴密化した骨では規則的な配列を示すようになる.このような骨細胞・骨細管系の再配列を可能にするのは骨改造である.成熟した骨の皮質骨では骨単位において,また,骨梁ではBSU(basic structural unit)において,機能的な骨細胞・骨細管系が発達しているとみなされる.ここでは,骨細胞・骨細管系における顕微解剖学的なわれわれの知見について述べたい.(著者抄録)
  • 骨リモデリングと骨細胞・骨細管系の構築に関する組織学的検索
    李 敏啓, Ubaidus Sobhan, Freitas Paulo HL, 小澤 英浩, 網塚 憲生  THE BONE  22-  (4)  451  -455  2008/07  [Not refereed][Not invited]
  • 骨の形と機能への疾患分子的アプローチ 骨形成系細胞におけるPTHとPTH/PTHrP受容体分子の画像イメージングと機能解析
    網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  18-  (2)  S37  -S37  2008/07  [Not refereed][Not invited]
  • 骨の組織化学・免疫電顕の実際と今後の展開
    網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  18-  (2)  S47  -S47  2008/07  [Not refereed][Not invited]
  • アスコルビン酸合成能欠如ラットの骨組織異常における組織化学的検索
    李 敏啓, 原 久仁子, 秋山 康博, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  18-  (2)  S88  -S88  2008/07  [Not refereed][Not invited]
  • OVXラットの柵状織においてED-71は骨微小モデリングを促進し、破骨細胞数を減少させる(ED-71 drives bone minimodeling and reduces osteoclastic number in trabeculae of OVX rats)
    Henrique Luiz de, Freitas Paulo, 李 敏啓, 齋藤 直朗, 高木 律男, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  18-  (2)  S90  -S90  2008/07  [Not refereed][Not invited]
  • 力学負荷モデル実験における軟骨細胞の組織学的変化
    Freitas Paulo HL, 小島 拓, Ubaidus Sobhan, 李 敏啓, 高木 律男, 前田 健康, 織田 公光, 小澤 英浩, 網塚 憲生  THE BONE  22-  (3)  247  -251  2008/06  [Not refereed][Not invited]
  • 【骨・軟骨研究の基礎と臨床】基礎編 骨の細胞形態学
    網塚 憲生, 李 敏啓, Freitas Paulo HL, Ubaidus Sobhan  THE BONE  22-  (3)  267  -274  2008/06  [Not refereed][Not invited]
     
    骨芽細胞は骨基質蛋白合成とその石灰化を行う一方、自ら産生した骨基質に埋まり骨細胞へと分化してゆく。骨芽細胞と骨細胞は互いに細胞突起を介した細胞性ネットワークを形成し、機能的なグループを作ると考えられる。前骨芽細胞は骨芽細胞の前駆細胞として存在するだけでなく、積極的に骨代謝に関与する細胞であり、in vivoではいくつかの表現型が存在する。また、破骨細胞は骨吸収を営む細胞であり、酸と基質蛋白分解酵素を分泌して骨基質を吸収する。破骨細胞は骨芽細胞系細胞の支持によって形成されるが、一方で、破骨細胞は骨芽細胞の活性や機能に対して影響を与えると推測される。ここでは、骨の細胞形態学を概説した。(著者抄録)
  • 歯槽骨における骨芽細胞と骨細管系の役割における検討 骨細胞特異的死滅マウスを用いた組織学的解析
    李 敏啓, 網塚 憲生  Clinical Calcium  18-  (7)  1029  -1030  2008/06  [Not refereed][Not invited]
  • 高Ca尿を伴う遺伝性低リン血症性くる病(HHRH;heredirary hypophosphatemic rickes with hypercalciuria)発症機構の解明
    瀬川 博子, 鬼塚 朱美, 伊藤 美紀子, 松本 満, 網塚 憲生, 宮本 賢一  日本腎臓学会誌  50-  (3)  307  -307  2008/04  [Not refereed][Not invited]
  • 骨細胞特異的死滅マウスの骨小腔・骨細管系における微細構造学的検索
    齋藤 直朗, 李 敏啓, 辰巳 佐和子, 池田 恭治, 網塚 憲生  解剖学雑誌  83-  (Suppl.)  160  -160  2008/03  [Not refereed][Not invited]
  • アスコルビン酸合成能欠如による骨組織異常の形態学的検索
    李 敏啓, 原 久仁子, 秋山 康博, 網塚 憲生  解剖学雑誌  83-  (Suppl.)  160  -160  2008/03  [Not refereed][Not invited]
  • 【骨質の評価】ステロイド性骨粗鬆症における骨質
    李 敏啓, 齋藤 直朗, 網塚 憲生  Clinical Calcium  18-  (3)  328  -335  2008/02  [Not refereed][Not invited]
     
    ステロイド性骨粗鬆症は、従来、骨組織における骨芽細胞の骨形成低下、破骨細胞の骨吸収亢進を示すと考えられてきた。しかし、骨密度(bone mineral density:BMD)が減少していなくとも骨折頻度が高いことから、ステロイド性骨粗鬆症は骨質が低下していることが指摘されてきた。ステロイド性骨粗鬆症の骨質低下のメカニズムはいまだに明らかにされていないが、近年、ステロイドによる骨細胞のアポトーシスやそれに伴う骨基質ミネラル維持・力学感知の阻害が、骨質低下の原因の一つであることが推測されている。(著者抄録)
  • ポリ乳酸プレートをGBR法に応用した骨増生について
    小島 拓, 網塚 憲生, 芳澤 享子, 齊藤 力  日本口腔科学会雑誌  57-  (1)  180  -180  2008/01  [Not refereed][Not invited]
  • 【新時代の骨粗鬆症学 骨折予防を見据えて】骨質 構成要素・評価方法など 骨基質の石灰化
    網塚 憲生, Freitas Paulo H.L, 小島 拓, Ubaidus Sobhan, 尚 光偉  日本臨床  65-  (増刊9 新時代の骨粗鬆症学)  194  -201  2007/11  [Not refereed][Not invited]
  • 【骨形成・骨吸収の最近のトピックス】骨形成のトピックス 骨形態からみた骨形成調節機構 前骨芽細胞の形態と骨形成に対する役割
    網塚 憲生, Freitas Paulo HL, Ubaidus Sobhan, 齋藤 直朗, 李 敏啓  THE BONE  21-  (6)  723  -729  2007/11  [Not refereed][Not invited]
     
    前骨芽細胞は骨芽細胞の前駆細胞であるとともに、それ自体、副甲状腺ホルモン(PTH)などに対して反応性を示す細胞である。また、前骨芽細胞の形態学的なphenotypeは1種類ではなく、ER-rich cell,endocytic cell,undifferentiated cell,PT-cellなどが報告されている。これら前骨芽細胞の微細構造と想定される役割について解説する。(著者抄録)
  • 骨細胞特異的死滅マウスを用いた骨芽細胞・骨細胞ネットワークの組織学的検討 歯槽骨の骨芽細胞に対する骨細胞ネットワークの関与について
    李 敏啓, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences  49-  (Suppl.)  97  -97  2007/08  [Not refereed][Not invited]
  • 老化モデルマウス顎下腺への男性ホルモンの効果
    鈴木 啓展, 網塚 憲生, 天野 修, 前田 健康  Journal of Oral Biosciences  49-  (Suppl.)  110  -110  2007/08  [Not refereed][Not invited]
  • 核小体移行型PTHrPトランスジェニックマウスにおける軟骨細胞異常の組織学的検討
    網塚 憲生, 小守 壽文, 李 敏啓  Journal of Oral Biosciences  49-  (Suppl.)  151  -151  2007/08  [Not refereed][Not invited]
  • 骨の細胞は骨質を変える
    網塚 憲生  Osteoporosis Japan  15-  (3)  563  -563  2007/07  [Not refereed][Not invited]
  • 李 敏啓, 原 久仁子, 秋山 康博, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌 = Journal of Japanese Society of Bone Morphometry  17-  (1)  2007/06/30  [Not refereed][Not invited]
  • 李 敏啓, 小守 壽文, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌 = Journal of Japanese Society of Bone Morphometry  17-  (1)  2007/06/30  [Not refereed][Not invited]
  • 骨代謝のバイオイメージング 骨形成のバイオイメージング
    網塚 憲生, Freitas Paulo H.L, Ubaidus Sobhan  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  25回-  105  -105  2007/06  [Not refereed][Not invited]
  • 骨細胞研究の進歩 骨細胞の微細構造
    網塚 憲生, Ubaidus Sobhan, Freitas Paulo H.L  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  25回-  151  -151  2007/06  [Not refereed][Not invited]
  • 核小体移行型PTHrPトランスジェニックマウスにおける軟骨細胞の異常について
    網塚 憲生, 小守 壽文, 李 敏啓  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  25回-  180  -180  2007/06  [Not refereed][Not invited]
  • 骨細胞の分布/陰窩-細管系に関する組織学的評価(Histochemical assessments on the distribution of osteocytes / lacunar canalicular system)
    Ubaidus Sobhan, 李 敏啓, 小島 拓, 織田 公光, 前田 健康, 高木 律男, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  25回-  203  -203  2007/06  [Not refereed][Not invited]
  • ペリオスチンによって安定化されるフィブロネクチンマトリックスは、メカニカルストレス感知機構を担う
    喜井 勲, 網塚 憲生, 李 敏啓, 中川 一樹, 高山 一成, 島崎 雅司, 田辺 英幸, 西山 尚志, 松本 裕子, 高久田 和夫, 市川 知広, 原田 伊知郎, 赤池 敏宏, 工藤 明  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  25回-  238  -238  2007/06  [Not refereed][Not invited]
  • ステロイド投与による骨細胞異常の組織学的検索
    李 敏啓, 原 久仁子, 秋山 康博, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  25回-  249  -249  2007/06  [Not refereed][Not invited]
  • 骨芽細胞系細胞のPTHによる間歇的刺激は骨芽細胞の存在に非依存性である(Intermittent PTH stimulates cells of the osteoblastic lineage independently of osteoblastic presence)
    Freitas Paulo, 李 敏啓, 二宮 禎, 中村 美どり, 織田 公光, 高木 律男, 宇田川 信之, 前田 健康, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  25回-  289  -289  2007/06  [Not refereed][Not invited]
  • 【ビタミンKの今日的意義と役割】基礎編 ビタミンK2の骨基質に対する微細構造学的メカニズム
    網塚 憲生, 李 敏啓  Pharma Medica  25-  (Suppl.)  12  -18  2007/06  [Not refereed][Not invited]
  • 細胞接着・細胞外基質・細胞間相互作用 骨芽細胞の石灰化におけるcaveolin-1の重要な役割(Caveolin-1 plays an important role in the calcification of osteoblasts)
    澤田 直樹, 竹谷 豊, 網塚 憲生, 山本 浩範, 武田 英二  日本発生生物学会・日本細胞生物学会合同大会要旨集  40回・59回-  51  -51  2007/05  [Not refereed][Not invited]
  • マウスの頭蓋顔面骨格形成時におけるFGF受容体1のカドヘリン-11による安定化(Cadherin-11 stabilizes FGF Receptor 1 during craniofacial skeletal development in mice)
    喜井 勲, 徐 方, 下村 淳子, 網塚 憲生, 常 智杰, 工藤 明  日本発生生物学会・日本細胞生物学会合同大会要旨集  40回・59回-  169  -169  2007/05  [Not refereed][Not invited]
  • プレドニゾロン投与による骨細胞障害の形態学的解析
    李 敏啓, 原 久仁子, 秋山 康博, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  17-  (1)  S66  -S66  2007/05  [Not refereed][Not invited]
  • 核小体移行型PTHrPの軟骨細胞の局在性における役割 トランスジェニックマウスを用いた形態学的検索
    李 敏啓, 小守 壽文, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  17-  (1)  S74  -S74  2007/05  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚 憲生, 李 敏啓, 下村 淳子  医学のあゆみ  221-  (1)  5  -13  2007/04/07  [Not refereed][Not invited]
  • 【骨粗鬆症-臨床と研究の最新動向】骨粗鬆症理解のための基礎 骨の構造と機能
    網塚 憲生, 李 敏啓, 下村 淳子  医学のあゆみ  221-  (1)  5  -13  2007/04  [Not refereed][Not invited]
     
    骨の構造は身体の支柱として、また血清カルシウムなどのミネラル調節に対応した機能を果たす。骨組織に存在する骨芽細胞、破骨細胞、骨細胞は、それらの分化・形成あるいは細胞活性にたがいに影響を及ぼしあいながら機能している。骨芽細胞は骨形成を担う細胞であり、骨基質蛋白合成と基質小胞を介した石灰化を誘導するが、自ら産生した骨基質に埋まり骨細胞へと分化をなし遂げる。骨芽細胞と骨細胞はたがいに細胞突起を介した細胞性ネットワークを形成し、機能的なグループをつくっていると考えられる。一方、破骨細胞は骨吸収を営む細胞であり、酸と基質蛋白分解酵素を分泌して骨基質を吸収する。破骨細胞は骨芽細胞系細胞の支持によって形成されるが、一方で、破骨細胞は骨芽細胞の活性や機能に対して影響を与えると推測される。このような破骨細胞と骨芽細胞は古い骨基質と新しい骨基質へと改変する骨改造を営むが、それは単に基質だけではなく、骨細胞の分布を規則的に構築する現象でもある。ここでは骨の構造と機能を概説した。(著者抄録)
  • リン代謝調節機構におけるNpt2aとNpt2cの役割
    瀬川 博子, 鬼塚 朱美, 塩沢 和代, 巴 由佳, 桑波田 雅士, 伊藤 美紀子, 松本 満, 網塚 憲生, 宮本 賢一  日本腎臓学会誌  49-  (3)  236  -236  2007/04  [Not refereed][Not invited]
  • MMP-9の軟骨内骨化における役割に関する組織学的検討
    小島 拓, 齊藤 力, 網塚 憲生  Clinical Calcium  17-  (5)  795  -796  2007/04  [Not refereed][Not invited]
  • 【骨質と骨粗鬆症】骨質と石灰化
    網塚 憲生, Ubaidus Sobhan, 李 敏啓  骨粗鬆症治療  6-  (1)  33  -40  2007/01  [Not refereed][Not invited]
     
    骨基質の石灰化は「骨密度」だけでは評価しきれない点が多く、骨基質の有機成分や細胞との関連性を考える必要がある。骨芽細胞がおこなう初期石灰化は、基質小胞性石灰化とコラーゲン性石灰化の過程に分けられるが、ともにカルシウムやリン酸を供給する酵素やプロテオグリカンなどの有機成分などによる調節を受ける。皮質骨においては、コラーゲン線維は幾何学的に規則的な配列を示し、また、骨細胞の骨細管もコラーゲン線維と関連して規則的な走行を示す。この形態学的特徴は骨細胞・骨細管系のmechanosensor,chemotransducerとして効率的に機能するために都合の良い構造と考えられる。(著者抄録)
  • 骨転移巣における破骨細胞の局在と基質分解酵素産生について 破骨細胞による基質認識機構の可能性
    李 敏啓, 網塚 憲生, Henrique Paulo, Ubaidus Sobhan, 小島 拓, 小澤 英浩  THE BONE  21-  (1)  3  -7  2007/01  [Not refereed][Not invited]
  • 【骨質】骨の微細構造と骨質(1)
    小澤 英浩, 中村 浩彰, 李 敏啓, 網塚 憲生  THE BONE  21-  (1)  21,13  -34,13  2007/01  [Not refereed][Not invited]
     
    骨は生体の中で最も細胞外基質が豊富な組織であり、そこにヒドロキシアパタイト結晶が特異的に沈着することによって特徴付けられている。したがって、骨質の要因の多くは「骨基質」に由来すると考えられるが、その調節は「骨の細胞群」が行っている。骨基質における石灰化は、基質小胞性石灰化とコラーゲン性石灰化の過程に分けられるが、それらは非コラーゲン性蛋白質やプロテオグリカンなどの有機成分による調節を受ける。一方、骨基質に多量に含まれるコラーゲン線維は、皮質骨では規則的な配列を示すことでヒドロキシアパタイト結晶の沈着・配向とともに力学的負荷に対する抵抗を示す。(著者抄録)
  • 【骨質】骨質関連因子 骨基質
    李 敏啓, Ubaidus Sobhan, 網塚 憲生  THE BONE  21-  (1)  59  -65  2007/01  [Not refereed][Not invited]
     
    骨は生体の中で最も細胞外基質が豊富な組織である。したがって、骨質の要因の多くは「骨基質」に由来すると考えられる。骨基質における石灰化は、基質小胞性石灰化とコラーゲン性石灰化の過程に分けられるが、非コラーゲン性蛋白やプロテオグリカンなどの有機成分による調節を受ける。一方、骨基質に多量に含まれるコラーゲン線維は、皮質骨では規則的な配列を示すことで力学的負荷に対する抵抗を示す。また、石灰化骨基質に張り巡らされた骨細胞・骨細管系は内部歪みの感知や物質輸送に関与することで骨質に寄与すると考えられる。(著者抄録)
  • 網塚 憲生, Sobhan Ubaidus, 李 敏啓  骨粗鬆症治療  6-  (1)  33  -40  2007/01  [Not refereed][Not invited]
  • 核小体移行型PTHrPトランスジェニックマウスの骨端軟骨における組織解析
    李 敏啓, 網塚 憲生  新潟歯学会雑誌  36-  (2)  317  -317  2006/12  [Not refereed][Not invited]
  • 骨端軟骨のFGFR3発現局在における分子組織化学的検索
    青木 由香莉, 李 敏啓, Sobhan Ubaidus, 小澤 英浩, 前田 健康, 吉江 弘正, 山崎 和久, 網塚 憲生  新潟歯学会雑誌  36-  (2)  317  -318  2006/12  [Not refereed][Not invited]
  • MMP-9遺伝子欠損マウスにおける軟骨内骨化異常の組織学的解析
    小島 拓, 李 敏啓, 齊藤 力, 前田 健康, 網塚 憲生  新潟歯学会雑誌  36-  (2)  318  -318  2006/12  [Not refereed][Not invited]
  • 骨リモデリングと骨細胞・骨細管系の再構築に関する形態学的検索
    広瀬 聡, 李 敏啓, 坂上 直子, 小島 拓, 織田 公光, 網塚 憲生, 齊藤 力  新潟歯学会雑誌  36-  (2)  318  -319  2006/12  [Not refereed][Not invited]
  • カップリングとリモデリングのどちらが骨細胞・骨細管系の構築を規定するか
    坂上 直子, 李 敏啓, Sobhan Ubaidus, Henrique Paulo, 小島 拓, 織田 公光, 小澤 英浩, 網塚 憲生  新潟歯学会雑誌  36-  (2)  319  -319  2006/12  [Not refereed][Not invited]
  • 軟骨内骨化のMMP-9の役割における組織学的検討
    小島 拓, 李 敏啓, 齊藤 力, 前田 健康, 網塚 憲生  Journal of Oral Biosciences  48-  (Suppl.)  126  -126  2006/09  [Not refereed][Not invited]
  • マウス歯の発生過程におけるTIMP-2とPeriostinは類似の時間的空間的発現パターンを示す
    吉羽 永子, 吉羽 邦彦, 興地 隆史, 斎藤 正寛, 横井 隆政, 細矢 明宏, 網塚 憲生, 小澤 英浩  Journal of Oral Biosciences  48-  (Suppl.)  153  -153  2006/09  [Not refereed][Not invited]
  • 【わが国における骨代謝研究のあゆみ】PTHrPと軟骨形成
    網塚 憲生, 李 敏啓  THE BONE  20-  (5)  599  -604  2006/09  [Not refereed][Not invited]
     
    副甲状腺ホルモン関連ペプチド(PTHrP)は、1940年代に副甲状腺ホルモン(PTH)様の物質としてその存在が示唆され、1980年代にクローニングされている。PTHrPは、当初、原癌遺伝子として認識されていたが、その後に軟骨形成に関与すること、核小体移行を行うこと、骨芽細胞のsurvival因子として作用することなどが明らかにされてきた。ここでは軟骨に関与するPTHrP研究の20年を振り返ってみたい。(著者抄録)
  • ポリ乳酸プレートとハイドロキシアパタイト補填材併用による骨再生の組織化学的検索
    小島 拓, 網塚 憲生, 芳澤 享子, 齊藤 力  日本口腔外科学会雑誌  52-  (Suppl.)  212  -212  2006/09  [Not refereed][Not invited]
  • 【新たなPTHの意義】骨格組織におけるPTH受容体の作用
    網塚 憲生, 李 敏啓  腎と骨代謝  19-  (3)  199  -205  2006/07  [Not refereed][Not invited]
     
    1991年にクローニングされたPTH受容体(PTH-R1)はおもに骨芽細胞,軟骨細胞,腎臓の尿細管細胞などに存在し,PKA/cAMP経路とPLC経路によってそのシグナルを伝える.PTH-R1シグナルは骨・軟骨形成に重要であることが明らかにされているが,とくにPKA/cAMP経路を介して軟骨細胞の分化増殖を調節すると考えられる.PTHrPの軟骨細胞の増殖に対する作用はp57Kip2を介して,また増殖層から肥大化細胞層への分化に対してはIndian hedgehogを介して間接的に作用する.一方で,PTHrPは骨芽細胞から産生されautocrine/paracrine的に作用することで,骨芽細胞の増殖やアポトーシスの抑制に作用することが推測されている(著者抄録)
  • klotho遺伝子欠損が骨の細胞および骨基質に及ぼす影響
    鈴木 啓展, 大島 勇人, 織田 公光, 李 敏啓, 網塚 憲生, 吉江 弘正, 野田 政樹, 前田 健康, 小澤 英浩  THE BONE  20-  (4)  395  -399  2006/07  [Not refereed][Not invited]
  • 骨評価の最新の知見 骨構造と骨質 モデルマウスにみるカップリングとリモデリング
    網塚 憲生, 李 敏啓  日本骨形態計測学会雑誌  16-  (2)  S56  -S56  2006/07  [Not refereed][Not invited]
  • 破骨細胞の分化制御 破骨細胞の作り方 形態からみた骨吸収とカップリング
    網塚 憲生, 李 敏啓  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  24回-  92  -92  2006/07  [Not refereed][Not invited]
  • ペリオスチンは力学的負荷依存的骨形成に必須である
    喜井 勲, 松本 裕子, Li Minqi, 田辺 英幸, 中川 一樹, 高山 一成, 東 由明, 高久田 和夫, 網塚 憲生, 工藤 明  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  24回-  170  -170  2006/07  [Not refereed][Not invited]
  • periostinとCCN3によるNotchシグナルの制御
    田辺 英幸, 喜井 勲, 森山 明美, 李 敏啓, 網塚 憲生, 勝部 憲一, 工藤 明  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  24回-  171  -171  2006/07  [Not refereed][Not invited]
  • 歯槽骨の骨芽細胞機能に対する骨細胞の関与 骨細胞死滅マウスを用いた組織学的検討
    李 敏啓, 石井 清朗, 辰巳 佐和子, 池田 恭治, 網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  24回-  185  -185  2006/07  [Not refereed][Not invited]
  • 骨芽細胞の骨石灰化におけるカベオリンの役割
    澤田 直樹, 竹谷 豊, 網塚 憲生, 山本 浩範, 武田 英二  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  24回-  185  -185  2006/07  [Not refereed][Not invited]
  • 高カルシウム尿症を伴う低リン血症性クル病(HHRH)原因遺伝子type IIc Na/Piトランスポーターの生理学的役割の解明
    瀬川 博子, 鬼塚 朱美, 塩沢 和代, 荒波 史, 古谷 順也, 伊藤 美紀子, 桑波田 雅士, 松本 満, 網塚 憲生, 宮本 賢一  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  24回-  186  -186  2006/07  [Not refereed][Not invited]
  • MMP-13は骨折治癒過程における軟骨性仮骨の吸収に必要である
    小崎 直人, 亀倉 暁, 川口 浩, 李 敏啓, 網塚 憲生, 戸山 芳昭, 高石 官成  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  24回-  207  -207  2006/07  [Not refereed][Not invited]
  • MMP-9遺伝子欠損マウスにおける軟骨内骨化異常の組織化学的検討
    小島 拓, 網塚 憲生, 李 敏啓, 小崎 直人, 齊藤 力, 高石 官成, 前田 健康  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  24回-  219  -219  2006/07  [Not refereed][Not invited]
  • マウス乳癌細胞株4Tlの骨転移における骨破壊メカニズムの解析
    中村 智香, 小野 加津広, 神谷 貞浩, 赤津 拓彦, 久貝 信夫, 李 敏啓, 網塚 憲生, 大湾 一郎, 二村 典行, 和田 誠基  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  24回-  254  -254  2006/07  [Not refereed][Not invited]
  • AMIZUKA Norio, LI Minqi  日本骨形態計測学会雑誌 = Journal of Japanese Society of Bone Morphometry  16-  (2)  2006/07/01  [Not refereed][Not invited]
  • 青木 由香莉, 李 敏啓, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  16-  (2)  S73  -S73  2006/07/01  [Not refereed][Not invited]
  • 李 敏啓, 石井 清朗, 辰巳 佐和子, 池田 恭治, 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  16-  (2)  S69  -S69  2006/07/01  [Not refereed][Not invited]
  • DE FREITAS PAULO, HENRIQUE Luiz, AMIZUKA Norio, LI Minqi, TAKAGI Ritsuo, MAEDA Takeyasu  日本骨形態計測学会雑誌 = Journal of Japanese Society of Bone Morphometry  16-  (2)  2006/07/01  [Not refereed][Not invited]
  • 小島 拓, 網塚 憲生, 李 敏啓, 小崎 直人, 齊藤 力, 高石 官成, 前田 健康  日本骨形態計測学会雑誌  16-  (2)  S88  -S88  2006/07/01  [Not refereed][Not invited]
  • 軟骨代謝の研究 基礎と臨床 最近の進歩 基礎 軟骨の組織学から見たPTHrPの役割
    李 敏啓, 網塚 憲生  Clinical Calcium  16-  (7)  1221  -1227  2006/06  [Not refereed][Not invited]
     
    副甲状腺ホルモン関連ペプチド(parathyroid hormone-related peptide:PTHrP)は軟骨細胞の分化増殖に重要な因子として明らかにされてきた.その作用は,軟骨細胞の増殖亢進と肥大化軟骨細胞への分化抑制によるものと考えられる.一方で,シグナル伝達の経路としては,GタンパクG(s)を介してアデニレートシクラーゼが活性化され,環状アデノシン-リン酸(cAMP)産生に伴うプロテインキナーゼA(PKA)の活性化シグナルと,Gタンパク質G(q)を介してホスホリパーゼC(PLC)が活性化され,イノシトールトリスリン酸(IP3)とジアシルグリセロール(DAG)の産生に伴うPKCの活性シグナルが大まかに考えられる.近年の遺伝子組み換えマウスの技術により,PLC活性を欠落した副甲状腺ホルモン(PTH)/PTHrP受容体を発現するマウス,および軟骨細胞特異的にG(s)αを欠損するマウスによって,cAMP/PKAは軟骨細胞の増殖亢進・分化抑制に,また,PLCは軟骨細胞の増殖抑制・分化促進に作用していることが明らかにされた.しかしながら,生理的にはcAMP/PKA活性がPLPC活性を上回ると考えられるが,N+/H+交換体調節因子(NHERF2)がPTH/PTHrP受容体のC末端に結合し,cAMP/PKA活性を抑制する機構も明らかにされている(著者抄録)
  • 骨芽細胞の活性化に対する破骨細胞の関与 op/opマウスにおける骨芽細胞と骨基質石灰化
    坂上 直子, 李 敏啓, 網塚 憲生, 宇田川 信之, 小澤 英浩  THE BONE  20-  (3)  263  -267  2006/05  [Not refereed][Not invited]
  • 生後マウスにおける下顎頭軟骨の経時的観察
    池田 順行, Hossain Kazi Sazzad, 井上 佳世子, 鈴木 晶子, 高木 律男, 前田 健康, 網塚 憲生  日本顎関節学会雑誌  18-  (1)  42  -42  2006/04  [Not refereed][Not invited]
  • 【悪性腫瘍と骨】悪性腫瘍に伴う骨病変の病理組織
    李 敏啓, 網塚 憲生  Clinical Calcium  16-  (4)  591  -597  2006/03  [Not refereed][Not invited]
     
    骨転移は骨吸収型,骨形成型,骨梁間型に大きく分けられるが,骨吸収型の骨転移は破骨細胞による骨吸収によるところが大きい.初期の骨転移巣では,腫瘍細胞が骨芽細胞,間質細胞,破骨細胞,血管内皮細胞などと混在するとともに,活発な細胞増殖を示す.このような初期転移巣では,破骨細胞前駆細胞がアルカリホスファターゼ/receptor activator of NF-κB ligand(RANKL)陽性骨芽細胞と細胞接触を示すことから,破骨細胞形成が既に始まっていることが推測された.一方で,一度形成された破骨細胞は,その細胞膜に発現するCD44と細胞外基質のオステオポンチンとの結合を介して,腫瘍巣の間質内を自由に移動できるものと考えられる.本稿では,腫瘍巣の増大を可能にすると思われる破骨細胞性骨吸収,血管新生,基質分解など組織病理学的な微細環境について述べたい(著者抄録)
  • SUZUKI Hironobu, AMIZUKA Norio, ODA Kimimitsu, LI Minqi, YOSHIE Hiromasa, OHSHIMA Hayato, NODA Masaki, MAEDA Takeyasu  Arch Histol Cytol  68-  (5)  371  -381  2006/03/01  [Not refereed][Not invited]
  • 癌の骨転移巣における血管新生と基質分解の微細環境
    李 敏啓, 網塚 憲生, 前田 健康, 島村 拓也, 小澤 英浩  THE BONE  20-  (1)  3  -7  2006/01  [Not refereed][Not invited]
  • 顎関節関節腔形成における血管内皮細胞とマクロファージの動態
    鈴木 晶子, 野澤 佳世子, 上, 網塚 憲生, 前田 健康  新潟歯学会雑誌  35-  (2)  246  -246  2006/01  [Not refereed][Not invited]
  • 骨芽細胞の活性に及ぼす破骨細胞の影響(第一報) op/opマウスを用いた組織化学的検討
    坂上 直子, 網塚 憲生, 李 敏啓, 前田 健康  新潟歯学会雑誌  35-  (2)  257  -257  2006/01  [Not refereed][Not invited]
  • 骨芽細胞の活性に及ぼす破骨細胞の影響(第二報) c-src遺伝子欠損マウスを用いた組織化学的検討
    坂上 直子, 網塚 憲生, 李 敏啓, Freitas Paulo H.L, 前田 健康  新潟歯学会雑誌  35-  (2)  257  -257  2006/01  [Not refereed][Not invited]
  • ポリ乳酸プレートおよびhydroxyapatite補填材併用による骨再生の組織化学的検索
    小島 拓, 網塚 憲生, 鈴木 晶子, 芳澤 享子, 齊藤 力, 前田 健康  新潟歯学会雑誌  35-  (2)  264  -264  2006/01  [Not refereed][Not invited]
  • チタンインプラント植立時に併用したα-TCP系自己硬化型補填材が骨再生に及ぼす影響
    中舘 正芳, 網塚 憲生, 野村 修一, 前田 健康  新潟歯学会雑誌  35-  (2)  265  -265  2006/01  [Not refereed][Not invited]
  • Y Taguchi, N Amizuka, M Nakadate, H Ohnishi, N Fujii, K Oda, S Nomura, T Maeda  BIOMATERIALS  26-  (31)  6158  -6166  2005/11  [Not refereed][Not invited]
     
    This study was designed to evaluate the histological changes during ossification and cellular events including osteogenic differentiation responding to collagenous bioresorbable membranes utilized for GBR. Standardized artificial bony defects were prepared at rat maxillae, and covered with a collagenous bioresorbable membrane. These animals were sacrificed at 1, 2, 3 and 4 weeks after the GBR-operation. The paraffin sections were subject to tartrate resistant acid phosphatase (TRAP) enzyme histochemistry and immunohistochemistry for alkaline phosphatase (ALP), osteopontin (OP) and osteocalcin (OC). In the first week of the experimental group, woven bone with ALP-positive osteoblasts occupied the lower half of the cavity. The collagenous membrane included numerous ALP-negative cells and OP-immunoreactive extracellular matrices. At 2 weeks, the ALP-, OP- and OC-immunoreactivity came to be recognizable in the region of collagenous membrane. Since ALP-negative soft tissue separated the collagenous membrane and the new bone originating from the cavity bottom, the collagenous membrane appeared to induce osteogenesis in situ. At 3 weeks, numerous collagen fibers of the membrane were embedded in the adjacent bone matrix. At 4 weeks, the membrane-associated and the cavity-derived bones had completely integrated, showing the same height of the periosteal ridge as the surrounding alveolar bones. The collagen fibers of a GBR-membrane appear to participate in osteogenic differentiation. (c) 2005 Elsevier Ltd. All rights reserved.
  • A Suzuki, K Nozawa-Inoue, N Ikeda, N Amizuka, K Ono, R Takagi, T Maeda  ANATOMICAL RECORD PART A-DISCOVERIES IN MOLECULAR CELLULAR AND EVOLUTIONARY BIOLOGY  286A-  (2)  908  -916  2005/10  [Not refereed][Not invited]
     
    Previous developmental studies on the temporomandibular joint (TMJ) have proposed several hypotheses on the formation of its articular cavity. However, detailed information is meager. The present study examined the formation process of the articular cavity in the rat TMJ by immunocytochemistry for CD31, RECA-1, and ED1, which are useful cellular markers for endothelial cells and monocyte/macrophage lineages, respectively. The upper articular cavity formation had begun by embryonic day 21 (E21) and was completed at postnatal day 1 (P1) in advance of the lower cavitation; the latter took place from P1 to P3. The occurrence and distribution pattern of the CD31-, RECA-1-, and ED1-positive cells differed between the upper and lower articular cavity-forming areas: the ED1-positive cells exclusively occurred in the area of the prospective upper articular cavity prior to its formation, while no ED1-positive cell appeared in the lower cavity-forming area. In contrast, the CD31- and RECA-1-positive endothelial cells were restricted to the lower cavity-forming area (never the prospective upper cavity) at E19 and diminished thereafter. Throughout the cavity formation, we failed to find any apoptotic cells in the cavity formation area, indicating no involvement of apoptosis in the cavity formation in TMJ. The present findings on the behaviors of endothelial cells and ED1-positive cells show a possibility of different mechanism in the cavity formation between the upper and lower articular cavities in the rat TMJ. The appearance of ED1-reactive cells and temporal vascularization may play crucial roles in the upper and lower articular cavity formation, respectively. (C) 2005 Wiley-Liss, Inc.
  • 【臨床分子内分泌学 甲状腺・副甲状腺・骨内分泌代謝系】カルシトニン 基礎研究の進展 カルシトニンシステム遺伝子改変動物 カルシトニン受容体遺伝子改変動物
    鈴木 啓展, 網塚 憲生, 前田 健康  日本臨床  63-  (増刊10 臨床分子内分泌学(3))  188  -193  2005/10  [Not refereed][Not invited]
  • 【臨床分子内分泌学 甲状腺・副甲状腺・骨内分泌代謝系】副甲状腺ホルモン 基礎研究の進展 副甲状腺ホルモン/副甲状腺ホルモン関連ペプチド受容体とシグナル伝達
    網塚 憲生, 李 敏啓  日本臨床  63-  (増刊10 臨床分子内分泌学(3))  278  -283  2005/10  [Not refereed][Not invited]
  • 【臨床分子内分泌学 甲状腺・副甲状腺・骨内分泌代謝系】副甲状腺ホルモン 基礎研究の進展 副甲状腺ホルモンシステム遺伝子改変動物 副甲状腺ホルモン/副甲状腺ホルモン関連ペプチド受容体遺伝子改変マウス
    網塚 憲生, 李 敏啓  日本臨床  63-  (増刊10 臨床分子内分泌学(3))  300  -305  2005/10  [Not refereed][Not invited]
  • 【臨床分子内分泌学 甲状腺・副甲状腺・骨内分泌代謝系】副甲状腺ホルモン 副甲状腺ホルモン関連ペプチド 副甲状腺ホルモン関連ペプチド遺伝子改変マウス
    網塚 憲生, 李 敏啓  日本臨床  63-  (増刊10 臨床分子内分泌学(3))  382  -386  2005/10  [Not refereed][Not invited]
  • 【骨壊死 最新の診断と治療】基礎的アプローチ 原因に関する基礎研究 骨髄損傷後骨再生モデルにおけるステロイドの影響
    近藤 直樹, 徳永 邦彦, 伊藤 知之, 荒井 勝光, 伊藤 雅之, 北原 洋, 網塚 憲生, 李 敏啓, 高野 玲子, 遠藤 直人  別冊整形外科  (48)  35  -40  2005/10  [Not refereed][Not invited]
     
    8週齢雌ラットの右脛骨骨髄を穿孔して作成した骨髄損傷モデルに,100mg/kg/日のステロイドを3日間臀筋内に投与し,骨再生過程におけるステロイドの影響を組織学的・分子生物学的に検討した.ステロイド投与群(M群)は組織学的に投与7日で新生骨と線維芽細胞様細胞が混在し,10,14日では対照群と比較してより多くの新生骨が残存していた.しかし,新生骨単位面積あたりの破骨細胞数は両群間で有意差を認めず,Cathepsin Kの免疫染色でも染色性に差を認めなかった.また,M群の最大骨量は対照群より有意に小さかったが,骨芽細胞分化マーカー(アルカリホスファターゼ,I型プロコラーゲンα1鎖,オステオポンチン,オステオカルシン)は両群間で差を認めず,ステロイドは出現した骨芽細胞の分化には影響を与えないと考えられた
  • S Niida, T Kondo, S Hiratsuka, SI Hayashi, N Amizuka, T Noda, K Ikeda, M Shibuya  PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA  102-  (39)  14016  -14021  2005/09  [Not refereed][Not invited]
     
    VEGF receptor 1 (VEGFR-1/Flt-1) is a high-affinity tyrosine kinase (TK) receptor for VEGF and regulates angiogenesis as well as monocyte/ macro phage functions. We previously showed that the osteoclast deficiency in osteopetrotic Csf1(op)/Csf1(op) (op/op) mice is gradually restored in an endogenous, VEGF-dependent manner. However, the molecular basis of the recovery is still not clear. To examine which VEGFR is important and to clarify how colony-stimulating factor 1 (CSF-1) and VEGF signals interact in osteoclastogenesis,we introduced a VEGFR-1 signaling deficiency (F1t1(TK-)/(-)) into op/op mice. The original FlT1(TK-/-) mice showed mild osteoclast reduction without bone marrow suppression. The double mutant (op/opFlt1(TK-)/(-)) mice, however, exhibited very severe osteoclast deficiency and did not have numbers of osteoclasts sufficient to form the bone marrow cavity. The narrow bone marrow cavity in the op/opFlt1(TK-)/(-) mice was gradually replaced with fibrous tissue, resulting in severe marrow hypoplasia and extramedullary hematopoiesis. in addition to osteoclasts, osteoblasts also decreased in number in the op/opFlt1(TK-)/(-) mice. These results strongly suggest that the interaction of signals by means of VEGFR-1 and the CSF-1 receptor plays a predominant role not only in osteoclastogenesis but also in the maintenance of bone marrow functions.
  • DS Miao, B He, YB Jiang, T Kobayashi, MA Soroceanu, J Zhao, HY Su, XK Tong, N Amizuka, A Gupta, HK Genant, HM Kronenberg, D Goltzman, AC Karaplis  JOURNAL OF CLINICAL INVESTIGATION  115-  (9)  2402  -2411  2005/09  [Not refereed][Not invited]
     
    Mice heterozygous for targeted disruption of Pthrp exhibit, by 3 months of age, diminished bone volume and skeletal microarchitectural changes indicative of advanced osteoporosis. Impaired bone formation arising from decreased BM precursor cell recruitment and increased apoptotic death of osteoblastic cells was identified as the underlying mechanism for low bone mass. The osteoporotic phenotype was recapitulated in mice with osteoblast-specific targeted disruption of Pthrp, generated using Cre-LoxP technology, and defective bone formation was reaffirmed as the underlying etiology. Daily administration of the 1-34 amino-terminal fragment of parathyroid hormone (PTH 1-34) to Pthrp(+/-) mice resulted in profound improvement in all parameters of skeletal microarchitecture, surpassing the improvement observed in treated WT littermates. These findings establish a pivotal role for osteoblast-derived PTH-related protein (PTHrP) as a potent endogenous bone anabolic factor that potentiates bone formation by altering osteoblast recruitment and survival and whose level of expression in the bone microenvironment influences the therapeutic efficacy of exogenous PTH 1-34.
  • インプラント周囲に充填したα-TCP系骨補填材が誘導する新生骨について
    中舘 正芳, 網塚 憲生, 野村 修一, 前田 健康  Journal of Oral Biosciences  47-  (Suppl.)  100  -100  2005/09  [Not refereed][Not invited]
  • ポリ乳酸プレートとhydroxyapatite/atelocollagen複合骨補填材による骨増生の組織化学的検索
    小島 拓, 網塚 憲生, 鈴木 晶子, 芳澤 享子, 齊藤 力, 前田 健康  Journal of Oral Biosciences  47-  (Suppl.)  100  -100  2005/09  [Not refereed][Not invited]
  • klotho欠損マウスにおける骨基質の石灰化異常
    鈴木 啓展, 網塚 憲生, 野田 政樹, 大島 勇人, 前田 健康  Journal of Oral Biosciences  47-  (Suppl.)  100  -100  2005/09  [Not refereed][Not invited]
  • Blomstrand型およびJansen型軟骨異形成症を誘導する変異型PTH/PTHrP受容体の細胞内局在異常について
    下村 淳子, 網塚 憲生, 小島 拓, 前田 健康, 下岡 正八  Journal of Oral Biosciences  47-  (Suppl.)  101  -101  2005/09  [Not refereed][Not invited]
  • ラット顎関節におけるカベオリン-1の局在
    野澤 佳世子, 井上, 鈴木 晶子, 網塚 憲生, 前田 健康  Journal of Oral Biosciences  47-  (Suppl.)  102  -102  2005/09  [Not refereed][Not invited]
  • 顎関節滑膜におけるCD44の局在
    鈴木 晶子, 野澤 佳世子, 上, 網塚 憲生, 前田 健康  Journal of Oral Biosciences  47-  (Suppl.)  102  -102  2005/09  [Not refereed][Not invited]
  • ペリオスチン遺伝子欠損マウスの歯の矯正移動初期における組織学的検索
    李 敏啓, 網塚 憲生, パウロエンリケ・ルイズデフレイタズ, 前田 健康  Journal of Oral Biosciences  47-  (Suppl.)  105  -105  2005/09  [Not refereed][Not invited]
  • 骨粗鬆症診療における骨質の評価 骨の細胞群による骨基質の調節 モデル動物を用いた解析
    網塚 憲生  Osteoporosis Japan  13-  (Suppl.1)  71  -71  2005/09  [Not refereed][Not invited]
  • 骨強度をコラーゲン代謝と骨石灰化から考える 骨基質からみた骨質 骨基質石灰化における微細構造学的考察
    網塚 憲生  Osteoporosis Japan  13-  (Suppl.1)  121  -121  2005/09  [Not refereed][Not invited]
  • MIFトランスジェニックマウスにおける低回転型骨粗鬆症の発症
    大嶋 茂樹, 小野寺 伸, 伊東 学, 西平 順, 網塚 憲生, 三浪 明男  Osteoporosis Japan  13-  (Suppl.1)  211  -211  2005/09  [Not refereed][Not invited]
  • KS Hossain, N Amizuka, N Ikeda, K Nozawa-Inoue, A Suzuki, MQ Li, K Takeuchi, M Aita, Y Kawano, M Hoshino, K Oda, R Takagi, T Maeda  MICROSCOPY RESEARCH AND TECHNIQUE  67-  (6)  325  -335  2005/08  [Not refereed][Not invited]
     
    The hypertrophic chondrocytes lack the ability to proliferate, thus permitting matrix mineralization as well as vascular invasion from the bone in both the mandibular condyle and the epiphyseal cartilage. This study attempted to verify whether the histological appearance of the hypertrophic chondrocytes is in a steady state during postnatal development of the mouse mandibular condyle. Type X collagen immunohistochemistry apparently distinguished the fibrous layer described previously as the "articular zone," "articular layer," and "resting zone" from the hypertrophic zone. Interestingly, the ratio of the type X collagen-positive hypertrophic zone in the entire condyle seemed higher in the early stages but decreased in the later stages. Some apparently compacted cells in the hypertrophic zone showed proliferating cell nuclear antigen (PCNA) immunoreaction, indicating the potential for cell proliferation at the early stages. As the mice matured, in contrast, they further enlarged and assumed typical features of hypertrophic chondrocytes. Apoptotic cells were also discernible in the hypertrophic zone at the early but not later stages. Consistent with morphological configurations of hypertrophic chondrocytes, immunoreactions for alkaline phosphatase, osteopontin, and type I collagen were prominent at the later stage, but not the early stage. Cartilaginous matrices demonstrated scattered patches of mineralization at the early stage, but increased in their volume and connectivity at the later stage. Thus, the spatial and temporal occurrence of these immunoreactions as well as apoptosis likely reflect the prematurity of hypertrophying cells at the early stage, and imply a physiological relevance during the early development of the mandibular condyles.
  • 【骨代謝疾患の成因と治療 基礎と臨床をつなぐもの】骨基質石灰化におけるマグネシウムとビタミンK2の相関
    網塚 憲生, 李 敏啓, 前田 健康  Clinical Calcium  15-  (7)  1155  -1159  2005/07  [Not refereed][Not invited]
     
    骨基質の石灰化ミネラルにはさまざまな元素が存在するが,特に体内のマグネシウムは半分以上が骨基質に存在しており,カルシウム,リンとともに重要な骨基質ミネラルを構成している.低マグネシウム環境では,破骨細胞の吸収活性が上昇するとともに骨芽細胞も活性化され,骨代謝回転が亢進する.一方,ビタミンK2(MK-4:menatetrenone)は破骨細胞の活性を抑制するために骨代謝回転の過剰な亢進を是正する.一方で,低マグネシウム環境では,骨基質内のカルシウム濃度が上昇するために,純度の高いハイドロキシアパタイト結晶を形成し,石灰化の過剰成長までも誘導してしまう.ビタミンK2はハイドロキシアパタイト結晶の純度には影響を与えないが,石灰化の過剰成長を抑制することが明らかとなった(著者抄録)
  • MEOICAL EYE 肋骨骨折モデルにおける骨膜組織の初期反応
    李 敏啓, 網塚 憲生, 前田 健康, 小澤 英浩  THE BONE  19-  (4)  355  -359  2005/07  [Not refereed][Not invited]
  • 画像に基づく骨疾患の評価 基礎から臨床まで 画像に基づく骨疾患の評価 基礎から臨床まで 細胞レベルにおける画像評価
    網塚 憲生  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  23回-  138  -138  2005/06  [Not refereed][Not invited]
  • MMP-13遺伝子欠損マウスでは骨吸収不全により遅発性の大理石骨病を呈する
    高石 官成, 小崎 直人, 川口 浩, 鄭 雄一, 宇田川 信之, 網塚 憲生, 戸山 芳昭  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  23回-  161  -161  2005/06  [Not refereed][Not invited]
  • マウス乳癌細胞株4T1の骨転移巣における骨破壊メカニズムと3次元骨微細構造の解析
    小野 加津広, 赤津 拓彦, 神谷 貞浩, 網塚 憲生, 李 敏啓, 大湾 一郎, 久貝 信夫, 和田 誠基  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  23回-  174  -174  2005/06  [Not refereed][Not invited]
  • 培養骨芽細胞における変異型PTH/PTHrP受容体の細胞内局在異常について
    下村 淳子, 網塚 憲生, 小島 拓, 前田 健康, 下岡 正八  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  23回-  174  -174  2005/06  [Not refereed][Not invited]
  • 骨芽細胞によるhepatocyte growth factor(HGF)産生が乳癌の骨転移に及ぼす影響
    小野 加津広, 神谷 貞浩, 網塚 憲生, 李 敏啓, 赤津 拓彦, 久貝 信夫, 和田 誠基  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  23回-  175  -175  2005/06  [Not refereed][Not invited]
  • 骨細胞のablationマウス
    辰巳 佐和子, 網塚 憲生, 伊東 昌子, 河野 憲二, 池田 恭治  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  23回-  206  -206  2005/06  [Not refereed][Not invited]
  • チタンインプラント植立時に併用したα-TCP系自己硬化型補填材が新生骨へ及ぼす影響
    中舘 正芳, 網塚 憲生, 野村 修一, 前田 健康  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  23回-  220  -220  2005/06  [Not refereed][Not invited]
  • klothoマウスにおける骨基質石灰化とCa,P,Mg元素マッピング
    鈴木 啓展, 網塚 憲生, 野田 政樹, 大島 勇人, 前田 健康  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  23回-  228  -228  2005/06  [Not refereed][Not invited]
  • 歯の移動実験におけるペリオスチン遺伝子欠損マウスの歯根膜の組織学的変化
    李 敏啓, 網塚 憲生, 喜井 勲, 工藤 明, 前田 健康  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  23回-  229  -229  2005/06  [Not refereed][Not invited]
  • ポリ乳酸プレートとハイドロキシアパタイト骨補填材を応用した骨増生法の開発
    小島 拓, 網塚 憲生, 鈴木 晶子, 芳澤 享子, 齊藤 力, 前田 健康  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  23回-  236  -236  2005/06  [Not refereed][Not invited]
  • 骨基質の石灰化過程におけるビタミンKの微細構造学的作用について
    網塚 憲生, 李 敏啓, 原 久仁子, 小林 正敏, 竹内 亀一, 秋山 康博, 前田 健康  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  23回-  274  -274  2005/06  [Not refereed][Not invited]
  • 低マグネシウム飼料飼育により低下した「骨質」に対するビタミンK2(MK-4)の効果
    網塚 憲生, 李 敏啓, 小林 正敏, 赤羽 章司, 原 久仁子, 竹内 亀一, 小澤 英浩, 秋山 康博, 前田 健康  マグネシウム  24-  (1)  3  -11  2005/06  [Not refereed][Not invited]
     
    生後4週雄性Wistar系ラットを用いて,コントロール群,低Mg飼育群(低Mg群),低Mg+ビタミンK2(MK4:メナテトレノン)(MK4群)を作製し,4週および8週後の大腿骨,脛骨の骨改造ならびに石灰化ミネラルについて検索した.低Mg群の骨幹端骨梁には波状縁を発達させた多数の破骨細胞を観察し,亢進した骨吸収と骨改造が示唆された.MK4群では,波状縁の発達が悪い破骨細胞を認め,MK4は低Mgで亢進した破骨細胞性骨吸収に対して抑制的に作用すると考えられた.MK4は,骨代謝回転と骨ミネラルをコントロールすることで,低Mgで生じた骨質の低下を改善すると考えられた
  • 癌の骨転移シンポジウム 骨転移巣の微細環境における組織学的知見
    網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  15-  (2)  65  -65  2005/06  [Not refereed][Not invited]
  • 肺癌骨転移巣における破骨細胞の骨吸収及び基質分解の形態学的観察
    李 敏啓, 網塚 憲生, 前田 健康  日本骨形態計測学会雑誌  15-  (2)  77  -77  2005/06  [Not refereed][Not invited]
  • ポリ乳酸プレートとハイドロキシアパタイト骨補填材を併用した骨増生の試み
    小島 拓, 網塚 憲生, 鈴木 晶子, 芳澤 享子, 齊藤 力, 前田 健康  日本骨形態計測学会雑誌  15-  (2)  86  -86  2005/06  [Not refereed][Not invited]
  • 歯科インプラント周囲に植立と同時に充填されたα-TCP系自己硬化型補填材が誘導する新生骨について
    中舘 正芳, 網塚 憲生, 野村 修一, 前田 健康  日本骨形態計測学会雑誌  15-  (2)  87  -87  2005/06  [Not refereed][Not invited]
  • インプラント周囲に充填した自己硬化型α-TCP系骨補填材に対する組織反応
    中舘 正芳, 魚島 勝美, 網塚 憲生, 織田 公光, 前田 健康, 野村 修一  日本補綴歯科学会雑誌  49-  (113回特別)  74  -74  2005/05  [Not refereed][Not invited]
  • 下村 淳子, 網塚 憲生, 小島 拓, 下岡 正八  小児歯科学雑誌  43-  (2)  205  -205  2005/04/25  [Not refereed][Not invited]
  • op/opマウスにおける骨基質石灰化と骨芽細胞の局在について
    坂上 直子, 網塚 憲生, 李 敏啓, 宇田川 信之, 前田 健康  解剖学雑誌  80-  (Suppl.)  143  -143  2005/03  [Not refereed][Not invited]
  • 骨吸収型骨転移病巣で破骨細胞が産生するcathepsin KとMMP-9の免疫局在
    李 敏啓, 網塚 憲生, 井上 佳世子, 河野 芳郎, 竹内 亀一, 前田 健康  解剖学雑誌  80-  (Suppl.)  161  -161  2005/03  [Not refereed][Not invited]
  • AMIZUKA Norio, UCHIDA Takashi, NOZAWA INOUE Kayoko, KAWANO Yoshiro, SUZUKI Akiko, LI Minqi, NASU Makiko, KOJIMA Taku, SAKAGAMI Naoko, OZAWA Hidehiro, MAEDA Takeyasu  J. Oral Biosci.  47-  (1)  33  -41  2005/02/20  [Not refereed][Not invited]
  • 致死型軟骨無形成症の組織異常と細胞内シグナリング
    新潟歯学会雑誌  印刷中-  2005  [Not refereed][Not invited]
  • In Vitro Cell Dev. Biol. Anim.  41 (5) : 171-176-  2005  [Not refereed][Not invited]
  • J. Bone Miner. Metab.  23 : 43-47-  2005  [Not refereed][Not invited]
  • J. Oral Biosci.  in press-  2005  [Not refereed][Not invited]
  • Anat. Rec.  284A (2) : 522-528-  2005  [Not refereed][Not invited]
  • 致死型軟骨無形成症の組織異常と細胞内シグナリング 小胞体からのアポトーシスシグナルの可能性
    那須 真樹子, 網塚 憲生, 李 敏啓, 野村 修一, 前田 健康  新潟歯学会雑誌  34-  (2)  243  -246  2005/01  [Not refereed][Not invited]
  • 変異型線維芽細胞増殖因子受容体III型による軟骨細胞のアポトーシス
    那須 真樹子, 網塚 憲生, 李 敏啓, 野村 修一, 前田 健康  新潟歯学会雑誌  34-  (2)  286  -286  2005/01  [Not refereed][Not invited]
  • 致死型軟骨無形成症II型における骨端軟骨への血管侵入異常
    那須 真樹子, 網塚 憲生, 李 敏啓, 野村 修一, 前田 健康  新潟歯学会雑誌  34-  (2)  287  -287  2005/01  [Not refereed][Not invited]
  • 肺癌骨転移病巣において破骨細胞が産生するcathepsin KとMMP-9の局在
    李 敏啓, 網塚 憲生, 織田 公光, 河野 芳郎, 竹内 亀一, 前田 健康  新潟歯学会雑誌  34-  (2)  287  -287  2005/01  [Not refereed][Not invited]
  • 低マグネシウムラットにおける骨代謝および石灰化に関する微細構造学的検討
    李 敏啓, 網塚 憲生, 竹内 亀一, 前田 健康  新潟歯学会雑誌  34-  (2)  288  -288  2005/01  [Not refereed][Not invited]
  • 下村 淳子, 網塚 憲生, 小島 拓, 下岡 正八  小児歯科学雑誌  43-  (2)  205  -205  2005  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚 憲生  助成研究報告集  2005-  35  -42  2005  [Not refereed][Not invited]
  • NOZAWA INOUE Kayoko, IKEDA Nobuyuki, SUZUKI Akiko, AMIZUKA Norio, MAEDA Takeyasu  Journal of oral biosciences  46-  (6)  519  -522  2004/12/20  [Not refereed][Not invited]
  • H Suzuki, N Amizuka, Kii, I, Y Kawano, K Nozawa-Inoue, A Suzuki, H Yoshie, A Kudo, T Maeda  ANATOMICAL RECORD PART A-DISCOVERIES IN MOLECULAR CELLULAR AND EVOLUTIONARY BIOLOGY  281A-  (2)  1264  -1275  2004/12  [Not refereed][Not invited]
     
    Previous reports have shown expression of immunoreactivity for periostin, originally identified as osteoblast-specific factor-2, in the periosteum and periodontal ligament. However, the developmental changes in its expression and the detailed immunolocalization have remained veiled. The present study was undertaken to examine the spatiotemporal expression of this protein in teeth and their associated tissues of mice during development at light and electron microscopic levels. In tooth germs at cap stage, periostin immunoreactivity was recognizable in the interface between inner enamel epithelium and preodontoblasts as well as in the mesenchymal tissues around cervical loop. Dental follicles around tooth germs at bell stage localized periostin immunopositivity in addition to the immunopositive areas observed in cap-staged tooth germs, although the functional significance of periostin has remained unclear in tooth development. Furthermore, periostin immunoreactivity was also found in the alveolar bone surface. In the incisors of both 7- and 21-day-old mice, immunoreaction for periostin was discernible in the lingual periodontal ligament and labial fibrous tissue adjacent to the papillary layer. After postnatal day 7, immunoreaction for periostin came to be restricted to the fibrous bundles in the periodontal ligament in accordance with the organization of the periodontal fibers, indicating its localization matched the morphogenesis of the periodontal ligament. Immunoelectron microscopic observation of the mature periodontal ligament verified the localization of periostin between the cytoplasmic processes of periodontal fibroblasts and cementoblasts and the adjacent collagen fibrils. Our findings suggest that periostin is involved at the sites of the cell-to-matrix interaction, serving as adhesive equipment for bearing mechanical forces, including occlusal force and tooth eruption. (C) 2004 Wiley-Liss, Inc.
  • Nasu Makiko, Amizuka Norio, Li Mimqi  Niigata dental journal  34-  (2)  79  -82  2004/12  [Not refereed][Not invited]
  • FGFR3/PTHrP遺伝子欠損マウスにおける軟骨異常
    網塚 憲生, 前田 健康, 小澤 英浩  THE BONE  18-  (6)  661  -665  2004/11  [Not refereed][Not invited]
  • 骨代謝回転に応じた骨基質の微細構造変化と骨原性細胞の分化
    網塚 憲生, 下村 淳子, 李 敏啓, 那須 真樹子, 坂上 直子, 野澤 佳世子, 前田 健康  Osteoporosis Japan  12(4) : 14-18-  (4)  522  -526  2004/10  [Not refereed][Not invited]
     
    高代謝回転モデル動物であるオステオプロテジェリン(OPG)欠損マウスの骨基質を微細構造学的に検索した.骨基質は不規則な走行のコラーゲン線維で構成されていた.セメントラインを電子顕微鏡観察すると電子密度が低いことから骨基質間の密着性は低いと考えられた.生後10〜15週にはOPG欠損によって破骨細胞と骨芽細胞の数が増加し活発な骨改造が認められたが,17週になると成長板軟骨のほとんどが吸収されてしまい,破骨細胞と骨芽細胞の数は野生型マウスと大差がなかった.骨髄組織における脂肪細胞数は生後15週,17週とも増加していた
  • Y Asawa, N Amizuka, K Hara, M Kobayashi, M Aita, M Li, S Kenmotsu, K Oda, Y Akiyama, H Ozawa  BONE  35-  (4)  870  -880  2004/10  [Not refereed][Not invited]
     
    To evaluate the biological effects of vitamin K2 (menatetrenone, MK-4) on ovariectomy (OVX)-induced bone loss, we have examined histological alterations of femoral metaphyses of sham-operated (sham group), ovariectomized (OVX group), and MK-4 dietary-supplemented OVX (MK-4 group; 50 mg/kg per day) female Fischer rats 1, 2, 5, and 8 weeks after OVX. In the first week, rats of the OVX and MK-4 groups showed discontinuous trabeculae compared with sham-operated rats. At 2 weeks after OVX, the OVX rats revealed many large tartrate resistant acid phosphatase (TRAP)-positive osteoclasts, while osteoclasts in the MK-4-treated rats were similar in size to those of the sham group. At 5 weeks, the OVX and MK-4 groups revealed fragmented trabeculae in femoral metaphyses. The cartilage matrix was partially exposed due to stimulated bone resorption in the OVX group, but not in the MK-4 group. After 8 weeks, the OVX rats had little metaphyseal trabeculae, whereas the MK-4-treated rats had maintained short trabeculae. Despite the presence of intense alkaline phosphatase-positive osteoblasts on trabeculae in the MK-4 group, TRAP-positive osteoclasts were flattened without developing ruffled borders. Therefore, MK-4 appeared to lessen the increase in osteoclastic bone resorption induced by OVX, as well as to maintain the accelerated osteoblastic activity. It is of importance to identify the target cells for MK-4 in bone. Autoradiography localized [H-3]-labeled MK-4 mainly in osteoblasts and adjacent bone matrices, but not in osteoclasts, indicating that MK-4 targets osteoblasts. Thus, MK-4 appears to target osteoblasts, consequently inhibiting bone loss induced by ovariectomy. (C) 2004 Elsevier Inc. All rights reserved.
  • 低マグネシウムラットの骨組織学的検討
    網塚 憲生  マグネシウム  23-  (2)  129  -129  2004/10  [Not refereed][Not invited]
  • 【癌と骨病変】癌と骨病変との研究から見出されたNew Factors 本態と本来の機能 PTHrP
    網塚 憲生, 李 敏啓, 那須 真樹子  Molecular Medicine  41-  (11)  1387  -1393  2004/10  [Not refereed][Not invited]
     
    骨転移を示す腫瘍細胞の多くが副甲状腺ホルモン関連ペプチド(PTHrP)を産生していることからPTHrPの重要性が推察されてきたが,1994年にPTHrP欠損マウスが作製されると,PTHrPは腫瘍ばかりでなく軟骨形成に重要な役割を演ずることが知られるようになった.また,PTH/PTHrPレセプターの点突然変異で,Jansen型よびBlomstrand型の軟骨異形成症が発症することが発見されている.そこで,こうしたPTHrPの骨転移における作用と,正常組織における作用について,それぞれ概説した
  • 発生期マウス下顎関節突起における肥大層の組織化学的変化(Histochemical changes of the hypertrophic zone in developing mouse mandibular condyle)
    Hossain Kazi Sazzad, 池田 順行, 野澤 佳世子, 網塚 憲生, 織田 公光, 高木 律男, 前田 健康  Journal of Oral Biosciences  46-  (5)  396  -396  2004/09  [Not refereed][Not invited]
  • 中舘 正芳, 網塚 憲生, 魚島 勝美, 田口 裕哉, 那須 真樹子, 前田 健康, 野村 修一  Journal of Oral Biosciences  46-  (5)  385  -385  2004/09/01  [Not refereed][Not invited]
  • SAZZAD HOSSAIN KAZI  Journal of oral biosciences  46-  (5)  2004/09/01  [Not refereed][Not invited]
  • 李 敏啓, 網塚 憲生, 織田 公光, 河野 芳郎, 竹内 亀一, 那須 真樹子, 小島 拓, 高木 律男, 前田 健康  Journal of Oral Biosciences  46-  (5)  405  -405  2004/09/01  [Not refereed][Not invited]
  • 鈴木 啓展, 網塚 憲生, 織田 公光, 野田 政樹, 大島 勇人, 前田 健康  Journal of Oral Biosciences  46-  (5)  405  -405  2004/09/01  [Not refereed][Not invited]
  • 那須 真樹子, 網塚 憲生, 李 敏啓, 野村 修一, 前田 健康  Journal of Oral Biosciences  46-  (5)  406  -406  2004/09/01  [Not refereed][Not invited]
  • 鈴木 晶子, 野澤 佳世子, 上, 池田 順行, 網塚 憲生, 前田 健康  Journal of Oral Biosciences  46-  (5)  406  -406  2004/09/01  [Not refereed][Not invited]
  • ペリオスチンノックアウトマウスではメカニカルストレスによる歯根膜リモデリングが破綻している
    喜井 勲, 網塚 憲生, 李 敏啓, 竹内 亀一, 前田 健康, 北嶋 聡, 菅野 純, 井上 達, 相賀 裕美子, 工藤 明  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  22回-  98  -98  2004/08  [Not refereed][Not invited]
  • Transient Receptor Potential Vanilloid 4(TRPV4)ノックアウトマウスにおける軟骨内骨化異常
    水野 敦子, 網塚 憲生, 李 敏啓, 鈴木 誠  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  22回-  121  -121  2004/08  [Not refereed][Not invited]
  • 閉経後骨粗鬆症発症におけるマクロファージ遊走阻止因子の役割
    大嶋 茂樹, 小野寺 伸, 西平 順, 網塚 憲生, 三浪 明男  日本整形外科学会雑誌  78-  (8)  S1061  -S1061  2004/08  [Not refereed][Not invited]
  • MIFトランスジェニックマウスは低回転型骨粗鬆症を呈する
    小野寺 伸, 大嶋 茂樹, 西平 順, 網塚 憲生, 三浪 明男  日本整形外科学会雑誌  78-  (8)  S1064  -S1064  2004/08  [Not refereed][Not invited]
  • マウス乳癌細胞株,4T1,は副甲状腺ホルモン関連蛋白(PTHrP)ではなくPGE2により破骨細胞を形成する
    小野 加津広, 赤津 拓彦, 網塚 憲生, 前原 博樹, 大湾 一郎, 金谷 文則, 和田 誠基, 久貝 信夫  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  22回-  146  -146  2004/08  [Not refereed][Not invited]
  • 骨芽細胞におけるperiostinとCCN3の会合とNotch signalの制御
    田辺 英幸, 喜井 勲, 網塚 憲生, 勝部 憲一, 工藤 明  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  22回-  163  -163  2004/08  [Not refereed][Not invited]
  • 肺癌骨転移モデルにおいて破骨細胞が産生する基質分解酵素の組織化学的検討
    李 敏啓, 網塚 憲生, 織田 公光, 河野 芳朗, 竹内 亀一, 高木 律男, 前田 健康  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  22回-  201  -201  2004/08  [Not refereed][Not invited]
  • 低マグネシウムラットの石灰化異常における電子回折とEPMA元素マッピング
    網塚 憲生, 李 敏啓, 小林 正敏, 赤羽 章司, 原 久仁子, 竹内 亀一, 小澤 英浩, 秋山 康博, 前田 健康  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  22回-  202  -202  2004/08  [Not refereed][Not invited]
  • klotho欠損マウスの象牙芽細胞と骨細胞における組織学的異常について
    鈴木 啓展, 網塚 憲生, 織田 公光, 野田 政樹, 吉江 弘正, 前田 健康  日本骨代謝学会学術集会プログラム抄録集  22回-  202  -202  2004/08  [Not refereed][Not invited]
  • MQ Li, N Amizuka, K Oda, K Tokunaga, T Ito, K Takeuchi, R Takagi, T Maeda  MICROSCOPY RESEARCH AND TECHNIQUE  64-  (4)  330  -342  2004/07  [Not refereed][Not invited]
     
    We have examined cellular events at the early stages of periosteal chondrogenesis and osteogenesis induced by bone fracture, using a well-standardized rib fracture model of the mouse. The initial cellular event was recognized as considerable proliferation in the deeper layer referred to as the "cambium layer" of the periosteum, as evidenced by numerous proliferating cell nuclear antigen-positive cells. The periosteal cartilage and bone were then regenerated directly from the region, of the most-differentiated cell, i.e., mature osteoblasts of the cambium layer both close to and distant from the fracture site. Therefore, periosteal osteohlasts appeared to have the potential to differentiate into chondrogenic and osteoblastic lineages. CD31-positive blood vessels were uniformly localized along the periosteum that was regenerating cartilage and bone, being therefore indicative of less influence on the initiation of osteochondrogenesis. In contrast, however, the regenerated periosteal cartilage or bone extended from the cortical bones included dead or living osteocytes, respectively. Empty lacunae and lacunae embedded with amorphous materials were found close to the regenerated cartilage, while intact osteocytes persisted adjacent to the regenerated bone. The embedded lacunae with amorphous materials would render the tissue fluid, nutrients, oxygen, and several secretory factors such as dentin matrix protein-1 impossible to be delivered to the periosteal osteoblasts that interconnect osteocytes via gap junctions. Our study thus provides two major clues on initial cellular events in response to bone fracture: the potentiality of periosteal osteoblastic differentiation into a chondrogenic lineage, and a putative involvement of osteocytes in periosteal cartilage and bone regeneration. Microsc. Res. Tech. 64: 330-342,2004. (C) 2004 Wiley-Liss, Inc.
  • FI Tapety, N Amizuka, K Uoshima, S Nomura, T Maeda  CLINICAL ORAL IMPLANTS RESEARCH  15-  (3)  315  -324  2004/06  [Not refereed][Not invited]
     
    This study was designed to investigate the responses of bone cells to a deproteinized bovine bone material, Bio-Oss(R) (Geistlich-Pharma, Wolhunsen, Switzerland), which was grafted in artificial bone defects of rat femurs. Standardized bone defects in the cortical bone of the right femurs were grafted with Bio-Oss(R) particles. Narrow penetrations were prepared on the bottom of the cavity, enabling osteogenic cells to migrate from the bone marrow. A defect in the left femur without Bio-Oss(R) was used as a control. The treated femurs were histochemically examined at 1, 3, 5, 7, and 14 days after the operation. At day 1, no osteogenic migration into the cavities occurred in either the control or experimental groups. At day 3, alkaline phosphatase (ALPase) immunohistochemistry showed a migration of the positive cells at the bottom of the cavities of the experimental groups, but not in the control ones. At day 5, new bone formation was recognized at the bottom of the cavity of both groups. In the experimental group, ALPase-positive cells were localized on Bio-Oss(R) and/or on the thin bone matrix that covered this material. The superficial layer of Bio-Oss(R) underlying the newly formed bone exhibited osteocalcin immunoreactivity. Transmission electron microscopy revealed osteoblasts depositing bone matrices - including collagen fibers - on the surface of Bio-Oss(R). At days 7 and 14, woven bone occupied the previous cavities of both control and experimental groups, accompanied by osteoclasts. Thus, Bio-Oss(R) appears to serve as a scaffold for osteogenic cells as well as to promote osteoblastic differentiation and matrix synthesis.
  • T Nakazawa, A Nakajima, N Seki, A Okawa, M Kato, H Moriya, N Amizuka, TA Einhorn, M Yamazaki  JOURNAL OF ORTHOPAEDIC RESEARCH  22-  (3)  520  -525  2004/05  [Not refereed][Not invited]
     
    To comprehensively evaluate gene expression in the early stage of fracture healing, we used a cDNA microarray with 2304 cDNA clones derived from an oligo-capped mouse embryo library. Closed mid-diaphyseal fractures were created in mouse tibiae and expression profiles were analyzed 3 days after fracture. Six genes were up-regulated in comparison to those in unfractured bones and these included three genes previously identified but never shown to be present in fractures, periostin, calumenin, and FHL-1. Cloning of these genes has been completed but their expression pattern and function during fracture healing and bone formation remain to be elucidated. Up-regulation of the six genes was reconfirmed by semi-quantitative RT-PCR analysis. Spatial and temporal expression of one of the newly identified fracture-induced genes, periostin, was analyzed using in situ hybridization, because it displayed the highest up-regulation ratio. A signal for periostin was detected in undifferentiated mesenchymal cells and immature preosteoblastic cells in the periosteal tissues between days 3 and 14 after fracture. Northern analysis showed that periostin gene expression rapidly increased by day 3, reached a peak on day 7, and declined by day 14. These findings suggest that periostin is a specific marker for preosteoblasts and may play an important role in periosteal callus formation during the early stage of fracture healing. (C) 2003 Orthopaedic Research Society. Published by Elsevier Ltd. All rights reserved.
  • ラット顎関節におけるエストロゲン受容体αの局在
    野澤 佳世子, 井上, 網塚 憲生, 前田 健康, 山田 一穂, 小澤 英浩  THE BONE  18-  (3)  251  -255  2004/05  [Not refereed][Not invited]
  • AMIZUKA Norio, HENDERSON Janet E, WHITE John H, ODA Kimimitsu, LI Miniqi, NOZAWA (INOUE) Kayoko, KAWANO Yoshiro, SUZUKI Akiko, KARAPLIS Andrew C, GOLTZMAN David, MAEDA Takeyasu  J. Oral Biosci.  46-  (2)  79  -96  2004/04/20  [Not refereed][Not invited]
     
    Mice with a targeted deletion of parathyroid hormone (PTH)-related peptide (PTHrP) develop a form of dyschondroplasia resulting from diminished proliferation and precocious maturation of chondrocytes. The hypertrophic zone of the mutant epiphyseal cartilage revealed aberrant heterogeneous populations of chondrocytes, i.e., non-hypertrophic cells at different stages of differentiation. Therefore, PTHrP appears to play a central role in modulating cell proliferation and differentiation. The biological function of PTHrP is mediated by signaling pathway linked to the PTH/PTHrP receptor. However, the amino acids at 87-107 positions of PTHrP show a putative nucleolar targeting signal, and thought to involve in the resistance to apoptosis. Chondrocytic cell line, CFK2, transfected with truncated forms of PTHrP cDNA showed this peptide in the nucleoli mediated by translation initiating from AUG-codon and alternatively initiating from CUG codons. Thereby, PTHrP appears to act as a bipartite modulator of chondrocyte proliferation/differentiation, both through signal transduction linked to the PTH/PTHrP receptor and by its direct action in the nucleolus. Meanwhile, PTH/PTHrP receptor expression is controlled by two promoters in mouse, and the downstream promoter acts predominantly in bone and cartilage. We found 1,25-dihydroxyvitamin D3 [1,25 (OH)<sub>2</sub>D<sub>3</sub>] downregulated the activity of the downstream promoter in osteoblasts, but not in chondrocytes. This indicates that the interplay between PTH and 1,25 (OH)<sub>2</sub>D<sub>3</sub> is specific to their overlapping roles of serum calcium regulation in bone, and not to their complementary effects on proliferation/differentiation of chondrocytes. Thus, we will review our recent examinations on cartilage development in conjunction with the biological role in PTHrP, PTH/PTHrP receptor and 1,25 (OH)<sub>2</sub>D<sub>3</sub>.
  • マウス乳癌細胞株(BALB/c-MC)の骨転移における骨芽細胞によるhepatocyte growth factor(HGF)産生の関与
    小野 加津広, 網塚 憲生, 赤津 拓彦, 角 誠二郎, 久貝 信夫  日本内分泌学会雑誌  80-  (1)  162  -162  2004/04  [Not refereed][Not invited]
  • 骨質とビタミンK 組織学的知見
    網塚 憲生  応用薬理  66-  (1〜2)  104  -104  2004/04  [Not refereed][Not invited]
  • H Kudo, N Amizuka, K Araki, K Inohaya, A Kudo  DEVELOPMENTAL BIOLOGY  267-  (2)  473  -487  2004/03  [Not refereed][Not invited]
     
    The myoseptum of fishes, composed of dense collagen, is a connective tissue layer that forms in the embryo, dividing somites from the trunk, and its structure and function are similar to those of the mammalian tendon. Both the myoseptum and tendon serve as the transmitter of muscular contractility to bones and adjoining muscles, and their structure is indispensable for movement of vertebrate animals. We cloned the zebrafish periostin gene and examined its expression and function in the myoseptum. The expression in embryos started in the rostral part of each segmented somite in the early segmentation stage; and consequently, metameric stripes were observed. At the end of segmentation, the expression region shifted to the transverse myoseptum and the myotome-epidermis boundary, and each myotome was surrounded by periostin. Using a polyclonal antibody, we found that the periostin protein was localized to the transverse myoseptum. Consistently, periostin morpholino antisense oligonucleotide led to defects in myoseptum formation, a delay in the differentiation of myofibers, and disorder of connection between myofibrils and myoseptum. We demonstrated here that periostin is the first molecule involved in myoseptum formation and propose that periostin secretion on the surface of the myoseptum is required for the adhesion of muscle fiber bundles to the myoseptum and the differentiation of muscle fibers. (C) 2004 Elsevier Inc. All rights reserved.
  • 【骨粗鬆症の治療における骨の質の評価を求めて】骨基質からみた骨質 組織学・微細構造学的知見
    網塚 憲生  Clinical Calcium  14-  (4)  589  -593  2004/03  [Not refereed][Not invited]
     
    骨は細胞外基質に最も富む組織であり,「骨質」は骨基質の性状によるものと思われる.骨基質は石灰化成分と有機質成分に分けて考えることができるが,有機質の中でもコラーゲン線維は90%を占めている.コラーゲン線維は引っ張り強さを有することから,骨の弾性に影響を及ぼすと考えられる.一方,骨基質の石灰化成分の多くはハイドロキシアパタイト結晶で構成されているが,周囲の非コラーゲン性蛋白質やプロテオグリカンにより成長が調節されている
  • 【PTHとPTHrP】軟骨におけるPTHrPの生理作用 遺伝子組み換えマウスの組織異常
    網塚 憲生, 李 敏啓, 前田 健康  THE BONE  18-  (1)  39  -44  2004/01  [Not refereed][Not invited]
     
    副甲状腺ホルモン関連ペプチド(PTHrP)は軟骨細胞などの分化増殖に重要な役割を果たすことが,PTHrP遺伝子欠損マウスをはじめとして一連の遺伝子組み換えマウスによって示されてきた.又,線維芽細胞増殖因子受容体III型(FGFR3)とPTHrPの二重遺伝子欠損マウスではPTHrP遺伝子欠損マウスの異常に類似していた.更に,PTH/PTHrP受容体の遺伝子変異により,Jansen型及びBlomstrand型骨幹端軟骨異形成症や内軟骨腫が生じることが明らかにされている
  • 軟骨細胞においてFGFR3はJAK/STAT系を介してPTH/PTHrP受容体発現抑制を行う
    関 雪絵, 網塚 憲生, 永田 昌毅, 織田 公光, 高木 律男, 前田 健康  新潟歯学会雑誌  33-  (2)  289  -290  2004/01  [Not refereed][Not invited]
  • 骨折の初期治癒過程における組織化学的検討
    李 敏啓, 網塚 憲生, 竹内 亀一, 高木 律男, 前田 健康  新潟歯学会雑誌  33-  (2)  290  -290  2004/01  [Not refereed][Not invited]
  • ラット上顎骨における吸収性膜を用いたGBR法の組織学的観察
    田口 裕哉, 網塚 憲生, 中舘 正芳, 大西 英夫, 藤井 規孝, 野村 修一, 前田 健康  新潟歯学会雑誌  33-  (2)  290  -291  2004/01  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚 憲生, 下村 淳子, 李 敏啓  オステオポローシスジャパン  12-  (4)  522  -526  2004  [Not refereed][Not invited]
  • AMIZUKA Norio  日本骨形態計測学会雑誌 = Journal of Japanese Society of Bone Morphometry  13-  (3)  1  -7  2003/12/30  [Not refereed][Not invited]
     
    培養軟骨細胞に様々なPTHrP cDNAをtransfectionしたところ,PTHrPの翻訳は開始メチオニンをコードするAUGばかりでなく,下流に存在するロイシンをコードするCUGからのalternative translationが可能であることが明らかにされた.これらのPTHrPはAUG或いはCUGコドンから開始された場合でも,内在する核小体移行シグナルによって核に局在することが示された.以上のことから,PTHrPは受容体に結合するか,或いは核小体局在の二方向性の経路で軟骨細胞の分化増殖を調整すると考えられた
  • OPG欠損マウスにおける骨芽細胞及び骨改造現象について
    網塚 憲生, 前田 健康, 小澤 英浩  THE BONE  17-  (6)  543  -547  2003/11  [Not refereed][Not invited]
  • TAGUCHI Y, AMIZUKA N, NAKADATE M, OHNISHI H, FUJII N, NOMURA S, MAEDA T  日本補綴歯科學會雜誌 = The journal of the Japan Prosthodontic Society  47-  2003/10/24  [Not refereed][Not invited]
  • R Mochizuki, M Dateki, K Yanai, Y Ishizuka, N Amizuka, H Kawashima, Y Koga, H Ozawa, A Fukamizu  BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS  310-  (4)  1219  -1226  2003/10  [Not refereed][Not invited]
     
    Neurochondrin/norbin is a cytoplasmic protein involved in dendrite outgrowth. The expression of the gene has been restricted to neural, bone, and chondral tissues. To identify the functions of the gene in vivo, we have generated mice with a disrupted mutation in the neurochondrin/norbin gene. Histological analysis of heterozygous mutant mice indicates the possibility of specific functions of neurochondrin/norbin in chondrocyte differentiation. We defined the expression patterns of neurochondrin/norbin-lacZ fusion protein in the central nervous system. In the developing olfactory bulb, beta-galactosidase activity was detected in the mantle layer at 12.5 dpc and the strongest activity was detected in the presumptive mitral or tufted cell layer at 15.5 dpc. beta-Galactosidase activity was also detected in the lateral choroid plexus. In homozygous (-/-) mutant mice, the disruption of the neurochondrin/norbin gene leads to early embryonic death between 3.5 and 6.5 dpc. This result indicates that neurochondrin/norbin gene function is essential for the early embryogenesis. (C) 2003 Elsevier Inc. All rights reserved.
  • ラット上顎骨GBRモデルにおける骨形成過程 生体吸収性膜及び非吸収性膜の比較
    田口 裕哉, 網塚 憲生, 中舘 正芳, 大西 英夫, 藤井 規孝, 野村 修一, 前田 健康  日本補綴歯科学会雑誌  47-  (110回特別)  71  -71  2003/10  [Not refereed][Not invited]
  • Apert症候群型変異FGFR2の頭蓋顔面発育に対する特異的作用とそのメカニズムについて
    永田 昌毅, 関 雪絵, 高木 律男, 網塚 憲生, Nuckolls Glen, Slavkin Harold  新潟医学会雑誌  117-  (10)  601  -602  2003/10  [Not refereed][Not invited]
  • Glen Nuckolls, Harold Slavkin  Niigata medical journal  117-  (10)  601  -602  2003/10  [Not refereed][Not invited]
  • 野澤-井上, 佳世子, 河野 芳朗, 網塚 憲生, 前田 健康  歯科基礎医学会雑誌  45-  (5)  2003/09/01  [Not refereed][Not invited]
  • FGFR2の活性化が頭蓋顔面の軟骨細胞に及ぼす影響とその分子機構について
    関 雪絵, 永田 昌毅, 網塚 憲生, 前田 健康, 高木 律男  歯科基礎医学会雑誌  45-  (5)  266  -266  2003/09  [Not refereed][Not invited]
  • ラット顎関節におけるMAPKAPK-2及びHsp25タンパクの局在
    野澤 佳世子, 井上, 河野 芳朗, 網塚 憲生, 前田 健康  歯科基礎医学会雑誌  45-  (5)  303  -303  2003/09  [Not refereed][Not invited]
  • 李 敏啓, 網塚 憲生, 織田 公光, 河野 芳朗, 竹内 亀一, 高木 律男, 前田 健康  歯科基礎医学会雑誌  45-  (5)  266  -266  2003/09/01  [Not refereed][Not invited]
  • 関 雪絵, 永田 昌毅, 網塚 憲生, 前田 健康, 高木 律男  歯科基礎医学会雑誌  45-  (5)  2003/09/01  [Not refereed][Not invited]
  • 鈴木 啓展, 網塚 憲生, 織田 公光, 野田 政樹, 吉江 弘正, 前田 健康  歯科基礎医学会雑誌  45-  (5)  270  -270  2003/09/01  [Not refereed][Not invited]
  • 田口 裕哉, 網塚 憲生, 関 雪絵, 大西 英夫, 藤井 規孝, 野村 修一, 前田 健康  歯科基礎医学会雑誌  45-  (5)  297  -297  2003/09/01  [Not refereed][Not invited]
  • Hossain Kazi Sazzad, 池田 順行, 井上 佳世子, 網塚 憲生, 織田 公光, 高木 律男, 前田 健康  歯科基礎医学会雑誌  45-  (5)  304  -304  2003/09/01  [Not refereed][Not invited]
  • ラット大腿骨頭壊死症モデルにおける骨再生過程
    北原 洋, 徳永 邦彦, 伊藤 知之, 伊藤 雅之, 網塚 憲生, 織田 公光, 遠藤 直人  日本整形外科学会雑誌  77-  (8)  S1089  -S1089  2003/08  [Not refereed][Not invited]
  • 【軟骨の細胞生物学】PTHrPと軟骨細胞
    網塚 憲生, 下村 淳子, 関 雪絵, 前田 健康  腎と骨代謝  16-  (3)  217  -227  2003/07  [Not refereed][Not invited]
     
    副甲状腺ホルモン関連ペプチド(PTHrP)シグナルが軟骨形成に重要な役割を演ずることが明らかにされ,特にPTHrPとIndian hedgehogのnegative feedbackによって軟骨分化が調節されることが明らかとなっている.又,PTH/PTHrP受容体のpoint mutationでJansen型及びBlomstrand型の軟骨異形成症が発症すること,更に内軟骨腫が発症することも明らかにされている.近年の報告では,PTH/PTHrP受容体にNa+/H+交換体調節因子が結合することにより,PTH/PTHrP受容体からのホスフォリパーゼCのシグナル伝達が活性化することが発見された.これら軟骨細胞の分化制御機構について解説した
  • 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  13-  (2)  S17  -S17  2003/05/30  [Not refereed][Not invited]
  • 李 敏啓, 網塚 憲生, 竹内 亀一, 高木 律男, 前田 健康  日本骨形態計測学会雑誌  13-  (2)  S37  -S37  2003/05/30  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚 憲生, 李 敏啓, 小林 正敏, 原 久仁子, 竹内 亀一, 下村 淳子, 秋山 康博, 前田 健康  日本骨形態計測学会雑誌  13-  (2)  S49  -S49  2003/05/30  [Not refereed][Not invited]
  • SUZUKI Hironobu, AMIZUKA Norio, YOSHIE Hiromasa  日本歯科保存学雑誌  46-  (春季特別)  52  -52  2003/05/06  [Not refereed][Not invited]
  • 骨芽細胞からの基質小胞形成にカベオラが関与する
    竹谷 豊, 網塚 憲生, 小川 千春, 澤田 直樹, 野本 香, 武田 英二  日本細胞生物学会大会講演要旨集  56回-  28  -28  2003/05  [Not refereed][Not invited]
  • AMIZUKA Norio  日本骨形態計測学会雑誌 = Journal of Japanese Society of Bone Morphometry  13(1): 5-9-  (1)  5  -9  2003/04/30  [Not refereed][Not invited]
     
    近年,いかに強固かつ弾力に富む丈夫な骨を増やしてゆくかといった「骨質」が注目を浴びてきている.骨は人体の中でも細胞外基質が最も発達した組織であり,骨基質の性状・量・立体的構築が「骨質」を規定すると考えて良い.しかし,長管骨の皮質骨と海面骨の構造は異なり,それらを覆う骨芽細胞の活性,類骨層の広さ,骨代謝回転などは同じではない.したがって,「骨質」を単純に石灰化度のみで評価しきれない面がある.そこで,動物モデルを用いて,正常の骨組織における骨基質,骨代謝回転と骨基質,ビタミンKと骨基質に分け,骨基質から読みとれる「骨質」を組織学的な見解を述べた
  • メカニカルストレスが軟骨細胞に及ぼす影響について
    網塚 憲生, 関 雪絵, 下村 淳子, 監物 新一, 前田 健康  解剖学雑誌  78-  (Suppl.)  190  -190  2003/04  [Not refereed][Not invited]
  • オステオプロテジェリン欠損マウスにおける骨芽細胞活性と骨改造現象について
    下村 淳子, 網塚 憲生, 関 雪絵, 野田 忠, 前田 健康  解剖学雑誌  78-  (Suppl.)  191  -191  2003/04  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚 憲生  昭和歯学会雑誌  23-  (1)  2003/03/31  [Not refereed][Not invited]
  • 【骨の細胞と形態機能】軟骨内骨化における石灰化と血管侵入
    網塚 憲生, 下村 淳子, 前田 健康, 小澤 英浩  Clinical Calcium  13-  (4)  405  -412  2003/03  [Not refereed][Not invited]
     
    骨端軟骨は大きく,静止層,増殖層,肥大化層に分けられる.肥大化層のカラム間基質は石灰化を受けるが,カラム内の横隔壁は石灰化をあまり受けない.そのために,石灰化軟骨基質は軟骨の長軸方向に形成される.血管内皮細胞は軟骨・骨境界部であまり石灰化を受けていない横隔壁を貫通することで,軟骨に侵入してゆき,その結果,石灰化したカラム間基質が骨組織へと露出する.この露出した軟骨基質は骨芽細胞が接着する足がかりとして役立つと考えられる.又,これらの骨芽細胞は骨基質を軟骨基質上へ分泌することにより,一次骨梁を形成する
  • 高カルシウム血症を合併した非ホジキンリンパ腫の1例
    大田 秀隆, 東 浩太郎, 堀内 敏行, 風間 広仁, 荒木 厚, 細井 孝之, 沢辺 元司, 網塚 憲生, 折茂 肇  日本老年医学会雑誌  40-  (2)  167  -171  2003/03  [Not refereed][Not invited]
     
    93歳女.食欲低下と意識障害(JCS20)が出現した.表在リンパ節は蝕知せず,腹部は平坦,かつ柔軟で,腫瘤は触れなかった.生化学検査では血清補正カルシウム値16.6mg/dl,iP2.3mg/dlであり,内分泌検査では血漿副甲状腺ホルモン5ng/ml未満,副甲状腺ホルモン関連タンパク(PTHrP)5.0pmol/Lと高値であった.頭部CTでは新規脳血管障害の所見はなかった.生理食塩水と利尿剤,カルシトニンで高カルシウム血症の治療を行ったが効果はみられず,播種性血管内凝固症候群と腎不全のため死亡した.その後の病理解剖で胃原発の非ホジキンリンパ腫と診断された.リンパ腫が浸潤した脾臓を用いてRT-PCRを行ったところ,PTHrPの発現が見られ,免疫染色でもリンパ腫細胞にPTHrP陽性像が認められた
  • 軟骨内骨化における石灰化と血管侵入
    Clinical Calcium  13 (4): 15-22-  2003  [Not refereed][Not invited]
  • PTHrPと軟骨細胞
    腎と骨代謝  16(3): 217-228-  2003  [Not refereed][Not invited]
  • 軟骨内骨化における血管の役割
    Clinical Calcium  12(3):15-24-  2003  [Not refereed][Not invited]
  • 乳癌骨転移モデルを使った組織化学的研究
    新潟歯学会雑誌  32(1):111-112-  2003  [Not refereed][Not invited]
  • J. Electron Micro.  52(6):503-513-  2003  [Not refereed][Not invited]
  • M Ito, N Amizuka, S Tanaka, Y Funatsu-Ozawa, S Kenmotsu, K Oda, T Nakajima, H Ozawa  JOURNAL OF BONE AND MINERAL METABOLISM  21-  (6)  353  -362  2003  [Not refereed][Not invited]
     
    Parathyroid hormone-related peptide (PTHrP) induces pathological bone resorption in an endocrine manner, resulting in hypercalcemia of malignancy. However, the histopathological aspect of the action of PTHrP secreted by tumor cells on bone resorption has not well been documented. Therefore, we studied cell-cell interactions between bone cells, stromal cells, and PTHrP-secreting tumor cells (EC-GI-10) morphologically. Tumor cells injected subcutaneously into the parietal region formed a tumor mass, invading the bone marrow. The tumor mass was surrounded by a membrane structure consisting of stromal cells. These stromal cells were positive for alkaline phosphatase (ALPase). Tartrate-resistant acid phosphatase (TRAPase)-positive osteoclasts were localized close to the ALPase-positive cells, and numerous osteoclasts were observed on the neighboring bone surfaces. PTHrP, vascular endothelial growth factor (VEGF), and matrix metalloproteinase (MMP)-9 were detected in the tumor cells. Using RT-PCR, expression of interleukin (IL)-1alpha, IL-1beta, and PTHrP, which are strong bone resorption factors, was detected in the tumor cells. Some ALPase-positive cells localizing on the neighboring bone surfaces and endothelial cells revealed PTH/PTHrP receptor immunoreactivity. Ultrastructurally, numerous blood vessels were observed between the tumor nests and the stromal cells. The nests were surrounded by a basement membrane, but it was discontinuous, therefore permitting direct contact between the tumor cells and the stromal cells. These results indicate that PTHrP secreted by tumor cells appears to stimulate osteoclast differentiation and bone resorption in a paracrine manner through PTH/PTHrP receptor-immunopositive cells. IL-1alpha, IL-1beta, VEGF, and MMP-9 may also be involved in facilitating osteoclast formation and the subsequent bone resorption.
  • Biomaterial  25(3):431-442-  2003  [Not refereed][Not invited]
  • Expression of estrogen receptor  (ER ) in the rat temporomandibular joint.
    Anat. Rec.  274 (2):934-941-  2003  [Not refereed][Not invited]
  • BioMed J.  24(1): 31-37,-  2003  [Not refereed][Not invited]
  • Osteoclastogenesis-related antigen, a novel molecule on mouse stromal cells, regulates osteoclastogenesis.
    J Bone Miner. Res.  18: 686-695-  2003  [Not refereed][Not invited]
     
    2003.
  • 自己硬化型骨補填材(バイオペックス)に対する骨組織の反応
    羽尾 博嗣, 網塚 憲生, 野村 修一, 前田 健康  新潟歯学会雑誌  32-  (2)  342  -342  2002/12  [Not refereed][Not invited]
  • ラット顎関節におけるエストロゲンレセプターαの免疫組織化学的研究
    山田 一穂, 河野 正司, 野澤 佳世子, 網塚 憲生, 前田 健康  新潟歯学会雑誌  32-  (2)  353  -353  2002/12  [Not refereed][Not invited]
  • マウス骨格組織におけるperiostinの局在について
    広瀬 泰史, 鈴木 啓展, 網塚 憲生, 前田 健康  新潟歯学会雑誌  32-  (2)  355  -355  2002/12  [Not refereed][Not invited]
  • TAGUCHI Y, AMIZUKA N, OHNISHI H, FUJII N, NOMURA S, MAEDA T  日本補綴歯科学会雑誌. 特別号, 日本補綴歯科学会学術大会抄録集 = Proceedings of the ... conference, the Japan Prosthodontic Society  46-  (108)  2002/10/11  [Not refereed][Not invited]
  • HAO H, AMIZUKA N, HUJII N, ODA k, NOMURA S, MAEDA T  日本補綴歯科学会雑誌. 特別号, 日本補綴歯科学会学術大会抄録集 = Proceedings of the ... conference, the Japan Prosthodontic Society  46-  (108)  189  -189  2002/10/11  [Not refereed][Not invited]
  • 吸収性膜を用いたGBR法に関する組織学的観察
    田口 裕哉, 網塚 憲生, 大西 英夫, 藤井 規孝, 野村 修一, 前田 健康  日本補綴歯科学会雑誌  46-  (108回特別)  150  -150  2002/10  [Not refereed][Not invited]
  • 関 雪絵, 網塚 憲生, 織田 公光, 高木 律男, 前田 健康  歯科基礎医学会雑誌  44-  (5)  387  -387  2002/09/20  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚 憲生, 監物 新一, 天谷 吉宏, 織田 公光, 前田 健康  歯科基礎医学会雑誌  44-  (5)  2002/09/20  [Not refereed][Not invited]
  • 鈴木 啓展, 網塚 憲生, 河野 芳朗, 吉江 弘正, 工藤 明, 前田 健康  歯科基礎医学会雑誌  44-  (5)  407  -407  2002/09/20  [Not refereed][Not invited]
  • 山田 一穂, 河野 正司, 井上 佳世子, 網塚 憲生, 前田 健康  歯科基礎医学会雑誌  44-  (5)  408  -408  2002/09/20  [Not refereed][Not invited]
  • 李 敏啓, 網塚 憲生, 竹内 亀一, 高木 律男, 前田 健康  歯科基礎医学会雑誌  44-  (5)  438  -438  2002/09/20  [Not refereed][Not invited]
  • 羽尾 博嗣, 網塚 憲生, 織田 公光, 藤井 規孝, 野村 修一, 前田 健康  歯科基礎医学会雑誌  44-  (5)  441  -441  2002/09/20  [Not refereed][Not invited]
  • 田口 裕哉, 網塚 憲生, 大西 英夫, 藤井 規孝, 野村 修一, 前田 健康  歯科基礎医学会雑誌  44-  (5)  443  -443  2002/09/20  [Not refereed][Not invited]
  • メカニカルストレス及びPTHrP欠損による軟骨細胞の形態変化の類似性
    網塚 憲生, 監物 新一, 天谷 吉宏, 織田 公光, 前田 健康  歯科基礎医学会雑誌  44-  (5)  387  -387  2002/09  [Not refereed][Not invited]
  • 致死型軟骨無形成症の軟骨内骨化における血管侵入と骨吸収の組織学的解析
    網塚 憲生  日本整形外科学会雑誌  76-  (8)  S1085  -S1085  2002/08  [Not refereed][Not invited]
  • Shimamura Takuya, Amizuka Norio, Ozawa Hidehiro  Niigata dental journal  32-  (1)  111  -112  2002/07  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌 = Journal of Japanese Society of Bone Morphometry  12-  (2)  2002/05/15  [Not refereed][Not invited]
  • 佐々木 朝代, 網塚 憲生, 小野 加津広, 赤津 拓彦, 久貝 信夫, 前田 健康  日本骨形態計測学会雑誌  12-  (2)  S21  -S21  2002/05/15  [Not refereed][Not invited]
  • 癌とカルシウム 癌の骨転移の微細構造
    網塚 憲生, 関 雪絵, 前田 健康  Clinical Calcium  12-  (6)  835  -843  2002/05  [Not refereed][Not invited]
  • 骨の質を考える 組織学から見た骨基質タンパクと骨質
    網塚 憲生  日本骨形態計測学会雑誌  12-  (2)  S10  -S10  2002/05  [Not refereed][Not invited]
  • 新井 智, 網塚 憲生, 東 由明, 関口 清俊, 工藤 明  Connective Tissue  34-  (1)  62  -62  2002/04  [Not refereed][Not invited]
     
    <目的>RANKLはpreB細胞上に発現が認められるが、破骨前駆細胞との共存培養で破骨細胞は形成されない。このことは、破骨細胞の分化はRANK-RANKLによりてのみ制御されるのでなく、RANKL以外のストローマ細胞上の因子によりて、調節を受けている可能性がある。本研究では、破骨細胞の分化を制御するストローマ細胞表面分子を検出することを目的とした。<方法と結果>破骨細胞形成を支持するストローマ細胞株TSB13を抗原とし、モノクローナル抗体を作成した。スクリーニングの結果、TSB13上の表面分子に結合する抗体A15-1を得た。免疫組織染色で抗原は骨表面のストローマ細胞に発現が認められ、活性型ビタミンD_3の投与を続けたマウスの骨髄で抗原の発現上昇が見られた。抗原は、間葉系細胞株のみに広く発現ていた。A15-1を破骨前駆細胞とストローマ細胞の共存培養系に加えたところ、破骨前駆細胞から単核破骨細胞への分化がおこる最初の2日間のみ加えたとき、破骨細胞分化阻害が認められた。しかし、ストローマ細胞を用いない可溶型RANKLによる破骨細胞分化は阻害しなかった。高カルシウム血症モデルマウスの腹腔内にA15-1を投与したところ、破骨細胞数、骨吸収活性ともに抑制傾向が認められた。大量に蛋白を集め、免疫沈降後CBB染色でone-bandを切り出し、アミノ酸配列を決定したところ、この抗原はフィブロネクチンであった。フィブロネクチンのantisense-oligopeptideをTSB13にtransfectionし、細胞表面での発現を低下させたところ、共存培養系における破骨細胞形成活性は低下した。この結果はフィブロネクチンが破骨細胞分化を制御することを抗体のみならず、遺伝子レベルでも証明できたことを示す。<考察>A15-1の処理により、in vivo、in vitroで破骨細胞形成が阻害されたことから、細胞表面のフィブロネクチンがストローマ細胞依存性の破骨細胞分化に必須である可能性が示唆された。フィブロネクチンと破骨前駆細胞上のインテグリンと相互作用により生じたシグナルがRANK-RANKLによる破骨細胞形成シグナルを補助したものと考えられる。
  • 佐々木 朝代, 網塚 憲生, 小澤 英浩  解剖学雑誌  107-  (0)  34  -34  2002/03  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚 憲生, 佐々木 朝代, 浅輪 幸世, 小澤 英浩  解剖学雑誌  107-  (0)  34  -34  2002/03  [Not refereed][Not invited]
  • 【骨と血管の異常 遺伝子からのアプローチ】軟骨内骨化における血管の役割
    網塚 憲生, 佐々木 朝代, 前田 健康  Clinical Calcium  12-  (3)  327  -336  2002/02  [Not refereed][Not invited]
     
    軟骨内骨化を担う細胞群の主役の1つとして血管内皮細胞があげられるが,血管内皮細胞の軟骨侵入に至る迄の軟骨細胞の整然とした細胞増殖・分化は重要なプロセスである.石灰化軟骨基質は軟骨カラム間に形成されており,血管内皮細胞はカラム中の石灰化されていない薄い横隔壁を貫通することで軟骨に侵入すると考えられる.軟骨内骨化における軟骨細胞と血管内皮細胞に焦点をあてて解説した
  • マウス尾椎の軟骨内一次骨化におけるアルカリ性ホスファターゼとオステオポンチンの局在
    新潟歯学会雑誌  31(2): 83-84-  2002  [Not refereed][Not invited]
  • 癌の骨転移の微細構造
    Clinical Calcium  12(6): 137-145-  2002  [Not refereed][Not invited]
  • Involvement of cyclooxygenase 2 in osteoclast formation and bone destruction in bone metastasis of mouse breast cancer cell lines.
    J Bone Miner. Res.  17: 774-781-  2002  [Not refereed][Not invited]
  • 1α. 25-dihydroxyvitamin D3 promoters vascularization of the chondro-osseous junction by stimulating expressing of vascular endothelial growth factor and MMP-9
    J Bone Miner. Res.  171, 1604-1612-  2002  [Not refereed][Not invited]
  • Biochem J  361-  (3)  473  -480  2002  [Not refereed][Not invited]
  • アルカリフォスファターゼ遺伝子異常による致死性骨疾患
    伊藤 将広, 織田 公光, 網塚 憲生, 小澤 英浩  THE BONE  16-  (1)  3  -7  2002/01  [Not refereed][Not invited]
  • 佐々木 朝代, 網塚 憲生, 小澤 英浩  新潟歯学会雑誌 = 新潟歯学会雑誌  31-  (2)  83  -84  2001/12  [Not refereed][Not invited]
  • マウス脛骨におけるカルシトニン受容体(CTR)の免疫局在
    泉 直也, 網塚 憲生, 小澤 英浩  THE BONE  15-  (6)  619  -622  2001/11  [Not refereed][Not invited]
  • PTHrP産生白血病細胞による高カルシウム血症をきたした急性骨髄性白血病の一例
    外島 正樹, 横手 耐治, 大月 哲也, 小松 則夫, 小澤 敬也, 網塚 憲生  臨床血液  42-  (10)  1027  -1027  2001/10  [Not refereed][Not invited]
  • M-CSF投与op/opマウスの骨芽細胞の活性化とカップリング
    西野 幾子, 網塚 憲生, 小澤 英浩  THE BONE  15-  (5)  413  -417  2001/09  [Not refereed][Not invited]
  • AMIZUKA Norio  Japanese journal of oral biology  43-  (4)  360  -369  2001/08/20  [Not refereed][Not invited]
     
    PTHrPはシグナル配列を有する分泌型蛋白質であるにも拘わらず,87位から107位迄のアミノ酸配列の両端には塩基性アミノ酸が存在し,HIV-1やHTLV-1に認められる核小体内局在様配列を有する.もしPTHrPが細胞外へ分泌されPTHと共有のレセプターに結合する一方,細胞内の核小体に局在し,何らかの機能を営むとすれば,PTHrPは粗面小胞体・ゴルジ系を経て細胞外分泌される経路と,細胞内で合成され核小体へと移行する経路の双極性を示すことになる.PTHrPの作用について,PTHrP遺伝子欠損マウスの異常,PTHrP及びPTH/PTHrPレセプターの局在を紹介し,PTHrPの核小体移行とそのメカニズムについて解説した
  • 伊藤 将広, 網塚 憲生, 小澤 英浩, 織田 公光  歯科基礎医学会雑誌  43-  (5)  533  -533  2001/08/20  [Not refereed][Not invited]
  • 佐々木 朝代, 網塚 憲生, 小澤 英浩  歯科基礎医学会雑誌  43-  (5)  557  -557  2001/08/20  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚 憲生, 佐々木 朝代, 浅輪 幸世, 伊藤 将広, 織田 公光, 小澤 英浩  歯科基礎医学会雑誌  43-  (5)  558  -558  2001/08/20  [Not refereed][Not invited]
  • OCIF遺伝子欠損マウスの長管骨ならびに歯槽骨における組織学的比較
    渡邊 淳一, 網塚 憲生, 小澤 英浩  歯科基礎医学会雑誌  43-  (5)  572  -572  2001/08  [Not refereed][Not invited]
  • Ikuko Nishino, Norio Amizuka, Hidehiro Ozawa  Niigata dental journal  31-  (1)  49  -50  2001/07  [Not refereed][Not invited]
  • 卵巣摘出ラットにおけるメナテトレノン(MK-4)投与時の組織学的検討
    浅輪 幸世, 網塚 憲生, 佐々木 朝代, 入江 一元, 監物 新一, 原 久仁子, 秋山 康博, 江尻 貞一, 小澤 英浩  日本骨代謝学会雑誌  19-  (2)  34  -34  2001/07  [Not refereed][Not invited]
  • 破骨細胞の分化を制御する骨髄ストローマ細胞の表面分子
    新井 智, 網塚 憲生, 東 由明, 工藤 明  日本骨代謝学会雑誌  19-  (2)  50  -50  2001/07  [Not refereed][Not invited]
  • 致死型軟骨無形成症における血管侵入とVEGFの亢進について
    網塚 憲生, 佐々木 朝代, 浅輪 幸世, 伊藤 将広, Henderson Janet, 織田 公光, 小澤 英浩  日本骨代謝学会雑誌  19-  (2)  5  -5  2001/07  [Not refereed][Not invited]
  • 軟骨内骨化における血管内皮細胞の侵入と基質分解の細胞組織学的検索
    佐々木 朝代, 網塚 憲生, 小澤 英浩  日本骨代謝学会雑誌  19-  (2)  143  -143  2001/07  [Not refereed][Not invited]
  • 分子レベルからみた整形外科疾患 多指症とGli遺伝子
    網塚 憲生, 佐々木 朝代, 浅輪 幸世, 小澤 英浩  整形・災害外科  44-  (8)  894  -895  2001/07  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚 憲生  日本骨代謝学会雑誌  19-  (1)  5  -12  2001/06/25  [Not refereed][Not invited]
  • M Ito, N Amizuka, T Nakajima, H Ozawa  BONE  28-  (6)  609  -616  2001/06  [Not refereed][Not invited]
     
    We examined the effects of a third generation bisphosphonate [YM-175; disodium dihydrogen (cycloheptylamino)-methylene-1,1-bisphosphonate] on osteoclasts in osteosclerotic (oc/oc) mice to elucidate the cellular mechanism for incorporation of the bisphosphonate, Osteoclasts of oc/oc mice were in direct contact with bone matrix but devoid of ruffled borders. Tartrate-resistant acid phosphatase (TRA-Pase) showed spotty localization intercellularly, whereas vacuolar H+-ATPase (V-ATPase) immunoreactivity was observed homogeneously in the cytoplasm, Upon injection of bisphosphonate, most osteoclasts lost cell polarity and were detached from bone surfaces. The detached osteoclasts underwent apoptosis as characterized by condensation of chromatin, absence of Golgi apparatus, and formation of many vesicles in the cytoplasm, Both TRAPase and V-ATPase were evenly distributed in the cytoplasm, The pyknotic nuclei of osteoclasts revealed DNA fragments as evidenced by the terminal deoxynucleotidyltransferase-mediated dUTP-biotin nick end-labeling (TUNEL) method. The results indicate that osteoclasts lacking ruffled borders in oc/oc mice incorporated the bisphosphonate from a site different from ruffled borders and that bisphosphonate may directly affect osteoclasts without mediating its deposition to the bone matrix. (C) 2001 by Elsevier Science Inc. All rights reserved.
  • 分子レベルからみた整形外科疾患 軟骨内骨化とVEGF遺伝子
    網塚 憲生, 佐々木 朝代, 小澤 英浩  整形・災害外科  44-  (7)  802  -803  2001/06  [Not refereed][Not invited]
  • 浅輪 幸世, 網塚 憲生, 佐々木 朝代, 入江 一元, 監物 新一, 原 久仁子, 秋山 康博, 江尻 貞一, 小澤 英浩  日本骨形態計測学会雑誌  11-  (1)  S53  -S53  2001/06/01  [Not refereed][Not invited]
  • MEDICAL EYE ビスフォスフォネートの投与により誘導される破歯細胞のアポトーシスに関する細胞化学的・微細構造学的研究
    渡邊 淳一, 野田 忠, 網塚 憲生, 小澤 英浩  THE BONE  15-  (3)  199  -202  2001/05  [Not refereed][Not invited]
  • HHMを合併した超高齢胃原発non Hodgkin lymphomaの一例
    上宮 文, 松本 美環, 風間 広仁, 荒木 厚, 細井 孝之, 小野内 常子, 網塚 憲生, 沢辺 元司, 堀内 敏行  日本内分泌学会雑誌  77-  (1)  164  -164  2001/04  [Not refereed][Not invited]
  • 軟骨におけるPTHrPとFGFR3の作用
    網塚 憲生  解剖学雑誌  76-  (1)  43  -43  2001/02  [Not refereed][Not invited]
  • 軟骨内骨化とVEGF遺伝子
    整形・災害外科  44-  802  -803  2001  [Not refereed][Not invited]
  • 多指症とGli遺伝子
    整形・災害外科  44-  849  -895  2001  [Not refereed][Not invited]
  • 骨の構造と細胞群、骨の知識と骨粗鬆症
    医薬情報センター  1-  10  -13  2001  [Not refereed][Not invited]
  • A histochemical study on the interradicular septum of aged rats under the mechanical stress
    Oryhodontic Wave  60-  354  -361  2001  [Not refereed][Not invited]
  • Acta Histochem Cytochem  34-  (5)  363  -369  2001  [Not refereed][Not invited]
  • High bone turnover associated with increased angiogenesis in melorheostosis : Histopathological studies.
    Orthopedics.  24-  273  -277  2001  [Not refereed][Not invited]
  • J Bone Miner Metab.  19-  (5)  267  -276  2001  [Not refereed][Not invited]
  • Amizuka Norio  Japanese Journal of Oral Biology  43-  (4)  360  -369  2001  [Not refereed][Not invited]
  • 腫瘍の骨転移初期における組織破壊の組織学的検討
    島村 拓也, 網塚 憲生, 新垣 晋, 中島 民雄, 小澤 英浩  新潟歯学会雑誌  30-  (2)  258  -258  2000/12  [Not refereed][Not invited]
  • 軟骨内骨化の血管侵入におけるVEGFの局在とMMP-9の基質分解について
    佐々木 朝代, 網塚 憲生, 小澤 英浩  新潟歯学会雑誌  30-  (2)  257  -258  2000/12  [Not refereed][Not invited]
  • マウス尾椎の軟骨内骨化における石灰化とアルカリ性ホスファターゼ,オステオポンチンの局在
    佐々木 朝代, 網塚 憲生, 入江 一元, 江尻 貞一, 小澤 英浩  新潟歯学会雑誌  30-  (2)  257  -257  2000/12  [Not refereed][Not invited]
  • マウス乳癌細胞株の骨破壊メカニズムの検討
    小野 加津広, 赤津 拓彦, 村上 健彦, 山本 通子, 四ノ宮 成祥, 六反田 亮, 網塚 憲生, 小澤 英浩, 永田 直一, 久貝 信夫  Osteoporosis Japan  8-  (Suppl.1)  107  -107  2000/09  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚 憲生  歯科基礎医学会雑誌  42-  (5)  395  -395  2000/08/30  [Not refereed][Not invited]
  • 佐々木 朝代, 網塚 憲生, 小澤 英浩  歯科基礎医学会雑誌  42-  (5)  402  -402  2000/08/30  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚 憲生, 佐々木 朝代, 小澤 英浩  歯科基礎医学会雑誌  42-  (5)  402  -402  2000/08/30  [Not refereed][Not invited]
  • 福士 真理子, 入江, 伊藤 将広, 天谷 吉宏, 網塚 憲生, 佐々木 朝代, 小澤 英浩, 織田 公光, 大村 智, 池原 征夫  歯科基礎医学会雑誌  42-  (5)  446  -446  2000/08/30  [Not refereed][Not invited]
  • 渡邊 淳一, 網塚 憲生, 小澤 英浩  歯科基礎医学会雑誌  42-  (5)  448  -448  2000/08/30  [Not refereed][Not invited]
  • MEDICAL EYE 軟骨基質の石灰化におけるアルカリ性フォスファターゼとオステオポンチンの局在
    佐々木 朝代, 網塚 憲生, 小澤 英浩  THE BONE  14-  (4)  399  -402  2000/08  [Not refereed][Not invited]
  • klotho遺伝子変異マウスの成長板軟骨における形態学的異常
    麻生 義則, 網塚 憲生, 山下 照仁, 二藤 彰, 四宮 謙一, 鍋島 陽一, 小澤 英浩, 野田 政樹  日本整形外科学会雑誌  74-  (8)  S1825  -S1825  2000/08  [Not refereed][Not invited]
  • 【悪性腫瘍に関連する骨病変】骨転移に関わる細胞群
    網塚 憲生, 島村 拓也, 伊藤 将広, 佐々木 朝代, 小澤 英浩  ホルモンと臨床  48-  (7)  585  -594  2000/07  [Not refereed][Not invited]
  • M Fukushi-Irie, M Ito, Y Amaya, N Amizuka, H Ozawa, S Omura, Y Ikehara, K Oda  BIOCHEMICAL JOURNAL  348-  (3)  633  -642  2000/06  [Not refereed][Not invited]
     
    Tissue-non-specific alkaline phosphatase (TNSALP) with an Arg(54), CYS (R54C) or an Asp(277)--> Ala (D277A) substitution was found in a patient with hypophosphatasia [Henthorn, Raducha, Fedde, Lafferty and Whyte (1992) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 89, 9924-9928]. To examine effects of these missense mutations on properties of TNSALP, the TNSALP mutants were expressed ectopically in COS-1 cells. The wild-type TNSALP was synthesized as a 66-kDa endo-beta-N-acetylglucosaminidase H (Endo H)-sensitive form, and processed to an 80-kDa mature form, which is anchored to the plasma membrane via glycosylphosphatidylinositol (GPI). Although the mutant proteins were found to be modified by GPI, digestion with phosphatidylinositol-specific phospholipase C, cell-surface biotinylation and immunofluorescence observation demonstrated that the cell-surface appearance of TNSALP (R54C) and TNSALP (D277A) was either almost totally or partially retarded respectively. The 66-kDa Endo H-sensitive band was the only form, and was rapidly degraded in the cells expressing TNSALP (R54C). In contrast with cells expressing TNSALP (R54C), where alkaline phosphatase activity was negligible, significant enzyme activity was detected and, furthermore, the 80-kDa mature form appeared on the surface of the cells expressing TNSALP (D277A). Analysis by sedimentation on sucrose gradients showed that a considerable fraction of newly synthesized TNSALP (R54C) and TNSALP (D277A) formed large aggregates, indicating improper folding and incorrect oligomerization of the mutant enzymes. When co-expressed with TNSALP (R54C), the level of the 80-kDa mature form of TNSALP (D277A) was decreased dramatically, with a concomitant reduction in enzyme activity in the co-transfected cell. These findings suggest that TNSALP (R54C) interferes with folding and assembly of TNSALP (D277A) in trans when expressed in the same cell, thus probably explaining why a compound heterozygote for these mutant alleles developed severe hypophosphatasia.
  • MEDICAL EYE ブレフェルジンA,ワートマニン投与後の破骨細胞の形態変化
    泉 直也, 網塚 憲生, 小澤 英浩  THE BONE  14-  (3)  273  -276  2000/06  [Not refereed][Not invited]
  • Gli遺伝子は軟骨原器のパターニングと軟骨内骨化に重要な役割を果たす 多指症を示すGli2/Gli3遺伝子欠損マウスの解析
    網塚 憲生, 佐々木 朝代, Henderson Janet, 小澤 英浩  日本骨代謝学会雑誌  18-  (2)  9  -9  2000/06  [Not refereed][Not invited]
  • 腫瘍性骨吸収に関する組織細胞化学的所見
    小澤 英浩, 網塚 憲生, 伊藤 将広, 島村 拓也  日本骨代謝学会雑誌  18-  (2)  (79)  -(79)  2000/06  [Not refereed][Not invited]
  • 骨転移における腫瘍性基質分解と破骨細胞形成のメカニズム
    島村 拓也, 網塚 憲生, 中島 民雄, 小澤 英浩  日本骨代謝学会雑誌  18-  (2)  157  -157  2000/06  [Not refereed][Not invited]
  • 軟骨内骨化はVEGF集積機構による血管内皮細胞の侵入の誘導とMMP-9の基質分解により行われる
    佐々木 朝代, 網塚 憲生, 織田 公光, 小澤 英浩  日本骨代謝学会雑誌  18-  (2)  11  -11  2000/06  [Not refereed][Not invited]
  • マウス乳癌細胞株の骨破壊メカニズムの検討
    小野 加津広, 赤津 拓彦, 村上 健彦, 北村 竜一, 山本 通子, 網塚 憲生, 小澤 英浩, 永田 直一, 久貝 信夫  日本骨代謝学会雑誌  18-  (2)  158  -158  2000/06  [Not refereed][Not invited]
  • 軟骨内骨化の血管侵入におけるVEGF局在と細胞・基質間相互作用
    佐々木 朝代, 網塚 憲生, 小澤 英浩  日本骨形態計測学会雑誌  10-  (1)  S34  -S34  2000/06  [Not refereed][Not invited]
     
    血管内皮細胞増殖因子は肥大化軟骨細胞より産生され,HS-GAG等の細胞外基質に結合し,細胞・基質間相互作用にて効率よく血管内皮細胞に受容される機構が推測された
  • 佐々木 朝代, 網塚 憲生, 小澤 英浩  日本骨形態計測学会雑誌 = Journal of Japanese Society of Bone Morphometry  10-  (1)  2000/06/01  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚 憲生, 佐々木 朝代, 小澤 英浩  医学のあゆみ  192-  (6)  740  -746  2000/02/05  [Not refereed][Not invited]
  • 【遺伝子異常と骨】遺伝子欠損マウスと骨代謝異常 副甲状腺ホルモン関連ペプチド遺伝子組換えマウスの軟骨・骨の異常
    網塚 憲生, 佐々木 朝代, 小澤 英浩  医学のあゆみ  192-  (6)  740  -746  2000/02  [Not refereed][Not invited]
  • 乳癌転移モデルを用いた骨転移巣形成初期の形態学的検索
    島村 拓也, 網塚 憲生, 中島 民雄, 小澤 英浩  解剖学雑誌  75-  (1)  147  -147  2000/02  [Not refereed][Not invited]
  • Gli2/Gli3遺伝子欠損マウスにおける軟骨内骨化の異常について
    網塚 憲生, 佐々木 朝代, 小澤 英浩  解剖学雑誌  75-  (1)  147  -147  2000/02  [Not refereed][Not invited]
  • マウス尾椎における軟骨内骨化の細胞組織化学的観察
    佐々木 朝代, 網塚 憲生, 入江 一元, 江尻 貞一, 小澤 英浩  解剖学雑誌  75-  (1)  147  -147  2000/02  [Not refereed][Not invited]
  • The biological action of parathyroid hormone-related peptide(PTHrP)and fibroblast growth factor receptor 3(FGFR3)on bone and cartilage.
    Acta. Anatomica Nipponica  75-  415  -425  2000  [Not refereed][Not invited]
  • Recent Studies on the Biological Action of Parathyroid Hormone(PTH)-related Peptide(PTHrP)and PTH/PTHrP Receptor in Cartilage and Bone.
    Histol. Histopath.  (15)  957  -970  2000  [Not refereed][Not invited]
  • Cytochemical and ultrastructural examination of apoptotic odontoclasts induced by bisphosphonate administration. (共著)
    Cell&Tissue Res.  301-  375  -387  2000  [Not refereed][Not invited]
  • Inefficient function of signal sequence of parathyroid hormone-related peptide(PTHrP)for targeting to the secretory pathway.
    Biochem. Biophys. Res. Commun.  273-  (621-629)  2000  [Not refereed][Not invited]
  • 堀内 圭輔, 網塚 憲生, 竹下 淳, 小澤 英浩, 工藤 明, 戸山 芳昭  日本整形外科学会雑誌  73-  (8)  S1921  -S1921  1999/08/25  [Not refereed][Not invited]
  • 島村 拓也, 網塚 憲生, 中島 民雄, 小澤 英浩  歯科基礎医学会雑誌  41-  (5)  425  -425  1999/08/20  [Not refereed][Not invited]
  • 佐々木 朝代, 網塚 憲生, 入江 一元, 小澤 英浩  歯科基礎医学会雑誌  41-  (5)  427  -427  1999/08/20  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚 憲生, 小澤 英浩  歯科基礎医学会雑誌  41-  (5)  429  -429  1999/08/20  [Not refereed][Not invited]
  • 新規遺伝子Periostinは骨膜に特異的に発現し,細胞の伸展を支持する
    堀内 圭輔, 網塚 憲生, 竹下 淳, 小澤 英浩, 戸山 芳昭, 工藤 明  日本細胞生物学会大会講演要旨集  52回-  69  -69  1999/08  [Not refereed][Not invited]
  • Norio Amizuka  Niigata dental journal  29-  (1)  33  -34  1999/07  [Not refereed][Not invited]
  • 【骨の分子発生学】軟骨におけるPTHrPの作用
    網塚 憲生  腎と骨代謝  12-  (3)  253  -266  1999/07  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚 憲生, Goltzman David, Ornitz David, Henderson Janet, 小澤 英浩  日本骨代謝学会雑誌  17-  (2)  7  -7  1999/06/26  [Not refereed][Not invited]
  • 堀内 圭輔, 網塚 憲生, 竹下 淳, 小澤 英浩, 戸山 芳昭, 工藤 明  日本骨代謝学会雑誌  17-  (2)  18  -18  1999/06/26  [Not refereed][Not invited]
  • 活性型ビタミンDによる骨と軟骨の副甲状腺ホルモンレセプターの発現制御
    網塚 憲生, 小澤 英浩  THE BONE  13-  (2)  3  -6  1999/06  [Not refereed][Not invited]
  • 【硬組織細胞とアポトーシス】骨組織におけるアポトーシス
    小澤 英浩, 網塚 憲生  THE BONE  13-  (2)  47  -56  1999/06  [Not refereed][Not invited]
  • 【硬組織細胞とアポトーシス】軟骨細胞のアポトーシス
    網塚 憲生  THE BONE  13-  (2)  73  -79  1999/06  [Not refereed][Not invited]
  • 歯科臨床のための骨の科学 軟骨発生におけるPTHrPの役割とその欠損による異常について
    網塚 憲生  The Quintessence  18-  (3)  674  -681  1999/03  [Not refereed][Not invited]
  • Vitamin D3 differentially regulates parathyroid hormone parathyroid hormone-related peptide receptor expression in bone and cartilage
    N Amizuka, MY Kwan, D Goltzman, H Ozawa, JH White  JOURNAL OF CLINICAL INVESTIGATION  103-  (3)  373  -381  1999/02  [Not refereed][Not invited]
     
    Transcription of the mouse parathyroid hormone (PTH)/PTH-related peptide (PTHrP) receptor (PTHR) gene is controlled by promoters P1 and P2. We performed transcript-specific in situ hybridization and found that P2 is the predominant promoter controlling PTHR gene expression in bone and cartilage. Treatment with 1 alpha,25-dihydroxyvitamin D3 (D3) in vivo specifically downregulated P2-specific transcripts in osteoblasts, but not in chondrocytes, under conditions where it enhanced bone resorption. Treatment of the osteoblastic cell Line MC3T3-E1 with D3 in vitro reduced expression of both P2-specific transcripts and PTHR protein. This effect was not blocked by cycloheximide, indicating that D3 inhibits PTHR expression by downregulating transcription of the P2 promoter. A similar inhibitory effect of D3 was not observed in the chondrocytic cell line CFK2. Gene-transfer experiments showed that P2, but not P1, is active in both MC3T3-E1 and CFK2 cells, and that D3 specifically inhibited P2 promoter activity in MC3T3-E1, but not in CFK2 cells. Inhibition of P2 activity by D3 required promoter sequences lying more that 1.6 kb upstream of the P2 transcription start site. Thus, the P2 promoter controls PTHR gene expression in both osteoblasts and chondrocytes. D3 downregulates PTHR gene transcription in a cell-specific manner by inhibiting P2 promoter activity in osteoblasts, but not in chondrocytes.
  • 骨組織の再建 微細形態学的・細胞化学的特徴
    小澤 英浩, 星 和人, 入江 一元, 中村 浩彰, 網塚 憲生, 江尻 貞一  解剖学雑誌  74-  (1)  12  -12  1999/02  [Not refereed][Not invited]
  • 変異型組織非特異的アルカリホスファターゼの細胞内局在と酵素活性
    福士 真理子, 網塚 憲生, 織田 公光, 小澤 英浩  解剖学雑誌  74-  (1)  125  -125  1999/02  [Not refereed][Not invited]
  • 軟骨・骨の分化形成におけるFGFレセプター3とPTHrPの作用 FGFR3/PTHrP遺伝子二重欠損マウスを用いた形態学的解析
    網塚 憲生, 小澤 英浩  解剖学雑誌  74-  (1)  137  -137  1999/02  [Not refereed][Not invited]
  • 軟骨細胞のアポトーシス。硬組織細胞とアポトーシス
    メディカルレビュー社、東京  13-  (2)  73  -79  1999  [Not refereed][Not invited]
  • 骨組織におけるアポトーシス。硬組織細胞とアポトーシス(共著)
    メディカルレビュー社  13-  (2)  47  -56  1999  [Not refereed][Not invited]
  • 軟骨におけるPTHrPの作用 腎と骨代謝
    骨の分子発生学  12-  (3)  253  -266  1999  [Not refereed][Not invited]
  • 軟骨発生におけるPTHrPの役割とその欠損による異常について 歯科口腔機能を支える骨組織学「発達障害と先天異常」
    クインテッセンス出版  18-  (3)  174  -180  1999  [Not refereed][Not invited]
  • カルシウム その基礎・臨床・栄養 骨とカルシウム -骨の細胞とカルシウム-
    社団法人 全国牛乳普及協会  1999  [Not refereed][Not invited]
  • THE BONE
    13-  (2)  73  -79  1999  [Not refereed][Not invited]
  • THE BONE
    13-  (2)  47  -56  1999  [Not refereed][Not invited]
  • Histochem Cell Biol.  111-  297  -303  1999  [Not refereed][Not invited]
  • Blomstrand chondrodisplasia caused by a missense mutation in the human parathyroid hormone receptor-1. (共著)
    Endocrinology.  139-  (12)  5255  -5258  1999  [Not refereed][Not invited]
  • J Bone Miner. Res.  14-  (2)  273  -280  1999  [Not refereed][Not invited]
  • N Izumi, N Amizuka, K Oda, Y Misumi, Y Ikehara, H Ozawa  ACTA HISTOCHEMICA ET CYTOCHEMICA  32-  (5)  393  -405  1999  [Not refereed][Not invited]
     
    Osteoclasts secrete protons and lysosomal enzymes through ruffled borders, resulting in demineralization and degradation of bone matrix. Golgi apparatus is thought to play a key role in this process. In order to elucidate the specific functions of Golgi apparatus in osteoclasts, we observed the ultrastructural and cytochemical changes resulting from the administration of brefeldin A (BFA), an inhibitor of Golgi structures, and wortmannin (WT), an inhibitor of phosphatidylinositol 3-kinase (PIS-kinase). When treated with BFA, osteoclasts showed a dissociated Golgi apparatus, while the peanut agglutinin (PMA)-positive ruffled borders were poorly developed or disappeared. Moreover, the acid phosphatase (ACPase) activity was somewhat reduced. WT-treated osteoclasts, on the other hand, exhibited no ultrastructural alteration of the Golgi apparatus, but were marked by the disappearance of PNA-positive ruffled borders, and a consequent increase in the number of ACPase-positive vesicles and vacuoles in the cytoplasm. These results indicate that the Golgi apparatus of osteoclasts not only plays an important role in the formation of lysosomal enzymes but also the supply of ruffled border membranes. Furthermore, PI 3-kinase appears to be involved in the transport of lysosomal enzymes and the maintenance of ruffled borders.
  • 線維芽細胞増殖因子投与で形成された骨の組織学的観察
    網塚 憲生, 小澤 英浩  THE BONE  12-  (4)  3  -6  1998/12  [Not refereed][Not invited]
  • Bisphosphonateにより誘導される破歯細胞のアポトーシスに関する細胞化学的検索
    渡邊 淳一, 網塚 憲生, 野田 忠, 小澤 英浩  新潟歯学会雑誌  28-  (2)  93  -93  1998/12  [Not refereed][Not invited]
  • op/opマウスへのM-CSF投与による骨基質改変について
    西野 幾子, 網塚 憲生, 小澤 英浩  新潟歯学会雑誌  28-  (2)  98  -98  1998/12  [Not refereed][Not invited]
  • 致死型低ホスファターゼ症例 突然変異型組織非特異的アルカリホスファターゼ(Gly317→Asp)の細胞内における保持と分解
    福士 真理子, 網塚 憲生, 小澤 英浩, 織田 公光  新潟歯学会雑誌  28-  (2)  98  -99  1998/12  [Not refereed][Not invited]
  • MOCHIZUKI Reiko, YANAI Kazuyuki, ISHIDUKA Yasuyuki, TANIGUCHI Keiko, TAKATSUKA Miki, AMIZUKA Norio, KAWASHIMA Hiroyuki, OZAWA Hidehiro, FUKAMIZU Akiyoshi  日本分子生物学会年会プログラム・講演要旨集  21-  1998/12/01  [Not refereed][Not invited]
  • IZUMI Naoya, AMIZUKA Norio, OZAWA Hidehiro  Denshi kenbikyo  33-  (3)  202  -204  1998/11/30  [Not refereed][Not invited]
  • 電子顕微鏡観察のための硬組織迅速脱灰法
    泉 直也, 網塚 憲生, 小澤 英浩  電子顕微鏡  33-  (3)  202  -204  1998/11  [Not refereed][Not invited]
  • 破骨細胞形成抑制因子(OCIF/Osteoprotegerin)遺伝子欠損マウスにおける形態学的観察
    網塚 憲生, 入江 一元, 小澤 英浩, 水野 敦子, 東尾 侃二  THE BONE  12-  (3)  3  -6  1998/09  [Not refereed][Not invited]
  • 組織非特異的アルカリホスファターゼの変異による酵素活性及び細胞内局在の変化について
    福士 真理子, 網塚 憲生, 小澤 英浩, 織田 公光  歯科基礎医学会雑誌  40-  (抄録)  448  -448  1998/09  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン関連ペプチド(PTHrP)の核小体移行はalternative translationに起因する
    網塚 憲生, 福士 真理子, 織田 公光, 小澤 英浩  歯科基礎医学会雑誌  40-  (抄録)  387  -387  1998/09  [Not refereed][Not invited]
  • 細胞分化 骨・脳特異的新規因子 C16Nのノックアウトマウス作製とその解析
    望月 礼子, 柳内 和幸, 石塚 保行, 谷口 圭子, 漆崎 美紀, 網塚 憲生, 川島 博行, 小澤 英浩, 深水 昭吉  生化学  70-  (8)  755  -755  1998/08  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚 憲生  日本骨代謝学会雑誌 = Japanese journal of bone metabolism  16-  (1)  40  -41  1998/06/30  [Not refereed][Not invited]
  • 骨芽細胞系細胞と破骨細胞系細胞の共存培養における細胞間相互作用の微細構造
    網塚 憲生, 小澤 英浩  THE BONE  12-  (2)  3  -6  1998/06  [Not refereed][Not invited]
  • M Fukushi, N Amizuka, K Hoshi, H Ozawa, H Kumagai, S Omura, Y Misumi, Y Ikehara, K Oda  BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS  246-  (3)  613  -618  1998/05  [Not refereed][Not invited]
     
    One point mutation which converts glycine-317 to aspartate of tissue-nonspecific alkaline phosphatase (TNSALP) was reported to be associated with lethal hypophosphatasia (Greenberg, C.R., et al. Genomics 17, 215-217, 1993). In order to define the molecular defect of TNSALP underlying the pathogenesis of hypophosphatasia, me have examined the biosynthesis of TNSALP with a Gly(317)-->Asp substitution, When expressed in COS-1 cells, the mutant did not exhibit alkaline phosphatase activity at all, indicating that the replacement of glycine-317 with aspartate abolishes the catalytic activity of TNSALP. Pulse-chase experiments showed that the newly synthesized mutant failed to acquire Endo H-resistance and to reach the cell surface. Interestingly, this TNSALP mutant was found to form a disulfide-bonded high-molecular-mass aggregate and was rapidly degraded within the cell, though the mutant protein was modified by glycosylphosphatidylinositol (GPI). Lactacystin, an inhibitor of the proteasome, obstructed the degradation of the mutant protein, suggesting the involvement of proteasome as a part of quality control of TNSALP. (C) 1998 Academic Press.
  • カルシトニン受容体と副甲状腺ホルモン受容体との関連・異同について
    ライフサイエンス出版  1998  [Not refereed][Not invited]
  • マイクロウェーブを用いた骨組織の迅速固定、迅速脱灰 マイクロウェーブ照射による生物試料の固定・染色法の基本とその応用(共著)
    学際企画  1998  [Not refereed][Not invited]
  • イヌの歯槽上部インプラント周囲骨欠損の骨再生法において脱灰凍結乾燥を施した同種骨移植の影響
    クインテッセンスDental Implantology  5-  (2)  100  -109  1998  [Not refereed][Not invited]
  • Possible involvement of stromal cells in the differentiation and activation of osteoclasts at the site of bone metastasis. International Bone Forum
    1998  [Not refereed][Not invited]
  • Biochem. Biophys. Res. Commun.  247-  (3)  610  -615  1998  [Not refereed][Not invited]
  • Proc. Natl. Acad. Sci. , USA.  95-  (9)  5372  -5377  1998  [Not refereed][Not invited]
  • Biochem. Biophys. Res. Commun.  245-  (2)  419  -422  1998  [Not refereed][Not invited]
  • Biochem. Biophys. Res. Commun.  247-  (3)  610  -615  1998  [Not refereed][Not invited]
  • Proc. Natl. Acad. Sci. , USA.  95-  (9)  5372  -5377  1998  [Not refereed][Not invited]
  • Biochem. Biophys. Res. Commum.  245-  (2)  419  -422  1998  [Not refereed][Not invited]
  • ラット骨髄損傷で形成された骨の組織学的観察
    網塚 憲生, 小澤 英浩, 田中 瑞栄  THE BONE  11-  (4)  3  -6  1997/12  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン関連ペプチドの細胞内局在について
    網塚 憲生  歯科基礎医学会雑誌  39-  (抄録)  111  -456  1997/09  [Not refereed][Not invited]
  • 軟骨の発生・成長・分化 軟骨の分化増殖における形態学的,細胞生物学的知見
    網塚 憲生, 小澤 英浩  THE BONE  11-  (3)  39  -52  1997/09  [Not refereed][Not invited]
  • HOSHI H  日本整形外科學會雜誌 = The Journal of the Japanese Orthopaedic Association  71-  (8)  1997/08/25  [Not refereed][Not invited]
  • Norio Amizuka, Hidehiro Ozawa  Niigata dental journal  27-  (1)  61  -62  1997/07  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚 憲生, 池亀 美華, 小澤 英浩  日本骨代謝学会雑誌  15-  (2)  234  1997/06/20  [Not refereed][Not invited]
  • 星 和人, 監物 新一, 竹内 靖博, 網塚 憲生, 小澤 英浩  日本骨代謝学会雑誌 = Japanese journal of bone metabolism  15-  (2)  1997/06/20  [Not refereed][Not invited]
  • 亀田 剛, 真野 博, 山田 芳司, 網塚 憲生, 泉 直也, 小堀 正人, 宮澤 浩史, 森 芳久, 川島 博行, 小澤 英浩, 池田 恭治, 亀田 晃, 羽毛田 慈之, 久米川 正好  日本骨代謝学会雑誌 = Japanese journal of bone metabolism  15-  (2)  1997/06/20  [Not refereed][Not invited]
  • 池亀 美華, 石橋 宰, 網塚 憲生, 小澤 英浩, 川島 博行  日本骨代謝学会雑誌 = Japanese journal of bone metabolism  15-  (2)  1997/06/20  [Not refereed][Not invited]
  • 伊藤 将広, 網塚 憲生, 中島 民雄, 小澤 英浩  日本骨代謝学会雑誌 = Japanese journal of bone metabolism  15-  (2)  1997/06/20  [Not refereed][Not invited]
  • 西野 幾子, 網塚 憲生, 山田 まりえ, 小澤 英浩  日本骨代謝学会雑誌 = Japanese journal of bone metabolism  15-  (2)  1997/06/20  [Not refereed][Not invited]
  • 泉 直也, 網塚 憲生, 小澤 英浩  日本骨代謝学会雑誌 = Japanese journal of bone metabolism  15-  (2)  1997/06/20  [Not refereed][Not invited]
  • 渡邊 淳一, 網塚 憲生, 小澤 英浩  日本骨代謝学会雑誌 = Japanese journal of bone metabolism  15-  (2)  1997/06/20  [Not refereed][Not invited]
  • 近藤 尚知, 春日井 昇平, 網塚 憲生, 向山 仁, 尾澤 昌悟, 菊川 郁雄, 黒田 真司, 大谷 啓一, 小澤 英浩, 大山 喬史  日本骨代謝学会雑誌 = Japanese journal of bone metabolism  15-  (2)  1997/06/20  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚 憲生  日本骨代謝学会雑誌  15-  (2)  312  -312  1997/06/20  [Not refereed][Not invited]
  • 骨と腎ではPTH/PTHrPレセプターの遺伝子発現は異なるプロモーター領域で調節される
    網塚 憲生, 小澤 英浩  日本骨代謝学会雑誌  15-  (1)  1  -7  1997/06  [Not refereed][Not invited]
  • 軟骨及び骨組織における線維芽細胞増殖因子レセプターの発現と局在について
    網塚 憲生  日本骨代謝学会雑誌  15-  (2)  234  -234  1997/06  [Not refereed][Not invited]
  • ハイドロキシアパタイト・コーテッドMicro-Ventインプラントとチタン素材Swede-Ventインプラントの比較
    クインテッセンスDental Implantology  4-  (1)  111  -113  1997  [Not refereed][Not invited]
  • 歯周疾患モデルにおける抜歯後即時埋入インプラントとポリラクテックメンブレンの併用による垂直的骨高径の変化-イヌにおける動物実験モデル(共著)
    クインテッセンス・Dental Implantology  4-  (5)  82  -83  1997  [Not refereed][Not invited]
  • インプラント形成における熱発生.in vitroにおける研究
    クインテッセンスDental Implantology  4-  (4)  83  -86  1997  [Not refereed][Not invited]
  • インプラント周囲の深い欠損における微生物に関する知見.(共著)
    クインテッセンスDental Implantology  4-  (3)  83  -85  1997  [Not refereed][Not invited]
  • 突然変異型組織非特異的アルカリホスファターゼの生合成と分解(共著)
    生化学会雑誌  69-  849  1997  [Not refereed][Not invited]
  • 生物学的石灰化における骨芽細胞分化マーカーの免疫細胞化学的局在(共著)
    新潟日整会誌  71-  (8)  S1516  1997  [Not refereed][Not invited]
  • 組織非特異型アルカリホスファターゼの免疫局在(共著)
    日本解剖学会雑誌  152  1997  [Not refereed][Not invited]
  • 破骨細胞に対するbisphosphonateの作用機序(共著)
    日本解剖学会雑誌  76  1997  [Not refereed][Not invited]
  • 破歯細胞と破骨細胞のbisphosphonateおよびcalcitoninに対する形態変化の比較について(共著)
    日本解剖学会雑誌  76  1997  [Not refereed][Not invited]
  • PI3-kinaseの阻害剤であるwortmannin投与後のラット破骨細胞の形態変化(共著)
    日本解剖学会雑誌  73  1997  [Not refereed][Not invited]
  • ラット頸骨骨髄内bFGF投与による異所性骨の形態学的検索
    日本解剖学会雑誌  73  1997  [Not refereed][Not invited]
  • 矯正力に対する老齢ラットの歯槽骨改造現象(共著)
    歯科基礎医学会雑誌  39-  111  1997  [Not refereed][Not invited]
  • PTHrPノックアウトマウス・データーブック
    422  -423  1997  [Not refereed][Not invited]
  • 1,25(OH)2D3による副甲状腺ホルモンレセプターの遺伝子発現制御に関する細胞生物学的検索。
    日本骨代謝学会雑誌  15-  312  1997  [Not refereed][Not invited]
  • 骨形成過程におけるPTH/PTHrP receptorの解析。(共著)
    日本骨代謝学会雑誌  15-  311  1997  [Not refereed][Not invited]
  • カルシトニンで誘導される破骨細胞と破歯細胞の細胞死における細胞生物学的検索。(共著)
    日本骨代謝学会雑誌  15-  310  1997  [Not refereed][Not invited]
  • 破骨細胞におけるカルシトニンレセプターの細胞内局在について。(共著)
    日本骨代謝学会雑誌  15-  309  1997  [Not refereed][Not invited]
  • M-CSF投与および非投与op/opマウスにおけるオステオポンチンの局在について。(共著)
    日本骨代謝学会雑誌  15-  230  1997  [Not refereed][Not invited]
  • PTHrP産生腫瘍細胞による局所的骨吸収における細胞生物学的検索。(共著)
    日本骨代謝学会雑誌  15-  166  1997  [Not refereed][Not invited]
  • 張力刺激により惹起される骨頂骨縫合部の骨芽細胞の分化にはBMP-4が関与する。(共著)
    日本骨代謝学会雑誌  15-  138  1997  [Not refereed][Not invited]
  • カルシウム受容体は破骨細胞に存在し骨吸収活性の制御に関する。(共著)
    日本骨代謝学会雑誌  15-  61  1997  [Not refereed][Not invited]
  • コラーゲン性石灰化はデコリンの脱却とコラーゲン細線維の癒合を伴いながら進行する。(共著)
    日本骨代謝学会雑誌  15-  39  1997  [Not refereed][Not invited]
  • Collagen calcification, following removal of decorin and fusion of collagen fibrils. (共著)
    J. Bone Miner. Res.  12-  S301  1997  [Not refereed][Not invited]
  • Cell-specific downregulation of the PTH/PTHrP receptor by 1,25(OH)2D3 in vivo and in vitro.
    J. Bone Miner, Res.  12-  S283  1997  [Not refereed][Not invited]
  • Tensile stress induced cytodifferentiation of osteoblastic cells and up-regulation of BMP-4 mRNA in murine calvarial sutures. (共著)
    J. Bone Miner. Res.  12-  S283  1997  [Not refereed][Not invited]
  • J. Bone Min. Metab.  15-  (2)  67  -76  1997  [Not refereed][Not invited]
  • Ras activation of human prostate epithelial induced overexpression of parathyroid hormone-related peptide. (共著)
    Clinical Cancer Res.  3-  855  -859  1997  [Not refereed][Not invited]
  • Kazuto Hoshi, Norio Amizuka, Takahide Kurokawa, Hidehiro Ozawa  Acta Histochem Cytochem  30-  (4)  371  -379  1997  [Not refereed][Not invited]
  • Histochem. Cell Biol  107-  183  1997  [Not refereed][Not invited]
  • 骨と軟骨組織におけるアポトーシス
    網塚 憲生, 伊藤 将広, 入江 一元  現代医療  29-  (1)  171  -180  1997/01  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモンセプターの骨,軟骨,腎臓における局在について
    網塚 憲生, 入江 一元, 小沢 英浩  THE BONE  10-  (4)  3  -6  1996/12  [Not refereed][Not invited]
  • 骨と腎臓における副甲状腺ホルモンレセプターの局在とその上流と下流のプロモーターの機能に関する研究
    網塚 憲生  歯科基礎医学会雑誌  38(補冊)-  (抄録)  135  -455  1996/08  [Not refereed][Not invited]
  • 骨形成・骨吸収の病態にかかわるシグナリング 副甲状腺ホルモン関連ペプチド遺伝子ノックアウトマウスとレセプターの新しい研究展開
    網塚 憲生, 小澤 英浩  実験医学  14-  (10)  1492  -1498  1996/07  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚 憲生  日本骨代謝学会雑誌  14-  (2)  115  -115  1996/06/01  [Not refereed][Not invited]
  • 星 和人, 網塚 憲生, 酒匂 崇, 黒川 高秀, 小澤 英浩  日本骨代謝学会雑誌 = Japanese journal of bone metabolism  14-  (2)  1996/06/01  [Not refereed][Not invited]
  • 伊藤 将広, 網塚 憲生, 中島 民雄, 小澤 英浩  日本骨代謝学会雑誌 = Japanese journal of bone metabolism  14-  (2)  1996/06/01  [Not refereed][Not invited]
  • 泉 直也, 網塚 憲生, 小澤 英浩  日本骨代謝学会雑誌 = Japanese journal of bone metabolism  14-  (2)  1996/06/01  [Not refereed][Not invited]
  • N Amizuka, AC Karaplis, JE Henderson, H Warshawsky, ML Lipman, Y Matsuki, S Ejiri, M Tanaka, N Izumi, H Ozawa, D Goltzman  DEVELOPMENTAL BIOLOGY  175-  (1)  166  -176  1996/04  [Not refereed][Not invited]
     
    Although apparently phenotypically normal at birth, mice heterozygous for inactivation of the gene encoding parathyroid hormone-related peptide (PTHrP) develop haplotype insufficiency by 3 months of age. In addition to histologic and morphologic abnormalities similar to those seen in homozygous mutants, heterozygous animals demonstrated alterations in trabecular bone and bone marrow These included metaphyseal bone spicules which were diminished in volume, irregularly distributed, and less well developed than those seen in age-matched controls as well as bone marrow, which contained an inordinate number of adipocytes. A substantial reduction in PTHrP mRNA was detected in heterozygous tissue, while circulating parathyroid hormone (PTH) and calcium concentrations were normal. Thus, while a physiologic concentration of PTH was capable of maintaining calcium homeostasis, it was incapable of compensating for PTHrP haploinsufficiency in developing bone. In normal animals, both PTHrP and the PTH/PTHrP receptor were expressed predominantly in chondrocytes situated throughout the proliferative zone of the tibial growth plate. In the metaphysis, the PTH/PTHrP receptor was identified on osteoblasts and preosteoblastic cells situated in the bone marrow, while PTHrP was expressed only by osteoblasts. These observations indicate that postnatal bone development involves susceptible pathways that display exquisite sensitivity to critical levels of PTHrP and imply that the skeletal effects of PTH are influenced by locally produced PTHrP. Moreover, identification of both the ligand and its N-terminal receptor in metaphyseal osteoblasts and their progenitors suggests an autocrine/paracrine role for the protein in osteoblast differentiation and/or function. Impairment in this function as a consequence of PTHrP haploinsufficiency may critically influence the course of bone formation, resulting in altered trabecular architecture and perhaps low bone mass and increased bone fragility. (C) 1996 Academic Press, Inc.
  • 骨,軟骨組織における副甲状腺ホルモン関連ペプチドの生物学的役割
    網塚 憲生  日本内分泌学会雑誌  72-  (2)  176  -176  1996/04  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚 憲生, 小澤 英浩  日本内分泌学会雑誌  72-  (2)  1996/03/20  [Not refereed][Not invited]
  • チタン表面に形成された実験的唾液ペリクルはレンサ球菌の接着を仲介する(共著)
    クインテッセンスDental Implantology  3-  (6)  105  -106  1996  [Not refereed][Not invited]
  • ウシ胎仔下顎骨由来の骨芽細胞による石灰化初代培養を用いたチタン合金と骨芽細胞および基質との境界面に関する微細形態学的研究(共著)
    クインテッセンスDental Implantology  3-  (3)  107  -118  1996  [Not refereed][Not invited]
  • ラット脛骨モデルを用いたチタニンプラントにおける骨形成の形態学的、ラジトオートグラフィー的研究
    クインテッセンスDental Implantology  3-  (1)  115  -127  1996  [Not refereed][Not invited]
  • rh BMP-2による脊椎靭帯骨化症モデルの形態学的観察(共著)
    日本パラプレジア医学会誌  9-  (1)  210  -211  1996  [Not refereed][Not invited]
  • 骨、腎臓における副甲状腺ホルモンレセプターの局在
    解剖誌  71-  (4)  332  1996  [Not refereed][Not invited]
  • 破骨細胞のゴルジ体からの膜輸送課程にはPI3-kinaseが関与する(共著)
    日骨代謝誌  14-  (2)  305  1996  [Not refereed][Not invited]
  • 破骨細胞は細胞死の後、マクロファージに貧食されるか血管内に入り込んで他の器官で処理される(共著)
    日骨代謝誌  14-  (2)  304  1996  [Not refereed][Not invited]
  • Bisphosphonate投与における破歯細胞の細胞死について(共著)
    歯基礎誌  38(補冊)-  102  1996  [Not refereed][Not invited]
  • 軟骨と骨組織におけるアポトーシス、特集:アポトーシスと疾患
    現代医療  29-  (1)  181  -186  1996  [Not refereed][Not invited]
  • 「骨代謝研究の最前線」骨、軟骨組織における副甲状腺ホルモン関連ペプチドの生物学的役割
    日本内分泌学会雑誌  72-  176  1996  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン関連ペプチド(PHTRP)と骨、軟骨の成長-PTHRP遺伝子欠損ヘテロマウスに認められた骨、軟骨の異常について-
    10-  (2)  1996  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚憲生、小澤英浩:実験動物の骨モデル9 骨端軟骨異常と副甲状腺ホルモン関連ペプチド
    骨と関節  9-  (5)  1996  [Not refereed][Not invited]
  • 軟骨と骨組織におけるアポトーシス現代医療
    特集アポトーシスと疾患  29-  (1)  18  1996  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン関連ペプチド遺伝子ノックアウトマウスとレセプターの新しい研究展開
    実験医学増刊号「骨形成・骨吸収のシグナリング」  14-  (10)  190  1996  [Not refereed][Not invited]
  • PTHrPの生理学的役割
    内分泌,糖尿病 科学評論社  1-  139  1996  [Not refereed][Not invited]
  • ウシ胎仔下顎骨由来の骨芽細胞による石灰化初代培養を用いたチタン合金と骨芽細胞および基質との境界面に関する微細形態学的研究(共著)
    クインテッセンス社  3-  115  1996  [Not refereed][Not invited]
  • Ossification of spinal ligaments induced by rhBMP-2. The international conference on hormone and cytokine in bone. (共著)
    J. Bone Miner. Metab.  14-  (2)  108  1996  [Not refereed][Not invited]
  • Tissue Engineering  2-  277  -287  1996  [Not refereed][Not invited]
  • PTHRP modulate normal proliferation and differentiation of chondrocytes.
    J. Dent. Res.  75-  272  1996  [Not refereed][Not invited]
  • Immunolocalization of the bone morphogenetic protein receptor and transforming growth factor-β during ectopic osteo-chondrogenesis induced by exogenous bone morphogenetic protein-2. (共著)
    Histochemistry and Cytochemistry, Proceedings of the Xth International Congress  461-  1996  [Not refereed][Not invited]
  • Overexpression of parathyroid hormone-related peptide(PTHrP)gene amplification in colonic carcinoma. (共著)
    J. Clin. Endocrinol. Metab.  81-  2841  -2847  1996  [Not refereed][Not invited]
  • Progtammed cell death of chondrocytes and aberrant chondrogenesis in mice homozygous for patathyroid hormone-related peptide(PTHrP)gene deletion.
    Endocrinology  137-  5055  1996  [Not refereed][Not invited]
  • Tissue Engineering  2-  277  1996  [Not refereed][Not invited]
  • PTHrP, a mediator of cell proliferation and differentiation of both chondrocytes and osteoblasts : The biological action of PTHrP on skeletal cells.
    International Bone Forum  4-  18  -21  1996  [Not refereed][Not invited]
  • Immunolocalization of parathyroid hormone parathyroid hormone-related peptide receptor transcripts and protein in bone and kidney.
    J. Bone Miner. Res.  11-  S302  1996  [Not refereed][Not invited]
  • Dying osteoclasts are phagocytosed by macrophages in bone or migrate into blood vessels to be destroyed in other organs. (共著)
    J. Bone Miner. Res.  11-  S190  1996  [Not refereed][Not invited]
  • Phosphatidylinositol 3-kinase is involved in membrane transport between Golgi apparatus and ruffled border in osteoclast. (共著)
    J. Bone Miner. Res.  11-  S184  1996  [Not refereed][Not invited]
  • Fibroblasts in spinal ligaments differentiate into chondrocytes pathologically by exogenous bone morphogenetic protein-2. (共著)
    J. Bone Miner. Res.  11-  S107  1996  [Not refereed][Not invited]
  • PTHRP modnlates normal proliferation and differention of chondrocytes.
    Journal of Dental Resenarch  75-  272  1996  [Not refereed][Not invited]
  • カルシトニン遺伝子関連ペプチド(CGRP)陽性神経の分布と破骨細胞
    入江 史子, 網塚 憲生, 小澤 英浩  THE BONE  9-  (4)  1  -4  1995/12  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン関連ペプチド(PTHRP)遺伝子ノックアウトマウスにおける骨組織異常
    網塚 憲生, 小澤 英浩  THE BONE  9-  (3)  3  -巻頭  1995/09  [Not refereed][Not invited]
  • PTHRP遺伝子と骨疾患
    網塚 憲生, 小澤 英浩  THE BONE  9-  (3)  83  -92  1995/09  [Not refereed][Not invited]
  • 副甲状腺ホルモン関連ペプチド欠損マウスにおける軟骨細胞の形態学的検索
    網塚 憲生  歯科基礎医学会雑誌  37-  (抄録)  118  -136  1995/08  [Not refereed][Not invited]
  • PTHrPの生理学的役割
    網塚 憲生, 小澤 英浩  内分泌・糖尿病科  1-  (2)  139  -145  1995/08  [Not refereed][Not invited]
  • 網塚 憲生, Goltzman David, 小澤 英浩  日本骨代謝学会雑誌  13-  (2)  28  -28  1995/07/01  [Not refereed][Not invited]
  • ヘルトビッヒ上皮鞘由来エナメル上皮細胞によるアメロゲニン産生について(共著)
    歯科基礎医学会誌  37-  191  1995  [Not refereed][Not invited]
  • ラット頚骨モデルを用いたチタンプラントにおける骨形成の形態学的, ラジオオートグラフィー的研究
    クインテッセンス社  2-  155  1995  [Not refereed][Not invited]
  • Expression of the ret proto-oncogene in hyperparathyroid tissues : implications for the pathogenesis of the parathyroid disease in men 2A. (共著)
    J. Bone Miner. Res.  10-  S191  1995  [Not refereed][Not invited]
  • Morphological examination of expression of the parathyroid hormone receptor in rat kidney : evidence for major regulation by a kidney-specific promoter.
    J. Bone Miner. Res.  10-  S281  1995  [Not refereed][Not invited]
  • Paratyroid hormone-related peptide (PTHRP) modnlates rormal differentiation of osteoprogenitor ceiis : Morphological evidence of alnormality in mutantmice homozygous and heterozygous for PTHRP gene deficiency.
    Bone  16-  206  1995  [Not refereed][Not invited]
  • Altered eutopic and ectopic chonrogenesis in long bones of homozygous PTHRP deficient mice.
    Joural of Bone and Mineral Research  10-  285  1995  [Not refereed][Not invited]
  • Morphological exanination of expression of the parathyroical hormone receptor in rat kidney : evidence for major regulation by a kidney-specific promoter
    Joural of Bone and Mineral Research  10-  281  1995  [Not refereed][Not invited]
  • Molecular targeting signal in parathyroid hormone-related peptide protects chondrocytes from apoptotic death.(共著)
    Molecular Cell Biology  15-  4064  1995  [Not refereed][Not invited]
  • Mouse Kalinin B1 (Laminin β3 chain) : Cloning and tissue distribution (共著)
    Laboratory Investigation  72-  300  1995  [Not refereed][Not invited]
  • A compilation of partial sequences of randomly selected cDNA clones from the rat incisor. (共著)
    Journal of Dental Research  74-  307  1995  [Not refereed][Not invited]
  • Gene Expression of epimorphin in ameloblasts (共著)
    Arch. Oral Biol.  40-  161  1995  [Not refereed][Not invited]
  • 「骨代謝研究」を支えてきた人々(第14回)David Goltzman,M.D.(1944〜)
    網塚 憲生  日本骨代謝学会雑誌  12-  (3)  136  -147  1994/11  [Not refereed][Not invited]
  • 骨粗鬆症 骨に関する基礎的事項 Bone cellsの構造と機能
    小沢 英浩, 網塚 憲生  日本臨床  52-  (9)  2246  -2254  1994/09  [Not refereed][Not invited]
  • Bone Cellsの構造と機構 (共著)
    日本臨床  52-  1994  [Not refereed][Not invited]
  • PTHRPの骨組織に対する作用 -PTHRP遺伝子欠損ミュータントマウスを用いた細胞生物学解析-
    日本骨代謝誌  12-  181  1994  [Not refereed][Not invited]
  • Identification of genes expressed in rat incisor. (共著)
    J. Dent. Res.  73-  146  1994  [Not refereed][Not invited]
  • Localization of gene expression of PTHRP and of the PTH/PTHRP receptor in normal adult bone tissues : consequences of bone formation in PTHRP-deficient animals. (共著)
    J. Bone Min. Res.  9-  S128  1994  [Not refereed][Not invited]
  • Expression of Mac-2 antigen in the preosteoclast and osteoclast identified in the OP/OP mouse injected with macrophage colony-stimulating factor (共著)
    Journal of Bone & Mineral Research  9-  873  1994  [Not refereed][Not invited]
  • Localization of gene expression of PTHRP and of the PTH/PTHRP receptor in normal adult bone tissues : Consequence for bone formation in PTHRP-deficient animals
    Journal of Bone & Mineral Research  9-  S128  1994  [Not refereed][Not invited]
  • Identification of a functional nucleolar localization signal in parathyroid hormone-related peptide. (共著)
    Journal of Bone & Mineral Research  9-  S121  1994  [Not refereed][Not invited]
  • 石井 ヒロ子, 石井 史郎, 角田 俊彦, 野田 忠, 鈴木 誠, 網塚 憲生, 小澤 英浩  小児歯科学雑誌  32-  (2)  350  -350  1994  [Not refereed][Not invited]
  • マイクロウェーブを用いた骨組織の迅速固定、迅速脱灰:マイクロウェーブ照射による生物試料の固定・染色法の基本とその応用
    1993  [Not refereed][Not invited]
  • OP/OPマウス大腿骨における遺伝子組換型ヒトM-CSF投与後の破骨細胞の分化とMac-2抗原の発現について(共著)
    歯科基礎医学会雑誌  1993  [Not refereed][Not invited]
  • The localization of H+-ATPase/Carbonic anhydrase in ameloblasts at the maturation stage. (共著)
    J. Dent. Res.  72-  204  1993  [Not refereed][Not invited]
  • Morphological analysis of endochondral bone formation in normal and PTHRP-deficient fetal mice.
    J. Bone Miner. Res.  8-  S148  1993  [Not refereed][Not invited]
  • The biological roles of the third component (C3) in osteoclast formation. (共著)
    Endocrinology  133-  397  1993  [Not refereed][Not invited]
  • Morphological analysis of endochondral bone formation in normal and PTHRP-deficient fetal mice
    Journal of Bone & Mineral Research  8-  S148  1993  [Not refereed][Not invited]
  • The localization of H+ ATPase/Carbonic Anhydrase in ameloblasts at the maturation (共著)
    J. Dental. Res.  72-  204  1993  [Not refereed][Not invited]
  • 骨組織内のM-CSFの局在に関する免疫組織化学的研究
    網塚 憲生  歯科基礎医学会雑誌  34-  (抄録)  189  -189  1992/09  [Not refereed][Not invited]
  • 骨芽細胞における1α,25(OH)2D3レセプターの細胞内局在について
    網塚 憲生  解剖学雑誌  67-  (4)  556  -556  1992/08  [Not refereed][Not invited]
  • 骨芽細胞におけるビタミンDレセプターの細胞内局在と細胞内移動
    網塚 憲生, 小沢 英浩  THE BONE  6-  (2)  1  -5  1992/06  [Not refereed][Not invited]
  • N AMIZUKA, T UCHIDA, M FUKAE, M YAMADA, H OZAWA  ARCHIVES OF HISTOLOGY AND CYTOLOGY  55-  (2)  179  -190  1992/05  [Not refereed][Not invited]
     
    Enamel tufts were exposed after decalcification of the enamel matrix and their fine structures and immunocytochemical characteristics were examined. Under the binocular microscope and the scanning electron microscope (SEM), enamel tufts appeared as corrugated ribbon-like structures located on the dentine parallel to the tooth axis. SEM observation disclosed enamel tufts as bundles of well extended tubular structures with cross striations attributable to hypocalcified enamel sheaths. Plate-like structures were observed at the center of enamel tufts, where they ran parallel to the enamel tufts. Under the transmission electron microscope (TEM), the plates of tufts revealed their origin in the superficial layer of the dentine, penetrating the hypercalcified zone adjacent to the dentine-enamel (D-E) junction, and then reaching the tuft region. The plates of tufts ran mainly along the enamel sheaths and partially across the prisms in the tuft region. The protein-A-gold technique revealed an intense immunoreactivity for amelogenin over the superficial layer of the dentine, but over the enamel prisms in the tufts nor over the plates of tufts. The immunoreactivity for 13-17kd protein was detected over the filamentous structures closely associated with the enamel sheaths in the enamel tuft. Thus our study disclosed that enamel tufts consist of both well extended hypocalcified enamel prisms and plates of tufts. The major organic component of the enamel tufts is suggested to be 13-17 kd protein rather than amelogenin.
  • N AMIZUKA, T UCHIDA, M FUKAE, M YAMADA, H OZAWA  ARCHIVES OF HISTOLOGY AND CYTOLOGY  55-  (2)  179  -190  1992/05  [Not refereed][Not invited]
     
    Enamel tufts were exposed after decalcification of the enamel matrix and their fine structures and immunocytochemical characteristics were examined. Under the binocular microscope and the scanning electron microscope (SEM), enamel tufts appeared as corrugated ribbon-like structures located on the dentine parallel to the tooth axis. SEM observation disclosed enamel tufts as bundles of well extended tubular structures with cross striations attributable to hypocalcified enamel sheaths. Plate-like structures were observed at the center of enamel tufts, where they ran parallel to the enamel tufts. Under the transmission electron microscope (TEM), the plates of tufts revealed their origin in the superficial layer of the dentine, penetrating the hypercalcified zone adjacent to the dentine-enamel (D-E) junction, and then reaching the tuft region. The plates of tufts ran mainly along the enamel sheaths and partially across the prisms in the tuft region. The protein-A-gold technique revealed an intense immunoreactivity for amelogenin over the superficial layer of the dentine, but over the enamel prisms in the tufts nor over the plates of tufts. The immunoreactivity for 13-17kd protein was detected over the filamentous structures closely associated with the enamel sheaths in the enamel tuft. Thus our study disclosed that enamel tufts consist of both well extended hypocalcified enamel prisms and plates of tufts. The major organic component of the enamel tufts is suggested to be 13-17 kd protein rather than amelogenin.
  • N AMIZUKA, H OZAWA  ARCHIVES OF HISTOLOGY AND CYTOLOGY  55-  (1)  77  -88  1992/03  [Not refereed][Not invited]
     
    The intracellular localization and translocation of the 1-alpha,25-dihydroxyvitamin D3 receptor (1-alpha,25(OH)2D3 receptor) in osteoblasts of mouse parietal bone and MC3T3-E1 cells were examined immunocytochemically using a rat monoclonal antibody to 1-alpha,25(OH)2D3 receptor. In osteoblasts of parietal bones in vivo, immunoreactivity for 1-alpha,25(OH)2D3 receptor was detected not only in the nuclei but also in lysosomal structures, and also sparsely in the cytoplasmic matrix. The transport of 1-alpha,25(OH)2D3 receptor was investigated immunocytochemically after incubation with 1-alpha,25(OH)2D3. In osteoblasts of parietal bones, after 1 min incubation with 10(-8)M 1-alpha,25(OH)2D3, the perinuclear cytoplasm showed intense immunoreactivity for 1-alpha,25(OH)2D3 receptor. After 10 min incubation, immunoreactivity was intense in the nuclei, especially in the heterochromatin. In MC3T3.E1 cells, after 1 min incubation with 1-alpha,25(OH)2D3, immunoreactivity for 1-alpha,25(OH)2D3 receptor was found in the form of a fibrillar structure extending radially to the periphery of the cells. The immunostaining pattern of anti-1-alpha,25(OH)2D3 receptor was similar to the distribution of microtubules stained with anti-/3-tubulin antibody. After 10 min incubation, the nuclei showed intense immunoreactivity for 1-alpha,25(OH)2D3 receptor. Incubation with colchicine dissociated the fibrillar structures and inhibited the intranuclear localization of the 1-alpha,25(OH)2D3 receptor. These findings suggest that the 1-alpha,25(OH)2D3 receptor is located in the nuclei, in lysosomal structures and also sparsely in the cytoplasmic matrix of osteoblasts in vivo, and that the receptor is transported to the perinuclear cytoplasm via microtubules to be then translocated into the nucleus, especially into the heterochromatin.
  • 活性型ビタミンD依存の破骨細胞形成過程における補体C3の役割(共著)
    日本骨代謝誌  10-  320  1992  [Not refereed][Not invited]
  • 活性型ビタミンDにより骨組織で産生される補体第三成分(C3)とその生理学的役割(共著)
    歯科基礎医学会雑誌  34-  133  1992  [Not refereed][Not invited]
  • 骨芽細胞における1α,25(OH)2D3レセプターの細胞内局在について
    解剖誌  67-  556  1992  [Not refereed][Not invited]
  • ラット切歯エナメル芽細胞におけるH+-ATPaseと炭酸脱水素酵素の局在について、-免疫組織細胞化学的研究- I:成熟期エナメル芽細胞 (共著)
    歯科基礎医学会雑誌  34-  195  1992  [Not refereed][Not invited]
  • 骨組織に分布するCGRP陽性神経の免疫組織化学的研究(共著)
    歯科基礎医学会雑誌  34-  188  1992  [Not refereed][Not invited]
  • The Effectiveness of the Air-Powder Abrasive Device for Root Planing During Periodontal Surgery
    Periodontal Clinical Investigation  14-  (1)  1992  [Not refereed][Not invited]
  • 骨芽細胞における1α,25(OH)2D3レセプターの細胞内局在について
    網塚 憲生  歯科基礎医学会雑誌  33-  (抄録)  93  -93  1991/09  [Not refereed][Not invited]
  • 骨芽細胞における1α,25(OH)2D3レセプターの細胞内局在について
    新潟歯学会誌  21-  204  1991  [Not refereed][Not invited]
  • 骨芽細胞における1α,25(OH)2D3レセプターの局在について
    歯科基礎医学会雑誌  33-  93  1991  [Not refereed][Not invited]
  • Intracellular localization of 1α, 25(OH)2D3 receptor in osteoblasts.
    Jpa. J. Oral. Biol.  33-  93  1991  [Not refereed][Not invited]
  • マクロファージと破骨細胞に認められる共通抗原の免疫細胞化学的研究
    網塚 憲生  歯科基礎医学会雑誌  32-  (抄録)  61  -61  1990/09  [Not refereed][Not invited]
  • ヒト永久歯エナメル叢の微細構造学的および免疫細胞化学的研究
    網塚 憲生  解剖学雑誌  65-  (4)  325  -325  1990/08  [Not refereed][Not invited]
  • 破骨細胞の分化と骨芽細胞系細胞の相互作用に関する微細構造学的研究 マウス頭蓋骨由来の骨芽細胞様細胞と脾細胞の共存培養により形成されるTRAP陽性多核細胞について
    網塚 憲生  日本骨代謝学会雑誌  8-  (3)  315  -315  1990/06  [Not refereed][Not invited]
  • ラット大腿骨におけるED1陽性マクロファージと破骨細胞の免疫細胞化学的研究
    歯科基礎医学会雑誌  3-  61  1990  [Not refereed][Not invited]
  • ヒト永久歯エナメル叢の微細構造学的研究
    解剖誌  65-  325  1990  [Not refereed][Not invited]
  • Ultrastructural observation of TRAP-positive osteoclastic cells differentiated by co-culture with mouse spleen cells and calvaria stronal cells
    J. Bone & Mineral Metab.  8-  213  1990  [Not refereed][Not invited]
  • Immunocytochemical observation of ED1-positive macrophage and osteoclast in rat femur.
    Jap. J. Oral Biol.  3-  61  1990  [Not refereed][Not invited]
  • Ultrastructural study of Enamel tufts in human permanent teeth.
    65-  325  1990  [Not refereed][Not invited]
  • ヒト永久歯におけるエナメル叢の微細構造学的観察
    網塚 憲生  新潟歯学会雑誌  19-  (1)  89  -90  1989/06  [Not refereed][Not invited]
  • SEM OBSERVATION ON ENAMEL TUFTS IN HUMAN PERMANENT TEETH
    N AMIZUKA, H OZAWA  JOURNAL OF DENTAL RESEARCH  68-  (4)  667  -667  1989/04  [Not refereed][Not invited]
  • ヒト永久歯エナメル叢における微細構造学的観察
    新潟歯学会雑誌  19-  90  1989  [Not refereed][Not invited]
  • Ultrastructural and cytochemical studies on the coupling hpenomena between osteoclasts and osteoblastic cells.
    J. Bone Min. Res.  4-  212  1989  [Not refereed][Not invited]
  • 低アルカリホスファターゼ症における突然変異型組織非特異型アルカリホスファターゼの生合成について(共著)
    第39回歯科基礎医学会  39-  111  [Not refereed][Not invited]
  • 骨の細胞におけるゴルジ装置の構造と機能-BrefeldinA投与による骨芽細胞と破骨細胞のゴルジ装置の形態変化について-(共著)
    歯科基礎医学会誌  37-  1  [Not refereed][Not invited]
  • 破骨細胞の細胞死に関する微細構造学的, 細胞化学的研究(共著)
    歯科基礎医学会誌  37-  2  [Not refereed][Not invited]
  • The biological action of parathyroid hormone (PTH)-related peptide (PTHrP) mediated either by the PTH/PTHrP receptor or the mucleolar translocation in chondrocytes
    Anat Sci Int  771, 225-236-  [Not refereed][Not invited]
  • Ultrastructural and cytochemical observation of apoptotic osteoclasts induced by bisphosphonate. (共著)
    Bone  [Not refereed][Not invited]
  • High bone turnover associated with increased angiogenesis in melorheostosis : Histopathological studies. (共著)
    Orthopedics.  [Not refereed][Not invited]
  • Blomstrand chondrodisplasia caused by a missense mutation in the human parathyroid hormone receptor-1. (共著)
    Endocrinology in press  [Not refereed][Not invited]

Awards & Honors

  • 2017/01 北海道大学 平成28年度北海道大学教育総長賞 奨励賞
     
    受賞者: 網塚 憲生
  • 2016/10 日本学術振興会 科学研究費補助金・審査員賞
     
    受賞者: 網塚 憲生
  • 2005 Best paper award of 2004, the 2nd joint meeting of the Europeans Calcified Tissue Society and International Bone and Mineral Society, Geneva, Switzerland.
  • 2003 歯科基礎医学会 第3回歯科基礎医学会ライオン学術賞
     骨代謝調節因子における形態学的解析 
    受賞者: 網塚 憲生
  • 2003 日本骨粗鬆症学会研究奨励賞
  • 2000 歯科基礎医学会学会賞
  • 2000 日本骨代謝学会学術賞
  • 1996 日本骨代謝学会奨励賞
  • 1996 William Geiz Award
  • 1993 若手研究者賞(Young Investigator Award)

Research Grants & Projects

  • リン酸イオン供与膜輸送体・酵素群に対する副甲状腺ホルモンの骨特異的作用
    日本学術振興会:科学研究費補助金 基盤研究(B)
    Date (from‐to) : 2018/04 -2021/03 
    Author : 網塚 憲生
  • 台湾陽明大学・北海道大学主催 国際カンファレンス
    公益財団法人伊藤医薬学術交流財団:平成31年度(第25回)助成
    Date (from‐to) : 2019/04 -2020/03 
    Author : 網塚 憲生
  • 骨芽細胞から骨細胞へのスイッチングにおけるON-OFF機構の新規解明
    日本学術振興会:学術研究助成基金助成金 挑戦的研究(萌芽)
    Date (from‐to) : 2018/04 -2020/03 
    Author : 網塚 憲生
  • 二国間交流事業共同研究・セミナー(日本学術振興会・国際交流事業)
    公益財団法人伊藤医薬学術交流財団:平成30年度(第24回)助成
    Date (from‐to) : 2018/04 -2019/03 
    Author : 網塚 憲生
  • ミニモデリングにおける骨細胞ネットワークの新規調節機構
    日本学術振興会:二国間交流事業共同研究
    Date (from‐to) : 2016/04 -2018/12 
    Author : 網塚 憲生
  • 二国間交流事業共同研究・セミナー(日本学術振興会・国際交流事業)
    公益財団法人伊藤医薬学術交流財団:平成29年度(第23回)助成
    Date (from‐to) : 2017/04 -2018/03 
    Author : 網塚 憲生
  • 骨細胞ネットワークの分泌蛋白ソーティングとミニモデリング誘導メカニズム
    日本学術振興会:学術研究助成基金助成金 挑戦的萌芽研究
    Date (from‐to) : 2016/04 -2018/03 
    Author : 網塚 憲生
  • 骨細胞におけるリン酸イオン供与システムとFGF23フィードバック機構
    日本学術振興会:科学研究費補助金 基盤研究(B)
    Date (from‐to) : 2015/04 -2018/03 
    Author : 網塚 憲生
  • 骨細胞ネットワークを介したPTH新規作用 -ミニモデリングと骨基質溶解・石灰化-
    日本学術振興会:学術研究助成基金助成金 挑戦的萌芽研究
    Date (from‐to) : 2014/04 -2016/03 
    Author : 網塚 憲生
  • 骨粗鬆症治療を見据えた新規骨形成メカニズム「ミニモデリング」の解明
    日本学術振興会:二国間交流事業共同研究
    Date (from‐to) : 2013/04 -2015/12 
    Author : 網塚 憲生
  • klothoシグナル破綻による血管石灰化および血管骨化 -マウスおよびヒトの血管における組織学的検索-
    日本腎臓財団:腎不全病態研究助成
    Date (from‐to) : 2014/04 -2015/03 
    Author : 網塚 憲生
  • 骨細胞を中心としたFGF23-klothoシステムによる骨基質石灰化の調節機構
    日本学術振興会:科学研究費補助金 基盤研究(B)
    Date (from‐to) : 2012/04 -2015/03 
    Author : 網塚 憲生
  • 骨芽細胞系細胞に対するPTHとPTHrP作用の相違における新規アプローチ
    日本学術振興会:学術研究助成基金助成金 挑戦的萌芽研究
    Date (from‐to) : 2012/04 -2014/03 
    Author : 網塚 憲生
  • klotho-FGF23作用破綻における血管石灰化の細胞生物
    日本腎臓財団:腎不全病態研究助成
    Date (from‐to) : 2012/04 -2013/03 
    Author : 網塚 憲生
  • Klotho欠損状態における骨代謝異常・血管石灰化の微細構造学的検索
    日本腎臓財団:腎不全病態研究助成
    Date (from‐to) : 2011/04 -2012/03 
    Author : 網塚 憲生
  • 骨細胞・骨細管系による骨基質ミネラル維持機構の解明
    日本学術振興会:科学研究費補助金 基盤研究(B)
    Date (from‐to) : 2009/04 -2012/03 
    Author : 網塚 憲生
  • 変異型副甲状腺ホルモン受容体の細胞内輸送と組織異常における新たな展開
    日本学術振興会:科学研究費補助金 挑戦的萌芽研究
    Date (from‐to) : 2009/04 -2011/03 
    Author : 網塚 憲生
  • 骨芽細胞分化誘導蛋白を保持する新しいリン酸カルシウム材料の骨誘導
    ノーステック財団:「研究開発事業」スタートアップ補助金
    Date (from‐to) : 2009/04 -2010/03 
    Author : 網塚 憲生
  • 骨・軟骨細胞における副甲状腺ホルモン受容体シグナルの分子細胞学的解析
    日本学術振興会:科学研究費補助金・特別研究費
    Date (from‐to) : 2009/04 -2010/03 
    Author : 網塚 憲生
  • 骨組織と腎におけるPTH/PTHRPレセプターの局在
  • 骨芽細胞の分化過程におけるPTH/PTHRPレセプターとFGFレセプターの発現について
  • 骨組織におけるPTHrPの生物学的作用に対する形態学的検索
  • Localization of PTH/PTHRP receptor in bone and kidney
  • Gene expression of PTH/PTHRP receptor and FGF receptor during osteoblast differentiation
  • Morphological assessment for biological note of PTHRP in bone tissues

Educational Activities

Teaching Experience

  • 組織学・口腔組織学
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 学士課程
    開講学部 : 歯学部
  • Soft Matter Medical Engineering
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 修士課程
    開講学部 : 生命科学院
    キーワード : 基礎医学、再生医学、バイオマテリアル、がん生物学
  • Seminar Ⅰ for oral presentation and writing scientific papers
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学研究科
    キーワード : 研究計画,文献検索,研究のまとめ,口頭発表,論文作製
  • Seminar Ⅰ for oral presentation and writing scientific papers
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : 研究計画,文献検索,研究のまとめ,口頭発表,論文作製
  • Seminar Ⅱ for oral presentation and writing scientific papers
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学研究科
    キーワード : 研究計画,文献検索,研究のまとめ,口頭発表,論文作製
  • Seminar Ⅱ for oral presentation and writing scientific papers
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : 研究計画,文献検索,研究のまとめ,口頭発表,論文作製
  • Seminar Ⅲ for oral presentation and writing scientific papers
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学研究科
    キーワード : 研究計画,文献検索,研究のまとめ,口頭発表,論文作製
  • Seminar Ⅲ for oral presentation and writing scientific papers
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : 研究計画,文献検索,研究のまとめ,口頭発表,論文作製
  • Oral Biology and Medicine
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学研究科
    キーワード : bone, tooth, structure, extracellular matrix, regeneration, osteoblast, osteoclast, remodeling, phosphatase, ATPase, materials, orthodontics, periodontics
  • Oral Biology and Medicine
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : bone, tooth, structure, extracellular matrix, regeneration, osteoblast, osteoclast, remodeling, phosphatase, ATPase, materials, orthodontics, periodontics
  • Developmental Biology of Hard Tissue
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : 硬組織,形態形成,分子生物学
  • Morphological Analysis of Hard Tissue
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学研究科
    キーワード : 硬組織,形態,発生,分子生物学,比較解剖学,系統発生学
  • Morphological Analysis of Hard Tissue
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : 硬組織,形態,発生,分子生物学,比較解剖学,系統発生学
  • Morphological Research in Hard Tissue
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学研究科
    キーワード : 骨代謝、硬組織、微細構造、組織化学、電子顕微鏡
  • Morphological Research in Hard Tissue
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : 骨代謝、硬組織、微細構造、組織化学、電子顕微鏡
  • Developmental Biology of Hard Tissue
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学研究科
    キーワード : 骨、軟骨、歯、硬組織、発生、石灰化、電子顕微鏡
  • Developmental Biology of Hard Tissue
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : 骨、軟骨、歯、硬組織、発生、石灰化、電子顕微鏡
  • Research for Developmental Biology of Hard Tissue
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学研究科
    キーワード : 硬組織,歯,発生,形態学,顕微鏡
  • Research for Developmental Biology of Hard Tissue
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : 硬組織,歯,発生,形態学,顕微鏡
  • Research Basics in Dental Sciences
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学研究科
    キーワード : 歯学研究,基本的研究技法,基礎知識
  • Research Basics in Dental Sciences
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : 歯学研究,基本的研究技法,基礎知識
  • Developmental Biology of Hard Tissue
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学研究科
    キーワード : 硬組織,形態形成,分子生物学
  • Freshman Seminar
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 学士課程
    開講学部 : 全学教育
  • Practice in Histology and Oral Histology
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 学士課程
    開講学部 : 歯学部
    キーワード : 組織学、細胞学、器官構築
  • Special Lecture
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 学士課程
    開講学部 : 全学教育
    キーワード : 留学、国際的な視野、学習計画
  • English Seminar
    開講年度 : 2018
    課程区分 : 学士課程
    開講学部 : 全学教育
    キーワード : バイオサイエンス、英語論文

Campus Position History

  • 2018年4月1日 
    2020年3月31日 
    教育研究評議会評議員
  • 2018年4月1日 
    2020年3月31日 
    大学院歯学研究院副研究院長

Position History

  • 2018年4月1日 
    2020年3月31日 
    教育研究評議会評議員
  • 2018年4月1日 
    2020年3月31日 
    大学院歯学研究院副研究院長


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