研究者データベース

樋田 京子(ヒダ キヨウコ)
歯学研究院 口腔医学部門 口腔病態学分野
教授

基本情報

所属

  • 歯学研究院 口腔医学部門 口腔病態学分野

職名

  • 教授

学位

  • 歯学博士(北海道大学)

ホームページURL

J-Global ID

研究キーワード

  • 腫瘍学   血管新生   細胞生物学   angiogenesis   Cell Biology   Oncology   

研究分野

  • ライフサイエンス / 外科系歯学
  • ライフサイエンス / 実験病理学
  • ライフサイエンス / 病態医化学

職歴

  • 2018年05月 - 現在 北海道大学大学院歯学研究院 口腔病態学分野血管生物分子病理学教室 教授
  • 2014年04月 - 2018年04月 北海道大学遺伝子病制御研究所 フロンティア研究ユニット 血管生物学研究室 特任准教授
  • 2009年04月 - 2014年03月 北海道大学大学院歯学研究科口腔病態学講座血管生物学教室・特任准教授
  • 2007年04月 - 2009年03月 北海道大学大学院歯学研究科口腔病態学講座口腔病理病態学・助教
  • 2005年04月 - 2007年03月 北海道大学大学院歯学研究科口腔病態学講座・助手
  • 2005年 - 2007年 Research Associate
  • 2004年01月 - 2005年03月 ハーバード大医学部小児病院 Vascular Research Program・助手
  • 2004年 - 2005年 Research Associate
  • 2001年07月 - 2003年12月 ハーバード大医学部小児病院Vascular Research Program・助手
  • 2001年 - 2003年 Researcher
  • 2000年09月 - 2001年01月 北海道大学歯学部第二口腔外科・医員
  • 2000年 - 2001年 Medical Staff
  • 1998年04月 - 2000年03月 日本学術振興会特別研究員 日本学術振興会特別研究員(PD)
  • 1998年 - 2000年 Postdoctoral Fellowships of Japan Society for the Promotion of Science
  • 1994年04月 - 1995年03月 札幌鉄道病院口腔外科・医師
  • 1994年 - 1995年 Medical Staff
  • 1992年07月 - 1994年03月 北海道大学歯学部第二口腔外科・医員
  • 1992年 - 1994年 Medical Staff

学歴

  • 1995年04月 - 1998年03月   北海道大学   大学院歯学研究科
  •         - 1998年   北海道大学
  • 1986年04月 - 1992年03月   北海道大学   歯学部   歯学科
  •         - 1992年   北海道大学

所属学協会

  • 日本分子生物学会   日本女性科学者の会   日本がん転移学会   日本細胞生物学会   日本歯科基礎医学会   日本口腔外科学会   日本口腔科学会   日本癌学会   アメリカ癌学会   日本血管生物医学会   日本病理学会   Japanese Association of PathologyJapanese association of Pathology   Japaneses association of cancer researchJapanese association of Oral maxillofacial surgery   American Association of cancer research   

研究活動情報

論文

  • Chisaho Torii, Nako Maishi, Taisuke Kawamoto, Masahiro Morimoto, Kosuke Akiyama, Yusuke Yoshioka, Takashi Minami, Takuya Tsumita, Mohammad Towfik Alam, Takahiro Ochiya, Yasuhiro Hida, Kyoko Hida
    Scientific Reports 11 1 2021年12月 [査読有り]
     
    AbstractTumor endothelial cells (TECs) reportedly exhibit altered phenotypes. We have demonstrated that TECs acquire drug resistance with the upregulation of P-glycoprotein (P-gp, ABCB1), contrary to traditional assumptions. Furthermore, P-gp expression was higher in TECs of highly metastatic tumors than in those of low metastatic tumors. However, the detailed mechanism of differential P-gp expression in TECs remains unclear. miRNA was identified in highly metastatic tumor extracellular vesicles (EVs) and the roles of miRNA in endothelial cell resistance were analyzed in vitro and in vivo. In the present study, we found that treatment of highly metastatic tumor-conditioned medium induced resistance to 5-fluorouracil (5-FU) with interleukin-6 (IL-6) upregulation in endothelial cells (ECs). Among the soluble factors secreted from highly metastatic tumors, we focused on EVs and determined that miR-1246 was contained at a higher level in highly metastatic tumor EVs than in low metastatic tumor EVs. Furthermore, miR-1246 was transported via the EVs into ECs and induced IL-6 expression. Upregulated IL-6 induced resistance to 5-FU with STAT3 and Akt activation in ECs in an autocrine manner. These results suggested that highly metastatic tumors induce drug resistance in ECs by transporting miR-1246 through EVs.
  • Keine Nishiyama, Kazuki Takahashi, Mao Fukuyama, Motohiro Kasuya, Ayuko Imai, Takumi Usukura, Nako Maishi, Masatoshi Maeki, Akihiko Ishida, Hirofumi Tani, Kyoko Hida, Koji Shigemura, Akihide Hibara, Manabu Tokeshi
    Biosensors and Bioelectronics 190 113414 - 113414 2021年10月 [査読有り]
  • Misa Yanagiya, Randa I. H. Dawood, Nako Maishi, Yasuhiro Hida, Chisaho Torii, Dorcas A. Annan, Hiroshi Kikuchi, Aya Yanagawa Matsuda, Tetsuya Kitamura, Yoichi Ohiro, Masanobu Shindoh, Shinya Tanaka, Yoshimasa Kitagawa, Kyoko Hida
    Pathology International 71 6 383 - 391 2021年06月 [査読有り]
  • Ryu Hiradate, Ikramy A. Khalil, Aya Matsuda, Mika Sasaki, Kyoko Hida, Hideyoshi Harashima
    Journal of Controlled Release 329 665 - 675 2021年01月 [査読有り]
  • Inhibition of stromal biglycan promotes normalization of the tumor microenvironment and enhances chemotherapeutic efficacy
    Li C, Maishi N, Annan DA, Young MF, Morimoto H, Morimoto M, Nam JM, Hida Y, Hida K
    Breast Cancer Res 23 51 2021年 [査読有り][通常論文]
  • Biglycan, tumor endothelial cell secreting proteoglycan, as possible biomarker for lung cancer,
    Morimoto H, Hida Y, Maishi N, Nishihara H, Hatanaka Y, Li C, Matsuno Y, Nakamura T, Hirano S, Hida K
    2021年 [査読有り]
  • Hiroshi Kikuchi, Nako Maishi, Dorcas A Annan, Mohammad Towfik Alam, Randa Ibrahim Hassan Dawood, Masumi Sato, Masahiro Morimoto, Ryo Takeda, Keita Ishizuka, Ryuji Matsumoto, Tomoshige Akino, Kunihiko Tsuchiya, Takashige Abe, Takahiro Osawa, Naoto Miyajima, Satoru Maruyama, Toru Harabayashi, Manabu Azuma, Katsushige Yamashiro, Kaname Ameda, Akira Kashiwagi, Yoshihiro Matsuno, Yasuhiro Hida, Nobuo Shinohara, Kyoko Hida
    Cancer research 80 14 2996 - 3008 2020年07月15日 [査読有り][通常論文]
     
    Tumor endothelial cells (TEC) lining tumor blood vessels actively contribute to tumor progression and metastasis. In addition to tumor cells, TEC may develop drug resistance during cancer treatment, allowing the tumor cells to survive chemotherapy and metastasize. We previously reported that TECs resist paclitaxel treatment via upregulation of ABCB1. However, whether TEC phenotypes are altered by anticancer drugs remains to be clarified. Here, we show that ABCB1 expression increases after chemotherapy in urothelial carcinoma cases. The ratio of ABCB1-positive TEC before and after first-line chemotherapy in urothelial carcinoma tissues (n = 66) was analyzed by ABCB1 and CD31 immunostaining. In 42 cases (64%), this ratio increased after first-line chemotherapy. Chemotherapy elevated ABCB1 expression in endothelial cells by increasing tumor IL8 secretion. In clinical cases, ABCB1 expression in TEC correlated with IL8 expression in tumor cells after first-line chemotherapy, leading to poor prognosis. In vivo, the ABCB1 inhibitor combined with paclitaxel reduced tumor growth and metastasis compared with paclitaxel alone. Chemotherapy is suggested to cause inflammatory changes in tumors, inducing ABCB1 expression in TEC and conferring drug resistance. Overall, these findings indicate that TEC can survive during chemotherapy and provide a gateway for cancer metastasis. Targeting ABCB1 in TEC represents a novel strategy to overcome cancer drug resistance. SIGNIFICANCE: These findings show that inhibition of ABCB1 in tumor endothelial cells may improve clinical outcome, where ABCB1 expression contributes to drug resistance and metastasis following first-line chemotherapy.
  • Dorcas Akuba-Muhyia Annan, Hiroshi Kikuchi, Nako Maishi, Yasuhiro Hida, Kyoko Hida
    International journal of molecular sciences 21 9 2020年05月03日 [査読有り][通常論文]
     
    Going from bench to bedside is a simplified description of translational research, with the ultimate goal being to improve the health status of mankind. Tumor endothelial cells (TECs) perform angiogenesis to support the growth, establishment, and dissemination of tumors to distant organs. TECs have various features that distinguish them from normal endothelial cells, which include alterations in gene expression patterns, higher angiogenic and metabolic activities, and drug resistance tendencies. The special characteristics of TECs enhance the vulnerability of tumor blood vessels toward antiangiogenic therapeutic strategies. Therefore, apart from being a viable therapeutic target, TECs would act as a better mediator between the bench (i.e., angiogenesis research) and the bedside (i.e., clinical application of drugs discovered through research). Exploitation of TEC characteristics could reveal unidentified strategies of enhancing and monitoring antiangiogenic therapy in the treatment of cancer, which are discussed in this review.
  • Kyoko Hida, Nako Maishi, Yasuhiro Hida
    Cancer Drug Delivery Systems Based on the Tumor Microenvironment 41 - 56 2020年01月01日 [査読有り][通常論文]
     
    © Springer Japan KK, part of Springer Nature 2019. Tumor growth and metastasis are dependent on angiogenesis, which is the formation of new blood vessels. The newly formed blood vessels around the tumor supply oxygen and nutrients to the tumor, supporting its progression. Moreover, these blood vessels also serve as channels through which tumor cells metastasize to distant organs. Tumor blood vessels, and especially the endothelial cells lining tumor blood vessels [tumor endothelial cells (TECs)], are important targets in cancer therapy. Since newly formed tumor blood vessels originate from pre-existing normal vessels, tumor blood vessels and TECs traditionally have been considered the same as normal vasculature. Tumor blood vessels, however, have a distinctively abnormal phenotype, including morphological alterations. Recently, it has been revealed that TECs constitute a heterogeneous population, exhibiting characteristics induced largely by tumor microenvironmental factors. Furthermore, TECs induce cancer progression through metastasis passively but also actively. This chapter will review the mechanisms underlying tumor angiogenesis and discuss the biology of TECs, offering new perspectives on treatment strategies that can target tumor blood vessels from a personalized medicine perspective.
  • TNF-α enhances TGF-β-induced endothelial-to-mesenchymal transition via TGF-β signal augmentation,
    Yoshimatsu, Yasuhiro, Wakabayashi, Ikumi, Kimuro, Shiori, Takahashi, Naoya, Takahashi, Kazuki, Kobayashi, Miho, Maishi, Nako, Inoue, Katarzyna, Hida, Kyoko, Miyazono, Kohei, Watabe, Tetsuro
    Cancer Science 111 7 2385 - 2399 2020年 [査読有り][通常論文]
  • Dorcas A Annan, Nako Maishi, Tomoyoshi Soga, Randa Dawood, Cong Li, Hiroshi Kikuchi, Takayuki Hojo, Masahiro Morimoto, Tetsuya Kitamura, Mohammad Towfik Alam, Kazuyuki Minowa, Nobuo Shinohara, Jin-Min Nam, Yasuhiro Hida, Kyoko Hida
    Cell communication and signaling : CCS 17 1 169 - 169 2019年12月17日 [査読有り][通常論文]
     
    BACKGROUND: Tumor endothelial cells (TECs) perform tumor angiogenesis, which is essential for tumor growth and metastasis. Tumor cells produce large amounts of lactic acid from glycolysis; however, the mechanism underlying the survival of TECs to enable tumor angiogenesis under high lactic acid conditions in tumors remains poorly understood. METHODOLOGY: The metabolomes of TECs and normal endothelial cells (NECs) were analyzed by capillary electrophoresis time-of-flight mass spectrometry. The expressions of pH regulators in TECs and NECs were determined by quantitative reverse transcription-PCR. Cell proliferation was measured by the MTS assay. Western blotting and ELISA were used to validate monocarboxylate transporter 1 and carbonic anhydrase 2 (CAII) protein expression within the cells, respectively. Human tumor xenograft models were used to access the effect of CA inhibition on tumor angiogenesis. Immunohistochemical staining was used to observe CAII expression, quantify tumor microvasculature, microvessel pericyte coverage, and hypoxia. RESULTS: The present study shows that, unlike NECs, TECs proliferate in lactic acidic. TECs showed an upregulated CAII expression both in vitro and in vivo. CAII knockdown decreased TEC survival under lactic acidosis and nutrient-replete conditions. Vascular endothelial growth factor A and vascular endothelial growth factor receptor signaling induced CAII expression in NECs. CAII inhibition with acetazolamide minimally reduced tumor angiogenesis in vivo. However, matured blood vessel number increased after acetazolamide treatment, similar to bevacizumab treatment. Additionally, acetazolamide-treated mice showed decreased lung metastasis. CONCLUSION: These findings suggest that due to their effect on blood vessel maturity, pH regulators like CAII are promising targets of antiangiogenic therapy. Video Abstract.
  • Nako Maishi, Hiroshi Kikuchi, Masumi Sato, Hiroko Nagao-Kitamoto, Dorcas A Annan, Shogo Baba, Takayuki Hojo, Misa Yanagiya, Yusuke Ohba, Genichiro Ishii, Kenkichi Masutomi, Nobuo Shinohara, Yasuhiro Hida, Kyoko Hida
    International journal of molecular sciences 20 18 4595  2019年09月17日 [査読有り][通常論文]
     
    Tumor angiogenesis research and antiangiogenic drug development make use of cultured endothelial cells (ECs) including the human microvascular ECs among others. However, it has been reported that tumor ECs (TECs) are different from normal ECs (NECs). To functionally validate antiangiogenic drugs, cultured TECs are indispensable tools, but are not commercially available. Primary human TECs are available only in small quantities from surgical specimens and have a short life span in vitro due to their cellular senescence. We established immortalized human TECs (h-imTECs) and their normal counterparts (h-imNECs) by infection with lentivirus producing simian virus 40 large T antigen and human telomerase reverse transcriptase to overcome the replication barriers. These ECs exhibited an extended life span and retained their characteristic endothelial morphology, expression of endothelial marker, and ability of tube formation. Furthermore, h-imTECs showed their specific characteristics as TECs, such as increased proliferation and upregulation of TEC markers. Treatment with bevacizumab, an antiangiogenic drug, dramatically decreased h-imTEC survival, whereas the same treatment failed to alter immortalized NEC survival. Hence, these h-imTECs could be a valuable tool for drug screening to develop novel therapeutic agents specific to TECs or functional biological assays in tumor angiogenesis research.
  • 尿路上皮癌における抗癌剤治療後の腫瘍血管ABCB1発現亢進(Increased ABCB1 expression in tumor blood vessels of urothelial carcinoma after chemotherapy)
    菊地 央, 間石 奈湖, 森本 真弘, 森本 浩史, 土屋 邦彦, 安部 崇重, 樋田 泰浩, 原林 透, 松野 吉宏, 篠原 信雄, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 78回 P - 1267 2019年09月 [査読有り][通常論文]
  • CAIIは腫瘍血管内皮細胞の増殖に重要である(Carbonic anhydrase 2(CAII) is essential for tumor endothelial cell proliferation)
    間石 奈湖, Annan Dorcas A., 曽我 朋義, ダウィード・ランダ, Li Cong, 菊地 央, 北條 敬之, 森本 真弘, 北村 哲也, アラン・モハメド, 篠原 信雄, 樋田 泰浩, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 78回 E - 2101 2019年09月 [査読有り][通常論文]
  • 間質biglycanは腫瘍血管新生を亢進し、腫瘍免疫応答を強化する(Stromal biglycan promotes tumor angiogenesis and potentiates tumor immune responses)
    Li Cong, 間石 奈湖, Annan Dorcas A., 樋田 泰浩, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 78回 P - 2247 2019年09月 [査読有り][通常論文]
  • Akatsu Y, Takahashi N, Yoshimatsu Y, Kimuro S, Muramatsu T, Katsura A, Maishi N, Suzuki HI, Inazawa J, Hida K, Miyazono K, Watabe T
    Mol Oncol. 13 8 1706 - 1724 2019年08月 [査読有り][通常論文]
  • Role of dimerized C16orf74 in aggressive pancreatic cancer: A novel therapeutic target
    Toshihiro Kushibiki, Toru Nakamura, Masumi Tsuda, Takahiro Tsuchikawa, Koji Hontani, Kazuho Inoko, Mizuna Takahashi, Toshimichi Asano, Keisuke Okamura, Soichi Murakami, Yo Kurashima, Yuma Ebihara, Takehiro Noji, Yoshitsugu Nakanishi, Kimitaka Tanaka, Nako Maishi, Katsunori Sasaki, Woong-Ryeon Park, Toshiaki Shichinohe, Kyoko Hida, Shinya Tanaka, Satoshi Hirano
    Mol Cancer Ther 19 1 187 - 198 2019年 [査読有り][通常論文]
  • Two modes of toxicity of lipid nanoparticles containing a pH-sensitive cationic lipid on human A375 and A375-SM melanoma cell lines,
    樋田 京子
    BPB Reports 2 48 - 55 2019年 [査読有り][通常論文]
  • 高転移性腫瘍由来エクソソームmiRNAの血管内皮の形質変化による転移促進メカニズムの解明(High metastatic tumor exosome-miRNA promotes metastasis via alteration of endothelial cells)
    森本 真弘, 間石 奈湖, 樋田 泰浩, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 77回 999 - 999 2018年09月 [査読有り][通常論文]
  • 尿路上皮癌における抗癌剤治療後の腫瘍血管ABCB1発現亢進(Increased ABCB1 expression in tumor blood vessels of urothelial carcinoma after chemotherapy)
    菊地 央, 間石 奈湖, 土屋 邦彦, 安部 崇重, 樋田 泰浩, 原林 透, 松野 吉宏, 篠原 信雄, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 77回 1576 - 1576 2018年09月 [査読有り][通常論文]
  • 化学療法誘発性IL-8による腫瘍血管におけるMDR1/ABCB1アップレギュレーション(MDR1/ABCB1 upregulation in tumor blood vessels by chemotherapy-induced IL-8)
    間石 奈湖, 菊地 央, 安部 崇重, 丸山 覚, 原林 透, 飴田 要, 松野 吉宏, 樋田 泰浩, 篠原 信雄, 樋田 京子
    日本病理学会会誌 107 1 321 - 321 2018年04月 [査読有り][通常論文]
  • 腫瘍内皮細胞におけるglutamine代謝(Glutamine Metabolism in Tumor Endothelial Cells)
    Annan Dorcas A., 間石 奈湖, 曽我 朋義, Dawood Randa, 樋田 泰浩, 樋田 京子
    日本病理学会会誌 107 1 342 - 343 2018年04月 [査読有り][通常論文]
  • Contribution of Tumor Endothelial Cells in Cancer Progression
    樋田 京子
    Int J Mol Sci 19 5 1272  2018年 [査読有り][通常論文]
  • Maishi Nako, Kikuchi Hiroshi, Morimoto Hirofumi, Tsuchiya Kunihiko, Abe Takashige, Hida Yasuhiro, Harabayashi Toru, Matsuno Yoshihiro, Shinohara Nobuo, Hida Kyoko
    CANCER SCIENCE 109 873  2018年01月 [査読有り][通常論文]
  • Kyoko Hida, Nako Maishi, Kosuke Akiyama, Hitomi Ohmura-Kakutani, Chisaho Torii, Noritaka Ohga, Takahiro Osawa, Hiroshi Kikuchi, Hirofumi Morimoto, Masahiro Morimoto, Masanobu Shindoh, Nobuo Shinohara, Yasuhiro Hida
    Cancer science 108 11 2195 - 2203 2017年11月 [査読有り][通常論文]
     
    Tumor blood vessels play an important role in tumor progression and metastasis. We previously reported that tumor endothelial cells (TEC) exhibit several altered phenotypes compared with normal endothelial cells (NEC). For example, TEC have chromosomal abnormalities and are resistant to several anticancer drugs. Furthermore, TEC contain stem cell-like populations with high aldehyde dehydrogenase (ALDH) activity (ALDHhigh TEC). ALDHhigh TEC have proangiogenic properties compared with ALDHlow TEC. However, the association between ALDHhigh TEC and drug resistance remains unclear. In the present study, we found that ALDH mRNA expression and activity were higher in both human and mouse TEC than in NEC. Human NEC:human microvascular endothelial cells (HMVEC) were treated with tumor-conditioned medium (tumor CM). The ALDHhigh population increased along with upregulation of stem-related genes such as multidrug resistance 1, CD90, ALP, and Oct-4. Tumor CM also induced sphere-forming ability in HMVEC. Platelet-derived growth factor (PDGF)-A in tumor CM was shown to induce ALDH expression in HMVEC. Finally, ALDHhigh TEC were resistant to fluorouracil (5-FU) in vitro and in vivo. ALDHhigh TEC showed a higher grade of aneuploidy compared with that in ALDHlow TEC. These results suggested that tumor-secreting factor increases ALDHhigh TEC populations that are resistant to 5-FU. Therefore, ALDHhigh TEC in tumor blood vessels might be an important target to overcome or prevent drug resistance.
  • Kyoko Hida, Nako Maishi, Kosuke Akiyama, Hitomi Ohmura-Kakutani, Chisaho Torii, Noritaka Ohga, Takahiro Osawa, Hiroshi Kikuchi, Hirofumi Morimoto, Masahiro Morimoto, Masanobu Shindoh, Nobuo Shinohara, Yasuhiro Hida
    CANCER SCIENCE 108 11 2195 - 2203 2017年11月 [査読有り][通常論文]
     
    Tumor blood vessels play an important role in tumor progression and metastasis. We previously reported that tumor endothelial cells (TEC) exhibit several altered phenotypes compared with normal endothelial cells (NEC). For example, TEC have chromosomal abnormalities and are resistant to several anticancer drugs. Furthermore, TEC contain stem cell-like populations with high aldehyde dehydrogenase (ALDH) activity (ALDH(high)TEC). ALDH(high) TEC have proangiogenic properties compared with ALDH(low) TEC. However, the association between ALDH(high) TEC and drug resistance remains unclear. In the present study, we found that ALDH mRNA expression and activity were higher in both human and mouse TEC than in NEC. Human NEC:human microvascular endothelial cells (HMVEC) were treated with tumor-conditioned medium (tumor CM). The ALDH(high) population increased along with upregulation of stem-related genes such as multidrug resistance 1, CD90, ALP, and Oct-4. Tumor CM also induced sphere-forming ability in HMVEC. Platelet-derived growth factor (PDGF)-A in tumor CM was shown to induce ALDH expression in HMVEC. Finally, ALDH(high) TEC were resistant to fluorouracil (5-FU) invitro and invivo. ALDH(high) TEC showed a higher grade of aneuploidy compared with that in ALDH(low) TEC. These results suggested that tumor-secreting factor increases ALDH(high) TEC populations that are resistant to 5-FU. Therefore, ALDH(high) TEC in tumor blood vessels might be an important target to overcome or prevent drug resistance.
  • Hida K, Maishi N
    Oral Sci Int 15 1 1 - 6 2017年10月 [査読有り][通常論文]
  • Nako Maishi, Kyoko Hida
    CANCER SCIENCE 108 10 1921 - 1926 2017年10月 [査読有り][通常論文]
     
    Tumor metastasis is the main cause of cancer-related death. Understanding the molecular mechanisms underlying tumor metastasis is crucial to control this fatal disease. Several molecular pathways orchestrate the complex biological cell events during a metastatic cascade. It is now well known that bidirectional interaction between tumor cells and their microenvironment, including tumor stroma, is important for tumor progression and metastasis. Tumor stromal cells, which acquire their specific characteristics in the tumor microenvironment, accelerate tumor malignancy. The formation of new blood vessels, termed as tumor angiogenesis, is a requirement for tumor progression. Tumor blood vessels supply nutrients and oxygen and also provide the route for metastasis. Tumor endothelial cells, which line tumor blood vessels, also exhibit several altered phenotypes compared with those of their normal counterparts. Recent studies have emphasized angiocrine factors that are released from tumor endothelial cells and promote tumor progression. During intravasation, tumor cells physically contact tumor endothelial cells and interact with them by juxtacrine and paracrine signaling. Recently, we observed that in highly metastatic tumors, tumor endothelial cells interact with tumor cells by secretion of a small leucine-rich repeat proteoglycan known as biglycan. Biglycan from tumor endothelial cells stimulates the tumor cells to metastasize. In the present review, we highlight the role of tumor stromal cells, particularly endothelial cells, in the initial steps of tumor metastasis.
  • Nako Maishi, Kyoko Hida
    Cancer Science 108 10 1921 - 1926 2017年10月01日 [査読有り][通常論文]
     
    Tumor metastasis is the main cause of cancer-related death. Understanding the molecular mechanisms underlying tumor metastasis is crucial to control this fatal disease. Several molecular pathways orchestrate the complex biological cell events during a metastatic cascade. It is now well known that bidirectional interaction between tumor cells and their microenvironment, including tumor stroma, is important for tumor progression and metastasis. Tumor stromal cells, which acquire their specific characteristics in the tumor microenvironment, accelerate tumor malignancy. The formation of new blood vessels, termed as tumor angiogenesis, is a requirement for tumor progression. Tumor blood vessels supply nutrients and oxygen and also provide the route for metastasis. Tumor endothelial cells, which line tumor blood vessels, also exhibit several altered phenotypes compared with those of their normal counterparts. Recent studies have emphasized “angiocrine factors” that are released from tumor endothelial cells and promote tumor progression. During intravasation, tumor cells physically contact tumor endothelial cells and interact with them by juxtacrine and paracrine signaling. Recently, we observed that in highly metastatic tumors, tumor endothelial cells interact with tumor cells by secretion of a small leucine-rich repeat proteoglycan known as biglycan. Biglycan from tumor endothelial cells stimulates the tumor cells to metastasize. In the present review, we highlight the role of tumor stromal cells, particularly endothelial cells, in the initial steps of tumor metastasis.
  • 抗癌剤治療前後における腫瘍血管内皮のP-glycoprotein発現変化
    間石 奈湖, 菊地 央, 森本 浩史, 土屋 邦彦, 安部 崇重, 樋田 泰浩, 原林 透, 松野 吉宏, 篠原 信雄, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 76回 J - 3103 2017年09月 [査読有り][通常論文]
  • Kyoko Hida, Hiroshi Kikuchi, Nako Maishi, Yasuhiro Hida
    CANCER LETTERS 400 305 - 310 2017年08月 [査読無し][通常論文]
     
    Drug resistance is a major problem in anticancer therapy. ATP-binding cassette (ABC) transporters have a role in the multidrug resistance. A new regimen of chemotherapy has been proposed, called "metronomic chemotherapy". Metronomic chemotherapy is the frequent, regular administration of drug doses designed to maintain low, but active, concentrations of chemotherapeutic drugs over prolonged periods of time, without causing serious toxicities. Metronomic chemotherapy regimens were developed to optimize the antitumor efficacy of agents that target the tumor vasculature instead of tumor cells, and to reduce toxicity of antineoplastic drugs [1]. Nevertheless, recent studies revealed that ABC transporters are expressed at a higher level in the endothelium in the tumor. To avoid resistance to metronomic antiangiogenic chemotherapy, ABC transporter inhibition of tumor endothelial cells may be a promising strategy. In this mini-review, we discuss the possible mechanism of resistance to metronomic chemotherapy from the viewpoint of tumor endothelial cell biology, focusing on ABC transporters. (C) 2017 Published by Elsevier Ireland Ltd.
  • Kyoko Hida, Taisuke Kawamoto, Nako Maishi, Masahiro Morimoto, Kosuke Akiyama, Noritaka Ohga, Masanobu Shindoh, Nobuo Shinohara, Yasuhiro Hida
    JOURNAL OF BIOCHEMISTRY 162 2 81 - 84 2017年08月 [査読有り][通常論文]
     
    Tumor progression is dependent on tumor angiogenesis. We previously reported that the phenotype of tumor endothelial cells (TECs) is distinct from normal endothelial cells (NECs). Herein, we conducted a pathway analysis using a public TEC microarray database and identified several putative TEC-specific miRNAs. We found that miR-145 expression was upregulated in TECs and that miR-145 enhanced cell adhesion and anoikis resistance and upregulated Bcl-2 and Bcl-xl via ERK1/2 in human microvascular endothelial cells. These findings suggested that miR-145 is involved in the acquisition of the TEC phenotype, partially. Therefore, miR-145 and its target genes may be molecular targets for anti-angiogenic therapy.
  • Hiroshi Kikuchi, Nako Maishi, Kosuke Akiyama, Masahiro Morimoto, Misa Yanagiya, Naoto Miyajima, Kunihiko Tsuchiya, Satoshi Maruyama, Takashige Abe, Yasuhiro Hida, Toru Harabayashi, Kaname Ameda, Ryuji Matsumoto, Akira Kashiwagi, Yoshihiro Matsuno, Nobuo Shinohara, Kyoko Hida
    JOURNAL OF CLINICAL ONCOLOGY 35 2017年05月 [査読有り][通常論文]
  • Chisaho Torii, Yasuhiro Hida, Masanobu Shindoh, Kosuke Akiyama, Noritaka Ohga, Nako Maishi, Yoichi Ohiro, Mitsunobu Ono, Yasunori Totsuka, Yoshimasa Kitagawa, Kanchu Tei, Yasufumi Sato, Kyoko Hida
    ANTICANCER RESEARCH 37 3 1219 - 1225 2017年03月 [査読有り][通常論文]
     
    Aim: We evaluated the prognostic value of vasohibin-1 (VASH1) expression in head and neck squamous cell carcinoma. Materials and Methods: Immunohistochemistry for VASH1 and cluster of differentiation 34 (CD34) was performed on 61 head and neck squamous cell carcinoma specimens. The association between VASH1 expression in the tumour and clinical outcomes was analyzed statistically. Results: VASH1 staining in normal tissue adjacent to cancerous tissue was negative, whereas it was positive in tumour blood vessels and AE1/AE3 and Ki67-positive tumour cells. Therefore, we examined the association between VASH1 expression in the tumour and clinical outcomes. Patients with high VASH1 expression in tumour had significantly shorter disease-free survival and more frequently had lymph node recurrence than those with low VASH1 expression. Conclusion: These results suggest that VASH1 expression is associated with tumour progression and may be useful as a prognostic marker of head and neck squamous cell carcinoma.
  • Kyoko Hida, Nako Maishi, Dorcas Akuba Muhyia Annan, Miyako Kondoh, Takayuki Hojo, Umma Habiba, Noritaka Ohga, Kosuke Ishikawa, Masumi Sato, Chisaho Torii, Misa Yanagiya, Masahiro Morimoto, Yasuhiro Hida, Masanobu Shindoh
    Journal of Oral Biosciences 59 1 50 - 54 2017年02月01日 [査読有り][通常論文]
     
    © 2016 Japanese Association for Oral Biology Objectives We have previously reported that tumor endothelial cells (TECs) are chromosomally abnormal. It is generally known that immortalized cells have chromosomal abnormalities. In this study, our objective was to compare chromosomal properties of an immortalized normal endothelial cell (NEC) line, MS1, and those of TECs, to assess the possible usefulness of MS1 cells as a surrogate for TECs, which have some experimental intractability as primary cultured endothelial cells. Methods Primary cultured NECs were isolated from murine dermis tissue. Fluorescence in situ hybridization was performed to analyze aneuploidy in MS1 cells and NECs. DNA damage response (DDR) activation was analyzed by γH2AX staining. We also tested the involvement of reactive oxygen species (ROS) in the chromosomal abnormalities of MS1 cells. Results MS1 cells showed a higher rate of aneuploidy than NECs did (91.6% versus 7.6%). A DDR was activated to a greater extent in MS1 cells than in NECs, judging by H2AX phosphorylation. ROS induced H2AX activation in MS1 cells, suggesting that ROS are involved in their DDR. Conclusion MS1 cells are aneuploid and activate H2AX to a greater extent than NECs do. MS1 cells resemble TECs in terms of the proliferative phenotype and aneuploidy. Thus, MS1 may be a good cell line for studies on the relation between chromosomal instability and a DDR in nonmalignant cells.
  • Umma Habiba, Kyoko Hida, Tetsuya Kitamura, Aya Yanagawa Matsuda, Fumihiro Higashino, Yoichi M. Ito, Yoichi Ohiro, Yasunori Totsuka, Masanobu Shindoh
    ONCOLOGY LETTERS 13 1 321 - 328 2017年01月 [査読有り][通常論文]
     
    Oral leukoplakia (OL) is a clinically diagnosed preneoplastic lesion of the oral cavity with an increased oral cancer risk. However, the risk of malignant transformation is still difficult to assess. The objective of the present study was to examine the expression patterns of aldehyde dehydrogenase 1 (ALDH1) and podoplanin in OL, and to determine their roles in predicting oral cancer development. In the present study, the expression patterns of ALDH1 and podoplanin were determined in samples from 79 patients with OL. The association between protein expression and clinicopathological parameters, including oral cancer-free survival, was analyzed during a mean follow-up period of 3.4 years. Expression of ALDH1 and podoplanin was observed in 61 and 67% patients, respectively. Kaplan-Meier analysis demonstrated that the expression of the proteins was correlated with the risk of progression to oral cancer. Multivariate analysis revealed that expression of ALDH1 and podoplanin was associated with 3.02- and 2.62-fold increased risk of malignant transformation, respectively. The malignant transformation risk of OL was considerably higher in cases with expression of both proteins. Point-prevalence analysis revealed that 66% of patients with co-expression of ALDH1 and podoplanin developed oral cancer. Taken together, our data indicate that ALDH1 and podoplanin expression patterns in OL are associated with oral cancer development, suggesting that ALDH1 and podoplanin may be useful biomarkers to identify OL patients with a substantially high oral cancer risk.
  • Kyoko Hida, Nako Maishi, Taisuke Kawamoto, Kosuke Akiyama, Noritaka Ohga, Yasuhiro Hida, Kenji Yamada, Takayuki Hojo, Hiroshi Kikuchi, Masumi Sato, Chisaho Torii, Nobuo Shinohara, Masanobu Shindoh
    PATHOLOGY INTERNATIONAL 66 12 687 - 694 2016年12月 [査読有り][通常論文]
     
    It has been described that tumor progression has many similarities to inflammation and wound healing in terms of the signaling processes involved. Among biological responses, angiogenesis, which is necessary for tumor progression and metastasis, is a common hallmark; therefore, tumor blood vessels have been considered as important therapeutic targets in anticancer therapy. We focused on pentraxin 3 (PTX3), which is a marker of cancer-related inflammation, but we found no reports on its expression and function in tumor blood vessels. Here we showed that PTX3 is expressed inmouse and human tumor blood vessels based on immunohistochemical analysis. We found that PTX3 is upregulated in primary mouse and human tumor endothelial cells compared to normal endothelial cells. We also showed that PTX3 plays an important role in the proliferation of the tumor endothelial cells. These results suggest that PTX3 is an important target for antiangiogenic therapy.
  • Umma Habiba, Tetsuya Kitamura, Aya Yanagawa-Matsuda, Fumihiro Higashino, Kyoko Hida, Yasunori Totsuka, Masanobu Shindoh
    ONCOLOGY LETTERS 12 5 3199 - 3207 2016年11月 [査読有り][通常論文]
     
    The risk of malignant transformation in oral preneoplastic lesions (OPLs) is challenging to assess. The objective of the present study was to determine the expression of ELAV like RNA binding protein 1 (HuR) and podoplanin in OPLs, and to evaluate the use of each protein as biomarkers for the risk assessment of malignant transformations. Immunohistochemistry for HuR and podoplanin was performed on the tissues of 51 patients with OPL, including cases of low grade dysplasia (LGD) and high grade dysplasia (HGD). The association between the protein expression patterns and clinicopathological parameters, including oral cancer free survival (OCFS) time, was analyzed during the follow-up period. HuR and podoplanin expression was observed in 28 (55%) and 36 (71%) of 51 patients, respectively. Kaplan-Meier analysis showed that the expression of HuR and podoplanin was associated with the risk of progression to oral cancer (P<0.05). Multivariate analysis revealed that HuR and podoplanin expression was associated with a 2.93-fold (95% confidence interval (CI), 0.98-10.34; P=0.055) and 2.06-fold (95% CI, 0.55-8.01; P=0.283) increase in risk of malignant transformation, respectively. The risk of OPL malignant transformation was considerably increased with the coexpression of HuR and podoplanin compared with the histological grading (95% CI, 1.64-23.59; P=0.005). The results of the present study demonstrated that the expression of HuR and podoplanin associates with malignant transformation and suggests that the proteins may be used as biomarkers to identify OPL patients with an increased risk of cancer development.
  • 抗癌剤治療前後の尿路上皮癌における腫瘍血管内皮のP-glycoprotein発現変化
    菊地 央, 間石 奈湖, 土屋 邦彦, 丸山 覚, 安部 崇重, 樋田 泰浩, 原林 透, 松野 吉宏, 篠原 信雄, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 75回 P - 3248 2016年10月 [査読有り][通常論文]
  • Nako Maishi, Yusuke Ohba, Kosuke Akiyama, Noritaka Ohga, Jun-ichi Hamada, Hiroko Nagao-Kitamoto, Mohammad Towfik Alam, Kazuyuki Yamamoto, Taisuke Kawamoto, Nobuo Inoue, Akinobu Taketomi, Masanobu Shindoh, Yasuhiro Hida, Kyoko Hida
    SCIENTIFIC REPORTS 6 28039  2016年06月 [査読有り][通常論文]
     
    Tumour blood vessels are gateways for distant metastasis. Recent studies have revealed that tumour endothelial cells (TECs) demonstrate distinct phenotypes from their normal counterparts. We have demonstrated that features of TECs are different depending on tumour malignancy, suggesting that TECs communicate with surrounding tumour cells. However, the contribution of TECs to metastasis has not been elucidated. Here, we show that TECs actively promote tumour metastasis through a bidirectional interaction between tumour cells and TECs. Co-implantation of TECs isolated from highly metastatic tumours accelerated lung metastases of low metastatic tumours. Biglycan, a small leucine-rich repeat proteoglycan secreted from TECs, activated tumour cell migration via nuclear factor-kappa B and extracellular signal-regulated kinase 1/2. Biglycan expression was upregulated by DNA demethylation in TECs. Collectively, our results demonstrate that TECs are altered in their microenvironment and, in turn, instigate tumour cells to metastasize, which is a novel mechanism for tumour metastasis.
  • 樋田 京子
    International Journal of Clinical Oncology 21 2 206 - 212 2016年04月 [査読有り][通常論文]
     
    Tumor blood vessels provide nutrition and oxygen to the tumor, resulting in tumor progression. They also act as gatekeepers, inducing tumor metastasis. Thus, targeting tumor blood vessels is an important strategy in cancer therapy. Tumor endothelial cells (TECs), which line the inner layer of blood vessels of the tumor stromal tissue, are the main targets of anti-angiogenic therapy. Because new tumor blood vessels generally sprout from pre-existing vasculature, they have been considered to be the same as normal blood vessels. However, tumor blood vessels demonstrate a markedly abnormal phenotype that includes several important morphological changes. The degree of angiogenesis is determined by the balance between the angiogenic stimulators and inhibitors released by the tumor and host cells. Recent studies have revealed that TECs also exhibit altered characteristics which depend on the tumor microenvironment. Here, we review recent studies on TEC abnormalities and heterogeneity with respect to tumor progression and consider their therapeutic implications.
  • Kyoko Hida, Nako Maishi, Yu Sakurai, Yasuhiro Hida, Hideyoshi Harashima
    ADVANCED DRUG DELIVERY REVIEWS 99 140 - 147 2016年04月 [査読無し][通常論文]
     
    To date anti-angiogenic therapy has been used for cancer therapy widely, yielding promising results. However, it has been elucidated that current anti-angiogenic drug has several issues to be solved, such as side-effects and drug resistance. It has been reported that tumor endothelial cells (TECs) differ from normal counterparts. In addition, it was shown that the TECs are heterogeneous according to the malignancy status of tumor. The development of novel strategy for targeting tumor vasculature is required. Recently, we have developed an active targeting system, which targets TECs specifically. In this review, we will discuss how TECs in tumor vasculature are heterogeneous and offer new perspectives on a drug delivery system, which can target heterogeneous tumor blood vessels from a viewpoint of personalized medicine. (C) 2015 Elsevier B.V. All rights reserved.
  • Kyoko Hida, Genichiro Ishii
    Advanced Drug Delivery Reviews 99 139  2016年04月01日 [査読有り][通常論文]
  • Shokoufeh Shahrabi-Farahani, Marina Gallottini, Fabiana Martins, Erik Li, Dayna R. Mudge, Hironao Nakayama, Kyoko Hida, Dipak Panigrahy, Patricia A. D'Amore, Diane R. Bielenberg
    AMERICAN JOURNAL OF PATHOLOGY 186 4 1055 - 1064 2016年04月 [査読有り][通常論文]
     
    Neuropilins are receptors for disparate ligands, including proangiogenic factors such as vascular endothelial growth factor and inhibitory class 3 semaphorin (SEMA3) family members. Differentiated cells in skin epithelium and cutaneous squamous ceLL carcinoma highly express the neuropilin-1 (NRP1) receptor. We examined the expression of NRP1 in human and mouse oral mucosa. NRP1 was significantly up-regulated in oral epithelial dysplasia and oral squamous cell carcinoma (OSCC). NRP1 receptor localized to the outer suprabasal epithelial layers in normal tongue, an expression pattern similar to the normal skin epidermis. However, dysplastic tongue epithelium and OSCC up regulated NRP1 in basal and proliferating epithelial layers, a profile unseen in cutaneous squamous cell carcinoma. NRP1 up-regulation is observed in a mouse carcinogen-induced OSCC model and in human tongue OSCC biopsies. Human OSCC cell Lines express NRP1 protein in vitro and in mouse tongue xenografts. Sites of capillary infiltration into orthotopic OSCC tumors correlate with high NRP1 expression. HSC3 xenografts, which express the highest NRP1 Levels of the cell lines examined, showed massive intratumoral lymphangiogenesis. SEMA3A inhibited OSCC cell migration, suggesting that the NRP1 receptor was bioactive in OSCC. In conclusion, NRP1 is regulated in the oral epithelium and is selectively up-regulated during epithelial dysplasia. NRP1 may function as a reservoir to sequester proangiogenic ligands within the neoplastic compartment, thereby recruiting neovessels toward tumor cells.
  • Comparison of characteristics of mouse immortalized normal endothelial cells, MS1 and primary cultured endothelial cells
    Hida K, Maishi N, Torii C, Yanagiya M, Annan Akuba-Muhyia Dorcas, Morimoto M, Alam Mohammad Towfik
    Hokkaido Journal of Dental Science 37 1 40 - 48 2016年 [査読有り][通常論文]
  • Kenji Yamada, Nako Maishi, Kosuke Akiyama, Mohammad Towfik Alam, Noritaka Ohga, Taisuke Kawamoto, Masanobu Shindoh, Norihiko Takahashi, Toshiya Kamiyama, Yasuhiro Hida, Akinobu Taketomi, Kyoko Hida
    INTERNATIONAL JOURNAL OF CANCER 137 12 2825 - 2836 2015年12月 [査読有り][通常論文]
     
    We reported that tumor endothelial cells (TECs) differ from normal endothelial cells (NECs) in many aspects, such as gene expression profiles. Although CXCR7 is reportedly highly expressed in blood vessels of several tumors, its function in TECs is still unknown. To investigate this role, we isolated TECs from mouse tumor A375SM xenografts, and compared them with NECs from normal mouse dermis. After confirming CXCR7 upregulation in TECs, we analyzed its function using CXCR7 siRNA and CXCR7 inhibitor; CCX771. CXCR7 siRNA and CCX771 inhibited migration, tube formation and resistance to serum starvation in TECs but not in NECs. ERK1/2 phosphorylation was inhibited by CXCR7 knockdown in TECs. These results suggest that CXCR7 promotes angiogenesis in TECs via ERK1/2 phosphorylation. Using ELISA, we also detected CXCL12, a ligand of CXCR7, in conditioned medium from TECs, but not from NECs. CXCL12 neutralizing antibody significantly inhibited TEC random motility. VEGF stimulation upregulated CXCR7 expression in NECs, implying that VEGF mediates CXCR7 expression in endothelial cells. A CXCR7 inhibitor, CCX771 also inhibited tumor growth, lung metastasis and tumor angiogenesis in vivo. Taken together, the CXCL12-CXCR7 autocrine loop affects TEC proangiogenic properties, and could be the basis for an antiangiogenic therapy that specifically targets tumor blood vessels rather than normal vessels. What's new? While the chemokine receptor CXCR7 is expressed at high levels on blood vessels in several tumor types, its function in tumor endothelial cells is unclear. The present study suggests that CXCR7 may have a role in tumor angiogenesis and lung metastasis. CXCR7 and its ligand CXCL12 were found to facilitate tube formation and cell migration in tumor endothelial cells via autocrine signaling. In mice, blockade of CXCR7 with the inhibitory molecule CCX771 resulted in reduced tumor growth and tumor weight, as well as lnhibition of lung metastasis. Inhibition of CXCL12/CXCR7 may represent a promising antiangiogenic strategy.
  • 腫瘍血管内皮細胞はbiglycanの分泌を介してがんの転移を促進する
    間石 奈湖, 大場 雄介, 秋山 廣輔, 大賀 則孝, 浜田 淳一, 北本 宗子[永尾], Mohammad Alam T., 進藤 正信, 樋田 泰浩, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 74回 E - 1030 2015年10月 [査読有り][通常論文]
  • 高転移性腫瘍miRNAはIL-6ならびにALDHの発現亢進を介して血管内皮に薬剤耐性を誘導する
    鳥居 ちさほ, 秋山 廣輔, 川本 泰輔, 間石 奈湖, 鄭 漢忠, 戸塚 靖則, 進藤 正信, 樋田 泰浩, 南 敬, 小坂 展慶, 落谷 孝広, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 74回 P - 3069 2015年10月 [査読有り][通常論文]
  • ROSによるbiglycan発現誘導を介した腫瘍血管内皮細胞の血管新生能亢進
    北條 敬之, 間石 奈湖, Alam Mohammad T., 秋山 廣輔, 大賀 則孝, 進藤 正信, 樋田 泰浩, 藤澤 俊明, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 74回 P - 3106 2015年10月 [査読有り][通常論文]
  • 腫瘍微小環境において、腫瘍由来のmiRXにより血管内皮はIL-6をオートクラインで利用し、薬剤耐性や幹細胞性を獲得している
    鳥居 ちさほ, 秋山 廣輔, 川本 泰輔, 間石 奈湖, 鄭 漢忠, 進藤 正信, 樋田 泰浩, 樋田 京子
    日本口腔科学会雑誌 64 2 191 - 191 (NPO)日本口腔科学会 2015年07月 [査読有り][通常論文]
  • Matsumoto R, Tsuda M, Wang Lei, Maishi N, Abe T, Kimura T, Tanino M, Nishihara H, Hida K, Ohba Y, Shinohara N, Nonomura K, Tanaka S
    Cancer Sci 106 6 709 - 17 2015年06月 [査読有り][通常論文]
     
    We have previously reported that an adaptor protein CRK, including CRK-I and CRK-II, plays essential roles in the malignant potential of various aggressive human cancers, suggesting the validity of targeting CRK in molecular targeted therapy of a wide range of cancers. Nevertheless, the role of CRK in human bladder cancer with marked invasion, characterized by distant metastasis and poor prognosis, remains obscure. In the present study, immunohistochemistry indicated a striking enhancement of CRK-I/-II, but not CRK-like, in human bladder cancer tissues compared to normal urothelium. We established CRK-knockdown bladder cancer cells using 5637 and UM-UC-3, which showed a significant decline in cell migration, invasion, and proliferation. It is noteworthy that an elimination of CRK conferred suppressed phosphorylation of c-Met and the downstream scaffold protein Gab1 in a hepatocyte growth factor-dependent and -independent manner. In epithelial-mesenchymal transition-related molecules, E-cadherin was upregulated by CRK elimination, whereas N-cadherin, vimentin, and Zeb1 were downregulated. A similar effect was observed following treatment with c-Met inhibitor SU11274. Depletion of CRK significantly decreased cell proliferation of 5637 and UM-UC-3, consistent with reduced activity of ERK. An orthotopic xenograft model with bioluminescent imaging revealed that CRK knockdown significantly attenuated not only tumor volume but also the number of circulating tumor cells, resulted in a complete abrogation of metastasis. Taken together, this evidence uncovered essential roles of CRK in invasive bladder cancer through the hepatocyte growth factor/c-Met/CRK feedback loop for epithelial-mesenchymal transition induction. Thus, CRK might be a potent molecular target in bladder cancer, particularly for preventing metastasis, leading to the resolution of clinically longstanding critical issues.
  • Kosuke Akiyama, Nako Maishi, Noritaka Ohga, Yasuhiro Hida, Yusuke Ohba, Mohammad Towfik Alam, Taisuke Kawamoto, Hitomi Ohmura, Kenji Yamada, Chisaho Torii, Masanobu Shindoh, Kyoko Hida
    AMERICAN JOURNAL OF PATHOLOGY 185 2 572 - 580 2015年02月 [査読有り][通常論文]
     
    Tumor angiogenesis plays an important role in tumor progression and metastasis. Tumor endothelial cells (TECs) are a therapeutic target of antiangiogenic chemotherapy that was recently developed and is currently being investigated in the clinic with promising results. Low-dose chemotherapy, which is the Long-term administration of relatively Low doses of chemotherapeutic agents, has been proposed for targeting tumor angiogenesis in various types of cancers. ALthough the efficacy of low-dose chemotherapy has been confirmed in several clinical models, some studies show insufficienttherapeutic effect for malignant cancers. As a possible mechanism of the treatment failure, it has been considered that tumor cells may acquire resistance to this therapy. However, drug resistance by TECs may also be due to another mechanism for resistance of tumor cells to low-dose chemotherapy. We reported elsewhere that TECs were resistant to the anticancer drug paclitaxel, which is a mitotic inhibitor, concomitant with P-glycoprotein up-regulation. Verapamil, a P-glycoprotein inhibitor, abrogated TEC resistance in vitro. Herein, we demonstrated that verapamil coadministration enhanced the effects of Low-dose paclitaxel concomitant with inhibiting tumor angiogenesis in a preclinical in vivo mouse melanoma xenograft model. Furthermore, verapamil coadministration reduced lung metastasis. These results suggest that inhibiting P-gLycoprotein in TECs may be a novel strategy for low-dose chemotherapy targeting TECs.
  • Golam Kibria, Hiroto Hatakeyama, Kosuke Akiyama, Kyoko Hida, Hideyoshi Harashima
    BIOLOGICAL & PHARMACEUTICAL BULLETIN 37 12 1926 - 1935 2014年12月 [査読有り][通常論文]
     
    Multi-drug resistance (MDR) of cancers to chemotherapy including doxorubicin (DOX) is mediated by several factors. To design an effective therapy for the treatment of chemotherapy-resistant cancers, it is essential to explore the elements responsible for mediating MDR. However, exploring these factors in detail in a wide range of tumor types is challenging as several critical analytical steps are involved. Here, we demonstrated the way of exploring the factors mediating MDR in the tumor types without performing the analysis at the molecular level of cells. The sensitivities of 15 different types of cancer cells to DOX were evaluated, and the role of P-glycoprotein (P-gp), one of the major efflux-pumps, was explored. A correlation curve was developed between the intracellular amounts of DOX and the sensitivities of cells, and, based on this correlation, the cells were classified in response to the involvement of P-gp that mediates MDR. P-gp plays an active role in mediating MDR of cancer cells where a correlation between the sensitivities of cells and the accumulated DOX exists. In contrast, in cells that show a resistance to DOX but whose sensitivities are independent of the amount of accumulated drug, it was reasonably presumed that mechanisms other than P-gp are likely to be involved in mediating MDR. Based on the correlation between the availability of a drug and cell sensitivity, it would be reasonable to explore the factors governing cancer MDR, which is essential in designing an effective therapeutic approach for treating chemotherapy-resistant cancers using chemotherapeutic drugs.
  • Hitomi Ohmura-Kakutani, Kosuke Akiyama, Nako Maishi, Noritaka Ohga, Yasuhiro Hida, Taisuke Kawamoto, Junichiro Iida, Masanobu Shindoh, Kunihiko Tsuchiya, Nobuo Shinohara, Kyoko Hida
    PLOS ONE 9 12 e113910  2014年12月 [査読有り][通常論文]
     
    Tumor blood vessels play an important role in tumor progression and metastasis. It has been reported that tumor endothelial cells (TECs) exhibit highly angiogenic phenotypes compared with those of normal endothelial cells (NECs). TECs show higher proliferative and migratory abilities than those NECs, together with upregulation of vascular endothelial growth factor (VEGF) and VEGF receptor 2 (VEGFR2). Furthermore, compared with NECs, stem cell markers such as Sca-1, CD90, and multidrug resistance 1 are upregulated in TECs, suggesting that stem-like cells exist in tumor blood vessels. In this study, to reveal the biological role of stem-like TECs, we analyzed expression of the stem cell marker aldehyde dehydrogenase (ALDH) in TECs and characterized ALDH(high) TECs. TECs and NECs were isolated from melanoma-xenografted nude mice and normal dermis, respectively. ALDH mRNA expression and activity were higher in TECs than those in NECs. Next, ALDH(high/low) TECs were isolated by fluorescence-activated cell sorting to compare their characteristics. Compared with ALDH(low) TECs, ALDH(high) TECs formed more tubes on Matrigel-coated plates and sustained the tubular networks longer. Furthermore, VEGFR2 expression was higher in ALDHhigh TECs than that in ALDH(low) TECs. In addition, ALDH was expressed in the tumor blood vessels of in vivo mouse models of melanoma and oral carcinoma, but not in normal blood vessels. These findings indicate that ALDH(high) TECs exhibit an angiogenic phenotype. Stem-like TECs may have an essential role in tumor angiogenesis.
  • Mohammad T. Alam, Hiroko Nagao-Kitamoto, Noritaka Ohga, Kosuke Akiyama, Nako Maishi, Taisuke Kawamoto, Nobuo Shinohara, Akinobu Taketomi, Masanobu Shindoh, Yasuhiro Hida, Kyoko Hida
    CANCER SCIENCE 105 12 1533 - 1540 2014年12月 [査読有り][通常論文]
     
    Recent studies have reported that stromal cells contribute to tumor progression. We previously demonstrated that tumor endothelial cells (TEC) characteristics were different from those of normal endothelial cells (NEC). Furthermore, we performed gene profile analysis in TEC and NEC, revealing that suprabasin (SBSN) was upregulated in TEC compared with NEC. However, its role in TEC is still unknown. Here we showed that SBSN expression was higher in isolated human and mouse TEC than in NEC. SBSN knockdown inhibited the migration and tube formation ability of TEC. We also showed that the AKT pathway was a downstream factor of SBSN. These findings suggest that SBSN is involved in the angiogenic potential of TEC and may be a novel TEC marker.
  • Afsana Akhter, Yasuhiro Hayashi, Yu Sakurai, Noritaka Ohga, Kyoko Hida, Hideyoshi Harashima
    INTERNATIONAL JOURNAL OF PHARMACEUTICS 475 1-2 227 - 237 2014年11月 [査読有り][通常論文]
     
    The specific delivery of a gene to liver sinusoidal endothelial cells (LSEC) could become a useful strategy for treating various liver diseases associated with such cells. We previously reported that the accumulation of KLGR peptide modified liposomes through liver sinusoidal blood vessels was enhanced after an intravenous administration. Here, we report on an attempt to develop an LSEC targeted nanocarrier system to deliver siRNA for the successful knockdown of LSEC specific gene expression. The system involved the development of a multifunctional envelop-type nano device (MEND) modified with the KLGR peptide for siRNA delivery targeting LSEC. Our developed carrier successfully lowered specific gene expression in LSEC. An in vivo study showed that at a lower density of ligand at the surface of the MEND resulted in the highest knockdown of gene expression in LSEC. This is the first report of the successful delivery of siRNA to LSECs. Further experiments suggest that not only a higher endosomal escape efficiency into the cytosol but also the uptake mechanism as a function of ligand density are two important factors to be considered for targeting LSEC. (C) 2014 Elsevier B.V. All rights reserved.
  • Mst Naznin Ara, Takashi Matsuda, Mamoru Hyodo, Yu Sakurai, Noritaka Ohga, Kyoko Hida, Hideyoshi Harashima
    BIOLOGICAL & PHARMACEUTICAL BULLETIN 37 11 1742 - 1749 2014年11月 [査読有り][通常論文]
     
    We describe herein the development of a high affinity and specific DNA aptamer as a new ligand for use in liposomal nanoparticles to target cultured mouse tumor endothelial cells (mTECs). Active targeted nanotechnology based drug delivery systems are currently of great interest, due to their potential for reducing side effects and facilitating the delivery of cytotoxic drugs or genes in a site specific manner. In this study, we report on a promising aptamer candidate AraHH036 that shows selective binding towards mTECs. The aptamer does not bind to normal cells, normal endothelial cells or tumor cells. Therefore, we synthesized an aptamer-polyethylene glycol (PEG) lipid conjugate and prepared aptamer based liposomes (ALPs) by the standard lipid hydration method. First, we quantified the higher capacity of ALPs to internalize into mTECs by incubating ALPs containing 1 mol%, 5 mol% and 10 mol% aptamer of total lipids and compared the results to those for unmodified PEGylated liposomes (PLPs). A confocal laser scanning microscope (CLSM) uptake study indicated that the ALPs were taken up more efficiently than PLPs. The measured K-d value of the ALPs was 142 nM. An intracellular trafficking study confirmed that most of the rhodamine labeled ALPs were taken up and co-localized with the green lysotracker, thus confirming that they were located in lysosomes. Finally, using an aptamer based proteomics approach, the molecular target protein of the aptamer was identified as heat shock protein 70 (HSP70). The results suggest that these ALPs offer promise as a new carrier molecule for delivering anti-angiogenesis drugs to tumor vasculature.
  • CXCR7を標的とした新規血管新生阻害療法の可能性(CXCR7 as a novel target for anti-angiogenic therapy)
    山田 健司, 間石 奈湖, 秋山 廣輔, 大賀 則孝, 川本 泰輔, 進藤 正信, 高橋 典彦, 神山 俊哉, 樋田 泰浩, 武冨 紹信, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 73回 J - 1006 2014年09月 [査読有り][通常論文]
  • Mst Naznin Ara, Takashi Matsuda, Mamoru Hyodo, Yu Sakurai, Hiroto Hatakeyama, Noritaka Ohga, Kyoko Hida, Hideyoshi Harashima
    BIOMATERIALS 35 25 7110 - 7120 2014年08月 [査読有り][通常論文]
     
    The objective of this study was to construct our recently developed aptamer-modified targeted liposome nano-carrier (Apt-PEG-LPs) system to target primary cultured mouse tumor endothelial cells (mTEC), both in vitro and in vivo. We first synthesized an aptamer-polyethylene glycol 2000-distearoyl phosphoethanolamine (Apt-PEG(2000)-DSPE). The conjugation of the Apt-PEG(2000)-DSPE was confirmed by MALDI-TOF mass spectroscopy. A lipid hydration method was used to prepare Apt-PEG-LPs, in which the outer surface of the PEG-spacer was decorated with the aptamer. Apt-PEG-LPs were significantly taken up by mTECs. Cellular uptake capacity was observed both quantitatively and qualitatively using spectrofluorometry, and confocal laser scanning microscopy (CLSM), respectively. In examining the extent of localization of aptamer-modified liposomes that entered the cells, approximately 39% of the Apt-PEG-LPs were not co-localized with lysotracker, indicating that they had escaped from endosomes. The uptake route involved a receptor mediated pathway, followed by clathrin mediated endocytosis. This Apt-PEG-LP was also applied for in vivo research whether this system could target tumor endothelial cells. Apt-PEG-LP and PEG(5000)-DSPE modified Apt-PEG-LP (Apt/PEG(5000)-LP) were investigated by human renal cell carcinoma (OS-RC-2 cells) inoculating mice using CLSM. Apt-PEG-LP and Apt/PEG(5000)-LP showed higher accumulation on tumor vasculature compared to PEG-LP and the co-localization efficacy of Apt-PEG-LP and Apt/PEG(5000)-LP on TEC were quantified 16% and 25% respectively, which was also better than PEG-LP (3%). The findings suggest that this system is considerable promise for targeting tumor endothelial cells to deliver drugs or genes in vitro and in vivo. (C) 2014 Elsevier Ltd. All rights reserved.
  • Mst. Naznin Ara, Mamoru Hyodo, Noritaka Ohga, Kosuke Akiyama, Kyoko Hida, Yasuhiro Hida, Nobuo Shinohara, Hideyoshi Harashima
    CANCER MEDICINE 3 4 825 - 834 2014年08月 [査読有り][通常論文]
     
    The identification of a specific biomarker involves the development of new clinical diagnostic tools, and an in-depth understanding of the disease at the molecular level. When new blood vessels form in tumor cells, endothelial cell production is induced, a process that plays a key role in disease progression and metastasis to distinct organs for solid tumor types. The present study reports on the identification of a new biomarker on primary cultured mouse tumor endothelial cells (mTECs) using our recently developed high-affinity DNA aptamer AraHH001 (K-d = 43 nmol/L) assisted proteomics approach. We applied a strategy involving aptamer-facilitated biomarker discovery. Biotin-tagged AraHH001 was incubated with lysates of mTECs and the aptamer-proteins were then conjugated with streptavidin magnetic beads. Finally, the bound proteins were separated by sodiumdodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) with silver staining. We identified troponin T via matrix assisted laser desorption ionization-time of flight (MALDI-TOF) mass spectrometry, the molecular target of aptamer AraHH001, and its presence was confirmed by measuring mRNA, protein levels, western blot, immunostaining, a gel shift assay of AraHH001 with troponin T. We first report here on the discovery of troponin T on mTECs, a promising and interesting diagnostic tool in the development of antiangiogenic therapy techniques the involves the targeting of the tumor vasculature.
  • Tsuguteru Otsubo, Yasuhiro Hida, Noritaka Ohga, Hideshi Sato, Toshihiro Kai, Yasushi Matsuki, Hideo Takasu, Kosuke Akiyama, Nako Maishi, Taisuke Kawamoto, Nobuo Shinohara, Katsuya Nonomura, Kyoko Hida
    CANCER SCIENCE 105 5 560 - 567 2014年05月 [査読有り][通常論文]
     
    Targeting tumor angiogenesis is an established strategy for cancer therapy. Because angiogenesis is not limited to pathological conditions such as cancer, molecular markers that can distinguish between physiological and pathological angiogenesis are required to develop more effective and safer approaches for cancer treatment. To identify such molecules, we determined the gene expression profiles of murine tumor endothelial cells (mTEC) and murine normal endothelial cells using DNA microarray analysis followed by quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction analysis. We identified 131 genes that were differentially upregulated in mTEC. Functional analysis using siRNA-mediated gene silencing revealed five novel tumor endothelial cell markers that were involved in the proliferation or migration of mTEC. The expression of DEF6 and TMEM176B was upregulated in tumor vessels of human renal cell carcinoma specimens, suggesting that they are potential targets for antiangiogenic intervention for renal cell carcinoma. Comparative gene expression analysis revealed molecular differences between tumor endothelial cells and normal endothelial cells and identified novel tumor endothelial cell markers that may be exploited to target tumor angiogenesis for cancer treatment.
  • Tsuguteru Otsubo, Yasuhiro Hida, Noritaka Ohga, Hideshi Sato, Toshihiro Kai, Yasushi Matsuki, Hideo Takasu, Kosuke Akiyama, Nako Maishi, Taisuke Kawamoto, Nobuo Shinohara, Katsuya Nonomura, Kyoko Hida
    Cancer Science 105 5 560 - 567 2014年05月 [査読有り][通常論文]
     
    Targeting tumor angiogenesis is an established strategy for cancer therapy. Because angiogenesis is not limited to pathological conditions such as cancer, molecular markers that can distinguish between physiological and pathological angiogenesis are required to develop more effective and safer approaches for cancer treatment. To identify such molecules, we determined the gene expression profiles of murine tumor endothelial cells (mTEC) and murine normal endothelial cells using DNA microarray analysis followed by quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction analysis. We identified 131 genes that were differentially upregulated in mTEC. Functional analysis using siRNA-mediated gene silencing revealed five novel tumor endothelial cell markers that were involved in the proliferation or migration of mTEC. The expression of DEF6 and TMEM176B was upregulated in tumor vessels of human renal cell carcinoma specimens, suggesting that they are potential targets for antiangiogenic intervention for renal cell carcinoma. Comparative gene expression analysis revealed molecular differences between tumor endothelial cells and normal endothelial cells and identified novel tumor endothelial cell markers that may be exploited to target tumor angiogenesis for cancer treatment. © 2014 The Authors.
  • Umma Habiba, Tetsuya Kitamura, Aya Yanagawa-Matsuda, Kyoko Hida, Fumihiro Higashino, Yoichi Ohiro, Yasunori Totsuka, Masanobu Shindoh
    ONCOLOGY REPORTS 31 4 1547 - 1554 2014年04月 [査読有り][通常論文]
     
    Oral verrucous carcinoma (OVC) is a low grade variant of oral squamous cell carcinoma, and oral verrucous hyperplasia (OVH) is a benign lesion without malignant features. However, pathologists are sometimes presented with borderline lesions and are indecisive as to diagnose them as benign or malignant. Thus, these lesions are tentatively termed oral verrucous lesions (OVLs). HuR is an ARE mRNA-binding protein, normally localized in the nucleus but cytoplasmic exportation is frequently observed in cancer cells. The present study aimed to elucidate whether expression of the HuR protein facilitates the diagnosis of true malignant lesions. Clinicopathological features were evaluated, and immunohistochemical analysis for p53, Ki67 and HuR proteins was performed in 48 cases of OVH, OVC and OVL, and the outcomes were correlated using appropriate statistical analysis. The association of these three proteins in relation to malignant transformation was analyzed after a 3-year follow-up of 25 OVL cases. The basal characteristics (age, gender and location) of all cases had no significant association with the types of lesions. Gingiva (39.4%) was the common site for all lesions. Distribution of the examined proteins had a significant association with the lesions. As compared with the OVLs, the number of immunostained-positive cells was significantly higher in the OVCs and lower in the OVH cases. During follow-up, 24% of the OVLs underwent malignant transformation for which high HuR expression and a diffuse staining pattern in the epithelium were observed. Taken together, the high degree of HuR expression with diffuse staining pattern in the epithelium may be an effective diagnostic tool that determines the potential of OVLs for malignant transformation.
  • Toru Sasamori, Kazutoshi Hida, Kimio Anzai, Shunsuke Yano, Yasutaka Kato, Shinya Tanaka, Hisatoshi Saito, Kiyohiro Houkin
    CLINICAL IMAGING 38 2 199 - 201 2014年03月 [査読有り][通常論文]
     
    The authors reported a case of cervical juxtafacet cyst with extensive rim enhancement on gadolinium-diethylenetriamine pentaacid magnetic resonance imaging. Operative finding revealed the epidural space around the mass filled with abundant venous plexus. Histological examination demonstrated that cyst wall was composed of the well-vascularized fibrous connective tissue with some inflammatory changes. We speculate that extensive rim enhancement of juxtafacet cyst may be attributed not only to the chronic inflammatory changes of cyst wall, but to engorged venous plexus within the widened epidural space. (c) 2014 Elsevier Inc. All rights reserved.
  • Yu Sakurai, Hiroto Hatakeyama, Yusuke Sato, Mamoru Hyodo, Hidetaka Akita, Noritaka Ohga, Kyoko Hida, Hideyoshi Harashima
    JOURNAL OF CONTROLLED RELEASE 173 10 110 - 118 2014年01月 [査読有り][通常論文]
     
    Angiogenesis is one of crucial processes associated with tumor growth and development, and consequently a prime target for cancer therapy. Although tumor endothelial cells (TECs) play a key role in pathological angiogenesis, investigating phenotypical changes in neovessels when a gene expression in TEC is suppressed is a difficult task. Small interfering RNA (siRNA) represents a potential agent due to its ability to silence a gene of interest. We previously developed a system for in vivo siRNA delivery to cancer cells that involves a liposomal-delivery system, a MEND that contains a unique pH-sensitive cationic lipid, YSK05 (YSK-MEND). In the present study, we report on the development of a system that permits the delivery of siRNA to TECs by combining the YSK-MEND and a ligand that is specific to TECs. Cyclo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys) (cRGD) is a well-known ligand to alpha(V)beta(3) integrin, which is selectively expressed at high levels in TECs. We incorporated cRGD into the YSK-MEND (RGD-MEND) to achieve an efficient gene silencing in TECs. Quantitative RT-PCR and the 5' rapid amplification of cDNA ends PCR indicated that the intravenous injection of RGD-MEND at a dose of 4.0 mg/kg induced a significant RNAi-mediated gene reduction in TEC but not in endothelial cells of other organs. Finally, we evaluated the therapeutic potency of the RGD-MEND encapsulating siRNA against vascular endothelial growth factor receptor 2. A substantial delay in tumor growth was observed after three sequential RGD-MEND injections on alternate days. In conclusion, the RGD-MEND represents a new approach for the characterization of TECs and for us in anti-angiogenic therapy. (C) 2013 Elsevier B.V. All rights reserved.
  • Kyoko Hida, Noritaka Ohga, Kosuke Akiyama, Nako Maishi, Yasuhiro Hida
    CANCER SCIENCE 104 11 1391 - 1395 2013年11月 [査読有り][通常論文]
     
    Tumor blood vessels play important roles in tumor progression and metastasis. Thus, targeting tumor blood vessels is an important strategy for cancer therapy. Tumor endothelial cells (TECs) are the main targets of anti-angiogenic therapy. Although tumor blood vessels generally sprout from pre-existing vessels and have been thought to be genetically normal, they display a markedly abnormal phenotype, including morphological changes. The degree of angiogenesis is determined by the balance between the positive and negative regulating molecules that are released by tumor and host cells in the microenvironment. Reportedly, tumor blood vessels are heterogeneous with TECs differing from normal endothelial cells (in contrast to the conventional view). We recently compared characteristics of different TECs isolated from highly and low metastatic tumors. We found TECs from highly metastatic tumors had more proangiogenic phenotypes than those from low metastatic tumors. Elucidating the variety of TEC phenotypes and identifying TEC molecular signatures should lead to more complete understanding of the mechanisms of tumor progression, discovery of new therapeutic targets, and development of biomarkers. This review considers current studies on TEC heterogeneity and discusses the therapeutic implications of these findings.
  • Miyako Kondoh, Noritaka Ohga, Kosuke Akiyama, Yasuhiro Hida, Nako Maishi, Alam Mohammad Towfik, Nobuo Inoue, Masanobu Shindoh, Kyoko Hida
    PLOS ONE 8 11 e80349  2013年11月 [査読有り][通常論文]
     
    There is much evidence that hypoxia in the tumor microenvironment enhances tumor progression. In an earlier study, we reported abnormal phenotypes of tumor-associated endothelial cells such as those resistant to chemotherapy and chromosomal instability. Here we investigated the role of hypoxia in the acquisition of chromosomal abnormalities in endothelial cells. Tumor-associated endothelial cells isolated from human tumor xenografts showed chromosomal abnormalities, > 30% of which were aneuploidy. Aneuploidy of the tumor-associated endothelial cells was also shown by simultaneous in-situ hybridization for chromosome 17 and by immunohistochemistry with anti-CD31 antibody for endothelial staining. The aneuploid cells were surrounded by a pimonidazole-positive area, indicating hypoxia. Human microvascular endothelial cells expressed hypoxia-inducible factor 1 and vascular endothelial growth factor A in response to either hypoxia or hypoxia-reoxygenation, and in these conditions, they acquired aneuploidy in 7 days. Induction of aneuploidy was inhibited by either inhibition of vascular endothelial growth factor signaling with vascular endothelial growth factor receptor 2 inhibitor or by inhibition of reactive oxygen species by N-acetyl-L-cysteine. These results indicate that hypoxia induces chromosomal abnormalities in endothelial cells through the induction of reactive oxygen species and excess signaling of vascular endothelial growth factor in the tumor microenvironment.
  • T. Osawa, N. Ohga, K. Akiyama, Y. Hida, K. Kitayama, T. Kawamoto, K. Yamamoto, N. Maishi, M. Kondoh, Y. Onodera, M. Fujie, N. Shinohara, K. Nonomura, M. Shindoh, K. Hida
    BRITISH JOURNAL OF CANCER 109 8 2237 - 2247 2013年10月 [査読有り][通常論文]
     
    Background: Molecules that are highly expressed in tumour endothelial cells (TECs) may be candidates for specifically targeting TECs. Using DNA microarray analysis, we found that the lysyl oxidase (LOX) gene was upregulated in TECs compared with its expression in normal endothelial cells (NECs). LOX is an enzyme that enhances invasion and metastasis of tumour cells. However, there are no reports on the function of LOX in isolated TECs. Methods: TECs and NECs were isolated to investigate LOX function in TECs. LOX inhibition of in vivo tumour growth was also assessed using beta-aminopropionitrile (BAPN). Results: LOX expression was higher in TECs than in NECs. LOX knockdown inhibited cell migration and tube formation by TECs, which was associated with decreased phosphorylation of focal adhesion kinase (Tyr 397). Immunostaining showed high LOX expression in human tumour vessels in vivo. Tumour angiogenesis and micrometastasis were inhibited by BAPN in an in vivo tumour model. Conclusion: LOX may be a TEC marker and a possible therapeutic target for novel antiangiogenic therapy.
  • Maishi N, Kawamoto T, Yamada K, Akiyama K, Yamamoto K, Osawa T, Hida Y, Hida K
    Oncol Rep 30 4 1695 - 1700 2013年10月 [査読有り][通常論文]
     
    Fluorescent and luminescent tools are commonly used to study the dynamics of cancer progression and metastases in real-time. Fluorophores have become essential tools to study biological events. However, few can sustain fluorescence long enough during long-term studies. In the present study, we focused on a series of new amphiphilic fluorophores known as POLARIC (TM), which emit strong fluorescence in lipid bilayers and can be readily modified using the Suzuki-Miyaura cross-coupling reaction. Appropriate chemical modifications of substituent groups can improve target-site specificity, reduce cytotoxicity and prolong emission. Therefore, in contrast to conventional fluorescent probes, these fluorophores show promise for long-term monitoring of biological processes. In the present study, we conducted long-term observations of tumor growth and metastasis using a POLARIC derivative as a novel fluorescent probe. For this purpose, we studied the metastatic melanoma cell line A375-SM, which proliferates at a high rate. We compared the characteristics of the POLARIC probe with the commercially available fluorescent dye PKH26 and fluorescent protein mRFP1. A375-SM cells were labeled with these fluorescent probes and orthotopically implanted into nude mice. The fluorescence emitted by POLARIC was detected more than five weeks after implantation without causing detectable harmful effects on tumor growth. By contrast, fluorescence of cells labeled with PKH26 could not be detected at this same time. Furthermore, POLARIC-, but not PKH26-labeled cells, were also detected in lung metastases. These results indicate that labeling cells with POLARIC fluorophores can significantly extend the time course of in vivo studies on tumor cell growth.
  • 血管内皮細胞によるがん転移促進(Endothelial cells promote tumor metastasis)
    間石 奈湖, 大場 雄介, 大賀 則孝, 秋山 廣輔, 山本 和幸, 浜田 淳一, 川本 泰輔, アラム・モハメド・トウフィック, 大村 瞳, 進藤 正信, 樋田 泰浩, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 72回 127 - 127 2013年10月 [査読有り][通常論文]
  • P-gp阻害剤はメトロノミックケモセラピーの血管新生阻害効果を強める(P-gp inhibitor enhance antiangiogenic activity in metronomic chemotherapy)
    秋山 廣輔, 大賀 則孝, 樋田 泰浩, 間石 奈湖, ムハンマド・トフィック, 川本 泰輔, 大村 瞳, 山田 健司, 鳥居 ちさほ, 進藤 正信, 大場 雄介, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 72回 127 - 127 2013年10月 [査読有り][通常論文]
  • microvesiclesを介して腫瘍細胞由来のmiRNAが血管内皮細胞へ輸送される(Tumor-derived miRNA is transported to endothelial cells by microvesicles)
    川本 泰輔, 秋山 廣輔, 大賀 則孝, 間石 奈湖, 進藤 正信, 樋田 泰浩, 小坂 展慶, 落合 孝広, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 72回 267 - 267 2013年10月 [査読有り][通常論文]
  • 腫瘍血管内皮におけるCXCR7の機能解析(The role of a chemokine receptor CXCR7 in tumor endothelial cells)
    山田 健司, 間石 奈湖, 大賀 則孝, 秋山 廣輔, 川本 泰輔, Towfik Alam Mohammad, 進藤 正信, 高橋 典彦, 神山 俊哉, 樋田 泰浩, 武冨 紹信, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 72回 317 - 317 2013年10月 [査読有り][通常論文]
  • 低酸素・低栄養環境によるROSの蓄積が及ぼすTECへの影響(Proangiogenic phenotype of TEC induced by ROS generation under hypoxia and starvation)
    北條 敬之, 間石 奈湖, 秋山 廣輔, 大賀 則孝, 近藤 美弥子, 大村 瞳, 進藤 正信, 藤澤 俊明, 樋田 泰浩, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 72回 317 - 317 2013年10月 [査読有り][通常論文]
  • 口腔扁平上皮癌における新規予後因子Vasohibin-1の発現解析(Vasohibin-1 as a novel prognostic factor in oral squamous cell carcinoma)
    鳥居 ちさほ, 大賀 則孝, 秋山 廣輔, 間石 奈湖, 北條 敬之, 大廣 洋一, 小野 貢伸, 戸塚 靖則, 鄭 漢忠, 樋田 泰浩, 進藤 正信, 佐藤 靖史, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 72回 414 - 414 2013年10月 [査読有り][通常論文]
  • Yuma Yamada, Masahiro Hashida, Yasuhiro Hayashi, Mai Tabata, Mamoru Hyodo, Mst Naznin Ara, Noritaka Ohga, Kyoko Hida, Hideyoshi Harashima
    JOURNAL OF PHARMACEUTICAL SCIENCES 102 9 3119 - 3127 2013年09月 [査読有り][通常論文]
     
    Dysfunctional sinusoidal liver endothelial cells (LECs) are associated with liver diseases, such as liver fibrosis, cirrhosis, and portal hypertension. Because of this, gene therapy targeted to LECs would be a useful and productive strategy for directly treating these diseases at the level of genes. Here, we report on the development of a transgene vector that specifically targets LECs. The vector is a liposome-based gene vector coated with hyaluronic acid (HA). HA is a natural ligand for LECs and confers desirable properties on particles, rendering them biodegradable, biocompatible, and nonimmunogenic. In this study, we constructed HA-modified carriers, and evaluated cellular uptake and transfection activity using cultured LECs from KSN nude mice (KSN-LECs). Cellular uptake analyses showed that KSN-LECs recognized the HA-modified carriers more effectively than skin endothelial cells. The transfection assay indicated that the efficient gene expression in KSN-LECs, using the HA-modified carriers, required an adequate lipid composition and a functional device to control intracellular trafficking. This finding contributes to our overall knowledge of transgene expression targeted to LECs. (C) 2013 Wiley Periodicals, Inc. and the American Pharmacists Association
  • Golam Kibria, Hiroto Hatakeyama, Noritaka Ohga, Kyoko Hida, Hideyoshi Harashima
    BIOMATERIALS 34 22 5617 - 5627 2013年07月 [査読有り][通常論文]
     
    Size of the liposomes (LPs) specially governs its biodistribution. In this study, LPs were developed with controlled sizes, where variation in LP size dictates the ligand receptor interaction, cellular internalization and its distribution within the tumor microenvironment. The therapeutic efficacies of doxorubicin (DOX)-loaded RGD modified small size (similar to 100 nm in diameter, dnm) and large size (similar to 300 dnm) PEGylated LPs (RGD-PEG-LPs) were compared to that of Doxil (a clinically used DOX-loaded PEG-LP, similar to 100 dnm) in DOX resistant OSRC-2 (Renal cell carcinoma, RCC) tumor xenografts. Doxil, which accumulated in tumor tissue via the enhanced permeability and retention (EPR) effect, failed to suppress tumor growth. Small size RGD-PEG-LP, that targets the tumor endothelial cells (TECs) and extravasates to tumor cells, failed to provide anti-tumor effect. Large size RGD-PEG-LP preferentially targets the TECs via minimization of the EPR effect, and significantly reduced the tumor growth, which was exerted through its strong anti-angiogenic activity on the tumor vasculature rather than having a direct effect on DOX resistant RCC. The prepared large size RGD-PEG-LP that targets the TECs via interacting with Integrin alpha v beta 3, is a potentially effective and alternate therapeutic strategy for the treatment of DOX resistant tumor cells by utilizing DOX, in cases where Doxil is ineffective. (C) 2013 Elsevier Ltd. All rights reserved.
  • Kyosuke Nagamine, Tetsuya Kitamura, Aya Yanagawa-Matsuda, Yoichi Ohiro, Kanchu Tei, Kyoko Hida, Fumihiro Higashino, Yasunori Totsuka, Masanobu Shindoh
    Oncology Reports 29 6 2114 - 2118 2013年06月 [査読有り][通常論文]
     
    Parathyroid hormone-related protein (PTHrP) is known to induce bone resorption by activating RANKL as well as PTH. PTHrP plays a central role in humoral hypercalcemia, and its expression has been reported to be closely associated with bone metastasis of breast carcinoma. PTHrP expression in oral squamous carcinoma cell lines was investigated, and PTHrP was expressed in oral squamous cell carcinoma cell lines similar to that in a prostate carcinoma cell line. Mucoepidermoid carcinoma is the most common malignant salivary gland tumor composed of different types of cells including a squamous component. Its clinical behavior is highly variable and ranges from slow-growing and indolent to locally aggressive and highly metastatic. We examined the PTHrP expression in mucoepidermoid carcinoma and assessed the significance of its correlation with clinicopathological features. Immunohistochemical detection of PTHrP was carried out in 21 cases of mucoepidermoid carcinoma in the head and neck region. PTHrP was highly detectable in intermediate and epidermoid cells, and abundant expression of PTHrP in intermediate cells had a significant association with cancer malignancy, including lymph node metastasis and/or tumor recurrence. These results suggest that PTHrP expresion can be used as a prognostic factor for mucoepidermoid carcinoma.
  • Kyoko Hida, Kosuke Akiyama, Noritaka Ohga, Nako Maishi, Yasuhiro Hida
    Journal of biochemistry 153 3 243 - 9 2013年03月 [査読有り][通常論文]
     
    Tumour growth is dependent on angiogenesis, and tumour blood vessels are recognized as an important target for cancer therapy. Tumour endothelial cells (TECs) are the main targets of anti-angiogenic therapy. Unlike the traditionally held view, some TECs may be genetically abnormal and might acquire drug resistance. Therefore, we investigated the drug resistance of TECs and the mechanism by which it is acquired. TECs show resistance to paclitaxel through greater mRNA expression of multidrug resistance 1, which encodes P-glycoprotein, as compared with normal endothelial cells. We found that high levels of vascular endothelial growth factor in tumour-conditioned medium may be responsible for upregulated P-glycoprotein expression. This is a novel mechanism for the acquisition of drug resistance by TECs in a tumour microenvironment. This review focuses on the possibility that TECs can acquire drug resistance.
  • Akhter A, Hayashi Y, Sakurai Y, Ohga N, Hida K, Harashima H
    Int J Pharm 456 1 195 - 201 2013年 [査読有り][通常論文]
  • Kosuke Akiyama, Noritaka Ohga, Nako Maishi, Yasuhiro Hida, Kazuko Kitayama, Taisuke Kawamoto, Takahiro Osawa, Yuko Suzuki, Nobuo Shinohara, Katsuya Nonomura, Masanobu Shindoh, Kyoko Hida
    PATHOLOGY INTERNATIONAL 63 1 37 - 44 2013年01月 [査読有り][通常論文]
     
    Tumor angiogenesis is necessary for tumor progression and metastasis; therefore, tumor blood vessels are potential therapeutic targets in anticancer therapy. We previously reported that tumor endothelial cells (TECs) exhibit different phenotypes compared with normal endothelial cells (NECs), and microarray analyses of mouse TECs and NECs have shown that several genes are upregulated in TECs compared with NECs. Among these genes, the expression levels of prostaglandin F receptor (PTGFR) mRNA, which encodes the prostaglandin F receptor (FP), were higher in TECs than in NECs. It has been reported that FP and its ligand, prostaglandin F2a, are involved in tumor angiogenesis. However, there have been no reports of the expression of PTGFR in the tumor vessels of renal cell carcinoma (RCC). Thus, we isolated human TECs (hTECs) from RCCs. The expression levels of PTGFR mRNA were also upregulated in hTECs. In addition, immunostaining showed that the PTGFR was expressed in human tumor blood vessels in vivo. These findings suggested that PTGFR is a novel TEC marker and that it may be a novel target for antiangiogenic therapy for RCC.
  • Mst. Naznin Ara, Mamoru Hyodo, Noritaka Ohga, Kyoko Hida, Hideyoshi Harashima
    PLOS ONE 7 12 e50174  2012年12月 [査読有り][通常論文]
     
    The present study used a spontaneous cell-based SELEX method (Systemic Evolution of Ligands by EXponential Enrichment) to produce DNA aptamers that specifically bind to cell surface proteins or biomarkers produced by primary cultured mouse tumor endothelial cells (mTECs). In solid tumors, new blood vessels are formed through an angiogenesis process, and this plays a critical role in cancer development as well as metastasis. To combat angiogenesis, an appropriate diagnosis and a molecular-level understanding of the different cancer types are now a high priority. The novel DNA aptamer AraHH001, developed in this study, binds specifically to mTECs with high affinity in the nano-molar range, but does not bind to normal skin endothelial cells (skin-ECs). The selected DNA aptamer was also found to bind to cultured human tumor endothelial cells (hTECs), isolated from a clinical patient with a renal carcinoma. The aptamer AraHH001 showed significant anti-angiogenesis activity by inhibiting tube formation by mTECs on matrigel. Interestingly, a confocal laser scanning microscopy examination of in vitro cellular uptake revealed that AraHH001 was assimilated by mTECs, and became co-localized in acidic compartments, as detected by labeling with Lysotracker Red. Therefore, the development of a specific DNA aptamer that binds to mTECs, as reported here for the first time, holds great promise not only as a therapeutic aptamer but also as a targeted molecular probe that appears to play a major role in angiogenesis, and for the development of a targeted new drug delivery system. Citation: Ara MN, Hyodo M, Ohga N, Hida K, Harashima H (2012) Development of a Novel DNA Aptamer Ligand Targeting to Primary Cultured Tumor Endothelial Cells by a Cell-Based SELEX Method. PLoS ONE 7(12): e50174. doi:10.1371/journal.pone.0050174
  • Kazuhiro Takara, Hiroto Hatakeyama, Golam Kibria, Noritaka Ohga, Kyoko Hida, Hideyoshi Harashima
    JOURNAL OF CONTROLLED RELEASE 162 1 225 - 232 2012年08月 [査読有り][通常論文]
     
    Anti-angiogenic therapy is a potential chemotherapeutic strategy for the treatment of drug resistant cancers. However, a method for delivering such drugs to tumor endothelial cells remains to be a major impediment to the success of anti-angiogenesis therapy. We designed liposomes (LPs) with controlled diameter of around 300 nm, and modified them with a specific ligand and a cell penetrating peptide (CPP) (a dual-ligand LP) for targeting CD13-expressing neovasculature in a renal cell carcinoma (RCC). We modified the LPs with an NGR motif peptide on the top of poly(ethylene glycol) and tetra-arginine (R4) on the surface of the liposome membrane as a specific and CPP ligand, respectively. The large size prevented extravasation of the dual-ligand LP, which allowed it to associate with target vasculature. While a single modification with either the specific or CPP ligand showed no increase in targetability, the dual-ligand enhanced the amount of delivered liposomes after systemic administration to OS-RC-2 xenograft mice. The anti-tumor activity of a dual-ligand LP encapsulating doxorubicin was evaluated and the results were compared with Doxil (R), which is clinically used to target tumor cells. Even though Doxil showed no anti-tumor activity, the dual-ligand LP suppressed tumor growth because the disruption of tumor vessels was efficiently induced. The comparison showed that tumor endothelial cells (TECs) were more sensitive to doxorubicin by 2 orders than RCC tumor cells, and the disruption of tumor vessels was efficiently induced. Collectively, the dual-ligand LP is promising carrier for the treatment of drug resistant RCC via the disruption of TECs. (C) 2012 Elsevier B. V. All rights reserved.
  • ALDH陽性活性腫瘍血管内皮細胞の特性解析(Characterization of Aldehyde dehydrogenase (ALDH) positive tumor endothelial cells)
    大村 瞳, 秋山 廣輔, 大賀 則孝, 間石 奈湖, 樋田 泰浩, 川本 泰輔, 近藤 美弥子, 大澤 崇宏, 山本 和幸, 飯田 順一, 進藤 正信, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 71回 85 - 85 2012年08月 [査読有り][通常論文]
  • がん転移における腫瘍血管内皮細胞の役割(The role of tumor endothelial cells in tumor metastasis)
    間石 奈湖, 大場 雄介, 大賀 則孝, 秋山 廣輔, 山本 和幸, 浜田 淳一, 川本 泰輔, 大澤 崇宏, 近藤 美弥子, 大村 瞳, 進藤 正信, 樋田 泰浩, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 71回 85 - 85 2012年08月 [査読有り][通常論文]
  • 腫瘍血管内皮の血管新生におけるLysyl oxidaseの役割(The role of Lysyl oxidase on proangiogenic phenotypes of tumor endothelial cells)
    秋山 廣輔, 大澤 崇宏, 大賀 則孝, 樋田 泰浩, 北山 和子, 川本 泰輔, 山本 和幸, 間石 奈湖, 近藤 美弥子, 篠原 信雄, 野々村 克也, 進藤 正信, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 71回 85 - 85 2012年08月 [査読有り][通常論文]
  • 腫瘍血管内皮におけるBiglycanの機能解析(Biglycan is a specific marker and an autocrine angiogenic factor of tumor endothelial cells)
    大賀 則孝, 山本 和幸, 樋田 泰浩, 秋山 廣輔, 間石 奈湖, 川本 泰輔, 北山 和子, 大澤 崇宏, 平野 聡, 篠原 信雄, 近藤 正信, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 71回 86 - 86 2012年08月 [査読有り][通常論文]
  • 腫瘍血管内皮細胞のプロスタサイクリン受容体は血管新生をオートクラインに促進する(Prostacyclin receptor in tumor endothelial cells promotes angiogenesis in an autocrine manner)
    土屋 邦彦, 大澤 崇宏, 大賀 則孝, 樋田 泰浩, 北山 和子, 秋山 廣輔, 小野寺 雄一郎, 篠原 信雄, 藤江 学, 進藤 正信, 野々村 克也, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 71回 251 - 251 2012年08月 [査読有り][通常論文]
  • Takahiro Osawa, Noritaka Ohga, Yasuhiro Hida, Kazuko Kitayama, Kosuke Akiyama, Yuichiro Onodera, Manabu Fujie, Nobuo Shinohara, Masanobu Shindoh, Katsuya Nonomura, Kyoko Hida
    CANCER SCIENCE 103 6 1038 - 1044 2012年06月 [査読有り][通常論文]
     
    Molecules highly expressed in tumor endothelial cells (TEC) are important for specific targeting of these cells. Previously, using DNA microarray analysis, we found that the prostacyclin receptor (IP receptor) gene was upregulated in TEC compared with normal endothelial cells (NEC). Although prostacyclin is implicated in re-endothelialization and angiogenesis, its role remains largely unknown in TEC. Moreover, the effect of the IP receptor on TEC has not been reported. In the present study we investigated the function of the IP receptor in TEC. The TEC were isolated from two types of human tumor xenografts in nude mice, while NEC were isolated from normal counterparts. Prostacyclin secretion levels in TEC were significantly higher than those in NEC, as shown using ELISA. Real-time RT-PCR showed that the IP receptor was upregulated in TEC compared with NEC. Furthermore, migration and tube formation of TEC were suppressed by the IP receptor antagonist RO1138452. Immunohistostaining showed that the IP receptor was specifically expressed in blood vessels of renal cell carcinoma specimens, but not in glomerular vessels of normal renal tissue. These findings suggest that the IP receptor is a TEC-specific marker and might be a useful therapeutic target. (Cancer Sci 2012; 103: 10381044)
  • Nako Maishi, Noritaka Ohga, Yasuhiro Hida, Kosuke Akiyama, Kazuko Kitayama, Takahiro Osawa, Yuichiro Onodera, Nobuo Shinohara, Katsuya Nonomura, Masanobu Shindoh, Kyoko Hida
    PATHOLOGY INTERNATIONAL 62 5 309 - 317 2012年05月 [査読有り][通常論文]
     
    Tumor angiogenesis is necessary for progression and metastasis of solid tumor. Tumor blood vessels are morphologically different from their normal counterparts. In this study, we isolated tumor endothelial cells (TECs) and revealed their abnormalities. We have compared the gene expression profiles of TECs and normal endothelial cells (NECs) by microarray analysis and found that several genes were upregulated in TECs. Expression of the chemokine receptor CXCR7 mRNA was higher in TECs than in NECs. However, information regarding the expression of CXCR7 in the tumor vessels of renal cell carcinoma is limited. CXCR7 and its ligand CXCL12 have been implicated in tumor cell survival. In this study, the expression of CXCR7 in the tumor vessels of renal cell carcinoma (RCC) was investigated. Real-time PCR revealed higher expression level of CXCR7 in cultured TECs than in cultured NECs. Furthermore, similar to mouse TECs, immunostaining revealed strong expression of CXCR7 in vivo in human tumor vessels. These findings suggest that CXCR7 is a novel TEC marker and a target for antiangiogenic therapy for RCC.
  • Kosuke Akiyama, Noritaka Ohga, Yasuhiro Hida, Taisuke Kawamoto, Yoshihiro Sadamoto, Shuhei Ishikawa, Nako Maishi, Tomoshige Akino, Miyako Kondoh, Aya Matsuda, Nobuo Inoue, Masanobu Shindoh, Kyoko Hide
    AMERICAN JOURNAL OF PATHOLOGY 180 3 1283 - 1293 2012年03月 [査読有り][通常論文]
     
    Tumor endothelial cells (TECs) are therapeutic targets in anti-angiogenic therapy. Contrary to the traditional assumption, TECs can be genetically abnormal and might also acquire drug resistance. In this study, mouse TECs and normal ECs were isolated to investigate the drug resistance of TECs and the mechanism by which it is acquired. TECs were more resistant to paclitaxel with the up-regulation of multidrug resistance (MDR) 1 mRNA, which encodes the P-glycoprotein, compared with normal ECs. Normal human microvascular ECs were cultured in tumor-conditioned medium (CM) and became more resisting to paclitixel through MDRI mRNA up-regulation and nuclear translocation of Y-box-binding protein 1, which is an MDR1 transcription factor. Vascular endothelial growth factor (VEGF) receptor 2 (VEGFR2) and Akt were activated in human microvascular ECs by tumor CM. We observed that tumor CM contained a significantly high level of VEGF. A VEGFR kinase inhibitor, Ki8751, and a phosphatidylinositol 3-kinase-Akt inhibitor, LY294002, blocked tumor CM-induced MDR1 up-regulation. MDR1 up-regulation, via the VEGF-VEGFR pathway in the tumor microenvironment, is one of the mechanisms of drug resistance acquired by TECs. We observed that VEGF secreted from tumors up-regulated MDR1 through the activation of VEGFR2 and Akt. This process is a novel mechanism of the acquisition of drug resistance by TECs in the tumor microenvironment (Am J Pathol 2012, 180: 1283-1293; DOI: 10.1016/j.ajpath.2011.11.029)
  • Noritaka Ohga, Shuhei Ishikawa, Nako Maishi, Kosuke Akiyama, Yasuhiro Hida, Taisuke Kawamoto, Yoshihiro Sadamoto, Takahiro Osawa, Kazuyuki Yamamoto, Miyako Kondoh, Hitomi Ohmura, Nobuo Shinohara, Katsuya Nonomura, Masanobu Shindoh, Kyoko Hida
    AMERICAN JOURNAL OF PATHOLOGY 180 3 1294 - 1307 2012年03月 [査読有り][通常論文]
     
    An important concept in tumor angiogenesis is that tumor endothelial cells (TECs) are genetically normal and homogeneous. However, we previously reported that TECs differ from normal ECs. Whether the characteristics of TECs derived from different tumors differ remains unknown. To elucidate this, in this study, we isolated two types of TECs from high-metastatic (HM) and low-metastatic (LM) tumors and compared their characteristics. HM tumor-derived TECs (HM-TECs) showed higher proliferative activity and invasive activity than LM tumor-derived TECs (LM-TECs). Moreover, the mRNA expression levels of pro-angiogenic genes, such as vascular endothelial growth factor (VEGF) receptors 1 and 2, VEGF, and hypoxia-inducible factor-1 alpha, were higher in HM-TECs than in LM-TECs. The tumor blood vessels themselves and the surrounding area in HM tumors were exposed to hypoxia. Furthermore, HM-TECs showed higher mRNA expression levels of the sternness-related gene stem cell antigen and the mesenchymal marker CD90 compared with LM-TECs. HM-TECs were spheroid, with a smoother surface and higher circularity in the stem cell spheroid assay. HM-TECs differentiated into osteogenic cells, expressing activated alkaline phosphatase in an osteogenic medium at a higher rate than either LM-TECs or normal ECs. Furthermore, HM-TECs contained more aneuploid cells than LM-TECs. These results indicate that TECs from HM tumors have a more pro-angiogenic phenotype than those from LM tumors. (Am J Pathol 2012,180:1294-1307; DOI: 10.1016/j.ajpath.2011.11.035)
  • K. Yamamoto, N. Ohga, Y. Hida, N. Maishi, T. Kawamoto, K. Kitayama, K. Akiyama, T. Osawa, M. Kondoh, K. Matsuda, Y. Onodera, M. Fujie, K. Kaga, S. Hirano, N. Shinohara, M. Shindoh, K. Hida
    BRITISH JOURNAL OF CANCER 106 6 1214 - 1223 2012年03月 [査読有り][通常論文]
     
    BACKGROUND: We isolated tumour endothelial cells (TECs), demonstrated their abnormalities, compared gene expression profiles of TECs and normal endothelial cells (NECs) by microarray analysis and identified several genes upregulated in TECs. We focused on the gene encoding biglycan, a small leucine-rich repeat proteoglycan. No report is available on biglycan expression or function in TECs. METHODS: The NEC and TEC were isolated. We investigated the biglycan expression and function in TECs. Western blotting analysis of biglycan was performed on sera from cancer patients. RESULTS: Biglycan expression levels were higher in TECs than in NECs. Biglycan knockdown inhibited cell migration and caused morphological changes in TECs. Furthermore, immunostaining revealed strong biglycan expression in vivo in human tumour vessels, as in mouse TECs. Biglycan was detected in the sera of cancer patients but was hardly detected in those of healthy volunteers. CONCLUSION: These findings suggested that biglycan is a novel TEC marker and a target for anti-angiogenic therapy. British Journal of Cancer (2012) 106, 1214-1223. doi: 10.1038/bjc.2012.59 www.bjcancer.com Published online 28 February 2012 (C) 2012 Cancer Research UK
  • Taisuke Kawamoto, Noritaka Ohga, Kosuke Akiyama, Naoya Hirata, Shuji Kitahara, Nako Maishi, Takahiro Osawa, Kazuyuki Yamamoto, Miyako Kondoh, Masanobu Shindoh, Yasuhiro Hida, Kyoko Hida
    PLOS ONE 7 3 e34045  2012年03月 [査読有り][通常論文]
     
    Background: Increasing evidence indicates that tumor endothelial cells (TEC) differ from normal endothelial cells (NEC). Our previous reports also showed that TEC were different from NEC. For example, TEC have chromosomal abnormality and proangiogenic properties such as high motility and proliferative activity. However, the mechanism by which TEC acquire a specific character remains unclear. To investigate this mechanism, we focused on tumor-derived microvesicles (TMV). Recent studies have shown that TMV contain numerous types of bioactive molecules and affect normal stromal cells in the tumor microenvironment. However, most of the functional mechanisms of TMV remain unclear. Methodology/Principal Findings: Here we showed that TMV isolated from tumor cells were taken up by NEC through endocytosis. In addition, we found that TMV promoted random motility and tube formation through the activation of the phosphoinositide 3-kinase/Akt pathway in NEC. Moreover, the effects induced by TMV were inhibited by the endocytosis inhibitor dynasore. Our results indicate that TMV could confer proangiogenic properties to NEC partly via endocytosis. Conclusion: We for the first time showed that endocytosis of TMV contributes to tumor angiogenesis. These findings offer new insights into cancer therapies and the crosstalk between tumor and endothelial cells mediated by TMV in the tumor microenvironment.
  • Chikara Muraki, Noritaka Ohga, Yasuhiro Hida, Hiroshi Nishihara, Yasutaka Kato, Kunihiko Tsuchiya, Kohei Matsuda, Yasunori Totsuka, Masanobu Shindoh, Kyoko Hida
    INTERNATIONAL JOURNAL OF CANCER 130 1 59 - 70 2012年01月 [査読有り][通常論文]
     
    Tumor angiogenesis is necessary for solid tumor progression and metastasis. Cyclooxygenase (COX)-2 is known to play an important role in cancer growth and invasion, and it activates the signaling pathways controlling cell proliferation, migration, apoptosis, and angiogenesis. COX-2 is reported to be expressed in many cancer cells. Several studies have reported successful treatment of cancer cells with COX-2 inhibitors (COX-2is). However, the effect of COX-2 inhibition on the tumor endothelium remains to be elucidated. Our study shows that COX-2 is expressed in the vasculature of surgically resected human tumors. To investigate the effects of COX-2 inhibition on the tumor endothelium in vitro, we isolated tumor endothelial cells (TECs) from human melanoma and oral carcinoma xenografts in mice, in which we confirmed that tumor growth was suppressed by inhibiting angiogenesis with the COX-2is NS398. COX-2 mRNA was upregulated in TECs compared to normal endothelial cells (NECs). Cell migration and proliferation were suppressed by NS398 in TECs but not in NECs. The effects of NS398 in vivo were consistent with the in vitro results. The number of CD133(+)/vascular endothelial growth factor receptor-2(+) cells in circulation was significantly suppressed by COX-2 inhibition. In addition, the number of progenitor marker-positive cells decreased in the tumor blood vessels after COX-2i treatment, which suggests that the homing of progenitor cells into the tumor was also blocked. We conclude that NS398 specifically targets both TECs and vascular progenitor cells without affecting NECs.
  • Kyoko Hida, Taisuke Kawamoto, Noritaka Ohga, Kosuke Akiyama, Yasuhiro Hida, Masanobu Shindoh
    PATHOLOGY INTERNATIONAL 61 11 630 - 637 2011年11月 [査読有り][通常論文]
     
    Tumor blood vessels play an important role in tumor progression and metastasis. Thus, targeting the tumor blood vessels is an important strategy in cancer therapy. Tumor blood vessels generally arise from pre-existing vessels and have been thought to be genetically normal. However, they have been shown to differ from their normal counterparts, e. g. with regard to the morphological changes. We isolated tumor endothelial cells (TEC) from mouse tumor xenografts and showed that they were abnormal. TEC up-regulate many genes, proliferate more rapidly and migrate more than normal endothelial cells (NEC). Furthermore, the TEC in our study were cytogenetically abnormal. We concluded that TEC can acquire cytogenetic abnormalities while in the tumor microenvironment. In order to develop ideal antiangiogenic therapies, understanding the crosstalk between blood vessels and the tumor microenvironment is important. This review considers the current studies on TEC abnormalities and discusses the possible mechanism by which the tumor microenvironment produces abnormal TEC.
  • 癌細胞培養上清による正常血管内皮の薬剤抵抗性の獲得(Endothelial cells acquire drug resistance by factors from tumor cells)
    秋山 廣輔, 大賀 則孝, 樋田 泰浩, 川本 泰輔, 定本 圭弘, 石川 修平, 近藤 美弥子, 間石 奈湖, 大澤 崇宏, 山本 和幸, 進藤 正信, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 70回 107 - 107 2011年09月 [査読有り][通常論文]
  • 低酸素環境が血管内皮細胞に及ぼす影響(Hypoxia is a key factor to acquisition of tumor endothelial cells abnormalities)
    近藤 美弥子, 大賀 則孝, 秋山 廣輔, 間石 奈湖, 川本 泰輔, 大澤 崇宏, 山本 和幸, 大村 瞳, 樋田 泰浩, 進藤 正信, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 70回 124 - 124 2011年09月 [査読有り][通常論文]
  • 腫瘍由来microvesiclesが血管内皮細胞の運動能と管腔形成能を亢進させる(Tumor-derived microvesicles promote cell motility and tube formation in endothelial cells)
    川本 泰輔, 大賀 則孝, 秋山 廣輔, 間石 奈湖, 大澤 崇宏, 山本 和幸, 近藤 美弥子, 進藤 正信, 樋田 泰浩, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 70回 125 - 125 2011年09月 [査読有り][通常論文]
  • 腫瘍血管内皮におけるBiglycanの機能解析(Biglycan is angiogenic factor stimulating cell migration of tumor endothelium)
    山本 和幸, 大賀 則孝, 樋田 泰浩, 北山 和子, 間石 奈湖, 大澤 崇宏, 川本 泰輔, 近藤 美弥子, 秋山 広輔, 加賀 基知三, 平野 聡, 進藤 正信, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 70回 125 - 126 2011年09月 [査読有り][通常論文]
  • 腫瘍微小環境における腫瘍血管内皮異常性の獲得(Tumor microenvironment induces abnormality in tumor endothelial cells)
    樋田 京子, 大賀 則孝, 秋山 廣輔, 樋田 泰浩
    日本癌学会総会記事 70回 336 - 336 2011年09月 [査読有り][通常論文]
  • 腫瘍血管内皮細胞とがん転移との相互作用解析(Analysis of interaction between tumor endothelial cells and tumor metastasis)
    間石 奈湖, 大賀 則孝, 樋田 泰浩, 大場 雄介, 浜田 淳一, 秋山 廣輔, 山本 和幸, 大澤 崇宏, 近藤 美弥子, 川本 泰輔, 進藤 正信, 井上 農夫男, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 70回 430 - 430 2011年09月 [査読有り][通常論文]
  • 転移能の異なる腫瘍から分離された腫瘍血管内皮細胞の比較解析(Comparative characterization of tumor endothelial cells isolated from highly and low metastatic tumors)
    大賀 則孝, 石川 修平, 樋田 泰浩, 秋山 広輔, 間石 奈湖, 近藤 美弥子, 川本 泰輔, 進藤 正信, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 70回 430 - 430 2011年09月 [査読有り][通常論文]
  • 腫瘍血管内皮におけるLysyl oxidaseの機能解析(The role of Lysyl oxidase on abnormal phenotypes of tumor endothelial cells)
    大澤 崇宏, 大賀 則孝, 北山 和子, 樋田 泰浩, 川本 泰輔, 近藤 美弥子, 間石 奈湖, 山本 和幸, 秋山 廣輔, 篠原 信雄, 野々村 克也, 進藤 正信, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 70回 430 - 430 2011年09月 [査読有り][通常論文]
  • Golam Kibria, Hiroto Hatakeyama, Noritaka Ohga, Kyoko Hida, Hideyoshi Harashima
    JOURNAL OF CONTROLLED RELEASE 153 2 141 - 148 2011年07月 [査読有り][通常論文]
     
    The objective of this study was to develop an efficient dual-ligand based PEGylated liposomal delivery system that had target specificity as well as properties that would enhance cellular uptake. PEGylated liposomes (PEG-LP) were prepared by the lipid film hydration method by adding distearoyl phosphoethanolamine-polyethylene-glycol-2000 conjugate (DSPE-PEG2000) to a lipid mixture. The cyclic RGD (Arg-Gly-Asp) peptide, a specific ligand with affinity for Integrin alpha(v)beta(3) was coupled to the distal end of the PEG on the PEG-LP (RGD-PEG-LP). Stearylated octaarginine (STR-R8) was incorporated on the surface of the RGD-PEG-LP as dual-ligand (R8/RGD-PEG-LP) that functions as a cell penetrating peptide (CPP). RGD-PEG-LP and R8/RGD-PEG-LP were preferentially taken up by caveolae-mediated and clathrin-mediated endocytosis pathways, respectively. Compared to PEG-LP, R8/RGD-PEG-LP showed an enhanced cellular uptake as well as a higher transfection efficiency in Integrin alpha(v)beta(3) expressing cells. However, the amount of cellular uptake or gene expression by the single ligand versions was negligible, even in Integrin alpha(v)beta(3) expressing cells. No remarkable difference in cellular uptake or gene expression was observed for cells in which the expression of targeted receptors was absent. It can be concluded that dual-ligand modified PEG-LP possesses a strong capability for the efficient internalization of PEG-LP and consequently would be an effective tool for the targeted delivery of macromolecules or chemotherapeutics through accelerated cellular uptake. (C) 2011 Elsevier B.V. All rights reserved.
  • 血管の多様性 組織発生から疾患におけるダイナミクス 腫瘍血管内皮の多様性と薬剤抵抗性(Cellular and functional diversity of the vasculature: health and disease Heterogeneity of Tumor Endothelium and Drug Resistance)
    樋田 京子, 大賀 則孝, 秋山 廣輔, 樋田 泰浩, 進藤 正信
    日本細胞生物学会大会講演要旨集 63回 94 - 94 2011年05月 [査読有り][通常論文]
  • 腫瘍細胞由来因子よる正常血管内皮細胞の薬剤抵抗性の獲得(Endothelial cells acquire drug resistance by factors from tumor cells)
    秋山 廣輔, 大賀 則孝, 樋田 泰浩, 石川 修平, 定本 圭弘, 川本 泰輔, 近藤 美弥子, 間石 奈湖, 鳥居 ちさほ, 北山 和子, 進藤 正信, 樋田 京子
    日本細胞生物学会大会講演要旨集 63回 171 - 171 2011年05月 [査読有り][通常論文]
  • T. Kurosu, N. Ohga, Y. Hida, N. Maishi, K. Akiyama, W. Kakuguchi, T. Kuroshima, M. Kondo, T. Akino, Y. Totsuka, M. Shindoh, F. Higashino, K. Hida
    BRITISH JOURNAL OF CANCER 104 5 819 - 829 2011年03月 [査読有り][通常論文]
     
    BACKGROUND: Tumour stromal cells differ from its normal counterpart. We have shown that tumour endothelial cells (TECs) isolated from tumour tissues are also abnormal. Furthermore, we found that mRNAs of vascular endothelial growth factor-A (VEGF-A) and cyclooxygenase-2 (COX-2) were upregulated in TECs. Vascular endothelial growth factor-A and COX-2 are angiogenic factors and their mRNAs contain an AU-rich element (ARE). AU-rich element-containing mRNAs are reportedly stabilised by Hu antigen R (HuR), which is exported to the cytoplasm. METHODS: Normal endothelial cell (NEC) and two types of TECs were isolated. We evaluated the correlation of HuR and accumulation of VEGF-A and COX-2 mRNAs in TECs and effects of HuR on biological phenotypes of TECs. RESULTS: The HuR protein was accumulated in the cytoplasm of TECs, but not in NECs. Vascular endothelial growth factor-A and COX-2 mRNA levels decreased due to HuR knockdown and it was shown that these ARE-mRNA were bound to HuR in TECs. Furthermore, HuR knockdown inhibited cell survival, random motility, tube formation, and Akt phosphorylation in TECs. CONCLUSION: Hu antigen R is associated with the upregulation of VEGF-A and COX-2 mRNA in TECs, and has an important role in keeping an angiogenic switch on, through activating angiogenic phenotype in tumour endothelium. British Journal of Cancer (2011) 104, 819-829. doi:10.1038/bjc.2011.20 www.bjcancer.com Published online 1 February 2011 (C) 2011 Cancer Research UK
  • Yukie Nitta, Kyoko Hida, Tetsuya Kitamura, Fumihiro Higashino, Noritaka Ohga, Kazuaki Fukushima, Masanobu Shindoh
    ONCOLOGY LETTERS 2 1 79 - 83 2011年01月 [査読有り][通常論文]
     
    Tumor metastasis to lymph nodes occurs through the lymphatic vessels located in the tumor circumference. However, few studies have focused on the phenotypes of lymphatic vessels around these tumors. We investigated the characteristics of the lymph vessels of tongue squamous cell carcinoma (SCC) and compared them to clinicopathological characteristics. A total of 43 patients diagnosed as having tongue SCC consulted Hokkaido University Hospital were examined. The lymphatic vessels were identified by antibody D2-40 and the number and diameter of tumor lymphatic vessels were measured. The proliferative activity of lymphatic endothelial cells was also examined by immunostaining using antibody MIB-1. We then measured the DNA density of lymphatic endothelial cells in normal and tumor tissues. The number of tumor lymphatic vessels significantly increased in highly metastatic cases of tongue SCC, particularly in cases with a large number of micro lymphatic vessels. A significant correlation was found between the metastatic and proliferative activity of tumor lymphatic endothelial cells. Moreover, the DNA density of tumor lymphatic endothelial cells increased compared to normal tissues. These results suggest that the phenotypes of tumor lymphatic endothelial cells are an indicator of lymph node metastasis of tongue SCC.
  • 腫瘍血管内皮細胞と腫瘍細胞との相互作用解析(Analysis of interaction between tumor endothelial cells and tumor cells)
    間石 奈湖, 大賀 則孝, 秋山 廣輔, 北山 和子, 近藤 美弥子, 川本 泰輔, 大澤 崇宏, 山本 和幸, 樋田 泰浩, 大場 雄介, 進藤 正信, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 69回 103 - 103 2010年08月 [査読有り][通常論文]
  • 癌細胞培養上清による正常血管内皮の薬剤抵抗性の獲得(Emdothelial cells acquire drug resistance by factors from tumor cells)
    秋山 廣輔, 大賀 則孝, 樋田 泰浩, 黒須 拓郎, 北山 和子, 石川 修平, 近藤 美弥子, 間石 奈湖, 川本 泰介, 大澤 崇宏, 山本 和幸, 進藤 正信, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 69回 103 - 103 2010年08月 [査読有り][通常論文]
  • がん患者末梢循環血管内皮細胞における遺伝子発現解析(Gene expression analysis of circulating endothelial cells in cancer patients)
    近藤 美弥子, 大賀 則孝, 黒須 拓郎, 北山 和子, 秋山 廣輔, 間石 奈湖, 川本 泰輔, 大澤 崇宏, 山本 和幸, 樋田 泰浩, 進藤 正信, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 69回 130 - 131 2010年08月 [査読有り][通常論文]
  • 転移能の異なる腫瘍から分離された腫瘍血管内皮細胞の特性解析(Comparative characterization of tumor endothelial cells isolated from highly and low metastatic tumors)
    大賀 則孝, 石川 修平, 樋田 泰浩, 秋山 広輔, 北山 和子, 近藤 美弥子, 間石 奈湖, 川本 泰輔, 大澤 崇宏, 山本 和幸, 進藤 正信, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 69回 270 - 270 2010年08月 [査読有り][通常論文]
  • 癌が分泌する小胞は内皮細胞の遺伝子発現を変化させる(Tumor-derived microvesicles cause gene changes in endothelial cells)
    川本 泰輔, 大賀 則孝, 北山 和子, 秋山 廣輔, 近藤 美弥子, 間石 奈湖, 大澤 崇宏, 山本 和幸, 樋田 泰浩, 進藤 正信, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 69回 497 - 498 2010年08月 [査読有り][通常論文]
  • Kazuhiro Takara, Hiroto Hatakeyama, Noritaka Ohga, Kyoko Hida, Hideyoshi Harashima
    INTERNATIONAL JOURNAL OF PHARMACEUTICS 396 1-2 143 - 148 2010年08月 [査読有り][通常論文]
     
    In this study, a dual-ligand liposomal system comprised of a specific ligand and a cell penetrating peptide (CPP) is described to enhance selectivity and cellular uptake. Dual-ligand PEGylated liposomes were prepared by modifying the end of the PEG with an NGR motif peptide, followed by a surface coating of the liposomes with stearylated oligoarginine (STR-RX) The NGR motif recognizes CD13. a marker protein located on tumor endothelial cells A suitable number of RX units was determined to be R4, since it can be masked by the PEG aqueous layer Although no enhanced cellular uptake was observed when a single modification of PEGylated liposomes with either NGR- or STR-R4 was used, the dual-modification with NGR and STR-R4 stimulated uptake of PEGylated liposomes by CD13 positive cells, and this uptake was superior to that obtained by PEG-unmodified liposomes modified with STR-R4 The dual-ligand system shows a synergistic effect on cellular uptake Collectively, the dual-ligand system promises to be useful in the development efficient and specific drug delivery systems. (C) 2010 Elsevier B V All rights reserved.
  • Kunihiko Tsuchiya, Kyoko Hida, Yasuhiro Hida, Chikara Muraki, Noritaka Ohga, Tomoshige Akino, Takeshi Kondo, Tetsuya Miseki, Koji Nakagawa, Masanobu Shindoh, Toru Harabayashi, Nobuo Shinohara, Katsuya Nonomura, Masanobu Kobayashi
    INTERNATIONAL JOURNAL OF ONCOLOGY 36 6 1379 - 1386 2010年06月 [査読有り][通常論文]
     
    Adrenomedullin (AM) is a multifunctional 52-amino acid peptide. AM has several effects and acts as a growth factor in several types of cancer cells. Our previous study revealed that an AM antagonist (AMA) suppressed the growth of pancreatic tumors in mice, although its mechanism was not elucidated. In this study, we constructed an AMA expression vector and used it to treat renal cell carcinoma (RCC) in mice. This AMA expression vector significantly reduced tumor growth in mice. In addition, microvessel density was decreased in AMA-treated tumors. To analyze the effect of AMA on tumor angiogenesis in this model, tumor endothelial cells (TECs) were isolated from RCC xenografts. TEC proliferation was stimulated by AM and it was inhibited by AMA significantly. AM induced migration of TECs and it was also blocked by AMA. However, normal ECs (NECs) were not affected by either AM or AMA. These results demonstrate that AMA has inhibitory effects on TECs specifically, not on NEC, thereby inhibiting tumor angiogenesis. Furthermore, we showed that vascular endothelial growth factor-induced mobilization of endothelial progenitor cell (EPC) into circulation was inhibited by AMA. These results suggest that AMA can be considered a good anti-angiogenic reagent that selectively targets TECs and EPC in renal cancer.
  • Yuka Suzuki, Noritaka Ohga, Yasuyuki Morishita, Kyoko Hida, Kohei Miyazono, Tetsuro Watabe
    JOURNAL OF CELL SCIENCE 123 10 1684 - 1692 2010年05月 [査読有り][通常論文]
     
    Members of the bone morphogenetic protein (BMP) family have been implicated in the development and maintenance of vascular systems. Whereas members of the BMP-2/4 and osteogenic protein-1 groups signal via activin receptor-like kinase (ALK)-2, ALK-3 and ALK-6, BMP-9 and BMP-10 have been reported to bind to ALK-1 in endothelial cells. However, the roles of BMP-9-ALK-1 signaling in the regulation of endothelial cells have not yet been fully elucidated. Here, using various systems, we examined the effects of BMP-9 on the proliferation of endothelial cells. Vascular-tube formation from ex vivo allantoic explants of mouse embryos was promoted by BMP-9. BMP-9, as well as BMP-4 and BMP-6, also induced the proliferation of in-vitro-cultured mouse embryonic-stem-cell-derived endothelial cells (MESECs) by inducing the expression of vascular endothelial growth factor receptor 2 and Tie2, a receptor for angiopoietin-1. A decrease in ALK-1 expression or expression of constitutively active ALK-1 in MESECs abrogated and mimicked the effects of BMP-9 on the proliferation of MESECs, respectively, suggesting that BMP-9 promotes the proliferation of these cells via ALK-1. Furthermore, in vivo angiogenesis was promoted by BMP-9 in a Matrigel plug assay and in a BxPC3 xenograft model of human pancreatic cancer. Consistent with these in vivo findings, BMP-9 enhanced the proliferation of in-vitro-cultured normal endothelial cells from dermal tissues of adult mice and of tumor-associated endothelial cells isolated from tumor xenografts in host mice. These findings suggest that BMP-9 signaling activates the endothelium tested in the present study via ALK-1.
  • Kazuaki Kajimoto, Md. Nazir Hossen, Kyoko Hida, Noritaka Ohga, Hidetaka Akita, Mamoru Hyodo, Yasuhiro Hida, Hideyoshi Harashima
    JOURNAL OF IMMUNOLOGICAL METHODS 357 1-2 43 - 50 2010年05月 [査読有り][通常論文]
     
    Adipose tissue has long been considered to be a simple tissue that contains adipocytes. Because of this, the isolation and characterization of microvascular endothelical cells, which are also present in adipose tissue, have been neglected, even though they are components of a capillary network that surrounds each individual adipocyte. Here we report on a protocol for producing highly purified murine microvascular endothelial cells (MECs) from diverse sites of murine adipose tissues including inguinal and epididymal adipose tissues. The method is based on a combination of negative and positive immunomagnetic selection. The protocol involves the preparation of a single cell suspension (digestion, filtration and density gradient centrifugation), immunomagnetic enrichment of the CD45(-) cell population and the purification of the MECs by a combination of common specific markers CD31, CD 102 and isolectin B4. The isolated MECs can be successively cultured for 10 to 12 passages without any detectable changes in morphology and phenotype. Therefore, the method described herein represents a protocol for the isolation and long-term maintenance of highly pure mouse MECs in high yields from adipose tissues. (C) 2010 Elsevier B.V. All rights reserved.
  • Kohei Matsuda, Noritaka Ohga, Yasuhiro Hida, Chikara Muraki, Kunihiko Tsuchiya, Takuro Kurosu, Tomoshige Akino, Shou-Ching Shih, Yasunori Totsuka, Michael Klagsbrun, Masanobu Shindoh, Kyoko Hida
    BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS 394 4 947 - 954 2010年04月 [査読有り][通常論文]
     
    Tumor angiogenesis is necessary for solid tumor progression and metastasis. Increasing evidence indicates that tumor endothelial cells (TECs) are more relevant to the study of tumor angiogenesis than normal endothelial cells (NECs) because their morphologies and gene expression are different from NECs. However, it is challenging to isolate and culture large numbers of pure ECs from tumor tissue since the percentage of ECs is only about 1-2% and tumor cells and fibroblasts easily overgrow them. In addition, there has been concern that isolated TECs may lose their special phenotype once they are dissociated from tumor cells. In this study, we have successfully purified murine TECs from four different human tumor xenografts and NECs from murine dermal tissue. Isolated ECs expressed endothelial markers, such as CD31, VE-cadherin (CD144), and endoglin (CD105), for more than 3 months after isolation. TECs maintained tumor endothelial-specific markers, such as tumor endothelial marker 8 (TEM8) and aminopeptidase N (APN), as in tumor blood vessels in vivo. In addition, TECs were more proliferative and motile than NECs. TECs showed a higher response to VEGF and higher expression of VEGF receptors-1 and -2 than NECs did. Stem cell antigen-1 was up-regulated in all four TECs, suggesting that they have a kind of sternness. Cultured TECs maintain distinct biological differences from NECs as in vivo. In conclusion, it was suggested that TECs are relevant material for tumor angiogenesis research. (C) 2010 Elsevier Inc. All rights reserved.
  • Kyoko Hida, Noritaka Ohga, Yasuhiro Hida, Masanobu Shindoh
    Japanese Dental Science Review 46 1 26 - 32 2010年02月 [査読有り][通常論文]
     
    Tumor angiogenesis is necessary for solid tumor progression and metastasis. Thus, targeting tumor blood vessels is an important strategy for cancer therapy. Especially, it would give large benefit to head and neck cancer patients if ideal anti-angiogenic drug is developed. Tumor blood vessels have been shown to differ from their normal counterparts, for example, by changes in morphology. An important concept in tumor angiogenesis is that tumor endothelial cells are assumed to be genetically normal, even though these endothelial cells are structurally and functionally abnormal. To date, many anti-angiogenic drugs have been developed, but it has been also reported to cause toxic side effects. To develop ideal anti-angiogenic therapies, understanding tumor endothelial cell abnormalities is important. We have isolated tumor endothelial cells from mouse tumor xenografts and have shown that tumor endothelial cells are abnormal. Tumor endothelial cells upregulate many genes, such as epidermal growth factor receptor. Tumor endothelial cells are also more sensitive to EGF. Unexpectedly, tumor endothelial cells were cytogenetically abnormal. In marked contrast, freshly isolated normal endothelial cells were diploid. We conclude that tumor endothelial cells can acquire cytogenetic abnormalities while in the tumor microenvironment. Here, we provide an overview of the current studies on tumor endothelial cell abnormalities. © 2009 Japanese Association for Dental Science.
  • 樋田 京子
    Oral Sci Int 7 1 1 - 10 2010年 [査読有り][通常論文]
  • Tomoshige Akino, Kyoko Hida, Yasuhiro Hida, Kunihiko Tsuchiya, Deborah Freedman, Chikara Muraki, Noritaka Ohga, Kouhei Matsuda, Kousuke Akiyama, Toru Harabayashi, Nobuo Shinohara, Katsuya Nonomura, Michael Klagsbrun, Masanobu Shindoh
    AMERICAN JOURNAL OF PATHOLOGY 175 6 2657 - 2667 2009年12月 [査読有り][通常論文]
     
    Tumor blood vessels are thought to contain genetically normal and stable endothelial cells (ECs), unlike tumor cells, which typically display genetic instability. Yet, chromosomal aberration in human tumor-associated ECs (hTECs) in carcinoma has not yet been investigated. Here we isolated TECs from 20 human renal cell carcinomas and analyzed their cytogenetic abnormalities. The degree of aneuploidy was analyzed by fluorescence in situ hybridization using chromosome 7 and chromosome 8 DNA probes in isolated hTECs. In human renal cell carcinomas, 22-58% (median, 33%) of uncultured hTECs were aneuploid, whereas normal ECs were diploid. The mechanisms governing TEC aneuploidy were then studied using mouse TECs (mTECs) isolated from xenografts of human epithelial tumors. To investigate the contribution of progenitor cells to aneuploidy in mTECs, CD133(+) and CD133(-) mTECs were compared for aneuploidy. CD133+ mTECs showed aneuploidy more frequently than CD133- mTECs. This is the first report showing cytogenetic abnormality of hTECs in carcinoma, contrary to traditional belief. Cytogenetic alterations in tumor vessels of carcinoma therefore can occur and may play a significant role in modifying tumor-stromal interactions. (Am J Pathol 2009, 175:2657-2667; DOI: 10.2353/ajpath.2009.090202)
  • Noritaka Ohga, Kyoko Hida, Yasuhiro Hida, Chikara Muraki, Kunihiko Tsuchiya, Kohei Matsuda, Yoichi Ohiro, Yasunori Totsuka, Masanobu Shindoh
    Cancer science 100 10 1963 - 70 2009年10月 [査読有り][通常論文]
     
    The polyphenol epigallocatechin-3 gallate (EGCG) in green tea suppresses tumor growth by direct action on tumor cells and by inhibition of angiogenesis, but it is not known whether it specifically inhibits tumor angiogenesis. We examined the anti-angiogenic effect of EGCG on tumor-associated endothelial cells (TEC), endothelial progenitor cells (EPC), and normal endothelial cells (NEC). EGCG suppressed the migration of TEC and EPC but not NEC. EGCG also inhibited the phosphorylation of Akt in TEC but not in NEC. Furthermore, vascular endothelial growth factor-induced mobilization of EPC into circulation was inhibited by EGCG. MMP-9 in the bone marrow plasma plays key roles in EPC mobilization into circulation. We observed that expression of MMP-9 mRNA was downregulated by EGCG in mouse bone marrow stromal cells. In an in vivo model, EGCG suppressed growth of melanoma and reduced microvessel density. Our study showed that EGCG has selective anti-angiogenic effects on TEC and EPC. It is suggested that EGCG could be a promising angiogenesis inhibitor for cancer therapy.
  • 転移能の異なる腫瘍から分離された腫瘍血管内皮細胞の特性解析(Comparative characterization of tumor endothelial cells isolated from high and low metastatic tumors)
    石川 修平, 大賀 則孝, 樋田 泰浩, 秋野 文臣, 黒須 拓郎, 秋山 廣輔, 近藤 美弥子, 間石 奈湖, 野々村 克也, 進藤 正信, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 68回 212 - 212 2009年08月 [査読有り][通常論文]
  • 緑茶ポリフェノールEGCGは腫瘍血管内皮に対する抑制効果を有する(Inhibitory Effects of Epigallocatechin-3 Gallate, a Polyphenol in Green Tea, on Tumor-Associated Endothelial Cells)
    大賀 則孝, 樋田 泰浩, 土屋 邦彦, 村木 力, 秋山 広輔, 近藤 美弥子, 間石 奈湖, 黒須 拓郎, 大廣 洋一, 戸塚 靖則, 進藤 正信, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 68回 219 - 219 2009年08月 [査読有り][通常論文]
  • 癌細胞培養上清による正常血管内皮の異常性獲得(Endothelial cells acquire abnormalities by factors from tumor cells)
    秋山 廣輔, 大賀 則孝, 樋田 泰浩, 秋野 文臣, 黒須 拓郎, 石川 修平, 近藤 美弥子, 間石 奈湖, 井上 農夫男, 進藤 正信, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 68回 269 - 269 2009年08月 [査読有り][通常論文]
  • 腫瘍血管内皮細胞におけるHuRを介したCOX-2及びVEGFA mRNAの発現亢進(Tumor endothelial cells upregulate COX-2 and VEGF-A, ARE-containing mRNAs which are associated with HuR)
    黒須 拓郎, 大賀 則孝, 東野 史裕, 樋田 泰浩, 格口 渉, 黒嶋 雄志, 秋野 文臣, 石川 修平, 秋山 廣輔, 戸塚 靖則, 進藤 正信, 樋田 京子
    日本癌学会総会記事 68回 393 - 393 2009年08月 [査読有り][通常論文]
  • Souichi Tanaka, Tetsuya Kitamura, Fumihiro Higashino, Kyoko Hida, Yoichi Ohiro, Mitsunobu Ono, Masanobu Kobayashi, Yasunori Totsuka, Masanobu Shindoh
    MOLECULAR MEDICINE REPORTS 2 2 313 - 318 2009年03月 [査読有り][通常論文]
     
    Pim-1 is a serine/threonine kinase as well as a protooncogene that induces T-cell lymphoma. Pim-1 induces cell cycle progression in cooperation with c-Myc and acts as an inhibitor of apoptotic cell death, actions that are involved in blood cell oncogenesis. However, little is known regarding the role of Pim-1 in oral carcinogenesis. We investigated Pim-1 expression in tongue squamous cell carcinoma (SCC) and examined its clinicopathological features. Western blotting was performed in 6 oral SCC cell lines, with Pim-1 being detected in all 6 of the lines. Immunohistochemical detection of Pim-1 was carried out in 39 cases of tongue SCC and analyzed in terms of its associated clinicopathological features. Pim-1 was expressed in 17/39 cases of tongue carcinoma, and was significantly correlated with lymph node metastasis. The role of Pim-1 in cell motility was further examined in HSC3 cells using the GTP-binding assay for Rho family protein, the motility assay and siRNA treatment. Rac 1 activation was observed, and cell motility was reduced when Pim-1 was knocked down by siRNA. These results indicate. that Pim-1 is involved in the carcinogenesis of oral SCC and is correlated to metastasis, which is in part associated with the enhancement of cell motility.
  • Kyoko Hida, Noritaka Ohga, Takuro Kurosu, Yasunori Totsuka, Masanobu Shindoh
    Oral Science International 7 1 1 - 10 2009年 [査読有り][通常論文]
     
    Tumor blood vessels play an important role in tumor progression and metastasis. Thus, targeting tumor blood vessels is an important strategy for cancer therapy, especially for head and neck cancer patients. Tumor blood vessels generally sprout from pre-existing vessels and have been thought to be genetically normal. However, tumor blood vessels have been shown to differ from their normal counterparts, for example, by changes in morphology. The authors isolated tumor endothelial cells (TECs) from mouse tumor xenografts and have shown that the TECs are abnormal. TECs up-regulate many genes and proliferate more rapidly and migrate more than normal endothelial cells (NECs). Furthermore, TECs were found to be cytogenetically abnormal. We conclude that TECs can acquire cytogenetic abnormalities while in a tumor microenvironment. To develop ideal antiangiogenic therapies, understanding the crosstalk between blood vessels and the tumor microenvironment is important. Here, we provide an overview of the current studies on TEC abnormalities and a discussion about possible mechanisms for how tumor the microenvironment makes TECs abnormal. © 2009, Japanese Stomatological Society. All rights reserved.
  • ヒト悪性腫瘍における腫瘍血管内皮細胞の遺伝子異常(Cytogenetic Abnormalities of Tumor-Associated Endothelial Cells in Human Malignant Tumor)
    秋野 文臣, 樋田 京子, 土屋 邦彦, 樋田 泰浩, クラグスバーン・マイケル, 大賀 則孝, 松田 光平, 黒須 拓郎, 佐澤 陽, 篠原 信雄, 野々村 克也, 進藤 正信
    日本癌学会総会記事 67回 297 - 297 2008年09月 [査読有り][通常論文]
  • 腫瘍血管内皮細胞ならびに血管内皮前駆細胞は正常血管内皮細胞に比べ、緑茶ポリフェノールに感受性を有する(Tumor endothelial cells and EPC are more sensitive to EGCG compared to normal endothelial cells)
    大賀 則孝, 樋田 京子, 村木 力, 樋田 泰浩, 土屋 邦彦, 大廣 洋一, 戸塚 靖則, 進藤 正信
    日本癌学会総会記事 67回 365 - 365 2008年09月 [査読有り][通常論文]
  • 腫瘍血管内皮細胞における特異マーカーの解析(The Analysis of Gene Expression of Tumor Endothelial Cells)
    黒須 拓郎, 樋田 京子, 樋田 泰浩, 藤江 学, 小野寺 雄一郎, 土屋 邦彦, 村木 力, 大賀 則孝, 松田 光平, 秋野 文臣, 戸塚 靖則, 進藤 正信
    日本癌学会総会記事 67回 442 - 442 2008年09月 [査読有り][通常論文]
  • A. C. Dudley, S-C Shih, A. R. Cliffe, K. Hida, M. Klagsbrun
    BRITISH JOURNAL OF CANCER 99 1 118 - 125 2008年07月 [査読有り][通常論文]
     
    Alterations in the tumour suppressor p53 have been reported in tumour-associated stromal cells; however, the consequence of these alterations has not been elucidated. We investigated p53 status and responses to p53-activating drugs using tumour-associated stromal cells from A375 melanoma and PC3 prostate carcinoma xenografts, and a spontaneous prostate tumour model ( TRAMP). p53 accumulation after treatment with different p53-activating drugs was diminished in tumour-associated stromal cells compared to normal stromal cells. Tumour-associated stromal cells were also less sensitive to p53-activating drugs - this effect could be reproduced in normal stromal cells by p53 knockdown. Unlike normal stromal cells, tumour stromal cells failed to arrest in G(2) after etoposide treatment, failed to upregulate p53-inducible genes, and failed to undergo apoptosis after treatment with vincristine. The lower levels of p53 in tumour stromal cells accompanied abnormal karyotypes and multiple centrosomes. Impaired p53 function in tumour stroma might be related to genomic instability and could enable stromal cell survival in the destabilising tumour microenvironment.
  • Hironobu Hata, Tetsuya Kitamura, Fumihiro Higashino, Kyoko Hida, Koichi Yoshida, Yoichi Ohiro, Yasunori Totsuka, Yoshimasa Kitagawa, Masanobu Shindoh
    ONCOLOGY REPORTS 19 5 1093 - 1098 2008年05月 [査読有り][通常論文]
     
    Matrix metalloproteinase (MMP) is closely involved in the degradation of extracellular matrix and confers invasive and metastatic potential to malignant tumors. MMP-2 is a type-IV collagenase secreted as a proenzyme that is activated on the surface of the tumor cell by membrane-type I MMP (MT1-MMP). MT1-MMP plays a critical role during tumor progression and metastasis. We investigated the expression levels of E1AF and MT1-MMP in malignant melanoma cell lines and specimens from patients in order to clarify the mechanisms responsible for the invasion and metastasis of malignant melanoma. High levels of E1AF and MT1-MMP mRNA expression were observed in melanoma cells by Northern blotting and real-time PCR. The expression level was highly correlated with an invasive potential determined by an in vitro invasion assay. The down-regulation of MT1-MMP was identified when E1AF was knocked down by RNA interference. These results suggest that E1AF plays a crucial role in the invasion and metastasis of malignant melanoma through up-regulating the MT1-MMP expression.
  • Kyoko Hida, Yasuhiro Hida, Masanobu Shindoh
    CANCER SCIENCE 99 3 459 - 466 2008年03月 [査読有り][通常論文]
     
    Tumor angiogenesis is necessary for solid tumor progression and metastasis. Tumor blood vessels have been shown to differ from their normal counterparts, for example, by changes in morphology. An important concept in tumor angiogenesis is that tumor endothelial cells are assumed to be genetically normal, even though these endothelial cells are structurally and functionally abnormal. To date, many anti-angiogenic drugs have been developed, but, their therapeutic efficacy is not dramatic and they have also been reported to cause toxic side effects. To develop ideal antiangiogenic therapies, understanding tumor endothelial cell abnormalities is important. We have isolated tumor endothelial cells from mouse tumor xenografts and have shown that tumor-associated endothelial cells are abnormal. Tumor-associated endothelial cells upregulate many genes, such as epidermal growth factor receptor (EGFR). Tumor-associated endothelial cells are also more sensitive to EGF. They also have relatively large, heterogeneous nuclei. Unexpectedly, tumor endothelial cells are cytogenetically abnormal. Fluorescence in situ hybridization (FISH) analysis showed that freshly isolated uncultured tumor endothelial cells were aneuploid and had abnormal multiple centrosomes. The degree of aneuploidy was exacerbated by passage in culture. In marked contrast, freshly isolated normal skin and adipose endothelial cells were diploid. They had normal centrosomes and remained cytogenetically stable in culture even up to 20 passages. We conclude that tumor endothelial cells can acquire cytogenetic abnormalities while in the tumor microenvironment. Questions as to whether or not tumor endothelial cells become resistant to antiangiogenic drugs are thus raised. Our preliminary data show that tumor endothelial cells are more resistant to certain chemotherapeutic drugs. Studies to evaluate the mechanism for cytogenetic abnormalities in tumor endothelial cells are underway. It is becoming quite clear that the tumor vasculature is much more complex and unpredictable than initially perceived. Here, we provide an overview of the current studies on tumor endothelial cell abnormalities.
  • 腫瘍血管内皮細胞の分離ならびに特異性の解析(Isolation and characterization of tumor Endothelial cells)
    松田 光平, 樋田 京子, 樋田 泰浩, 土屋 邦彦, 村木 力, 大賀 則孝, 秋野 文臣, 戸塚 靖則, Klagsbrun Michael, 進藤 正信
    日本癌学会総会記事 66回 141 - 141 2007年08月 [査読有り][通常論文]
  • 腫瘍血管内皮を標的としたCyclooxigenase-2の血管新生阻害作用(Anti-Angiogenic Effects of Cyclooxygenase-2 inhibitor on Tumor-associated Endothelial Cells)
    村木 力, 樋田 京子, 樋田 泰浩, 土屋 邦彦, 戸塚 靖則, Klagsbrun Michael, 進藤 正信
    日本癌学会総会記事 66回 147 - 147 2007年08月 [査読有り][通常論文]
  • 緑茶ポリフェノールによる腫瘍血管内皮と血管内皮前駆細胞への抑制効果(A green tea polyphenol, EGCG has inhibitory effects on tumor endothelial cells and endothelial progenitor cells)
    大賀 則孝, 樋田 京子, 村木 力, 樋田 泰浩, 土屋 邦彦, 戸塚 靖則, 進藤 正信
    日本癌学会総会記事 66回 523 - 523 2007年08月 [査読有り][通常論文]
  • Cyclooxygenase-2 inhibitorは腫瘍血管新生を抑制する
    村木 力, 樋田 京子, 樋田 泰浩, 土屋 邦彦, 戸塚 靖則, Michael Klagsbrun, 進藤 正信
    日本癌学会総会記事 65回 312 - 312 日本癌学会 2006年09月 [査読有り][通常論文]
  • 樋田 泰浩, 樋田 京子, Klagsbrun Michael, 宮本 正樹, 平野 聡, 加賀 基知三, 大竹 節之, 七戸 俊明, 近藤 哲
    日本外科学会雑誌 107 臨増2 60 - 60 2006年03月 [査読有り][通常論文]
  • DN Amin, K Hida, DR Bielenberg, M Klagsbrun
    CANCER RESEARCH 66 4 2173 - 2180 2006年02月 [査読有り][通常論文]
     
    Epidermal growth factor (EGF) receptor family members are expressed by tumor cells and contribute to tumor progression. The expression and activity of EGF receptors in endothelial cells are less well characterized. Analysis of tumor-derived endothelial cells showed that they express EGFR, ErbB2, and ErbB4, whereas their normal counterparts express ErbB2, ErbB3, and ErbB4. The gain in expression of EGFR and the loss of ErbB3 expression in tumor vasculature was also observed in vivo. As a consequence of their expressing EGFR, tumor endothelial cells responded to EGF and other EGF family members by activating both EGFR and ErbB2, by activating the downstream mitogen-activated protein kinase pathway, and by enhanced proliferation. On the other hand, normal endothelial cells did not respond to EGF but instead were responsive to neuregulin (NRG), a ligand for ErbB3 and ErbB4. NRG activated ErbB3 in normal endothelial cells and inhibited growth of these cells. In contrast, tumor endothelial cells, which do not express ErbB3, were not growth inhibited by NRG. Furthermore, due to their expression of EGFR, tumor endothelial cells, unlike normal endothelial cells, are direct targets for EGFR kinase inhibitors. These low-molecular-weight compounds block EGF-induced EGFR activation and proliferation of tumor endothelial cells. These results suggest that a gain of EGF-induced endothelial cell proliferation, and loss of NRG-induced growth inhibition in tumor endothelial cells constitutes a switch that promotes tumor angiogenesis. In addition, these results suggest that EGFR kinase inhibitors may be effective for antiangiogenesis therapy by specifically targeting the tumor, but not the normal, vasculature.
  • K Hida, N Klagsbrun
    CANCER RESEARCH 65 7 2507 - 2510 2005年04月 [査読有り][通常論文]
     
    it has been shown that endothelial cells in solid tumors are cytogenetically abnormal. These cells are aneuploid with multiple chromosomes and multiple centrosomes. Unlike normal endothetial cells which remain diploid in long-term culture, the aneuploidy of tumor endothelial cells is exacerbated in culture suggesting that these cells are inherently unstable. It is speculated that this instability might compromise the effectiveness of antiangiogenesis therapy.
  • K Hida, Y Hida, DN Amin, AF Flint, D Panigrahy, CC Morton, M Klagsbrun
    CANCER RESEARCH 64 22 8249 - 8255 2004年11月 [査読有り][通常論文]
     
    Tumor angiogenesis is necessary for solid tumor progression and metastasis. Tumor blood vessels have been shown to differ from normal counterparts, for example, by changes in morphology. An important concept in tumor angiogenesis is that tumor endothelial cells are assumed to be genetically normal, although these endothelial cells are structurally and functionally abnormal. However, we hypothesized that given the phenotypic differences between tumor and normal blood vessels, there may be genotypic alterations as well: Mouse endothelial cells were isolated from two different human tumor xenografts, melanoma and liposarcoma, and from two normal endothelial. cell counterparts, skin and adipose. Tumor-associated endothelial cells expressed typical endothelial cell markers, such as CD31. They had relatively large, heterogeneous nuclei. Unexpectedly, tumor endothelial cells were cytogenetically abnormal. Fluorescence in situ hybridization (FISH) analysis showed that freshly isolated uncultured tumor endothelial cells were aneuploid and had abnormal multiple centrosomes. The degree of aneuploidy was exacerbated by passage in culture. Multicolor FISH indicated that the structural chromosomal aberrations in tumor endothelial cells were heterogeneous, indicating that the cytogenetic alterations were not clonal. There was no evidence of human tumor-derived chromosomal material in the mouse tumor endothelial cells. In marked contrast, freshly isolated normal skin and adipose endothelial cells were diploid, had normal centrosomes, and remained cytogenetically stable in culture even up to 20 passages. FISH analysis of tumor sections also showed endothelial cell aneuploidy. We conclude that tumor endothelial cells can acquire cytogenetic abnormalities while in the tumor microenvironment.
  • 由良 晋也, 戸塚 靖則, 大井 一浩, 馬渕 亜希子, 堀向 弘眞, 足利 雄一, 出山 文子, 由川 哲也, 大廣 洋一, 樋田 京子
    日口外誌 49 4 246 - 251 2003年 [査読無し][通常論文]
  • M Kreuter, D Bielenberg, Y Hida, K Hida, M Klagsbrun
    ANNALS OF HEMATOLOGY 81 S74 - S74 2002年 [査読有り][通常論文]
  • M. Shindoh, M. Adachi, F. Higashino, M. Yasuda, K. Hida, T. Nishioka, M. Ono, S. Takayama, J.C Reed, K. Imai, Y. Totsuka, T. Kohgo
    Oral Oncology 36 5 444 - 449 2000年09月 [査読有り][通常論文]
     
    BAG-1 is a Bcl-2-binding protein that functions as an anti-apoptotic molecule. In this report we show a possible correlation between BAG-1 expression levels and the probability of oral squamous cell carcinoma (SCC) progression. We investigated BAG-1 expression levels in 22 patients diagnosed with early lesions (T1 and T2) of oral SCCs using immunohistochemistry and western blotting. High steady-state levels of BAG-1 were detected in 13 out of 22 cases (59%). High BAG-1 expression was observed more frequently in cases with nodal metastasis (89%) than in those without nodal metastasis (38%) (P < 0.03), suggesting that BAG-1 expression levels may correlate with the pathological stage of oral SCCs. Furthermore, BAG-1 expression levels correlated with the WHO grade, i.e. 45% in grade-I cases as opposed to 72% in grade-II cases (P < 0.02). These data suggest that an analysis of BAG-1 expression may be useful in establishing a prognosis for patients with oral SCCs, and especially in predicting the metastatic potential of SSCs. (C) Elsevier Science Ltd.
  • M Shindoh, M Adachi, F Higashino, M Yasuda, K Hida, T Nishioka, M Ono, S Takayama, JC Reed, K Imai, Y Totsuka, T Kohgo
    ORAL ONCOLOGY 36 5 444 - 449 2000年09月 [査読有り][通常論文]
     
    BAG-1 is a Bcl-2-binding: protein that functions as an anti-apoptotic molecule. III this report We show a possible correlation between BAG-1 expression levels and the probability of oral squamous cell carcinoma (SCC) progression. We investigated BAG-1 expression levels in 22 patients diagnosed with early lesions (T1 and T2) of oral SCCs using immunohistochemistry and western blotting. High steady-state levels of BAG-1 were detected in 13 out of 29 cases (59%). High BAG-1 expression was observed more frequently in cases with nodal metastasis (89%) than in those without nodal metastasis (38%) (P < 0.03), suggesting that BAG-I expression levels may correlate with the pathological stage of oral SCCs. Furthermore, BAG-I expression levels correlated with the WHO grade, i.e. 45% in grade-I cases as opposed to 72% in grade-II cases (P < 0.02). These data suggest that an analysis of BAG-I expression may be useful in establishing a prognosis for patients with oral SCCs, and especially in predicting the metastatic potential of SSCs. (C) 2000 Elsevier Science Ltd. All rights reserved.
  • M Hanzawa, M Shindoh, F Higashino, M Yasuda, N Inoue, K Hida, M Ono, T Kohgo, M Nakamura, K Notani, H Fukuda, Y Totsuka, K Yoshida, K Fujinaga
    CARCINOGENESIS 21 6 1079 - 1085 2000年06月 [査読有り][通常論文]
     
    Hepatocyte growth factor (HGF) is thought to play a role in cell motility and invasion. Matrix metalloproteinases (MMPs) have been implicated in invasion and metastasis of tumor cells. We have previously reported that the Ets-oncogene family transcription factor E1AF positively regulates transcription of MMP genes in transient expression assays and that overexpression of the E1AF gene confers an invasive phenotype on breast cancer cells. Here we examined the effect of HGF on E1AF and MMP gene expression in terms of the invasive potential of the oral squamous cell carcinoma cell line HSC3. HGF stimulated expression of the E1AF gene. The levels of MMP-1, -3 and -9 mRNAs increased in cells treated with HGF and correlated with E1AF upregulation, In contrast, no obvious upregulation of MMP-1 and -9 mRNA was observed in ASE1AFHSC3 cells transfected with the antisense E1AF expression vector into parental HSC3 cells. The wild-type MMP-9 gene promoter was activated by endogenous E1AF in HSC3 cells, and chloramphenicol acetyltransferase (CAT) activities increased when HGF was added to transfected cells. On the other hand, CAT activity was reduced to almost two-thirds of the wild-type activity when HSC3 cells were transfected with a CAT reporter plasmid driven by a mutant MMP-9 promoter lacking the Ets-binding site, and induction of CAT activity was not observed upon addition of HGF. Analysis of organotypic raft cultures revealed that HSC3 cells invaded and degraded collagen gel actively upon addition of HGF. These results suggest that HGF induces expression of the Ets-related E1AF transcription factor gene whose product in turn activates MMP genes and leads to oral cancer cell invasion.
  • 笠師 久美子, 原田 幸子, 和田 育男, 小林 一三, 船岡 孝誠, 樋田 京子, 戸塚 靖則
    歯科薬物療法 18 3 212 - 212 (一社)日本歯科薬物療法学会 1999年12月 [査読有り][通常論文]
  • K. Kasashi, S. Harada, I. Wada, I. Kobayashi, K. Funaoka, K. Hida, Y. Totsuka
    Oral Therapeutics and Pharmacology 18 3 110 - 115 1999年 [査読有り][通常論文]
     
    When administering medication, the oral cavity presents specific problems in comparison with other organs. In other words, there are diverse factors such as the palate, the proximity to olfaction, the existence of sensitive tactus and the tongue, sputum and teeth. Carboxymethyl Cellulose Sodium (CMC) and Sodium Polyacrylate have been used as adhesive agents for the mucous membrane of the oral cavity in manufactured oral ointments and hospital preparations. However, even with the use of these agents, the adhesion time of oral ointments has not increased satisfactorily and the problem of the taste of the ingredients remains. This situation requires improvements for comfortable use of such ointments for all occasions. HPC Film consisting of Hydroxypropyl Cellulose (HPC), a water-soluble high- polymer was used as a covering material without active ingredients. After applying 10% Tetracycline CMC ointment to the buccal mucosa, lower buccal gingiva, soft palate and margin of tongue, they were covered by HPC Film. Changes over time in the presence of the ointment were compared between cases with and without HPC Film. It was found that by using a covering of HPC Film, adhesion time was markedly increased. Even in the tongue which was difficult to attach, the adhesion-maintenance time of oral ointment with HPC film indicated six-fold that without the film.
  • 笠師 久美子, 原田 幸子, 和田 育男, 小林 一三, 船岡 孝誠, 樋田 京子, 戸塚 靖則
    歯科薬物療法 18 3 110 - 115 1999年 [査読無し][通常論文]
  • 由良 晋也, 戸塚 靖則, 工藤 善史, 堀向 弘眞, 鈴木 豊典, 由川 哲也, 安田 睦, 樋田 京子, 門脇 繁, 小林 隆, 山口 泰彦, 井上 農夫男
    日口外誌 44 10 787 - 793 1998年 [査読無し][通常論文]
  • K Hida, M Shindoh, K Yoshida, A Kudoh, K Furaoka, T Kohgo, K Fujinaga, Y Totsuka
    ORAL ONCOLOGY 33 6 426 - 430 1997年11月 [査読有り][通常論文]
     
    E1AF is a newly identified ets-oncogene family transcription factor. Previous reports have noted that E1AF can upregulate promoter activities of several matrix metalloproteinase (MMP) genes and showed that invasive potentials of oral squamous cell carcinoma-derived cell lines are correlated with expression of E1AF and MMPs. The invasive phenotype is restrained by transfection with an antisense E1AF expression vector. Thus, E1AF is thought to be highly correlated with malignant potentials of cancer cells. However, little is known about E1AF expression and cancer cell malignancies in in vivo tumours. In the present study, 27 oral squamous cell carcinoma (SCC) specimens were examined using RT-PCR, Southern blot hybridisation and in situ hybridisation (ISH) and compared to the clinicopathological parameters. Among the 27 patients, E1AF was detected in 15 cases. E1AF mRNA was detected in 13 of 17 invasive SCCs, whereas the majority of SCCs not expressing E1AF showed an expansive growth pattern. Increased prevalence of E1AF-positive oral SCC was observed in cases with nodal metastasis. These results indicate that E1AF may be involved in cancer cell malignancies through its ability to promote invasive potential. (C) 1997 Elsevier Science Ltd. All rights reserved.
  • K Funaoka, M Shindoh, K Yoshida, M Hanzawa, K Hida, S Nishikata, Y Totsuka, K Fujinaga
    BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS 236 1 79 - 82 1997年07月 [査読有り][通常論文]
     
    p21(Waf1/Cip1) is one of the key regulatory proteins in cell cycle, terminal differentiation, and apoptosis. Its promoter was shown to be transactivated by the wild-type p53 protein as well as in a p53-independent manner. In this report, we demonstrate that E1AF, an ets-related transcription factor, activated the human p21(Waf1/Cip1) promoter by interacting with the ets-binding sites located close to the two previously identified p53-responsive elements. Northern blot analysis revealed that p21(Waf1/Cip1) and E1AF were correlatively upregulated in response to cisplatin treatment in SiHa cells. Transient expression assays demonstrated that E1AF can activate the p21(Waf1/Cip1) promoter-driven luciferase reporter gene in SiHa cells. The p21(Waf1/Cip1) promoter activity was also increased in p53-null Saos2 osteosarcoma cells, but was markedly reduced when the ets-binding sites were deleted. These results indicate that E1AF positively regulates transcription from the p21(Waf1/Cip1) promoter in response to genotoxic stresses. (C) 1997 Academic Press.
  • K Hida, M Shindoh, M Yasuda, M Hanzawa, K Funaoka, T Kohgo, A Amemiya, Y Totsuka, K Yoshida, K Fujinaga
    AMERICAN JOURNAL OF PATHOLOGY 150 6 2125 - 2132 1997年06月 [査読有り][通常論文]
     
    E1AF is a newly identified human ets-family transcription factor We have reported that E1AF can up-regulate transcription of matrix metalloproteinase (MMP) genes and confers invasive phenotype on human cancer cells. HSC3 is an oral squamous-cell-carcinoma-derived cell line, and it manifests high levels of E1AF and MMP-1 and -9 gene expression that are associated with invasive potential, We reconstructed an E1AF antisense expression vector, transfected HSC3 cells with the vector, and obtained HSC3AS cells that express E1AF antisense RNA, HSC3AS showed decreasing mRNA and protein levels of MMP-1, -3, and -9, Moreover, HSC3AS showed lower invasive potential in vitro three-dimensional raft culture and in vivo implantation into nude mice. These results imply that transfection of antisense E1AF inhibits tumor invasion by down-regulating MMP genes.
  • K. Hida, M. Shindoh, K. Yoshida, A. Kudoh, K. Furaoka, T. Kohgo, K. Fujinaga, Y. Totsuka
    Oral Oncology 33 6 426 - 430 1997年 [査読有り][通常論文]
     
    E1AF is a newly identified ets-oncogene family transcription factor. Previous reports have noted that E1AF can upregulate promoter activities of several matrix metalloproteinase (MMP) genes and showed that invasive potentials of oral squamous cell carcinoma-derived cell lines are correlated with expression of E1AF and MMPs. The invasive phenotype is restrained by transfection with an antisense E1AF expression vector. Thus, E1AF is thought to be highly correlated with malignant potentials of cancer cells. However, little is known about E1AF expression and cancer cell malignancies in in vivo tumours. In the present study, 27 oral squamous cell carcinoma (SCC) specimens were examined using RT-PCR, Southern blot hybridisation and in situ hybridisation (ISH) and compared to the clinicopathological parameters. Among the 27 patients, E1AF was detected in 15 cases. E1AF mRNA was detected in 13 of 17 invasive SCCs, whereas the majority of SCCs not expressing E1AF showed an expansive growth pattern. Increased prevalence of E1AF-positive oral SCC was observed in cases with nodal metastasis. These results indicate that E1AF may be involved in cancer cell malignancies through its ability to promote invasive potential.
  • 慢性クローズド,ロック症例に対する顎関節パンピング,マニピュレーション法の応用ー造影所見と治療効果との比較
    由良晋也, 戸塚靖則, 工藤善史, 堀向弘眞, 鈴木豊典, 由川哲也, 安田 睦, 樋田京子, 門脇 繁, 小林 隆, 山口泰彦, 井上農夫男
    日顎誌 9 129 - 137 1997年 [査読無し][通常論文]
  • E1AFアンチセンス発現ベクター導入による口腔扁平上皮癌細胞の浸潤能の抑制およびE1AF発現の臨床的意義
    樋田 京子
    北海道歯学雑誌 18 2 105 - 114 1997年 [査読無し][通常論文]
  • Shindoh M, Fujinaga K, Hida K, Funaoka K
    Tanpakushitsu kakusan koso. Protein, nucleic acid, enzyme 41 463 - 466 5 1996年04月 [査読無し][招待有り]
  • M Shindoh, F Higashino, M Kaya, M Yasuda, K Funaoka, M Hanzawa, K Hida, T Kohgo, A Amemiya, K Yoshida, K Fujinaga
    AMERICAN JOURNAL OF PATHOLOGY 148 3 693 - 700 1996年03月 [査読有り][通常論文]
     
    Matrix metalloproteinases (MMPs) have been implicated irt invasion and metastasis of tumor cells. Transcription regulatory regions of MMP genes often contain binding sites for ets transcription factors. We recently isolated a cDNA encoding human E1A-F, a member of the ets oncogene family, and showed that E1A-F; can upregulate MMP genes by CAT assay. We attempted to investigate the relationship between E1A-F mRNA expression and MMP protein expression in four different types of oral squamous-cell-carcinoma-derived cell lines (HSC 3, SAS, KB, and Ca 9.22). HSC 3 and SAS are highly invasive cell lines when they are injected in the tongue of nude mice Raft culture of HSC 3 and SRS revealed the same characteristics as seen in tumors implanted in viva Both type I collagenase (MMP-1) and 92-kd type IV collagenase (MMP-9) were detected in cultured HSC 3 and SAS cells. E1A-F mRNA was demonstrated to be highly expressed in HSC 3 and SAS by Northern blotting, and in situ hybridization confirmed E1A-F mRNA expression at the invasion front of tumor cells seeded on collagen gel. On the other hand, RE and Ca 9.22 have little potential for invasion, and MMP-1 and MMP-9 protein and E1A-F mRNA could not be detected. These results suggest that the ets-related E1A-F participates in the regulation of invasion-associated MMP genes and is involved ia presenting invasive activity in tumor cells of oral squamous cell carcinoma.
  • 非復位性の関節円板前方転位症例における臨床経過と顎関節構成体の形態変化
    門脇 繁, 中島頼俊, 土井上輝夫, 渡辺政明, 小林 隆, 由良晋也, 樋田京子, 上田倫弘, 村上有二, 井上農夫男, 戸塚靖則
    日顎誌 8 21 - 32 1996年 [査読無し][通常論文]
  • 由良 晋也, 戸塚 靖則, 樋田 京子, 門脇 繁, 小林 隆, 津山 昌嗣, 山口 泰彦, 井上 農夫男, 原田 浩之, 大類 晋, 畔田 貢
    口腔外科学会誌 40 4 519 - 524 1994年 [査読無し][通常論文]
  • 由良 晋也, 戸塚 靖則, 樋田 京子, 佐藤 淳, 津山 昌嗣, 門脇 繁, 山口 泰彦, 中村 武之, 井上 農夫男, 福田 博, 三浦 尚徳, 中村 博行
    口腔外科学会誌 39 10 1049 - 1056 1994年 [査読無し][通常論文]
  • Synergistic enhancement of cellular uptake with CD44-expressing malignant pleural mesothelioma by combining cationic liposome and hyaluronic acid-lipid conjugate
    Sakurai Y, Kato A, Hida Y, Hamada J, Maishi N, Hida K, Harashima H
    J Pharm Sci [査読有り][通常論文]
  • ROS enhance angiogenic properties via regulation of NRF2 in tumor endothelial cells
    Hojo T, Maishi N.§, Alam Mohammad Towfik, Akiyama K, Ohga N, Shindoh M, Hida Y, Minowa K, Fujisawa T, Hida K
    Oncotarget [査読有り][通常論文]
  • Tumor endothelial heterogeneity in cancer progression
    Nako Maishi, Dorcas A. Annan, Hiroshi Kikuchi, Yasuhiro Hida, Kyoko Hida
    Cancers [査読有り][通常論文]

書籍

  • 血管新生
    樋田京子 (担当:分担執筆範囲:42-46)
    南江堂 2021年05月
  • 高倉伸幸企画, がん免疫の効果を左右する腫瘍血管と免疫環境
    樋田京子, 間石奈湖 (担当:分担執筆範囲:腫瘍血管内皮細胞の異常性と腫瘍免疫, 3201-3205,)
    羊土社 2019年11月
  • パラダイムシフトをもたらすエクソソーム機能研究最前線
    樋田京子, 間石奈湖, 森本真弘 (担当:分担執筆範囲:がんとエクソソーム)
    エヌ・ティー・エス 2017年
  • Cancer Metastasis and Cancer Stem Cell/Niche
    Hida K, Maishi N, Dorcas Akuba-Muhyia Annan, Hida Y (担当:分担執筆範囲:Tumor Endthelial Cells and Cancer Progression”)
    Bentham Books 2016年
  • 別冊BIO Clinica 慢性炎症と疾患~慢性炎症とがん
    樋田京子, 大賀則孝, 間石奈湖, 秋山廣輔, 樋田泰浩 (担当:分担執筆範囲:腫瘍血管内皮細胞の多様性)
    北隆館 2016年01月
  • 口腔組織・発生学 第2版
    樋田 京子 (担当:分担執筆範囲:癌と血管新生)
    医歯薬出版 2015年02月
  • 新臨床腫瘍学(改訂第4版)-がん薬物療法専門医のために-
    樋田 京子 (担当:分担執筆範囲:血管新生)
    南江堂 2015年
  • 血管新生研究の最先端
    樋田 京子 (担当:分担執筆範囲:血管新生と病態-腫瘍血管新生)
    2013年
  • 血管生物医学事典
    樋田 京子 (担当:分担執筆範囲:腫瘍血管内皮細胞)
    朝倉書店 2011年
  • がん転移研究の実験手法 第1版
    樋田 京子 (担当:分担執筆範囲:磁気ビーズを用いたがん組織からの細胞分離法)
    金芳堂 2008年

講演・口頭発表等

  • 腫瘍血管内皮細胞による微小環境の乱れとがんの転移  [招待講演]
    樋田京子
    第30回日本がん転移学会学術集会・総会シンポジウム「血管から転移を考える」 2021年07月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管制御によるがん免疫活性化
    樋田京子
    第4回AIR in Sapporo-Angiogenesis & Immunology Research- 2021年06月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 腫瘍血管内皮細胞の特性とがん免疫  [招待講演]
    樋田京子
    第110回日本病理学会総会シンポジウム「がんと免疫病理, 最前線」 2021年04月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管内皮細胞とがんの悪性化  [招待講演]
    樋田 京子
    第94回日本薬理学会年会シンポジウム 2021年03月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • “私のWork-Life Blend”, 2021.3.1(WEB開催)  [招待講演]
    樋田京子
    北海道大学病院男女共同参画推進室・北海道大学大学院歯学研究院FD委員会共催 男女共同参画推進室講演会「キャリアを考える」 2021年03月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 腫瘍血管と免疫小環境  [招待講演]
    樋田京子
    Breast Cancer Investigator’s Meeting in Sapporo, 2020年11月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • The role of tumor endothelial cells in the immune environmen  [招待講演]
    樋田京子
    The 79th Annual Meeting of the Japanese Cancer Assosiation Symposium, Real world of tumor microenvironment 2020年10月 口頭発表(招待・特別)
  • 治療標的としての腫瘍血管内皮細胞の異常性
    樋田京子
    第79回日本癌学会学術総会特別シンポジウム「がん研究における女性研究者(WSCR)Women scientists in cancer research」 2020年10月 口頭発表(招待・特別)
  • New Insights Into Drug-Resistance: Abnormality in Tumor Endothelial Cells  [招待講演]
    樋田京子
    The 21th International Vascular Biology Meeting 2020年09月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管内皮細胞の特性解析とがん治療への応用  [招待講演]
    樋田京子
    第109回日本病理学会総会シンポジウム「口腔腫瘍の病理と遺伝子異常―がん形質と微小環境」 2020年04月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管の多様性  [招待講演]
    樋田 京子
    日本薬物動態学会第34回年会シンポジウム 2019年12月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 治療標的としての腫瘍血管の特性  [招待講演]
    樋田 京子
    第60回日本脈管学会総会学術委員会シンポジウム2「がん治療~脈管を攻める、脈管を守る」 2019年10月 口頭発表(招待・特別)
  • 歯科口腔外科学  [通常講演]
    樋田 京子
    高知大学DCセミナー 2019年10月 公開講演,セミナー,チュートリアル,講習,講義等
  • 血管新生とがんの悪性化  [招待講演]
    樋田 京子
    第30回日本臨床口腔病理学会合同シンポジウム「口腔に症状が現れる全身疾患へのアプローチ」 2019年09月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • Roles of tumor endothelial cells in tumor progression  [招待講演]
    樋田 京子
    the 2019 AVBS SCIENTIFIC MEETING-JOINT VASCULAR BIOLOGY MEETING 2019年09月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 腫瘍組織の多様性と相互作用  [招待講演]
    樋田 京子
    文部科学省新学術領域研究 細胞社会ダイバースシテ-の統合的解明と制御_第92回日本生化学会共催シンポジウム「臓器の構築と制御の統合的理解を目指した細胞ダイバーシティー研究」 2019年09月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 腫瘍血管研究と今後の展望~Bench to Bedの実現にむけて~  [招待講演]
    樋田 京子
    令和元年北海道大学歯学部口腔外科同門会学術大会 2019年09月 その他
  • Abnormalities of tumor endothelial cells and cancer progression  [招待講演]
    樋田 京子
    第38回札幌国際がんシンポジウム 2019年07月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管の多様性とその制御  [招待講演]
    樋田 京子
    文部科学省科学研究費補助金 新学術領域研究「細胞社会ダイバーシティの統合的解明と制御」第四回公開シンポジウム 2019年06月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍免疫における血管の役割  [招待講演]
    樋田 京子
    第119回北海道癌談話会春季シンポジウム「がん免疫療法:基礎と臨床のコラボレーション」 2019年06月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 私のワークライフバランス-子連れ留学,ラボヘッドの経験から学んだもの  [招待講演]
    樋田 京子
    第57回日本小児歯科学会大会「将来計画検討委員会・女性小児歯科医委員会合同企画」 2019年06月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • VEGF阻害による腫瘍微小環境の制御  [招待講演]
    樋田 京子
    Lung Cancer Expert Meeting in Sapporo, 2019年05月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管内皮の遺伝子異常  [招待講演]
    樋田 京子
    第108回日本病理学会総会 特別シンポジウム1「がんゲノム医療と病理」 2019年05月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 腫瘍血管新生の多様性と腎癌の悪性化  [招待講演]
    樋田 京子
    腎癌の血管と免疫を見つめる会 2019年02月 口頭発表(招待・特別)
  • 血管新生阻害と微小環境の変化  [招待講演]
    樋田 京子
    AIR in Sapporo-Angiogenesis & Immunology Research- 2018年11月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管の特性を活かした新しいがん治療法の開発を目指して  [招待講演]
    樋田 京子
    これからのキャリアを語る医師と学生の会2018講演会「『がんと遺伝子』~私たちの研究が、患者さんの未来を変える」 2018年10月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管内皮細胞によるがんの転移促進  [招待講演]
    樋田 京子
    第77回日本癌学会学術総会シンポジウム 2018年09月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 血管新生阻害療法の展開  [招待講演]
    樋田 京子
    第16回日本臨床腫瘍学会学術集会シンポジウム「消化器癌に対する血管新生阻害薬の意義」 2018年07月 口頭発表(招待・特別)
  • 治療抵抗性における腫瘍血管の役割  [通常講演]
    樋田 京子
    第107回日本病理学会総会 特別企画シンポジウム「腫瘍微小環境の病理学」 2018年06月 口頭発表(招待・特別)
  • Chemotherapy-induced drug resistance in tumor endothelial cells  [招待講演]
    樋田 京子
    第25回血管生物医学会学術集会 AAVBM2017シンポジウム“Tumor Angiogenesis and Lymphangiogenesis” 2017年12月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 腫瘍血管内皮細胞の形質変化とがんの悪性化  [招待講演]
    樋田 京子
    第40回日本分子生物学会年会ワークショップ「生老病死における血管・リンパ管の生命科学的意義」 2017年12月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 腫瘍血管内皮細胞の特性とがんの悪性化  [通常講演]
    樋田 京子
    平成29年度先端医学研究セミナー 2017年11月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管に関する基礎研究から新たながん治療戦略の構築を目指して  [通常講演]
    樋田 京子
    第62回日本口腔外科学会総会・学術大会特別プログラム「日台姉妹締結10周年記念シンポジウム Translational Research」 2017年10月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 腫瘍血管の異常とがんの悪性化  [招待講演]
    樋田 京子
    第35回日本骨代謝学会学術集会共催・第20回癌と骨病変研究会 ミニシンポジウム「癌と骨病変」 2017年07月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管内皮細胞のがん幹細胞への関与  [招待講演]
    樋田 京子
    第26回日本がん転移学会学術集会・総会シンポジウム2「がん幹細胞に対する新たな知見」 2017年07月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 腫瘍血管内皮細胞の特性とがんの悪性化  [通常講演]
    樋田 京子
    愛媛大学プロテオサイエンスセンター PROSセミナー&大学院特別講義 2017年06月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管の特異解明と新しいがん治療戦略  [招待講演]
    樋田 京子
    第53回大阪大学数理医学研究会 2016年09月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管の特異性とエクソソーム  [通常講演]
    樋田 京子
    千里ライフサイエンスセミナーK3「エクソソーム研究の最前線:疾患のメカニズム解明から診断・治療まで」 2016年09月 口頭発表(招待・特別)
  • 高転移性腫瘍miRによる血管内皮における薬剤耐性誘導  [通常講演]
    樋田 京子
    第25回日本がん転移学会学術集会・総会シンポジウム「がん転移の新しい治療標的としてのエクソソーム研究 2016年07月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 腫瘍血管内皮細胞の特異性解明と新たながん治療への応用  [通常講演]
    樋田 京子
    第70回日本口腔科学会学術集会「口腔疾患治療の科学革命(パラダイムシフト) 2016年04月 口頭発表(招待・特別)
  • Heterogeneity of Tumor Endothelial Cells  [招待講演]
    樋田 京子
    Keystone Symposia on Molecular and Cellular Biology 2016 2016年04月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管内皮細胞の特性とがんの悪性化  [通常講演]
    樋田 京子
    平成27年度「個体レベルでのがん研究支援活動」ワークショップ 2016年02月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 腫瘍血管の異常とがんの悪性化  [招待講演]
    樋田 京子
    第34回日本口腔腫瘍学会総会ワークショップ 2016年01月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管の遺伝子発現異常とエピゲノム  [招待講演]
    樋田 京子
    第38回日本分子生物学会年会 2015年12月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管の遺伝子発現異常とがんの悪性化  [招待講演]
    樋田 京子
    2015年06月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管の異常性獲得メカニズムについて  [通常講演]
    樋田 京子
    北海道大学遺伝子病制御研究所・金沢大学がん進展制御研究所ジョイントシンポジウム2014 2014年10月 口頭発表(招待・特別)
  • Tumor-derived exosome miRNA induce abnormality in tumor endothelial cells  [招待講演]
    樋田 京子
    第1回細胞外小胞学会 2014年08月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管の多様性と新たな治療法開発  [招待講演]
    樋田 京子
    金沢女性がん研究者フォーラム 2014年07月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管内皮細胞の薬剤抵抗性  [通常講演]
    樋田 京子
    第41回日本毒性学会学術年会ミニシンポジウム 2014年07月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管内皮の多様性解明と個別化血管新生阻害法の開発  [招待講演]
    樋田 京子
    公開シンポジウム「血管を標的とするナノ医療の実用化に向けて拠点形成~がんを始めとする国民病を血管から治療する~」 2014年06月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 腫瘍血管の多様性と新たな治療法開発  [招待講演]
    樋田 京子
    第68回NPO法人日本口腔科学会学術集会ワークショップ「がんを間質から考える」 2014年05月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • Tumor endothelial cells as key players in tumor microenvironment  [招待講演]
    樋田 京子
    International Symposium on Vascular Biology and Medicine 2014年04月 口頭発表(招待・特別)
  • Heterogeneity of tumor endothelium  [招待講演]
    樋田 京子
    The 18th International Vascular Biology Meeting 2014年04月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管内皮細胞の特異性とmiRNA  [通常講演]
    樋田 京子
    第36回日本分子生物学会年会ワークショップ「マイクロRNAとエクソソームの生物学的意義」 2013年12月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 腫瘍血管内皮細胞の特性解明から診断・治療への応用  [通常講演]
    樋田 京子
    第3回北海道探索病理学研究シンポジウム「探索医療・基礎と臨床の連携:病理が橋渡しする臨床研究の新展開」 2013年11月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管の多様性とがんの浸潤転移  [招待講演]
    樋田 京子
    第46回北海道病理談話会特別講演 2013年10月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管の多様性  [通常講演]
    樋田 京子
    第72回日本癌学会学術総会シンポジウム「がんと微小環境:研究の展望」 2013年10月
  • 腫瘍血管内皮の薬剤抵抗性  [招待講演]
    樋田 京子
    第21回日本血管生物医学会学術総会シンポジウム 2013年09月
  • 腫瘍血管新生とがんの新しい治療法の開発  [通常講演]
    樋田 京子
    第25回北海道輸血シンポジウム 2013年07月 口頭発表(招待・特別)
  • がん転移と血管新生  [招待講演]
    樋田 京子
    第22回日本がん転移学会学術集会・総会 2013年07月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管の多様性  [通常講演]
    樋田 京子
    腫瘍血管シンポジウム 2013年04月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • Characterization of stem-like tumor endothelial cells, The 20th annual Meeting of the Japanese Vascular Biology and MedicineOrganization  [通常講演]
    樋田 京子
    The 10th Korea-Japan Joint Symposium on Vascular Biology 2012年12月 口頭発表(一般)
  • Heterogeneity of Tumor Endothelial Cells  [招待講演]
    Kyoko HIDA
    The 43rd International Symposium of The Princess Takamatsu Cancer Research Fund“Cancer Heterogeneity: Impact on Carcinogenesis, Cancer Stem Cell, Microenvironment, Diagnosis and Treatment” 2012年11月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • Altered phenotype in endothelial cells in tumor microenvironment  [招待講演]
    Kyoko HIDA
    The 2nd International Symposium by JSPS Core-to-Core Program“Cooperative International Framework in TGF-β Family Signaling” 2012年10月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • がん微小環境と血管新生  [招待講演]
    樋田 京子
    第57回日本口腔外科学会総会・学術大会ワークショップ「がん治療戦略を目指した先端的がん研究」 2012年10月 口頭発表(招待・特別)
  • 血管を標的とした新規抗がん剤の開発を目指して  [招待講演]
    樋田 京子
    第43回PFA国際歯学会日本部会年次大会-ピエールフォーシャルアカデミー国際歯学会日本部会 2012年09月 口頭発表(招待・特別)
  • Crosstalk between tumor endothelial cells and tumor cells  [招待講演]
    Kyoko HIDA
    The 71st Annual Meeting of the Japanese Cancer Association 2012年09月 口頭発表(招待・特別)
  • 母親として、PI(Principle Investigator)として  [招待講演]
    樋田 京子
    広島大学女性研究者スキルアップ交流会 2012年07月 公開講演,セミナー,チュートリアル,講習,講義等
  • がんの浸潤転移と血管新生  [招待講演]
    樋田 京子
    第28回日本DDS学会学術集会 2012年07月 口頭発表(招待・特別)
  • Tumor endothelial cell s acquire drug resistance by MDR1 upregulation  [通常講演]
    Kyoko HIDA
    the 17th International Vascular Biology Meeting, 2012.6.4, Wiesbaden 2012年06月 口頭発表(一般)
  • 腫瘍血管内皮細胞の異常性と転移との関連  [招待講演]
    樋田 京子
    第101回日本病理学会総会コンパニオンミーティング7「口腔癌の悪性形質の発現に関する橋渡し研究と分子標的治療への応用」 2012年04月 口頭発表(招待・特別)
  • 血管内皮細胞の抗がん剤抵抗性  [招待講演]
    樋田 京子
    千里ライフサイエンスセミナー「がんの浸潤・転移と微小環境」 2012年02月 公開講演,セミナー,チュートリアル,講習,講義等
  • がんの浸潤転移と血管新生  [招待講演]
    樋田 京子
    第30回日本口腔腫瘍学会学術大会シンポジウム「口腔癌の浸潤-マクロ・ミクロ・モレキュラー」 2012年01月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 腫瘍血管内皮細胞の特異性の解明  [招待講演]
    樋田 京子
    公開シンポジウム「血管を標的とする革新的医薬分子送達法の基盤技術の確立」 2012年01月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 腫瘍血管の多様性とがんの転移  [招待講演]
    樋田 京子
    Recent Advance in Tumor Angiogenesis 2011 2011年12月 公開講演,セミナー,チュートリアル,講習,講義等
  • 腫瘍血管新生阻害療法における新たな局面-Lesson from Basic research  [招待講演]
    樋田 京子
    函館Basic Cancer Forum 2011年11月 公開講演,セミナー,チュートリアル,講習,講義等
  • 腫瘍微小環境における腫瘍血管内皮異常性の獲得  [通常講演]
    樋田 京子
    第70回日本癌学会学術総会 2011年10月 口頭発表(一般)
  • 腫瘍血管内皮細胞の異常性がもたらすがん治療への影響  [招待講演]
    樋田 京子
    平成23年度遺伝子病制御研究所共同研究集会、「がん細胞・組織の多様性の出現・維持に関わる微小環境因子」 2011年09月 公開講演,セミナー,チュートリアル,講習,講義等
  • 腫瘍血管特異性の解明と新たな血管新生阻害療法への応用  [招待講演]
    樋田 京子
    大阪歯科大学大学院50周年記念講演会 2011年09月 公開講演,セミナー,チュートリアル,講習,講義等
  • A New Insights into Tumor endothelial cell  [招待講演]
    Kyoko HIDA
    The 5th Meeting of Asian Society of Oral and Maxillofacial Pathology 2011年08月 口頭発表(招待・特別)
  • がん転移に関わる腫瘍血管内皮の異常性  [通常講演]
    樋田 京子
    第20回日本がん転移学会学術集会・総会 2011年06月 口頭発表(一般)
  • Heterogeneity of Tumor Endothelium and Drug Resistance  [招待講演]
    樋田 京子
    第63回日本細胞生物学会大会、「血管の多様性~組織発生から疾患におけるダイナミクス」 2011年06月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管内皮細胞の特異性とその制御  [招待講演]
    樋田 京子
    ACCEL in Hokkaido~NSCLCに対するアバスチンの治療戦略~ 2011年06月 公開講演,セミナー,チュートリアル,講習,講義等
  • 腫瘍血管内皮細胞の多様な生物像  [招待講演]
    樋田 京子
    第27回日本DDS学会学術集会 2011年06月 口頭発表(招待・特別)
  • がん組織における血管の特異性の解明と新たな血管新生阻害療法への応用  [招待講演]
    樋田 京子
    高知大学医学部歯科口腔外科学講座セミナー 2011年06月 公開講演,セミナー,チュートリアル,講習,講義等
  • 癌間質の異常、とくに腫瘍血管の特性と浸潤との関連性  [招待講演]
    樋田 京子
    第100回日本病理学会総会コンパニオンミーティング4「口腔癌の浸潤:外科病理と分子病理の架け橋」 2011年05月 口頭発表(招待・特別)
  • がん微小環境内における腫瘍-血管の相互作用  [招待講演]
    樋田 京子
    第9回口腔医科学フロンティア学術集会 2011年03月 口頭発表(招待・特別)
  • 低酸素環境における腫瘍血管ダイナミクス  [招待講演]
    樋田 京子
    The 8th Annual Meeting for the Japanese Association for Cancer and Hypoxia Research 2011年01月 口頭発表(招待・特別)
  • Tumor induces drug resistance of endothelial cells by nuclear translocation of YB-1 and up-regulation of MDR-1  [通常講演]
    Kyoko HIDA
    第18回日本血管生物医学会学術集会 2010年12月 口頭発表(一般)
  • Crosstalk between tumor endothelial cells and microenvironment  [招待講演]
    樋田 京子
    第56回日本病理学会秋期特別総会 2010年11月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • Crosstalk between Tumor Endothelial Cells and Microenvironment  [招待講演]
    樋田 京子
    The 13th Hokkaido University – Seoul National University Joint Sympojium 2010年11月 口頭発表(招待・特別)
  • Crosstalk between blood vessels and tumor microenvironment  [招待講演]
    Kyoko HIDA
    The 13th Hokkaido University – Seoul National University Joint Sympojium 2010年10月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 腫瘍血管内皮細胞を標的とした新たな治療法の開発  [招待講演]
    樋田 京子
    平成22年度北海道癌談話会秋季シンポジウム「腫瘍血管新生の基礎と臨床」 2010年10月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 腫瘍血管内皮細胞の異常と新たな治療法の開発  [招待講演]
    樋田 京子
    第64回日本口腔科学会学術集会 2010年06月 口頭発表(招待・特別)
  • Cytogenetic Abnormalities of Tumor Endothelial Cells in Human Malignant Tumors  [通常講演]
    Kyoko HIDA
    AACR 101st ANNUAL MEETING 2010 2010年04月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管内皮細胞の特性と治療抵抗性  [招待講演]
    樋田 京子
    第43回加齢医学研究所シンポジウム「血管から見る医科学研究の新展開」 2010年03月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • がん治療の最前線 血管新生阻害の最新アプローチ  [招待講演]
    樋田 京子
    The 4th Lecture Meeting SUTENT by Urology Specialist 2010年02月 口頭発表(招待・特別)
  • 生体ナノ環境を構成する間質細胞の時空間的ダイナミクスの解明  [招待講演]
    樋田 京子
    公開シンポジウム「生体ナノ環境の時空間制御を目指して」、戦略的研究推進経費プロジェクト主催「血管を標的とする革新的医薬分子送達法の基盤技術の確立」 2010年01月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 腫瘍血管内皮細胞の異常と薬剤抵抗性  [招待講演]
    樋田 京子
    第32回日本分子生物学会年会ワークショップ 2009年12月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 腫瘍血管内皮細胞の異常性  [招待講演]
    樋田 京子
    第17回日本血管生物医学会 2009年10月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管内皮の異常と薬剤抵抗性  [通常講演]
    樋田 京子
    第68回日本癌学会学術総会 2009年10月 口頭発表(一般)
  • がん転移におけるがん細胞・間質相互作用The Role of  [通常講演]
    樋田 京子
    第18回日本がん転移学会モーニングセッション 2009年07月 口頭発表(一般)
  • 転移能の異なる腫瘍から分離された2つの腫瘍血 管内皮細胞の比較検討  [通常講演]
    樋田 京子
    第18回日本がん転移学会 2009年07月 口頭発表(一般)
  • 腫瘍血管内皮に関する新しい洞察-がん微小環境における血管内皮の特異性  [招待講演]
    樋田 京子
    北海道癌談話会春期シンポジウム 2009年06月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • がん微小環境における腫瘍血管内皮細胞の異常性  [招待講演]
    樋田 京子
    日本生化学会北海道支部・日本生物物理学会北海道支部・北海道分子生物研究会2008年度合同シンポジウム「生命現象の分子レベルでの解明」 2008年11月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • がん微小環境における腫瘍血管内皮細胞の異常性  [通常講演]
    樋田 京子
    第73回日本インターフェロン・サイトカイン学会学術集会、第19回日本生体防御学会学術集会、第45回補体シンポジウム合同大会 2008年07月 口頭発表(一般)
  • がん微小環境における腫瘍血管内皮細胞の異常性  [通常講演]
    樋田 京子
    日本分子生物学会第8回春期シンポジウム 2008年05月 口頭発表(一般)
  • 腫瘍血管の多様性-特異的な遺伝子  [招待講演]
    樋田 京子
    金沢大学がん研究所セミナー 2008年05月 公開講演,セミナー,チュートリアル,講習,講義等
  • 腫瘍血管新生のダイナミクス-多様な腫瘍血管内皮細胞の特性-  [招待講演]
    樋田 京子
    第1回消化器リサーチセミナー 2008年04月 公開講演,セミナー,チュートリアル,講習,講義等
  • Chromosomal Abnormalities of Human Tumor-Associated Endothelial Cells  [招待講演]
    Kyoko HIDA
    THE U.S.-JAPAN COOPERATIVE CANCER RESEARCH PROGRAM WORKSHOP 2008 2008年03月 口頭発表(招待・特別)
  • がん微小環境における腫瘍血管内皮細胞の異常性  [招待講演]
    樋田 京子
    2007日本生化・分子生物学会ワークショップ 2007年12月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • Cyclooxygenase-2 inhibitorの腫瘍血管内皮ならびに血管内皮前駆細胞に対する直接的制御効果  [通常講演]
    樋田 京子
    第15回血管生物医学会学術総会 2007年11月 口頭発表(一般)
  • Abnormality of tumor endothelial cells  [通常講演]
    Kyoko HIDA
    International sessions 2 Cancer Angiogenesis.The 66th Annual Meeting of the Japanese Cancer Association 2007年10月 口頭発表(一般)
  • Abnormality of tumor endothelial cells. International sessions 2 Cancer Angiogenesis  [招待講演]
    Kyoko HIDA
    The 66th Annual Meeting of the Japanese Cancer Association 2007年10月 口頭発表(招待・特別)
  • がん微小環境における血管内皮細胞の特異性〜理想的な血管新生阻害療法を開発するために  [招待講演]
    樋田 京子
    Basic Urology Research Seminar 2007年08月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管内皮に関する新 しい洞察-がん微小環境における血管内皮の特異性  [招待講演]
    樋田 京子
    北海道癌談話会春期シンポジウム 2007年06月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • Abnormality of tumor-associated endothelial cells.  [通常講演]
    Kyoko HIDA
    AACR-JCA International Conference ”In the Forefront of Basic and Translational Cancer Research 2007年01月 口頭発表(一般)
  • 腫瘍血管内皮に関する新しい洞察  [招待講演]
    樋田 京子
    東京大学大学院 医学系研究科分子病理学講座セミナー 2006年12月 口頭発表(招待・特別)
  • Understanding Abnormality of Tumor Endothelial Cells to Develop Ideal Antiangiogenic Therapies  [招待講演]
    Kyoko HIDA
    The COE 3rd International Symposium~Novel perspectives in cancer research and translation to the clinic 2006年11月 口頭発表(招待・特別)
  • 緑茶ポリフェノールによる腫瘍血管内皮への抑制効果  [通常講演]
    樋田 京子
    第65回日本癌学会学術総会 2006年09月 口頭発表(一般)
  • 腫瘍血管内皮の特異的性質—染色体遺伝子学的異常について  [通常講演]
    樋田 京子
    第95回日本病理学会総会 2006年04月 口頭発表(一般)
  • 腫瘍血管内皮に関する新しい洞察-より効果的な血管新生阻害療法を目指して-  [招待講演]
    樋田 京子
    旭川肺癌研究会学術大会 2006年04月 口頭発表(招待・特別)
  • 腫瘍血管内皮についての新しい洞察  [招待講演]
    樋田 京子
    第6回 愛媛オンコロジーフォーラム 2005年11月 口頭発表(招待・特別)
  • Tumor-associated endothelial cells with cytogenetic abnormalities  [招待講演]
    Kyoko HIDA
    AACR Special Conference in Cancer Research “Anti-Angiogenesis and Drug Delivery to tumors:Bench to Bedside and Back” 2005年11月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 腫瘍血管内皮についての新しい洞察  [招待講演]
    樋田 京子
    第85回北海道癌談話会秋期シンポジウム「血管新生の新しいパラダイムと癌」 2005年11月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • 腫瘍血管内皮の特異的性質—染色体遺伝子異常について  [通常講演]
    樋田 京子
    第50回日本口腔外科学会総会 2005年10月 口頭発表(一般)
  • 腫瘍関連血管内皮細胞は細胞発生学的に異常を伴っている  [通常講演]
    樋田 京子
    第64回日本癌学会総会 2005年09月 シンポジウム・ワークショップパネル(公募)
  • 腫瘍血管内皮についての新しい洞察-腫瘍血管内皮の染色体異常  [招待講演]
    樋田 京子
    第85回癌談話会 2005年09月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • Tumor-associated endothelial cells with cytogenetic abnormalities  [招待講演]
    樋田 京子
    ボストン血管新生シンポジウム (Boston Angiogenesis Meeting: BAM) 2004年11月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • Chromosome instability of Tumor associated Endothelial cells  [招待講演]
    樋田 京子
    Gordon symposium 2004年08月 シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
  • Tumor Endothelial cells are not normal  [招待講演]
    樋田 京子
    ハーバード小児病院外科研究分野春期研究会 2003年04月 公開講演,セミナー,チュートリアル,講習,講義等
  • Characterization of Tumor-deirived Endothelial cells  [招待講演]
    樋田 京子
    Harvard Medical School Surgical Research Summer Retreat Seminar 2002年07月 公開講演,セミナー,チュートリアル,講習,講義等
  • がん微小環境における血管の特異性  [招待講演]
    樋田 京子
    第104回日本病理学会総会シンポジウム 口頭発表(招待・特別)

その他活動・業績

  • 腫瘍血管内皮細胞における異常性解明とその制御
    間石奈湖, 樋田京子 高倉伸幸編「細胞」-特集 がんの進展における血管新生と免疫- 53 (2) 49 -52 2021年02月 [査読無し][通常論文]
  • The role of IGF/IGF-IR-signaling and extracellular matrix effectors in sarcoma pathogenesis
    George N.Tzanakakis, Eirini-Maria Giatagana, Aikaterini Berdiaki, Ioanna Spyridaki, Hida K, Monica Neagu, Aristidis M. Tsatsakis, Dragana Nikitovic Cancers 2021年 [査読有り]
  • がん治療標的としての腫瘍血管内皮細胞の特異性
    間石奈湖, Annan DA, 樋田京子 炎症と免疫 28 (5) 35 -40 2020年08月 [査読無し][通常論文]
  • Dorcas Akuba Muhyia Annan, Hiroshi Kikuchi, Nako Maishi, Yasuhiro Hida, Kyoko Hida International Journal of Molecular Sciences 21 (9) 2020年05月01日 [査読無し][通常論文]
     
    © 2020 by the authors. Licensee MDPI, Basel, Switzerland. Going from bench to bedside is a simplified description of translational research, with the ultimate goal being to improve the health status of mankind. Tumor endothelial cells (TECs) perform angiogenesis to support the growth, establishment, and dissemination of tumors to distant organs. TECs have various features that distinguish them from normal endothelial cells, which include alterations in gene expression patterns, higher angiogenic and metabolic activities, and drug resistance tendencies. The special characteristics of TECs enhance the vulnerability of tumor blood vessels toward antiangiogenic therapeutic strategies. Therefore, apart from being a viable therapeutic target, TECs would act as a better mediator between the bench (i.e., angiogenesis research) and the bedside (i.e., clinical application of drugs discovered through research). Exploitation of TEC characteristics could reveal unidentified strategies of enhancing and monitoring antiangiogenic therapy in the treatment of cancer, which are discussed in this review.
  • 尿路上皮癌における抗癌剤治療後の腫瘍血管ABCB1発現亢進と薬剤耐性
    菊地 央, 間石 奈湖, 宮田 遥, 松本 隆児, 大澤 孝宏, 安部 崇重, 樋田 泰浩, 丸山 覚, 原林 透, 飴田 要, 柏木 明, 松野 吉宏, 篠原 信雄, 樋田 京子 日本癌治療学会学術集会抄録集 56回 O22 -3 2018年10月 [査読無し][通常論文]
  • 肺癌症例における腫瘍血管内皮マーカーbiglycanの発現解析
    森本 浩史, 間石 奈湖, 樋田 泰浩, 西原 広史, 畑中 豊, 松野 吉宏, 中村 透, 平野 聡, 樋田 京子 日本病理学会会誌 107 (1) 293 -293 2018年04月 [査読無し][通常論文]
  • 肺癌症例における腫瘍血管内皮マーカーbiglycanの発現解析
    森本 浩史, 間石 奈湖, 樋田 泰浩, 西原 広史, 畑中 豊, 松野 吉宏, 中村 透, 平野 聡, 樋田 京子 日本病理学会会誌 107 (1) 293 -293 2018年04月 [査読無し][通常論文]
  • 樋田 京子 Journal of the Society of Japanese Women Scientists 18 12 -17 2018年 [査読有り][通常論文]
  • 肺癌症例における腫瘍血管内皮細胞マーカーbiglycanの発現解析
    森本 浩史, 間石 奈湖, 樋田 泰浩, 西原 広史, 畑中 豊, 松野 吉宏, 中村 透, 平野 聡, 樋田 京子 日本癌学会総会記事 76回 P -2436 2017年09月 [査読無し][通常論文]
  • 肺癌症例における腫瘍血管内皮細胞マーカーbiglycanの発現解析
    森本 浩史, 間石 奈湖, 樋田 泰浩, 西原 広史, 畑中 豊, 松野 吉宏, 中村 透, 平野 聡, 樋田 京子 日本癌学会総会記事 76回 P -2436 2017年09月 [査読無し][通常論文]
  • 抗癌剤治療前後における腫瘍血管内皮のP-glycoprotein発現変化
    間石 奈湖, 菊地 央, 森本 浩史, 土屋 邦彦, 安部 崇重, 樋田 泰浩, 原林 透, 松野 吉宏, 篠原 信雄, 樋田 京子 日本癌学会総会記事 76回 J -3103 2017年09月 [査読無し][通常論文]
  • 樋田 京子, 間石 奈湖 生体の科学 68 (4) 321 -323 2017年08月 [査読無し][通常論文]
  • 森本浩史, 間石奈湖, 樋田泰浩, 西原広史, 畑中豊, 松野吉宏, 平野聡, 樋田京子 がんと代謝研究会プログラム&抄録集 5th 74 2017年07月 [査読無し][通常論文]
  • 菊地央, 菊地央, 間石奈湖, 秋山廣輔, 森本真弘, 土屋邦彦, 丸山覚, 安部崇重, 樋田泰浩, 原林透, 飴田要, 松本隆児, 松本隆児, 柏木明, 松野吉宏, 篠原信雄, 樋田京子 日本がん転移学会学術集会・総会プログラム抄録集 26th 134 2017年 [査読無し][通常論文]
  • 腫瘍血管・腫瘍血管内皮細胞の特徴とその分子機構
    間石奈湖, 樋田京子 医学のあゆみ 258 (1) 11 -14 2016年07月 [査読無し][通常論文]
  • マイクロRNAと血管疾患
    樋田 京子 血管医学:今が旬!マイクロRNA・エクソソーム最前線 17 (1) 71 -76 2016年03月 [査読無し][通常論文]
  • 樋田 京子, 大賀 則孝, 間石 奈湖, 秋山 廣輔, 樋田 泰浩 別冊Bio Clinica: 慢性炎症と疾患 5 (1) 158 -164 2016年02月 [査読無し][通常論文]
     
    腫瘍血管内皮細胞は正常血管内皮細胞と共通の性質をもつと近年まで考えられてきたが、腫瘍血管は形態学的異常のみならず、内皮細胞にも異常性があることがわかってきた。一方、がん微小環境には多様性があることが明らかになってきた。本研究では転移能の異なる2種類の腫瘍に着目し、それらの腫瘍から分離培養された腫瘍血管内皮細胞には様々な違いがあることを示した。このことにより、微小環境が腫瘍血管内皮細胞の特異性獲得の原因になっていることが示唆された。(著者抄録)
  • 腫瘍血管の分子生物学的特徴
    樋田 京子 細胞工学 35 (1) 19 -22 2016年01月 [査読無し][通常論文]
  • 高転移性腫瘍miRNAはIL-6ならびにALDHの発現亢進を介して血管内皮に薬剤耐性を誘導する
    鳥居 ちさほ, 秋山 廣輔, 川本 泰輔, 間石 奈湖, 鄭 漢忠, 戸塚 靖則, 進藤 正信, 樋田 泰浩, 南 敬, 小坂 展慶, 落谷 孝広, 樋田 京子 日本癌学会総会記事 74回 P -3069 2015年10月 [査読無し][通常論文]
  • CRKアダプター蛋白質はHGF/c-Metフィードバックループを介して膀胱癌のEMTと転移を誘導する
    王 磊, 松本 隆児, 津田 真寿美, 間石 奈湖, 安部 崇重, 木村 太一, 谷野 美智枝, 西原 広史, 樋田 京子, 大場 雄介, 篠原 信雄, 田中 伸哉 日本癌学会総会記事 74回 J -1142 2015年10月 [査読無し][通常論文]
  • 樋田京子, 間石奈湖, 樋田泰浩 実験医学 33 (5) 794 -798 2015年03月15日 [査読無し][通常論文]
  • 腫瘍血管の特性を標的とした新たな治療法の展望
    樋田京子, 間石奈湖, 樋田泰浩 実験医学 増刊「がん微小環境と標的治療」 33 (5) 134 -138 2015年 [査読無し][通常論文]
  • 腫瘍内低酸素環境と腫瘍血管内皮の異常性の関連
    大賀 則孝, 近藤 美弥子, 秋山 廣輔, 間石 奈湖, 北川 善政, 進藤 正信, 樋田 京子 日本口腔科学会雑誌 63 (4) 347 -347 2014年09月 [査読無し][通常論文]
  • 山田健司, 間石奈湖, 大賀則孝, 秋山廣輔, 樋田泰浩, 川本泰輔, MOHAMMAD Towfik Alam, 高橋典彦, 神山俊哉, 樋田京子, 武冨紹信 日本外科学会雑誌 115 361 2014年03月05日 [査読無し][通常論文]
  • 間石 奈湖, 大場 雄介, 大賀 則孝, 秋山 廣輔, 浜田 淳一, 山本 和幸, 川本 泰輔, 進藤 正信, 樋田 泰浩, 樋田 京子 日本病理学会会誌 103 (1) 209 -209 2014年03月 [査読無し][通常論文]
  • 鳥居 ちさほ, 大賀 則孝, 秋山 廣輔, 間石 奈湖, 北條 敬之, 大廣 洋一, 小野 貢伸, 戸塚 靖則, 北川 善正, 鄭 漢忠, 樋田 泰浩, 進藤 正信, 松野 吉宏, 佐藤 靖史, 樋田 京子 日本病理学会会誌 103 (1) 281 -281 2014年03月 [査読無し][通常論文]
  • 安永 賢史, 間石 奈湖, 秋山 廣輔, 山本 和幸, Mohammad Alam T., 大賀 則孝, 篠原 信雄, 進藤 正信, 樋田 泰浩, 樋田 京子 日本病理学会会誌 103 (1) 397 -397 2014年03月 [査読無し][通常論文]
  • 間石 奈湖, 大場 雄介, 樋田 泰浩, 浜田 淳一, 山本 和幸, 大賀 則孝, 秋山 廣輔, 川本 泰輔, 大澤 崇宏, 近藤 美弥子, 大村 瞳, 井上 農夫男, 進藤 正信, 樋田 京子 日本口腔科学会雑誌 63 (1) 135 -135 2014年01月 [査読無し][通常論文]
  • 間石 奈湖, 大賀 則孝, 石川 修平, 樋田 泰浩, 秋山 廣輔, 川本 泰輔, 進藤 正信, 樋田 京子 日本口腔科学会雑誌 63 (1) 92 -92 2014年01月 [査読無し][通常論文]
  • 大村 瞳, 秋山 廣輔, 大賀 則孝, 間石 奈湖, Towfik Alam Mohammad, 樋田 泰浩, 川本 泰輔, 近藤 美弥子, 大澤 崇宏, 飯田 順一郎, 進藤 正信, 樋田 京子 日本口腔科学会雑誌 63 (1) 133 -133 2014年01月 [査読無し][通常論文]
  • 秋山 廣輔, 大賀 則孝, 樋田 泰浩, 間石 奈湖, Towfik Alam Mohammad, 川本 泰輔, 大村 瞳, 山田 健司, 鳥居 ちさほ, 進藤 正信, 樋田 京子 日本口腔科学会雑誌 63 (1) 123 -123 2014年01月 [査読無し][通常論文]
  • 秋山 廣輔, 川本 泰輔, 大賀 則孝, 樋田 泰浩, 近藤 美弥子, 間石 奈湖, 大澤 崇宏, 山本 和幸, 進藤 正信, 樋田 京子 日本口腔科学会雑誌 63 (1) 170 -170 2014年01月 [査読無し][通常論文]
  • 腫瘍血管新生阻害療法の今後の展望
    樋田 京子 Surgery Frontier~特集:癌と微小環境 21 (2) 53 -57 2014年 [査読無し][通常論文]
  • 腫瘍血管内皮の特異性と新たな治療戦略への展望
    樋田 京子 病理と臨床~特集:がんと間質 32 (1) 45 -50 2014年 [査読無し][通常論文]
  • 腫瘍血管内皮の特異性と新規治療への応用
    樋田 京子 がん分子標的治療 別冊 11 (2) 55 -58 2013年12月 [査読無し][通常論文]
  • 腫瘍血管内皮細胞の特異性と治療感受性
    樋田 京子 最新医学 68 (12) 40 -45 2013年12月 [査読無し][通常論文]
  • Kyoko Hida, Noritaka Ohga, Kosuke Akiyama, Nako Maishi, Yasuhiro Hida Cancer Science 104 (11) 1391 -1395 2013年11月 [査読無し][通常論文]
     
    Tumor blood vessels play important roles in tumor progression and metastasis. Thus, targeting tumor blood vessels is an important strategy for cancer therapy. Tumor endothelial cells (TECs) are the main targets of anti-angiogenic therapy. Although tumor blood vessels generally sprout from pre-existing vessels and have been thought to be genetically normal, they display a markedly abnormal phenotype, including morphological changes. The degree of angiogenesis is determined by the balance between the positive and negative regulating molecules that are released by tumor and host cells in the microenvironment. Reportedly, tumor blood vessels are heterogeneous with TECs differing from normal endothelial cells (in contrast to the conventional view). We recently compared characteristics of different TECs isolated from highly and low metastatic tumors. We found TECs from highly metastatic tumors had more proangiogenic phenotypes than those from low metastatic tumors. Elucidating the variety of TEC phenotypes and identifying TEC molecular signatures should lead to more complete understanding of the mechanisms of tumor progression, discovery of new therapeutic targets, and development of biomarkers. This review considers current studies on TEC heterogeneity and discusses the therapeutic implications of these findings. © 2013 Japanese Cancer Association.
  • 間石奈湖, 大場雄介, 山本和幸, 大賀則孝, 浜田淳一, 秋山廣輔, 川本泰輔, 大澤崇宏, 大村瞳, 樋田泰浩, 進藤正信, 樋田京子 日本病理学会会誌 102 (1) 437 2013年04月26日 [査読無し][通常論文]
  • 大村瞳, 秋山廣輔, 大賀則孝, 間石奈湖, TOWFIK Alam Mohammad, 樋田泰浩, 川本泰輔, 近藤美弥子, 大澤崇宏, 飯田順一郎, 進藤正信, 樋田京子 日本病理学会会誌 102 (1) 435 2013年04月26日 [査読無し][通常論文]
  • 山田健司, 間石奈湖, 大賀則考, 秋山廣輔, 川本泰輔, TOWFIK Mohammad, 大村瞳, 鳥居ちさほ, 高橋典彦, 樋田泰浩, 進藤正信, 武冨紹信, 樋田京子 日本病理学会会誌 102 (1) 307 2013年04月26日 [査読無し][通常論文]
  • 山本 和幸, 大賀 則孝, 樋田 泰浩, 間石 奈湖, 川本 泰輔, 秋山 廣輔, 大澤 崇宏, 近藤 美弥子, 加賀 基知三, 平野 聡, 篠原 信雄, 進藤 正信, 樋田 京子 北海道醫學雜誌 = Acta medica Hokkaidonensia 88 (2) 2013年04月01日 [査読無し][通常論文]
  • Towfik Alam, 大賀 則孝, 山本 和幸, 秋山 廣輔, 間石 奈湖, 川本 泰輔, 進藤 正信, 樋田 泰浩, 樋田 京子 日本病理学会会誌 102 (1) 437 -437 2013年04月 [査読無し][通常論文]
  • 秋山 廣輔, 大賀 則孝, 樋田 泰浩, 間石 奈湖, Towfik Mohammad Alam, 川本 泰輔, 大村 瞳, 山田 健司, 鳥居 ちさほ, 進藤 正信, 樋田 京子 日本病理学会会誌 102 (1) 325 -325 2013年04月 [査読無し][通常論文]
  • 樋田泰浩, 大賀則孝, 秋山廣輔, 間石奈湖, 川本泰輔, 大村瞳, 鳥居さちほ, 松居喜郎, 樋田京子 再生医療 12 249 2013年02月28日 [査読無し][通常論文]
  • 秋山廣輔, 大賀則孝, 樋田泰浩, 間石奈湖, TOWFIK Alam Mohammad, 川本泰輔, 大村瞳, 山田健司, 鳥居ちさほ, 進藤正信, 樋田京子 日本がん転移学会学術集会・総会プログラム抄録集 22nd 78 2013年 [査読無し][通常論文]
  • 間石奈湖, 大場雄介, 大賀則孝, 秋山廣輔, 山本和幸, 浜田淳一, 川本泰輔, ALAM Mohammad T, 樋田泰浩, 樋田京子 日本血管生物医学会学術集会プログラム・抄録集 21st 134 2013年 [査読無し][通常論文]
  • 樋田京子, 大賀則孝, 秋山廣輔, 間石奈湖, 川本泰輔, 大場雄介, 樋田泰浩 がん研究分野の特性等を踏まえた支援活動公開シンポジウムプログラム・抄録集 平成24年度 32 2013年 [査読無し][通常論文]
  • 北條敬之, 間石奈湖, 秋山廣輔, 大賀則孝, 近藤美弥子, 角谷瞳, 進藤正信, 樋田泰浩, 藤澤俊明, 樋田京子 日本血管生物医学会学術集会プログラム・抄録集 21st 154 2013年 [査読無し][通常論文]
  • 間石奈湖, 大場雄介, 大賀則孝, 秋山廣輔, 山本和幸, 浜田淳一, 川本泰輔, ALAM MOHAMMAD T, 大村瞳, 樋田泰浩, 樋田京子 日本がん転移学会学術集会・総会プログラム抄録集 22nd 79 2013年 [査読無し][通常論文]
  • 秋山 廣輔, 大賀 則孝, 樋田 泰浩, 川本 泰輔, 定本 圭弘, 石川 修平, 間石 奈湖, 秋野 文臣, 近藤 美弥子, 松田 彩, 井上 農夫男, 進藤 正信, 樋田 京子 日本口腔科学会雑誌 62 (1) 169 -169 2013年01月 [査読無し][通常論文]
  • 山田健司, 間石奈湖, 大賀則孝, 秋山廣輔, 樋田泰浩, 川本泰輔, ALAM Mohammad Towfik, 高橋典彦, 神山俊哉, 武冨紹信, 樋田京子 日本血管生物医学会学術集会プログラム・抄録集 21st 155 2013年 [査読無し][通常論文]
  • 腫瘍細胞由来のmicrovesiclesがエンドサイトーシスを介して血管内皮細胞に血管新生能を獲得させる(Tumor-derived microvesicles induce proangiogenic phenotype in endothelial cells via endocytosis)
    川本 泰輔, 大賀 則孝, 秋山 廣輔, 平田 尚也, 北原 秀治, 間石 奈湖, 大澤 崇宏, 山本 和幸, 近藤 美弥子, 進藤 正信, 樋田 泰浩, 樋田 京子 日本癌学会総会記事 71回 293 -293 2012年08月 [査読無し][通常論文]
  • 大賀 則孝, 石川 修平, 樋田 泰浩, 秋山 廣輔, 間石 奈湖, 川本 泰輔, 進藤 正信, 樋田 京子 日本DDS学会学術集会プログラム予稿集 28回 173 -173 2012年06月 [査読無し][通常論文]
  • 山本和幸, 樋田泰浩, 加賀基知三, 平野聡, 樋田京子 日本外科学会雑誌 113 308 2012年03月05日 [査読無し][通常論文]
  • 大澤 崇宏, 樋田 京子, 大賀 則孝, 秋山 廣輔, 樋田 泰浩, 丸山 覚, 安部 崇重, 佐澤 陽, 篠原 信雄, 進藤 正信, 野々村 克也 日本泌尿器科学会雑誌 103 (2) 356 -356 2012年03月 [査読無し][通常論文]
  • 秋山 廣輔, 大賀 則孝, 樋田 泰浩, 川本 泰輔, 定本 圭弘, 石川 修平, 間石 奈湖, 秋野 文臣, 近藤 美弥子, 松田 彩, 井上 農夫男, 進藤 正信, 樋田 京子 日本病理学会会誌 101 (1) 287 -287 2012年03月 [査読無し][通常論文]
  • Kyoko Hida Seikagaku 84 (1) 43 -46 2012年 [査読無し][通常論文]
  • 大村瞳, 大村瞳, 大賀則孝, 樋田泰浩, 秋山廣輔, 間石奈湖, 近藤美弥子, 大澤崇宏, 山本和幸, 川本泰輔, 飯田順一郎, 進藤正信, 樋田京子 日本がん転移学会学術集会・総会プログラム抄録集 21st 91 2012年 [査読無し][通常論文]
  • 間石奈湖, 大場雄介, 山本和幸, 大賀則孝, 浜田淳一, 秋山廣輔, 川本泰輔, 大澤崇宏, 近藤美弥子, 大村瞳, 樋田泰浩, 樋田京子 日本がん転移学会学術集会・総会プログラム抄録集 21st 104 2012年 [査読無し][通常論文]
  • 腫瘍血管内皮細胞の異常性
    樋田 京子 生化学 84 (1) 43 -46 2012年 [査読無し][通常論文]
  • 樋田 京子 “Drug Delivery System”、 特集「基礎から拓くDDS創薬フロンティア」日本DDS学会 27 (1) 34 -39 2012年 [査読有り][通常論文]
  • 樋田 京子 日本口腔腫瘍学会誌 24 (3) 88 -94 2012年 [査読有り][通常論文]
  • 大賀則孝, 石川修平, 樋田泰浩, 秋山広輔, 間石奈湖, 川本泰輔, 近藤美弥子, 進藤正信, 樋田京子 日本臨床口腔病理学会総会・学術大会プログラム・抄録集 22nd 145 2011年 [査読無し][通常論文]
  • 大賀 則孝, 村木 力, 黒須 拓郎, 樋田 泰浩, 土屋 邦彦, 戸塚 靖則, 進藤 正信, 樋田 京子 日本口腔科学会雑誌 60 (1) 27 -27 2011年01月 [査読無し][通常論文]
  • 樋田 京子, 大賀 則孝, 樋田 泰浩, 進藤 正信 日本病理学会会誌 99 (2) 17 -17 2010年09月 [査読無し][通常論文]
  • 石川 修平, 大賀 則孝, 秋野 文臣, 樋田 泰浩, 黒須 拓郎, 秋山 廣輔, 近藤 美弥子, 間石 奈湖, 篠原 信雄, 野々村 克也, 進藤 正信, 樋田 京子 日本泌尿器科學會雜誌 101 (2) 2010年02月20日 [査読無し][通常論文]
  • 大賀 則孝, 樋田 京子, 樋田 泰浩, 村木 力, 土屋 邦彦, 大廣 洋一, 戸塚 靖則, 進藤 正信 日本病理学会会誌 98 (1) 370 -370 2009年03月 [査読無し][通常論文]
  • 秋野 文臣, 樋田 京子, 樋田 泰浩, 土屋 邦彦, 大賀 則孝, 松田 光平, 黒須 拓郎, 石川 修平, 秋山 広輔, 佐澤 陽, 篠原 信雄, 進藤 正信, 野々村 克也 日本泌尿器科學會雜誌 100 (2) 2009年02月20日 [査読無し][通常論文]
  • 樋田京子, 秋野文臣, 樋田泰浩 実験医学 27 (2) 277-283,148(4) 2009年02月01日 [査読無し][通常論文]
  • 大賀則孝, 樋田泰浩, 土屋邦彦, 土屋邦彦, 村木力, 秋山広輔, 近藤美弥子, 間石奈湖, 黒須拓郎, 戸塚靖則, 進藤正信, 樋田京子 日本血管生物医学会 17th 74 2009年 [査読無し][通常論文]
  • がん組織中の血管内皮細胞の異常性-遺伝子発現から染色体異常まで
    樋田 京子 実験医学増刊号「癌の微小環境と適応応答の最前線」 27 (2) 149 -155 2009年 [査読無し][通常論文]
  • 腫瘍血管内皮細胞の特性と治療抵抗性
    樋田 京子 血管医学 特集「がんと血管-イメージングから治療まで-」 10 (4) 23 -28 2009年 [査読無し][通常論文]
  • 樋田京子, 樋田泰浩 細胞 40 (12) 512 -515 2008年11月20日 [査読無し][通常論文]
  • 樋田京子, 樋田泰浩, 秋野文臣, 大賀則孝, 松田光平, 黒須拓郎, 土屋邦彦, 村木力, 進藤正信 補体シンポジウム講演集 45th 178 2008年07月 [査読無し][通常論文]
  • 黒須拓郎, 樋田京子, 樋田泰浩, 藤江学, 小野寺雄一郎, 土屋邦彦, 村木力, 大賀則孝, 松田光平, 秋野文臣, 戸塚靖則, 進藤正信 日本病理学会会誌 97 (1) 239 2008年03月31日 [査読無し][通常論文]
  • 樋田泰浩, 樋田京子, BIELENBERG Diane, KLAGSBRUN Michael, 近藤哲 Biotherapy (Tokyo) 22 (2) 80 -86 2008年03月30日 [査読無し][通常論文]
  • 樋田 泰浩, 樋田 京子, Bielenberg Diane, Klagsbrun Michael, 近藤 哲 癌の臨床 54 (3) 157 -162 2008年03月 [査読無し][通常論文]
  • 秋野 文臣, 樋田 京子, 土屋 邦彦, 樋田 泰浩, 村木 力, 大賀 則孝, 松田 光平, 黒須 拓郎, Klagsbrun Michael, 原林 透, 篠原 信雄, 野々村 克也, 進藤 正信 日本病理学会会誌 97 (1) 224 -224 2008年03月 [査読無し][通常論文]
  • 秋野文臣, 樋田京子, 土屋邦彦, 樋田泰浩, KLAGSBRUN Michael, 村木力, 大賀則孝, 松田光平, 原林透, 篠原信雄, 進藤正信, 野々村克也 日本泌尿器科学会雑誌 99 (2) 251 2008年02月20日 [査読無し][通常論文]
  • Kyoko Hida, Yasuhiro Hida, Masanobu Shindoh Cancer Science 99 (3) 459 -466 2008年02月 [査読無し][通常論文]
     
    Tumor angiogenesis is necessary for solid tumor progression and metastasis. Tumor blood vessels have been shown to differ from their normal counterparts, for example, by changes in morphology. An important concept in tumor angiogenesis is that tumor endothelial cells are assumed to be genetically normal, even though these endothelial cells are structurally and functionally abnormal. To date, many anti-angiogenic drugs have been developed, but, their therapeutic efficacy is not dramatic and they have also been reported to cause toxic side effects. To develop ideal antiangiogenic therapies, understanding tumor endothelial cell abnormalities is important. We have isolated tumor endothelial cells from mouse tumor xenografts and have shown that tumor-associated endothelial cells are abnormal. Tumor-associated endothelial cells upregulate many genes, such as epidermal growth factor receptor (EGFR). Tumor-associated endothelial cells are also more sensitive to EGF. They also have relatively large, heterogeneous nuclei. Unexpectedly, tumor endothelial cells are cytogenetically abnormal. Fluorescence in situ hybridization (FISH) analysis showed that freshly isolated uncultured tumor endothelial cells were aneuploid and had abnormal multiple centrosomes. The degree of aneuploidy was exacerbated by passage in culture. In marked contrast, freshly isolated normal skin and adipose endothelial cells were diploid. They had normal centrosomes and remained cytogenetically stable in culture even up to 20 passages. We conclude that tumor endothelial cells can acquire cytogenetic abnormalities while in the tumor microenvironment. Questions as to whether or not tumor endothelial cells become resistant to antiangiogenic drugs are thus raised. Our preliminary data show that tumor endothelial cells are more resistant to certain chemotherapeutic drugs. Studies to evaluate the mechanism for cytogenetic abnormalities in tumor endothelial cells are underway. It is becoming quite clear that the tumor vasculature is much more complex and unpredictable than initially perceived. Here, we provide an overview of the current studies on tumor endothelial cell abnormalities. © 2007 Japanese Cancer Association.
  • 大賀則孝, 樋田京子, 樋田泰浩, 村木力, 土屋邦彦, 松田光平, 大廣洋一, 戸塚靖則, 進藤正信 生化学 1P-1394 2008年 [査読無し][通常論文]
  • 腫瘍血管内皮細胞の特性
    樋田 京子 細胞 40 (12) 16 -19 2008年 [査読無し][通常論文]
  • 樋田 泰浩, 樋田 京子, Bielenberg Diane, Klagsbrun Michael, 近藤 哲 日本外科学会雑誌 108 (臨増2) 76 -76 2007年03月 [査読無し][通常論文]
  • 松田光平, 樋田京子, 土屋邦彦, 村木力, 樋田泰浩, 大賀則孝, 秋野文臣, 戸塚靖則, 進藤正信 日本病理学会会誌 96 (1) 185 2007年02月05日 [査読無し][通常論文]
  • 喜屋武麻記子, 喜屋武麻記子, 小野寺雄一郎, 飯塚正, 樋田京子, 東野史裕, 北川善政, 進藤正信 日本口腔科学会雑誌 56 (1) 118 -119 2007年01月10日 [査読無し][通常論文]
  • 樋田京子, 樋田泰浩, 進藤正信 生化学 4W12-4 2007年 [査読無し][通常論文]
  • 樋田京子, 樋田泰浩 実験医学 24 (18) 2852 -2857 2006年11月10日 [査読無し][通常論文]
  • 樋田京子, 村木力, 樋田泰浩, 土屋邦彦, 松田光平, KLAGSBRUN Michael, 進藤正信 日本癌学会学術総会記事 65th 33 2006年08月28日 [査読無し][通常論文]
  • 樋田京子, 樋田泰浩, 土屋邦彦, 村木力, 小林正伸, KLAGSBRUN Michael, 進藤正信 日本病理学会会誌 95 (1) 241 2006年03月18日 [査読無し][通常論文]
  • 村木力, 樋田京子, 樋田泰浩, 土屋邦彦, 戸塚靖則, KLAGSBRUN Michael, 進藤正信 日本病理学会会誌 95 (1) 241 2006年03月18日 [査読無し][通常論文]
  • 樋田 泰浩, 樋田 京子, Klagsbrun Michael, 宮本 正樹, 平野 聡, 加賀 基知三, 大竹 節之, 七戸 俊明, 近藤 哲 日本外科学会雑誌 107 (2) 2006年03月05日 [査読無し][通常論文]
  • 腫瘍血管内皮細胞の特異性-理想的な血管新生阻害剤の開発を目指して
    樋田 京子 総説 実験医学増刊号「急速進展する血管研究」 24 (18) 152 -157 2006年 [査読無し][通常論文]
  • 樋田京子, 樋田泰浩, 進藤正信, KLAGSBRUN Michael 日本癌学会学術総会記事 64th 43 2005年08月15日 [査読無し][通常論文]
  • 樋田泰浩, 樋田京子, 清水昭夫, BIELENBERG Diane, MOSES Marsha, KLAGSBRUN Michael 日本癌学会学術総会記事 64th 44 2005年08月15日 [査読無し][通常論文]

受賞

  • 2017年03月 日本女性科学者の会 第22回(2017年度)日本女性科学者の会 奨励賞
     新しいがん治療法の開発を目指したがん微小環境における血管の異常性解明 
    受賞者: 樋田 京子
  • 2012年12月 The 10th Korea-Japan Joint Symposium on Vascular Biology The 20th annual Meeting of the Japanese Vascular Biology and MedicineOrganization,
     Characterization of stem-like tumor endothelial cells 
    受賞者: Kyoko HIDA
  • 2010年 平成17年度 日本病理学会学術研究賞
  • 2005年 平成17年度 湯浅記念財団賞
  • 2005年 第50回日本口腔外科学会 メダルティス賞受賞

共同研究・競争的資金等の研究課題

  • がんと腫瘍血管の相互作用による新たな転移促進機構の解明とその制御
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(C)
    研究期間 : 2021年04月 -2024年03月 
    代表者 : 菊地 奈湖, 樋田 京子, 樋田 泰浩, 篠原 信雄, 大廣 洋一, 松田 彩
  • 腫瘍血管トランスポーターを標的とした薬剤耐性口腔がんの制御
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(C)
    研究期間 : 2021年04月 -2024年03月 
    代表者 : 梅山 悠伊, 樋田 京子, 菊地 奈湖, 松田 彩
  • 腫瘍血管内皮細胞因子標的によるがん免疫の活性化と新たな治療法開発
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(A)
    研究期間 : 2021年04月 -2024年03月 
    代表者 : 樋田 京子, 菊地 奈湖, 樋田 泰浩, 大廣 洋一, 松田 彩, 上田 倫弘
  • 腫瘍特異的血管新生阻害剤とドラッグリポジショニングによる新規肺癌治療の開発
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(B)
    研究期間 : 2021年04月 -2024年03月 
    代表者 : 樋田 泰浩, 菊地 奈湖, 樋田 京子
  • 腫瘍血管由来因子を標的とした腫瘍溶解ウイルスの開発
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(C)
    研究期間 : 2020年04月 -2023年03月 
    代表者 : 松田 彩, 菊地 奈湖, 樋田 京子, 東野 史裕
  • 歯髄の治癒促進と硬組織接着性を併せ持つ革新的直接覆髄材の探索研究
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(C)
    研究期間 : 2019年04月 -2022年03月 
    代表者 : 佐野 英彦, 松本 真理子, 樋田 京子
     
    歯を削る必要のある治療の際に,時として歯の神経(歯髄)まで至る切削が行われることがある.この時,条件が許されれば歯髄を保存していく治療が可能になる.そのことで,歯髄を除去する際の歯に対する大きなダメージを与えることなく,歯の寿命を延ばすことが期待できる.米国等の先進国では極めて高価な神経の治療を回避することが可能となる.いまのところ,このような時に使える材料や手技に限界があり,新たな材料の出現が待たれている.本研究では,露出された歯の神経の部分を完全にシールし,傷ついた神経の治癒を助ける材料の開発を検討していくことを目的としている. 本研究を遂行していくにあたり,臨床に有用な新規直接覆髄材の開発に際して,①直接覆髄材に用いる適切なキャリアの選択,② MTAとキャリアの適切な配合とそれに対する生体反応の検討,③ CPN等ナノ物質を用いた場合に,生体の治癒促進が可能であるかどうかの検討,④偶発的露髄に関して,その治癒過程における分子細胞生物学的な検討を行うことを視野に入れている. 硬組織接着性と歯髄の治癒促進を併せ持つ直接覆髄材は,今のところ製品として世界に見られない.加えて,直接覆髄ための臨床技法はテクニックセンシティブであり臨床成績も期待できないことが多々ある.また,臨床成績が期待できるMTAに関してもその治癒機転に関する詳細なメカニズムは明らかでない.従って本研究では,臨床に直接有効な開発に関わるばかりではなく,偶発的露髄の治癒機転に関する生物学的な新たな知見も期待していくことにもある.
  • エナメル上皮腫の浸潤機構解明による新規治療法の開発
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(C)
    研究期間 : 2019年04月 -2022年03月 
    代表者 : 北村 哲也, 菊地 奈湖, 大廣 洋一, 樋田 京子, 東野 史裕, 松田 彩
     
    本研究ではエナメル上皮腫の浸潤性増殖の解明を目的とし、主にbudding領域について詳細な検討を行ってきた。budding領域は、エナメル上皮腫の組織学的特徴の一つで、腫瘍から間質への出芽様構造のことであり、これが浸潤性増殖の原因と考えられている。これまで我々は、budding領域にHuRタンパク質と⊿Np63タンパク質が高発現していることを免疫組織学的に明らかにしてきた。そこで、HuRと⊿Np63との分子生物学的関連について着目した。HuRはmRNA結合タンパクであることから、HuRタンパクと⊿Np63 mRNAとの結合をRIP assay法によって検討した。細胞はエナメル上皮腫の培養細胞株であるAM-1細胞を用いた。その結果、HuRタンパクは⊿Np63 mRNAに結合することが明らかとなった。また、HuRタンパクとmRNAの結合を特異的に阻害するCMLD2を用いたところ、HuRタンパクと⊿Np63 mRNAとの結合は阻害された。 次に、HuRタンパクと⊿Np63 mRNAの結合の意義について検討した。AM-1細胞にCMLD-2を用いて、⊿Np63 mRNAの発現をreal time PCR法を用いて、⊿N63タンパク質の発現についてWestern blotting法を用いて検討した。⊿Np63 mRNAの半減期はCMLDを作用させると短くなり、⊿N63タンパク質は経時的に発現が減少した。このことから、HuRタンパクは⊿Np63 mRNAに結合して、mRNAを安定化させ、その結果タンパク質の発現を上昇させていることが明らかとなった。 これらの結果から、budding領域での生物学的機序が明らかとなった。
  • 口腔がんの転移に関わる口腔常在菌の解析
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(C)
    研究期間 : 2019年04月 -2022年03月 
    代表者 : 大廣 洋一, 北村 哲也, 樋田 京子, 長谷部 晃
     
    細菌特異的な16s rDNAの発現をPCRで確認する際,バックグラウンドの低下と,精度を向上させるために下記を行った. 1) 腫瘍組織選択的なDNA 抽出条件の検討:手術標本の残余組織を用いて,①未染のパラフィン固定された組織,②ヘマトキシリン・エオジン(HE)染色された切片よりNucleoSpin DNA FFPE XSにてDNAを抽出した.HE染色により,腫瘍組織より選択的にDNAを回収できることを想定したが,HE染色によりDNA収量が30%程度以下になることを確認した.HEで染色では腫瘍部・非腫瘍部を判別するには簡便だが,DNAの抽出には不利であることがわかった. 2)ポジティブコントロールの調整:手術残余組織と細菌学教室より供与いただいたストレプトコッカス・ミュータンス(S. mutans)とを混合し,DNA抽出,PCRを行った.また,同様に大腸菌(E. Coli)を材料として上記手順を行ったところ組織とS. mutansの混合物ならびにE. Coliから回収したサンプルでは16srDNAの発現が確認された. 3)転移リンパ節標本からのDNA抽出条件の検討:リンパ節標本(15x15mm大)ならびに原発腫瘍の深部(細菌に汚染されていない部分)のみからなる薄切(4.25 μm)切片10枚よりDNAを抽出し,さらにポジティブコントロールとして大腸菌(E.Coli)由来のDNAを用いて,PCRを行ったところ30サイクルではポジティブコントロールのみで発現したが,実験群では発現は確認できなかった.PCRの条件に問題はないが,標的臓器で確認するためには,キットの選定,プライマーの設定,サイクル数などの検討が必要と考えられた.
  • 正常血管に作用しない悪性腫瘍特異的血管新生阻害剤のハイスループットスクリーニング
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(B)
    研究期間 : 2018年04月 -2021年03月 
    代表者 : 樋田 泰浩, 菊地 奈湖, 樋田 京子
  • 口腔がんエクソソームによるがんの転移促進機構の解明と転移制御への応用
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(B)
    研究期間 : 2018年04月 -2021年03月 
    代表者 : 樋田 京子, 北村 哲也, 菊地 奈湖, 樋田 泰浩, 大廣 洋一, 大賀 則孝
     
    高転移性の癌細胞に特異的なエクソソームmiRANの同定:高転移性・低転移性の癌細胞の培養上清から超遠心法によりエクソソームを精製し、CD9、CD63などの膜抗原の確認を行った後、miRNAを抽出した。miRNA アレイにより転移能の異なるがん細胞エクソソームにおけるmiRNAレベルを比較し、絞り込んだmiRNAについてTaqman-qPCR 法で再現性を確認した。 高転移性がん由来エクソソームmiRNAの血管内皮への影響の解析(in vitro): 上述で絞り込まれたmiRNAを正常血管内皮細胞に導入したもの、ならびに高転移性、低転移性がんそれぞれのエクソソームを処理した正常血管内皮においてその遺伝子発現を比較する。共通して発現亢進している分子の中から、血管内皮細胞のE-selectin、ICAM1、CAM2、 VCAMなどの接着分子ならびにVE-cadherin、ZO-1などの細胞間接着分子の発現変動に注目する。さらに腫瘍血管内皮から多く分泌されていることを見出している因子(biglycan、IL6、PTX3など)の発現変動についても解析した。さらに、上記で選別されたmiRNAのmimicを正常血管内皮に導入し共通して発現量が増加するmiRNAを血管内皮形質変化責任miRNA-Xとして同定し、エクソソームmiRNA-Xによる血管内皮細胞の形質変化を解析した。miR-Xにより血管内皮のモノレイヤーに対するがん細胞の浸潤性が促進することを見出した。VE-cadherinの発現低下がその機序の一つとして見出された。
  • 腫瘍血管内皮による転移促進機構解明のための基盤的研究
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(C)
    研究期間 : 2018年04月 -2021年03月 
    代表者 : 菊地 奈湖, 樋田 京子, 大賀 則孝, 樋田 泰浩
     
    腫瘍血管は,がんに栄養や酸素を供給し,がんの増大や転移に重要である.腫瘍血管を裏打ちする腫瘍血管内皮細胞は,様々な異常性を示し,がんの悪性化に寄与することがわかってきた.最近,われわれは腫瘍血管内皮細胞がBiglycanを分泌してがん細胞の血管内侵入を促進し,転移促進に関与することを報告した.しかし,がん細胞の血管内侵入後における腫瘍血管内皮細胞の役割については不明である.そこで,がん細胞が血管内で細胞塊を形成すること,腫瘍血管内皮細胞に接着しやすいこと,また腫瘍血管内皮細胞が様々な接着因子や増殖因子を高く発現することなど,これまで得られてきた腫瘍血管内皮細胞の異常性に関する知見をふまえ,がん細胞が原発巣から転移先臓器へと移動する血液中において,腫瘍血管内皮細胞ががん細胞と接着することで周囲のストレスから保護し,転移巣形成に寄与すると仮説を立てた.本研究では,腫瘍血管内皮細胞の転移における様々な役割を分子基盤とともに解明することを目的とした. 昨年度は,がん細胞と血管内皮細胞の細胞塊形成について,非接着性プレート上で様々ながん細胞と血管内皮細胞を共培養して観察し,スフェロイドの局在に違いがあることを見出した.今年度は,非接着プレート上で培養して作製したスフェロイドの性質を解析した.腫瘍血管内皮細胞とがん細胞のスフェロイドでは,正常血管内皮細胞とのスフェロイドに比べてがん細胞の生存能・増殖能が高かった.さらに,作製したスフェロイドをマウス尾静脈から投与したところ,転移に違いが見られた.腫瘍血管内皮細胞とがん細胞がスフェロイド形成することで,がん細胞の性質に変化があることが示唆された.現在,スフェロイド形成させた後にフローサイトメトリーでがん細胞ならびに血管内皮細胞をそれぞれ分離し,それらの遺伝子発現をPCR arrayならびにDNA microarrayにて検討中である.
  • 腫瘍血管・がん微小環境のネットワークの解明と新規血管新生阻害療法の開発
    日本医療研究開発機構 (AMED):2018 革新的がん医療実用化研究事業-がんネットワークの臨床的意義の理解に基づく医療シーズの開発研究
    研究期間 : 2018年04月 -2021年03月 
    代表者 : 樋田 京子
  • 細胞社会をつなぐ血管内皮細胞のダイバーシティー獲得機構の解明
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 新学術領域研究(研究領域提案型)
    研究期間 : 2018年04月 -2020年03月 
    代表者 : 樋田 京子
     
    Biglycanノックアウトマウスを用いてin vivo 腫瘍モデルを用いてがん間質細胞と血管の相互的な関係におけるbiglycan の機能について解析した。腫瘍血管が発現するBiglycanが癌関連マクロファージや細胞傷害性リンパ球の動員の抑制に働いている知見を見出した。このことは腫瘍内の血管内皮によっても、こうした分子を発現しているものとそうでないものがあり、多様な性質をもち、さらには周囲の免疫環境にも異なる影響を及ぼしている可能性が示唆された。また,腫瘍血管内皮細胞のBiglycan により周囲間質の線維化が促進されることがわかり,免疫細胞の癌組織内の遊走を抑制する要因の一つになっていることが示唆された. また、治療経過による環境変化と上皮EMTと血管内皮細胞の相互作用についても検討を行った。 一次化学療法としてゲムシタビン,シスプラチンにより治療された尿路上皮がん患者の病理検体を用いた解析において,抗癌剤治療によるがん細胞のIL-8などのサイトカイン量の増加により、腫瘍血管内皮細胞においてNF-kBが活性化し,薬剤耐性関連分子ABCB1 の発現レベルが上昇することを見出した.2次治療として用いられるパクリタキセルに対する耐性の原因の一つとなることをin vitro, in vivo 両方において証明した. 治療経過による微小環境の変化によりがん細胞と血管の間の相互作用も変化しうることが示唆された。特に血管内皮細胞において治療中に発現変化する分子はその後の癌細胞の血行転移にも関連するため,治療標的として重要であることが示唆された.
  • 日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(B)
    研究期間 : 2012年04月 -2016年03月 
    代表者 : 樋田 泰浩, 加賀 基知三, 松居 喜郎, 加藤 達哉, 樋田 京子
     
    担癌マウスの腫瘍血管内皮細胞,特に転移能の高い腫瘍から分離された腫瘍血管内皮細胞でビグリカンの高発現が顕著であった. siRNAでビグリカンをノックダウンすると,腫瘍細胞の血管内皮細胞の接着や細胞シート下層への浸潤の低下が認められた.マウスの肺転移モデルでは腫瘍血管内皮細胞を共移植すると転移能を持たない腫瘍細胞が転移能を獲得した.これは腫瘍血管内皮細胞におけるビグリカンの発現を抑制するとキャンセルされた.ヒト癌組織の免疫では腫瘍血管に特異的にビグリカンの発現が認められた.血液検体のELISA検査で担癌患者,特に転移陽性例で血清中ビグリカン濃度が高い傾向が認められた.
  • 日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(B)
    研究期間 : 2012年04月 -2015年03月 
    代表者 : 戸塚 靖則, 大賀 則孝, 鄭 漢忠, 大廣 洋一, 進藤 正信, 樋田 京子
     
    癌組織は強い低酸素とともに,極度の低栄養状態にある.そのような環境で生じる活性酸素(ROS)ががん幹細胞や,さらにそのニッチの役割を果たす腫瘍血管の生態に及ぼす影響を解明し,がん幹細胞の標的化治療法につながる分子機構に迫った.ROSにより癌細胞において幹細胞マーカーの発現や血管新生因子の発現が亢進し,さらに腫瘍血管内皮においても様々な遺伝子の発現が変動した.ROSにより増加する腫瘍血管内皮由来分泌たんぱくのうちがん細胞を走化させ,未分化性の維持に働くことものがあることが示唆された. 最後に,抗酸化剤DPIを用いてin vivo 腫瘍増殖に対する効果を検証した.
  • 日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(C)
    研究期間 : 2012年04月 -2015年03月 
    代表者 : 小堀 善則, 大賀 則孝, 樋田 京子
     
    腫瘍血管内皮において、COX-2/プロスタグランジンE2(PGE2)、プロスタサイクリン(PGI2)が高発現し、積極的に生存に使用していることがわかった。今後の血管新生阻害療法の治療戦略として、高価な分子標的薬を用いる他にも、安価で、莫大な数があるCOX-2/プロスタグランジンE2(PGE2)阻害剤を癌治療に用いることができる可能性が示唆された。
  • がん微小環境における血管内皮多様性解明と転移の制御
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 新学術領域研究(研究領域提案型)
    研究期間 : 2013年04月 -2014年03月 
    代表者 : 樋田 京子
  • 腫瘍血管の異常性獲得に関わるmiRNAの同定と新規血管新生阻害療法への応用
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 挑戦的萌芽研究
    研究期間 : 2013年04月 -2014年03月 
    代表者 : 樋田 京子
  • 日本学術振興会:科学研究費助成事業 挑戦的萌芽研究
    研究期間 : 2012年04月 -2014年03月 
    代表者 : 樋田 泰浩, 加賀 基知三, 松居 喜郎, 加藤 達哉, 樋田 京子
     
    腫瘍の中の血管細胞(腫瘍血管内皮細胞, TEC)が分泌するマイクロRNA(miRNA)が腫瘍の遠隔転移を促進するという仮説の元に研究を行った.実験動物に移植してもほとんど転移しない悪性黒色腫の細胞株A375と同株から樹立された良く転移するA375SM("super metastatic")を用いた.それらの細胞株を移植したマウスに出来た腫瘍からそれぞれTECを分離してmiRNAを抽出し,miRNAマイクロアレイで発現量の比較を行った.見出したA375SMのTECに特異的に多いmiRNAを皮膚から分離された正常血管内皮細胞に導入すると,A375SMのTECと同様の性質を持つようになった.
  • 口腔環境が口腔がんの悪性化・上皮間葉移行を誘導する機構の解明
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 挑戦的萌芽研究
    研究期間 : 2012年04月 -2014年03月 
    代表者 : 進藤 正信, 北村 哲也, 樋田 京子, 東野 史裕
     
    口腔がんの腫瘍周囲環境が腫瘍の発生、増殖、浸潤、転移等の悪性化に関与する因子を検索することを目的に研究を行った。副甲状腺 関連タンパクPTHrPは乳がんや前立腺癌の骨転移において重要な役割を果たすことが知られている。口腔がん細胞でもPTHrPが高発現していることを我々は見いだした。さらに実際の口腔がん患者でPTHrP陽性率と腫瘍の転移・再発に有意な相関があることも明らかにし た。腫瘍間質に存在する線維芽細胞は腫瘍血管と同様に正常細胞とは異なった形質を発現していることが報告され、cancer-associate d fibroblast (CAF)と称されている。口腔領域に発生する粘表皮がんで検索したところ、PTHrPを高発現する粘表皮がんの中間細胞集 にCAFが多くみられ、さらに新生血管が豊富に存在し、PTHrP発現腫瘍細胞の悪性形質との関連が示唆された。線維芽細胞株MRC5をPTHr P高発現細胞株HSC2の上清を加えたMRC5では明らかな増殖活性の亢進がみられた。PTHrPsiRNA導入HSC2細胞ではPTHrPのmRNA発現が低下 していることが示され、PTHrPノックダウンHSC2細胞培養上清を加えたMRC5細胞は増殖活性の減弱がみられた。さらに通常培養ではαS MAの発現がほとんどみられないMRC5、DP31、DP36をPTHrP産生癌細胞上清で培養したところ、線維芽細胞株でαSMAの発現が亢進することがWestern blotであきらかになり、PTHrPによる周囲間質に存在する線維芽細胞のがん関連線維芽細胞(CAF)への誘導効果が示された。
  • 腫瘍血管内皮細胞の幹細胞性と薬剤耐性獲得機構との関わりの解明
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(B)
    研究期間 : 2011年04月 -2014年03月 
    代表者 : 樋田 京子, 進藤 正信, 樋田 泰浩, 大賀 則孝
     
    1)薬剤抵抗性と幹細胞性の関連解析:がん幹細胞は薬剤抵抗性をもつことはよく知られている.腫瘍血管内皮細胞には幹細胞性(CD90, Sca-1などの幹細胞マーカーの発現)や薬剤抵抗関連遺伝子,MDR1の発現が高いことがわかった.また,腫瘍培養上清により正常血管内皮においてこのトランスポーター遺伝子MDR1の発現が上昇したことから,腫瘍血管内皮細胞の薬剤抵抗性と幹細胞性との関わりについてCD90, Sca-1, CD133,MDR1発現と薬剤感受性の違いとの関係をreal time PCR,MTS assay, フローサイトメトリーによるSP分画解析などにより解析した.さらにALDHが高い腫瘍血管内皮細胞の存在をみいだし,それらが薬剤耐性をもっていることを明らかにした.また,幹細胞性をもつ腫瘍血管内皮細胞においてある細胞成長因子のシグナル経路が亢進していることなどを現在解析中である. 2)培養上清中サイトカインの解析:腫瘍培養上清により正常血管内皮における腫瘍血管内皮マーカーの発現亢進や薬剤耐性に影響を及ぼすサイトカインの解析をおこなった.悪性度の異なるがん細胞の培養上清による処理後, 細胞の抗がん剤や血管新生阻害剤への感受性の変化を増殖能, 遊走能への影響を通して比較検討した. 培養上清中のVEGFが血管内皮の薬剤耐性を亢進させることをみいだした.血管内皮においてこの受容体の阻害を行うことで薬剤耐性を回避できることを確認した.その他の培養上清中のサイトカインもいくつか見出され,現在解析中である.
  • 血管を標的とする革新的医薬分子送達法の基盤技術の確立
    文部科学省:特別教育研究経費(研究推進)
    研究期間 : 2009年04月 -2014年03月 
    代表者 : 樋田 京子
  • 腫瘍血管と微小環境との相互作用の解明とその分子機構を標的とした治療法開発
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 新学術領域研究(研究領域提案型)
    研究期間 : 2011年04月 -2013年03月 
    代表者 : 樋田 京子
     
    1)がんの培養上清による血管内皮のmiRNAの発現変化 がんの培養上清による血管内皮の遺伝子発現変化については,それががん由来のmiRNAや遺伝子の取り込みによるものなのか,血管内皮側の転写亢進によるものかなどを検討する.高転移性の腫瘍の培養上清中のエクソソームには低転移性の腫瘍放出エクソソームと異なったmiRNAXが含まれていることがわかった.このmiRNAXがホストの血管内皮にエクソソームを介して取り込まれるのかどうかについてしらべた.このmiRNAが確かにエクソソームを介して血管内皮に取り込まれること,さらにその発現が血管内皮においてあがることが確認できた.現在このmiRNAの血管内皮における機能の解析を行っている.2) 異常性を獲得する分子機構を標的とした治療 これまでの研究で腫瘍由来のVEGFにより血管内皮の膜トランスポーターP-gpの発現が上がることがわかった.これを阻害するverapamilによりin vitro の系では血管内皮の薬剤感受性が回復することがわかり,この薬剤を併用した抗がん剤低用量使用による血管新生阻害療法をおこなっている.3) がんの進展における経時的な腫瘍血管内皮細胞の遺伝子発現解析 北海道大学病院において肺がん,大腸がん,胃がん,腎がん,前立腺がんや口腔がんと診断された症例において,ヒト腫瘍病理検体や末梢血を用いてTECマーカーの発現を解析し,がんの悪性度との関連や治療経過とがん組織像,血管の成熟化との関連などを解析し現在,臨床パラメータとの比較をおこなった.現在論文作成中である.
  • 日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(C)
    研究期間 : 2011年 -2013年 
    代表者 : 篠原 信雄, 樋田 京子, 樋田 康浩, 野々村 克也
     
    転移性腎癌患者のCirculating endothelial cell (CEC)から採取したRNAを用いてこれまで共同研究室で同定してきたマウス腫瘍血管内皮マーカー (PTGIR、Biglycan、LOX、CXCR7など)の発現をreal-time PCRによって確認した。腎癌患者6症例において腎腫瘍と腎正常部より腫瘍血管内皮細胞と正常血管内皮細胞をそれぞれ分離培養し、6症例ともPTGIR、Biglycan、LOX、CXCR7は有意に腫瘍血管内皮細胞での発現が亢進していた。これらの結果より腫瘍血管内皮マーカーを発現するCEC が腎癌のバイオマーカー検討において有用であることが示唆された。
  • 日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(C)
    研究期間 : 2011年 -2013年 
    代表者 : 松沢 祐介, 大賀 則孝, 樋田 京子
     
    今回、腫瘍血管内皮細胞における活性酸素(ROS)を介したさまざまなシグナル伝達が血管新生能に与える影響を与えるかについて検討した。 低酸素低血清下でROSが蓄積し、その際の細胞の生存率は腫瘍血管内皮では有意に高いことがわかった。また,ピオシアニン処理によって腫瘍血管内皮においてROSの誘導をすると VEGFシグナリングが活性化することがわかり、抗酸化物質であるカテキンによりこのシグナル活性化は抑制された。またROSは血管内皮のaneuploidyも引き起こすことがわかった。本研究においてROSが腫瘍血管内皮細胞の生存活性に関与していることや腫瘍血管新生阻害剤としての抗酸化剤の可能性が示唆された。
  • 非小細胞肺癌幹細胞における分泌型miRNAの同定とその治療応用へ向けての解析
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(C)
    研究期間 : 2012年 -2012年 
    代表者 : 加藤 達哉, 樋田 泰浩, 樋田 京子, 加賀 基知三, 松居 喜郎
     
    我々は、癌幹細胞に特化した「分泌型miRNA」に着目し、「非小細胞肺癌幹細胞における分泌型miRNAの同定とその治療応用へ向けての解析」というテーマで平成24年4月より研究を開始した。まず非小細胞肺癌における癌幹細胞の最も良いsorting方法を検討するため種々の方法を試みたが、中でも我々はsphere形成能を持つ癌細胞がマウス皮下腫瘍形成能を高率に有することに着目した。まず肺癌細胞株を用いてsphere形成能を持つ肺癌幹細胞の培養条件検討を行い、足場非依存性のためにpolyHEMA coatedを使用し、またserum-free、EGF+bFGF+ITS premixの培養液を用いて限界希釈を行ったのち培養を継続することで、同細胞群は約1ヶ月に渡りsphere形成能を維持したまま生育することを見出した。次に培養上清中の癌幹細胞における特異的な分泌型miRNAの検索として、マイクロアレイによる解析を行う方針とした。先に述べたsphere形成能を有する細胞群の培養上清と通常の肺癌細胞培養上清におけるmiRNA発現プロファイルを比較検討するため、両群の培養上清よりキットを用いてmiRNAの抽出を行った。細胞株レベルで条件検討が終了し、実際の臨床検体において同様の研究を開始する予定で倫理申請まで行っていたが、筆頭研究者である加藤達哉が海外へ留学することとなり、今回やむなく研究中止の申請をするに至った。
  • 日本学術振興会:科学研究費助成事業 挑戦的萌芽研究
    研究期間 : 2011年 -2012年 
    代表者 : 佐藤 明, 東野 史裕, 北村 哲也, 樋田 京子, 戸塚 靖則, 北村 哲也, 樋田 京子, 進藤 正信, 戸塚 靖則
     
    ヒトパピローマウイルス(HPV)感染によってがん化された口腔がん細胞で、ARE-mRNAが核外輸送・安定化されているか検討した。HPVのがん遺伝子産物E6及びE7を細胞に導入すると、一部のARE-mRNAが安定化された。さらに、ARE-mRNAの輸送に関わるHuRをノックダウンするとARE-mRNAの安定化が阻害された。これらの結果はHPVによる口腔がんの発生にARE-mRNAが関与することを示唆している。
  • 日本学術振興会:科学研究費助成事業 挑戦的萌芽研究
    研究期間 : 2011年 -2012年 
    代表者 : 樋田 京子, 進藤 正信, 樋田 泰浩, 大賀 則孝
     
    がんの血行性転移の初期過程であるがん細胞が血管内皮を通り抜けて血管内に侵入するintravasationのステップが重要において腫瘍血管内皮の特異性が大きく関わっているのではないかという視点から解析を行った.転移能が異なる腫瘍由来2種類の血管内皮細胞,正常血管内皮細胞を用いて腫瘍細胞に対する接着,走化性などを解析した.腫瘍血管内皮細胞の中にはがんの転移を促進させる可能性のある細胞があること,ならびにそれらがもつ分子機構の一部を明らかにした.
  • 日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(A)
    研究期間 : 2009年 -2012年 
    代表者 : 高田 隆, 工藤 保誠, 進藤 正信, 樋田 京子
     
    口腔癌の浸潤・転移機構に重要な働きを果たす分子の探索と、それらの悪性度診断や遺伝子治療への応用を目的として検討した結果、癌細胞の浸潤能を促進する分子として、これまでに我々が報告してきた Periostin, IFITM1に加えて Wnt5B 及び MMP-10 を、抑制する分子として microRNA-203 を、リンパ管新生を促進する分子としてPeriostion を、血管新生を促進する分子として MMP-13 を新たに同定した。特に Periostin に関しては、口腔癌患者より採取した血清を用いた解析により、Periostin の発現量の増加とリンパ節転移の有無が相関することを見出し、悪性度診断への応用の可能性示した。
  • がん微小環境に着目した新たな腫瘍血管新生阻害療法の開発
    文部科学省:科学研究費補助金
    研究期間 : 2008年04月 -2011年03月 
    代表者 : 樋田 京子
  • 日本学術振興会:科学研究費助成事業 挑戦的萌芽研究
    研究期間 : 2010年 -2011年 
    代表者 : 戸塚 靖則, 進藤 正信, 東野 史裕, 樋田 京子, 北村 哲也
     
    本研究の目的は、口腔がんのHuRの局在、細胞質のHuR量と悪性度との関連、前がん病変のHuRの局在と予後との関連を調べることである。口腔がんではHuRおよびARE-mRNAは細胞質に輸送されていた。さらに悪性度の高いがんや、予後の悪い前がん病変ほど細胞質のHuR量は増加することが明らかになった。これらの結果は、HuRの局在を調べることにより前がん病変の予後を予測できることを示唆している。
  • 日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(C)
    研究期間 : 2009年 -2011年 
    代表者 : 樋田 泰浩, 樋田 京子, 近藤 哲
     
    腫瘍細胞・腫瘍血管内皮細胞相互作用による肺転移促進の機序 蛍光タンパクでラベルした腫瘍細胞と腫瘍血管内皮細胞を用いることで,腫瘍血管内皮細胞が腫瘍細胞の浸潤転移を促進していることを明らかにすることができた.腫瘍血管内皮細胞とマウスに共移植すると循環血液中の腫瘍細胞と肺転移が増加した.腫瘍血管内皮への遊走と内皮細胞シート下への浸潤(transendothelial migration)がその機序であった.
  • 日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(C)
    研究期間 : 2009年 -2011年 
    代表者 : 石川 誠, 東野 史裕, 進藤 正信, 樋田 京子, 北村 哲也
     
    本研究ではARE-mRNA及びそれに結合するpp32やHuRなどのタンパクの複合体の挙動が、細胞のがん化に寄与しているかを解析した。ARE-mRNAやHuRは口腔がん細胞で核外輸送されていた。pp32は細胞質でHuRを分解する機能を持つが、口腔がん細胞で多く発現するpp32r1はHuRを分解しなかった。これらの結果は、がん細胞ではRNA結合タンパクによりARE-mRNAが制御されることを示している
  • 日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(C)
    研究期間 : 2009年 -2011年 
    代表者 : 小野 貢伸, 樋田 京子, 樋田 泰浩, 進藤 正信, 東野 史裕, 戸塚 靖則, 北村 哲也
     
    ヒト血管内皮前駆細胞(EPC)を末梢血から分離・培養を試みた.血管内皮マーカーならびに幹細胞マーカー陽性の前駆細胞を用いて血管新生能の観点からそれらの性質を正常血管内皮細胞と比較した. EPCは正常血管内皮細胞に比較し,血管新生因子の産生が高いこと, in vitroにおいて血管新生能が亢進していることが見出された.またこれらはin vivoでは虚血部位に動員されており、組織再生に貢献できる可能性が示唆された.
  • 日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(A)
    研究期間 : 2008年 -2011年 
    代表者 : 戸塚 靖則, 進藤 正信, 東野 史裕, 樋田 京子, 北村 哲也, 大場 雄介, 松本 健一, 大廣 洋一
     
    我々は、癌の「間質」に存在する腫瘍血管内皮細胞が正常血管内皮細胞とは異なった遺伝子背景をもつことを明らかにしてきた。近年、上皮間葉移行が癌細胞の浸潤・転移に重要な役割を果たしていることが明らかになってきた。上皮性の口腔扁平上皮癌細胞と間葉系細胞の相互作用を検索することは、癌細胞のみならず腫瘍に栄養・酸素を供給することで腫瘍の生存や増殖に関わっている間質細胞をターゲットにした効率的な治療法の確立にも寄与することが期待される。HuRは通常、核に存在しているタンパクでAU-rich element(ARE)mRNAの安定性に関与している。我々は、ウイルス発癌系でARE mRNAがHuRを介して安定化され細胞の形質転換(癌化)に関与していることを明らかにした。口腔環境は唾液腺など全身の臓器の中で特異な器官を有している。我々は破骨細胞の誘導因子であるRANCLが口腔環境で発現が高いことをみいだした。さらにヌードマウスに口腔癌細胞を移植すると口腔に移植した癌細胞が有意に増大することを発見し、このような所見はRANKLが口腔癌のstem cellの上皮間葉移行を生じさせることで誘導されることを明らかにした。腫瘍の微小環境は癌細胞の増殖や浸潤転移と深く関わっている。我々は、腫瘍間質に存在する血管(腫瘍血管)を分離培養し、その生物学的特徴について検索してきた。その結果、炎症を惹起することでも知られているCox-2を阻害することで腫瘍血管新生が抑制されること、腫瘍血管はVEGFシグナルを介したMDR1の転写亢進により抗癌剤に対する抵抗性を獲得することなどが明らかになり、このような検索結果は腫瘍血管をターゲットにした分子標的治療へ応用する可能性が高まった。
  • 血管新生阻害療法に対する腫瘍血管内皮細胞の抵抗性獲得の機序解析
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 挑戦的萌芽研究
    研究期間 : 2009年 -2010年 
    代表者 : 樋田 京子, 進藤 正信, 戸塚 靖則, 東野 史裕, 樋田 泰浩, 北村 哲也
     
    平成22年度はマウス腫瘍モデルを用いて,腫瘍血管新生阻害効果を解析した.同じ治療に対して抵抗性を獲得したマウスの腫瘍と感受性のあったマウスの腫瘍を用いてin situにおける血管内皮において前年度のin vitroの解析でピックアップされた血管内皮薬剤抵抗性関連因子の発現を解析した.さらに腫瘍微小環境が血管内皮細胞の薬剤抵抗性獲得に及ぼす影響に関して検討した. 腫瘍血管内皮細胞が薬剤抵抗性を獲得するメカニズムとして,腫瘍細胞と内皮細胞との相互作用による可能性,ならびに低酸素、薬剤による刺激などを考え,その機序について解析を行った.具体的にはがん細胞の培養上清による処理,またはがん細胞との共培養によって,血管内皮に薬剤抵抗性関連因子の発現亢進がおきるのかを検討した.がん細胞の培養上清によって正常血管内皮細胞の5-FUやpaclitaxelに対する薬剤抵抗性が表れること,さらに抵抗性関連遺伝子であるMDR-1の発現亢進などが起こること,MDR-1の転写因子であるYB-1の核内移行がおこることなどを見出した.さらに細胞内のAktのリン酸化亢進なども起こることをしめした.培養上清を熱処理するとこの現象は起こらなくなることから,培養上清中のサイトカインなどのタンパクが影響を及ぼす因子であることが示唆された.これらの結果より血管内皮細胞といえども環境により薬剤抵抗性を獲得しうるということが示唆された.
  • 日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(B)
    研究期間 : 2008年 -2010年 
    代表者 : 東野 史裕, 進藤 正信, 戸塚 靖則, 樋田 京子, 北村 哲也, 格口 渉, 黒嶋 雄志
     
    HuRは細胞増殖などに関連するARE-mRNAを核外輸送及び安定化するRNA結合タンパクである。本研究では、口腔がん細胞のHuRをノックダウンすることにより、ARE-mRNAの核外輸送及び安定化が抑制され、細胞周期を促進するタンパクの発現が減少し、足場非依存的な細胞増殖能などの悪性形質も減弱することが明らかになった。これらの結果はHuRノックダウンが口腔がんの治療に応用可能であることを示している。
  • 日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(B)
    研究期間 : 2008年 -2010年 
    代表者 : 樋田 京子, 進藤 正信, 戸塚 靖則, 東野 史裕, 樋田 泰浩, 北村 哲也
     
    腫瘍血管内皮細胞に特異的に発現しているマーカーをシグナル伝達経路,新規性などの観点からピックアップした.siRNAによるマーカーのノックダウンを行い, マーカーの発現抑制が及ぼす細胞への増殖・遊走能への影響を解析した.その後蛍光免疫2重染色によりおこない,ヒト腫瘍血管における発現を確認した.ヒトにも発現が認められたマーカーの阻害剤を用いたところ,in vivo血管新生の抑制を伴う抗腫瘍効果をみとめた.腫瘍血管内皮特異マーカーを標的とする治療の実現が可能であることが示唆された.
  • 日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(C)
    研究期間 : 2008年 -2010年 
    代表者 : 篠原 信雄, 樋田 京子, 野々村 克也, 野々村 克也
     
    血管新生阻害剤のスクリーニング評価をより腫瘍微小環境内を反映した系において確立することを目指してマウス皮下腫瘍モデルから採取した腫瘍血管内皮細胞を用いて正常血管内皮との差異を解析した.特にマイクロアレイをもちいて腫瘍血管内皮において発現が亢進している遺伝子について解析を進めた。 これらの遺伝子が薬剤耐性や細胞の高い生存能、遊走能といった、腫瘍血管内皮の生物学的特徴に強く関わっていることを明らかにした。(Akino T, Hida K, Shinohara N et.al.Am J Pathol. 2009)(Tsuchiya K, Hida K, Shinohara N et.al.Int J Oncol.2010) さらにマウスで発現が亢進している遺伝子が、ヒト腎癌由来の腫瘍血管内皮細胞にも同様に発現が亢進していることを明らかにした。 これらの知見により、血管新生阻害剤のスクリーニング評価系確立に一歩近づいたと同時に、新たな腫瘍血管新生阻害開発に寄与すると考えられた。
  • 日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(C)
    研究期間 : 2007年 -2009年 
    代表者 : 小野 貢伸, 進藤 正信, 東野 史裕, 樋田 京子, 北村 哲也, 大廣 洋一, 戸塚 靖則, 小林 正伸
     
    腫瘍の転移は悪性腫瘍の治療においてその予後に影響する最も重要な因子であり、口腔悪性腫瘍の大部分を占める扁平上皮がんの治療にあたっても、転移の有無が予後と深く関わっている。口腔扁平上皮がんの転移の大部分は所属リンパ節である頸部リンパ節へのリンパ行性転移で、その治療にあたっては原発巣とともに転移したリンパ節の制御が必須であり、とくに現在画像診断的に検出が困難である径5mm以下の微小リンパ節転移の有無を術前に知ることが可能であればその意義は大きい。今回の検索は、口腔がんにおける転移形質に関与する遺伝子/遺伝子産物の同定を行うことを第一の目標としている。 ヒト口腔正常粘膜上皮、白板症、口腔がん組織より試料を採取し、直ちに液体窒素で凍結保存を行い、以後の実験に用いた。試料の一部よりRNAを抽出しDNAマイクロアレイにより網羅的解析を行ったところ、数十の発現亢進する遺伝子および発現が低下した遺伝子が認められた。 これらの中で口腔がんで発現が亢進しているPim-1に注目して検索を行った。口腔扁平上皮がん細胞株6種全てにPim-1のタンパク発現が認められた。北海道大学病院で口腔扁平上皮がんと診断された早期がん症例39例についてPim-1の発現を検索したところ17例(44%)にPim-1発現が認められた。Pim-1発現症例は有意に所属リンパ節転移、遠隔臓器転移が多く、Pim-1発現と転移の関連性が示唆された。転移形質とPim-1の関連を探るため、siRNAを用いて検討を行った。その結果、Pim-1に対するsiRNA導入細胞では細胞運動能の低下がみられ、この際にRac1の活性が低下することが明らかになった。 以上の結果は、Pim-1はRac1の活性化により口腔がん細胞の運動能を高め、転移形質に深く関与しており、Pim-1をターゲットにした画像診断の有用性を示唆するものだった。
  • 腫瘍血管内皮の細胞生物学的解析-遺伝子標的治療へのアプローチ
    文部科学省:科学研究費補助金
    研究期間 : 2006年04月 -2008年03月 
    代表者 : 樋田 京子
  • 口腔がんの顎骨浸潤は抑制できるか?-EGFレセプターリン酸化阻害による効果-
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 萌芽研究
    研究期間 : 2007年 -2008年 
    代表者 : 戸塚 靖則, 進藤 正信, 大場 雄介, 北村 哲也, 樋田 京子, 東野 史裕, 津田 真寿美
     
    口腔がんの多くは舌や歯肉などの口腔内組織に発症するが、これらの臓器・組織は解剖学的に顎骨に近接しており、腫瘍の増大により容易に顎骨に浸潤する。この場合は、腫瘍の根治性の点から、顎骨離断術や部分切断術を施行せざるをえず、顔面の審美性や機能性に多大な障害を生じ、治癒後の社会生活やQOLに大きな影響を及ぼす。それ故、腫瘍の顎骨浸潤を抑制することが可能となれば、口腔がん患者にどって大きな福音となり、その開発が真に望まれている。 口腔癌細胞の多くは、epidemal growth factor (EGF) receptorを高頻度に発現しており、また顎下腺並びに唾液中には高濃度のEGFが存在していることが明らかになっている。従って、口腔癌の微小環境中に存在するEGFが、癌細胞に対してパラクライン的に作用し、骨浸潤に関与する形質発現に重要な影響を及ぼしていることが示唆される。 口腔がん細胞株HSC2, HSC3, HSC4, Ca9.22, SASを用いてEGFRの発現をWestern Blotで検討したところ、全てのがん細胞株でEGFRの発現亢進がみられた。これらの細胞をEGFで刺激した際、EGFRのリン酸化の亢進およびMAPKであるERK1/2, p38.JNKの活性化がみられた。ERK1/2はEGF依存的にPTHrPを発現亢進した。HSC2細胞にPTHrPのsiRNAを導入することで細胞増殖、浸潤活性の抑制がみられた。 このような所見は、口腔がん細胞の顎骨浸潤にはEGF/EGFRによるPTHrPの発現が重要な役割を演じていることを示唆するものだった。
  • 口腔白板症の悪性化に関わる因子は何か?-HuRと細胞質移行タンパクの解析-
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 萌芽研究
    研究期間 : 2007年 -2008年 
    代表者 : 進藤 正信, 東野 史裕, 樋田 京子, 北村 哲也, 戸塚 靖則, 小林 正伸
     
    口腔の悪性腫瘍の大部分は扁平上皮がんが占めており、口腔がんの発症・進展は患者の咀嚼や発音などの機能障害だけでなく、審美障害を引き起こすため、その治療成績の改善は患者のQuolity of Life (QOL)の向上に密接な関係を有している。口腔は、可視化できる臓器であるため、これまで口腔扁平上皮がんの前がん病変として、所謂、白板症があることが知られている。 我々は、これまで口腔扁平上皮がんの発生・進展に関わっている遺伝子/遺伝子産物の研究を行ってきた。アデノウイルスのがん遺伝子産物を研究する過程で、E4orf6がAU-rich element (ARE)に結合することでmRNAを安定化させるHuRと結合し、核から細胞質へ移行することで細胞がん化を導くことを明らかにした。 口腔癌細胞株HSC3, Ca9.22を用いてHuRの発現をWestern blotおよび免疫染色で検索した。その結果、両細胞でHuRの発現は亢進し細胞質へ移行していることが明らかになった。HSC3の細胞増殖能はHuRの細胞質での発現がみられない歯肉線維芽細胞に比べ明らかに亢進していた。口腔がん細胞における駅EmRNAであるc-fos, c-myc mRNAの局在をin situ hybridization法で検討したところ正常細胞であるHGF(ヒト歯肉線維芽細胞)では核に局在していたが、口腔がん細胞では核および細胞質に存在し、ARE mRNAが核外輸送されていることが明らかになった。 さらに定量RT-PCR法でARE mRNAの安定化について検索した。その結果、口腔がん細胞ではc-fos, c-mycが細胞質内に蓄積・安定化されていた。 以上の結果は、口腔がん細胞ではHuRが核外へ輸送され、同時にARE mRNAも核外輸送・安定化されていることを示しており、HuRの細胞質への輸送局在を検討することにより、早期の細胞がん化を判定できる可能性が示された。
  • RNA結合タンパクの局在と口腔がんの悪性度
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 萌芽研究
    研究期間 : 2007年 -2008年 
    代表者 : 東野 史裕, 進藤 正信, 戸塚 靖則, 樋田 京子
     
    AU(アデニン-ウラシル)-rich element (ARE)はc-fos、 c-myc、 COX-2などの細胞の増殖に関わる遺伝子のmRNAに存在し、AUUUAをコアとする繰り返し配列から成る領域である。我々はアデノウイルスのがん遺伝子産物E4orf6がARE-mRNAを核外輸送・安定化することにより細胞をがん化することをこれまでに見出している。E4orf6は発がんのみならず、がん細胞の悪性化に関わるタンパクでもありE4orf6によるARE-1nRNAや同時に輸送されるHuRの輸送は、細胞のがん化やがんの悪性化の指標となりうる。本研究の目的は口腔がん細胞でHuRタンパクの細胞質への局在と、そのがん細胞の悪性度との関連を調べ、HuRの局在が口腔がん細胞の悪性度の指標になるか検討することである。 口腔がん組織を用いて、HuRタンパクの局在を検討した。まず、HSC-3やCa9.22などの口腔がん培養細胞を用いてセルブロックを作成し、免疫染色の条件検討を行つた。次に、この染色条件で、手術材料から得られた切片を用いてHuRの免疫染色を行うによりHuRの局在を検討した。その結果、がん組織の細胞では細胞質側にもHuRタンパクが存在することがわかり、これに対して正常組織の細胞では主に核のみにHuRが局在していることが判明した。また、白板症の患者から得られたサンプルを用いて同様の検討を行つたところ、まだサンプル数は不十分であるが、予後不良のサンプルについてはHuRが核外輸送されていることも確認された。さらに、培養細胞を用いて、c-fos、 c-myc、 COX2などのARE-mRNAの局在をin situ hybridization法で検討しところ、がん細胞ではこれらのmRNAが核外輸送されていることも明らかになった。 以上の結果より、口腔がんでは、HuRやARE-mRNAが核外輸送されていることが明らかになり、HuRの局在が口腔がん細胞の悪性度の指標となりうることがわかった.
  • AU-rich elementを持つmRNAの輸送・安定化と口腔細胞のがん化
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(B)
    研究期間 : 2006年 -2007年 
    代表者 : 東野 史裕, 進藤 正信, 戸塚 靖則, 小林 正伸, 樋田 京子
     
    AU(アデニン-ウラシル)-rich element(ARE)はがん遺伝子やサイトカイン遺伝子など、細胞の増殖に関わる遺伝子のmRNAに存在する。我々はアデノウイルスの研究により、ARE-mRNAがHuRなどのRNA結合タンパクと複合体を形成し、核外輸送・安定化され、細胞ががん化されることをこれまでに見出している。本研究の目的は、ウイルス発がんで見られたこの細胞がん化機構が、口腔がん細胞中でも見られるか検討することである。またHuRをRNAi法でノックダウンしてARE-mRNAの輸送・安定化を阻害できるかどうか、また口腔がん細胞の性質が変化するかについても検討した。 HSC3やCa9.22などの口腔がん細胞では、HuRタンパクが核外に輸送され、ARE-mRNAも核外輸送および安定化されていることが明らかになった。さらに、生理的な条件では、本来核外輸送タンパクであるCRM1依存的に輸送されているこれらの物質が、口腔がん細胞ではCRM1非依存的に強制的かつ恒常的に、核外輸送されていることが見出された。また、HuRのsiRNAを設計し、口腔がん細胞にそのsiRNAを導入し、効率よくHuRタンパクの発現が減少する系が構築できた。HuRノックダウンした口腔がん細胞では、ARE-mRNAが核外輸送されなくなったり、soft-agarでコロニーを形成できなくなる等、その形質が変化することがわかり、HuRノックダウンは口腔がん治療の新しいツールである可能性が示せた。
  • 腫瘍血管内皮に対する遺伝子標的治療:siRNA,miRNAの口腔がんへの応用
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(B)
    研究期間 : 2006年 -2007年 
    代表者 : 戸塚 靖則, 進藤 正信, 樋田 京子, 東野 史裕, 小林 正伸, 大廣 洋一
     
    腫瘍は遺伝子の疾患であり、がん細胞に対する遺伝子標的治療が行われている。しかし、腫瘍自体の遺伝子異常は複雑で、単一の遺伝子をターゲットにした遺伝子標的治療は極めて困難と考えられる。 一方、腫瘍細胞が生存・増殖するためには、腫瘍間質の血管新生が腫瘍の増殖に必須であることから、この血管新生を阻害することで腫瘍の増殖を抑制する治療法が考えられている。腫瘍間質に存在する血管は正常な血管内皮細胞であると考えられてきたが、樋田はマウス皮下移植腫瘍モデルから分離した腫瘍血管内皮細胞は正常血管内皮細胞とは遺伝子的に異なった性格を有することを明らかにした。 平成18年度において、我々は腫瘍血管内皮細胞と正常血管内皮細胞を樹立するために、口腔がん、腎癌、肺癌の手術摘出材料から磁気ビーズ法で血管内皮細胞を分離した。この細胞はCD34やCDI31を発現し、血管内皮細胞であることが確認された。 この腫瘍血管内皮細胞からRNAを抽出し、網羅的解析を行った。その結果、腫瘍血管内皮細胞で発現の亢進している70の遺伝子を同定した。その遺伝子群の一部について腫瘍血管内皮での発現をreal-time RT-PCRとWestern blotで確認した。現在、北海道大学知財部と共同で、これらの遺伝子に対する特許出願準備中である。一部の遺伝子については発現細胞にsiRNAを導入することで細胞の増殖抑制が得られた。また、Cox-2阻害剤により腫瘍血管内皮細胞の運動能が低下することを見出した。
  • ナノコロイドを用いた遺伝子デリバリーシステムの開発と遺伝子標的治療への応用
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(B)
    研究期間 : 2006年 -2007年 
    代表者 : 進藤 正信, 小林 正伸, 古月 文志, 東野 史裕, 樋田 京子, 北村 哲也, 大廣 洋一, 戸塚 靖則
     
    悪性腫瘍や先天性遺伝子疾患に対して遺伝子治療の試みがなされているが、効率が低いことや必ずしも生体への安全性が確かめられないことなどの問題点があり、未だに決定的・効果的な方法は開発されていない。我々は、内部に発現プラスミドを封入し、粒子表面に細胞表面レセプターに対するリガンドペプチドを結合させた微細粒子(ナノコロイド)により、ターゲットとなる細胞の細胞表面レセプターを利用し、細胞特異的な遺伝子デリバリーシステムの開発を目的として研究を企画した。 口腔扁平上皮がん細胞の多くはEGFレセプター(EGFR)を発現していることが考えられている。口腔扁平上皮がん細胞株5種類(HSC2, HSC3, HSC4,'Ca9.22, SAS)を用いてWestern blotでEGFRの発現を検索したところ、全ての細胞株で発現が認められた。EGFR結合配列をもつペプチドを合成し、EGFRとの結合についてBiacoreを用いて結合分子間力を検討した。その結果、合成ペプチドはEGFRと結合することが明らかになった。このペプチドとGFP発現ベクターをナノコロイドに結合させ、口腔がん細胞への導入効果について検討した。その結果、遺伝子導入効果がみられたが、その効率は30%ほどで、今後、担体の構造を変化させることによって効率を上げることを目指している。なお、合成ペプチドはEGFRに結合するが、細胞内ドメインのリン酸化は起こさないことが確認された。血管新生にはたらくアドレノメデュリン阻害作用をもつ遺伝子配列をもつベクターをヌードマウスに移植した腫瘍に対して作用させたところ腫瘍の抑制効果が認められた。
  • 末梢血中血管内皮前区細胞の腫瘍マーカーとしての意義
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(C)
    研究期間 : 2006年 -2007年 
    代表者 : 加賀 基知三, 樋田 泰浩, 近藤 哲, 宮本 正樹, 樋田 京子, 七戸 俊明
     
    血管内皮前駆細胞(EPC)は腫瘍の血管新生において重要な役割を持つと考えられている。EPCは宿所骨髄から放出され、血行性に腫瘍に到達して新生血管を構築していると考えられ、腫瘍細胞がメディエーターを分泌することで、この作用を促進していることが予想される。本研究ではこの機序を明らかにすると同時に、EPCおよびそのメディエーターを検出することで、担癌患者の再発などを診断する腫瘍マーカーとしての意義を明らかにすることである。本研究では、血管新生阻害因子を導入した細胞株(HEC46-PEDFおよびTE8-PEDF)を構築してヌードマウスに移植し、野生型細胞株(HEC46およびTE8)を移植した対照群と比較して、末梢血の単核球成分(PBMC)、EPCについて検討した。野生型細胞株を移植したマウスではPBMCおよびEPC数がともに増加したが血管新生阻害因子発現細胞株を移植したマウスでは、この効果は認められなかった。したがって、腫瘍細胞がメディエーターを分泌してEPCを誘導すると同時に、血管新生阻害因子はこれを阻害し、骨髄からのEPC放出を抑制することで効果を発揮することが明らかになった。本メディエーターは未知のタンパクと考えられるため、血管内皮細胞のタンパクと結合する阻害因子を抽出してタンパクを精製し、質量分析機を用いて解析を行った。一方で、インフォームドコンセントを取得した担癌患者より末梢血を採取してPBMCを保存、FACSを用いて血管内皮細胞マーカーと骨髄マーカーともに陽性となるEPC分画について計数し、病期や腫瘍の大きさ、生存率を比較検討した。
  • 腫瘍血管内皮の細胞生物学的解析ー遺伝子標的治療へのアプローチ
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 基盤研究(C)
    研究期間 : 2006年 -2007年 
    代表者 : 樋田 京子, 進藤 正信, 戸塚 靖則, 小林 正伸, 樋田 泰浩, 東野 史裕
     
    腫瘍の血管は腫瘍の進展と転移に大きな役割を果たしていることから血管新生阻害療法にはがんの治療法として重要なものであることが認知され始めている。ところが従来の血管新生阻害剤は正常血管内皮細胞を用いて研究開発されたものがほとんどである。申請者らは腫瘍血管内皮の分離と培養に世界に先駆けて成功した後に、それらが正常血管内皮とは様々な点で異なることを報告してきた。 理想的な血管新生阻害剤を開発するためには、腫瘍血管内皮の生物学的な特異性を把握することが重要である。そのためには腫瘍血管内皮の分離と培養が必須である。そのことを目的として申請者は4つの異なる腫瘍(口腔扁平上皮癌を含む)から純度の高い腫瘍血管内皮細胞を分離することができ、これらが増殖能や遊走能などが高いことなどがわかった。さらに遺伝子の発現パターンをDNA microarrayにて正常血管内皮と比較検討することまで研究を進めることができた。例えば、Tumor ECはepidermal growth factor (EGFR)の発現が高いことがわかった。また、腫瘍血管内皮細胞は腫瘍微小環境下で正常に見られない染色体の異常があることがFISHによりわかり、薬剤感受性などが異なることなどが示唆された。これらの知見はこれまで腫瘍の血管は正常の血管と同じ性質を持つという概念を根底から覆すもので、より腫瘍血管に特異的な薬剤の開発が可能であることを同時に示唆しているものである。 これまで遺伝子発現の網羅的解析で数種の腫瘍血管に共通して発現亢進している遺伝子を汎腫瘍血管内皮マーカー(さらには汎腫瘍マーカー)として重要なものとしてピックアップしており、それらのうちいくつかの遺伝子は実際のヒトの腫瘍血管にも発現がタンパクレベルで確認でき、その発現亢進が確認された。 これらは腫瘍血管内皮により特異的な治療薬の標的として重要と考え、今後の研究で生物学的影響などを解析する予定で、実際の創薬の具現化を図る予定である。
  • study of tumor-associated endothelial cell specific markersbiology of tumor-associated endothelial cells biology of endothelial projenitor cells (EPC)
    研究期間 : 2004年
  • 口腔がんにおける浸潤・転移の機構解明-転写因子EIAFの機能分析-
    日本学術振興会:日本学術振興会特別研究員奨励費
    研究期間 : 1998年04月 -2000年03月 
    代表者 : 樋田 京子
  • 口腔がんにおける浸潤・転移の機構解明- 転写因子EIAFの機能分析-
    日本学術振興会:科学研究費助成事業 特別研究員奨励費
    研究期間 : 1998年 -1999年 
    代表者 : 樋田 京子

教育活動情報

主要な担当授業

  • ソフトマター医工学特論
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 修士課程
    開講学部 : 生命科学院
    キーワード : 基礎医学、再生医学、バイオマテリアル、がん生物学
  • 歯学研究概論
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : 歯学研究,基本的研究技法,基礎知識
  • 発表・論文執筆法演習Ⅰ
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学研究科
    キーワード : 研究計画,文献検索,研究のまとめ,口頭発表,論文作製
  • 発表・論文執筆法演習Ⅰ
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : 研究計画,文献検索,研究のまとめ,口頭発表,論文作製
  • 発表・論文執筆法演習Ⅱ
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学研究科
    キーワード : 研究計画,文献検索,研究のまとめ,口頭発表,論文作製
  • 発表・論文執筆法演習Ⅱ
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : 研究計画,文献検索,研究のまとめ,口頭発表,論文作製
  • 発表・論文執筆法演習Ⅲ
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学研究科
    キーワード : 研究計画,文献検索,研究のまとめ,口頭発表,論文作製
  • 発表・論文執筆法演習Ⅲ
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : 研究計画,文献検索,研究のまとめ,口頭発表,論文作製
  • 口腔病態生物学研究
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
  • 口腔病理学研究
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学研究科
  • 口腔病理学研究
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
  • 口腔病理診断学
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
  • 転写機能制御学研究
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
  • 遺伝子発現解析学研究
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学院
    キーワード : 研究計画,文献検索,研究のまとめ,口頭発表,論文作製
  • 歯学研究概論
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 博士後期課程
    開講学部 : 歯学研究科
    キーワード : 歯学研究,基本的研究技法,基礎知識
  • アクティブラーニング科目Ⅳ
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 学士課程
    開講学部 : 歯学部
    キーワード : 科学的思考,問題発見, 自己解決能力
  • 特別講義(1単位)
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 学士課程
    開講学部 : 全学教育
    キーワード : 国際的な視野、留学、キャリアデザイン、学修計画
  • 外科学Ⅱ
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 学士課程
    開講学部 : 歯学部
    キーワード : 外科学 外科的処置
  • 外科学
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 学士課程
    開講学部 : 歯学部
    キーワード : 外科学 外科的処置 
  • 病理学・口腔病理学Ⅰ
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 学士課程
    開講学部 : 歯学部
    キーワード : 病理学、口腔病理学、実習
  • 病理学・口腔病理学実習Ⅰ
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 学士課程
    開講学部 : 歯学部
    キーワード : 病理学・口腔病理学・実習
  • 病理学・口腔病理学Ⅱ
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 学士課程
    開講学部 : 歯学部
    キーワード : 病理学、口腔病理学、実習
  • 病理学・口腔病理学実習Ⅱ
    開講年度 : 2020年
    課程区分 : 学士課程
    開講学部 : 歯学部
    キーワード : 病理学・口腔病理学・実習

大学運営

委員歴

  • 2017年10月 - 現在   日本学術会議   連携会員
  • 2017年04月 - 現在   日本血管生物医学会   監事
  • 2014年04月 - 現在   日本血管生物医学会   渉外委員
  • 2014年04月 - 現在   日本病理学会   評議員
  • 2013年01月 - 現在   日本癌学会   評議員
  • 2012年 - 現在   日本がん転移学会   評議員
  • 2010年 - 現在   日本血管生物医学会   評議員   日本血管生物医学会
  • 2014年10月 - 2016年03月   文部科学省   歯学教育の改善・充実に関する調査研究協力者会議フォローアップ小委員会委員
  • 2012年03月 - 2013年06月   日本病理学会   プログラム委員


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