佐分利 亘 (サブリ ワタル)
| 農学研究院 基盤研究部門 生物機能化学分野 | 准教授 |
Last Updated :2025/12/04
■研究者基本情報
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■経歴
経歴
委員歴
■研究活動情報
受賞
- 2020年09月, 日本応用糖質科学会, 奨励賞
佐分利 亘 - 2018年09月, 日本応用糖質科学会, ポスター賞
佐分利 亘 - 2017年09月, 日本応用糖質科学会, ポスター賞
佐分利 亘 - 2017年04月, Congress on Gastrointestinal Function, James Russel Award
佐分利 亘 - 2016年09月, 日本応用糖質科学会, ポスター賞
佐分利 亘 - 2015年03月, 日本農芸化学会, 農芸化学奨励賞
佐分利 亘 - 2014年10月, 植物化学調節学会, ポスター賞
佐分利 亘 - 2013年06月, 酵素応用シンポジウム, 研究奨励賞
佐分利 亘
論文
- AtGH3.10 and JAR1 Produce 12-Hydroxyjasmonoyl-l-isoleucine from 12-Hydroxyjasmonic Acid in Arabidopsis thaliana.
Katsunari Oki, Akane Enoki, Yoshitaka Yokota, Taiki Kurihara, Takafumi Shimizu, Wataru Saburi, Takayuki Tohge, Haruhide Mori, Guido Van den Ackerveken, Naoki Kitaoka, Hideyuki Matsuura
Chembiochem : a European journal of chemical biology, e2500151, 2025年09月11日, ［査読有り］, ［国際共著］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, Jasmonates are plant hormones that regulate plant defense and development. 7-iso-Jasmonoyl-l-isoleucine (JA-Ile) is a representative active jasmonate which is biosynthesized from 7-iso-jasmonic acid (JA) by the jasmonoyl-amido synthases JASMONATE RESISTANT 1 (JAR1) and AtGH3.10 in Arabidopsis thaliana. 12-Hydroxy-7-iso-jasmonoyl-l-isoleucine (12-OH-JA-Ile) is another active jasmonate, and 12-hydroxylation of JA-Ile is considered the major biosynthetic pathway toward 12-OH-JA-Ile. Previous report elucidated that recombinant JAR1 showed a weak activity against 12-hydroxy-7-iso-jasmonic acid (12-OH-JA). However, the direct conversion from 12-OH-JA to 12-OH-JA-Ile in planta and the enzyme activity of AtG3.10 against 12-OH-JA have never been reported. Herein, a feeding experiment with deuterated 12-OH-JA confirms the direct conversion of 12-OH-JA to 12-OH-JA-Ile in wild-type Arabidopsis plants. The conversion from 12-OH-JA to 12-OH-JA-Ile is not observed in jar1 gh3.10 double mutant, suggesting that 12-OH-JA is converted to 12-OH-JA-Ile by JAR1 and AtGH3.10. Notably, enzyme assays show that the catalytic efficiency with 12-OH-JA for AtGH3.10 is higher than those with JA for AtGH3.10 and with 12-OH-JA for JAR1. Comparative analysis of JAR1 and AtGH3.10 structures and site-directed mutation analysis reveals that Ser120 in AtGH3.10 is the key amino acid residue responsible for its high catalytic efficiency against 12-OH-JA. - Structural basis of transglucosylation in dextran dextrinase, a homolog of anomer-inverting GH15 glucoside hydrolases.
Takayoshi Tagami, Wataru Saburi, Juri Sadahiro, Yuya Kumagai, Weeranuch Lang, Naohiro Matsugaki, Masayuki Okuyama, Haruhide Mori, Atsuo Kimura
The Journal of biological chemistry, 301, 9, 110541, 110541, 2025年07月30日, ［査読有り］, ［筆頭著者］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, Bacterial exopolysaccharide, dextran, primarily composed of α-(1→6)-linked d-glucosyl residues, is synthesized from α-(1→4)-glucan dextrin or sucrose through successive anomer-retaining transglucosylation reactions by dextran dextrinase (DDase) or dextransucrase, respectively. Although the structure-function relationship of dextransucrase has been extensively studied, that of DDase remains largely unknown. Herein, we revealed the Gluconobacter oxydans DDase structural basis through biochemical and structural analyses. The DDase comprises 1,284 residues, with its N-terminal 902 residues being functionally essential. Crystal structure analysis of the minimal active DDase (Δ382C) complex with the pseudo-maltotetraose inhibitor, acarbose, revealed its homodimeric structure. A Δ382C protomer contains two β-sandwich domains, N1 and N2, and an (α/α)6-barrel domain A. Surprisingly, domains N2, A, and the helix-loop-helix connecting them structurally resemble those of bacterial anomer-inverting glucohydrolases in glycoside hydrolase family 15 (GH15). Domain N1 primarily forms intra- and inter-subunit domain interfaces. The DDase acarbose-binding residues in subsite -1 are conserved with GH15 glucohydrolases. The DDase Glu671 and Glu858 are positioned similarly to the GH15 glucohydrolase general acid and base catalysts, respectively. However, Glu858 is approximately 1.2-1.6 Å closer to the acarbose equivalent anomeric carbon, facilitating being a nucleophile catalyst in the double displacement mechanism. The catalytic residue functions were biochemically confirmed using mutant enzymes. Spatial position of Glu858 is arranged by the local structure of the α11→α12 loop and subunit interactions involving domain N1. Enzymes classified in the same GH family catalyze reactions with different mechanisms, anomer-inverting or -retaining, due to differences in their catalytic residue spatial arrangement. - Biochemical and structural analysis of the mechanism for the catalysis and specificity of cellobiose 2-epimerase from Rhodothermus marinus.
Wataru Saburi, Hirohiko Muto-Fukiya, Nongluck Jaito, Koji Kato, Jian Yu, Min Yao, Haruhide Mori
Bioscience, biotechnology, and biochemistry, 89, 7, 973, 984, 2025年03月22日, ［査読有り］, ［筆頭著者, 責任著者］, ［国際共著］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, Cellobiose 2-epimerase (CE) catalyzes C-2 epimerization of reducing end d-glucose/d-mannose residue of β-(1→4)-disaccharides, and also slightly catalyzes aldose-ketose conversion. In this study, we investigated the structure-function relationship of Rhodothermus marinus CE (RmCEs). In 2H2O, 2H replaced the 2-H of the reducing end sugar residue, suggesting a proton abstraction-addition mechanism via the cis-enediolate intermediate. The structure of the RmCE-mannobiitol complex showed that His259 was suitable for abstracting 2-H from d-mannose residue, whereas His390 was suitable for the d-glucose residue. H259A and H390A mutations abolished activity for Galβ1-4Man and Galβ1-4Glc formation from Galβ1-4Fru, respectively, and these mutants catalyzed both epimerization and isomerization to Galβ1-4Glc and Galβ1-4Man, respectively. Ala substitution of the residues interacting with the 2-O of the reducing end sugar residue significantly reduced the velocity for epimerization, but not for isomerization. Trp385, stacked onto the non-reducing-end sugar residues of disaccharides, was shown to be important for disaccharide specificity. - Molecular mechanism for the substrate specificity of Arthrobacter globiformis M6 α-glucosidase CmmB, belonging to glycoside hydrolase family 13 subfamily 30
Wataru Saburi, Takayoshi Tagami, Takuya Usui, Jian Yu, Toyoyuki Ose, Min Yao, Haruhide Mori
Food Bioscience, 61, 104516, 104516, Elsevier BV, 2024年10月, ［査読有り］, ［筆頭著者, 責任著者］
研究論文（学術雑誌） - Comparisons of the amylolytic enzymes and malt starch hydrolysates of two barley cultivars, Hokudai 1 (the first cultivar developed in Japan) and Kitanohoshi (currently used cultivar for beer production)
Wataru Saburi, Haruhide Mori
Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry, 88, 10, 1180, 1187, Oxford University Press (OUP), 2024年07月11日, ［査読有り］, ［筆頭著者, 責任著者］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, Abstract
Starch degradation in malted barley produces yeast-fermentable sugars. In this study, we compared the amylolytic enzymes and composition of the malt starch hydrolysates of two barley cultivars, Hokudai 1 (the first cultivar established in Japan) and Kitanohoshi (the currently used cultivar for beer production). Hokudai 1 malt contained lower activity of amylolytic enzymes than Kitanohoshi malt, although these cultivars contained α-amylase AMY2 and β-amylase Bmy1 as the predominant enzymes. Malt starch hydrolysate of Hokudai 1 contained more limit dextrin and less yeast-fermentable sugars than that of Kitanohoshi. In mixed malt saccharification, a high Hokudai 1 malt ratio increased the limit dextrin levels and decreased the maltotriose and maltose levels. Even though Kitanohoshi malt contained more amylolytic enzymes than Hokudai 1 malt, addition of Kitanohoshi extract containing the amylolytic enzymes did not enhance malt starch degradation of Hokudai 1. Hokudai 1 malt starch was less degradable than Kitanohoshi malt starch. - Extraction and antioxidant capacity of mycosporine-like amino acids from red algae in Japan.
Ryuya Yamamoto, Shigeru Toriumi, Chikara Kawagoe, Wataru Saburi, Hideki Kishimura, Yuya Kumagai
Bioscience, biotechnology, and biochemistry, 88, 7, 830, 838, 2024年04月29日, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, Mycosporine-like amino acids (MAAs) are the natural UV absorbing compounds with antioxidant activity found in microalgae and macroalgae. We collected red algae Asparagopsis taxiformis, Meristotheca japonica, and Polysiphonia senticulosa from Nagasaki, where UV radiation is more intense than in Hokkaido, and investigated the effect of UV radiation on MAAs content. It was suggested that A. taxiformis and M. japonica contained shinorine and palythine, while UV absorbing compound in P. senticulosa could not be identified. The amounts of these MAAs were lower compared to those from Hokkaido. Despite an increase in UV radiation in both region from February to April, MAAs contents of red algae from Nagasaki slightly decreased, while that from Hokkaido significantly decreased. This difference was suggested the amount of inorganic nitrogen in the ocean. Antioxidant activity of MAAs increased under alkaline conditions. The extract containing MAAs from P. senticulosa showed the highest antioxidant activity among four red algae. - Tunable structure of chimeric isomaltomegalosaccharides with double α-(1 → 4)-glucosyl chains enhances the solubility of water-insoluble bioactive compounds
Weeranuch Lang, Takayoshi Tagami, Yuya Kumagai, Seiya Tanaka, Hye-Jin Kang, Masayuki Okuyama, Wataru Saburi, Haruhide Mori, Tohru Hira, Chaehun Lee, Takuya Isono, Toshifumi Satoh, Hiroshi Hara, Takayuki Kurokawa, Nobuo Sakairi, Yoshiaki Yuguchi, Atsuo Kimura
Carbohydrate Polymers, 319, 121185, 121185, Elsevier BV, 2023年11月, ［査読有り］, ［国際共著］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, Isomaltomegalosaccharides with α-(1 → 4) and α-(1 → 6)-segments solubilize water-insoluble ligands since the former complexes with the ligand and the latter solubilizes the complex. Previously, we enzymatically synthesized isomaltomegalosaccharide with a single α-(1 → 4)-segment at the reducing end (S-IMS) by dextran dextrinase (DDase), but the chain length [average degree of polymerization (DP) ≤ 9] was insufficient for strong encapsulation. We hypothesized that the conjugation of longer α-(1 → 4)-segment afforded the promising function although DDase is incapable to do so. In this study, the cyclodextrin glucanotransferase-catalyzed coupling reaction of α-cyclodextrin to S-IMS synthesized a new α-(1 → 4)-segment at the nonreducing end (N-4S) of S-IMS to form D-IMS [IMS harboring double α-(1 → 4)-segments]. The length of N-4S was modulated by the ratio between α-cyclodextrin and S-IMS, generating N-4Ss with DPs of 7-50. Based on phase-solubility analysis, D-IMS-28.3/13/3 bearing amylose-like helical N-4S with DP of 28.3 displayed a water-soluble complex with aromatic drugs and curcumin. Small-angle X-ray scattering revealed the chain adapted to rigid in solution in which the radius of gyration was estimated to 2.4 nm. Furthermore, D-IMS with short N-4S solubilized flavonoids of less-soluble multifunctional substances. In our research, enzyme-generated functional biomaterials from DDase were developed to maximize the hydrophobic binding efficacy towards water-insoluble bioactive compounds. - Molecular mechanism for endo-type action of glycoside hydrolase family 55 endo-β-1,3-glucanase on β1-3/1-6-glucan.
Tomoya Ota, Wataru Saburi, Takayoshi Tagami, Jian Yu, Shiro Komba, Linda Elizabeth Jewell, Tom Hsiang, Ryozo Imai, Min Yao, Haruhide Mori
The Journal of biological chemistry, 299, 11, 105294, 105294, 2023年09月27日, ［査読有り］, ［国際共著］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, The glycoside hydrolase family 55 (GH55) includes inverting exo-β-1,3-glucosidases and endo-β-1,3-glucanases, acting on laminarin, which is a β1-3/1-6-glucan consisting of a β1-3/1-6-linked main chain and β1-6-linked branches. Despite their different modes of action toward laminarin, endo-β-1,3-glucanases share with exo-β-1,3-glucosidases conserved residues that form the dead-end structure of subsite -1. Here, we investigated the mechanism of endo-type action on laminarin by GH55 endo-β-1,3-glucanase MnLam55A, identified from Microdochium nivale. MnLam55A, like other endo-β-1,3-glucanases, degraded internal β-d-glucosidic linkages of laminarin, producing more reducing sugars than the sum of d-glucose and gentiooligosaccharides detected. β1-3-Glucans lacking β1-6-linkages in the main chain were not hydrolyzed. NMR analysis of the initial degradation of laminarin revealed that MnLam55A preferentially cleaved the non-reducing terminal β1-3-linkage of the laminarioligosaccharide moiety at the reducing end side of the main chain β1-6-linkage. MnLam55A liberates d-glucose from laminaritriose and longer laminarioligosaccharides, but kcat/Km values to laminarioligosaccharides (≤4.21 s-1mM-1) were much lower than to laminarin (5,920 s-1mM-1). These results indicate that β-glucan binding to the minus subsites of MnLam55A, including exclusive binding of the gentiobiosyl moiety to subsites -1 and -2, is required for high hydrolytic activity. A crystal structure of MnLam55A, determined at 2.4 Å resolution, showed that MnLam55A adopts an overall structure and catalytic site similar to those of exo-β-1,3-glucosidases. However, MnLam55A possesses an extended substrate-binding cleft that is expected to form the minus subsites. Sequence comparison suggested that other endo-type enzymes share the extended cleft structure. The specific hydrolysis of internal linkages in laminarin is presumably common to GH55 endo-β-1,3-glucanases. - Hydrolysis-transglycosylation of sucrose and production of β-(2→1)-fructan by inulosucrase from Neobacillus drentensis 57N.
Yusuke Kido, Wataru Saburi, Taizo Nagura, Haruhide Mori
Bioscience, biotechnology, and biochemistry, 87, 10, 1169, 1182, 2023年09月21日, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, Inulin, β-(2→1)-fructan, is a beneficial polysaccharide used as a functional food ingredient. Microbial inulosucrases (ISs), catalyzing β-(2→1)-transfructosylation, produce β-(2→1)-fructan from sucrose. In this study, we identified a new IS (NdIS) from the soil isolate, Neobacillus drentensis 57N. Sequence analysis revealed that, like other Bacillaceae ISs, NdIS consists of a glycoside hydrolase family 68 domain and shares most of the 1-kestose-binding residues of the archaeal IS, InuHj. Native and recombinant NdIS were characterized. NdIS is a homotetramer. It does not require calcium for activity. High performance liquid chromatography and 13C-nuclear magnetic resonance indicated that NdIS catalyzed the hydrolysis and β-(2→1)-transfructosylation of sucrose to synthesize β-(2→1)-fructan with chain lengths of 42 or more residues. The rate dependence on sucrose concentration followed hydrolysis-transglycosylation kinetics, and a 50% transglycosylation ratio was obtained at 344 m m sucrose. These results suggest that transfructosylation from sucrose to β-(2→1)-fructan occurs predominantly to elongate the fructan chain because sucrose is an unfavorable acceptor. - Chemical synthesis of oligosaccharide derivatives with partial structure of β1-3/1-6 glucan, using monomeric units for the formation of β1-3 and β1-6 glucosidic linkages.
Tomoya Ota, Wataru Saburi, Shiro Komba, Haruhide Mori
Bioscience, biotechnology, and biochemistry, 87, 10, 1111, 1121, 2023年07月05日, ［査読有り］, ［国際共著］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, β1-3/1-6 Glucans, known for their diverse structures, comprise a β1-3-linked main chain and β1-6-linked short branches. Laminarin, a β1-3/1-6 glucan extracted from brown seaweed, for instance, includes β1-6 linkages even in the main chain. The diverse structures provide various beneficial functions of the glucan. To investigate the relationship between structure and functionality, and to enable the characterization of β1-3/1-6 glucan-metabolizing enzymes, oligosaccharides containing exact structures of β1-3/1-6 glucans are required. We synthesized the monomeric units for the synthesis of β1-3/1-6 mixed-linked glucooligosaccharides. 2-(Trimethylsilyl)ethyl 2-O-benzoyl-4,6-O-benzylidene-β-d-glucopyranoside served as an acceptor in the formation of β1-3 linkages. Phenyl 2-O-benzoyl-4,6-O-benzylidene-3-O-(tert-butyldiphenylsilyl)-1-thio-β-d-glucopyranoside and phenyl 2,3-di-O-benzoyl-4,6-di-O-levulinyl-1-thio-β-d-glucopyranoside acted as donors, synthesizing acceptors suitable for the formation of β1-3- and β1-6-linkages, respectively. These were used to synthesize a derivative of Glcβ1-6Glcβ1-3Glcβ1-3Glc, demonstrating that the proposed route can be applied to synthesize the main chain of β-glucan, with the inclusion of both β1-3 and β1-6 linkages. - Structural insights into the substrate specificity and activity of a novel mannose 2-epimerase from Runella slithyformis.
Hang Wang, Xiaomei Sun, Wataru Saburi, Saki Hashiguchi, Jian Yu, Toyoyuki Ose, Haruhide Mori, Min Yao
Acta crystallographica. Section D, Structural biology, 79, Pt 7, 585, 595, 2023年07月01日, ［査読有り］, ［国際共著］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, Mannose 2-epimerase (ME), a member of the acylglucosamine 2-epimerase (AGE) superfamily that catalyzes epimerization of D-mannose and D-glucose, has recently been characterized to have potential for D-mannose production. However, the substrate-recognition and catalytic mechanism of ME remains unknown. In this study, structures of Runella slithyformis ME (RsME) and its D254A mutant [RsME(D254A)] were determined in their apo forms and as intermediate-analog complexes [RsME-D-glucitol and RsME(D254A)-D-glucitol]. RsME possesses the (α/α)6-barrel of the AGE superfamily members but has a unique pocket-covering long loop (loopα7-α8). The RsME-D-glucitol structure showed that loopα7-α8 moves towards D-glucitol and closes the active pocket. Trp251 and Asp254 in loopα7-α8 are only conserved in MEs and interact with D-glucitol. Kinetic analyses of the mutants confirmed the importance of these residues for RsME activity. Moreover, the structures of RsME(D254A) and RsME(D254A)-D-glucitol revealed that Asp254 is vital for binding the ligand in a correct conformation and for active-pocket closure. Docking calculations and structural comparison with other 2-epimerases show that the longer loopα7-α8 in RsME causes steric hindrance upon binding to disaccharides. A detailed substrate-recognition and catalytic mechanism for monosaccharide-specific epimerization in RsME has been proposed. - Identification and characterization of extracellular GH3 β-glucosidase from the pink snow mold fungus, Microdochium nivale.
Tomoya Ota, Wataru Saburi, Linda Elizabeth Jewell, Tom Hsiang, Ryozo Imai, Haruhide Mori
Bioscience, biotechnology, and biochemistry, 87, 7, 707, 716, 2023年06月23日, ［査読有り］, ［国際共著］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, Glycoside hydrolase family 3 (GH3) β-glucosidase exists in many filamentous fungi. In phytopathogenic fungi, it is involved in fungal growth and pathogenicity. Microdochium nivale is a severe phytopathogenic fungus of grasses and cereals and is the causal agent of pink snow mold, but its β-glucosidase has not been identified. In this study, a GH3 β-glucosidase of M. nivale (MnBG3A) was identified and characterized. Among various p-nitrophenyl β-glycosides, MnBG3A showed activity on d-glucoside (pNP-Glc) and slight activity on d-xyloside. In the pNP-Glc hydrolysis, substrate inhibition occurred (Kis = 1.6 m m), and d-glucose caused competitive inhibition (Ki = 0.5 m m). MnBG3A acted on β-glucobioses with β1-3, -6, -4, and -2 linkages, in descending order of kcat/Km. In contrast, the regioselectivity for newly formed products was limited to β1-6 linkage. MnBG3A has similar features to those of β-glucosidases from Aspergillus spp., but higher sensitivity to inhibitory effects. - Alteration of Substrate Specificity and Transglucosylation Activity of GH13_31 α-Glucosidase from Bacillus sp. AHU2216 through Site-Directed Mutagenesis of Asn258 on β→α Loop 5
Waraporn Auiewiriyanukul, Wataru Saburi, Tomoya Ota, Jian Yu, Koji Kato, Min Yao, Haruhide Mori
Molecules, 28, 7, 3109, 3109, MDPI AG, 2023年03月30日, ［査読有り］, ［責任著者］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, α-Glucosidase catalyzes the hydrolysis of α-d-glucosides and transglucosylation. Bacillus sp. AHU2216 α-glucosidase (BspAG13_31A), belonging to the glycoside hydrolase family 13 subfamily 31, specifically cleaves α-(1→4)-glucosidic linkages and shows high disaccharide specificity. We showed previously that the maltose moiety of maltotriose (G3) and maltotetraose (G4), covering subsites +1 and +2 of BspAG13_31A, adopts a less stable conformation than the global minimum energy conformation. This unstable d-glucosyl conformation likely arises from steric hindrance by Asn258 on β→α loop 5 of the catalytic (β/α)8-barrel. In this study, Asn258 mutants of BspAG13_31A were enzymatically and structurally analyzed. N258G/P mutations significantly enhanced trisaccharide specificity. The N258P mutation also enhanced the activity toward sucrose and produced erlose from sucrose through transglucosylation. N258G showed a higher specificity to transglucosylation with p-nitrophenyl α-d-glucopyranoside and maltose than the wild type. E256Q/N258G and E258Q/N258P structures in complex with G3 revealed that the maltose moiety of G3 bound at subsites +1 and +2 adopted a relaxed conformation, whereas a less stable conformation was taken in E256Q. This structural difference suggests that stabilizing the G3 conformation enhances trisaccharide specificity. The E256Q/N258G-G3 complex formed an additional hydrogen bond between Met229 and the d-glucose residue of G3 in subsite +2, and this interaction may enhance transglucosylation. - Function and structure of Lacticaseibacillus casei GH35 β-galactosidase LBCZ_0230 with high hydrolytic activity to lacto-N-biose I and galacto-N-biose
Saburi Wataru, Tomoya Ota, Koji Kato, Takayoshi Tagami, Keitaro Yamashita, Min Yao, Haruhide Mori
Journal of Applied Glycoscience, 70, 2, 43, 52, The Japanese Society of Applied Glycoscience, 2023年03月11日, ［査読有り］, ［筆頭著者, 責任著者］, ［国内誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, β-Galactosidase (EC 3.2.1.23) hydrolyzes β-D-galactosidic linkages at the non-reducing end of substrates to produce β-D-galactose. Lacticaseibacillus casei is one of the most widely utilized probiotic species of lactobacilli. It possesses a putative β-galactosidase belonging to glycoside hydrolase family 35 (GH35). This enzyme is encoded by the gene included in the gene cluster for utilization of lacto-N-biose I (LNB; Galβ1-3GlcNAc) and galacto-N-biose (GNB; Galβ1-3GalNAc) via the phosphoenolpyruvate: sugar phosphotransferase system. The GH35 protein (GnbG) from L. casei BL23 is predicted to be 6-phospho-β-galactosidase (EC 3.2.1.85). However, its 6-phospho-β-galactosidase activity has not yet been examined, whereas its hydrolytic activity against LNB and GNB has been demonstrated. In this study, L. casei JCM1134 LBCZ_0230, homologous to GnbG, was characterized enzymatically and structurally. A recombinant LBCZ_0230, produced in Escherichia coli, exhibited high hydrolytic activity toward o-nitrophenyl β-D-galactopyranoside, p-nitrophenyl β-D-galactopyranoside, LNB, and GNB, but not toward o-nitrophenyl 6-phospho-β-D-galactopyranoside. Crystal structure analysis indicates that the structure of subsite -1 of LBCZ_0230 is very similar to that of Streptococcus pneumoniae β-galactosidase BgaC and not suitable for binding to 6-phospho-β-D-galactopyranoside. These biochemical and structural analyses indicate that LBCZ_0230 is a β-galactosidase. According to the prediction of LNB's binding mode, aromatic residues, Trp190, Trp240, Trp243, Phe244, and Tyr458, form hydrophobic interactions with N-acetyl-D-glucosamine residue of LNB at subsite +1. - Discovery of solabiose phosphorylase and its application for enzymatic synthesis of solabiose from sucrose and lactose
Wataru Saburi, Takanori Nihira, Hiroyuki Nakai, Motomitsu Kitaoka, Haruhide Mori
Scientific Reports, 12, 1, 259, 259, Springer Science and Business Media LLC, 2022年12月, ［査読有り］, ［筆頭著者, 責任著者］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）,Abstract Glycoside phosphorylases (GPs), which catalyze the reversible phosphorolysis of glycosides, are promising enzymes for the efficient production of glycosides. Various GPs with new catalytic activities are discovered from uncharacterized proteins phylogenetically distant from known enzymes in the past decade. In this study, we characterizedPaenibacillus borealis PBOR_28850 protein, belonging to glycoside hydrolase family 94. Screening of acceptor substrates for reverse phosphorolysis, in which α-d -glucose 1-phosphate was used as the donor substrate, revealed that the recombinant PBOR_28850 produced inEscherichia coli specifically utilizedd -galactose as an acceptor and produced solabiose (β-d -Glcp -(1 → 3)-d -Gal). This indicates that PBOR_28850 is a new GP, solabiose phosphorylase. PBOR_28850 catalyzed the phosphorolysis and synthesis of solabiose through a sequential bi-bi mechanism involving the formation of a ternary complex. The production of solabiose from lactose and sucrose has been established. Lactose was hydrolyzed tod -galactose andd -glucose by β-galactosidase. Phosphorolysis of sucrose and synthesis of solabiose were then coupled by adding sucrose, sucrose phosphorylase, and PBOR_28850 to the reaction mixture. Using 210 mmol lactose and 280 mmol sucrose, 207 mmol of solabiose was produced. Yeast treatment degraded the remaining monosaccharides and sucrose without reducing solabiose. Solabiose with a purity of 93.7% was obtained without any chromatographic procedures. - Functional characterization of a novel GH94 glycoside phosphorylase, 3-O-β-d-glucopyranosyl β-d-glucuronide phosphorylase, and implication of the metabolic pathway of acidic carbohydrates in Paenibacillus borealis.
Naoto Isono, Emi Mizutani, Haruka Hayashida, Hirotaka Katsuzaki, Wataru Saburi
Biochemical and biophysical research communications, 625, 60, 65, 2022年10月15日, ［査読有り］, ［最終著者］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, Glycoside hydrolase family 94 (GH94) contains enzymes that reversibly catalyze the phosphorolysis of β-glycosides. We conducted this study to investigate a GH94 protein (PBOR_13355) encoded in the genome of Paenibacillus borealis DSM 13188 with low sequence identity to known phosphorylases. Screening of acceptor substrates for reverse phosphorolysis in the presence of α-d-glucose 1-phosphate as a donor substrate showed that PBOR_13355 utilized d-glucuronic acid and p-nitrophenyl β-d-glucuronide as acceptors. In the reaction with d-glucuronic acid, 3-O-β-d-glucopyranosyl-d-glucuronic acid was synthesized. PBOR_13355 showed a higher apparent catalytic efficiency to p-nitrophenyl β-d-glucuronide than to d-glucuronic acid, and thus, PBOR_13355 was concluded to be a novel glycoside phosphorylase, 3-O-β-d-glucopyranosyl β-d-glucuronide phosphorylase. PBOR_13360, encoded by the gene immediately downstream of the PBOR_13355 gene, was shown to be β-glucuronidase. Collectively, PBOR_13355 and PBOR_13360 are predicted to work together in the cytosol to metabolize oligosaccharides containing the 3-O-β-d-glucopyranosyl β-d-glucuronide structure released from bacterial and plant acidic carbohydrates. - Characterization of Antioxidant Activity of Heated Mycosporine-like Amino Acids from Red Alga Dulse Palmaria palmata in Japan.
Yuki Nishida, Wataru Saburi, Yoshikatsu Miyabe, Hideki Kishimura, Yuya Kumagai
Marine drugs, 20, 3, 2022年03月01日, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, We recently demonstrated the monthly variation and antioxidant activity of mycosporine-like amino acids (MAAs) from red alga dulse in Japan. The antioxidant activity of MAAs in acidic conditions was low compared to that in neutral and alkali conditions, but we found strong antioxidant activity from the heated crude MAA fraction in acidic conditions. In this study, we identified and characterized the key compounds involved in the antioxidant activity of this fraction. We first isolated two MAAs, palythine, and porphyra-334, from the fraction and evaluated the activities of the two MAAs when heated. MAAs possess absorption maxima at around 330 nm, while the heated MAAs lost this absorption. The heated MAAs showed a high ABTS radical scavenging activity at pH 5.8-8.0. We then determined the structure of heated palythine via ESI-MS and NMR analyses and speculated about the putative antioxidant mechanism. Finally, a suitable production condition of the heated compounds was determined at 120 °C for 30 min at pH 8.0. We revealed compounds from red algae with antioxidant activities at a wide range of pH values, and this information will be useful for the functional processing of food. - Substrate specificity of glycoside hydrolase family 1 β-glucosidase AtBGlu42 from Arabidopsis thaliana and its molecular mechanism.
Shu Horikoshi, Wataru Saburi, Jian Yu, Hideyuki Matsuura, James R Ketudat Cairns, Min Yao, Haruhide Mori
Bioscience, biotechnology, and biochemistry, 86, 2, 231, 245, 2022年01月24日, ［査読有り］, ［国際共著］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, Plants possess many glycoside hydrolase family 1 (GH1) β-glucosidases, which physiologically function in cell wall metabolism and activation of bioactive substances, but most remain uncharacterized. One GH1 isoenzyme AtBGlu42 in Arabidopsis thaliana has been identified to hydrolyze scopolin using the gene deficient plants, but no enzymatic properties were obtained. Its sequence similarity to another functionally characterized enzyme Os1BGlu4 in rice suggests that AtBGlu42 also acts on oligosaccharides. Here, we show that the recombinant AtBGlu42 possesses high kcat/Km not only on scopolin, but also on various β-glucosides, cellooligosaccharides, and laminarioligosaccharides. Of the cellooligosaccharides, cellotriose was the most preferred. The crystal structure, determined at 1.7 Å resolution, suggests that Arg342 gives unfavorable binding to cellooligosaccharides at subsite +3. The mutants R342Y and R342A showed the highest preference on cellotetraose or cellopentaose with increased affinities at subsite +3, indicating that the residues at this position have an important role for chain length specificity. - A practical approach to producing isomaltomegalosaccharide using dextran dextrinase from Gluconobacter oxydans ATCC 11894.
Weeranuch Lang, Yuya Kumagai, Juri Sadahiro, Wataru Saburi, Rakrudee Sarnthima, Takayoshi Tagami, Masayuki Okuyama, Haruhide Mori, Nobuo Sakairi, Doman Kim, Atsuo Kimura
Applied microbiology and biotechnology, 106, 2, 689, 698, 2022年01月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, Dextran dextrinase (DDase) catalyzes formation of the polysaccharide dextran from maltodextrin. During the synthesis of dextran, DDase also generates the beneficial material isomaltomegalosaccharide (IMS). The term megalosaccharide is used for a saccharide having DP = 10-100 or 10-200 (DP, degree of polymerization). IMS is a chimeric glucosaccharide comprising α-(1 → 6)- and α-(1 → 4)-linked portions at the nonreducing and reducing ends, respectively, in which the α-(1 → 4)-glucosyl portion originates from maltodextrin of the substrate. In this study, IMS was produced by a practical approach using extracellular DDase (DDext) or cell surface DDase (DDsur) of Gluconobacter oxydans ATCC 11894. DDsur was the original form, so we prepared DDext via secretion from intact cells by incubating with 0.5% G6/G7 (maltohexaose/maltoheptaose); this was followed by generation of IMS from various concentrations of G6/G7 substrate at different temperatures for 96 h. However, IMS synthesis by DDext was limited by insufficient formation of α-(1 → 6)-glucosidic linkages, suggesting that DDase also catalyzes elongation of α-(1 → 4)-glucosyl chain. For production of IMS using DDsur, intact cells bearing DDsur were directly incubated with 20% G6/G7 at 45 °C by optimizing conditions such as cell concentration and agitation efficiency, which resulted in generation of IMS (average DP = 14.7) with 61% α-(1 → 6)-glucosyl content in 51% yield. Increases in substrate concentration and agitation efficiency were found to decrease dextran formation and increase IMS production, which improved the reaction conditions for DDext. Under modified conditions (20% G6/G7, agitation speed of 100 rpm at 45 °C), DDext produced IMS (average DP = 14.5) with 65% α-(1 → 6)-glucosyl content in a good yield of 87%. KEY POINTS: • Beneficial IMS was produced using thermostabilized DDase. • Optimum conditions for reduced dextran formation were successfully determined. • A practical approach was established to provide IMS with a great yield of 87%. - A Ubiquitously Expressed UDP-Glucosyltransferase, UGT74J1, Controls Basal Salicylic Acid Levels in Rice.
Daisuke Tezuka, Hideyuki Matsuura, Wataru Saburi, Haruhide Mori, Ryozo Imai
Plants (Basel, Switzerland), 10, 9, 2021年09月10日, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, Salicylic acid (SA) is a phytohormone that regulates a variety of physiological and developmental processes, including disease resistance. SA is a key signaling component in the immune response of many plant species. However, the mechanism underlying SA-mediated immunity is obscure in rice (Oryza sativa). Prior analysis revealed a correlation between basal SA level and blast resistance in a range of rice varieties. This suggested that resistance might be improved by increasing basal SA level. Here, we identified a novel UDP-glucosyltransferase gene, UGT74J1, which is expressed ubiquitously throughout plant development. Mutants of UGT74J1 generated by genome editing accumulated high levels of SA under non-stressed conditions, indicating that UGT74J1 is a key enzyme for SA homeostasis in rice. Microarray analysis revealed that the ugt74j1 mutants constitutively overexpressed a set of pathogenesis-related (PR) genes. An inoculation assay demonstrated that these mutants had increased resistance against rice blast, but they also exhibited stunted growth phenotypes. To our knowledge, this is the first report of a rice mutant displaying SA overaccumulation. - β-(1→4)-Mannobiose Acts as an Immunostimulatory Molecule in Murine Dendritic Cells by Binding the TLR4/MD-2 Complex.
Ting-Yu Cheng, Yen-Ju Lin, Wataru Saburi, Stefan Vieths, Stephan Scheurer, Stefan Schülke, Masako Toda
Cells, 10, 7, 2021年07月14日, ［査読有り］, ［国際共著］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, Some β-mannans, including those in coffee bean and soy, contain a mannose backbone with β-(1→4) bonds. Such mannooligosaccharides could have immunological functions involving direct interaction with immune cells, in addition to acting as prebiotics. This study aimed at assessing the immunological function of mannooligosaccharides with β-(1→4) bond, and elucidating their mechanism of action using bone marrow-derived murine dendritic cells (BMDCs). When BMDCs were stimulated with the mannooligosaccharides, only β-Man-(1→4)-Man significantly induced production of cytokines that included IL-6, IL-10, TNF-α, and IFN-β, and enhanced CD4+ T-cell stimulatory capacity. Use of putative receptor inhibitors revealed the binding of β-Man-(1→4)-Man to TLR4/MD2 complex and involvement with the complement C3a receptor (C3aR) for BMDC activation. Interestingly, β-Man-(1→4)-Man prolonged the production of pro-inflammatory cytokines (IL-6 and TNF-α), but not of the IL-10 anti-inflammatory cytokine during extended culture of BMDCs, associated with high glucose consumption. The results suggest that β-Man-(1→4)-Man is an immunostimulatory molecule, and that the promotion of glycolysis could be involved in the production of pro-inflammatory cytokine in β-Man-(1→4)-Man-stimulated BMDCs. This study could contribute to development of immune-boosting functional foods and a novel vaccine adjuvant. - A model system for studying plant-microbe interactions under snow.
Chikako Kuwabara, Kentaro Sasaki, Natsuki Umeki, Tamotsu Hoshino, Wataru Saburi, Hirokazu Matsui, Ryozo Imai
Plant physiology, 185, 4, 1489, 1494, 2021年02月02日, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, A model plant–pathogen system using Arabidopsis and its natural snow mold pathogen Typhula ishikariensis demonstrated Arabidopsis plants develop disease resistance through cold acclimation. - Preliminary evaluation of colorimetric and HPLC-based methods for quantifying β-(1→4)-mannobiose in a crude material
Kensuke Fukui, Wataru Saburi, Masahisa Ibuki, Kazunobu Tsumura, Haruhide Mori
Food Science and Technology Research, 27, 2, 249, 257, Japanese Society for Food Science and Technology, 2021年, ［査読有り］
研究論文（学術雑誌） - Efficient one-pot enzymatic synthesis of trehalose 6-phosphate using GH65 α-glucoside phosphorylases.
Yodai Taguchi, Wataru Saburi, Ryozo Imai, Haruhide Mori
Carbohydrate research, 488, 107902, 107902, 2020年02月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, Trehalose 6-phosphate (Tre6P) is an important intermediate for trehalose biosynthesis. Recent researches have revealed that Tre6P is an endogenous signaling molecule that regulates plant development and stress responses. The necessity of Tre6P in physiological studies is expected to be increasing. To achieve the cost-effective production of Tre6P, a novel approach is required. In this study, we utilized trehalose 6-phosphate phosphorylase (TrePP) from Lactococcus lactis to produce Tre6P. In the reverse phosphorolysis by the TrePP, 91.9 mM Tre6P was produced from 100 mM β-glucose 1-phosphate (β-Glc1P) and 100 mM glucose 6-phosphate (Glc6P). The one-pot reaction of TrePP and maltose phosphorylase (MP) enabled production of 65 mM Tre6P from 100 mM maltose, 100 mM Glc6P, and 20 mM inorganic phosphate. Addition of β-phosphoglucomutase to this reaction produced Glc6P from β-Glc1P and thus reduced requirement of Glc6P as a starting material. Within the range of 20-469 mM inorganic phosphate tested, the 54 mM concentration yielded the highest amount of Tre6P (33 mM). Addition of yeast increased the yield because of its glucose consumption. Finally, from 100 mmol maltose and 60 mmol inorganic phosphate, we successfully achieved production of 37.5 mmol Tre6P in a one-pot reaction (100 mL), and 9.4 g Tre6P dipotassium salt was obtained. - Two binding proteins of the ABC transporter that confers growth of Bifidobacterium animalis subsp. lactis ATCC27673 on β-mannan possess distinct manno-oligosaccharide-binding profiles.
M Ejby, A Guskov, M J Pichler, G C Zanten, E Schoof, W Saburi, D J Slotboom, M Abou Hachem
Molecular microbiology, 112, 1, 114, 130, 2019年07月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, Human gut bifidobacteria rely on ATP-binding cassette (ABC) transporters for oligosaccharide uptake. Multiple oligosaccharide-specific solute-binding protein (SBP) genes are occasionally associated with a single ABC transporter, but the significance of this multiplicity remains unclear. Here, we characterize BlMnBP1 and BlMnBP2, the two SBPs associated to the β-manno-oligosaccharide (MnOS) ABC transporter in Bifidobacterium animalis subsp. lactis. Despite similar overall specificity and preference to mannotriose (Kd ≈80 nM), affinity of BlMnBP1 is up to 2570-fold higher for disaccharides than BlMnBP2. Structural analysis revealed a substitution of an asparagine that recognizes the mannosyl at position 2 in BlMnBP1, by a glycine in BlMnBP2, which affects substrate affinity. Both substitution types occur in bifidobacterial SBPs, but BlMnBP1-like variants prevail in human gut isolates. B. animalis subsp. lactis ATCC27673 showed growth on gluco and galactomannans and was able to outcompete a mannan-degrading Bacteroides ovatus strain in co-cultures, attesting the efficiency of this ABC uptake system. By contrast, a strain that lacks this transporter failed to grow on mannan. This study highlights SBP diversification as a possible strategy to modulate oligosaccharide uptake preferences of bifidobacterial ABC-transporters during adaptation to specific ecological niches. Efficient metabolism of galactomannan by distinct bifidobacteria, merits evaluating this plant glycan as a potential prebiotic. - Biochemical characteristics of maltose phosphorylase MalE from Bacillus sp. AHU2001 and chemoenzymatic synthesis of oligosaccharides by the enzyme.
Gao Y, Saburi W, Taguchi Y, Mori H
Bioscience, biotechnology, and biochemistry, 83, 2097, 2109, 2019年07月, ［査読有り］, ［国際誌］ - Enzymatic characteristics of D-mannose 2-epimerase, a new member of the acylglucosamine 2-epimerase superfamily.
Saburi W, Sato S, Hashiguchi S, Muto H, Iizuka T, Mori H
Applied microbiology and biotechnology, 2019年06月, ［査読有り］, ［筆頭著者］, ［国際誌］ - Enzymatic production of xylooligosaccharides from red alga dulse (Palmaria sp.) wasted in Japan {IF:2.616]
Y.Yamamoto, H.Kishimura, Y.Kinoshita, W.Saburi, Y.Kumagai, H.Yasui, T.Ojima
Process Biochemistry, 2019年04月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - The rice ethylene response factor OsERF83 positively regulates disease resistance to Magnaporthe oryzae.
Tezuka D, Kawamata A, Kato H, Saburi W, Mori H, Imai R
Plant physiology and biochemistry : PPB, 135, 263, 271, Elsevier BV, 2019年02月, ［査読有り］, ［国際誌］
研究論文（学術雑誌） - Functional modulation of caecal fermentation and microbiota in rat by feeding bean husk as a dietary fibre supplement.
Myint H, Kishi H, Iwahashi Y, Saburi W, Koike S, Kobayashi Y
Beneficial microbes, 9, 6, 1, 12, Wageningen Academic Publishers, 2018年09月, ［査読有り］, ［国際誌］
研究論文（学術雑誌）, A feeding study using rats was conducted to evaluate the utility of lablab bean husk and soya bean husk as sources of potential prebiotic fibre. Twenty 5-week-old Sprague Dawley rats were divided into 4 groups and fed one of the following diets for 3 weeks: purified diet (AIN93 G) containing 5% cellulose (CEL), or the same diet in which cellulose was replaced by corn starch (STA), lablab bean husk (LBH), or soya bean husk (SBH). Rats were sacrificed at 8 weeks of age and caecal digesta were collected. Feed intake, body weight, anatomical parameters, and caecal ammonia level did not differ significantly among diets. Rats on LBH and SBH showed higher concentrations of caecal short-chain fatty acid and lactate than those on CEL. Rats on CEL, SBH, and LBH exhibited lower caecal indole and skatole levels. LBH yielded increased caecal abundance of Akkermansia muciniphila and Oscillibacter relatives, as demonstrated by either qPCR, MiSeq, or clone library analysis. SBH favoured the growth of lactobacilli as assessed by both qPCR and MiSeq, and favoured the growth of bifidobacteria as assessed by MiSeq. In comparison with STA, LBH and SBH yielded lower caecal abundance of bacteria related to Dorea massiliensis, as demonstrated by qPCR, MiSeq, and clone library analysis. Both types of bean husk were found to contain oligosaccharides that might selectively stimulate the growth of beneficial bacteria. Based on these results, the two species of bean husk tested are considered potentially functional for promoting the gut health of monogastric animals. - A Transposon Mutagenesis System for Bifidobacterium longum subsp. longum Based on an IS3 Family Insertion Sequence, ISBlo11.
Mikiyasu Sakanaka, Shingo Nakakawaji, Shin Nakajima, Satoru Fukiya, Arisa Abe, Wataru Saburi, Haruhide Mori, Atsushi Yokota
Applied and environmental microbiology, 84, 17, 2018年09月01日, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）, Bifidobacteria are a major component of the intestinal microbiota in humans, particularly breast-fed infants. Therefore, elucidation of the mechanisms by which these bacteria colonize the intestine is desired. One approach is transposon mutagenesis, a technique currently attracting much attention because, in combination with next-generation sequencing, it enables exhaustive identification of genes that contribute to microbial fitness. We now describe a transposon mutagenesis system for Bifidobacterium longum subsp. longum 105-A (JCM 31944) based on ISBlo11, a native IS3 family insertion sequence. To build this system, xylose-inducible or constitutive bifidobacterial promoters were tested to drive the expression of full-length or a truncated form at the N terminus of the ISBlo11 transposase. An artificial transposon plasmid, pBFS12, in which ISBlo11 terminal inverted repeats are separated by a 3-bp spacer, was also constructed to mimic the transposition intermediate of IS3 elements. The introduction of this plasmid into a strain expressing transposase resulted in the insertion of the plasmid with an efficiency of >103 CFU/μg DNA. The plasmid targets random 3- to 4-bp sequences, but with a preference for noncoding regions. This mutagenesis system also worked at least in B. longum NCC2705. Characterization of a transposon insertion mutant revealed that a putative α-glucosidase mediates palatinose and trehalose assimilation, demonstrating the suitability of transposon mutagenesis for loss-of-function analysis. We anticipate that this approach will accelerate functional genomic studies of B. longum subsp. longumIMPORTANCE Several hundred species of bacteria colonize the mammalian intestine. However, the genes that enable such bacteria to colonize and thrive in the intestine remain largely unexplored. Transposon mutagenesis, combined with next-generation sequencing, is a promising tool to comprehensively identify these genes but has so far been applied only to a small number of intestinal bacterial species. In this study, a transposon mutagenesis system was established for Bifidobacterium longum subsp. longum, a representative health-promoting Bifidobacterium species. The system enables the identification of genes that promote colonization and survival in the intestine and should help illuminate the physiology of this species. - Function and structure of GH13_31 α-glucosidase with high α-(1→4)-glucosidic linkage specificity and transglucosylation activity.
Auiewiriyanukul W, Saburi W, Kato K, Yao M, Mori H
FEBS letters, 592, 13, 2268, 2281, 2018年07月, ［査読有り］, ［国際誌］ - Biochemical and structural characterization of Marinomonas mediterranea D-mannose isomerase Marme_2490 phylogenetically distant from known enzymes
Wataru Saburi, Nongluck Jaito, Koji Kato, Yuka Tanaka, Min Yao, Haruhide Mori
Biochimie, 144, 63, 73, Elsevier B.V., 2018年01月01日, ［査読有り］, ［筆頭著者, 責任著者］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Elucidation of the biosynthetic pathway of cis-jasmone in Lasiodiplodia theobromae
Ryo Matsui, Naruki Amano, Kosaku Takahashi, Yodai Taguchi, Wataru Saburi, Hideharu Mori, Norio Kondo, Kazuhiko Matsuda, Hideyuki Matsuura
SCIENTIFIC REPORTS, 7, 1, 6688, 2017年07月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Evaluation of acceptor selectivity of Lactococcus lactis ssp lactis trehalose 6-phosphate phosphorylase in the reverse phosphorolysis and synthesis of a new sugar phosphate
Yodai Taguchi, Wataru Saburi, Ryozo Imai, Haruhide Mori
BIOSCIENCE BIOTECHNOLOGY AND BIOCHEMISTRY, 81, 8, 1512, 1519, 2017年, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Functions, structures, and applications of cellobiose 2-epimerase and glycoside hydrolase family 130 mannoside phosphorylases
Wataru Saburi
BIOSCIENCE BIOTECHNOLOGY AND BIOCHEMISTRY, 80, 7, 1294, 1305, 2016年07月, ［査読有り］, ［筆頭著者, 責任著者］, ［国際誌］
英語 - α-Glucosidases and α-1,4-glucan lyases: structures, functions, and physiological actions.
Okuyama M, Saburi W, Mori H, Kimura A
Cellular and molecular life sciences : CMLS, 73, 14, 2727, 2751, 2016年07月, ［査読有り］, ［筆頭著者］, ［国際誌］
英語 - The cold-induced defensin TAD1 confers resistance against snow mold and Fusarium head blight in transgenic wheat
Kentaro Sasaki, Chikako Kuwabara, Natsuki Umeki, Mari Fujioka, Wataru Saburi, Hirokazu Matsui, Fumitaka Abe, Ryozo Imai
JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY, 228, 3, 7, 2016年06月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Purification and characterization of a chloride ion-dependent α-glucosidase from the midgut gland of Japanese scallop (Patinopecten yessoensis).
Masuda Y, Okuyama M, Iizuka T, Nakai H, Saburi W, Fukukawa T, Maneesan J, Tagami T, Naraoka T, Mori H, Kimura A
Bioscience, biotechnology, and biochemistry, 80, 3, 479, 485, 2016年03月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Structural insights into the difference in substrate recognition of two mannoside phosphorylases from two GH130 subfamilies
Yuxin Ye, Wataru Saburi, Rei Odaka, Koji Kato, Naofumi Sakurai, Keisuke Komoda, Mamoru Nishimoto, Motomitsu Kitaoka, Haruhide Mori, Min Yao
FEBS LETTERS, 590, 6, 828, 837, 2016年03月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Supplemental epilactose prevents metabolic disorders through uncoupling protein-1 induction in the skeletal muscle of mice fed high-fat diets
Yuki Murakami, Teruyo Ojima-Kato, Wataru Saburi, Haruhide Mori, Hirokazu Matsui, Soichi Tanabe, Takuya Suzuki
BRITISH JOURNAL OF NUTRITION, 114, 11, 1774, 1783, 2015年12月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Identification of rice Os4BGlu13 as a β-glucosidase which hydrolyzes gibberellin A4 1-O-β-d-glucosyl ester, in addition to tuberonic acid glucoside and salicylic acid derivative glucosides.
Hua Y, Ekkhara W, Sansenya S, Srisomsap C, Roytrakul S, Saburi W, Takeda R, Matsuura H, Mori H, Ketudat Cairns JR
Archives of biochemistry and biophysics, 583, 36, 46, 2015年10月, ［査読有り］, ［国際共著］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Functional reassignment of Cellvibrio vulgaris EpiA to cellobiose 2-epimerase and an evaluation of the biochemical functions of the 4-O-β-d-mannosyl-d-glucose phosphorylase-like protein, UnkA.
Saburi W, Tanaka Y, Muto H, Inoue S, Odaka R, Nishimoto M, Kitaoka M, Mori H
Bioscience, biotechnology, and biochemistry, 79, 6, 969, 977, 2015年06月, ［査読有り］, ［筆頭著者］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Structural elements responsible for the glucosidic linkage-selectivity of a glycoside hydrolase family 13 exo-glucosidase
Wataru Saburi, Hiroaki Rachi-Otsuka, Hironori Hondoh, Masayuki Okuyama, Haruhide Mori, Atsuo Kimura
FEBS LETTERS, 589, 7, 865, 869, 2015年03月, ［査読有り］, ［筆頭著者］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Structural insights into the catalytic reaction that is involved in the reorientation of Trp238 at the substrate-binding site in GH13 dextran glucosidase
Momoko Kobayashi, Wataru Saburi, Daichi Nakatsuka, Hironori Hondoh, Koji Kato, Masayuki Okuyama, Haruhide Mori, Atsuo Kimura, Min Yao
FEBS LETTERS, 589, 4, 484, 489, 2015年02月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Identity of the two dextran dextrinases produced by Gluconobacter oxydans ATCC 11894 and its localization change depending on the cell growth.
Sadahiro J, Mori H, Saburi W, Okuyama M, Kimura A
Biochem Biophys Res Commun, 456, 1, 500, 505, 2015年, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Biochemical properties and substrate recognition mechanism of GH31 α-glucosidase from Bacillus sp. AHU 2001 with broad substrate specificity.
Saburi W, Okuyama M, Kumagai Y, Kimura A, Mori H
Biochimie, 108, 108, 140, 148, 2015年, ［査読有り］, ［筆頭著者］, ［国際誌］
英語 - Enhancement of hydrolytic activity of thermophilic alkalophilic alpha-amylase from Bacillus sp AAH-31 through optimization of amino acid residues surrounding the substrate binding site
Naoya Tamamura, Wataru Saburi, Atsushi Mukai, Naoki Morimoto, Toshihiko Takehana, Seiji Koike, Hirokazu Matsui, Haruhide Mori
BIOCHEMICAL ENGINEERING JOURNAL, 86, 8, 15, 2014年05月, ［査読有り］, ［筆頭著者］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Crystallization and preliminary X-ray crystallographic analysis of α-glucosidase HaG from Halomonas sp. strain H11.
Shen X, Saburi W, Gai ZQ, Komoda K, Yu J, Ojima-Kato T, Kido Y, Matsui H, Mori H, Yao M
Acta crystallographica. Section F, Structural biology communications, 70, Pt 4, 464, 466, 2014年04月, ［査読有り］, ［国際共著］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Structural insights into the epimerization of β-1,4-linked oligosaccharides catalyzed by cellobiose 2-epimerase, the sole enzyme epimerizing non-anomeric hydroxyl groups of unmodified sugars.
Fujiwara T, Saburi W, Matsui H, Mori H, Yao M
The Journal of biological chemistry, 289, 6, 3405, 3415, 2014年02月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Characterization of a thermophilic 4-O-β-D-mannosyl-D-glucose phosphorylase from Rhodothermus marinus.
Jaito N, Saburi W, Odaka R, Kido Y, Hamura K, Nishimoto M, Kitaoka M, Matsui H, Mori H
Bioscience, biotechnology, and biochemistry, 78, 2, 263, 270, 2014年02月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Replacement of the Catalytic Nucleophile Aspartyl Residue of Dextran Glucosidase by Cysteine Sulfinate Enhances Transglycosylation Activity
Wataru Saburi, Momoko Kobayashi, Haruhide Mori, Masayuki Okuyama, Atsuo Kimura
JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 288, 44, 31670, 31677, 2013年11月, ［査読有り］, ［筆頭著者］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Characterization of Ruminococcus albus cellodextrin phosphorylase and identification of a key phenylalanine residue for acceptor specificity and affinity to the phosphate group.
Sawano T, Saburi W, Hamura K, Matsui H, Mori H
The FEBS journal, 280, 18, 4463, 4473, 2013年09月, ［査読有り］, ［筆頭著者］, ［国際共著］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Modulation of Allosteric Regulation by E38K and G101N Mutations in the Potato Tuber ADP-glucose Pyrophosphorylase
Shinji Wakuta, Yumi Shibata, Yumiko Yoshizaki, Wataru Saburi, Shigeki Hamada, Hiroyuki Ito, Seon-Kap Hwang, Thomas W. Okita, Hirokazu Matsui
BIOSCIENCE BIOTECHNOLOGY AND BIOCHEMISTRY, 77, 9, 1854, 1859, 2013年09月, ［査読有り］, ［責任著者］, ［国際共著］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - A thermophilic alkalophilic α-amylase from Bacillus sp. AAH-31 shows a novel domain organization among glycoside hydrolase family 13 enzymes.
Saburi W, Morimoto N, Mukai A, Kim DH, Takehana T, Koike S, Matsui H, Mori H
Bioscience, biotechnology, and biochemistry, 77, 9, 1867, 1873, 2013年09月, ［査読有り］, ［筆頭著者］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Identification of rice β-glucosidase with high hydrolytic activity towards salicylic acid β-D-glucoside.
Himeno N, Saburi W, Wakuta S, Takeda R, Matsuura H, Nabeta K, Sansenya S, Ketudat Cairns JR, Mori H, Imai R, Matsui H
Bioscience, biotechnology, and biochemistry, 77, 5, 934, 939, 2013年05月, ［査読有り］, ［筆頭著者］, ［国際共著］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Crystal structure of Ruminococcus albus cellobiose 2-epimerase: Structural insights into epimerization of unmodified sugar
Takaaki Fujiwara, Wataru Saburi, Sota Inoue, Haruhide Mori, Hirokazu Matsui, Isao Tanaka, Min Yao
FEBS LETTERS, 587, 7, 840, 846, 2013年04月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Identification and Characterization of Cellobiose 2-Epimerases from Various Aerobes
Teruyo Ojima, Wataru Saburi, Takeshi Yamamoto, Haruhide Mori, Hirokazu Matsui
BIOSCIENCE BIOTECHNOLOGY AND BIOCHEMISTRY, 77, 1, 189, 193, 2013年01月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Modulation of acceptor specificity of Ruminococcus albus cellobiose phosphorylase through site-directed mutagenesis
Ken Hamura, Wataru Saburi, Hirokazu Matsui, Haruhide Mori
Carbohydrate Research, 379, 21, 25, Elsevier Ltd, 2013年, ［査読有り］, ［筆頭著者］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - COLD SHOCK DOMAIN PROTEIN 3 is involved in salt and drought stress tolerance in Arabidopsis
Myung-Hee Kim, Shunya Sato, Kentaro Sasaki, Wataru Saburi, Hirokazu Matsui, Ryozo Imai
FEBS OPEN BIO, 3, 438, 442, 2013年, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Metabolic Mechanism of Mannan in a Ruminal Bacterium, Ruminococcus albus, Involving Two Mannoside Phosphorylases and Cellobiose 2-Epimerase: DISCOVERY OF A NEW CARBOHYDRATE PHOSPHORYLASE, β-1,4-MANNOOLIGOSACCHARIDE PHOSPHORYLASE.
Kawahara R, Saburi W, Odaka R, Taguchi H, Ito S, Mori H, Matsui H
The Journal of biological chemistry, 287, 50, 42389, 42399, 2012年12月, ［査読有り］, ［筆頭著者, 責任著者］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Bacteroides thetaiotaomicron VPI-5482 glycoside hydrolase family 66 homolog catalyzes dextranolytic and cyclization reactions
Young-Min Kim, Eiji Yamamoto, Min-Sun Kang, Hiroyuki Nakai, Wataru Saburi, Masayuki Okuyama, Haruhide Mori, Kazumi Funane, Mitsuru Momma, Zui Fujimoto, Mikihiko Kobayashi, Doman Kim, Atsuo Kimura
FEBS JOURNAL, 279, 17, 3185, 3191, 2012年09月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Immobilization of a Thermostable Cellobiose 2-Epimerase from Rhodothermus marinus JCM9785 and Continuous Production of Epilactose
Hiroki Sato, Wataru Saburi, Teruyo Ojima, Hidenori Taguchi, Haruhide Mori, Hirokazu Matsui
BIOSCIENCE BIOTECHNOLOGY AND BIOCHEMISTRY, 76, 8, 1584, 1587, 2012年08月, ［査読有り］, ［筆頭著者, 責任著者］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Purification and characterization of a liquefying α-amylase from alkalophilic thermophilic Bacillus sp. AAH-31.
Kim DH, Morimoto N, Saburi W, Mukai A, Imoto K, Takehana T, Koike S, Mori H, Matsui H
Bioscience, biotechnology, and biochemistry, 76, 7, 1378, 1383, 2012年07月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Novel Dextranase Catalyzing Cycloisomaltooligosaccharide Formation and Identification of Catalytic Amino Acids and Their Functions Using Chemical Rescue Approach
Young-Min Kim, Yoshiaki Kiso, Tomoe Muraki, Min-Sun Kang, Hiroyuki Nakai, Wataru Saburi, Weeranuch Lang, Hee-Kwon Kang, Masayuki Okuyama, Haruhide Mori, Ryuichiro Suzuki, Kazumi Funane, Nobuhiro Suzuki, Mitsuru Momma, Zui Fujimoto, Tetsuya Oguma, Mikihiko Kobayashi, Doman Kim, Atsuo Kimura
JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 287, 24, 19927, 19935, 2012年06月, ［査読有り］, ［国際共著］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - α-Glucosylated 6-gingerol: chemoenzymatic synthesis using α-glucosidase from Halomonas sp. H11, and its physical properties.
Ojima T, Aizawa K, Saburi W, Yamamoto T
Carbohydrate research, 354, 59, 64, 2012年06月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - A novel metabolic pathway for glucose production mediated by α-glucosidase-catalyzed conversion of 1,5-anhydrofructose.
Kim YM, Saburi W, Yu S, Nakai H, Maneesan J, Kang MS, Chiba S, Kim D, Okuyama M, Mori H, Kimura A
The Journal of biological chemistry, 287, 27, 22441, 22444, 2012年06月, ［査読有り］, ［筆頭著者］, ［国際共著］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Enzymatic Characteristics of Cellobiose Phosphorylase from Ruminococcus albus NE1 and Kinetic Mechanism of Unusual Substrate Inhibition in Reverse Phosphorolysis
Ken Hamura, Wataru Saburi, Shotaro Abe, Naoki Morimoto, Hidenori Taguchi, Haruhide Mori, Hirokazu Matsui
BIOSCIENCE BIOTECHNOLOGY AND BIOCHEMISTRY, 76, 4, 812, 818, 2012年04月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Characterization of Halomonas sp. strain H11 α-glucosidase activated by monovalent cations and its application for efficient synthesis of α-D-glucosylglycerol.
Ojima T, Saburi W, Yamamoto T, Kudo T
Applied and environmental microbiology, 78, 6, 1836, 1845, 2012年03月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Biochemical Characterization of a Thermophilic Cellobiose 2-Epimerase from a Thermohalophilic Bacterium, Rhodothermus marinus JCM9785
Teruyo Ojima, Wataru Saburi, Hiroki Sato, Takeshi Yamamoto, Haruhide Mori, Hirokazu Matsui
BIOSCIENCE BIOTECHNOLOGY AND BIOCHEMISTRY, 75, 11, 2162, 2168, 2011年11月, ［査読有り］
英語, 研究論文（学術雑誌） - OsJAR1 and OsJAR2 are jasmonyl-L-isoleucine synthases involved in wound- and pathogen-induced jasmonic acid signalling
Shinji Wakuta, Erika Suzuki, Wataru Saburi, Hideyuki Matsuura, Kensuke Nabeta, Ryozo Imai, Hirokazu Matsui
BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, 409, 4, 634, 639, 2011年06月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - 難消化性二糖エピラクトースによるカルシウム吸収・鉄吸収、骨形成、貧血の回復作用に関する研究 ―胃切除ラットにおけるフラクトオリゴ糖との比較検討―
田口 秀典, 鈴木 卓弥, 西向 めぐみ, 横嶋 悟, 小島 晃代, 山本 健, 佐分利 亘, 原 博, 金田 勇, 小野寺 秀一, 塩見 徳夫, 松井 博和
Journal of Applied Glycoscience Supplement, 2011, 0, 74, 74, The Japanese Society of Applied Glycoscience, 2011年, ［査読有り］, ［国内誌］
研究論文（学術雑誌） - Ingestion of Epilactose, a Non-digestible Disaccharide, Improves Postgastrectomy Osteopenia and Anemia in Rats through the Promotion of Intestinal Calcium and Iron Absorption
Takuya Suzuki, Megumi Nishimukai, Aki Shinoki, Hidenori Taguchi, Satoru Fukiya, Atsushi Yokota, Wataru Saburi, Takeshi Yamamoto, Hiroshi Hara, Hirokazu Matsui
JOURNAL OF AGRICULTURAL AND FOOD CHEMISTRY, 58, 19, 10787, 10792, 2010年10月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - 難消化性二糖エピラクトースによるカルシウム吸収・鉄吸収、骨形成、貧血の回復作用に関する研究 ～胃切除ラットでの評価
鈴木 卓弥, 西向 めぐみ, 田口 秀典, 濱田 茂樹, 佐分利 亘, 山本 健, 伊藤 進, 原 博, 松井 博和
Journal of Applied Glycoscience Supplement, 2010, 90, 90, 日本応用糖質科学会, 2010年
日本語 - Streptococcus mutans由来 dextran glucosidaseの部位特異的変異導入による糖転移活性の改変 (2)
中塚 大地, 本同 宏成, 大塚 博昭, 佐分利 亘, 森 春英, 奥山 正幸, 木村 淳夫
Journal of Applied Glycoscience Supplement, 2009, 34, 34, 日本応用糖質科学会, 2009年
日本語 - Structure-function relationship of substrate length specificity of dextran glucosidase from Streptococcus mutans
Wataru Saburi, Hironori Hondoh, Young-Min Kim, Haruhide Mori, Masayuki Okuyama, Atsuo Kimura
BIOLOGIA, 63, 6, 1000, 1005, 2008年12月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Gene cloning and enzymatic characteristics of a novel gamma-cyclodextrin-specific cyclodextrinase from alkalophilic Bacillus clarkii 7364.
Nakagawa Y, Saburi W, Takada M, Hatada Y, Horikoshi K
Biochimica et biophysica acta, 1784, 12, 2004, 2011, 2008年12月, ［査読有り］, ［国際誌］ - Molecular Mechanism of α-glucosidase
Masayuki Okuyama, Haruhide Mori, Hironori Hondoh, Hiroyuki Nakai, Wataru Saburi, Min Sung Kang, Young Min Kim, Mamoru Nishimoto, Jintanart Wongchawalit, Takeshi Yamamoto, Mee Son, Jin Ha Lee, San San Mar, Kenji Fukuda, Seiya Chiba, Atsuo Kimura
Carbohydrate-Active Enzymes: Structure, Function and Applications, 64, 76, 2008年09月, ［査読有り］, ［国際誌］
論文集(書籍)内論文 - Substrate recognition mechanism of alpha-1,6-glucosidic linkage hydrolyzing enzyme, dextran glucosidase from Streptococcus mutans
Hironori Hondoh, Wataru Saburi, Haruhide Mori, Masayuki Okuyama, Toshitaka Nakada, Yoshiki Matsuura, Atsuo Kimura
JOURNAL OF MOLECULAR BIOLOGY, 378, 4, 913, 922, 2008年05月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Crystallization and preliminary X-ray analysis of Streptococcus mutans dextran glucosidase
Wataru Saburi, Hironori Hondoh, Hideaki Unno, Masayuki Okuyama, Haruhide Mori, Toshitaka Nakada, Yoshiki Matsuura, Atsuo Kimura
ACTA CRYSTALLOGRAPHICA SECTION F-STRUCTURAL BIOLOGY AND CRYSTALLIZATION COMMUNICATIONS, 63, Pt 9, 774, 776, 2007年09月, ［査読有り］, ［筆頭著者］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Structural elements in dextran glucosidase responsible for high specificity to long chain substrate.
Saburi W, Mori H, Saito S, Okuyama M, Kimura A
Biochimica et biophysica acta, 1764, 4, 688, 698, 2006年04月, ［査読有り］, ［筆頭著者］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Enzymatic synthesis of alkyl α-2-deoxylglucosides by alkyl alcohol resistant α-glucosidase from Aspergillus niger
Kim YM, Okuyama M, Mori H, Nakai H, Saburi W, Chiba S, Kimura A
Tetrahedron Asymmetry, 16, 2, 403, 409, 2005年01月24日, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌） - Molecular analysis of α-glucosidase belonging to GH-family 31
Nakai H, Okuyama M, Kim YM, Saburi W, Wongchawalit J, Mori H, Chiba S, Kimura A
Biologia, Bratislava, 60, 131, 135, 2005年, ［査読有り］, ［国際誌］
英語 - Isolation and characterization of cDNA encoding P-19.5 protein accumulated preferentially at early stage of carrot somatic embryogenesis
Takuma Sano, Mamoru Nishimoto, Wataru Saburi, Atsuo Kimura, Hiroshi Yasuda, Masahiro Uchibatake, Takuji Ohwada, Hiroshi Masuda
Plant Science, 167, 6, 1211, 1217, 2004年12月, ［査読有り］, ［国際誌］
英語, 研究論文（学術雑誌）
その他活動・業績
- β1-3グルカン分解酵素群の多様な切断様式とその分子基盤 ラミナリンを端から切る酵素と内から切る酵素の共通点と相違点
太田智也, 佐分利亘, 森春英, 化学と生物, 62, 8, 2024年 - 新規酵素ガラクトース2-エピメラーゼの諸性質ならびにX線結晶構造の解析
内山昌典, 佐分利亘, 武井梓穂, 尾瀬農之, 森春英, 日本農芸化学会北海道支部学術講演会講演要旨集(Web), 2023, 2023年 - GH55β-1,3-グルカナーゼのエンド様式の作用と構造
太田智也, 佐分利亘, 山下恵太郎, 田上貴祥, 于健, 今場司朗, ジュウェルリンダ, シャントム, 今井亮三, 姚閔, 森春英, 応用糖質科学, 13, 1, 2023年 - β1-3/1-6グルカンの部分構造をもつオリゴ糖の化学合成
太田智也, 佐分利亘, 今場司朗, 森春英, 日本農芸化学会大会講演要旨集(Web), 2023, 2023年 - GH3β-グルコシダーゼMnBG3Aの反応速度と基質阻害に対する単糖の影響
太田智也, 佐分利亘, JEWELL Linda, HSIANG Tom, 今井亮三, 森春英, 日本栄養・食糧学会北海道支部大会講演要旨集, 53rd (CD-ROM), 2023年 - 雪腐病菌由来GH3β-グルコシダーゼMnBG3AのpNP-Glc加水分解速度への各種配糖体および単糖の影響
太田智也, 佐分利亘, JEWELL Linda, HSIANG Tom, 今井亮三, 森春英, 応用糖質科学, 13, 3, 2023年 - Microdochium nivale由来GH55ラミナリナーゼによるラミナリン分解機構の解明
太田智也, 佐分利亘, 今場司朗, JEWELL Linda, HSIANG Tom, 今井亮三, 森春英, 日本農芸化学会大会講演要旨集(Web), 2022, 2022年 - GH55β-1,3-グルカナーゼのエンド様式の作用と構造
太田智也, 佐分利亘, 山下恵太郎, 田上貴祥, 于健, 今場司朗, JEWELL Linda, HSIANG Tom, 今井亮三, 姚閔, 森春英, 応用糖質科学, 12, 3, 2022年 - 【総説：―受賞論文―】 セロビオース2-エピメラーゼと類縁酵素群の構造と機能に関する研究
佐分利 亘, 応用糖質科学：日本応用糖質科学会誌, 11, 1, 22, 34, 2021年, ［査読有り］, ［筆頭著者, 責任著者］, ［国内誌］セロビオース2-エピメラーゼ(CE)は,β-(1→4)-二糖の還元末端Glc残基をMan残基にエピメリ化する.β-マンナンの代謝においてManβ-4ManからManβ-4Glcを生成し,加リン酸分解へと導くとされる.CEの利用によるラクトースからのエピラクトースの生産技術が整備され,エピラクトースにプレバイオティクス効果など有益な生理機能が見出された.CEの構造は,触媒部位も含めてアシルグルコサミン2-エピメラーゼ(AGE)やマンノースイソメラーゼ(MI)などと類似し,AGEスーパーファミリーを形成する.(α/α)6バレルからなる触媒ドメインの8番目と12番目のα-ヘリックス上のHisが一般酸・塩基触媒として基質の2-Hの授受に働くcis-エンジオレート中間体を経由したエピメリ化機構が提唱された.一方,MIなどイソメラーゼでは,8番目のα-ヘリックス上のHisが一般酸・塩基触媒として基質の1-Cと2-Cの間でのプロトンの分子内転移を行う機構が考えられた.AGEスーパーファミリーからManをエピメリ化するマンノース2-エピメラーゼが発見され,GlcからのManの生産への応用が期待された.
, 一般社団法人 日本応用糖質科学会, 日本語, 記事・総説・解説・論説等（学術雑誌） - 紅色雪腐病菌Microdochium nivale由来GH3β-グルコシダーゼの酵素化学的諸性質とオリゴ糖の合成
太田智也, 佐分利亘, JEWELL Linda, HSIANG Tom, 今井亮三, 森春英, 応用糖質科学, 10, 4, 2020年 - 植物病原性真菌Microdochium nivale由来菌体外β-グルコシダーゼの機能解析
太田智也, 佐分利亘, JEWELL Linda, HSIANG Tom, 今井亮三, 森春英, 日本農芸化学会大会講演要旨集(Web), 2020, 2020年 - 植物病原性真菌Microdochium nivale由来菌体外ラミナリナーゼの機能解析
太田智也, 佐分利亘, 今井亮三, 森春英, 応用糖質科学, 9, 3, 2019年 - ビフィズス菌のトランスポゾン変異株を用いたα-グルコシダーゼ遺伝子の機能解明
阪中幹祥, 阪中幹祥, 阪中幹祥, 中川路伸吾, 中島森, 阿部光紗, 佐分利亘, 森春英, 横田篤, 吹谷智, 日本農芸化学会大会講演要旨集(Web), 2019, 2019年 - ゲノム編集を用いたサリチル酸高蓄積イネ変異体の作出
手塚大介, 手塚大介, 佐分利亘, 森春英, 松浦英幸, 今井亮三, 植物の生長調節, 53, Supplement, 2018年 - 転写因子に着目したトレハロース誘導抵抗性のシグナル伝達機構の解析
手塚大介, 手塚大介, 川又彩, 加藤英樹, 佐分利亘, 森春英, 今井亮三, 今井亮三, 日本植物細胞分子生物学会大会・シンポジウム講演要旨集, 36th, 2018年 - Ten years of CAZypedia: a living encyclopedia of carbohydrate-active enzymes
Wade Abbott, Orly Alber, Ed Bayer, Jean-Guy Berrin, Alisdair Boraston, Harry Brumer, Ryszard Brzezinski, Anthony Clarke, Beatrice Cobucci-Ponzano, Darrell Cockburn, Pedro Coutinho, Mirjam Czjzek, Bareket Dassa, Gideon John Davies, Vincent Eijsink, Jens Eklof, Alfons Felice, Elizabeth Ficko-Blean, Geoff Pincher, Thierry Fontaine, Zui Fujimoto, Kiyotaka Fujita, Shinya Fushinobu, Harry Gilbert, Tracey Gloster, Ethan Goddard-Borger, Ian Greig, Jan-Hendrik Hehemann, Glyn Hemsworth, Bernard Henrissat, Masafumi Hidaka, Ramon Hurtado-Guerrero, Kiyohiko Igarashi, Takuya Ishida, Stefan Janecek, Seino Jongkees, Nathalie Juge, Satoshi Kaneko, Takane Katayama, Motomitsu Kitaoka, Naotake Konno, Daniel Kracher, Anna Kulminskaya, Alicia Lammerts van Bueren, Sine Larsen, Junho Lee, Markus Linder, Leila LoLeggio, Roland Ludwig, Ana Luis, Mirko Maksimainen, Brian Mark, Richard McLean, Gurvan Michel, Gurvan Michel, Cedric Montanier, Marco Moracci, Haruhide Mori, Hiroyuki Nakai, Wim Nerinckx, Takayuki Ohnuma, Richard Pickersgill, Kathleen Piens, Tirso Pons, Etienne Rebuffet, Peter Reilly, Magali Remaud-Simeon, Brian Rempel, Kyle Robinson, David Rose, Juha Rouvinen, Wataru Saburi, Yuichi Sakamoto, Mats Sandgren, Fathima Shaikh, Yuval Shoham, Franz St John, Jerry Stahlberg, Michael Suits, Gerlind Sulzenbacher, Tomomi Sumida, Ryuichiro Suzuki, Birte Svensson, Toki Taira, Ed Taylor, Takashi Tonozuka, Breeanna Urbanowicz, Gustav Vaaje-Kolstad, Wim Van den Ende, Annabelle Varrot, Maxime Versluys, Florence Vincent, David Vocadlo, Warren Wakarchuk, Tom Wennekes, Rohan Williams, Spencer Williams, David Wilson, Stephen Withers, Katsuro Yaoi, Vivian Yip, Ran Zhang, GLYCOBIOLOGY, 28, 1, 3, 8, 2018年01月
英語, その他 - β-マンナン分解に寄与するセロビオース2-エピメラーゼとβ-マンノシドホスホリラーゼの構造と機能 (応用糖質科学シンポジウム)
佐分利 亘, 加藤 公児, 姚 閔, 松井 博和, 森 春英, 応用糖質科学 = Bulletin of applied glycoscience : 日本応用糖質科学会誌, 7, 2, 69, 75, 2017年05月
β-マンナンは主としてマンノシル基がβ-(1→4)-結合した主鎖を持つ多糖であり，植物細胞壁のヘミセルロースの構成多糖や貯蔵多糖として存在する。Ruminococcus albusやBacteroides fragilisなどの細菌は，β-マンナン分解物のβ-(1→4)-マンノビオース(Manβ1-4Man)をセロビオース2-エピメラーゼ(CE)によりエピメリ化し，生じたManβ1-4Glcを4-O-β-D-マンノシル-D-グルコースホスホリラーゼ(MGP)により加リン酸分解することで代謝する(CE-MGP経路)。R. albusは，長鎖のβ-(1→4)-マンノオリゴ糖を好むβ-1,4-マンノオリゴ糖ホスホリラーゼ(MOP)も有する。CEはN-アセチルグルコサミン2-エピメラーゼやアルドースケトースイソメラーゼなどの単糖異性化酵素と構造的類似性を持ち，MGPやMOPは主としてマンノシドホスホリラーゼからなる糖質加水分解酵素ファミリー130に分類される。本稿では，これら酵素の機能と構造について概説する。, 日本応用糖質科学会, 日本語 - アルドース‐ケトース間の異性化反応を利用したセロビオース2‐エピメラーゼの反応機構の解析
武藤洋彦, 佐分利亘, 藤原孝彰, 加藤公児, YAO Min, 森春英, 日本農芸化学会大会講演要旨集(Web), 2017, ROMBUNNO.3J33p07 (WEB ONLY), 2017年03月05日
日本語 - イネのトレハロース誘導抵抗性に関与する新たなERF転写因子の機能解析
手塚大介, 手塚大介, 川又彩, 加藤英樹, 佐分利亘, 森春英, 今井亮三, 植物の生長調節, 51, Supplement, 59, 2016年10月07日
日本語 - トレハロース6‐リン酸ホスホリラーゼを用いたトレハロース6‐リン酸および新規糖リン酸の合成
田口陽大, 佐分利亘, 今井亮三, 森春英, 応用糖質科学, 6, 3, 46, 2016年08月20日
日本語 - β‐マンナン分解に寄与するセロビオース2‐エピメラーゼとβ‐マンノシドホスホリラーゼの構造と機能
佐分利亘, 加藤公児, 姚閔, 松井博和, 森春英, 応用糖質科学, 6, 3, 65, 2016年08月20日
日本語 - マルトースを出発物質とするトレハロース6‐リン酸の酵素合成法の確立
田口陽大, 佐分利亘, 今井亮三, 今井亮三, 森春英, 日本農芸化学会大会講演要旨集(Web), 2016, 4D028 (WEB ONLY), 2016年03月05日
日本語 - Ruminococcus albus由来4‐O‐β‐D‐マンノシル‐D‐グルコースホスホリラーゼのサブサイト+1に保存されるArg92の基質結合への関与
塩田咲耶子, 尾高伶, 佐分利亘, YE Yuxin, 薦田圭介, 加藤公児, 西本完, 北岡本光, YAO Min, 森春英, 日本農芸化学会大会講演要旨集(Web), 2016, 4D009 (WEB ONLY), 2016年03月05日
日本語 - 乳中ラクトースのエピラクトースへの直接変換を指向した各種セロビオース2‐エピメラーゼの機能評価
武藤洋彦, 佐分利亘, 森春英, 日本農芸化学会大会講演要旨集(Web), 2016, 4D008 (WEB ONLY), 2016年03月05日
日本語 - Gluconobacter oxydans由来の菌体外酵素dextran dextrinaseは自らの生成物デキストランによって細胞表層から遊離する.
貞廣樹里, 森春英, 佐分利亘, 奥山正幸, 木村淳夫, 日本農芸化学会大会講演要旨集(Web), 2016, 4D013 (WEB ONLY), 2016年03月05日
日本語 - コムギの低温誘導性ディフェンシンは雪腐病および赤かび病抵抗性を向上させる
佐々木健太郎, 宇梶慎子, 梅木菜月, 藤岡真里, 佐分利亘, 松井博和, 安倍史高, 今井亮三, 農研機構生物機能利用研究部門成果情報(Web), 2016, 2016年 - P055 Trehalose-induced Systemic Resistance(TSR)の分子基盤(ポスター発表,植物化学調節学会第50回大会)
手塚 大介, 和久田 真司, 加藤 英樹, 松浦 英幸, 佐分 利亘, 森 春英, 松井 博和, 今井 亮三, 植物化学調節学会研究発表記録集, 50, 0, 73, 73, 2015年10月01日
植物化学調節学会, 日本語 - Trehalose‐induced Systemic Resistance(TSR)の分子基盤
手塚大介, 手塚大介, 和久田真司, 加藤英樹, 松浦英幸, 佐分利亘, 森春英, 松井博和, 今井亮三, 今井亮三, 植物の生長調節, 50, Supplement, 73, 2015年10月01日
日本語 - Ba-9 Ruminococcus albus由来4-O-β-D-mannosyl-D-glucose phosphorylase RaMP1の無機リン酸に対するホモトロピック相互作用(ホスホリラーゼ関連,一般講演,一般社団法人日本応用糖質科学会平成27年度大会(第64回))
尾高 伶, 佐分 利亘, Ye Yuxin, 薦田 圭介, 加藤 公児, 西本 完, 北岡 本光, 姚 閔, 森 春英, 応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌, 5, 3, B42, 2015年08月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - Ruminococcus albus由来4‐O‐β‐D‐mannosyl‐D‐glucose phosphorylase RaMP1の無機リン酸に対するホモトロピック相互作用
尾高伶, 佐分利亘, YE Yuxin, 薦田圭介, 加藤公児, 西本完, 北岡本光, 姚閔, 森春英, 応用糖質科学, 5, 3, 42, 2015年08月20日
日本語 - Bacillus sp.AHU2001由来GH31α‐グルコシダーゼの生化学的諸性質と基質認識に重要な構造因子の解析
佐分利亘, 奥山正幸, 熊谷祐也, 木村淳夫, 森春英, 日本農芸化学会大会講演要旨集(Web), 2015, 3E32P02 (WEB ONLY), 2015年03月05日
日本語 - Rhodothermus marinus JCM9785由来セロビオース2‐エピメラーゼの基質結合部位周辺アミノ酸残基の機能解析
武藤洋彦, 佐分利亘, 藤原孝彰, YAO Min, 森春英, 日本農芸化学会大会講演要旨集(Web), 2015, 2E32A08 (WEB ONLY), 2015年03月05日
日本語 - グライコシンターゼ反応を利用したシロイヌナズナ由来β‐グルコシダーゼBglu15のアグリコン特異性の解析
菅原好美, 佐分利亘, 谷口沙希, 今井亮三, 森春英, 日本農芸化学会大会講演要旨集(Web), 2015, 2E32A11 (WEB ONLY), 2015年03月05日
日本語 - UDP-Glc非依存性配糖体化酵素による新規なジャスモン酸の配糖体化と その生理的意義
竹松 知紀, 瀬戸 義哉, 宮澤 吉郎, 和久田 真司, 荻原 毅, 佐分利 亘, 森 春英, 高橋 公咲, 松浦 英幸, 天然有機化合物討論会講演要旨集, 57, Oral14, 2015年【目 的】
植物は大地に根を張り移動が困難である事から、自己の被る様々な環境要因，ストレスに適応して生活環を終結させなくてはならない。よって、植物は独自の環境応答機構を有している。この応答機構を司る生理活性物質として植物ホルモンと呼称される一群の化合物が知られ、多くの研究がなされてきた。我々の研究室では長年、植物ホルモンの一種であるジャスモン酸(JA)について、鋭意研究を行っている。JA類は植物の傷害応答シグナル物質として必須であり、他の興味ある生理活性としてバレイショ塊茎の誘導活性、植物の就眠運動における就眠誘導、花粉管伸長促進などが知られている。近年、JA類の生理活性の制御の観点から、配糖化、チトクロームP450による酸化などに注目した報告がある。
我々はJA類の配糖体化に関して研究を進め、イネに含まれるOsSGTを12-hydroxyJA(12-OHJA)配糖化酵素として報告した[1]。OsSGT は糖供与体としてUDP-Glcを用いるが、12-OHJAよりサリチル酸(SA)に対してより高い糖転位活性を示した。しかしながら、本酵素の探索過程において、SAに対してほとんど配糖化活性を示さず、12-OHJAに特異性の高いUDP-Glc非依存性の配糖化酵素の存在も明らかとした。現在のところ、UDP-Glc非依存性の植物2次代謝産物を標的とした配糖化酵素に関しては松葉らの報告[2]があるのみであり、植物ホルモンの配糖体化に関してUDP-Glc非依存性の糖転位酵素が関与しているとの報告は一切無い。
上記の興味ある発見の詳細を明らかとすべく我々は、1）イネカルスに含まれるUDP-Glc非依存性の配糖化酵素の精製、2）イネカルスに含まれる本配糖化酵素の糖供与体の単離精製、構造決定,3）本配糖化酵素の諸性質の究明を進めたところ、本配糖化酵素はb−glucosydase, OsBGlu1 （accession number: AK100165）であると突き止め、イネにおいてサリチル酸グルコシド(SAG)が糖供与体として働くことを明らかとした(図1)。本酵素の生理学的意義は水酸化JA類を配糖化しJAの活性調節に寄与していると示唆できた事から、本成果について報告する。
【研究方法および結果】
1. UDP-Glc非依存性配糖化酵素の発見
イネカルス粗酵素溶液にUDP-Glcを糖供与体としない12-OHJA 選択的な配糖化酵素が存在する事を、市販の糖供与体を用い、以下の実験より発見した。糖転位反応液としてイネカルスより抽出した粗酵素溶液、糖受容体としてJA水酸化体の一種である12-OHJA、糖供与体として市販のGlc 1-phosphate, TDP-Glc, octyl-Glc, UDP-Glcを用いて実験を行った。その結果、octyl-Glc はUDP-Glcよりも12-OHJAにより選択的に糖を供与し、SAはほとんど配糖化されなかった。
2. イネ由来のUDP-Glc非依存性配糖化酵素の同定
12-OHJA選択的糖転位活性を指標に、イネカルス粗酵素溶液に含まれる糖転位酵素の同定を試みた。糖供与体としてoctyl-Glc、糖受容体として12-OHJAを用い、種々の精製操作の後、得られた精製タンパク質はペプチドマスフィンガープ
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, 天然有機化合物討論会実行委員会, 日本語 - イネの傷害応答におけるサリチル酸グルコシド加水分解酵素の機能
武田遼介, 佐分利亘, 姫野奈美, 和久田真司, 松浦英幸, 今井亮三, 松井博和, 森春英, 植物の生長調節, 49, Supplement, 80, 2014年10月01日
日本語 - イネのトレハロースにより誘導されるシステミックな病害抵抗性にはジャスモン酸が関与する
手塚大介, 坂井志帆, 和久田真司, 加藤英樹, 松浦英幸, 佐分利亘, 森春英, 松井博和, 今井亮三, 植物の生長調節, 49, Supplement, 70, 2014年10月01日
日本語 - 傷害時のイネにおけるサリチル酸グリコシドを糖ドナーとするツベロン酸への糖転移反応
竹松知紀, 瀬戸義哉, 宮澤吉郎, 和久田真司, 佐分利亘, 森春英, 高橋公咲, 松浦英幸, 植物の生長調節, 49, Supplement, 61, 2014年10月01日
日本語 - 低温に応答したGA量の抑制によりイネの耐性を高めることができる
高橋直希, 川又彩, 手塚大介, 佐分利亘, 松浦英幸, 森春英, 今井亮三, 植物の生長調節, 49, Supplement, 37, 2014年10月01日
日本語 - 19. 低温に応答したGA量の抑制によりイネの耐性を高めることができる(口頭発表,植物化学調節学会第49回大会)
高橋 直希, 川又 彩, 手塚 大介, 佐分利 亘, 松浦 英幸, 森 春英, 今井 亮三, 植物化学調節学会研究発表記録集, 49, 0, 37, 37, 2014年10月01日
植物化学調節学会, 日本語 - 43. 傷害時のイネにおけるサリチル酸グルコシドを糖ドナーとするツベロン酸への糖転移反応(口頭発表,植物化学調節学会第49回大会)
竹松 知紀, 瀬戸 義哉, 宮澤 吉郎, 和久田 真司, 佐分利 亘, 森 春英, 高橋 公咲, 松浦 英幸, 植物化学調節学会研究発表記録集, 49, 0, 61, 61, 2014年10月01日
植物化学調節学会, 日本語 - 52. イネのトレハロースにより誘導されるシステミックな病害抵抗性にはジャスモン酸が関与する(口頭発表,植物化学調節学会第49回大会)
手塚 大介, 坂井 志帆, 和久田 真司, 加藤 英樹, 松浦 英幸, 佐分利 亘, 森 春英, 松井 博和, 今井 亮三, 植物化学調節学会研究発表記録集, 49, 0, 70, 70, 2014年10月01日
植物化学調節学会, 日本語 - 62. イネの傷害応答におけるサリチル酸グルコシド加水分解酵素の機能(口頭発表,植物化学調節学会第49回大会)
武田 遼介, 佐分利 亘, 姫野 奈美, 和久田 真司, 松浦 英幸, 今井 亮三, 松井 博和, 森 春英, 植物化学調節学会研究発表記録集, 49, 0, 80, 80, 2014年10月01日
植物化学調節学会, 日本語 - Halomonas sp. H11株由来α‐グルコシダーゼの糖転移機構の解析
城戸悠輔, 佐分利亘, 小島晃代, SHEN Xing, 薦田圭介, 姚閔, 松井博和, 森春英, 日本農芸化学会北海道支部講演会講演要旨, 2014, 32, 2014年09月22日
日本語 - Ba-8 イネ由来スクロースシンターゼ3のヌクレオチド二リン酸特異性に関わるアミノ酸残基の決定(その他の糖質関連酵素,一般講演,日本応用糖質科学会平成26年度大会(第63回))
岩藤 伸治, 佐分利 亘, 松井 博和, 今井 亮三, 森 春英, 応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌, 4, 3, B40, 2014年08月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - イネ由来スクロースシンターゼ3のヌクレオチド二リン酸特異性に関わるアミノ酸残基の決定
岩藤伸治, 佐分利亘, 松井博和, 今井亮三, 森春英, 応用糖質科学, 4, 3, (40), 2014年08月20日
日本語 - 難消化性二糖エピラクトースによる抗メタボリックシンドローム作用の解析
村上祐紀, 佐分利亘, 森春英, 松井博和, 田辺創一, 鈴木卓弥, 日本栄養・食糧学会大会講演要旨集, 68th, 257, 2014年04月30日
日本語 - Halomonas sp.H11株由来α‐グルコシダーゼD274G変異酵素の一価カチオンによる活性化機構の解析
城戸悠輔, 佐分利亘, 小島晃代, 松井博和, 森春英, 日本農芸化学会大会講演要旨集(Web), 2014, 2D02A05 (WEB ONLY), 2014年03月05日
日本語 - アクセプタ結合部位を改変したRuminococcus albus由来マンノシドホスホリラーゼの基質特異性と反応特性の解析
尾高伶, 佐分利亘, 福士江里, 西本完, 北岡本光, 松井博和, 森春英, 日本農芸化学会大会講演要旨集(Web), 2014, 3D02P09 (WEB ONLY), 2014年03月05日
日本語 - ルーメン細菌に見られたヘミセルロースの新しい分解機構 オリゴ糖異性化酵素と加リン酸分解酵素による糖代謝
佐分利亘, 化学と生物, 52, 1, 13, 14, 2014年01月01日
Japan Society for Bioscience, Biotechnology, and Agrochemistry, 日本語 - Acidophilic β-Galactosidase from Aspergillus niger AHU7120 with Lactose Hydrolytic Activity Under Simulated Gastric Conditions
Saburi Wataru, M. Ueno Hiroshi, Matsui Hirokazu, Mori Haruhide, Journal of Applied Glycoscience, 61, 2, 53, 57, 2014年
Acidophilic β-galactosidase is a useful enzyme as digestive supplement used to alleviate symptoms of lactose intolerance. Aspergilli are the source of several acidophilic β-galactosidases that retain enzymatic activity under gastric conditions. In this study, we investigated the extracellular acidophilic β-galactosidase activity of six Aspergillus niger strains, AHU7104, AHU7120, AHU7217, AHU7294, AHU7295 and AHU7296; A. niger AHU7120 was selected as an enzyme source. β-Galactosidase from A. niger AHU7120 (AnBGal) was purified from culture supernatant. Its N-terminal sequence was identical to that of An01g12150, which belongs to the glycoside hydrolase family 35, from A. niger CBS 513.88. The DNA sequence of AnBGal was identical to An01g12150. Recombinant AnBGal (rAnBGal) harboring yeast α-factor signal sequence was expressed in Pichia pastoris, and 21.9 mg of purified rAnBGal with 129 U/mg of enzyme activity was isolated from 200 mL of culture supernatant. Native and recombinant AnBGal enzymes showed similar pH optima, pH stability, and kinetics for p-nitrophenyl β-D-galactopyranoside and lactose; rAnBGal showed slightly lower thermal stability than the native enzyme. Lactose in milk was rapidly degraded by rAnBGal at higher pH values (range, 2.0‒3.5), consistent with the pH optimum of AnBGal. We estimated that 3.5 μM AnBGal may degrade ≥ 66% of lactose before gastric half-emptying of ingested milk. These data indicate that AnBGal may help alleviate symptoms of lactose intolerance., The Japanese Society of Applied Glycoscience, 英語 - Colorimetric Quantification of β-(1→4)-Mannobiose and 4-O-β-D-Mannosyl-D-glucose
Jaito Nongluck, Saburi Wataru, Muto Hirohiko, Matsui Hirokazu, Mori Haruhide, Journal of Applied Glycoscience, 61, 4, 117, 119, 2014年
Spectrophotometric quantification method of carbohydrates is useful for processing multiple samples. In this study, we established colorimetric quantification for 4-O-β-D-mannosyl-D-glucose (Man-Glc) and β-(1→4)-mannobiose (Man2). For quantification of Man-Glc, phosphorolysis of Man-Glc catalyzed by 4-O-β-D-mannosyl-D-glucose phosphorylase (MGP) was coupled with quantification of D-glucose by the glucose oxidase-peroxidase method. In addition to MGP, cellobiose 2-epimerase (CE) was added for quantification of Man2. In both quantifications, a good linear relationship was obtained between A505 and the sample concentration (0-0.5 mM). The A505 values obtained at various concentrations of Man2 and Man-Glc were almost identical to those with equivalent D-glucose concentrations. Kinetic parameters of Ruminococcus albus and Rhodothermus marinus CEs for the epimerization of Man2 were determined using the quantification method for Man-Glc. Both enzymes showed 5-15-fold higher kcat/Km values than those for cellobiose and lactose, which supports the prediction that these enzymes utilize Man2 as a substrate in the β-mannan metabolic pathway., The Japanese Society of Applied Glycoscience, 英語 - Acidophilic β-Galactosidase from Aspergillus niger AHU7120 with Lactose Hydrolytic Activity Under Simulated Gastric Conditions
Saburi Wataru, Ueno Hiroshi M, Matui Hirokazu, Journal of applied glycoscience, 61, 2, 53, 57, 2014年
Japanese Society of Applied Glycoscience, 英語 - シロイヌナズナβ‐グルコシダーゼ様タンパク質の生化学的機能解析
谷口沙希, 佐分利亘, 松浦英幸, 今井亮三, 松井博和, 森春英, 日本農芸化学会北海道支部講演会講演要旨, 2013, 36, 2013年11月27日
日本語 - Gluconobacter oxydansが産生する2つのデキストラン合成酵素の同一性に関する解析
貞廣樹里, 森春英, 佐分利亘, 奥山正幸, 木村淳夫, 日本農芸化学会北海道支部講演会講演要旨, 2013, 17, 2013年11月27日
日本語 - イネ胚乳ADP‐グルコースピロホスホリラーゼの酵素化学的諸性質
石塚佐都子, 和久田真司, 佐分利亘, 今井亮三, 森春英, 日本農芸化学会北海道支部講演会講演要旨, 2013, 23, 2013年11月27日
日本語 - シロイヌナズナβ‐グルコシダーゼ様タンパク質の生化学的機能解析
谷口沙希, 佐分利亘, 松浦英幸, 今井亮三, 松井博和, 森春英, 日本農芸化学会北海道支部講演会講演要旨, 2013, 23, 2013年11月27日
日本語 - Cellvibrio vulgaris NCIMB8633のマンナン代謝オペロンの機能解析
田中佑果, 佐分利亘, 森春英, 日本農芸化学会北海道支部講演会講演要旨, 2013, 25, 2013年11月27日
日本語 - Ap-12 セロビオース2-エピメラーゼの異性化反応機構の解明(セルラーゼ,一般講演,日本応用糖質科学会平成25年度大会(第62回))
藤原 孝彰, 佐分利 亘, 松井 博和, 森 春英, 田中 勲, 姚 閔, 応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌, 3, 3, B30, 2013年08月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - Ca-1 Halomonas sp. H11株由来α-グルコシダーゼの一価陽イオンによる活性化機構の解析(α-グルコシダーゼ・その他の糖質関連酵素1,一般講演,日本応用糖質科学会平成25年度大会(第62回))
城戸 悠輔, 佐分利 亘, 小島 晃代, 松井 博和, 森 春英, 応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌, 3, 3, B37, 2013年08月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - Ca-4 Bacillus sp. AAH-31株由来α-アミラーゼの一次構造の解析とN末端ドメインの機能解析(α-グルコシダーゼ・その他の糖質関連酵素1,一般講演,日本応用糖質科学会平成25年度大会(第62回))
佐分利 亘, 森本 奈保喜, 向井 惇, Kim Dae Hoon, 竹花 稔彦, 小池 誠治, 松井 博和, 森 春英, 応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌, 3, 3, B38, 2013年08月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - Halomonas sp.H11株由来α‐グルコシダーゼの一価陽イオンによる活性化機構の解析
城戸悠輔, 佐分利亘, 小島晃代, 松井博和, 森春英, 応用糖質科学, 3, 3, 37, 2013年08月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - Bacillus sp.AAH‐31株由来α‐アミラーゼの一次構造の解析とN末端ドメインの機能解析
佐分利亘, 森本奈保喜, 向井惇, KIM Dae Hoon, 竹花稔彦, 小池誠治, 松井博和, 森春英, 応用糖質科学, 3, 3, 38, 2013年08月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - セロビオース2‐エピメラーゼの異性化反応機構の解明
藤原孝彰, 佐分利亘, 松井博和, 森春英, 田中勲, 姚閔, 応用糖質科学, 3, 3, 30, 2013年08月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - 低温馴化により誘導される植物ディフェンシンTAD1はコムギの雪腐病抵抗性に関与する
梅木菜月, 梅木菜月, 小野瑞穂, 小野瑞穂, 藤岡真理, 植原愛, 宇梶慎子, 安倍史高, 佐々木健太郎, 佐分利亘, 松井博和, 今井亮三, 日本植物細胞分子生物学会大会・シンポジウム講演要旨集, 31st, 184, 2013年08月20日
日本語 - 2つのRuminococcus albus NE1由来マンノシルグルコースホスホリラーゼアイソザイムの生化学的機能解析
佐分利亘, 飯島藤十郎記念食品科学振興財団年報, 28, 299, 2013年08月
日本語 - セロビオース2‐エピメラーゼを用いたエピラクトースの実用的酵素合成法の開発
佐分利亘, 小島晃代, 佐藤央基, 田口秀典, 森春英, 松井博和, 応用糖質科学, 3, 2, 137, 142, 2013年05月20日
セロビオース2-エピメラーゼ(CE)は,セロビオースやラクトースなどβ-1,4結合からなるオリゴ糖の還元末端のグルコース残基をマンノース残基に可逆的に異性化する。CEをラクトースに作用させて得られるエピラクトース(4-O-β-D-ガラクトシル-D-マンノース)は優れた腸内細菌叢改善効果を有し,新たな食品素材として有望である。本研究では,CEを用いたエピラクトースの実用的合成法の確立を目的とした。Ruminococcus albus由来CEのアミノ酸配列を基に配列類似性検索を行い,大規模培養が可能な好気性細菌よりCEホモログを探索した。見出されたCEのうちRhodothermus marinus由来酵素(RmCE)は耐熱性に優れ,エピラクトースの工業的製造に適した特性を備えていた。固定化RmCEによる連続反応では,遊離酵素よりも少ない酵素量でエピラクトースを合成可能なことが示された。反応液を濃縮してラクトースを結晶化,除去した後,樹脂分画もしくは結晶化を行うことでCE反応液からエピラクトースを約90%の純度に精製した。, 日本応用糖質科学会, 日本語 - セロビオース2-エピメラーゼを用いたエピラクトースの実用的酵素合成法の開発
佐分 利亘, 小島 晃代, 佐藤 央基, 田口 秀典, 森 春英, 松井 博和, 応用糖質科学, 3, 2, 137, 141, 2013年05月
セロビオース2-エピメラーゼ(CE)は，セロビオースやラクトースなどβ-1，4結合からなるオリゴ糖の還元末端のグルコース残基をマンノース残基に可逆的に異性化する。CEをラクトースに作用させて得られるエピラクトース(4-O-β-D-ガラクトシル-D-マンノース)は優れた腸内細菌叢改善効果を有し，新たな食品素材として有望である。本研究では，CEを用いたエピラクトースの実用的合成法の確立を目的とした。Ruminococcus albus由来CEのアミノ酸配列を基に配列類似性検索を行い，大規模培養が可能な好気性細菌よりCEホモログを探索した。見出されたCEのうちRhodothermus marinus由来酵素(RmCE)は耐熱性に優れ，エピラクトースの工業的製造に適した特性を備えていた。固定化RmCEによる連続反応では，遊離酵素よりも少ない酵素量でエピラクトースを合成可能なことが示された。反応液を濃縮してラクトースを結晶化，除去した後，樹脂分画もしくは結晶化を行うことでCE反応液からエピラクトースを約90%の純度に精製した。, 日本応用糖質科学会, 日本語 - イネ由来ツベロン酸β‐グルコシドグルコシダーゼのアグリコン認識メカニズムの解析
姫野奈美, 佐分利亘, 武田遼介, 和久田真司, 松浦英幸, 鍋田憲助, 森春英, 今井亮三, 松井博和, 日本農芸化学会大会講演要旨集(Web), 2013, 3C16A13 (WEB ONLY), 2013年03月05日
日本語 - シロイヌナズナにおけるCYP94B2の機能解析
天野就基, 北岡直樹, 川出洋, 谷口沙希, 佐分利亘, 松井博和, 松浦英幸, 日本農芸化学会大会講演要旨集(Web), 2013, 4A44A10 (WEB ONLY), 2013年03月05日
日本語 - デキストラン合成酵素dextran dextrinaseの触媒残基およびその機能の決定
貞廣樹里, 森春英, 佐分利亘, 奥山正幸, 木村淳夫, 日本農芸化学会大会講演要旨集(Web), 2013, 2C16A12 (WEB ONLY), 2013年03月05日
日本語 - イネ由来ツベロン酸β‐グルコシドグルコシダーゼアイソザイム1の機能解析
武田遼介, 姫野奈美, 佐分利亘, 和久田真司, 森春英, 松浦英幸, 鍋田憲助, 今井亮三, 松井博和, 日本農芸化学会大会講演要旨集(Web), 2013, 3C16A12 (WEB ONLY), 2013年03月05日
日本語 - Halomonas sp.H11株由来α‐グルコシダーゼ組換え酵素の大腸菌による生産と諸性質
城戸悠輔, 佐分利亘, 小島晃代, 森春英, 松井博和, 日本農芸化学会大会講演要旨集(Web), 2013, 3C16A01 (WEB ONLY), 2013年03月05日
日本語 - Bacillus sp.AAH‐31株由来耐熱性アルカリα‐アミラーゼの高機能化に関する研究
玉村尚也, 向井惇, 森本奈保喜, 竹花稔彦, 佐分利亘, 森春英, 小池誠治, 松井博和, 日本農芸化学会北海道支部講演会講演要旨, 2012, 24, 2012年11月01日
日本語 - ツベロン酸グルコシド加水分解酵素の基質認識機構の解明
姫野奈美, 和久田真司, 武田遼介, 佐分利亘, 森春英, 松浦英幸, 鍋田憲助, 今井亮三, 松井博和, 日本農芸化学会北海道支部講演会講演要旨, 2012, 24, 2012年11月01日
日本語 - 組換えツベロン酸グルコシドグルコシダーゼの酵素化学的諸性質の解析
武田遼介, 姫野奈美, 佐分利亘, 和久田真司, 森春英, 松浦英幸, 鍋田憲助, 今井亮三, 松井博和, 日本農芸化学会北海道支部講演会講演要旨, 2012, 23, 2012年11月01日
日本語 - イネの傷害時のSAGをdonorとしたTAに対する糖転移反応
竹松知紀, 宮澤吉郎, 瀬戸義哉, 和久田真司, 佐分利亘, 鍋田憲助, 松井博和, 松浦英幸, 日本農芸化学会北海道支部講演会講演要旨, 2012, 15, 2012年11月01日
日本語 - Bp1-10 cellobiose phosphorylaseのepilactose phosphorylaseへの改変(ホスホリラーゼおよび関連酵素,一般講演,日本応用糖質科学会平成24年度大会(第61回))
羽村 健, 佐分 利亘, 森 春英, 松井 博和, 応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌, 2, 3, B37, 2012年08月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - Bp1-11 シロイヌナズナADP-glucose pyrophosphorylase遺伝子の発現制御因子の解析(ホスホリラーゼおよび関連酵素,一般講演,日本応用糖質科学会平成24年度大会(第61回))
石塚 佐都子, 和久田 真司, 佐分 利亘, 今井 亮三, 松井 博和, 応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌, 2, 3, B38, 2012年08月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - Bp1-12 Ruminococcus albus NE1株由来マンノシルグルコースホスホリラーゼ(RaMP1)の一般酸触媒残基の解析(ホスホリラーゼおよび関連酵素,一般講演,日本応用糖質科学会平成24年度大会(第61回))
尾高 伶, 佐分 利亘, 川原 良介, 森 春英, 松井 博和, 応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌, 2, 3, B38, 2012年08月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - Bp1-13 Ruminococcus albus由来セロデキストリンホスホリラーゼの諸性質とリン酸結合部位の解析(ホスホリラーゼおよび関連酵素,一般講演,日本応用糖質科学会平成24年度大会(第61回))
澤野 達也, 佐分 利亘, 森 春英, 松井 博和, 応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌, 2, 3, B38, 2012年08月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - Ba2-8 Ruminococcus albus由来セロビオース2-エピメラーゼ(RaCE)のX線結晶構造解析(バイオマス関連酵素(キチナーゼ・キトサナーゼ他),一般講演,日本応用糖質科学会平成24年度大会(第61回))
藤原 孝彰, 佐分 利亘, 井上 聡太, 森 春英, 松井 博和, 姚 閔, 田中 勲, 応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌, 2, 3, B53, 2012年08月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - S3-4 セロビオース2-エピメラーゼを用いたエピラクトースの実用的酵素合成法の開発(応用糖質科学シンポジウム(旧糖質関連酵素化学シンポジウム),日本応用糖質科学会平成24年度大会(第61回))
佐分 利亘, 小島 晃代, 佐藤 央基, 田口 秀典, 森 春英, 松井 博和, 応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌, 2, 3, B58, 2012年08月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - Ruminococcus albus由来セロビオース 2‐エピメラーゼ(RaCE)のX線結晶構造解析
藤原孝彰, 佐分利亘, 井上聡太, 森春英, 松井博和, 姚閔, 田中勲, 応用糖質科学, 2, 3, (53), 2012年08月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - シロイヌナズナADP‐glucose pyrophosphorylase遺伝子の発現制御因子の解析
石塚佐都子, 和久田真司, 佐分利亘, 今井亮三, 松井博和, 応用糖質科学, 2, 3, (38), 2012年08月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - cellobiose phosphorylaseのepilactose phosphorylaseへの改変
羽村健, 佐分利亘, 森春英, 松井博和, 応用糖質科学, 2, 3, (37), 2012年08月20日
日本語 - セロビオース2‐エピメラーゼを用いたエピラクトースの実用的酵素合成法の開発
佐分利亘, 小島晃代, 佐藤央基, 田口秀典, 森春英, 松井博和, 応用糖質科学, 2, 3, (58), 2012年08月20日
日本語 - Ruminococcus albus由来セロデキストリンホスホリラーゼの諸性質とリン酸結合部位の解析
澤野達也, 佐分利亘, 森春英, 松井博和, 応用糖質科学, 2, 3, (38), 2012年08月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - Ruminococcus albus NE1株由来マンノシルグルコースホスホリラーゼ(RaMP1)の一般酸触媒残基の解析
尾高伶, 佐分利亘, 川原良介, 森春英, 松井博和, 応用糖質科学, 2, 3, (38), 2012年08月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - イネのストレス応答とトレハロース代謝
藪内威志, 島周平, 佐分利亘, 松井博和, 今井亮三, 日本農芸化学会大会講演要旨集(Web), 2012, 2A30A06 (WEB ONLY), 2012年03月05日
日本語 - 固定化セロビオース2‐エピメラーゼによるエピラクトースの合成
佐藤央基, 佐分利亘, 小島晃代, 田口秀典, 森春英, 松井博和, 日本農芸化学会大会講演要旨集(Web), 2012, 4C10A04 (WEB ONLY), 2012年03月05日
日本語 - シロイヌナズナ由来シトクロムP450 CYP94C1の機能解析
谷口沙希, 和久田真司, 北岡直樹, 佐分利亘, 川出洋, 松浦英幸, 鍋田憲助, 今井亮三, 松井博和, 日本農芸化学会大会講演要旨集(Web), 2012, 3A30P18 (WEB ONLY), 2012年03月05日
日本語 - Ruminococcus albus NE1株由来cellobiose phosphorylaseのアクセプター特異性の改変
羽村健, 佐分利亘, 森本奈保喜, 森春英, 松井博和, 日本農芸化学会大会講演要旨集(Web), 2012, 2C10P21 (WEB ONLY), 2012年03月05日
日本語 - 嫌気性ルーメン細菌Ruminococcus albus由来セロビオース 2‐エピメラーゼの立体構造解析
藤原孝彰, 佐分利亘, 松井博和, 姚閔, 田中勲, PFシンポジウム要旨集, 29th, 30, 2012年
日本語 - エピラクトースの酵素合成と機能
佐分 利亘, 田口 秀典, 鈴木 卓弥, 応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌 = Bulletin of applied glycoscience, 1, 4, 291, 295, 2011年11月20日
エピラクトース(4-O-β-D-ガラクトシル-D-マンノース)は,加熱牛乳中に微量存在する希少糖である。ラクトースのアルカリ異性化やβ-ガラクトシダーゼによる糖転移反応により本糖質を合成可能であることが示されていたが,効率の低さや基質のコストの高さから,生理機能解析を実施できるほど大量の高純度エピラクトースを合成することは困難であった。しかし,セロビオース2-エピメラーゼ(CE)を用いることによりラクトースからエピラクトースを効率的に合成可能であることが見出され,当該酵素反応液からのエピラクトースの精製法が開発された。このことからエピラクトースの生理機能解析が比較的容易となり,様々な有益な生理機能が明らかにされてきた。本稿では,セロビオース2-エピメラーゼを用いたエピラクトースの効率的合成方法ならびに生理機能について概説する。, 日本応用糖質科学会, 日本語 - オリゴ糖研究の最前線 その1 機能性オリゴ糖の研究 エピラクトースの酵素合成と機能
佐分利亘, 田口秀典, 鈴木卓弥, 応用糖質科学, 1, 4, 291, 295, 2011年11月20日
エピラクトース(4-O-β-D-ガラクトシル-D-マンノース)は,加熱牛乳中に微量存在する希少糖である。ラクトースのアルカリ異性化やβ-ガラクトシダーゼによる糖転移反応により本糖質を合成可能であることが示されていたが,効率の低さや基質のコストの高さから,生理機能解析を実施できるほど大量の高純度エピラクトースを合成することは困難であった。しかし,セロビオース2-エピメラーゼ(CE)を用いることによりラクトースからエピラクトースを効率的に合成可能であることが見出され,当該酵素反応液からのエピラクトースの精製法が開発された。このことからエピラクトースの生理機能解析が比較的容易となり,様々な有益な生理機能が明らかにされてきた。本稿では,セロビオース2-エピメラーゼを用いたエピラクトースの効率的合成方法ならびに生理機能について概説する。, 日本応用糖質科学会, 日本語 - エピラクトースの酵素合成と機能
佐分 利亘, 田口 秀典, 鈴木 卓弥, 応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌 = Bulletin of applied glycoscience, 1, 4, 291, 295, 2011年11月20日
エピラクトース(4-O-β-D-ガラクトシル-D-マンノース)は,加熱牛乳中に微量存在する希少糖である。ラクトースのアルカリ異性化やβ-ガラクトシダーゼによる糖転移反応により本糖質を合成可能であることが示されていたが,効率の低さや基質のコストの高さから,生理機能解析を実施できるほど大量の高純度エピラクトースを合成することは困難であった。しかし,セロビオース2-エピメラーゼ(CE)を用いることによりラクトースからエピラクトースを効率的に合成可能であることが見出され,当該酵素反応液からのエピラクトースの精製法が開発された。このことからエピラクトースの生理機能解析が比較的容易となり,様々な有益な生理機能が明らかにされてきた。本稿では,セロビオース2-エピメラーゼを用いたエピラクトースの効率的合成方法ならびに生理機能について概説する。, 日本応用糖質科学会, 日本語 - Biochemical Characterization of a Thermophilic Cellobiose 2-Epimerase from a Thermohalophilic Bacterium, Rhodothermus marinus JCM9785
Teruyo Ojima, Wataru Saburi, Hiroki Sato, Takeshi Yamamoto, Haruhide Mori, Hirokazu Matsui, BIOSCIENCE BIOTECHNOLOGY AND BIOCHEMISTRY, 75, 11, 2162, 2168, 2011年11月
英語 - Physiological and Biochemical Characterization of Three Nucleoside Diphosphate Kinase Isozymes from Rice (Oryza sativa L.)
Akihiko Kihara, Wataru Saburi, Shinji Wakuta, Myung-Hee Kim, Shigeki Hamada, Hiroyuki Ito, Ryozo Imai, Hirokazu Matsui, BIOSCIENCE BIOTECHNOLOGY AND BIOCHEMISTRY, 75, 9, 1740, 1745, 2011年09月
英語 - 好塩細菌Halomonas sp.H11株より単離した新規α‐グルコシダーゼの諸性質
小島晃代, 佐分利亘, 山本健, 工藤俊章, 日本生物工学会大会講演要旨集, 63rd, 138, 138, 2011年08月25日
日本生物工学会, 日本語 - 2Dp12 好塩細菌Halomonas sp. H11株より単離した新規α-グルコシダーゼの諸性質(酵素学・酵素工学,一般講演)
小島 晃代, 佐分利 亘, 山本 健, 工藤 俊章, 日本生物工学会大会講演要旨集, 0, 63, 138, 138, 2011年08月25日
公益社団法人日本生物工学会, 日本語 - Calcium Ion-Dependent Increase in Thermostability of Dextran Glucosidase from Streptococcus mutans
Momoko Kobayashi, Hironori Hondoh, Haruhide Mori, Wataru Saburi, Masayuki Okuyama, Atsuo Kimura, BIOSCIENCE BIOTECHNOLOGY AND BIOCHEMISTRY, 75, 8, 1557, 1563, 2011年08月
英語 - Ochromonas danica由来β‐1,3‐グルカンホスホリラーゼのクローニングと機能解析
磯野直人, 柳原和典, 山本豊, 十万真奈, 佐分利亘, 山本健, 小林裕子, 小林一成, 久松眞, 応用糖質科学, 1, 3, (57), 2011年07月20日
日本語 - Ruminococcus albus NE1におけるマンナン資化性の解析とβ‐1,4‐マンナナーゼの同定
阪本安希, 中島碧, 田口秀典, 佐分利亘, 森春英, 松井博和, 応用糖質科学, 1, 3, (50), 2011年07月20日
日本語 - Ruminococcus albus NE1株由来cellobiose phosphorylaseの諸性質の解析
羽村健, 阿部正太郎, 河内慎平, 森本奈保喜, 佐分利亘, 森春英, 松井博和, 応用糖質科学, 1, 3, (51), 2011年07月20日
日本語 - Pichia pastorisによる組換えツベロン酸グルコシドβ‐glucosidaseの諸性質の解明
姫野奈美, 和久田真司, 佐分利亘, 森春英, 松浦英幸, 鍋田憲助, 今井亮三, 松井博和, 応用糖質科学, 1, 3, (47), 2011年07月20日
日本語 - 好熱性好気性細菌Rhodothermus marinus JCM 9785株より単離したcellobiose 2‐epimeraseの諸性質
小島晃代, 佐分利亘, 山本健, 佐藤央基, 森春英, 松井博和, 応用糖質科学, 1, 3, (51), 2011年07月20日
日本語 - Ruminococcus albus NE1株由来マンノシルグルコース加リン酸分解酵素の諸性質と一次構造の解析
川原良介, 伊藤重陽, 田口秀典, 佐分利亘, 森春英, 松井博和, 応用糖質科学, 1, 3, (51), 2011年07月20日
日本語 - イネ培養細胞を用いたスクロース誘導性タンパク質の網羅的解析
アンストーン ワスサン, 佐分利亘, 和久田真司, 濱田茂樹, 伊藤浩之, 森春英, 今井亮三, 松井博和, 応用糖質科学, 1, 3, (34), 2011年07月20日
日本語 - 難消化性二糖エピラクトースによるカルシウム吸収・鉄吸収,骨形成,貧血の回復作用に関する研究―胃切除ラットにおけるフラクトオリゴ糖との比較検討―
田口秀典, 鈴木卓弥, 西向めぐみ, 横嶋悟, 小島晃代, 山本健, 佐分利亘, 原博, 金田勇, 小野寺秀一, 塩見徳夫, 松井博和, 応用糖質科学, 1, 3, (43), 2011年07月20日
日本語 - Ruminococcus albus NE1のマンナン代謝の解析
中島碧, 伊藤重陽, 田口秀典, 佐分利亘, 森春英, 松井博和, 日本農芸化学会大会講演要旨集, 2011, 106, 2011年03月05日
日本語 - Ruminococcus albus NE1由来cellobiose phosphorylaseの一次構造の解析と大腸菌による組換え酵素の諸性質
阿部正太郎, 羽村健, 河内慎平, 伊藤重陽, 森本奈保喜, 佐分利亘, 森春英, 松井博和, 日本農芸化学会大会講演要旨集, 2011, 44, 2011年03月05日
日本語 - イネ培養細胞におけるスクロース誘導性タンパク質の解析
アンストーン ワスサン, 和久田真司, 濱田茂樹, 伊藤浩之, 佐分利亘, 今井亮三, 松井博和, 日本農芸化学会大会講演要旨集, 2011, 13, 2011年03月05日
日本語 - イネNucleoside diphosphate kinaseの生理的諸性質の解析
木原明彦, 和久田真司, 金明姫, 濱田茂樹, 佐分利亘, 伊藤浩之, 今井亮三, 松井博和, 日本農芸化学会大会講演要旨集, 2011, 14, 2011年03月05日
日本語 - イネの病傷害ストレス応答におけるOsJAR1およびOsJAR2の機能
鈴木絵里香, 和久田真司, 佐分利亘, 松浦英幸, 鍋田憲助, 今井亮三, 松井博和, 日本農芸化学会北海道支部講演会講演要旨, 2011, 5, 2011年
日本語 - Ruminococcus albus NE1株由来cellodextrin phosphorylaseの酵素化学的諸性質
澤野達也, 佐分利亘, 森本奈保喜, 森春英, 松井博和, 日本農芸化学会北海道支部講演会講演要旨, 2011, 14, 2011年
日本語 - 中等度好熱性アルカリ細菌Bacillus sp.AAH‐31株由来アミラーゼ遺伝子のクローニングおよび大腸菌組換え酵素の諸性質
向井惇, 金大勳, 森本奈保喜, 竹花稔彦, 佐分利亘, 森春英, 小池誠治, 松井博和, 日本農芸化学会北海道支部講演会講演要旨, 2011, 14, 2011年
日本語 - Rhodothermus marinus JCM9785由来耐熱性セロビオース2‐エピメラーゼのエピラクトースの効率的合成への応用
佐藤央基, 佐分利亘, 小島晃代, 田口秀典, 森春英, 松井博和, 日本農芸化学会北海道支部講演会講演要旨, 2011, 7, 2011年
日本語 - α-グルコシダーゼとシクロデキストリン生成酵素の共反応による非還元性末端にα-1,3結合およびα-1,6結合したグルコシル基を有する二つのα-1,4-グルカンの生成
佐分利 亘, 佐分利 上村, 飯塚 貴久, 山本 健, 高田 正保, Journal of applied glycoscience, 57, 4, 231, 237, 2010年10月20日
イソマルトオリゴ糖やニゲロオリゴ糖などのオリゴ糖は，α-amylaseやβ-amylaseによりmaltoseやmaltotrioseまで澱粉を加水分解し，α-glucosidaseによる糖転移反応を行うことにより製造される．このため，当該シラップは，2-4糖の比較的低分子糖を主成分とする．一方，高分子糖は低甘味であり飲食物のコク味やボディー感増強効果がある他，低浸透圧のため小腸への刺激が少なくエネルギー給源として優れる．本研究では，シクロデキストリン生成酵素(CGTase)とα-glucosidaseを枝切り酵素存在下で同時に澱粉へ作用させることにより，β-amylase耐性グルカンが得られることを見出した．β-amylaseによる作用をほとんど受けないことから本グルカンは非還元性末端あるいはその近傍にα-1,4結合以外の結合が導入されたと考えられた．本グルカンの重合度は，α-glucosidaseの鎖長特異性に依存し，高分子基質に高活性を示す <i>Acremonium strictum</i> 酵素(ASG)を使用した場合は長鎖(重合度6-10)の，低分子基質へ高い特異性を有する <i>Aspergillus niger</i> 酵素(ANG)を使用した場合は短鎖(重合度4-6)の糖が主成分であった(Fig. 2)．得られたグルカンのβ-amylaseによる分解がα-amylaseにより促進されたことから還元性末端部は主にα-1,4-結合からなると考えられた．メチル化分析により，ASGおよびANGを用いて得られたグルカン(それぞれBRGIおよびBRGII)はそれぞれα-1,3結合およびα-1,6結合が非還元性末端あるいはその近傍に導入されたことが明らかとなった．BRGI含有シラップを調製し，澱粉加水分解物からなるコーンシラップと室温保存1カ月での外観を比較したところ，BRGI含有シラップはコーンシラップと異なり清澄性を保ち，高い耐老化性を示した(Fig. 8)., 日本応用糖質科学会, 英語 - Practical Preparation of Epilactose Produced with Cellobiose 2-Epimerase from Ruminococcus albus NE1
Wataru Saburi, Takeshi Yamamoto, Hidenori Taguchi, Shigeki Hamada, Hirokazu Matsui, BIOSCIENCE BIOTECHNOLOGY AND BIOCHEMISTRY, 74, 8, 1736, 1737, 2010年08月
英語 - 各種二重変異米澱粉の特性の評価
安東竜一, 佐分利亘, 高田正保, 中村保典, 藤田直子, J Appl Glycosci, 57, Suppl., 31, 22, 2010年07月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - 難消化性二糖エピラクトースによる小腸カルシウム吸収促進作用機序に関する研究
鈴木卓弥, 西向めぐみ, 武知真希, 田口秀典, 濱田茂樹, 佐分利亘, 山本健, 伊藤進, 原博, 松井博和, J Appl Glycosci, 57, Suppl., 48, 91, 2010年07月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - 難消化性二糖エピラクトースによるカルシウム吸収・鉄吸収,骨形成,貧血の回復作用に関する研究~胃切除ラットでの評価
鈴木卓弥, 西向めぐみ, 田口秀典, 濱田茂樹, 佐分利亘, 山本健, 伊藤進, 原博, 松井博和, J Appl Glycosci, 57, Suppl., 48, 2010年07月20日
日本語 - ヒトおよびラット小腸粘膜ならびにヒト唾液消化酵素を用いた新規糖質・メガロ糖の消化性の検討
高見昌之, 田辺賢一, 中村禎子, 佐分利亘, 奥恒行, 日本栄養・食糧学会大会講演要旨集, 64th, 84, 2010年05月01日
日本語 - Bacillus clarkii 7364 株が生産する γ-Cyclodextrin に高い特異性を有する二つの酵素
中川 佳紀, 佐分利 亘, 山本 健, 高田 正保, 小川 浩一, 山本 幹男, 秦田 勇二, 中村 信之, 掘越 弘毅, Journal of applied glycoscience, 57, 2, 121, 129, 2010年04月20日
好アルカリ性細菌<i>Bacillus clarkii</i> 7364株が菌体外に分泌するcyclodextrin glucanotransferase (CGTase)は，澱粉を基質としたとき，γ-cyclodextrin (γ-CD)を優先的に生成するγ-CGTaseである．また，本酵素(Cgt)をコードする遺伝子の約200 bases下流には，cyclodextrinase (Cda)をコードする遺伝子が存在する．本研究では，CgtおよびCdaの機能解析を行った．Cgtは至適pH 10.0の好アルカリ酵素であった．Cgtを1%(w/v)可溶性澱粉に作用させると，CD組成はα-CD<0.1%，β-CD 3.5%およびγ-CD 27.5%となった．Cgtおよび他起源のCGTaseのアミノ酸配列を比較したところ，Cgtではサブサイト+3，+2，-3および-7においてアミノ酸の欠失および相違が認められた．サブサイト+2に位置するAla223を三つの塩基性アミノ酸(His，LysおよびArg)に置換した変異体は，いずれも中性pHでのγ-CD合成比活性が向上した．これは，Ala223の塩基性アミノ酸への置換により，プロトン化した側鎖のアミノ基が基質と相互作用を示すことによるものと推察される．一方，Cdaはγ-CDのみに高い加水分解活性を示すcyclodextrinaseであった．さらに，Cdaはマルトトリオース単位で糖転移させる活性を保持していた．Cdaおよび他起源のCD分解酵素のアミノ酸配列を比較したところ，Cdaでは他起源のCD分解酵素が保持するNドメインが欠失し，C末端側が100アミノ酸以上長かった．CD分解酵素のNドメインは二量体形成に寄与するが，CdaはNドメインを欠失しているにもかかわらず，12量体を形成していた．これらの特徴は他起源のCD分解酵素では認められず，Cdaは新奇なCD分解酵素であることが示唆される．, 日本応用糖質科学会, 英語 - CGTaseとα‐glucosidaseの共反応による新規分岐糖生成反応
佐分利亘, 上村由香里, 飯塚貴久, 山本健, 高田正保, 日本農芸化学会大会講演要旨集, 2010, 23, 2010年03月05日
日本語 - 大腸菌組換えデキストリンデキストラナーゼのオリゴ糖に対する作用と触媒アミノ酸残基の解析
貞廣樹里, 佐分利亘, 森春英, 奥山正幸, 岡田嚴太郎, 木村淳夫, 日本農芸化学会大会講演要旨集, 2010, 22, 2010年03月05日
日本語 - Streptococcus mutans由来dextran glucosidaseの部位特異的変異導入による糖転移活性の改変(2)
中塚大地, 本同宏成, 大塚博昭, 佐分利亘, 森春英, 奥山正幸, 木村淳夫, J Appl Glycosci, 56, Suppl., 37, 2009年07月20日
日本語 - Bacillus clarkii7364株が生産するγ‐cyclodextrinに高い特異性を有する2つの酵素
中川佳紀, 佐分利亘, 山本健, 高田正保, 小川浩一, 山本幹男, 秦田勇二, 中村信之, 掘越弘毅, J Appl Glycosci, 56, Suppl., 61, 2009年07月20日
日本語 - Streptococcus mutans由来dextran glucosidaseの部位特異的変異導入による糖転移活性の改変(1)
本同宏成, 大塚博昭, 中塚大地, 佐分利亘, 森春英, 奥山正幸, 木村淳夫, J Appl Glycosci, 56, Suppl., 37, 33, 2009年07月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - Streptococcus mutans Dextran Glucosidase の基質認識機構
本同 宏成, 大塚 博昭, 佐分利 亘, 森 春英, 奥山 正幸, 木村 淳夫, Journal of applied glycoscience, 56, 2, 111, 117, 2009年04月20日
<i>Streptococcus mutans</i>由来のdextran glucosidase(DGase)は，デキストランやイソマルトオリゴ糖の非還元末端のα-1,6結合を加水分解し，α-glucoseを遊離する保持型酵素である．またDGaseは，一次構造に基づきGH family 13に分類されることや，高い糖転移活性を示すことも明らかとなっている．本研究では，α-1,6結合に特異的に作用するDGaseの基質認識機構をX線結晶構造解析により解明した．X線結晶構造解析の結果，DGaseは(β/α)<sub>8</sub>バレル構造を持ち，その活性部位はポケット状になっていることが明らかとなった．イソマルトトリオース複合体の構造解析より，三つのサブサイト(-1～+2)が確認された．サブサイト-1において基質は多くの水素結合により認識されており，その様式はGH family 13の他の酵素と類似していた．加えてAsp60とArg398が基質のグルコース残基のO4原子と水素結合を形成しており，これらの結合が基質の非還元末端の認識に重要であると考えられる．サブサイト+1では，Lys275とGlu371が基質と水素結合しており，基質のコンフォメーションを制御していた．加えて切断されるα-1,6結合の6位のメチレン基とVal195の間に疎水的相互作用が確認され，これらの残基が基質認識に重要であることが示唆された．, 日本応用糖質科学会, 英語 - Dextran glucosidaseの加水分解および糖転移反応における基質特異性の変換
本同宏成, 大塚博昭, 佐分利亘, 森春英, 奥山正幸, 木村淳夫, J Appl Glycosci, 55, Suppl., 62, 148, 2008年07月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - α‐1,4グルコシド結合特異的なdextran glucosidase変異体の基質認識機構
本同宏成, 大塚博昭, 佐分利亘, 森春英, 奥山正幸, 木村淳夫, J Appl Glycosci, 55, Suppl., 49, 99, 2008年07月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - γ‐CDに高い特異性を有するBacillus clarkii7364由来cyclodextrinaseの諸性質
中川佳紀, 佐分利亘, 高田正保, 秦田勇二, 掘越弘毅, J Appl Glycosci, 55, Suppl., 49, 2008年07月20日
日本語 - デキストリンデキストラナーゼ遺伝子の異宿主発現および組換え酵素の解析
貞廣樹里, 佐分利亘, 森春英, 奥山正幸, 岡田嚴太郎, 木村淳夫, J Appl Glycosci, 55, Suppl., 49, 100, 2008年07月20日
日本応用糖質科学会, 日本語 - アクセプタ結合部位への変異導入によるdextran glucosidaseの糖転移生成物の制御
本同宏成, 大塚博昭, 佐分利亘, 森春英, 奥山正幸, 木村淳夫, 日本農芸化学会大会講演要旨集, 2008, 191, 2008年03月05日
日本語 - デキストリンデキストラナーゼ遺伝子の異種宿主発現および組換え酵素の解析
貞廣 樹里, 佐分利 亘, 森 春英, 奥山 正幸, 岡田 嚴太郎, 木村 淳夫, Journal of Applied Glycoscience Supplement, 2008, 0, 100, 100, 2008年
日本応用糖質科学会, 日本語 - γ-CDに高い特異性を有するBacillus clarkii 7364由来cyclodextrinaseの諸性質
中川 佳紀, 佐分利 亘, 高田 正保, 秦田 勇二, 掘越 弘毅, Journal of Applied Glycoscience Supplement, 2008, 0, 98, 98, 2008年
日本応用糖質科学会, 日本語 - デキストリンデキストラナーゼの一次構造決定および組換え酵素の解析
貞廣樹里, 佐分利亘, 森春英, 奥山正幸, 岡田嚴太郎, 木村淳夫, 日本農芸化学会北海道支部・日本土壌肥料学会北海道支部・日本生物工学会北日本支部・日本応用糖質科学会北海道支部・北海道農芸化学協会合同学術講演会講演要旨, 2008, 25, 2008年
日本語 - Streptococcus mutans由来dextran glucosidaseの保存領域IVに存在するAsnの機能解析
大塚博昭, 本同宏成, 佐分利亘, 森春英, 奥山正幸, 木村淳夫, J Appl Glycosci, 54, Suppl., 33, 2007年07月20日
日本語 - Streptococcus mutans由来dextran glucosidase(DGase)の基質特異性の変換:α‐1,4結合加水分解酵素への改変
大塚博昭, 佐分利亘, 本同宏成, 森春英, 奥山正幸, 木村淳夫, 日本農芸化学会大会講演要旨集, 2007, 206, 2007年03月05日
日本語 - Streptococcus mutans由来Dextran Glucosidase M198Wの結晶構造解析
本同宏成, 佐分利亘, 森春英, 奥山正幸, 木村淳夫, 日本農芸化学会北海道支部・日本土壌肥料学会北海道支部・日本生物工学会北日本支部・日本応用糖質科学会北海道支部・北海道農芸化学協会合同学術講演会講演要旨, 2007, 36, 2007年
日本語 - Bacillus subtills 168S由来α‐glucosidase(YugT)の基質特異性に関わるアミノ酸残基の推定
大塚博昭, 佐分利亘, 森春英, 奥山正幸, 木村淳夫, J Appl Glycosci, 53, Suppl., 30, 2006年08月30日
日本語 - Dextran glucosidaseのα‐1,6グルコシド結合認識機構
本同宏成, 佐分利亘, 奥山正幸, 森春英, 松浦良樹, 木村淳夫, J Appl Glycosci, 53, Suppl., 34, 2006年08月30日
日本語 - Bacillus subtilis168S由来α‐glucosidase YugTの機能解析
大塚博昭, 佐分利亘, 森春英, 奥山正幸, 木村淳夫, 日本農芸化学会大会講演要旨集, 2006, 154, 2006年03月05日
日本語 - Bacillus subtilis 168S由来β‐N‐acetylglucosaminidase(YbbD)の求核触媒残基を酸素酸化型システインに置換した変異酵素の性質
須賀原千佳, 佐分利亘, 奥山正幸, 森春英, 木村淳夫, 日本農芸化学会大会講演要旨集, 2006, 306, 2006年03月05日
日本語 - Acetobacter capsulatum由来dextrin dextranaseの一次構造の解析
佐分利亘, 奥山正幸, 森春英, 岡田厳太郎, 木村淳夫, J Appl Glycosci, 52, Suppl., 26, 2005年07月20日
日本語 - Bacillus subtilis 168S由来YbbDはβ‐N‐acetylglucosaminidase活性を示す。
須賀原千佳, 佐分利亘, 奥山正幸, 森春英, 木村淳夫, 日本農芸化学会大会講演要旨集, 2005, 196, 2005年03月05日
日本語 - Streptococus mutans由来dextran glucosidaseの基質特異性の改変
佐分利亘, 森春英, 奥山正幸, 木村淳夫, 日本農芸化学会大会講演要旨集, 2005, 26, 2005年03月05日
日本語 - ミツバチα‐グルコシダーゼIIIの蜂蜜生産への適応:Tyr210の高Knへの寄与
岩井岳, 森春英, 佐分利亘, 奥山正幸, 千葉誠哉, 木村淳夫, 日本農芸化学会大会講演要旨集, 2005, 30, 2005年03月05日
日本語 - Streptococcus mutans由来dextran glucosidaseのMet198変異酵素の機能
佐分利亘, 森春英, 大塚博昭, 岩井岳, 奥山正幸, 木村淳夫, 日本農芸化学会北海道支部・日本土壌肥料学会北海道支部・日本生物工学会北日本支部・日本応用糖質科学会北海道支部・北海道農芸化学協会合同学術講演会講演要旨, 2005, 15, 2005年
日本語 - 触媒残基をcysteineに置換したdextran glucosidaseは酸化処理により活性が回復する
佐分利亘, 森春英, 奥山正幸, 木村淳夫, 日本農芸化学会大会講演要旨集, 2004, 255, 2004年03月05日
日本語 - Purification, Characterization, and Sequence Analysis of Two α-Amylase Isoforms from Azuki Bean, Vigna angularis, Showing Different Affinity towards β-Cyclodextrin Sepharose(Biochemistry & Molecular Biology)
MAR San San, MORI Haruhide, LEE Jin-Ha, FUKUDA Kenji, SABURI Wataru, FUKUHARA Arinobu, OKUYAMA Masayuki, CHIBA Seiya, KIMURA Atsuo, Bioscience, biotechnology, and biochemistry, 67, 5, 1080, 93, 2003年05月, ［国際誌］
英語 - Streptococcus mutans由来Dextran glucosidase変異酵素の長鎖基質に対する作用
佐分利亘, 森春英, 奥山正幸, 木村淳夫, 日本農芸化学会大会講演要旨集, 2003, 99, 2003年03月05日
日本語 - Acetobacter capsulatum由来Dextrin Dextranaseの初期反応の解析とその測定法の確立
佐分利亘, 奥山正幸, 森春英, 岡田厳太郎, 千葉誠哉, 木村淳夫, 日本農芸化学会大会講演要旨集, 2002, 35, 2002年03月05日
日本語 - Bacillus subtilis 168Sr α‐glucosidase組換え体の大腸菌での生産
森春英, 佐分利亘, 尾関理香, 水上裕紀子, 木村淳夫, 千葉誠哉, 日本農芸化学会大会講演要旨集, 2002, 126, 2002年03月05日
日本語
共同研究・競争的資金等の研究課題
- 新規オキシリピン生合成経路の解明を目指したゼニゴケの鍵酵素の同定と応用展開
科学研究費助成事業
2023年04月01日 - 2026年03月31日
北岡 直樹, 佐分利 亘
植物オキシリピンの中には植物ホルモンの一種であるジャスモン酸 (JA)類が含まれる。ジャスモン酸類の受容体であるCOI1-JAZのリガンドは、高等植物においてはジャスモン酸イソロイシンである一方、ゼニゴケではジャスモン酸の生合成中間体でもあるdinor-cis-12-ファイトジエン酸 (dn-OPDA)であるということが明らかとなっている。本研究では、ゼニゴケを研究対象とし、苔類における植物オキシリピンの生合成経路と生理作用解明を目指し研究を進めている。
ゼニゴケにおける生合成経路の解析に必要となる重水素標識体を含むゼニゴケのオキシリピン類の標準物質の有機合成を行った。合成したdn-OPDAの重水素標識体を取り込ませたゼニゴケにおいてジャスモン酸の生成を確認した。また、JAの生合成中間体と考えられる化合物をゼニゴケ植物体より検出した。以上結果は、dn-OPDAからJAへの代謝経路をゼニゴケが有していることを示唆する結果である。またOPDAより生合成経路上、下流に位置すると予想される酵素遺伝子の破壊株の作製を行った。
また、ジャスモン酸メチル (MeJA)の重水素標識体を気中より取り込ませたゼニゴケにおいて、JAの生合成が誘導されるという結果を見出した。本研究結果は、ゼニゴケがJAもしくはその代謝物を認識していることを示唆する結果である。
OPDAを基質とする代謝酵素の探索も進めている。ゼニゴケ粗酵素溶液より酵素活性を指標に酵素精製を進めた。部分精製後の酵素溶液をプロテオーム解析に供し、ゼニゴケのOPDA代謝に関わる候補酵素の選抜に成功した。
日本学術振興会, 基盤研究(C), 北海道大学, 23K05047 - ゲノムデザインと自由な書き換えによる高収量コムギの創出
科学研究費助成事業
2021年07月09日 - 2024年03月31日
今井 亮三, 佐分利 亘
日本学術振興会, 挑戦的研究(萌芽), 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構, 21K19127 - 糖質の効率的変換に有用な糖質異性化酵素の構造基盤の解明と機能強化
科学研究費助成事業 基盤研究(C)
2021年04月01日 - 2024年03月31日
佐分利 亘
糖質の高度利用には，希少糖質の効率合成法が必要である．本研究では，微生物の多様な糖質代謝を支える異性化酵素の中でも，セロビオース2-エピメラーゼやマンノースイソメラーゼなど様々な糖質異性化酵素を含む酵素群に注目し，反応特異性を制御する機構の解明と高活性変異酵素の開発を目的とした．セロビオース2-エピメラーぜの中にはエピメラーゼ活性のみを示す酵素 (1機能CE) とエピメラーゼ活性に加えてイソメラーゼ活性を示す酵素 (2機能CE) が存在するが，この特異性の違いを説明する構造は明らかではなかった．そこで，1機能CEと2機能CEの間で構造領域を入れ換えた一連のキメラ酵素を作成した．具体的には，(α/α)6バレルの触媒ドメインを構成するαヘリックス1と2，3と4，5と6，7と8，9と10，11と12について，1機能酵素の構造を2機能酵素に移植した．これら6つのキメラ酵素のうち，最初の3つの変異酵素は活性型酵素として得られた．この機能について解析を進めている．
マンノースエピメラーゼ (ME酵素) については高活性変異酵素の取得のため，ハイスループットスクリーニング系を検討した．本スクリーニング系では，マンノーストランスポーター遺伝子を欠失させることでマンノース資化性を失われた大腸菌を用い，この細胞表層にME酵素を発現させることでマンノース資化性の回復，また，活性に応じた生育速度の増加により高活性変異酵素をスクリーニングすることを計画した．マンノーストランスポーターを構成する3タンパク質全ての遺伝子を欠失させることでマンノース資化性を完全に失わせることができた．この大腸菌変異株をホストとし，氷核タンパク質のNドメインを付加したME酵素を発現させると，ME酵素は外膜画分に生産され，マンノース資化性の回復が確認された．この系を利用して高活性変異酵素をスクリーニングする予定である．
日本学術振興会, 基盤研究(C), 北海道大学, 21K05388 - D-マンノ－ス骨格を持つ糖鎖による免疫・炎症反応制御とその分子基盤の解析
科学研究費助成事業 基盤研究(B)
2019年04月01日 - 2022年03月31日
戸田 雅子, 佐分利 亘, 比能 洋, 新谷 尚弘
真菌類や植物には結合様式の異なる様々なα型とβ型のマンナン（D-マンノ－スを含む多糖類）が含まれる。マンナンは「免疫系に対する機能を持つ食品成分」と注目され、その機能性の科学的解析が求められている。本研究はマンノ－ス骨格を持つ分子の免疫学的な意義を明らかすることを目的とする。また、日本の国菌と言われる「麹菌」を用いてマンノシル化アレルゲンを発現する麹菌を構築し、抗アレルギ－作用を持つマンナン分子の作製を目指す。本年度はまずβ型マンノオリゴ糖の調製を行い、その免疫機能性を解析した。その結果、β-Man-(1→4)-Manやβ-Man-(1→4)-Glc骨格を持つオリゴ糖の中で、β-1,4-マンノビオースがマウス骨髄樹状細胞を高レベルで活性化することが明らかになった。また、α型マンナンをβ-1,4-マンノビオースや他の多糖類と共に樹状細胞を刺激すると、樹状細胞による抗炎症サイトカイン産生が増強されることを見いだした。αマンノオリゴ糖に関しては、α-1,2およびα-1,6結合への伸長方向が任意に制御可能な保護基の組み合わせによるαマンノオリゴ糖の合成ルート構築を実施した。この目的を満たす共通中間体の最適化を行い、中間体を使用することによりそれぞれのα-1,2およびα-1,6結合型の直鎖オリゴ糖をベンジルグリコシド体として調製するルート構築に成功した。マンノシル化アレルゲンを発現する麹菌に関しては、オボアルブミン（OVA：モデルアレルゲン）の cDNAを麹菌グルコアミラーゼglaAの触媒ドメインをコードするDNAの下流に連結し、GlaA-OVA融合タンパク質として麹菌で発現させた。2日間液体培養した培養上清500 µL分をSDS-PAGEに供し、Coomassie Brilliant Blue R-250染色したところ、OVAの発現が確認できたが発現量は低かった。
日本学術振興会, 基盤研究(B), 東北大学, 19H02902 - 糖質の多様化高機能化に向けた酵素法アプローチの新展開
科学研究費助成事業 基盤研究(B)
2018年04月01日 - 2021年03月31日
森 春英, 佐分利 亘
糖質は構成糖と結合様式により顕著な多様性を示す．食品機能性素材やバイオ素材等，素材の潜在的宝箱であり，機能発見と応用利用に向けて，多様性に対応可能な効率的合成手法の確立が必須である．本申請研究は，合成酵素と転移酵素利用を利用した糖質多様化に向けた合成手法の確立を目的としている．
合成酵素利用による糖質合成に関しては，ショ糖からの糖ヌクレオチド合成酵素の高機能化に向けた変異酵素等の解析，および安定的な利用条件について検討を行った．糖供与体基質としてショ糖に依存しない糖ヌクレオチド合成酵素について，利用条件の検討を進めた．本酵素単独での反応による新規オリゴ糖数種の合成も行い，構造決定により新規化合物であることを確認した．反応条件検討により収率向上を図った．
糖転移酵素関連では，TS酵素（N末端側を伸長型酵素）は伸長部分を含めて主要3ドメインにより構成され，各ドメイン単独のタンパク質，ならびに各ドメイン欠失タンパク質を調製・機能解析を行い，各ドメインが有する機能を実験的に明らかにした．マルトオリゴ糖からイソマルトオリゴ糖形成に至る逐次的反応を明らかにした．
糖質の合成に関して，植物において代謝制御物質として機能するトレハロース６-リン酸を，酵素により合成する反応系を確立した．本反応では，マルトオリゴ糖を唯一の炭素源として，3酵素を含むワンポット反応により目的の糖リン酸を合成するものであり，簡便かつ有効な合成系である．
日本学術振興会, 基盤研究(B), 北海道大学, 18H02133 - 微生物が持つ新しい糖質異性化酵素群を活用した糖質変換技術の開発と応用
科学研究費助成事業 基盤研究(C)
2018年04月01日 - 2021年03月31日
佐分利 亘
多様な構造を持つ糖質には様々な優良な機能が知られている。自然界に豊富に存在する糖質は極めて限定的で，豊富な糖質を希少糖質へと変換する技術を開発することで、新しい糖質の応用が拓けると考えられる．本研究では，単糖変換を触媒する異性化酵素であり，グルコースからマンノースへの一段階異性化反応を触媒するマンノース2-エピメラーゼ (ME) について機能・構造を解明すること，ホモログの機能解析を通じて新たな単糖変換酵素を取得することを目的とした。本年度は，MEに特徴的な長いループ構造に注目して3つの細菌に由来するMEホモログの機能を大腸菌組換え酵素を用いて解析し，いずれのホモログにもME活性を認めた。このことから，MEに特徴的な長いループ構造に着目することで精度良くMEを取得できることが示された．また，興味深いことに，これらの基質を検討する中で，ME酵素がキシロースやリキソースなどの単糖にも作用し，エピメラーゼ活性のみならずイソメラーゼ活性も微弱ながら示すことが明らかになった．Runella slithformis由来MEの高活性化変異酵素の取得に先立ち、変異酵素のハイスループットスクリーニング系を検討した。すなわち，96穴プレートを活用した小規模培養系による組換え酵素生産条件，溶菌試薬による酵素抽出条件と無細胞抽出液の酵素活性の評価方法を確立した。単糖にも有意に高いエピメリ化活性を持つMelioribacter roseus由来セロビオース2-エピメラーゼ (CE) について，本酵素に見られたMEに対応する長いループに注目し，この削除変異酵素を調製して基質特異性を検討した．当該変異酵素は野生型酵素より明らかに低い単糖に対する特異性を示した．ループの短縮化に伴う単糖特異性の低下から，本ループ構造がM. roseus由来CEの単糖への高い活性に重要なことが明らかになった。
日本学術振興会, 基盤研究(C), 北海道大学, 18K05382 - 植物の病害抵抗性を支配するシグナル物資の活性化の分子基盤
科学研究費助成事業 基盤研究(Ｃ)
2015年10月21日 - 2018年03月31日
松井 博和, 佐分利 亘
植物ではシグナル物質の多くは配糖化により不活性化され，加水分解により活性化される．本研究ではツベロン酸(TA)配糖体 を加水分解するイネβ-グルコシダーゼTAGG2がサリチル酸グルコシド (SAG) にも高い活性を持つことに注目し，SAG分解に重要なアミノ酸残基を特定し，アポプラストへの局在を明らかにした．TAGG2過剰発現イネではTA量の増加は見られたが，SA量の明確な増加は見られなかった．いもち菌接種試験では，TAGG過剰発現体において野生型よりも病斑形成が促進されることが明らかになった．シロイヌナズナホモログはSAGよりもラミナリオリゴ糖などオリゴ糖基質によく作用した．
日本学術振興会, 基盤研究(Ｃ), 北海道大学, 15K07379 - オリゴ糖・多糖・配糖体の酵素合成の分子基盤的研究
科学研究費助成事業 基盤研究(B)
2015年04月01日 - 2018年03月31日
森 春英, 佐分利 亘
糖質は，構成単糖と結合様式と重合度によって顕著な多様性を持つ分子群である．有用化合物が多数存在すると予想されるが，機能性の解析には潤沢な化合物が必要であり，効率的な大量合成系確立が必須である．本研究では，天然に豊富に存在する糖質からの転換として，合成酵素と転移酵素を利用した高度な糖質合成系確立を実施した．合成酵素利用では，ショ糖を出発物質として合成酵素の基質（UDP-Glcなどの糖ヌクレオチド）を供給するワンポット反応により二糖の合成系を確立した．新規転移酵素はマルトオリゴ糖に作用し，グルコース単位での転移反応を触媒する酵素群を見いだした．
日本学術振興会, 基盤研究(B), 北海道大学, 15H04484 - オリゴ糖異性化酵素とその類縁酵素の構造基盤の解明
科学研究費助成事業 若手研究(B)
2014年04月01日 - 2016年03月31日
佐分利 亘
セロビオース2-エピメラーゼ (CE) は，β1-4二糖の還元末端グルコース残基をマンノース残基に異性化する。本酵素は触媒ドメインおよび触媒部位構造を他の単糖異性化酵素と共有する。本研究では，これら酵素の構造機能相関を解析した。Rhodothermus marinus由来CEの基質結合部位残基への変異により二糖特異性に重要なアミノ酸残基を決定した。また，本酵素に僅かなイソメラーゼ活性を認め，Cardicellulosiruptor saccharolyticus由来酵素との比較からイソメラーゼ活性に重要な構造を見出した。機能未知タンパク質の解析から、新規なマンノース異性化酵素を見出した。
日本学術振興会, 若手研究(B), 北海道大学, 26850059 - オリゴ糖異性化酵素とその類縁酵素の構造基盤の解明
科学研究費補助金 若手研究(B)
2014年04月 - 2016年03月
佐分利 亘
文部科学省, 研究代表者, 競争的資金 - 植物ホルモンの新規な代謝酵素の同定と機能解析
科学研究費助成事業 基盤研究(C)
2012年04月01日 - 2015年03月31日
松井 博和, 佐分 利亘, 松浦 英幸
ジャスモン酸 (JA) は病傷害ストレス応答，生長などに関与する植物ホルモンである．本研究ではJAシグナルの不活性化に働くと推定したCYP94D1，CYP94D2およびILL6の機能解析を行った．CYP94D1については遺伝子発現量の調整により表現型の変化が認められた．すなわち，遺伝子欠損株ではJAへの感受性の低下，過剰発現体ではJAの水酸化物の誘導体ツベロン酸グルコシドの蓄積が見られた．
日本学術振興会, 基盤研究(C), 北海道大学, 24580134 - オリゴ糖異性化酵素ならびに類縁酵素群の機能解明と有用糖質の効率合成への応用展開
奨励研究助成
2014年04月 - 2015年03月
佐分利 亘
野田産業科学研究所, 研究代表者, 競争的資金 - ２つの新規な糖質ホスホリラーゼの分子解析
科学研究費助成事業 若手研究(B)
2012年04月01日 - 2014年03月31日
佐分利 亘
反芻動物の第一胃ルーメンに共生する偏性嫌気性細菌Ruminococcus albusは二つのマンノシルグルコースホスホリラーゼ (I型酵素とII型酵素) を持つ。基質特異性を検討したところ，I型酵素はマンノシルグルコースに特異的な酵素であり，II型酵素はマンノオリゴ糖に高い活性を示す酵素であることが判明した．合成反応では，I型酵素のみ6-OHグルコース誘導体をアクセプタ基質とした．アミノ酸配列の比較から推定したアミノ酸残基の変異酵素の解析から，I型酵素のAsp129が触媒残基と考えられた．また，I型酵素のIle212がグルコース6位誘導体への合成活性に重要な残基であることが明らかになった．
日本学術振興会, 若手研究(B), 北海道大学, 24780091 - プレバイオティクスとして機能するエピラクトースの実用的合成法の開発
A-STEP 研究成果最適展開支援プログラム 第1回【FS】 探索タイプ
2013年08月 - 2014年03月
佐分利 亘
科学技術振興機構, 研究代表者, 競争的資金 - 2つの新規な糖質ホスホリラーゼの分子解析
科学研究費補助金 若手研究(B)
2012年04月 - 2014年03月
佐分利 亘
文部科学省, 研究代表者, 競争的資金 - プレバイオティクスの革新的酵素合成技術の開発
研究開発助成事業」(フードイノベーション創造支援事業 研究シーズ発掘補助金)
2012年08月 - 2013年03月
佐分利 亘
ノーステック財団, 研究代表者, 競争的資金 - バイオリアクターを利用したエピラクトースの効率的合成法の開発
「研究開発助成事業」(若手研究人材育成事業 Talent補助金)
2011年09月 - 2012年03月
佐分利 亘
ノーステック財団, 研究代表者, 競争的資金 - ルーメン細菌によるヘミセルロース分解の分子機構の解析
研究助成 (奨励助成)
2011年04月 - 2012年03月
佐分利 亘
公益財団法人秋山記念生命科学振興財団, 研究代表者, 競争的資金
産業財産権
- 内臓脂肪蓄積予防または蓄積改善剤
特許権, 松井 博和, 田口 秀典, 濱田 茂樹, 宮下 和夫, 伊藤 進, 松浦 正男, 木口 雅夫, 横谷 亮, 山本 健, 佐分利 亘, 日本食品化工株式会社, 国立大学法人北海道大学, 株式会社化合物安全性研究所
特願2010-101646, 2010年04月27日
特開2011-231035, 2011年11月17日
特許第5982087号
2016年08月05日
201603010684373826 - 新規なα−グルコシダーゼとその製造法並びに用途
特許権, 小島 晃代, 相沢 健太, 和田 幸樹, 佐分利 亘, 山本 健, 工藤 俊章, 日本食品化工株式会社, 国立大学法人 長崎大学
特願2012-093302, 2012年04月16日
特開2013-005793, 2013年01月10日
特許第5933321号
2016年05月13日
201603003156993778 - エピラクトースを含有する動物用飼料組成物を含有する液状の動物用配合飼料の用途
特許権, 本間 満, 上西 寛司, 中島 肇, 藤田 孝, 阿部 健太郎, 松井 博和, 佐分利 亘, 田口 秀典, 雪印種苗株式会社
特願2011-191311, 2011年09月02日
特開2013-051904, 2013年03月21日
特許第5903230号
2016年03月18日
201603010521225250 - 分岐糖類を含有する風味改善剤および製剤用マスキング剤
特許権, 佐分利, 亘, 上 村, 由香里, 山 本, 健, 高 田 正, 日本食品化工株式会社
特願2009-239669, 2009年10月16日
特開2011-083248, 2011年04月28日
特許第5778888号
2015年07月17日
201503008415363456 - 高純度エピラクトースの製造方法
特許権, 佐分利 亘, 山本 健, 日本食品化工株式会社
特願2010-093027, 2010年04月14日
特開2011-217701, 2011年11月04日
特許第5615584号
2014年09月19日
201403023507906210 - β1,3−グルカンの製造方法
特許権, 磯野 直人, 山本 豊, 佐分利 亘, 国立大学法人三重大学
特願2010-550548, 2010年02月11日
特許第5590615号
2014年08月08日
201403049059820502 - 澱粉分解物および飲食品用味質改善剤ならびにその用途
特許権, 飯塚 貴久, 影嶋 富美, 佐分利 亘, 柿野 あけみ, 山本 健, 高田 正保, 日本食品化工株式会社
特願2013-107151, 2013年05月21日
特開2014-005447, 2014年01月16日
201403045972049700 - 澱粉分解物および飲食品用味質改善剤ならびにその用途
特許権, 飯塚 貴久, 影嶋 富美, 佐分利 亘, 柿野 あけみ, 山本 健, 高田 正保, 日本食品化工株式会社
特願2013-107151, 2013年05月21日
特開2014-005447, 2014年01月16日
特許第5414926号
2013年11月22日
201403040019728479 - デキストラン生成酵素遺伝子、デキストラン生成酵素およびその製造方法、デキストランの製造方法
特許権, 木村 淳夫, 森 春英, 奥山 正幸, 佐分利 亘, 千葉 誠哉, 岡田 嚴太郎, 山本 健, 山本 幹男, 国立大学法人北海道大学, 日本食品化工株式会社
特願2006-322192, 2006年11月29日
特開2007-181452, 2007年07月19日
特許第5224572号
2013年03月22日
201303089862201646 - エピラクトースを含有する動物用飼料組成物、その組成物を含有する動物用配合飼料、及びその用途
特許権, 本間 満, 上西 寛司, 中島 肇, 藤田 孝, 阿部 健太郎, 松井 博和, 佐分利 亘, 田口 秀典, 雪印メグミルク株式会社, 雪印種苗株式会社
特願2011-191311, 2011年09月02日
特開2013-051904, 2013年03月21日
201303002682696657 - 新規なα−グルコシダーゼとその製造法並びに用途
特許権, 小島 晃代, 相沢 健太, 和田 幸樹, 佐分利 亘, 山本 健, 工藤 俊章, 日本食品化工株式会社, 国立大学法人 長崎大学
特願2012-093302, 2012年04月16日
特開2013-005793, 2013年01月10日
201303038329804874 - セロビオース2−エピメラーゼおよびその用途
特許権, 佐分利 亘, 小島 晃代, 山本 健, 松井 博和, 日本食品化工株式会社, 国立大学法人北海道大学
特願2011-229188, 2011年10月18日
特開2012-130332, 2012年07月12日
特許第5092049号
2012年09月21日
201303045638740941 - セロビオース2−エピメラーゼおよびその用途
特許権, 佐分利 亘, 小島 晃代, 山本 健, 松井 博和, 日本食品化工株式会社, 国立大学法人北海道大学
特願2011-229188, 2011年10月18日
特開2012-130332, 2012年07月12日
201203064122628468 - 内臓脂肪蓄積予防または蓄積改善剤
特許権, 松井 博和, 田口 秀典, 濱田 茂樹, 宮下 和夫, 伊藤 進, 松浦 正男, 木口 雅夫, 横谷 亮, 山本 健, 佐分利 亘, 日本食品化工株式会社, 国立大学法人北海道大学, 株式会社化合物安全性研究所
特願2010-101646, 2010年04月27日
特開2011-231035, 2011年11月17日
201103061666598914 - 高純度エピラクトースおよびその製造方法
特許権, 佐分利 亘, 山本 健, 日本食品化工株式会社
特願2010-093027, 2010年04月14日
特開2011-217701, 2011年11月04日
201103029212146538 - 分岐糖類を含有する風味改善剤および製剤用マスキング剤
特許権, 佐分利, 亘, 上 村, 由香里, 山 本, 健, 高 田 正, 日本食品化工株式会社
特願2009-239669, 2009年10月16日
特開2011-083248, 2011年04月28日
201103014968847206 - β1,3−グルカンの製造方法
特許権, 磯野 直人, 山本 豊, 佐分利 亘, 国立大学法人三重大学
JP2010052001, 2010年02月11日
WO2010-092997, 2010年08月19日
201203046386496901 - アノマー保持型糖加水分解酵素変異体及びその製造方法
特許権, 佐分利 亘, 森 春英, 奥山 正幸, 木村 淳夫, 山本 健, 小川 浩一, 日本食品化工株式会社
特願2004-061180, 2004年03月04日
特開2005-253302, 2005年09月22日
特許第4537733号
2010年06月25日
201103044027154701 - 新規分岐グルカン並びにその製造方法および用途
特許権, 佐分利, 亘, 上 村, 由香里, 大 畑, 祐一郎, 山 本, 健, 高 田 正, 日本食品化工株式会社
特願2009-099117, 2009年04月15日
特開2010-095701, 2010年04月30日
201003099272270506 - 新規分岐グルカン並びにその製造方法および用途
特許権, 佐分利, 亘, 上 村, 由香里, 大 畑, 祐一郎, 山 本, 健, 高 田 正, 日本食品化工株式会社
特願2009-099117, 2009年04月15日
特許第4397965号
2009年10月30日
201103001378520711 - デキストラン生成酵素遺伝子、デキストラン生成酵素およびその製造方法、デキストランの製造方法
特許権, 木村 淳夫, 森 春英, 奥山 正幸, 佐分利 亘, 千葉 誠哉, 岡田 嚴太郎, 山本 健, 山本 幹男, 国立大学法人 北海道大学, 日本食品化工株式会社
特願2006-322192, 2006年11月29日
特開2007-181452, 2007年07月19日
200903064570813955 - アノマー保持型糖加水分解酵素変異体及びその製造方法
特許権, 佐分利 亘, 森 春英, 奥山 正幸, 木村 淳夫, 山本 健, 小川 浩一, 日本食品化工株式会社
特願2004-061180, 2004年03月04日
特開2005-253302, 2005年09月22日
200903003995134491
