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井上 晶 (イノウエ アキラ)
| 水産科学研究院 海洋応用生命科学部門 海洋生物工学分野 | 教授 |
研究活動情報
■ 受賞- 2019年, 日本学術振興会, 特別研究員等審査会専門委員（書面担当）の表彰
井上 晶 - 2016年, 北海道, 北海道科学技術奨励賞
井上 晶 - 2009年, 日本水産学会, 日本水産学会論文賞
Comparative study on general properties of alginate lyases from some marine gastropod mollusks
- Enzymatic characterization of a mannuronan C5-epimerase from the subtropical brown alga Cladosiphon okamuranus
Miu Sakagami; Yuki Ohnishi; Yasuhiro Kumaki; Tomoyasu Aizawa; Akira Inoue
Fisheries Science, 2023年09月, ［査読有り］, ［最終著者, 責任著者］
英語, 研究論文（学術雑誌） - An oxidative metabolic pathway of 4-deoxy-L-erythro-5-hexoseulose uronic acid (DEHU) from alginate in an alginate-assimilating bacterium
Ryuji Nishiyama; Takao Ojima; Yuki Ohnishi; Yasuhiro Kumaki; Tomoyasu Aizawa; Akira Inoue
Communications Biology, 4, 1, 1254, Springer Science and Business Media LLC, 2021年11月02日, ［査読有り］, ［最終著者, 責任著者］
英語, 研究論文（学術雑誌）,Abstract Alginate-assimilating bacteria degrade alginate into an unsaturated monosaccharide, which is converted into 4-deoxy-L-erythro -5-hexoseulose uronic acid (DEHU). DEHU is reduced to 2-keto-3-deoxy-D-gluconate by a DEHU-specific reductase using NAD(P)H. This is followed by pyruvate production via the Entner-Doudoroff pathway. Previously, we identified FlRed as a DEHU reductase in an alginate-assimilating bacterium,Flavobacterium sp. strain UMI-01. Here, we showed that FlRed can also catalyze the oxidation of DEHU with NAD+, producing 2-keto-3-deoxy-D-glucarate (KDGR). FlRed showed a predilection for NADH and NAD+ over NADPH and NADP+, respectively, and theK m value for NADH was approximately 2.6-fold less than that for NAD+. Furthermore, we identified two key enzymes, FlDet and FlDeg, for KDGR catabolism. FlDet was identified as an enzyme of the ribonuclease activity regulator A family, which converts KDGR to α-ketoglutaric semialdehyde (α-KGSA). FlDeg, a type II α-KGSA dehydrogenase, generated α-ketoglutaric acid by oxidizing the aldehyde group of α-KGSA using NAD(P)+. Consequently, unlike the conventional DEHU reduction pathway, DEHU can be directly converted to α-ketoglutaric acid without consuming NAD(P)H. Alginate upregulated the expression of not only FlRed and two enzymes of the DEHU-reduction pathway, but also FlDet and FlDeg. These results revealed dual pathways of DEHU metabolism involving reduction or oxidation by FlRed. - Functional identification of the 4-deoxy-L-erythro-5-hexoseulose uronate reductase from a brown alga, Saccharina japonica
Akira Inoue; Takao Ojima
Biochemical and Biophysical Research Communications, 545, 112, 118, Elsevier BV, 2021年03月, ［査読有り］, ［筆頭著者, 責任著者］
研究論文（学術雑誌） - Identification and characterization of cellouronate (β-1,4-linked polyglucuronic acid) lyase from the scallop Mizuhopecten yessoensis
Akira Inoue; Masataka Kudo; Elisa Werner; Takao Ojima
Carbohydrate Polymers, 117306, 117306, Elsevier BV, 2020年11月, ［査読有り］, ［筆頭著者, 責任著者］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Production of a novel dimeric 4-deoxy-L-erythro-5-hexoseulose uronic acid by a PL-17 exolytic alginate lyase from Hydrogenophaga sp. UMI-18.
Joemark Narsico; Akira Inoue; Seiko Oka; Takao Ojima
Biochemical and Biophysical Research Communications, 525, 4, 982, 988, 2020年05月14日, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, Hydrogenopahaga sp. strain UMI-18 is an alginolytic bacterium that can produce poly(3-hydroxybutylate) (PHB) using alginate as its sole carbon source. Genome analysis indicated that this strain harbors both PHB-synthesizing and alginate-assimilating gene clusters. In the present study, we cloned HyAly-I gene that encodes a PL-17 exolytic alginate lyase and investigated its enzymatic properties using recombinant HyAly-I (recHyAly-I) that was produced by Escherichia coli. The recHyAly-I preferably depolymerized poly(β-D-mannuronate) block of alginate in an exolytic manner at an optimal temperature and a pH at 40 °C and pH 6.0, respectively. It released 4-deoxy-L-erythro-5-hexoseulose uronic acid (DEH) from the non-reducing terminus of polymer and oligomer substrates. Interestingly, recHyAly-I was found to produce a novel unsaturated disaccharide, i.e., dimeric DEH (diDEH), along with monomeric DEH. Production of diDEH was prominent in the degradation of trisaccharides. - Isolation and characterization of an adenylate kinase from the lateral muscle of bastard halibut Paralichthys olivaceus
Kenta Arai; Akira Inoue; Takao Ojima
Fisheries Science, 86, 2, 385, 394, Springer Science and Business Media LLC, 2020年03月, ［査読有り］
研究論文（学術雑誌） - Production of poly(3-hydroyxybutylate) by a novel alginolytic bacterium Hydrogenophaga sp. strain UMI-18 using alginate as a sole carbon source
Takahiro Yamaguchi; Joemark Narsico; Takanori Kobayashi; Akira Inoue; Takao Ojima
Journal of Bioscience and Bioengineering, 128, 2, 203, 208, Elsevier BV, 2019年08月, ［査読有り］
研究論文（学術雑誌） - Complementary DNA cloning and functional analysis of lycopene β-cyclase in the brown alga Undaria pinnatifida
Akira Inoue; Toshiyuki Iwayama; Takao Ojima
Fisheries Science, 85, 4, 717, 729, Springer Science and Business Media LLC, 2019年07月, ［査読有り］, ［筆頭著者, 責任著者］
研究論文（学術雑誌） - Functional identification of alginate lyase from the brown alga Saccharina japonica.
Inoue Akira; Ojima Takao
Scientific Reports, 9, 1, 4937, 2019年03月, ［査読有り］, ［筆頭著者, 責任著者］ - Structural basis for controlling the enzymatic properties of polymannuronate preferred alginate lyase FlAlyA from the PL-7 family
Hui-Min Qin; Takuya Miyakawa; Akira Inoue; Ryuji Nishiyama; Akira Nakamura; Atsuko Asano; Takao Ojima; Masaru Tanokura
Chemical Communications, 54, 5, 555, 558, Royal Society of Chemistry (RSC), 2018年01月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Polysaccharide-Degrading Enzymes From Marine Gastropods
Takao Ojima; Mohammad M. Rahman; Yuya Kumagai; Ryuji Nishiyama; Joemark Narsico; Akira Inoue
Methods in Enzymology, 605, 457, 497, Academic Press Inc., 2018年01月01日, ［査読有り］, ［招待有り］
英語, 論文集(書籍)内論文 - Characterization of PL-7 Family Alginate Lyases From Marine Organisms and Their Applications
Akira Inoue
Methods in Enzymology, 605, 499, 524, Academic Press Inc., 2018年01月01日, ［査読有り］, ［招待有り］, ［筆頭著者, 責任著者］
英語, 論文集(書籍)内論文 - Structural basis for controlling the enzymatic properties of polymannuronate preferred alginate lyase FlAlyA from the PL-7 family
Hui-Min Qin; Takuya Miyakawa; Akira Inoue; Ryuji Nishiyama; Akira Nakamura; Atsuko Asano; Takao Ojima; Masaru Tanokura
Chemical Communications, 54, 5, 555, 558, 2018年01月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Laminarinase from Flavobacterium sp. reveals the structural basis of thermostability and substrate specificity
Hui-Min Qin; Takuya Miyakawa; Akira Inoue; Akira Nakamura; Ryuji Nishiyama; Takao Ojima; Masaru Tanokura
Scientific Reports, 7, 1, 11425, 2017年12月, ［査読有り］
研究論文（学術雑誌） - Continuous Saccharification of Laminarin by Immobilized Laminarinase ULam111 Followed by Ethanol Fermentation with a Marine-Derived Yeast
Mitsuya Daisuke; Yamamoto Masashi; Okai Masahiko; Inoue Akira; Suzuki Tomohiro; Ojima Takao; Urano Naoto
Advances in Micobiology, 7, 5, 387, 403, 2017年05月, ［査読有り］ - Structure and Polymannuronate Specificity of a Eukaryotic Member of Polysaccharide Lyase Family 14
Hui-Min Qin; Takuya Miyakawa; Akira Inoue; Ryuji Nishiyama; Akira Nakamura; Atsuko Asano; Yoriko Sawano; Takao Ojima; Masaru Tanokura
JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 292, 6, 2182, 2190, 2017年02月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Identification of 2-keto-3-deoxy-D-Gluconate Kinase and 2-keto-3-deoxy-D-Phosphogluconate Aldolase in an Alginate-Assimilating Bacterium, Flavobacterium sp Strain UMI-01
Ryuji Nishiyama; Akira Inoue; Takao Ojima
MARINE DRUGS, 15, 2, 2017年02月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Crystal structure of laminarinase from Flavobacterium sp. UMI-01 reveals distinct thermostability and substrate specificity from other GH16 family members.
H-M. Qin; T. Miyakawa; A. Inoue; A. Nakamura; T. Ojima; M. Tanokura
Sci. Rep., 7, 11425, 1, 9, 2017年, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - The alginate lyases FlAlyA, FlAlyB, FlAlyC, and FlAlex from Flavobacterium sp UMI-01 have distinct roles in the complete degradation of alginate
Akira Inoue; Ryuji Nishiyama; Takao Ojima
Algal Research, 19, 355, 362, 2016年11月, ［査読有り］, ［筆頭著者, 責任著者］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Distribution of alginate and cellulose and regulatory role of calcium in the cell wall of the brown alga Ectocarpus siliculosus (Ectocarpales, Phaeophyceae)
Makoto Terauchi; Chikako Nagasato; Akira Inoue; Toshiaki Ito; Taizo Motomura
PLANTA, 244, 2, 361, 377, 2016年08月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Discovery of a Novel Alginate Lyase from Nitratiruptor sp SB155-2 Thriving at Deep-sea Hydrothermal Vents and Identification of the Residues Responsible for Its Heat Stability
Akira Inoue; Moe Anraku; Satoshi Nakagawa; Takao Ojima
JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 291, 30, 15551, 15563, 2016年07月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Functional heterologous expression and characterization of mannuronan C5-epimerase from the brown alga Saccharina japonica
Akira Inoue; Aya Satoh; Mio Morishita; Yuko Tokunaga; Takuya Miyakawa; Masaru Tanokura; Takao Ojima
ALGAL RESEARCH-BIOMASS BIOFUELS AND BIOPRODUCTS, 16, 282, 291, 2016年06月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - A Novel Aldo-Keto Reductase, HdRed, from the Pacific Abalone Haliotis discus hannai, Which Reduces Alginate-derived 4-Deoxy-L-erythro-5-hexoseulose Uronic Acid to 2-Keto-3-deoxy-D-gluconate
Shogo Mochizuki; Ryuji Nishiyama; Akira Inoue; Takao Ojima
JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 290, 52, 30962, 30974, 2015年12月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Characterization of an Eukaryotic PL-7 Alginate Lyase in the Marine Red Alga Pyropia yezoensis.
Akira Inoue; Chieco Mashino; Toshiki Uji; Naotsune Saga; Koji Mikami; Takao Ojima
Current Biotechnology, 4, 3, 240, 248, 2015年08月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, BACKGROUND: Alginate lyases belonging to polysaccharide lyase family-7 (PL-7) are the most well studied on their structures and functions among whole alginate lyases. However, all characterized PL-7 alginate lyases are from prokaryotic bacteria cells. Here we report the first identification of eukaryotic PL-7 alginate lyase from marine red alga Pyropia yezoensis. METHODS: The cDNA encoding an alginate lyase PyAly was cloned and was used for the construction of recombinant PyAly (rPyAly) expression system in Escherichia coli. Purified rPyAly was assayed to identify its enzymatic properties. Its expression pattern in P. yessoensis was also investigated. RESULTS: PyAly is likely a secreted protein consisting of an N-terminal signal peptide of 25 residues and a catalytic domain of 216 residues. The amino-acid sequence of the catalytic domain showed 19-29% identities to those of bacterial characterized alginate lyases classified into family PL-7. Recombinant PyAly protein, rPyAly, which was produced with E. coli BL21(DE3) by cold-inducible expression system, drastically decreased the viscosity of alginate solution in the early stage of reaction. The most preferable substrate for rPyAly was the poly(M) of alginate with an optimal temperature and pH at 35oC and 8.0, respectively. After reaction, unsaturated tri- and tetra-saccharides were produced from poly(M) as major end products. These enzymatic properties indicated that PyAly is an endolytic alginate lyase belonging to PL-7. Moreover, we found that the PyAly gene is split into 4 exons with 3 introns. PyAly was also specifically expressed in the gametophytic haplopid stage. CONCLUSION: This study demonstrates that PyAly in marine red alga P. yezoensis is a novel PL-7 alginate lyase with an endolytic manner. PyAly is a gametophyte-specifically expressed protein and its structural gene is composed of four exons and three introns. Thus, PyAly is the first enzymatically characterized eukaryotic PL-7 alginate lyase. - Identification of a 4-Deoxy-L-erythro-5-hexoseulose Uronic Acid Reductase, FlRed, in an Alginolytic Bacterium Flavobacterium sp Strain UMI-01
Akira Inoue; Ryuji Nishiyama; Shogo Mochizuki; Takao Ojima
MARINE DRUGS, 13, 1, 493, 508, 2015年01月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Characterization of an Alginate Lyase, FlAlyA, from Flavobacterium sp Strain UMI-01 and Its Expression in Escherichia coli
Akira Inoue; Kohei Takadono; Ryuji Nishiyama; Kenji Tajima; Takanori Kobayashi; Takao Ojima
MARINE DRUGS, 12, 8, 4693, 4712, 2014年08月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Characterization of a GHF45 cellulase, AkEG21 from the common sea hare Aplysia kurodai
Mohammad M. Rahman; Akira Inoue; Takao Ojima
FRONTIERS IN CHEMISTRY, 2, 2014年, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - A laminaribiose-hydrolyzing enzyme, AkLab, from the common sea hare Aplysia kurodai and its transglycosylation activity
Yuya Kumagai; Takuya Satoh; Akira Inoue; Takao Ojima
COMPARATIVE BIOCHEMISTRY AND PHYSIOLOGY B-BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY, 167, 1, 7, 2014年01月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Characterization of an alpha-glucosidase, HdAgl, from the digestive fluid of Haliotis discus hannai
Takuya Satoh; Akira Inoue; Takao Ojima
COMPARATIVE BIOCHEMISTRY AND PHYSIOLOGY B-BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY, 166, 1, 15, 22, 2013年09月
英語, 研究論文（学術雑誌） - Isolation of novel prototype galectins from the marine ball sponge Cinachyrella sp guided by their modulatory activity on mammalian glutamate-gated ion channels
Takuya Ueda; Yuka Nakamura; Caleb M. Smith; Bryan A. Copits; Akira Inoue; Takao Ojima; Satoko Matsunaga; Geoffrey T. Swanson; Ryuichi Sakai
GLYCOBIOLOGY, 23, 4, 412, 425, 2013年04月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Enzymatic properties and primary structures of two α-amylase isozymes from the Pacific abalone Haliotis discus hannai
Yuya Kumagai; Takuya Satoh; Akira Inoue; Takao Ojima
Comparative Biochemistry and Physiology - B Biochemistry and Molecular Biology, 164, 2, 80, 88, 2013年02月
英語, 研究論文（学術雑誌） - cDNA cloning and bacterial expression of a PL-14 alginate lyase from a herbivorous marine snail Littorina brevicula
Mohammad Matiur Rahman; Ling Wang; Akira Inoue; Takao Ojima
CARBOHYDRATE RESEARCH, 360, 69, 77, 2012年10月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Novel tetrameric galectin from a marine sponge potentiates mammalian glutamate receptor function
Ueda Takuya; Nakamura Yuka; Focia Pamela J; Smith Caleb; Inoue Akira; Ojima Takao; Matsunaga Satoko; Freymann Douglas M; Sakai Ryuichi; Swanson Geoffrey T
ABSTRACTS OF PAPERS OF THE AMERICAN CHEMICAL SOCIETY, 244, 2012年08月19日, ［査読有り］ - Heat-stability and primary structure of the major alginate lyase isozyme LbAly35 from Littorina brevicula
Ling Wang; Mohammad Matiur Rahman; Akira Inoue; Takao Ojima
FISHERIES SCIENCE, 78, 4, 889, 896, 2012年07月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Characterization of a beta-D-mannosidase from a marine gastropod, Aplysia kurodai
Umme Afsari Zahura; Mohammad Matiur Rahman; Akira Inoue; Takao Ojima
COMPARATIVE BIOCHEMISTRY AND PHYSIOLOGY B-BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY, 162, 1-3, 24, 33, 2012年05月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - cDNA cloning of an alginate lyase from a marine gastropod Aplysia kurodai and assessment of catalytically important residues of this enzyme
Mohammad Matiur Rahman; Akira Inoue; Hiroyuki Tanaka; Takao Ojima
BIOCHIMIE, 93, 10, 1720, 1730, 2011年10月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - cDNA cloning and bacterial expression of an endo-beta-1,4-mannanase, AkMan, from Aplysia kurodai
Umme Afsari Zahura; Mohammad Matiur Rahman; Akira Inoue; Hiroyuki Tanaka; Takao Ojima
COMPARATIVE BIOCHEMISTRY AND PHYSIOLOGY B-BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY, 159, 4, 227, 235, 2011年08月
英語, 研究論文（学術雑誌） - Protoplast Preparation from Laminaria japonica with Recombinant Alginate Lyase and Cellulase
Akira Inoue; Chieco Mashino; Teina Kodama; Takao Ojima
MARINE BIOTECHNOLOGY, 13, 2, 256, 263, 2011年04月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Isolation and characterization of two alginate lyase isozymes, AkAly28 and AkAly33, from the common sea hare Aplysia kurodai
Mohammad Matiur Rahman; Akira Inoue; Hiroyuki Tanaka; Takao Ojima
COMPARATIVE BIOCHEMISTRY AND PHYSIOLOGY B-BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY, 157, 4, 317, 325, 2010年12月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - An endo-beta-1,4-mannanase, AkMan, from the common sea hare Aplysia kurodai
Umme Afsari Zahura; Mohammad Matiur Rahman; Akira Inoue; Hiroyuki Tanaka; Takao Ojima
COMPARATIVE BIOCHEMISTRY AND PHYSIOLOGY B-BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY, 157, 1, 137, 143, 2010年09月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Membrane fusion process and assembly of cell wall during cytokinesis in the brown alga, Silvetia babingtonii (Fucales, Phaeophyceae)
Chikako Nagasato; Akira Inoue; Masashi Mizuno; Kazuki Kanazawa; Takao Ojima; Kazuo Okuda; Taizo Motomura
PLANTA, 232, 2, 287, 298, 2010年07月, ［査読有り］
英語 - Comparative study on general properties of alginate lyases from some marine gastropod mollusks
Mami Hata; Yuya Kumagai; Mohammad Matiur Rahman; Satoru Chiba; Hiroyuki Tanaka; Akira Inoue; Takao Ojima
FISHERIES SCIENCE, 75, 3, 755, 763, 2009年05月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Catalytically important amino-acid residues of abalone alginate lyase HdAly assessed by site-directed mutagenesis
Sayo Yamamoto; Takehiko Sahara; Daisuke Sato; Kosei Kawasaki; Satoru Ohgiya; Akira Inoue; Takao Ojima
ENZYME AND MICROBIAL TECHNOLOGY, 43, 6, 396, 402, 2008年11月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Preparation of protoplasts from Laminaria japonica using native and recombinant abalone alginate lyases
Akira Inoue; Mayu Kagaya; Takao Ojima
JOURNAL OF APPLIED PHYCOLOGY, 20, 5, 633, 640, 2008年10月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Preparation of beta-1,3-glucanase from scallop mid-gut gland drips and its use for production of novel heterooligosaccharides
Yuya Kumagai; Akira Inoue; Hiroyuki Tanaka; Takao Ojima
FISHERIES SCIENCE, 74, 5, 1127, 1136, 2008年10月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Isolation and primary structure of a cellulase from the Japanese sea urchin Strongylocentrotus nudus
Yukiko Nishida; Ken-ichi Suzuki; Yuya Kumagai; Hiroyuki Tanaka; Akira Inoue; Takao Ojima
BIOCHIMIE, 89, 8, 1002, 1011, 2007年08月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Isolation and cloning of an endo-beta-1,4-mannanase from Pacific abalone Haliotis discus hannai
Shuuji Ootsuka; Naotsune Saga; Ken-ichi Suzuki; Akira Inoue; Takao Ojima
JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY, 125, 2, 269, 280, 2006年09月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - A novel oligoalginate lyase from abalone, Haliotis discus hannai, that releases disaccharide from alginate polymer in an exolytic manner
Harumasa Suzuki; Ken-ichi Suzuki; Akira Inoue; Takao Ojima
CARBOHYDRATE RESEARCH, 341, 11, 1809, 1819, 2006年08月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - A unique mechanism for the processive movement of single-headed myosin-IX
M Nishikawa; S Nishikawa; A Inoue; AH Iwane; T Yanagida; M Ikebe
BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, 343, 4, 1159, 1164, 2006年05月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Functional importance of Ca2+-deficient N-terminal lobe of molluscan troponin C in troponin regulation
T Doi; A Satoh; H Tanaka; A Inoue; F Yumoto; M Tanokura; Obtsuki, I; K Nishita; T Ojima
ARCHIVES OF BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS, 436, 1, 83, 90, 2005年04月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Human deafness mutation of myosin VI (C442Y) accelerates the ADP dissociation rate
O Sato; HD White; A Inoue; B Belknap; R Ikebe; M Ikebe
JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 279, 28, 28844, 28854, 2004年07月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - N-terminal modification and its effect on the biochemical characteristics of akazara scallop tropomyosins expressed in Escherichia coli
A Inoue; T Ojima; K Nishita
JOURNAL OF BIOCHEMISTRY, 136, 1, 107, 114, 2004年07月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - A one-headed class V myosin molecule develops multiple large (approximate to 32-nm) steps successively
TM Watanabe; H Tanaka; AH Iwane; S Maki-Yonekura; K Homma; A Inoue; R Ikebe; T Yanagida; M Ikebe
PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA, 101, 26, 9630, 9635, 2004年06月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Determination of human myosin III as a motor protein having a protein kinase activity
S Komaba; A Inoue; S Maruta; H Hosoya; M Ikebe
JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 278, 24, 21352, 21360, 2003年06月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Characterization of the motor activity of mammalian myosin VIIA
A Inoue; M Ikebe
JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 278, 7, 5478, 5487, 2003年02月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Motor function of unconventional myosin
M Ikebe; A Inoue; S Nishikawa; K Homma; H Tanaka; AH Iwane; E Katayama; R Ikebe; T Yanagida
MOLECULAR AND CELLULAR ASPECTS OF MUSCLE CONTRACTION, 538, 143, 157, 2003年, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Primary structure of myosin heavy chain from fast skeletal muscle of Chum salmon Oncorhynchus keta
Y Iwamni; T Ojima; A Inoue; K Nishita
COMPARATIVE BIOCHEMISTRY AND PHYSIOLOGY B-BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY, 133, 2, 257, 267, 2002年10月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Myosin IXb is a single-headed minus-end-directed processive motor
A Inoue; J Saito; R Ikebe; M Ikebe
NATURE CELL BIOLOGY, 4, 4, 302, 306, 2002年04月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - DOC-2/DAB2 is the binding partner of myosin VI
A Inoue; O Sato; K Homma; M Ikebe
BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, 292, 2, 300, 307, 2002年03月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Dual regulation of mammalian myosin VI motor function
M Yoshimura; K Homma; J Saito; A Inoue; R Ikebe; M Ikebe
JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 276, 43, 39600, 39607, 2001年10月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Human myosin IX is a single headed processive motor.
Inoue A; Saito J; Nishikawa S; Iwane AH; Yanagida T; Mitsuko Ikebe
Molecular Biology of the Cell, 12, 426, 2001年
英語 - Functional role of Ca2+-binding site IV of scallop troponin C
T Ojima; N Koizumi; K Ueyama; A Inoue; K Nishita
JOURNAL OF BIOCHEMISTRY, 128, 5, 803, 809, 2000年11月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Cloning and sequencing of cDNA for akazara scallop tropomyosin
A Inoue; T Ojima; K Nishita
FISHERIES SCIENCE, 65, 5, 772, 776, 1999年10月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Determination of primary structure of heavy meromyosin region of walleye pollack myosin heavy chain by cDNA cloning
T Ojima; N Kawashima; A Inoue; A Amauchi; M Togashi; S Watabe; K Nishita
FISHERIES SCIENCE, 64, 5, 812, 819, 1998年10月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Cloning and sequence of a cDNA for troponin-T of ezo-giant scallop striated muscle
A Inoue; T Ojima; K Nishita
FISHERIES SCIENCE, 64, 3, 459, 463, 1998年06月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Partial nucleotide sequence of a cDNA encoding C-terminal polymerizable region of akazara scallop tropomyosin
A Inoue; T Ojima; K Nishita
FISHERIES SCIENCE, 64, 1, 164, 165, 1998年02月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Troponin from smooth adductor muscle of Ezo-giant scallop
K Nishita; T Ojima; A Takahashi; A Inoue
JOURNAL OF BIOCHEMISTRY, 121, 3, 419, 424, 1997年03月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Bacterial expression, purification, and characterization of akazara scallop troponin C
T Ojima; M Maita; A Inoue; K Nishita
FISHERIES SCIENCE, 63, 1, 137, 141, 1997年02月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Cloning and sequencing of a cDNA for Akazara scallop troponin T
A Inoue; T Ojima; K Nishita
JOURNAL OF BIOCHEMISTRY, 120, 4, 834, 837, 1996年10月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌）
- DNA分析によるコンブ原産国判別法の開発
清水健志; 井上晶; 八十川大輔; 井口潤, グリーンテクノ情報, 20, 1, 7, 9, 2024年06月
日本語, 記事・総説・解説・論説等（その他） - バキュロウィルスを用いた褐藻カロテノイド生合成関連酵素の機能実証
井上晶; 高谷直己; 細川雅史; 尾島孝男, マリンバイオテクノロジー学会大会講演要旨集, 23rd, 2023年 - 半合成多糖セロウロン酸の海洋生分解性の解明と未利用素材としての可能性
井上晶, 月刊マテリアルステージ, 21, 10, 50, 54, 2022年01月10日, ［招待有り］, ［筆頭著者, 責任著者］
日本語, 記事・総説・解説・論説等（商業誌、新聞、ウェブメディア） - 昆虫細胞を用いた褐藻類β-カロテン水酸化酵素の同定
井上晶; 高谷直己; 細川雅史; 尾島孝男, 日本水産学会大会講演要旨集(CD-ROM), 2022, 2022年 - Alginate-degrading and assimilating enzymes
Takao Ojima; Akira Inoue, NIPPON SUISAN GAKKAISHI, 83, 5, 826, 826, 2017年09月, ［査読有り］
日本語 - Alginate-modifying enzymes
Akira Inoue; Takao Ojima, NIPPON SUISAN GAKKAISHI, 83, 5, 827, 827, 2017年09月, ［査読有り］
日本語 - Flavobacterium sp.UMI‐01のアルギン酸リアーゼとその遺伝子クラスター
井上晶; 高殿晃平; 池田祐輔; 田島健次; 尾島孝男, マリンバイオテクノロジー学会大会講演要旨集, 15th, 64, 2013年06月01日
日本語 - Flavobacterium sp.UMI‐01株の粗酵素を用いたアルギン酸からのα‐ケト酸の作出
村田安興; 井上晶; 田島健次; 尾島孝男, マリンバイオテクノロジー学会大会講演要旨集, 15th, 63, 2013年06月01日
日本語 - Flavobacterium sp.UMI‐01株由来アルギン酸リアーゼとその遺伝子クラスター
高殿晃平; 池田祐輔; 村田安興; RAHMAN M. M; 田島健次; 井上晶; 尾島孝男, 日本水産学会大会講演要旨集, 2013, 102, 2013年03月26日
日本語 - Flavobacterium sp.UMI‐01株由来の新奇アルギン酸リアーゼ
高殿晃平; 村田安興; RAHMAN M.M; 田島健次; 井上晶; 尾島孝男, 日本農芸化学会北海道支部講演会講演要旨, 2012, 41, 2012年11月01日
日本語 - Flavobacterium sp.UMI‐01株由来エンド型アルギン酸リアーゼの性状解析
高殿晃平; 村田安興; 安部秀昭; RAHMAN M. M; 田島健次; 井上晶; 尾島孝男, 日本水産学会大会講演要旨集, 2012, 105, 2012年03月26日
日本語 - P-42 海綿Cinachyrella sp.から得られたiGluR制御活性を示す新規ガレクチンの研究(ポスター発表の部)
上田 拓弥; 酒井 隆一; DM Freymann; PJ Focial; 中村 友香; Smith Caleb; 井上 昌; 尾島 孝男; 松永 智子; GT Swanson, 天然有機化合物討論会講演要旨集, 54, 0, 585, 590, 2012年
Here we report the bioactivity-guided isolation of novel galectins from the marine sponge Cinachyrella sp., collected from Iriomote Island, Japan. The lectin proteins, which we refer to as the Cinachyrella galectins (CchGs), were identified as the active principles in an aqueous sponge extract that modulated the function of mammalian ionotropic glutamate receptors. Aggregation of rabbit erythrocytes by CchGs was competed most effectively by galactosides but not mannose, a profile characteristic of members of the galectin family of oligosaccharide-binding proteins. The lectin activity was remarkably stable, with only a modest loss in hemagglutination after exposure of the protein to 100℃ for 1 h, and showed little sensitivity to calcium concentration. CchG-1 and -2 appeared as 16 and l8kDa in SDS-PAGE, respectively, whereas MALDI-TOF MS indicated broad ion clusters centered at 16,216 and 16,423 respectively. The amino acid sequences of the CchGs were deduced using a combination of Edman degradation and cDNA cloning and revealed that the proteins were distant orthologues of animal prototype galectins and that multiple isolectins comprised the CchGs. The biochemical properties of the CchGs as well as their unexpected activity on mammalian excitatory amino acid receptors suggest that further analysis of these new members of the galectin family will yield further glycobiological and neurophysiological insights., 天然有機化合物討論会実行委員会, 日本語 - 食用コンブの産地判別に関する研究
清水 健志; 加藤 佑基; 加藤 省吾; 井上 晶; 尾島 孝男; 八十川 大輔, 北海道立工業技術センター研究報告, 11, 1, 4, 2010年12月
食用コンブの産地判別技術を開発するため，分析に適したDNA抽出法とミトコンドリアDNA分析の利用について検討を行った。その結果，エゾアワビ由来のアルギン酸リアーゼを利用することで，PCR増幅性が高い，高品質なDNAを安定して取得できる抽出法が開発できた。また，本抽出法は試料の粉砕を必要としない簡易な手法であり，様々な褐藻類に利用可能な技術と考えられた。本抽出法を用いて10種の食用コンブからミトコンドリアDNAを抽出し，NAD5遺伝子を解析した結果，ミツイシコンブ，ナガコンブ，ガッガラコンブ，チヂミコンブ，ガゴメ，トロロコンブの識別が可能であることから，それぞれの生息分布により産地が推定でき，国産コンブと輸入コンブの判別にも利用可能であることが分かった。一方，マコンブ，ホソメコンブ，リシリコンブ，オニコンブは塩基配列にほとんど違いが見られず，今回の結果から，それぞれの産地を判別するにはさらに詳細な検討が必要と考える。, テクノポリス函館技術振興協会, 日本語 - Comparative study on general properties of alginate lyases from some marine gastropod mollusks
畑 舞美; 熊谷 祐也; RAHMAN Mohammad Matiur; 千葉 智; 田中 啓之; 井上 晶; 尾島 孝男, 日本水産學會誌 = Bulletin of the Japanese Society of Scientific Fisheries, 76, 4, 580, 580, 2010年07月15日
日本語 - 海洋好熱細菌Nitratiruptor sp.由来アルギン酸リアーゼの性状解析
井上晶; 安楽萌; 中川聡; 澤辺智雄; 尾島孝男, 日本水産学会大会講演要旨集, 2010, 2010年 - エゾアワビ肝膵臓におけるアルギン酸代謝に関する研究
木本雄太; 熊谷祐也; 澤辺智雄; 田中啓之; 井上晶; 尾島孝男, 日本水産学会大会講演要旨集, 2010, 2010年 - CLONING AND BIOCHEMICAL CHARACTERIZATION OF CELLULASE- AND ALGINATE LYASE-LIKE PROTEINS FROM PORPHYRA YEZOENSIS
A. Inoue; C. Mashino; K. Mikami; N. Saga; T. Ojima, PHYCOLOGIA, 48, 4, 48, 48, 2009年07月
英語, 研究発表ペーパー・要旨（国際会議） - MEMBRANE FUSION DURING CYTOKINESIS OF BROWN ALGAE, FUCUS DISTICHUS AND SILVETIA BABINGTONII (FUCALES, PHAEOPHYCEAE)
C. Nagasato; A. Inoue; T. Ojima; K. Okuda; T. Motomura, PHYCOLOGIA, 48, 4, 89, 89, 2009年07月
英語, 研究発表ペーパー・要旨（国際会議） - 生体成分情報による生物種・産地鑑定とトレーサビリティ
高村巧; 清水健志; 木下康宣; 下野功; 青木央; 加藤省伍; 尾島孝男; 井上晶; 嵯峨直恆; 安井肇; 八十川大輔; 三上貞芳; 長野章; 高木剛; ひばり野由美; 能戸守; 道場登志男; 佐々木武充; 若杉充宏; 須田新輔; 谷口陽一郎; 松田健一; 南條宏; 桑原伸司; 脇裕輝; 鳴海日出人; 若林隆司, 北海道立工業技術センター研究成果発表会・都市エリア産学官連携促進事業成果発表会要旨集, 2008, 2008年 - 生体成分情報による生物種・産地鑑定とトレーサビリティ
高村巧; 清水健志; 木下康宣; 下野功; 青木央; 加藤省伍; 尾島孝男; 井上晶; 嵯峨直恆; 安井肇; 八十川大輔; 三上貞芳; 長野章; 高木剛; やく野由美; 能戸守; 道場登志男; 佐々木武充; 若杉充宏; 脇裕輝; 須田新輔; 松田健一; 南條宏; 桑原伸司; 鳴海日出人; 若林隆司; 佐々木武充, 北海道立工業技術センター研究成果発表会・都市エリア産学官連携促進事業成果発表会要旨集, 2007, 2007年 - Myosin VIIA is a double-headed, plus-directed, and high duty-cycle motor.
A Inoue; R Ikebe; M Ikebe, BIOPHYSICAL JOURNAL, 84, 2, 118A, 118A, 2003年02月
英語, 研究発表ペーパー・要旨（国際会議） - Human myosin III has ATPase and kinase activity
S Komaba; A Inoue; S Maruta; H Hosoya; M Ikebe, BIOPHYSICAL JOURNAL, 84, 2, 118A, 119A, 2003年02月
英語, 研究発表ペーパー・要旨（国際会議） - Role of the IQ motifs on the regulation of motor activities of myosin I beta
A Inoue; M Ikebe, MOLECULAR BIOLOGY OF THE CELL, 12, 293A, 293A, 2001年11月
英語, 研究発表ペーパー・要旨（国際会議） - Mammalian myosin VIIA is a plus-directed fast motor that requires high ATP concentration for its motor activity
A Inoue; M Ikebe, JOURNAL OF GENERAL PHYSIOLOGY, 118, 1, 11A, 11A, 2001年07月
英語, 研究発表ペーパー・要旨（国際会議） - Cloning, expression, and biochemical characterization of rat myosin VII
A Inoue; M Ikebe, MOLECULAR BIOLOGY OF THE CELL, 11, 375A, 375A, 2000年12月
英語, 研究発表ペーパー・要旨（国際会議） - 軟体動物トロポニンTとトロポミオシンの一次構造と相互作用部位
井上 晶; 尾島 孝男; 西田 清義, 日本分子生物学会年会プログラム・講演要旨集, 19, 638, 638, 1996年08月01日
日本語
- Encyclopedia of Marine Biotechnology
Akira Inoue, Degradation and Modification of Alginate by Enzymes in Marine Organisms (Chapter 85)
WILEY, 2020年10月, 9781119143772, ［分担執筆］ - 新技術開発による東日本大震災からの復興・再生 (水産学シリーズ)
公益社団法人日本水産学会; 竹内俊郎; 佐藤 實; 渡部終五; 林孝治; 多田千佳; 中野和典; 荒川久幸; 池田吉用; 和泉充; 潮秀樹; 北澤大輔; 水野英則; 佐藤陽一; 阿部知子; 福西暢尚; 浦野直人; 宮川拓也; 井上晶; 宮下和夫; 鈴木徹; 婁小波
恒星社厚生閣, 2017年03月27日, 4769916019, 140
- Functional identification of brown algal lycopene β-cyclase
Inoue Akira
The 8th International Conference on Algal Biomass, Biofuels and Bioproducts, 2018年06月11日, 英語, ポスター発表
［国際会議］ - cDNA cloning and bacterial expression of an alginate lyase isozyme from Littorina brevicula
RAHMAN Mohammad Matiur; INOUE Akira; TANAKA Hiroyuki; OJIMA Takao
日本水産学会大会講演要旨集, 2011年03月27日, 英語 - Mannan-degrading enzymes from Aplysia kurodai
ZAHURA Umme Afsari; RAHMAN Mohammad Matiur; INOUE Akira; TANAKA Hiroyuki; OJIMA Takao
日本水産学会大会講演要旨集, 2011年03月27日, 英語
- 海洋生物工学特論Ⅰ, 2024年, 修士課程, 水産科学院
- 海洋生物工学特論Ⅱ, 2024年, 修士課程, 水産科学院
- Introduction to Fisheries Sciences Ⅱ（水産科学汎論Ⅱ）, 2024年, 修士課程, 水産科学院
- 大学院共通授業科目（一般科目）：自然科学・応用科学, 2024年, 修士課程, 大学院共通科目
- 細胞生物学, 2024年, 学士課程, 水産学部
- 海洋分子生物学, 2024年, 学士課程, 水産学部
- 環境と人間, 2024年, 学士課程, 全学教育
- 水圏生化学実験, 2024年, 学士課程, 水産学部
- 水産増養殖実習, 2024年, 学士課程, 水産学部
- 卒業研究, 2024年, 学士課程, 水産学部
- 増殖生命科学演習, 2024年, 学士課程, 水産学部
- 水産科学英語Ⅰ, 2024年, 学士課程, 水産学部
- 水産科学英語Ⅱ, 2024年, 学士課程, 水産学部
- 博物館実習, 2024年, 学士課程, 文学部
- 水産生物化学, 2024年, 学士課程, 水産学部
- 基礎生命科学実験, 2024年, 学士課程, 水産学部
■ 共同研究・競争的資金等の研究課題
- 褐藻類の有用多糖類およびカロテノイド類代謝関連酵素の探索と機能実証
科学研究費助成事業
2019年04月01日 - 2024年03月31日
井上 晶
コンブやワカメなどの褐藻類は、食糧としてだけでなく有用成分の供給源としても重要である。特に多糖類やカロテノイド類には他の藻類や陸上植物にみられないものが多く、それらのいくつかはヒトの暮らしの改善にも関わっている。一方、褐藻自身がそれらをどのようにして合成し、利用しているのかについては、不明な点が多い。本研究では、褐藻の有用化合物の代謝機構を解明するために、それに関わる酵素の同定と有用酵素の大量生産法の確立を目的としている。
前年度までに、褐藻由来の酵素の基質となるアルギン酸分解物を細菌の酵素を用いて準備を進めたが、その過程で未知の化合物が検出された。そのため、これを生じる酵素の同定を進め、アルギン酸酸化代謝機構の全容を解明した。この成果は定説とは異なり、アルギン酸分解・代謝時に細胞内で還元力が蓄積されることを初めて実証したものであり、新技術開発への貢献が期待される。
さらに、アルギン酸のマンヌロン酸とグルロン酸の配列を制御する酵素のマンヌロン酸C5-エピメラーゼについても組換え酵素の発現と機能解析を進めた。13種類のアイソザイムの発現系を構築したが、最も組換え酵素の収量が高かったものについて、詳細に酵素性状を解析した。注目すべき点としては、本酵素が比較的高い熱安定性をもつことがあげられ、40℃で1時間加熱後も95%以上の活性が残存していた。
フコイダン分解酵素については、これまでに知見は少ないもののいくつかの細菌から同酵素が発見されている。本研究では、それらと配列相同性をもつ2つの褐藻のタンパク質の発現に成功したが、フコイダン分解活性は検出できなかった。そのため、他生物のフコイダン分解酵素の一次構造情報を得るために、新規細菌のスクリーニングを行い、1種類のフコイダン分解細菌を単離した。そのゲノム解析を行った結果、少なくとも3種類の候補タンパク質が存在することが分かった。
日本学術振興会, 基盤研究(B), 北海道大学, 19H03039 - 生分解性ポリマーPHBを高効率で分解する真菌由来新奇酵素に関する研究
科学研究費助成事業
2020年07月30日 - 2023年03月31日
井上 晶
近年、石油系プラスチックが地球環境や生態系に及ぼす影響が懸念されており、その代替素材として生分解性ポリマーの利用が注目されている。本研究では、それらのうちバイオマスが原料となるポリヒドロキシ酪酸（PHB）に着目した。先に、申請者は海砂からPHB分解能をもつ新しい真菌を単離した。同菌の培養液上清にはPHB分解酵素活性が検出されたため、その酵素の同定と性状解析を目的として研究を進めた。さらに、同酵素の遺伝子を用いて組換え酵素の大量発現システムの構築に取り組んだ。
PHBを含む培養液で本菌を培養すると、その上清中には2つの主要タンパク質（約35 kDaと40 kDa）がSDS-ポリアクリルアミドゲル（PAGE）上で検出された。これらのタンパク質を泳動前に加熱処理を行わなかった場合には、同じSDS-PAGE条件下では検出されず、約110 kDaのタンパク質が出現した。そのため、これらのタンパク質はSDSが存在していても複合体を形成できる可能性が示唆された。加熱処理後の各タンパク質について、N末端配列を調べた結果、それぞれ7アミノ酸が決定されたが、互いに一致しない配列であった。これらの実験と並行して、本菌からmRNAを抽出し、次世代シーケンサーを用いてトランスクリプトームデータベースを構築した。各N末端配列を照合した結果、それぞれ完全に一致するアミノ酸配列をコードするタンパク質の遺伝子が一つずつ見出された。次に、各cDNAのクローニングを行いアミノ酸配列を決定した結果、いずれもN末端側に分泌シグナルと予測される配列が存在し、PHB分解に必須と考えられる触媒残基も保存されていた。これらについて、昆虫細胞分泌発現系を構築し、組換えタンパク質を発現した結果、約40 kDaのタンパク質だけがPHBを分解できることが分かった。
日本学術振興会, 挑戦的研究(萌芽), 北海道大学, 20K21324 - 褐藻類にみられる有用物質の代謝関連酵素の同定と高度変換技術の開発
科学研究費助成事業
2016年04月01日 - 2020年03月31日
井上 晶; 尾島 孝男
褐藻は、他の生物にはほとんど見られないユニークな多糖類やカロテノイド類を含む。それらの成分のいくつかは、人類にとって有用な成分であることが知られており、注目されている。しかしながら、褐藻がこれらの成分をどのような酵素を利用して生合成しているのかについては、ゲノムや遺伝子解析から部分的に推定されているにすぎなかった。本研究では、多糖類であるアルギン酸の配列決定に関わるマンヌロン酸C5-エピメラーゼや遺伝子レベルではその存在が見出されなかった褐藻のアルギン酸分解酵素の機能をタンパク質レベルで解明した。また、褐藻のβ-カロテン生合成を担う酵素についてもリコペン合成大腸菌を作出し、その機能を実証した。
日本学術振興会, 基盤研究(B), 北海道大学, 16H04977 - アワビの褐藻食性を支える新しい糖質代謝系
科学研究費助成事業
2016年04月01日 - 2019年03月31日
尾島 孝男; 井上 晶
アワビなどの藻食性腹足類が、摂餌した褐藻に含まれるアルギン酸（ポリウロン酸）を、どのような糖質代謝系を用いて炭素栄養源として利用しているのかは長年不明であった。本研究では、アワビのアルギン酸分解酵素の作用によりアルギン酸から生じた不飽和ウロン酸単糖（DEH）が、DEH還元酵素（HdRed）によりケトデオキシグルコン酸（KDG）に還元されること、さらにKDGは特異的アルドラーゼHdAldにより最終的にピルビン酸とグリセルアルデヒドに分解されることを明らかにした。これらはアセチルCoAとなってTCA回路に導入されると考えられる。このような代謝系は他の藻食性腹足類にも存在すると考えられた。
日本学術振興会, 基盤研究(C), 北海道大学, 16K07864 - ATPを分解しないミオシンの機能と存在意義の解明
科学研究費助成事業
2014年04月01日 - 2017年03月31日
井上 晶; 尾島 孝男
褐藻類マコンブのプロトプラスト細胞に見出されたタンパク質であるSjMLPの一次構造は、他種ミオシンと高い相同性を示すが、コンバーター領域以後が欠損している特徴をもつ。SjMLPは、ATPの有無に関わらずアクチンと結合したが、ATPが存在する場合にはアクチンを束化した。また、SjMLPはプロトプラストに特異的に発現し、プロトプラスト化処理前の藻体には、SjMLPのC末端部が伸長した典型的なミオシン構造をもつタンパク質が発現することが示唆された。自然界でマコンブが生息する環境は、種々の要因により浸透圧が変動するが、SjMLPは細胞強度を高めて、そのような変化に適応するために存在すると考えられた。
日本学術振興会, 挑戦的萌芽研究, 北海道大学, 26660166 - アワビの海藻多糖代謝機構の解明
科学研究費助成事業
2007年 - 2010年
尾島 孝男; 井上 晶; 田中 啓之; 澤辺 智雄
アワビやアメフラシなどの食藻性腹足類は、アルギン酸やラミラナン、マンナン、キシラン、セルロースなどの海藻多糖を特異的に分解する酵素をもつ。これらの酵素によって分解された海藻多糖は、腹足類の解糖系やTCA回路により代謝される。本研究では、腹足類の海藻多糖代謝機構に関する理解を深めるために、消化液に含まれる一連の多糖代謝系酵素、特にアルギン酸、ラミナラン、マンナンの分解に関連する酵素の性状を解析した。
日本学術振興会, 基盤研究(B), 北海道大学, 19380117 - レバーアーム構造をもたない褐藻類ミオシン様タンパク質の機能解析
科学研究費助成事業
2008年 - 2009年
井上 晶
有用大型褐藻類であるマコンブからcDNAクローニング法により得られた634アミノ酸から構成されるミオシン様タンパク質(以下LjMLPと称する)の昆虫細胞発現系を構築し、その機能について調べた。その結果、LjMLPはマコンブ カルモジュリンと共発現した場合には、アクチン非存在下、25℃では0.26 1/secのMg-ATPase活性を示し、その活性はアクチンにより増大し、40μMアクチン存在下では0.68 1/secで最大となった。さらに、invitro motility assayにより、LjMLPは0.03μm/secの速度でアクチンの滑り運動を示した。また、LjMLP遺伝子の構造解析によりLjMLPの翻訳領域は3つのイントロンで分断された4つのイントロンから構成されることが分かった。様々な時期に採取した藻体における発現パターンについてRT-PCR法で調べた結果、LjMLPは採取時期に依存せずに藻体内で発現していることが示唆された。
日本学術振興会, 若手研究(B), 北海道大学, 20780150 - 海洋無脊椎動物海藻多糖分解酵素の昆虫細胞系による発現生産
科学研究費助成事業
2005年 - 2006年
井上 晶
本研究では、申請者らのグループによりクローン化されたエゾアワビ・アルギン酸リアーゼ(HdAly)および同セルラーゼ(HdEG66)をコードするcDNAを用いて、組み換えバキュロウィルスを調製し、昆虫細胞Sf9に感染後、組み換え酵素を分泌発現させた。精製組み換え酵素は、SDS-PAGE上で、ほぼ単一のバンドとして検出された。組み換えHdAlyの性状解析を行った結果、至適温度および同pHは、天然のHdAlyと同等であったが、熱安定性は天然のものと比べて約5℃低かった。これは、組み換えHdAlyの糖鎖修飾が天然のものと異なっているためと考えられた。また、組み換えHdEG66の性状を調べた結果、比活性は天然のものとほぼ同じ値をもつことが明らかになり、至適温度、同pH、および熱安定性も天然のものと同等であった。
組み換え酵素およびセルラーゼオノズカを用いて、マコンブのプロトプラスト化能を検討した結果、組み換えHdAly 150 U/mlとセルラーゼオノズカ 5 U/mlを加えて藻体を人工海水中で3時間、17℃で処理したときにプロトプラスト作出能が最大(2x10^7 cells/g fresh weight)となった。一方、セルラーゼオノズカを同活性の組み換えHdEG66に置換した場合には、プロトプラストは観察されなかった。組み換えHdEG66を最大100 U/mlとなるように加えた場合でも同様であった。これらの結果は、組み換えHdAlyはセルラーゼオノズカと混合使用することにより、マコンブからプロトプラストの調製は可能であるが、組み換えHdEG66はプロトプラストの調製には適さないことを示唆している。また、上記のプロトプラスト作出条件は、ワカメおよびチガイソにも適用可能であったことから、本法は褐藻類のプロトプラスト調製において汎用性が高いと考えられた。
日本学術振興会, 若手研究(B), 北海道大学, 17780164
- アルギン酸の分解方法
特許権, 井上 晶; 中川 聡, 国立大学法人北海道大学
JP2011056835, 2011年03月22日
WO2011-118582, 2011年09月29日
201303080291547909
