共同研究・競争的資金等の研究課題

• 複雑な乳歯根管系の制御 －歯根外部吸収部の再生－
  科学研究費助成事業
  2024年04月01日 - 2027年03月31日
  八若 保孝, 中村 光一
  日本学術振興会, 基盤研究(C), 北海道大学, 24K13167
• 生活歯髄切断材料に対する抗酸化アミノ酸の応用~強アルカリによる歯髄刺激からの脱却
  科学研究費助成事業
  2022年04月01日 - 2025年03月31日
  中村 光一, 阿部 薫明, 八若 保孝
  日本学術振興会, 基盤研究(C), 北海道大学, 22K10259
• Hg・Pb・Al曝露は非認知及び前頭葉機能発達に影響するか？-思春期までの追跡-
  科学研究費助成事業
  2020年04月01日 - 2024年03月31日
  草薙 恵美子, 星 信子, 高橋 義信, 中村 光一, 八若 保孝, 森口 佑介, 高橋 文
  本研究の目的は、胎児・幼児・学童・思春期の各時期の金属曝露及び家庭環境等が急激な心理的変化の生じる思春期の子どもの心理・脳機能・運動発達に与える影響を縦断的に検討することである。
  学童期紙面調査に回答した国内5地域271家庭に母親及び子ども用の調査票を郵送した。母親用調査票では、思春期気質質問紙「EATQ-R(Parent)」日本語版、「日本語版家族機能測定尺度」（FACES Ⅲ）、「子どもの強さと困難さアンケート（SDQ)」（4～17歳用/親記入用）の質問項目、及び食品摂取頻度、家庭の経済状況等について尋ねた。子どもの自記式調査票では、「EATQ-R（Kid）」日本語版、SDQ（11～17歳用/自己記入用）、FACES Ⅲからの質問項目について尋ねた。171名の母親及び167名の子どもから回答を得た。
  SDQの子どもの「総合的困難さ」の母親評定値と子どもの自己評定値の相関はr= 0.54であった。重回帰分析により学童期の養育及び気質の思春期「総合的困難さ」への影響を検討した結果、母親による評定では、養育変数と性の調整後、外向性・高潮性（ES）とエフォートフル・コントロール（EC）が困難さを減少させ、否定的情動性（NA）は困難さを増加させることがわかった。子どもの評定した「総合的困難さ」では、ESは有意ではなく、ECの影響度も半減したが、養育尺度の感情的領域が有意となり、子どもの感じる困難さには養育行動が影響していることが確かめられた。
  学童期の子どもの毛髪中金属をICP-QQQにより測定した。毛髪処理及び測定の妥当性は標準試料（Human Hair：NIES CRM No.3)を用いて検討した。幼児期で問題のみられたアルミニウムの回収率は、灰化方法を変更することで概ね満足のいく回収率となった。子どもの毛髪中の鉛やマンガン等の金属の含有量は標準試料の毛髪濃度よりも低かった。
  日本学術振興会, 基盤研究(B), 國學院大學北海道短期大学部, 20H01664
• 複雑な乳歯根管系の制御－歯根外部吸収への修復機構の誘導と歯根安定の獲得－
  科学研究費助成事業
  2020年04月01日 - 2023年03月31日
  八若 保孝, 中村 光一
  根管治療において、根管内壁に生じるスミア層の除去が重要で、根管貼薬剤の効果を根管、根管内壁、象牙細管を通しての根管歯質、歯根外表面へ有効に拡散させることができる。これまでに、根管洗浄として、有機質溶解作用のある次亜塩素酸ナトリウムを使用した超音波洗浄が、乳歯ではスミア層除去に有効であること、永久歯では、硬組織脱灰作用のあるEDTAを使用した超音波洗浄を加えることで、適切なスミア層除去ができることを示すことができた。
  適切なスミア層除去により、根管貼薬剤である水酸化カルシウム製剤の効果が歯根外表面にまで拡散することが示され、前述した根管洗浄法が、複雑な乳歯根管系の制御の最も重要な点であることが把握された。
  根尖性歯周炎の治療は、炎症のコントロールと病的歯根吸収のコントロールの両面での対応が必要である。根尖性歯周炎は、超音波を用いた根管洗浄により貼薬剤の効果が有効に発揮され、炎症のコントロールの確実性が増加した。歯根吸収においては、前述の有効な根管洗浄により、吸収を示す歯根外表面へ象牙細管を経由した水酸化カルシウムのアルカリ性の拡散が生じる。これにより、酸性環境が必要な歯根吸収部を中和させることができ、歯根吸収抑制の可能性が高くなる。事実、臨床においてこの方法を行うことで、多くの症例で歯根吸収を止めることができた。
  歯根外表面の吸収部については、これまでの組織学的検索で、セメント質添加による形態的修復が生じることがあることが報告されている。しかし、どのような環境下で、なにがトリガーとなって、セメント質添加が生じるのかは解明されていない。細胞培養系および実験動物系の2系統を用いて、この点を明らかにする。
  日本学術振興会, 基盤研究(C), 北海道大学, 20K10197
• 緑茶カテキンを利用した新規生活歯髄切断材料は作れるか～歯髄作用機構の解析から～
  科学研究費助成事業
  2019年04月01日 - 2022年03月31日
  中村 光一, 阿部 薫明, 八若 保孝
  RAW264.7細胞にLPSならびにHEMA刺激を加え、WST-8 assayを行ったところ、細胞増殖に対してEGCGは影響を与えなかった。また、炎症反応を評価するためにELISA法でプロスタグランジンE2（PGE2)産生量を測定した。LPS刺激によりPGE2産生量は24時間後、48時間後で著しく増加した。EGCGによりそれらの増加は抑制された。HEMAの刺激により、48時間後におけるPGE2産生量は増加したが、EGCGによりその増加は抑制された。in vitroにおいてEGCGが抗炎症作用を有することが示唆された。
  ラット臼歯に対する生切の結果、EGCGには硬組織誘導能があることが示唆された。
  日本学術振興会, 基盤研究(C), 北海道大学, 19K10374
• 水銀・鉛曝露は心理及び前頭葉機能の発達に影響するか？－幼児期から学童期追跡調査－
  科学研究費助成事業
  2017年04月01日 - 2021年03月31日
  草薙 恵美子, 星 信子, 高橋 義信, 高村 仁知, 森口 佑介, 八若 保孝
  幼児期に毛髪金属量を測定した子どもを追跡し、学童期の心理、運動、脳活動の発達、及び食物摂取等について調べた。また、これらの子どもの脱落乳歯エナメル質中金属濃度測定により胎・乳児期の金属暴露量を測定した。幼児期水銀暴露は子どもの学童期気質発達に負の影響を与え、またアルミニウムと鉛は男児の微細運動に負の影響を与えていたが、脳機能発達への影響はなかった。学童期栄養摂取、特にn-3系脂肪酸摂取は投運動能力や認知的柔軟性の発達と関連することが示唆された。さらに、幼児期毛髪金属量への影響要因について検討した結果、ヨーグルト摂取が鉛やアルミニウムの暴露量低減に有効であることが示された。
  日本学術振興会, 基盤研究(B), 國學院大學北海道短期大学部, 17H02197
• 複雑な乳歯根管系の制御－確実な歯根吸収抑制と吸収部修復機構発現の解明－
  科学研究費助成事業
  2017年04月01日 - 2020年03月31日
  八若 保孝, 中村 光一
  根管治療において、超音波を用いた根管洗浄方法および水酸化カルシウム製剤の貼薬が、複雑な乳歯根管系の制御に重要な要素であることが把握された。
  ラットを用いた動物実験系において、臼歯の歯根外部吸収モデルを構築し、歯根吸収に対する水酸化カルシウム製剤の効果を組織学的に観察した。水酸化カルシウム製剤の効果により、歯根外部吸収は抑制されること、セメント質の添加が生じることが明らかになった。これは、歯根吸収部の修復機構発現の一つと考えられた。細胞培養系においては、歯根吸収モデルを作製することができたが、再現性の問題から、水酸化カルシウム製剤の効果を検索するところまでは至らなかった。
  日本学術振興会, 基盤研究(C), 北海道大学, 17K11951
• 複雑な乳歯根管系の制御 －水酸化カルシウムの拡散様相と歯根外部吸収抑制効果－
  科学研究費助成事業
  2013年04月01日 - 2016年03月31日
  八若 保孝, 中村 光一
  根管洗浄による根管内壁のスミヤ層の除去と象牙細管の開口が、根管治療の予後に大きく影響を与える。先の研究で、永久歯では、EDTAとNaOClを使用した超音波洗浄が、乳歯では、NaOClを使用した超音波洗浄が効果的であることを示した。
  本研究では、根管内壁の状態と貼薬剤である水酸化カルシウム（Ca(OH)2）の拡散様相を検索した。Ca(OH)2貼薬による歯根外表面へのアルカリ性の拡散は、根管内壁の状態に影響を受けることを示した。さらに、カルシウムイオンも歯根外表面に到達していることを示すことができた。これにより、良好な根管洗浄は、Ca(OH)2の効果を十分に発揮させることが示された。
  日本学術振興会, 基盤研究(C), 北海道大学, 25463164
• 子どものこころと身体を見守り支援する大規模データ収集とリスク予測モデル構築
  科学研究費助成事業
  2012年04月01日 - 2016年03月31日
  藤原 卓, 星野 倫範, 西口 美由季, 日高 聖, 朝田 芳信, 山崎 要一, 釜崎 陽子, 本村 陽一, 齋藤 幹, 苅部 洋行, 八若 保孝, 早崎 治明, 佐藤 恭子, 新谷 誠康, 平田 創一郎
  母親教室アンケートから，こころと身体の成育支援に役立つ情報をアドバイスとして出力できるような支援エンジンを構築し，それを連続的に収集応用できるシステムの開発を試みた．さらに外傷データの収集システム，クイズによるを構築した．これらの支援のために入力をタブレット型端末で行うとともに，歯のクイズ形式で健康意識や知識情報を収集するアプリを開発した．
  データ入力アプリはほぼ完成した．母親教室アンケートは解析用ソフトWeka にてデータ分析を行い、齲蝕罹患状態を目的変数として決定木を作製した．う蝕罹患状態を目的変数として，種々の条件下で決定木を作成したが，これまでの定説に合致するようなものではなかった
  日本学術振興会, 基盤研究(B), 長崎大学, 24390463
• 複雑な乳歯根管系の制御-感染根管治療の確実な成功のために
  科学研究費助成事業
  2010年 - 2012年
  八若 保孝
  根管治療におけるリーミング・ファイリングは根管内壁にスメア層を形成する。本研究は、このスメア層を除去する根管洗浄方法の確立を目的とした。その結果、永久歯ではEDTAあるいはEDTAとNaOClを併用して超音波洗浄を行う方法が、スミヤー層を効果的に除去し、乳歯ではNaOClの超音波洗浄を行う方法がスミヤー層を除去することが示された。超音波の根管洗浄への使用は、水酸化物イオンの拡散に有効であることが示唆された。
  日本学術振興会, 基盤研究(C), 北海道大学, 22592276
• 永久歯の先天性欠如に関する総合的研究
  科学研究費助成事業
  2007年 - 2008年
  山崎 要一, 岩崎 智憲, 早崎 治明, 齊藤 一誠, 徳冨 順子, 八若 保孝, 井上 美津子, 朝田 芳信, 田村 康夫, 嘉ノ海 龍三, 牧 憲司, 吉原 俊博, 船津 敬弘, 手島 陽子, 上里 千夏, 山下 一恵, 井出 正道, 栗山 千裕, 向井 向井, 近藤 亜子, 嘉藤 幹夫, 渡邉 京子, 藤田 優子, 長谷川 大子, 稲田 絵美
  北海道大学、昭和大学、鶴見大学、朝日大学、大阪歯科大学、九州歯科大学、鹿児島大学の7大学における附属病院小児歯科と調査協力施設において、エックス線写真を使用した永久歯の先天性欠如に関する疫学調査を行った。対象者は、資料採得時の年齢が永久歯胚の確認が可能となる7歳以上の小児とした。調査対象者総数は15, 544名(男子7, 502名、女子8, 042名)で、永久歯の先天性欠如者数は1, 568名、発現頻度は10.09%であった
  日本学術振興会, 基盤研究(B), 鹿児島大学, 19390532
• 再石灰化を誘導する自己修復機能材料の開発(バイオグラスの歯科材料への応用)
  科学研究費助成事業
  2006年 - 2007年
  橋本 正則, 八若 保孝, 加我 正行
  フッ素徐放性レジンの硬化体が歯質とのギャップにおいて数十umの結晶性物質を形成することをラマン分析およびSEM観察により確認した。さらに接着性レジンの再石灰化能を向上させることを目的としてバイオグラス(Na2-CaO-SiO2-P2O5系)添加型レジンを作成、わずか、数ケ月の水中浸漬により多量の石灰化物を形成する事実を確認している。しかし、10%程度のバイオグラス添加によりレジン硬化体の機械的強度は大きく低下する。数パーセント添加による物性の低下はわずかであるが、レジン硬化体から放出される各種イオンの量は低下するという利点を生じる。これら、物性の低下はセメントの練和時さらにガラスを水溶性レジンに添加することによって、液性分と瞬時に反応することによって石灰化物を形成してしまい、その二次的に形成された石灰化物がレジンおよびセメント硬化体の物性を低下させてしまう。しかし、これら実験結果はマイクロサイズのバイオグラスをもちいた場合であり、粒子径がさらに小さいナノバイオグラス(粒子径10-20nm)を使用した場合は体積あたりの表面積が向上するため少量添加で臨床応用可能な機械的強度と良好な再石灰化を期待することができる。よって、今後、バイオグラス添加型レジンの臨床応用に向けた試みとしては、粒子径が小さなグラス(ナノバイオグラスなど)を使用することにより、レジンやセメントに混入する添加量を減らし、物性の低下を減少させる方向性があると考えられる。
  日本学術振興会, 基盤研究(C), 18592226
• 遺伝子治療による新しい歯根吸収制御法の開発
  科学研究費助成事業
  2003年 - 2003年
  小口 春久, 吉村 善隆, 八若 保孝, 加我 正行
  骨形成・骨吸収の遺伝子治療が考えられている現在、病的あるいは非生理的な「歯根吸収の制御」を遺伝子治療という観点から考えることは、新しい研究分野の展開につながる将来性のある研究の第一歩と考える。破骨細胞は骨吸収を担う多核細胞であり、単球・マクロファージ系細胞の前駆細胞から分化することが知られている。予備実験の結果から、今回我々は、炎症性サイトカインの1つであるマクロファージ遊走阻止因子(MIF)が、破骨細胞分化過程にどのような影響を及ぼすかについて検討を行った。マウス骨芽細胞様細胞(MC3T3-E1細胞)とマウス骨髄細胞との共存培養系によって破骨細胞を誘導し、酒石酸耐性酸性ホスファターゼ(TRAP)活性陽性細胞の出現数、破骨細胞分化因子(RANKL)の発現量、破骨細胞抑制因子(OPG)の産生量および象牙質切片を用いた硬組織吸収能についてMIFの影響を調べた。その結果、TRAP陽性多核細胞の出現数は、MIF濃度に依存して減少することが判明した。一方、MC3T3-E1細胞におけるRANKLの発現およびOPGの産生に、MIFの影響は確認されなかった。TRAP陽性細胞1個中に含まれる核数の分布を調べたところ、MIF作用群ではコントロールと比較し、多核化が抑制されていることが明らかになった。また、象牙質切片上に形成された吸収窩を観察したところ、MIF作用群では形成された吸収窩の大きさが明らかに小さかった。以上の結果より、MIFは骨芽細胞に作用するよりも、むしろ、分化・成熟過程にある破骨細胞の融合過程を阻害することで、成熟した破骨細胞の出現を抑制しているものと考えられ、これらを基盤とすることで、単球・マクロファージ系細胞の破骨細胞前駆細胞もしくは骨髄細胞への遺伝子治療による新しい歯根吸収制御法開発の礎が可能と考えられる。
  日本学術振興会, 萌芽研究, 北海道大学, 15659489
• 新しい細菌検査法による乳歯の病的歯根吸収過程の解明と治療法の確立
  科学研究費助成事業
  1999年 - 2001年
  小口 春久, 長谷川 智一, 八若 保孝, 加我 正行, 野田 守, 長内 正数
  乳歯の病的歯根吸収は主として細菌感染によって生じる。乳歯感染根管の病的吸収過程を電子顕微鏡で観察し、根管内滲出液をPCR法で分析した。歯根膜細胞を培養し、破骨細胞の分化に影響する分子群を検索し、以下の知見を得た。
  1.根尖性歯周炎の乳歯を抜去し、歯根表面を電子顕微鏡で観察した。歯根の生理的吸収の影響がほとんど認められない感染根管では、細菌が根管内、根管壁、根表面に広く分布し、破歯細胞は病的吸収領域にほとんど観察されず、虫喰状の不規則な吸収窩が多数観察された。生理的吸収ではほとんど観察されない吸収窩がみられることから、病的歯根吸収は根管内および根管壁に存在する細菌および細菌の産生物に深く関与していると考えられた。
  2.感染根管に至った乳歯根管内滲出液を滅菌ペーパーポイントで採取し、PCR法で分析した。16SrDNAを検出するためプライマーを作製してPCR法を行ったところ、全菌株でDNAが増幅された。その結果、試料を採取する溶液とPCRを設定することにより、細菌の検出方法を効率的に行うことができた。
  3.歯根膜線維由来の細胞が産生するosteoprotegerin(OPG)は、骨芽細胞や歯肉由来細胞比べて、10倍多かった。これは、歯根膜細胞から産生されるOPGが常にRANKLと結合し、破骨細胞の誘導を抑制していることを示唆する。つまり歯根膜は、単に歯と歯槽骨の間に存在する結合組織だけでなく、OPGの産生を介して歯と歯槽骨を破骨細胞から保護しているものと考えられる。そのため、感染が及ばない歯根でも病的歯根吸収を回避する方法として、根管治療薬の中にOPGを含有することで、病的な骨吸収を抑制できる可能性があると考えられた。
  以上の結果より、徹底した根管洗浄および消毒の有効性と細菌の分離同定による治療のほか、新たにosteoprotegerinの導入が治療法として示唆された。
  日本学術振興会, 基盤研究(B), 北海道大学, 11470445
• 根尖性歯周炎を有するヒト乳歯歯根の病的吸収動態に関する組織学的研究
  科学研究費助成事業
  1997年 - 1999年
  八若 保孝, 加我 正行
  本研究の目的は、根尖性歯周炎を有した歯根象牙質と健全な歯根象牙質において、その歯根吸収にどのような差異が認められるかを明らかにするものであった。
  1.根尖性歯周炎を有するヒト抜去乳歯の歯根を顕微鏡観察した。病的吸収は歯根象牙質および原生セメント質の広い範囲で生じており、いわゆる虫喰的な状態の吸収窩が多数観察された。また、凹凸を有する歯根象牙質表面において、部分的ではあるが、根管の外形を補填するようにセメント質の添加が観察された。病的歯根吸収後に添加したセメント質は、本来のセメント質と著しく違った構造であった。これらのことより、添加された修復性セメント質は、本来の構造を有しておらず、吸収領域を取り巻く局所の環境が、修復機構に大きな影響を与えたことが示唆された。
  2.根尖性歯周炎を有したヒト乳歯歯根(p群)および健全な乳歯歯根(n群:対照群)より試料片を作製した。マウス大腿骨骨髄から調整した細胞浮遊液(αMEM)を象牙質試料片にまき、培養を行った。培養後、試料片を取り出し固定して、酒石酸耐性酸フォスファターゼ(TRAP)活性を観察した。試料片上のTRAP陽性細胞数を顕微鏡下で計測した。TRAP陽性細胞は両群のすべての試料片上に観察された。両群の細胞数の間に、統計学的有意差は認められなかった(Mann-Whitney test)。結果は、根尖性歯周炎を有した歯質でも培養破骨細胞により吸収されることが示唆された。よって、病的歯根吸収において、歯根周囲の環境因子が、歯根歯質の状態よりも、大きな影響を及ぼすと考えられた。
  3.ラット皮下組織へのp群およびn群の試料片を埋入した。両群の試料片は、線維性の結合組織および炎症性の細胞により、被包されて観察され、部分的には、多核巨細胞による吸収が認められた。しかしながら、吸収は軽度なものであった。両群の試料片の状態に差異は観察されなかった。よって、病的吸収において、歯根歯質の状態は、あまり影響を与えないと考えられた。
  これらのことより、病的歯根吸収に関して、歯根周囲の環境因子が大きな影響を与えることが示唆された。
  日本学術振興会, 基盤研究(C), 北海道大学, 09672089
• 乳歯列不正咬合に関する形態学的および機能学的研究　　　　　　　　　　　　　　　
  1992年
  競争的資金
• The molphological and functional study of malocclusion in primary dentition　　　　　　　　　　　　　　　
  1992年
  競争的資金
• 乳歯の生理的歯根吸収および病的異常吸収に関する組織学および分子生物学的研究　　　　　　　　　　　　　　　
  1989年
  競争的資金
• Histological and molecular biological study of physiological and pathological root resorption in primary teeth.　　　　　　　　　　　　　　　
  1989年
  競争的資金