研究者データベース

長谷部 晃(ハセベ アキラ)
歯学研究院 口腔医学部門 口腔病態学分野
教授

基本情報

所属

  • 歯学研究院 口腔医学部門 口腔病態学分野

職名

  • 教授

学位

  • 博士(歯学)(北海道大学)

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J-Global ID

研究キーワード

  • 感染免疫学(6913) 細菌学   

研究分野

  • ライフサイエンス / 細菌学

所属学協会

  • 日本免疫学会   日本細菌学会   日本マイコプラズマ学会   歯科基礎医学会   

研究活動情報

論文

  • マイコプラズマ由来リポタンパク質/リポペプチドにより誘導される生きたマクロファージからのIL-1β細胞外分泌機構
    佐伯 歩, 引頭 毅, 長谷部 晃, 鈴木 敏彦, 柴田 健一郎
    Journal of Oral Biosciences Supplement 2019 127 - 127 (一社)歯科基礎医学会 2019年10月 [査読有り][通常論文]
  • マイコプラズマのリポペプチドFSL-1はどのようにして生きたマクロファージからIL-1βの放出を誘発するのか
    佐伯 歩, 土屋 晃介, 須田 貴司, 引頭 毅, 長谷部 晃, 鈴木 敏彦, 柴田 健一郎
    日本細菌学雑誌 74 1 85 - 85 日本細菌学会 2019年03月 [査読有り][通常論文]
  • Hasebe A, Saeki A, Yoshida Y, Shibata KI
    Archives of Oral Biology 93 115 - 125 2018年06月 [査読有り][通常論文]
  • Ayumi Saeki, Masahiro Sugiyama, Akira Hasebe, Toshihiko Suzuki, Ken-Ichiro Shibata
    Mol Oral Microbiol 2018年04月 [査読有り][通常論文]
     
    endosomes. The artificial delivery of FSL-1 into the cytosol of B6BMMs drastically enhanced the IL-1β production-inducing activity. FSL-1 as well as the representative NLRP3 inflammasome activator nigericin induced the NLRP3/ASC speck, but FSL-1 located in the compartment different from the NLRP3/ASC speck. This article is protected by copyright. All rights reserved.
  • Aggregatibacter actinomycetemcomitansのゲノムDNAはマクロファージに対してnucleotide-binding domain-like receptor containing protein 3インフラマソームを活性化してIL-1βを誘導する
    亀崎 良助, 阿部 亜美, 佐伯 歩, 長谷部 晃, 鈴木 敏彦, 北川 善政, 柴田 健一郎
    北海道歯学雑誌 38 2 177 - 184 北海道歯学会 2018年03月 [査読有り][通常論文]
     
    インフラマソームは多様な生理活性をもつ炎症性サイトカインの一つであるIL-1βの産生を制御する細胞内センサーである。IL-1βは歯周炎を含む多くの炎症性疾患において重要な病因的役割を果たしている。そこで、本研究では、侵襲性歯周炎の主な病原菌であるAggregatibacter actinomycetemcomitansによるnucleotide-binding domain-like receptor containing protein 3(NLRP3)インフラマソームの活性化を介したIL-1β産生誘導について検証した。C57BL/6(B6)マウスならびにcaspase-1、ASC(apoptosis-associated speck-like protein containing a caspase recruitment domain)あるいはNLRP3をノックアウトしたマウスより採取した骨髄細胞から分化誘導したマクロファージ(BMM)をA.actinomycetemcomitans JP2の生菌および100℃で5分間熱処理した死菌で刺激した。IL-1βはELISA法ならびにウェスタンブロッティング法で測定した。生菌ならびに死菌でB6 BMMを刺激したところ、生菌、死菌ともにIL-1βの産生を誘導したが、生菌に比べて死菌の活性が約10倍高かった。生菌およ
  • NLRP3 inflammasome活性化のためのマイコプラズマリポペプチドFSL-1の細胞質ゾルへの移行
    佐伯 歩, 長谷部 晃, 鈴木 敏彦, 柴田 健一郎
    日本細菌学雑誌 73 1 40 - 40 日本細菌学会 2018年02月 [査読有り][通常論文]
  • Koichi Nakamura, Ko Nakanishi, Yosuke Bando, Akira Hasebe, Atsushi Hyono, Shigeaki Abe, Ken-Ichiro Shibata, Yasuhiro Yoshida, Junichiro Iida, Yasutaka Yawaka
    Nano Biomedicine 9 1 29 - 34 2018年 [査読有り][通常論文]
     
    In this study, nanoporous silica particles (NPS) were synthesized and their controlled drug-release behavior was investigated. The NPS were mixed with glass ionomer cement (GIC), which is a common dental material. Epigallocatechin gallate (EGCG) was charged into the samples as a model drug. Samples were immersed into distilled water then, the supernatant was analyzed every day using a UV-visible spectrophotometer to observe EGCG-release behavior. GIC containing NPS can release EGCG for more than one week, whereas specimens without NPS released it for only a few days. This suggests that NPS has an excellent ability for sustained drug-release.
  • インフラマソーム活性化物質としてのマイコプラズマ由来リポタンパク質
    佐伯 歩, 長谷部 晃, 鈴木 敏彦, 柴田 健一郎
    Journal of Oral Biosciences Supplement 2017 189 - 189 (一社)歯科基礎医学会 2017年09月 [査読有り][通常論文]
  • Ayumi Saeki, Toshihiko Suzuki, Akira Hasebe, Ryousuke Kamezaki, Mari Fujita, Futoshi Nakazawa, Ken-Ichiro Shibata
    CELLULAR MICROBIOLOGY 19 3 2017年03月 [査読有り][通常論文]
     
    Streptococcus sanguinis is frequently isolated from the blood of patients with infective endocarditis and contributes to the pathology of this disease through induction of interleukin (IL)-1 beta responsible for the development of the disease. However, the mechanism of IL-1 beta induction remains unknown. In this study, S. sanguinis activated a murine dendritic cell (DC) to induce IL1 beta and this activity was attenuated by silencing the mRNAs of nucleotide-binding domain-like receptor containing protein 3 (NLRP3) and caspase-1. S. sanguinis induced IL-1 beta production in murine bone marrow-derived macrophage, but this activity was significantly reduced in bone marrow-derived macrophages from NLRP3-, apoptosisassociated speck-like protein containing a caspase-recruitment domain-, and caspase-1-deficient mice. DC phagocytosed S. sanguinis cells, followed by the release of adenosine triphosphate (ATP). The ATP-degradating enzyme attenuated the release of ATP and IL-1 beta. The inhibitors for ATP receptor reduced IL-1 beta release in DC. These results strongly suggest that S. sanguinis has the activity to induce IL-1 beta through the NLRP3 inflammasome in macrophage and DC and interaction of purinergic receptors with ATP released is involved in expression of the activity.
  • マイコプラズマのIL-1β産生誘導物質の一つはリポペプチド・リポタンパク質である
    佐伯 歩, 長谷部 晃, 鈴木 敏彦, 柴田 健一郎
    日本細菌学雑誌 72 1 68 - 68 日本細菌学会 2017年02月 [査読有り][通常論文]
  • M. Sugiyama, A. Saeki, A. Hasebe, R. Kamesaki, Y. Yoshida, Y. Kitagawa, T. Suzuki, K. Shibata
    MOLECULAR ORAL MICROBIOLOGY 31 3 259 - 269 2016年06月 [査読有り][通常論文]
     
    Interleukin-1 (IL-1) plays crucial roles in the pathogenesis of periodontal disease. It is produced after the processing of pro-IL-1 by caspase-1, which is activated by the inflammasome-a multiprotein complex comprising nucleotide-binding domain leucine-rich repeat-containing receptor (NLR), the adaptor protein apoptosis-associated speck-like protein containing a caspase-recruitment domain (ASC), and procaspase-1. Mycoplasma salivarium preferentially inhabits the gingival sulcus and the incidence and number of organisms in the oral cavity increase significantly with the progression of periodontal disease. To initially clarify the association of this organism with periodontal diseases, this study determined whether it induces IL-1 production by innate immune cells such as dendritic cells or macrophages by using Mycoplasma pneumoniae as a positive control. Both live and heat-killed M.salivarium and M.pneumoniae cells induced IL-1 production by XS106 murine dendritic cells as well as pyroptosis. The activities were significantly downregulated by silencing of caspase-1. Bone-marrow-derived macrophage (BMMs) from wild-type and NLR-containing protein 3 (NLRP3)-, ASC-, and caspase-1-deficient mice were examined for IL-1 production in response to these mycoplasmas. Live M.salivarium and M.pneumoniae cells almost completely lost the ability to induce IL-1 production by BMMs from ASC- and caspase-1-deficient mice. Their activities toward BMMs from NLRP3-deficient mice were significantly but not completely attenuated. These results suggest that live M.salivarium and M.pneumoniae cells can activate several types of inflammasomes including the NLRP3 inflammasome. Both M.salivarium and M.pneumoniae cells can activate THP-1 human monocytic cells to induce IL-1 production. Hence, the present finding that M.salivarium induces IL-1 production by dendritic cells and macrophages may suggest the association of this organism with periodontal diseases.
  • マイコプラズマ由来リポペプチド・リポタンパク質によるNLRP3インフラマソームの活性化
    佐伯歩, 長谷部晃, 亀崎良助, 柴田健一郎
    日本マイコプラズマ学会雑誌 43 9 - 10 2016年 [査読無し][通常論文]
  • M. Oouchi, A. Hasebe, H. Hata, T. Segawa, Y. Yamazaki, Y. Yoshida, Y. Kitagawa, K-I Shibata
    ORAL DISEASES 21 5 645 - 651 2015年07月 [査読有り][通常論文]
     
    ObjectiveRoles of aging or immune responses mediated by Toll-like receptors and natural killer cell in the onset or progression of human candidiasis remain unclear. This study was designed to elucidate the roles using peripheral blood mononuclear cells from healthy donors and patients with oral candidiasis. Subjects and methodsSubjects tested were healthy volunteers and patients who visited Dental Clinical Division of Hokkaido University Hospital. The patients with oral candidiasis included 39 individuals (25-89years of age) with major complaints on pain in oral mucosa and/or dysgeusia. Healthy volunteers include students (25-35years of age) and teaching staffs (50-65years of age) of Hokkaido University Graduate School of Dental Medicine. ResultsFunctions of Toll-like receptors 2 and 4 were downregulated significantly and the natural killer activity was slightly, but not significantly downregulated in aged healthy volunteers compared with healthy young volunteers. Functions of Toll-like receptors 2 and 4 and the natural killer activity were significantly downregulated in patients with oral candidiasis compared with healthy volunteers. ConclusionDownregulation of functions of Toll-like receptors 2 and 4 as well as natural killer activity is suggested to be associated with the onset or progression of oral candidiasis in human.
  • 阿部亜美, 佐伯歩, 長谷部晃, 原博志, 八若保孝, 柴田健一郎
    北海道歯学雑誌 35 2 123 - 132 北海道歯学会 2015年03月15日 [査読無し][通常論文]
     
    インフラマソームは多様な生理活性をもつ炎症性サイトカインのひとつであるIL-1βの産生を制御する細胞内センサーである。近年、IL-1βが関与する炎症性疾患の多くがこの細胞内センサーの活性化と関連している可能性が示唆され、病態解明の手がかりとしてインフラマソームが注目されている。歯周炎はその病態形成にIL-1βが重要な役割を果たすが、歯周炎とインフラマソームとの関連を示した報告はほとんどない。そこで、本研究では、侵襲性歯周炎の主な病原菌であり、感染性心内膜炎や敗血症などの全身疾患との関連も多く報告されているAggregatibacter actinomycetemcomitansの歯周疾患における病因論の一部を明らかにすることを目的とし、本菌によるインフラマソームの活性化について検証した。A.actinomycetemcomitansの生菌および死菌でA/Jマウス由来樹状細胞(XS106細胞)を刺激したところ、生菌、死菌ともにIL-1βの産生を誘導したが、A.actinomycetemcomitans培養上清では産生誘導はみられなかった。生菌および死菌でのIL-1β産生誘導活性はZ-VAD-FMKとZ-YVAD-FMKで有意に阻害された。さらに、これらのIL-1β産生誘導活性はcaspase-1ならびにNLRP3のノックダウンにより有意に減弱した。また、A.actinomycetemcomitans菌体はXS106細胞にネクローシス様細胞死を誘導し、その細胞死はIL-1βの産生を伴うことからピロトーシスであると考えられる。以上の結果から、A.actinomycetemcomitans菌体はXS106細胞においてNLRP3インフラマソームを活性化し、IL-1β産生ならびにピロトーシス誘導活性を有していることがわかった。(著者抄録)
  • 原博志, 長谷部晃, 佐伯歩, 阿部亜美, 山崎裕, 柴田健一郎
    北海道歯学雑誌 35 1 16 - 24 北海道歯学会 2014年09月15日 [査読無し][通常論文]
     
    我々は、これまでにToll-like receptor 2(TLR2)のリガンドであるリポペプチドFSL-1がin vivoにおいてTLR2依存的な抗腫瘍活性を示すこと、また、口腔レンサ球菌の全菌体の認識にTLR2が重要な役割を果たしていることを明らかにした。そこで、本研究では口腔レンサ球菌の全菌体のin vivoにおける抗腫瘍活性を検証した。8-9週齢のC57BL/6マウスの背部皮下にメラノーマB16F0を接種後、4日後及び9日後に、Streptococcus gordoniiの生菌あるいは死菌で免疫した。その結果、生菌ならびに死菌は共に腫瘍の増殖を有意に抑制した。さらに、2回目の免疫を行った翌日の脾臓ならびに所属リンパ節からリンパ球を採取し、ナチュラルキラー(NK)細胞と細胞傷害性T細胞(CTL)の傷害活性を調べた。生菌で免疫したマウスの脾臓ならびに所属リンパ節では有意に高いNK活性を示した。また、脾臓では有意に高いCTL活性を示したが、所属リンパ節では有意ではないが、活性化傾向を示した。さらに、2回目の免疫から6日後の所属リンパ節において、免疫抑制状態を惹起することが知られている制御性T細胞(Treg)ならびに骨髄由来抑制細胞(MDSC)の割合を調べた。その結果、生菌で免疫していた場合にTregならびにMDSCの割合が共に有意に減少していることがわかった。また、腫瘍周囲におけるTregの存在状況を調べたところコントロール群では移植腫瘍間や間質にTregが認められたが、生菌で免疫した群は認められなかった。以上の結果から、口腔レンサ球菌の一つであるStreptococcus gordoniiの全菌体はin vivoにおいて抗腫瘍活性を有しており、その活性発現にはNK細胞ならびにCTLによる細胞傷害活性と、TregならびにMDSC数の減少による免疫力の亢進が関与していることが示唆された。(著者抄録)
  • 谷詰直穂, 大谷誠, 長谷部晃, 佐伯歩, 戸塚靖則, 鄭漢忠, 柴田健一郎
    北海道歯学雑誌 35 1 8 - 15 北海道歯学会 2014年09月15日 [査読無し][通常論文]
     
    TLRは自然免疫系で病原体の侵入を感知するだけでなく、T細胞が中心的な役割を果たす獲得免疫の誘導においても重要な役割を果たしている。これまで、T細胞自身もTLRを発現していることが明らかになっているが、T細胞の機能におけるTLRの役割はいまだ不明な点が多く残されている。本研究では、T細胞受容体を介したT細胞の活性化で重要な役割を果たしているSrcファミリーキナーゼのひとつであるLckに注目し、TLR2とLckのクロストークを検討した。C57BL/6マウスのCD4陽性T細胞を抗CD3ε抗体およびTLR2のリガンドであるリポペプチドFSL-1で刺激すると、抗CD3ε抗体またはFSL-1で単独刺激したものと比べ、共刺激したものではCD4陽性T細胞の増殖が相乗的に増加した。ヒト胎児腎細胞由来のHEK293細胞にTLR2遺伝子とLck野生型遺伝子をそれぞれ単独、あるいは同時に導入し、NF-κBの活性化を調べた。その結果、予想に反して、TLR2遺伝子を単独導入したものと比較し、TLR2遺伝子とLck野生型遺伝子を同時に導入したものでは、FSL-1刺激によるNF-κBの活性化が有意に抑制されることがわかった。さらに、Lckの各種欠失変異体(キナーゼ不活型点変異体K273R、Y394F、恒常的活性化型点変異体Y505F)を作製し、これらの遺伝子をHEK293細胞に導入し、FSL-1刺激によるNF-κBの活性化を調べたところ、キナーゼ活性がLckによるTLR2シグナルの抑制に部分的に関与するという結果を得た。また、TLR2とLckとの会合が免疫沈降法で確認された。以上の結果から、TCRを介したT細胞の活性化に関与するLckがTLR2と会合し、下流のシグナルを負に制御することが示唆された。(著者抄録)
  • Akira Hasebe, Hong-Hua Mu, Barry C. Cole
    AMERICAN JOURNAL OF REPRODUCTIVE IMMUNOLOGY 72 3 285 - 295 2014年09月 [査読有り][通常論文]
     
    Problem Mycoplasma hominis has been implicated in many inflammatory conditions of the human urogenital tract in particular amniotic infections that lead to fetal and neonatal disease and pre-term labor. The mechanisms responsible are poorly defined. Method of Study Biochemical and immunological methods were used to extract, purify, and characterize an inflammatory component present in M. hominis. Results We isolated and purified to homogeneity a 40-kDa bioactive lipoprotein from M. hominis that was a potent TLR2-dependent, CD14-independent activator of the human THP-1 macrophage cell line. Homology searches of the N-terminal sequence revealed that 22 of the first 23 residues were identical to those seen for the phase-variable M. hominis p50 adhesin. The truncated P50t lipoprotein importantly retained its adhesive properties for human macrophages. Conclusion The unique adhesin/macrophage activator may play a key role in M. hominis infections by triggering an inflammatory cytokine cascade.
  • マイコプラズマのIL-1産生誘導活性におけるATPとその分解産物ならびにK+の関与
    杉山正博, 佐伯歩, 長谷部晃, 柴田健一郎
    日本マイコプラズマ学会雑誌 41 28 - 29 2014年 [査読無し][通常論文]
  • A. Saeki, T. Segawa, T. Abe, M. Sugiyama, T. Arimoto, H. Hara, A. Hasebe, M. Ohtani, N. Tanizume, M. Ohuchi, H. Kataoka, M. Kawanami, A. Yokoyama, K. Shibata
    MOLECULAR ORAL MICROBIOLOGY 28 4 267 - 280 2013年08月 [査読有り][通常論文]
     
    This study was designed to determine whether oral streptococci modulate the growth and functions of regulatory T cells. Heat-killed cells of wild-type strains of Streptococcus gordonii and Streptococcus mutans induced the Toll-like receptor 2 (TLR2)-mediated nuclear factor-kappa B (NF-kappa B) activation, but their lipoprotein-deficient strains did not. Stimulation with these streptococci resulted in a significant increase in the frequency of CD4(+) CD25(+) Foxp3(+) regulatory T cells in splenocytes derived from both TLR2(+/+) and TLR2(-/-) mice, but the level of increase in TLR2(+/+) splenocytes was stronger than that in TLR2(-/-) splenocytes. Both strains of S. gordonii enhanced the proliferation of CD4(+) CD25(+) Foxp3(+) regulatory T cells isolated from TLR2(+/+) mice at the same level as those from TLR2(-/-) mice in an interleukin- 2-independent manner. However, wild-type and lipoprotein-deficient strains of both streptococci did not enhance the suppressive activity of the isolated regulatory T cells in vitro, but rather inhibited it. TLR ligands also inhibited the suppressive activity of the regulatory T cells. Inhibition of the suppressive activity was recovered by the addition of anti-IL-6 antibody. Pretreatment of antigen-presenting cells with the NF-jB inhibitor BAY11-7082 enhanced the suppressive activity of the regulatory T cells. These results suggested that interleukin-6 produced by antigen-presenting cells inhibits the suppressive activity of the regulatory T cells. Wild-type strain, but not lipoprotein-deficient strain, of S. gordonii reduced the frequency of CD4(+) CD25(+) Foxp3(+) regulatory T cells in the acute infection model, whereas both strains of S. gordonii increased it in the chronic infection model mice. Hence, this study suggests that oral streptococci are capable of modulating the growth and functions of regulatory T cells in vitro and in vivo.
  • Akira Hasebe, Isao Ishikawa, Haque M. Shamsul, Makoto Ohtani, Taku Segawa, Ayumi Saeki, Naoho Tanizume, Manabu Oouchi, Yoshihide Okagami, Teruo Okano, Ken-Ichiro Shibata
    Photomedicine and Laser Surgery 31 3 125 - 131 2013年03月01日 [査読有り][通常論文]
     
    Objective: The objective of this research was to determine the effectiveness of antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) in the removal of mycoplasmas from contaminated cells. Background data: Mycoplasmas often contaminate cell cultures. The cell-contaminating mycoplasmas are removed by antibiotics, but the use of antibiotics usually induces antibiotic-resistant bacteria. aPDT is expected to be a possible alternative to antibiotic treatments for suppressing infections. Materials and Methods: Mycoplasma salivarium (Ms)-infected human embryonic kidney (HEK) 293 cells were irradiated using a red light-emitting diode (LED) in the presence of methylene blue (MB) as a photosensitizer. The Ms viable count was determined using culture on agar plates or using a mycoplasma detection kit. Results: aPDT performed using red LED irradiation was effective in decreasing live Ms in the presence of MB without damaging the HEK293 cells. aPDT removed live Ms from the infected cells after washing the cells with sterilized phosphate-buffered saline (PBS) to decrease the initial number of live Ms before aPDT. Conclusions: This study suggests that aPDT could remove mycoplasmas from contaminated cells. © Copyright 2013, Mary Ann Liebert, Inc. 2013.
  • Taku Segawa, Ayumi Saeki, Akira Hasebe, Takafumi Arimoto, Hideo Kataoka, Atsuro Yokoyama, Masamitsu Kawanami, Ken-ichiro Shibata
    Pathogens and Disease 68 3 65 - 77 2013年 [査読有り][通常論文]
     
    Whole cells of wild-type strains of Streptococcus gordonii and Streptococcus mutans induced Toll-like receptor 2 (TLR2)-mediated nuclear factor-jB (NF-ΚB) activation, whereas those of lipoprotein (LP)-deficient strains did not. All strains upregulated the proliferation of TLR2+/+ splenocytes more strongly than TLR2-/- splenocytes. However, significant differences were not observed between the cytokine-inducing activities of wild-type and LP-deficient strains towardTLR2+/+ and TLR-/- splenocytes. Muramyl dipeptide as well as whole cells not only induced nucleotide-binding oligomerization domain 2 (NOD2)-mediated activation of NF-ΚB but also enhanced the proliferation of TLR2-/- as well as TLR2+/+ splenocytes. Wild-type strains of these streptococci were more resistant to clearance from blood and organs (liver and spleen) in TLR2+/+ but not TLR2-/- mice and induced production of larger amounts of blood TNF-α than the LP-deficient strains. Wild-type strains of both species adhered to human vascular endothelial cells more strongly than did the LP-deficient strains. Thus, this study suggested that LP plays an important role in the recognition of these streptococci by the host in vivo as well as in vitro and that these streptococci possess some components recognized by NOD2 and/or TLR2 that are involved in the mitogenic activity toward splenocytes. © 2013 Federation of European Microbiological Societies.
  • マイコプラズマによるインフラマソームの活性化
    杉山正博, 佐伯歩, 長谷部晃, 柴田健一郎
    日本マイコプラズマ学会雑誌 40 9 - 10 2013年 [査読無し][通常論文]
  • Makoto Ohtani, Mitsuhiro Iyori, Ayumi Saeki, Naoho Tanizume, Takeshi Into, Akira Hasebe, Yasunori Totsuka, Ken-ichiro Shibata
    CELLULAR MICROBIOLOGY 14 1 40 - 57 2012年01月 [査読有り][通常論文]
     
    Dendritic cells recognize pathogens through pattern recognition receptors such as Toll-like receptors and phagocytose and digest them by phagocytic receptors for antigen presentation. This study was designed to clarify the cross-talk between recognition and phagocytosis of microbes in dendritic cells. The murine dendritic cell line XS106 cells were stimulated with the murine C-type lectin SIGNR1 ligand lipoarabinomannan and the Toll-like receptor 2 ligand FSL-1. The co-stimulation significantly suppressed FSL-1-mediated activation of NF-?B as well as production of TNF-a, IL-6 and IL-12p40 in a dose-dependent manner. The suppression was significantly but not completely recovered by knock-down of SIGNR1. SIGNR1 was associated with Toll-like receptor 2 in XS106 cells. The co-stimulation upregulated the expression of suppressor of cytokine signalling-1 in XS106 cells, the knock-down of which almost completely recovered the suppression of the FSL-1-mediated cytokine production by lipoarabinomannan. In addition, it was found that the MyD88-adaptor-like protein in XS106 cells was degraded by co-stimulation with FSL-1 and lipoarabinomannan in the absence, but not the presence, of the proteasome inhibitor MG132 and the degradation was inhibited by knock-down of suppressor of cytokine signalling-1. This study suggests that Toll-like receptor 2-mediated signalling is negatively regulated by SIGNR1-mediated signalling in dendritic cells, possibly through suppressor of cytokine signalling-1-mediated degradation of the MyD88-adaptor-like protein.
  • マイコプラズマと口腔レンサ球菌のパターン認識受容体による認識の違い
    佐伯歩, 瀬川卓, 有本隆文, 長谷部晃, 五十嵐武, 柴田健一郎
    日本マイコプラズマ学会雑誌 39 59 - 61 2012年 [査読無し][通常論文]
  • Kazuto Kiura, Akira Hasebe, Ayumi Saeki, Taku Segawa, Futoshi Okada, Haque Mohammad Shamsul, Makoto Ohtani, Takeshi Into, Nobuo Inoue, Minoru Wakita, Ken-ichiro Shibata
    IMMUNOBIOLOGY 216 8 891 - 900 2011年08月 [査読有り][通常論文]
     
    TLR ligands as Th1 inducers have been investigated as potential anti-tumour agents. However, few attempts have been made to investigate the anti-tumour activity of TLR ligands as Th2 inducers. This study, therefore, was carried out to determine whether the TLR2 ligand FSL-1 as a Th2 inducers affects the growth of a QRsP tumour, a fibrosarcoma derived from the C57BL/6 (TLR2(+/+).) mouse in vivo. Tumour volumes in TLR2(+/+) mice immunized with both FSL-1 and tumour-associated antigens were significantly smaller than those in control mice. Immunization with both FSL-1 and tumour-associated antigens increased the survival rate of TLR2(+/+) mice. However, surprisingly, immunization with FSL-1 alone significantly enhanced the growth of tumour. Both anti- and pro-tumour activities of FSL-1 were not observed in TLR2(-/-) mice. Immunization of both FSL-1 and tumour-associated antigens induced tumour-associated antigen-specific cytolytic T cells, antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity of natural killer cells by production of the tumour-specific antibodies, tumour lysis by complement activation and reduction of the number of regulatory T cells in the draining lymph node. Immunization with FSL-1 alone increased the number of regulatory T cells in the draining lymph node, and in vivo administration of anti-CD25 antibody into mice abrogated the pro-tumour activity of FSL-1, suggesting that regulatory T cells are involved in the pro-tumour activity. This study demonstrated that FSL-1 exhibited TLR2-mediated anti- and pro-tumour activities when immunized with and without tumour-associated antigens, respectively. (C) 2011 Elsevier GmbH. All rights reserved.
  • Hong-Hua Mu, Akira Hasebe, Adam Van Schelt, Barry C. Cole
    CELLULAR MICROBIOLOGY 13 3 374 - 387 2011年03月 [査読有り][通常論文]
     
    P>Mycoplasma arthritidis, an inflammatory murine pathogen, secretes a potent superantigen, Mycoplasma arthritidis mitogen (MAM) that contributes to toxic shock, arthritis and skin necrosis. Previously we showed that MAM induced type 2 T-cell cytokines in mice that express functional TLR2 and TLR4, but type 1 cytokines in mice that lack TLR4 function. We show here that IL-17, pSTAT3 and retinoid-related orphan nuclear receptor gamma t are rapidly expressed in wild-type C3H/HeSnJ (TLR2+/4+) mice but are significantly delayed in mutant C3H/HeJ (TLR2+/4-) mice. This marked kinetic difference was associated with a high level of IL-6 in TLR2+/4+ mice versus high levels of IL-1 beta and TNF alpha in TLR2+/4- mice. Also antibodies to IL-6 and IL-23, suppressed IL-17 responses to MAM in TLR2+/4+ mice whereas anti-IL-1 beta, but not anti-TNF alpha, enhanced IL-17 in TLR2+/4- mice. Antibody blocking of TLR4 in TLR2+/4+ mice decreased IL-17 and IL-6 but not IL-23. In addition both IL-17 and IL-6 but not IL-23 were elevated in TLR2 KO mice versus wild-type TLR2+/4+ mice given MAM. We conclude that the MAM interaction with TLR2 versus TLR4 leads to distinct cytokine pathways mediated primarily by IL-1 beta or IL-6/IL-17 signalling respectively. Our findings suggest that the differential interaction of MAM with different TLRs might play an important role in disease outcomes by M. arthritidis.
  • Haque M. Shamsul, Akira Hasebe, Mitsuhiro Iyori, Makoto Ohtani, Kazuto Kiura, Diya Zhang, Yasunori Totsuka, Ken-ichiro Shibata
    IMMUNOLOGY 130 2 262 - 272 2010年06月 [査読有り][通常論文]
     
    P>Little is known of how Toll-like receptor (TLR) ligands are processed after recognition by TLRs. This study was therefore designed to investigate how the TLR2 ligand FSL-1 is processed in macrophages after recognition by TLR2. FSL-1 was internalized into the murine macrophage cell line, RAW264.7. Both chlorpromazine and methyl-beta-cyclodextrin, which inhibit clathrin-dependent endocytosis, reduced FSL-1 uptake by RAW264.7 cells in a dose-dependent manner but nystatin, which inhibits caveolae- and lipid raft-dependent endocytosis, did not. FSL-1 was co-localized with clathrin but not with TLR2 in the cytosol of RAW264.7 cells. These results suggest that internalization of FSL-1 is clathrin dependent. In addition, FSL-1 was internalized by peritoneal macrophages from TLR2-deficient mice. FSL-1 was internalized by human embryonic kidney 293 cells transfected with CD14 or CD36 but not by the non-transfected cells. Also, knockdown of CD14 or CD36 in the transfectants reduced FSL-1 uptake. In this study, we suggest that (i) FSL-1 is internalized into macrophages via a clathrin-dependent endocytic pathway, (ii) the FSL-1 uptake by macrophages occurs irrespective of the presence of TLR2, and (iii) CD14 and CD36 are responsible for the internalization of FSL-1.
  • Relationship of expression and function of Toll-like receptor 2 and 4 with aging in human and mouse.
    Donen M, Ohtani M, Kiura K, Saeki A, Tanizume N, Hasebe A, Totsuka Y, Shibata K
    Hokkaido Journal of Dental Science 31 82 - 89 2010年 [査読有り][通常論文]
  • Mitsuhiro Iyori, Makoto Ohtani, Akira Hasebe, Yasunori Totsuka, Ken-ichiro Shibata
    BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS 377 2 367 - 372 2008年12月 [査読有り][通常論文]
     
    HEK293 cells stably expressing DC-SIGN (293/DC-SIGN) were examined for phagocytosis of Escherichia coli. 293/DC-SIGN stable transfectants were able to mediate phagocytosis of E. coli. The phagocytosis was inhibited by EDTA or several inhibitors specific for Syk kinase, Raf kinase and the transcription factor NF-kappa B. DC-SIGN consists of characteristic domains and motifs such as CRD, neck, incomplete ITAM, dileucine and tri-acidic cluster. HEK293 cells expressing mutants of DC-SIGN were also examined for the phagocytosis. It was found that Cal(2+) binding sites in the CRD of DC-SIGN were involved in phagocytosis of bacteria as well as multimerization of DC-SIGN, and the neck region played a role in efficiency of binding to microbes as well as multimerization of the protein. (C) 2008 Elsevier Inc. All rights reserved.
  • Mitsuhiro Iyori, Hideo Kataoka, Haque Mohammad Shamsul, Kazuto Kiura, Motoaki Yasuda, Takashi Nakata, Akira Hasebe, Ken-ichiro Shibata
    ANTIMICROBIAL AGENTS AND CHEMOTHERAPY 52 1 121 - 127 2008年01月 [査読有り][通常論文]
     
    Many studies have shown that the pharmacological effects of resveratrol, a phytoalexin polyphenolic compound, include protective effects against cancer and inflammation as well as enhancement of stress resistance. In this study, we examined whether resveratrol affected the phagocytosis of bacteria by macrophages and the activation of the transcription factor NF-kappa B after stimulation with or without the ligand FSL-1 for Toll-like receptor 2 (TLR2). Phagocytosis of Escherichia coli and of Staphylococcus aureus by THP-1 cells and RAW264.7 cells was inhibited by resveratrol in a dose-dependent manner regardless of stimulation with FSL-1. The NF-kappa B activity in HEK293 cells stably expressing TLR2 was also inhibited by resveratrol after stimulation with FSL-1. Resveratrol also inhibited both the translocation of p65 of NF-kappa B into nuclei in the transfectant and tumor necrosis factor alpha production by THP-1 cells or RAW264.7 cells. It has recently been reported that TLR-mediated signaling pathways lead to the upregulation of mRNAs of phagocytic receptors, including scavenger receptors and C-type lectin receptors. This study also demonstrated that FSL-1 induced the upregulation of mRNAs of phagocytic receptors such as macrophage scavenger receptor-1, CD36, DC-SIGN, and Dectin-1 and that the FSL-1-induced upregulation of their mRNAs was inhibited by resveratrol. In addition, it was found that the expression of DC-SIGN in HEK293 cells stably expressing DC-SIGN was reduced by resveratrol and that the phagocytic activity was significantly inhibited by resveratrol. Thus, this study suggests that resveratrol inhibited bacterial phagocytosis by macrophages by downregulating the expression of phagocytic receptors and NF-kappa B activity.
  • Toll-like receptor 2とDC-SIGNシグナルのクロストーク
    大谷誠, 伊従光洋, 長谷部晃, 木浦和人, 柴田健一郎
    日本マイコプラズマ学会雑誌 35 65 - 66 2008年 [査読無し][通常論文]
  • マクロファージにおけるジアシルリポペプチドFSL-1刺激による遺伝子発現の網羅的解析とFSL-1の取り込み様式
    長谷部晃, Haque Mohammad Shamsul, 伊従光洋, 木浦和人, 大谷誠, 柴田健一郎
    日本マイコプラズマ学会雑誌 35 79 - 83 2008年 [査読無し][通常論文]
  • Akira Hasebe, Hong-Hua Mu, Leigh R. Washburn, Fok V. Chan, Nathan D. Pennock, Michael L. Taylor, Barry C. Cole
    INFECTION AND IMMUNITY 75 4 1820 - 1826 2007年04月 [査読有り][通常論文]
     
    Mycoplasma arthritidis is a naturally occurring murine pathogen, and the disease model has been used extensively to understand inflammatory mechanisms. Recently, Triton X-114 extracts of a virulent strain of M. arthritidis were found to be more potent in activating macrophages than were those from an avirulent strain, suggesting a role in disease. Here, octyl glucoside extraction of cells was used to identify four distinct bioactive moieties, with molecular masses of similar to 41, 37, 34, and 17 kDa. Their bioactivities were resistant to proteinase K but were destroyed by alkaline hydrolysis and oxidation. As for MALP-2, all were dependent upon Toll-like receptor 2, but unlike MALP-2, they were also dependent upon CD14. The M. arthriddis lipoproteins exhibited infrared absorbances at 2,900 cm(-1) and 1,662 cm(-1), similar to those seen in Pam(3)-Cys-Ser-(Lys)(4). Edman degradation failed to reveal N-terminal sequences, suggesting that they were blocked and therefore might be triacylated. However, mass spectrometry of fragments revealed that the 41-kDa moiety, which binds to serum apolipoprotein A-1, had similarity with the recently described MlpD lipoprotein of M. arthritidis.
  • Masako Mae, Mitsuhiro Iyori, Motoaki Yasuda, Haque Mohammad Shamsul, Hideo Kataoka, Kazuto Kiura, Akira Hasebe, Yasunori Totsuka, Ken-ichiro Shibata
    FEMS IMMUNOLOGY AND MEDICAL MICROBIOLOGY 49 3 398 - 409 2007年04月 [査読有り][通常論文]
     
    A significant amount of evidence has been accumulated to show that Toll-like receptors (TLRs) function as sensors for microbial invasion. However, little is known about how signalling triggered by TLRs leads to the phagocytosis of pathogens. This study was designed to determine whether stimulation of TLR2 mainly with the lipopeptide FSL-1 plays a role in the phagocytosis of pathogens by macrophages. FSL-1 enhanced the phagocytosis of Escherichia coli to a markedly greater extent than it did that of Staphylococcus aureus, but did not enhance the phagocytosis of latex beads. FSL-1 stimulation resulted in enhanced phagocytosis of bacteria by macrophages from TLR2(+/+) mice but not by those from TLR2(-/-) mice. Chinese hamster ovary cells stably expressing TLR2 failed to phagocytose these bacteria, but the cells expressing CD14 did. FSL-1 induced upregulation of the expression of phagocytic receptors, including MSR1, CD36, DC-SIGN and Dectin-1 in THP-1 cells. Human embryonic kidney 293 cells transfected with DC-SIGN and MSR1 phagocytosed these bacteria. These results suggest that the FSL-1-induced enhancement of phagocytosis of bacteria by macrophages may be explained partly by the upregulation of scavenger receptors and the C-type lectins through TLR2-mediated signalling pathways, and that TLR2 by itself does not function as a phagocytic receptor.
  • マイコプラズマ細胞膜由来リポペプチドによるマクロファージ活性化に及ぼす赤ワインポリフェノールの影響
    伊従光洋, 木浦和人, 長谷部晃, 柴田健一郎
    日本マイコプラズマ学会雑誌 34 12 - 14 2007年 [査読無し][通常論文]
  • マイコプラズマ由来ジアシルリポペプチドFSL-1の抗腫瘍活性
    木浦和人, 安田元昭, 長谷部晃, 伊従光洋, 脇田稔, 山本恒之, 井上農夫男, 柴田健一郎
    日本マイコプラズマ学会雑誌 34 8 - 9 2007年 [査読無し][通常論文]
  • Akira Hasebe, Nathan D. Pennock, Hong-Hua Mu, Fok V. Chan, Michael L. Taylor, Barry C. Cole
    JOURNAL OF IMMUNOLOGY 177 7 4826 - 4832 2006年10月 [査読有り][通常論文]
     
    There is increasing epidemiologic evidence implying a role for chronic infection in atherosclerosis and that microbial TLR agonists may contribute to this disease. Mycoplasma arthritidis is an agent of acute and chronic inflammatory disease in rodents, and has been used extensively as a model for defining the mechanisms involved in arthritis and other inflammatory diseases. We have purified a 28-kDa, apolipoprotein A-1 (apoA-1)-like TLR2-dependent macrophage-activating moiety from a culture of a virulent strain of M. arthritidis. ApoA-1 similarly isolated from uninoculated mycoplasma medium was without bioactivity. The activity of the mycoplasma-derived molecule was resistant to heat and to digestion with proteinase K, but was susceptible to alkaline hydrolysis and H2O1 oxidation. Infrared profiles of normal apoA-1 and that derived from mycoplasma were distinct. Unlike the activity of other mycoplasmal TLR2 agonists such as macrophage-activating lipopeptide-2, activity of the M. arthrifidis-derived 28-kDa component was dependent upon CD14, a coreceptor for LPS. Finally, we showed that bioactive lipopeptides prepared from M. arthritidis grown in serum-free medium and also from a 41-kDa known bioactive lipoprotein of M. arthritidis, avidly bound to purified apoA-1 that separated out by SDS-PAGE, induced TNF-alpha and IL-12p40 both in vitro and in vivo. ApoA-1 is a key functional component of the high-density lipoprotein cholesterol complex by scavenging and removing unwanted lipids. Our finding that this molecule can acquire macrophage-activating properties from microbial TLR2-dependent agonists suggests a novel mechanism whereby some microbial agents might reverse the protective role of apoA-1, thus contributing to the genesis of atherosclerosis.
  • BC Cole, HH Mu, ND Pennock, A Hasebe, FV Chan, LR Washburn, MR Peltier
    INFECTION AND IMMUNITY 73 9 6039 - 6047 2005年09月 [査読有り][通常論文]
     
    Mycoplasma arthritidis induces toxicity, arthritis, and dermal necrosis in mice. Virulence factors include a superantigen and membrane adhesins and possibly also a bacteriophage component. Here we compare the biological properties of Triton X-114 extracts derived from avirulent and virulent M. arthtitidis strains. Macrophage cell lines and resident peritoneal macrophages were used to assess inflammatory potential as indicated by production of tumor necrosis factor alpha, interleukin-6, and/or nitric oxide. The activity resided exclusively within the hydrophobic detergent phase, was unaffected by heat treatment at 100 degrees C for 30 min, and was resistant to proteinase K digestion, suggesting involvement of a lipopeptide. Contamination of extracts with endotoxin or superantigen was excluded. Extracts of the more virulent strain had higher activity than did those of the avirulent strain. Using CHO cells expressing Toll-like receptor 2 (TLR2) or TLR4, both with transfected CD14, we showed that extracts activated these cells via TLR2 but not by TLR4. Also, macrophages from C57BL/6 TLR2(-/-) mice failed to respond to the extracts, whereas those from TLR2(+/+) cells did respond. The preparations from the virulent strain of M. arthritidis were also more potent in activating dendritic cells, as evidenced by up-regulation of major histocompatibility complex class II, CD40, B7-1, and B7-2. Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis and subsequent elution of gel slices revealed the presence of three active moieties which corresponded to molecular masses of approximately 24, 28, and 40 kDa. Three active components were also found by reverse-phase chromatography. We suggest that macrophage activation by M. arthritidis could play a significant role in the inflammatory response induced in the host by this organism.
  • A Hasebe, A Yoshimura, T Into, H Kataoka, S Tanaka, S Arakawa, H Ishikura, DT Golenbock, T Sugaya, N Tsuchida, M Kawanami, Y Hara, K Shibata
    INFECTION AND IMMUNITY 72 3 1318 - 1325 2004年03月 [査読有り][通常論文]
     
    Bacteroides forsythus is a gram-negative, anaerobic, fusiform bacterium and is considered to be an etiological agent in periodontal disease. A lipoprotein fraction prepared from B. forsythus cells by Triton X-114 phase separation (BfLP) activated human gingival fibroblasts and a human monocytic cell line, THP-1, to induce interleukin-6 production and tumor necrosis factor alpha production. BfLP was found to be capable of inducing nuclear factor-kappaB translocation in human gingival fibroblasts and THP-1 cells. By using Chinese hamster ovary K1 cells transfected with Toll-like receptor genes together with a nuclear factor-kappaB-dependent CD25 reporter plasmid, it was found that signaling by BfLP was mediated by Toll-like receptor 2 but not by CD14 or Toll-like receptor 4. BfLP induced apoptotic cell death in human gingival fibroblasts, KB cells (an oral epithelial cell line), HL-60 cells (a human myeloid leukemia cell line), and THP-1 cells but not in MOLT4 cells (a T-cell leukemia cell line). Caspase-8, an initiator caspase in apoptosis, was found to be activated in these cells in response to BfLP stimulation. Thus, this study suggested that BfLP plays some etiological roles in oral infections, especially periodontal disease, by induction of cell activation or apoptosis.
  • T Okusawa, M Fujita, JI Nakamura, T Into, M Yasuda, A Yoshimura, Y Hara, A Hasebe, DT Golenbock, M Morita, Y Kuroki, T Ogawa, KI Shibata
    INFECTION AND IMMUNITY 72 3 1657 - 1665 2004年03月 [査読有り][通常論文]
     
    The lipopeptide FSL-1 [S-(2,3-bispalmitoyloxypropyl)-Cys-Gly-Asp-Pro-Lys-His-Pro-Lys-Ser-Phe, Pam(2)CG DPKHPKSF] synthesized on the basis of the N-terminal structure of a Mycoplasma salivarium lipoprotein capable of activating normal human gingival fibroblasts to induce the cell surface expression of ICAM-1 revealed an activity to induce production of monocyte chemoattractant protein 1, interleukin-6 (IL-6), and IL-8. FSL-1 also activated macrophages to produce tumor necrosis factor alpha as the Mycoplasmafermentans-derived lipopeptide MALP-2 (Pam(2)CGNNDESNISFKEK), a potent macrophage-activating lipopeptide, did. The level of the activity of FSL-1 was higher than that of MALP-2. This result suggests that the difference in the amino acid sequence of the peptide portion affects the activity because the framework structure other than the amino acid sequence of the former is the same as that of the latter. To determine minimal structural requirements for the activity of FSL-1, the diacylglyceryl Cys and the peptide portions were examined for this activity. Both portions did not reveal the activity. A single amino acid substitution from Phe to Arg and a fatty acid substitution from palmitic acid to stearic acid drastically reduced the activity. Similar results were obtained in measuring the NF-kappaB reporter activity of FSL-1 to human embryonic kidney 293 cells transfected with Toll-like receptor 2 and 6, together with a NF-kappaB-dependent luciferase reporter plasmid. These results suggest that both the diacylglyceryl and the peptide portions of FSL-1 are indispensable for the expression of biological activities and for the recognition by Toll-like receptors 2 and 6 and that the recognition of FSL-1 by Toll-like receptors 2 and 6 appears to be hydrophobic.
  • T Into, K Kiura, M Yasuda, H Kataoka, N Inoue, A Hasebe, K Takeda, S Akira, K Shibata
    CELLULAR MICROBIOLOGY 6 2 187 - 199 2004年02月 [査読有り][通常論文]
     
    Mycoplasmal membrane diacylated lipoproteins not only initiate proinflammatory responses through Toll-like receptor (TLR) 2 and TLR6 via the activation of the transcriptional factor NF-kappaB, but also initiate apoptotic responses. The aim of this study was to clarify the apoptotic machineries. Mycoplasma fermentans lipoproteins and a synthetic lipopeptide, MALP-2, showed cytocidal activity towards HEK293 cells transfected with a TLR2-encoding plasmid. The activity was synergically augmented by co-expression of TLR6, but not by co-expression of other TLRs. Under the condition of co-expression of TLR2 and TLR6, the lipoproteins could induce maximum NF-kappaB activation and apoptotic cell death in the cells 6 h and 24 h after stimulation respectively. Dominant-negative forms of MyD88 and FADD, but not IRAK-4, reduced the cytocidal activity of the lipoproteins. In addition, both dominant-negative forms also downregulated the activation of both NF-kappaB and caspase-8 in the cells. Additionally, the cytocidal activity was sufficiently attenuated by a selective inhibitor of p38 MAPK. These findings suggest that mycoplasmal lipoproteins can trigger TLR2- and TLR6-mediated sequential bifurcate responses: NF-kappaB activation as an early event, which is partially mediated by MyD88 and FADD; and apoptosis as a later event, which is regulated by p38 MAPK as well as by MyD88 and FADD.
  • T Into, M Fujita, T Okusawa, A Hasebe, M Morita, KI Shibata
    INFECTION AND IMMUNITY 70 7 3586 - 3591 2002年07月 [査読有り][通常論文]
     
    Mycoplasmal lipopeptides S-(2,3-bispalmitoyloxypropyl)-CGDPKHSPKSF and S-(2,3-bispalmitoyloxypropyl)-CGNNDESNISFKEK activated a monocytic cell line, THP-1 cells, to produce tumor necrosis factor alpha. The activity of the lipopeptides was augmented by ATP in a dose-dependent manner. In addition, the level of expression of mRNAs for tumor necrosis factor alpha and interleukin-1beta, -6, and -8 was also upregulated by the lipopeptides and/or extracellular ATP, but that of interleukin-10 was not. The P2X purinergic receptor antagonists pyridoxal phosphate 6-azophenyl 2',4'-disulfonic acid and periodate-oxidized ATP suppressed the activity of ATP to augment the activation of THP-1 cells by the lipopeptides, suggesting that P2X receptors play important roles in the activity of ATP. The nuclear factor kappaB inhibitor dexamethasone also suppressed the activity, suggesting that the activity of ATP is dependent upon the nuclear factor kappaB. Thus, these results suggest that the interaction of extracellular ATP with the P2X receptors is attributed to the activity of ATP to augment the activation of THP-1 cells by mycoplasmal lipopeptides.
  • T Into, Y Nodasaka, A Hasebe, T Okuzawa, J Nakamura, N Ohata, K Shibata
    MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY 46 4 265 - 276 2002年 [査読有り][通常論文]
     
    Lipoproteins of Mycoplasma salivarium and Mycoplasma fermentans preferentially induced necrotic cell death in lymphocytic cell lines, MOLT-4 and Raji, and in one monocytic cell line, THP-1, whereas they preferentially induced apoptotic cell death in another monocytic cell line, HL-60. These findings were also supported by ultrastructural observations by the use of scanning and transmission electron microscopes and by agarose gel electrophoresis of the genomic DNA. The lipoproteins activated caspase-3 in both MOLT-4 and HL-60 cells, which was assessed by the cleavage of the synthetic substrate DEVD-pNA and the endogenous substrate poly(ADP-ribose) polymerase. The cytotoxicity to MOLT-4 and HL-60 cells was inhibited by various caspase inhibitors, Ac-DMQD-CHO, Ac-IETD-CHO, and Z-VAD-FMK. The cytotoxicity was also partially suppressed by the monoclonal antibody to Toll-like receptor 2. Thus this study demonstrated that mycoplasmal lipoproteins induce caspases-dependent necrotic and apoptotic cell death in lymphocytes and monocytes/macrophages, which is partially induced by TLR2-mediated signaling.
  • J Nakamura, K Shibata, A Hasebe, T Into, T Watanabe, N Ohata
    MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY 46 3 151 - 158 2002年 [査読有り][通常論文]
     
    Lipoproteins derived from Mycoplasma salivarium and a synthetic lipopeptide (FSL-1) activate human gingival fibroblasts to induce IL-6 production and ICAM-1 expression. Human gingival fibroblasts were treated with lipoproteins or FSL-1 and then examined for the activation of mitogen-activated protein kinases (MAPKs), ERK1/2, p38, and SAPK/JNK, and transcription factors, AP-1 and NF-kappaB. Western blotting indicated that p38 and SAPK/JNK were activated in response to the stimulators, but the activation of ERK1/2 could not be discriminated because ERK1/2 was activated in the absence of stimulators. The p38 inhibitor SB 203580 also suppressed their IL-6 production-inducing activities, whereas the ERK1/2-activating MAPK kinase (MEK1) inhibitor PD 98059 did not suppress their activities. Moreover, they were capable of inducing the activation of AP-1 and NF-kappaB. NF-kappaB activation was also confirmed by the phosphorylation of IkappaB-alpha. On the basis of these results, it was concluded that lipoproteins of M. salivarium and FSL-1 are capable of activating the MAPKs p38 and SAPK/JNK and the transcriptional factors AP-1 and NF-kappaB in human gingival fibroblasts.
  • マイコプラズマ由来リポペプチドとlipid Aの生物活性の比較
    中村順一朗, 黒岩理暢, 長谷部晃, 大畑昇, 川崎貴生, 小川知彦, 柴田健一郎
    日本マイコプラズマ学雑誌 29 70 - 72 2002年 [査読無し][通常論文]
  • Mycoplasma fermentans 由来リポタンパク質の細胞死誘導活性における細胞外ATPとP2Xレセプターの関与について
    引頭毅, 岡田和隆, 長谷部晃, 井上農夫男, 安田元昭, 柴田健一郎
    日本マイコプラズマ雑誌 29 68 - 69 2002年 [査読無し][通常論文]
  • A Hasebe, K Shibata, T Watanabe
    INFECTION AND IMMUNITY 69 11 7173 - 7177 2001年11月 [査読有り][通常論文]
     
    The cultural supernatant of Mycoplasma fermentans induced interleukin-6 production by human gingival fibroblasts. The active entities were divided into hydrophilic and hydrophobic substances. In this study, we purified a 4.1-kilodalton polypeptide from the hydrophilic substances. It reacted with polyclonal antibodies to M. fermentans and activated human macrophages.
  • マイコプラズマの細胞膜リポタンパク質によって誘導されるヒト・リンパ球ならびにヒト単球のアポトーシスならびにネクローシスについて
    引頭毅, 柴田健一郎, 野田坂佳伸, 長谷部晃, 奥澤亜美, 千葉尚明, 中村順一朗, 渡邊継男
    日本マイコプラズマ学会雑誌 28 61 - 63 2001年 [査読無し][通常論文]
  • 微生物の有するモジュリン
    長谷部 晃, 柴田 健一郎
    北海道歯学雑誌 22 109 - 122 2001年 [査読有り][通常論文]
  • K Shibata, A Hasebe, T Into, M Yamada, T Watanabe
    JOURNAL OF IMMUNOLOGY 165 11 6538 - 6544 2000年12月 [査読有り][通常論文]
     
    The activities to induce TNF-alpha production by a monocytic cell Line, THP-1, and ICAM-1 expression and IL-6 production by human gingival fibroblasts were detected in plural membrane lipoproteins of Mycoplasma salivarium. Although SDS-PAGE of the lipoproteins digested by proteinase K did not reveal any protein bands with molecular masses higher than approximately10 kDa, these activities were detected in the front of the gel. A lipoprotein with a molecular mass of 44 kDa (Lp44) was purified. Proteinase K did not affect the ICAM-1 expression-inducing activity of Lp44, but lipoprotein lipase abrogated the activity. These results suggested that the proteinase K-resistant and low molecular mass entity, possibly the N-terminal lipid moiety, played a key role in the expression of the activity. The N-terminal lipid moiety of Lp44 was purified from Lp44 digested with proteinase K by HPLC. Judging from the structure of microbial lipopeptides as well as the amino acid sequence and infrared spectrum of Lp44, the structure of the N-terminal lipid moiety of Lp44 was speculated to be S-(2,3-bisacyloxypropyl)-cysteine-GDPKHPKSFTEWV-. Its analogue, S-(2, 3-bispalmitoyloxypropyl)-cysteine-GDPKHPKSF, was synthesized. The lipopeptide was similar to the N-terminal lipid moiety of Lp44 in the infrared spectrum and the ICAM-1 expression-inducing activity. Thus, this study suggested that the active entity of Lp44 was its N-terminal lipopeptide moiety, the structure of which was very similar to S-(2, 3-bispalmitoyloxypropyl)-cysteine-GDPKHPKSF.
  • 「正常歯肉線維芽細胞にICAM-1を誘導するMycoplasma salivariumの膜結合性44kDaのリポタンパク質のN末端リポペプチドについて」
    柴田健一郎, 董莉, 長谷部晃, 引頭毅, 千葉尚明, 中村順一朗, 渡邊継男
    日本マイコプラズマ学会雑誌 27 72 - 74 2000年 [査読無し][通常論文]
  • 「Mycoplasma fermentans培養上清に存在するヒト正常歯肉線維芽細胞にIL-6を誘導する物質の精製と性状」
    長谷部晃, 柴田健一郎, 董莉, 引頭毅, 千葉尚明, 土門彦氏, 中村順一朗, 渡邊継男
    「日本マイコプラズマ学会雑誌」 27 80 - 82 2000年 [査読無し][通常論文]
  • L Dong, KI Shibata, Y Sawa, A Hasebe, Y Yamaoka, S Yoshida, T Watanabe
    INFECTION AND IMMUNITY 67 6 3061 - 3065 1999年06月 [査読有り][通常論文]
     
    Lipoproteins in the cell membranes of both Mycoplasma salivarium and Mycoplasma fermentans were demonstrated to trigger the transcription of intercellular adhesion molecule-1 mRNA in normal fibroblasts isolated from human gingival tissue and to induce its cell surface expression by a mechanism distinct from that of Escherichia call lipopolysaccharide. The lipid moiety of the lipoproteins was suggested to play a key role in the expression of the activity.
  • K Shibata, M Kaga, M Kudo, L Dong, A Hasebe, H Domon, Y Sato, H Oguchi, T Watanabe
    MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY 43 6 521 - 525 1999年 [査読有り][通常論文]
     
    Attempts were made to detect Mycoplasma fermentans in saliva sampled from 201 subjects (108 males and 93 females) aged from 4 months to 59 years by a polymerase chain reaction-based assay, M. fermentans was detected in saliva from 110 (54.7%) of 201 subjects, and 10 (28.6%) of 35 subjects aged from 4 months to 3 Sears. Of ten positive subjects, three were aged from 16 to 23 months and five were from 26 to 31 months. The incidence tended to increase with age up to the teens. The incidence was significantly greater in teenagers than in subjects aged from 7 to 12 years, but there was no significant difference in the incidence between the group of teenagers and each of the groups of subjects older than the teenagers. Thus, it was suggested that nl, fermentans colonized the mouth at the age of about 16 months up to the age of 19 years.
  • A Hasebe, K Shibata, H Domon, L Dong, T Watanabe
    MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY 43 11 1003 - 1008 1999年 [査読有り][通常論文]
     
    The active entity responsible for inducing interleukin-6 production by human gingival fibroblasts was partially purified by ion-exchange chromatography from the water-soluble fraction of Mycoplasma salivariurn cells, Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis of the final preparation revealed one densely stained band with a molecular weight of 20.6 kilodaltons and two faint bands with molecular weights of 40.5 and 82.5 kilodaltons, The specific activity of the final preparation was 34-fold higher than that of the starting water-soluble fraction. The interleukin-6-inducing activity was destroyed by proteinase K and reduced 70% by lipoprotein lipase and heat treatment, but was not affected by deoxyribonuclease I or endoglucosidase D. The final preparation induced small amounts of tumor necrosis factor-alpha and interleukin-lp in a myelomonocytic cell line, THP-1 cells, but did not induce interleukin-6. The ability of Escherichia coli lipopolysaccharide to stimulate human gingival fibroblasts to release interleukin-6 was dependent upon the presence of serum in the assay medium, but that of the final preparation from M. salivarium was not, Thus, we partially purified the protein(s) from M, salivarium which were capable of stimulating human gingival fibroblasts to release interleukin-6 by a mechanism different from that of E. coli lipopolysaccharide.
  • 「Mycoplasma fermentans培養上清に存在するポタンパク質がヒト正常歯肉線維芽細胞にIL-6を誘導する」
    長谷部晃, 柴田健一郎, 董莉, 土門彦氏, 渡邊継男
    日本マイコプラズマ学雑誌 26 82 - 84 1999年 [査読無し][通常論文]
  • T Watanabe, K Shibata, T Yoshikawa, L Dong, A Hasebe, H Domon, T Kobayashi, Y Totsuka
    FEMS IMMUNOLOGY AND MEDICAL MICROBIOLOGY 22 3 241 - 246 1998年11月 [査読有り][通常論文]
     
    Thirty-six synovial fluid samples of temporomandibular joints were obtained from 33 patients with pain and anterior disk displacement (closed lock) in the joints. DNAs were prepared from the samples and amplified by a PCR-based assay specific for Mycoplasma salivarium or Mycoplasma fermentans. Of the 36 samples, five (14%), three (8%) and 19 (53%) were positive for M. salivarium, M. fermentans and both, respectively. (C) 1998 Federation of European Microbiological Societies. Published by Elsevier Science B.V. All rights reserved.
  • 顎関節症患者の顎関節滑液からのMycoplasma salivarium ならびにMycoplasma fermentans の検出
    董莉, 柴田健一郎, 由川哲也, 土門彦氏, 長谷部晃, 小林隆, 由良晋也, 戸塚靖則, 渡邊継男
    日本マイコプラズマ学会雑誌 25 130 - 132 1998年 [査読有り][通常論文]
  • ヒト正常歯肉線維芽細胞にIL-6 を誘導するMycoplasma salivarium 由来物質の精製と性状
    長谷部晃, 柴田健一郎, 由川哲也, 土門彦氏, 渡邊継男
    日本マイコプラズマ学会雑誌 25 103 - 105 1998年 [査読無し][通常論文]
  • ヒト正常歯肉線維芽細胞はMycoplasma salivarium 刺激によりICAM-1 を発現する
    柴田健一郎, 董莉, 沢禎彦, 長谷部晃, 吉田重光, 渡邊継男
    日本マイコプラズマ学会雑誌 25 106 - 108 1998年 [査読無し][通常論文]
  • K Shibata, A Hasebe, T Sasaki, T Watanabe
    FEMS IMMUNOLOGY AND MEDICAL MICROBIOLOGY 19 4 275 - 283 1997年12月 [査読有り][通常論文]
     
    Analysis by an enzyme-linked immunosorbent assay for cytokines indicated that whole cells, intracellular materials and cell membranes of Mycoplasma salivarium induced interleukin-6 and interleukin-8 in a human gingival fibroblast cell line, Gin-1 cells. This was confirmed by reverse transcription-polymerase chain reaction analysis of mRNAs of these cytokines. Studies with inhibitors of second-messenger pathway indicated that a protein kinase C-dependent pathway was involved in the expression of the activity of the cell membranes. In addition, whole cells of other mycoplasmas (M. hominis, M. arthritidis, M. arginini, M. fermentans, M. penetrans, M. pirum and M. pneumoniae) tested for comparative purposes were also shown to possess the activity. Thus, this study demonstrated that mycoplasmas possess the activity to induce interleukin-6 and interleukin-8 in human fibroblasts. (C) 1998 Federation of European Microbiological Societies. Published by Elsevier Science B.V.
  • Mycoplasma salivariumは大腸菌のLPSとは異なったメカニズムでヒト正常歯肉線維芽細胞にIL-6ならびにIL-8 を誘導する
    柴田健一郎, 長谷部晃, 由川哲也, 佐々木次雄, 渡邊継男
    日本マイコプラズマ学会雑誌 24 116 - 117 1997年 [査読無し][通常論文]
  • Mycoplasma salivariumの有するヒト正常歯肉線維芽細胞にIL-6 を誘導するタンパク質の精製と性状
    長谷部晃, 柴田健一郎, 由川哲也, 土門彦氏, 渡邊継男
    日本マイコプラズマ学会雑誌 24 118 - 119 1997年 [査読無し][通常論文]

講演・口頭発表等

  • 自然免疫によるマイコプラズマ由来リポペプチドの認識と処理-マクロファージによるジアシルリポペプチドFSL-1の取り込み機構について  [招待講演]
    長谷部 晃
    日本マイコプラズマ学会第39回学術集会 2012年05月 口頭発表(招待・特別)
  • Mycoplasma arthritidis による関節炎―MAM & リポタンパク質.  [招待講演]
    長谷部 晃
    日本マイコプラズマ学会第36回学術集会 2009年06月 口頭発表(招待・特別)
  • The uptake manner of the diacylated lipopeptide FSL-1 by macrophages  [招待講演]
    長谷部 晃
    Innate Immunity Symposium, Regulation in Innate Immunity - from Recognition Molecules to Antimicrobial Peptides. 2008年10月 口頭発表(招待・特別)

その他活動・業績

  • Aggregatibacter actinomycetemcomitans DNAによるインフラマソームの活性化
    亀崎 良助, 佐伯 歩, 長谷部 晃, 北川 善政, 鈴木 敏彦, 柴田 健一郎 Journal of Oral Biosciences Supplement 2016 374 -374 2016年09月 [査読無し][通常論文]
  • 樹状細胞ならびにマクロファージにおけるMycoplasma salivariumによるNLRP3インフラマソームの活性化
    杉山 正博, 佐伯 歩, 長谷部 晃, 亀崎 良助, 北川 善政, 柴田 健一郎 日本マイコプラズマ学会雑誌 (42) 50 -50 2016年03月 [査読無し][通常論文]
  • Mycoplasma salivariumによる樹状細胞ならびにマクロファージにおけるNLRP3インフラマソーム活性化
    杉山 正博, 佐伯 歩, 長谷部 晃, 北川 善政, 柴田 健一郎 日本口腔科学会雑誌 64 (2) 145 -145 2015年07月 [査読無し][通常論文]
  • 口腔マイコプラズマのIL-1β産生誘導活性
    杉山 正博, 佐伯 歩, 長谷部 晃, 北川 善政, 柴田 健一郎 日本口腔科学会雑誌 63 (4) 405 -405 2014年09月 [査読無し][通常論文]
  • 長谷部晃, 柴田健一郎 北海道歯学雑誌 32 (2) 230 -232 2012年03月15日 [査読無し][通常論文]
  • Hong-Hua Mu, Akira Hasebe, Barry Cole JOURNAL OF IMMUNOLOGY 182 2009年04月 [査読無し][通常論文]
  • Ken-ichiro Shibata, Kazuto Kiura, Akira Hasebe, Mitsuhiro Iyori, Mohammad Shamsul Haque, Makoto Ohtani JOURNAL OF IMMUNOLOGY 182 2009年04月 [査読無し][通常論文]
  • Mohammad Shamsul Haque, Akira Hasebe, Mitsuhiro Iyori, Kazuto Kiura, Makoto Ohtani, Ken-ichiro Shibata JOURNAL OF IMMUNOLOGY 182 2009年04月 [査読無し][通常論文]
  • Makoto Ohtani, Akira Hasebe, Mitsuhiro Iyori, Haque Shamsul Mohammad, Yasunori Totsuka, Ken-ichiro Shibata JOURNAL OF IMMUNOLOGY 182 2009年04月 [査読無し][通常論文]
  • TLR2リガンドの取り込み機序
    長谷部 晃, モハメド シャムスル ハク, 柴田 健一郎 . 臨床免疫・アレルギー科 50 162 -166 2008年 [査読無し][招待有り]
  • 長谷部 晃, 荒川 真一, 石倉 裕晃, 吉村 篤利, 土田 信夫, 安田 元昭, 柴田 健一郎 歯科基礎医学会雑誌 44 (5) 2002年09月20日 [査読無し][通常論文]
  • 柴田 健一郎, 吉村 篤利, Golenbock Douglas, 長谷部 晃, 引頭 毅, 奥澤 亜美, 千葉 尚明, 中村 順一朗, 渡邊 継男 日本マイコプラズマ学会雑誌 = Japanese Journal of Mycoplasmology 28 58 -60 2001年12月28日 [査読無し][通常論文]

受賞

  • 2007年 第4回北海道歯学会賞

共同研究・競争的資金等の研究課題

  • 文部科学省:基盤研究(C)
    研究期間 : 2017年 -2019年 
    代表者 : 長谷部 晃
  • 文部科学省:基盤研究(C)
    研究期間 : 2014年 -2016年 
    代表者 : 長谷部 晃
     
    口腔カンジダ症は、口腔常在性であり加齢にともない検出率が上昇するCandida albicansが主たる要因となることが知られている。しかしながらC. albicansがなぜ口腔内に常在できるのかは依然として不明である。 我々は、C. albicansが口腔内に常在できるのは経口免疫寛容が誘導されていることによるのではないかと考えた。すなわち、C. albicansが食物や唾液とともに経口的に摂取されることにより、腸管などにおいてC. albicansに特異的な免疫抑制性のT細胞(制御性T細胞、Treg)が誘導され、それによりC. albicansが口腔に定着できるのではないかということである。また、加齢によりC. albicansの検出率が上昇するのは、このC. albicans特異的なTregの数、あるいは割合が増加するのではないかと考えた。 我々は、まずC. albicansの経口摂取による特異的な免疫抑制の状態を確認するために、C. albicansをマウスに経口的に摂取させ、その後C. albicansを皮下に接種することで特異的抗体の誘導に及ぼす影響を調べた。用いたのは若いあるいは高齢の野生型(WT)ならびにToll-like receptor 2欠損(TLR2KO)C57BL/6マウスである。その結果、WTならびにTLR2KOマウスで大きな違いはなく、若いマウスよりも高齢のマウスにおいて、C. albicansの経口摂取によりC. albicans特異的IgGが有意に強く誘導された。これは経口摂取が、皮下免疫による抗体誘導に対しては抑制的に作用しないということを示している。今後は糞便中のIgAならびに血清中のIgEについても調べ、さらに腸管におけるTregについても調べ、C. albicansの経口摂取が免疫系に及ぼす影響を確認する。
  • 文部科学省:科学研究費補助金(基盤研究(C))
    研究期間 : 2011年 -2013年 
    代表者 : 長谷部 晃
     
    微生物の培養細胞への混入、とりわけマイコプラズマの混入はしばしば大きな問題となるが、その除去のための抗菌薬の使用は耐性菌の誘導などの問題がある。したがって抗菌薬によらない除菌方法の開発が必要である。 我々は、腫瘍の治療などに利用される光線力学療法を応用し、培養細胞を傷害することなく細胞に混入したマイコプラズマを除去できることを示した。この研究により、培養細胞に影響を与える事なく混入した微生物を除去する新たな道筋が示された。
  • 文部科学省:科学研究費補助金(基盤研究(B))
    研究期間 : 2010年 -2012年 
    代表者 : 柴田 健一郎, 長谷部 晃
     
    Th1応答を誘導するToll-like receptor(TLR)リガンドが抗ガン物質として研究されているが,Th2応答を誘導するTLRリガンドの抗ガン作用はほとんど研究されていない.そこで,本研究では,Th2応答を誘導するTLR2リガンドである口腔マイコプラズマ由来リポペプチドFSL-1が,C57BL/6マウス由来の繊維腫であるQRsP腫瘍細胞のin vivoにおける増殖にどのような影響を及ぼすかを調べた.FSL-1とQRsP由来ガン抗原と一緒に予め免疫した後,QRsP腫瘍細胞を接種した場合には腫瘍の増殖が抑えられ,また,マウスの生存率も増加した.この抗腫瘍活性には,QRsP腫瘍抗原特異的な細胞傷害性T細胞,QRsP腫瘍抗原特異的な抗体産生によるNK細胞のよるADCC,さらに,所属リンパ節における制御性T細胞数の減少による免疫抑制活性の減弱が関与していることが示唆された.しかしながら,FSL-1のみを単独で免疫した場合は,逆に,腫瘍の増殖が促進された.この腫瘍増殖促進活性には所属リンパ節における制御性T細胞数の増加による免疫抑制活性の増強が関与していることが示唆された.また,FSL-1の抗腫瘍活性ならびに腫瘍増殖促進活性はTLR2のノックアウトマウスでは観察されなかった.本研究では,TLR2リガンドであるFSL-1は腫瘍抗原と予め免疫した場合は抗腫瘍活性を,単独で免疫した場...
  • 文部科学省:科学研究費補助金(若手研究(B))
    研究期間 : 2009年 -2010年 
    代表者 : 長谷部 晃
     
    マイコプラズマは細胞壁を欠き、細胞膜リポタンパク質が宿主細胞のToll様受容体(TLR)2で認識される。また、一部のマイコプラズマは宿主細胞への侵入性を有することから、Mycoplasma hominisのリポタンパク質を精製しその性状を調べた。その結果、これまで報告のあった50kDaのアドヘジンとN 末端アミノ酸配列が相同で、分子量が10kDa小さいリポタンパク質の欠損変異体を同定した。このリポタンパク質はマクロファージを活性化するだけでなくTLR2非依存的に宿主細胞への付着に関与するということなどを明らかにした。さらにマイコプラズマがリポタンパク質を介して宿主細胞に影響を与えることから、マイコプラズマが培養細胞に混入した場合の除去方法についても検討した。以上のことは国際的な学術雑誌に投稿準備中である。
  • 文部科学省:科学研究費補助金(基盤研究(B))
    研究期間 : 2007年 -2009年 
    代表者 : 柴田 健一郎, 長谷部 晃
     
    生体は微生物の侵入を感知し,貪食し殺滅する.本研究では,微生物の侵入を感知するセンサーからの細胞内シグナルが,貪食に関わるレセプターからのシグナルで抑制されることを明らかにした.
  • 文部科学省:科学研究費補助金(若手研究(B))
    研究期間 : 2007年 -2008年 
    代表者 : 長谷部 晃
     
    マイコプラズマのリポタンパク質に由来する活性リポペプチドであるFSL-1を用いて、自然免疫において重要な役割を果たすファゴサイトーシスの分子メカニズムについて調べている。2007年度は、FSL-1はマクロファージに取り込まれ、その取り込みはクラスリン依存的であること、ならびにその取り込みはFSL-1の受容体であるTLR2非依存的であること明らかにした。しかしながらFSL-1の取り込みに重要な受容体は不明のままであった。そこで2008年度は、FSL-1の取り込みに重要な受容体を検索し、CD14ならびにCD36が重要であることを明らかにした。これらの詳細なデータは論文にまとめたところであり、国際的な学術雑誌に投稿中である。
  • 文部科学省:科学研究費補助金(基盤研究(C))
    研究期間 : 2007年 -2008年 
    代表者 : 木浦 和人, 柴田 健一郎, 長谷部 晃
     
    微生物由来物質と腫瘍抗原と一緒に免疫してマウスに腫瘍を接種すると、腫瘍の増殖が著しく抑制され、生存率も著しく伸びた。しかしながら、微生物由来物質を単独、FSL-1 を単独で免疫した場合は、腫瘍の増殖が著しく増強され、生存率も著しく低下した。この相反する活性の原因を細胞レベルで明らかにした。
  • 文部科学省:科学研究費補助金(若手研究(B))
    研究期間 : 2002年 -2003年 
    代表者 : 長谷部 晃
     
    Bacteroides forsythus由来のリポタンパク質(BfLP)の生物活性について、以下のことを明らかにした。● BfLPはヒト正常歯肉線維芽細胞(hGF)にIL-6産生を誘導し、単球・マクロファージ系細胞株THP-1にTNF-αの産生を誘導する。また、Lipopolysaccharideの活性を消失させるポリミキシンBはこの活性に影響を与えない。● BfLP刺激により、hGFならびにTHP-1においてNF-κBが経時的に活性化されている。● BfLPのレセプターとして、自然免疫系のレセプターとして重要であるtoll-like receptor (TLR)のひとつであるTLR2が関与している。● BfLPは最終濃度1μg/ml以下の刺激では炎症性サイトカイン産生を誘導するが、それ以上の濃度による刺激では細胞死を誘導する。● BfLPは最終濃度6μg/mlでhGFに100%、歯肉上皮系細胞KBに80%程度細胞死を誘導する。● BfLPは最終濃度6μg/mlで単球・マクロファージ系細胞株HL-60ならびにTHP-1に細胞死を誘導するが、リンパ球形細胞株MOLT-4には細胞死を誘導しない。● 上記の細胞死はアポトーシスを伴い、それぞれcaspase-8の活性化が確認される。● 歯周病患者・健常者それぞれ10名のBfLPに対する抗体価を比較すると、歯周病患者の平均抗体価は健...
  • 文部科学省:科学研究費補助金(奨励研究(A))
    研究期間 : 1998年 -1999年 
    代表者 : 長谷部 晃
     
    〈平成10年度〉ヒト正常歯肉線維芽細胞にInterleukine-6(IL-6)を誘導するMycoplasma salivarium(Ms)由来の物質の性状について新たに得られた知見は以下の通りである。1 Ms由来物質(MsA)はMs細胞内に存在するタンパク性の物質であり、熱処理を行っても活性が30%以上残っている。2 DEAE-sephacelによるイオン交換クロマトグラフィーにより、MsAは、arginine deiminaseとは明らかに異なる物質であるということがわかった。3 さらにCM-sepharose、DEAE-sephacelと、カラムを変えて精製を行った結果、比活性にして30倍以上に達するサンプル(MsA)が得られた。4 MsAのSDS-PAGEを行うと、20.6キロダルトンのメジャーなバンドと2本のかすかなハンド(82.5キロダルトンと40.5キロダルトン)が観察された。5 MaAでTHP-1を刺激したところ、TNF-α、IL-1β、IL-6の産生誘導は見られなかったため、MsAはこれまでに報告されている物質とは異なっている。6 MsAの活性はグラム陰性菌のLPSと異なり、血清の非存在下でも失われることがなかった。〈平成11年度〉ヒト正常歯肉線維芽細胞にIL-6を誘導する物質が、Mycoplasma fermentans(Mf)培養上清中に存在し、その物質...
  • 文部科学省:科学研究費補助金(基盤研究(C))
    研究期間 : 1998年 -1999年 
    代表者 : 柴田 健一郎, 長谷部 晃, 渡邊 継男
     
    Mycoplasma salivarium(Ms)に存在する分子量44kDaのリポタンパク質(LP44)がヒト正常歯肉線維芽細胞(HGF)に対してICAM-1発現誘導活性を示した。Lp44のICAM-1発現誘導活性はproteinase K処理で影響を受けなかったが、lipoprotein lipase処理で消失した。Lp44のN末端アミノ酸配列はCGDPKHPKSFTEWVあった。また、エドマン分解が可能であったことから、システインのアミノ基はフリーであることが示唆された。Lp44の活性発現領域の構造ならびに性状を明らかにするために、Lp44をproteinase Kで処理した後、HPLCによる逆相クロマトグラフィーを行った。活性物質は高い疎水性を有し、赤外吸収スぺクトルにより脂肪酸がエステル結合している物質であることが示唆された。これまで、単球を活性化するリポぺプチドがMycoplasma fermentansから精製され、その構造はS-(2,3-bisacyloxypropyl)-CGN-NDESNISFHEKであると報告されている。また、原核生物のLpはN末端のシステインにリピドが結合していることが知られている。これらのことから、Lp44のN末端リポぺプチドが活性物質であり、その構造はS-(2,3-bisacyloxypropyl)-CGDPKHPKSF-TEWVでは...

教育活動情報

主要な担当授業

  • 基本技法
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学研究科
    キーワード : 実験動物,疾患の動物モデル,病態解析方法の基礎,
  • 基本技法
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : 実験動物,疾患の動物モデル,病態解析方法の基礎,
  • 有害・危険物質の取り扱いと管理
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学研究科
    キーワード : 有害・危険物質,取扱い,管理
  • 有害・危険物質の取り扱いと管理
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : 有害・危険物質,取扱い,管理
  • 口腔感染制御学
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : 微生物、自然免疫、受容体、Toll-like receptor、インフラマソーム
  • 歯学研究概論
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : 歯学研究,基本的研究技法,基礎知識
  • 発表・論文執筆法演習Ⅰ
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : 研究計画,文献検索,研究のまとめ,口頭発表,論文作製
  • 発表・論文執筆法演習Ⅱ
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : 研究計画,文献検索,研究のまとめ,口頭発表,論文作製
  • 発表・論文執筆法演習Ⅲ
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : 研究計画,文献検索,研究のまとめ,口頭発表,論文作製
  • 口腔感染制御学研究
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学研究科
    キーワード : 腸内細菌, 口腔細菌, ウイルス, 免疫, 感染
  • 口腔感染制御学研究
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : 腸内細菌, 口腔細菌, ウイルス, 免疫, 感染
  • 口腔生物学と医学
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学研究科
    キーワード : feeding behavior, vomiting, conditioned taste aversion (CTA), nausea, GLP-1, bacteriology, immunity, lipoprotein, salivary gland, oncogene, oral cancer, orofacial pain, tumor virus, dental materials, cementum, HIV, matrix cell biology
  • 口腔生物学と医学
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : feeding behavior, vomiting, conditioned taste aversion (CTA), nausea, GLP-1, bacteriology, immunity, lipoprotein, salivary gland, oncogene, oral cancer, orofacial pain, tumor virus, dental materials, cementum, HIV, matrix cell biology
  • 分子生物学的解析技法
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学研究科
    キーワード : 分子生物学、PCR
  • 口腔分子免疫学
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : DNAウイルス
  • 口腔分子免疫学研究
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : アデノウイルス,自然免疫
  • 歯学研究概論
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学研究科
    キーワード : 歯学研究,基本的研究技法,基礎知識
  • 歯科生体材料開発研究
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学研究科
    キーワード : 歯科材料,生体材料,生体適合性,ティッシュエンジニアリング,再生医学
  • 歯科生体材料開発研究
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : 歯科材料,生体材料,生体適合性,ティッシュエンジニアリング,再生医学
  • アクティブラーニング科目Ⅳ
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 学士課程
    開講学部 : 歯学部
    キーワード : 科学的思考,問題発見, 自己解決能力
  • 英語演習
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 学士課程
    開講学部 : 全学教育
    キーワード : ライフサイエンス、科学論文
  • 関連臨床医学
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 学士課程
    開講学部 : 歯学部
    キーワード : 関連臨床医学、耳鼻咽喉科学、精神医学、臨床心理学、眼科、皮膚科、産婦人科
  • 関連臨床医学Ⅱ
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 学士課程
    開講学部 : 歯学部
    キーワード : 関連臨床医学Ⅱ、眼科、皮膚科、産婦人科
  • 健康と社会
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 学士課程
    開講学部 : 全学教育
    キーワード : 口腔,血管,リンパ管,炎症,歯周組織,生体防御,常在細菌叢,う蝕(虫歯),歯周病,唾液, 口腔ガン,歯垢バイオフィルム
  • 微生物学・口腔微生物学Ⅰ
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 学士課程
    開講学部 : 歯学部
  • 微生物学・口腔微生物学Ⅱ
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 学士課程
    開講学部 : 歯学部
  • 微生物学・口腔微生物学実習
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 学士課程
    開講学部 : 歯学部
    キーワード : 口腔細菌、グラム染色

大学運営

委員歴

  • 2006年 - 現在   日本細菌学会   北海道支部 幹事   日本細菌学会
  • 2006年 - 現在   日本マイコプラズマ学会   評議員   日本マイコプラズマ学会


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