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苅和　宏明 (カリワ　ヒロアキ)

獣医学研究院　獣医学部門　衛生学分野特任教授
人獣共通感染症国際共同研究所特任教授

研究者基本情報

■ 学位
  • 博士（獣医学）, 北海道大学
■ URL
researchmap URLホームページURL■ ID 各種
J-Global ID■ 研究キーワード・分野
研究キーワード
  • 人獣共通感染症
  • ウイルス学
  • 公衆衛生学
  • Zoonosis
  • Virology
  • Public Health
研究分野
  • ライフサイエンス, 獣医学
■ 担当教育組織

経歴

■ 経歴
学内役職歴
  • 大学院国際感染症学院副学院長, 2021年4月1日 - 2023年3月31日
  • 大学院国際感染症学院副学院長, 2023年4月1日 - 2025年3月31日

研究活動情報

■ 受賞
  • 2007年04月, 日本獣医学会, 日本獣医学会賞
    野生げっ歯類を対象としたハンタウイルス感染症の比較疫学的研究
    苅和 宏明
■ 論文
  • Development of blood-brain barrier-penetrating antibodies for neutralizing tick-borne encephalitis virus in the brain.
    Mizuki Fukuta; Sayo Fukano; Naoya Maekawa; Shintaro Kobayashi; Shunsuke Okamoto; Minato Hirano; Junko Nio-Kobayashi; Hiroaki Kariwa; Shigeru Kawakami; Satoru Konnai; Kentaro Yoshii
    mSphere, 10, 7, e0018425, 2025年07月29日, ［国際誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）, UNLABELLED: Tick-borne encephalitis virus (TBEV) belongs to the genus Flavivirus and causes tick-borne encephalitis (TBE), a disease characterized by severe neurological symptoms with a high mortality rate. Currently, no specific antiviral treatments have been developed for TBE. The blood-brain barrier (BBB) restricts drug delivery to the central nervous system, posing a major challenge in developing effective therapies targeting TBEV in the brain. In this study, we developed recombinant anti-TBEV antibodies fused with BBB-penetrating rabies virus glycoprotein (RVG) peptides to facilitate their transport across the BBB. The fusion of RVG peptides to the C-terminus of the heavy chain of whole antibodies or single-chain variable fragment had minimal impact on their neutralizing ability against TBEV. The RVG fusion enhanced antibody binding to the surface of a human brain endothelial cell line and increased permeability in an in vitro BBB model. The RVG-fused antibodies exhibited a higher transport efficiency to the brain than the non-fused antibodies following peripheral injection in mice. Notably, the peripheral administration of the RVG-fused whole antibody after viral invasion into the brain significantly neutralized TBEV in the brains of infected mice. These findings suggest that RVG-fused antibodies represent a promising therapeutic strategy for treating TBE once the virus has entered the brain. IMPORTANCE: Tick-borne encephalitis virus is a neuroinvasive pathogen that causes severe neurologic disease, significantly affecting patients' quality of life. No specific antiviral treatment is available for tick-borne encephalitis caused by virus multiplication in the brain. The delivery of drugs to the brain via peripheral administration is often obstructed by the blood-brain barrier. To develop targeted antiviral therapies for brain infections, we engineered recombinant antibodies capable of crossing the blood-brain barrier via brain-targeted ligands. These antibodies exhibited permeability across the blood-brain barrier in both in vitro and in vivo models and notably effectively neutralized the virus within the brain following peripheral administration. This study is the first to highlight the therapeutic potential of brain-targeted recombinant antibodies after viral entry into the brain, offering a promising pathway for the development of effective antiviral treatments for tick-borne encephalitis.
  • Molecular evolution of Hokkaido virus, a genotype of Orthohantavirus puumalaense, among Myodes rodents.
    Duong Thi Ngoc Thuy; Michihito Sasaki; Yasuko Orba; Passawat Thammahakin; Keisuke Maezono; Shintaro Kobayashi; Hiroaki Kariwa
    Virology, 597, 110168, 110168, 2024年07月03日, ［国際誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）, Viruses in the genus Orthohantavirus within the family Hantaviridae cause human hantavirus infections and represent a threat to public health. Hokkaido virus (HOKV), a genotype of Orthohantavirus puumalaense (Puumala virus; PUUV), was first identified in Tobetsu, Hokkaido, Japan. Although it is genetically related to the prototype of PUUV, the evolutionary pathway of HOKV is unclear. We conducted a field survey in a forest in Tobetsu in 2022 and captured 44 rodents. Complete coding genome sequences of HOKVs were obtained from five viral-RNA-positive rodents (four Myodes rufocanus bedfordiae and one Apodemus speciosus). Phylogenetic analysis revealed a close relationship between the phylogenies and geographical origins of M. rufocanus-related orthohantaviruses. Comparison of the phylogenetic trees of the S segments of orthohantaviruses and the cytochrome b genes of Myodes species suggested that Myodes-related orthohantaviruses evolved in Myodes rodent species as a result of genetic isolation and host switching.
  • Rab27a promotes degradation of West Nile virus E protein in the lysosome.
    Shintaro Kobayashi; Seira Kawai; Yukine Fukuda; Haruto Eguchi; Keisuke Maezono; Passawat Thammahakin; Hirofumi Sawa; Hiroaki Kariwa
    iScience, 27, 4, 109539, 109539, 2024年04月19日, ［国際誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）, Rab27a, a Rab family small GTPases, plays an important role in the trafficking and secretion of the intracellular proteins and has been reported to promote various viral multiplication. However, whether Rab27a is involved in West Nile virus (WNV) multiplication is unknown. This study examined the ability of Rab27a to suppress WNV multiplication. The inhibition of Rab27a expression increased viral multiplication and the intracellular levels of WNV structural proteins, E and prM proteins. Rab27a partially colocalized with E protein, mainly in the perinuclear region, while inhibition of Rab27a expression resulted in diffuse subcellular localization of E protein. In addition, some of the perinuclear E protein colocalized with the lysosomal marker LAMP1, and inhibition of lysosomal acidification increased intracellular levels of Rab27a and E proteins. These observations suggested that Rab27a inhibits WNV multiplication by inducing the degradation of viral protein in lysosomes.
  • Ubiquitin accumulation induced by the finger and palm sub-domains of NS5 modulates the replication of West Nile virus.
    Shintaro Kobayashi; Ryoko Kawakami; Chisaki Takeda; Keisuke Maezono; Passawat Thammahakin; Haruto Eguchi; Bernard M Hang'ombe; Yasuko Orba; Hirofumi Sawa; Kentaro Yoshii; Hiroaki Kariwa
    Virology, 588, 109902, 109902, 2023年11月, ［国際誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）, West Nile virus (WNV) causes encephalitis in human and animals. WNV is phylogenetically classified into at least five distinct genetic lineages with different pathogenicity. The pathogenesis of West Nile encephalitis is affected by ubiquitin accumulation in infected cells, but the mechanism is unknown. In this study, the association between ubiquitin accumulation and WNV pathogenicity was investigated. Ubiquitin accumulation was detected in cells infected with NY99 strain belonging to lineage-1, but not FCG and Zmq16 strains belonging to lineage-2. Substitution of the Finger and Palm sub-domains of NS5 from lineage-1 to -2 decreased ubiquitin accumulation and viral replication. Furthermore, the survival rate was increased, and viral replication and ubiquitin accumulation in the brain were attenuated, in mice inoculated with the substituted WNV compared with lineage-1 WNV. Therefore, the intracellular ubiquitin accumulation induced by the Finger and Palm sub-domains of NS5 is linked to the differences in pathogenicity among WNV lineages.
  • ウエストナイルウイルス感染で形成される複製複合体内に局在する二本鎖RNAを標的とした抗ウイルス効果の検討
    江口 悠人; 前園 佳祐; Thammahakin Passawat; 石橋 和大; 好井 健太朗; 苅和 宏明; 小林 進太郎
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 166回, 151, 151, (公社)日本獣医学会, 2023年09月
    日本語
  • 核膜孔複合体の機能障害に着目したウエストナイルウイルス感染による宿主タンパク質の核-細胞質間輸送の障害と病態形成との関連の解明
    前園 佳祐; Thammahakin Passawat; 好井 健太朗; 苅和 宏明; 小林 進太郎
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 166回, 151, 151, (公社)日本獣医学会, 2023年09月
    日本語
  • ウエストナイルウイルスの脳内侵入機構解明のための脳組織の病理組織学的解析
    梶山 実紗; 福田 幸音; 佐々木 道仁; Passawat Thammahkin; 前園 佳祐; 長谷部 理絵; 村上 正晃; 苅和 宏明; 小林 進太郎
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 166回, 150, 150, (公社)日本獣医学会, 2023年09月
    日本語
  • ダニ媒介脳炎における検査法の評価および後方視的調査結果について
    山口 宏樹; 駒込 理佳; 三好 正浩; 伊東 拓也; 後藤 明子; 三津橋 和也; 渡 慧; 山野 公明; 小林 進太郎; 苅和 宏明; 好井 健太朗
    病原微生物検出情報月報, 44, 8, 128, 130, 国立感染症研究所, 2023年08月
    日本語, 2017年6月～2023年3月までのダニ媒介脳炎の検査結果を示し、その検査法の有用性について検討した。さらに、2017年6月以前のダニ媒介感染症疑い症例における後方視的調査結果を報告した。当所に搬入された294症例369検体についてELISAおよび中和試験を実施した。その結果、新たに3症例(6検体)からダニ媒介脳炎ウイルス(TBEV)に対する特異的抗体が検出された。ELISAと中和試験の結果を比較した結果、IgM捕捉ELISAにおいて陽性の6検体では偽陰性・偽陽性はみられず、IgG-ELISAで陰性、中和試験において抗体が検出された3検体はそれぞれの回復期血清においてIgG抗体陽転が確認された。2017年6月以前に当所に搬入された88症例99検体において後方視的調査を実施した。その結果、3症例(3検体)からIgM抗体および中和抗体が検出され、新たに2名のTBEV抗体陽性症例の存在が明らかとなった。
  • ダニ媒介脳炎における検査法の評価および後方視的調査結果について
    山口 宏樹; 駒込 理佳; 三好 正浩; 伊東 拓也; 後藤 明子; 三津橋 和也; 渡 慧; 山野 公明; 小林 進太郎; 苅和 宏明; 好井 健太朗
    病原微生物検出情報月報, 44, 8, 128, 130, 国立感染症研究所, 2023年08月
    日本語, 2017年6月～2023年3月までのダニ媒介脳炎の検査結果を示し、その検査法の有用性について検討した。さらに、2017年6月以前のダニ媒介感染症疑い症例における後方視的調査結果を報告した。当所に搬入された294症例369検体についてELISAおよび中和試験を実施した。その結果、新たに3症例(6検体)からダニ媒介脳炎ウイルス(TBEV)に対する特異的抗体が検出された。ELISAと中和試験の結果を比較した結果、IgM捕捉ELISAにおいて陽性の6検体では偽陰性・偽陽性はみられず、IgG-ELISAで陰性、中和試験において抗体が検出された3検体はそれぞれの回復期血清においてIgG抗体陽転が確認された。2017年6月以前に当所に搬入された88症例99検体において後方視的調査を実施した。その結果、3症例(3検体)からIgM抗体および中和抗体が検出され、新たに2名のTBEV抗体陽性症例の存在が明らかとなった。
  • Detection of disease-associated microglia among various microglia phenotypes induced by West Nile virus infection in mice.
    Passawat Thammahakin; Keisuke Maezono; Naoya Maekawa; Hiroaki Kariwa; Shintaro Kobayashi
    Journal of neurovirology, 29, 4, 367, 375, 2023年08月, ［国際誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）, West Nile virus (WNV) has emerged as a significant cause of viral encephalitis in humans and horses. However, the pathogenesis of the West Nile encephalitis remains unclear. Microglia are activated by WNV infection, and the pathogenic involvement of their phenotypes is controversial. In this study, we examined the diversity of microglia phenotypes caused by WNV infection by assessing various microglia markers and identified disease-associated microglia in WNV-infected mouse brain tissue. Cells positive for general microglia markers such as Iba1, P2RY12, or TMEM119 were detected in the control and WNV-infected brain tissue. The morphology of the positive cells in brain tissue infected by WNV was different from that of control brain tissue, indicating that WNV infection induced activation of microglia. The activated microglia were classified into various phenotypes by investigation of specific marker expression. Among the activated microglia, disease-associated microglia that were positive for CD11c and weakly positive for TMEM119 were detected close to the WNV-infected cells. These results indicate that WNV infection induces activation of diverse microglia phenotypes and that disease-associated microglia may be associated with the pathogenicity of WNV infection in the mouse brain.
  • Development of recombinant West Nile virus expressing mCherry reporter protein.
    Shintaro Kobayashi; Yukine Fukuda; Kentaro Yoshii; Passawat Thammahakin; Keisuke Maezono; Luděk Eyer; Daniel Růžek; Hiroaki Kariwa
    Journal of virological methods, 317, 114744, 114744, 2023年07月, ［国際誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）, West Nile virus (WNV) is transmitted to humans and animals by a mosquito and enters the central nervous system, leading to lethal encephalitis. Reporter viruses expressing fluorescent proteins enable detection of infected cells in vitro and in vivo, facilitating evaluation of the dynamics of viral infection, and the development of diagnostic or therapeutic methods. In this study, we developed a method for production of a recombinant replication-competent WNV expressing mCherry fluorescent protein. The expression of mCherry was observed in viral antigen-positive cells in vitro and in vivo, but the growth of the reporter WNV was reduced as compared to the parental WNV. The expression of mCherry was stable during 5 passages in reporter WNV-infected culture cells. Neurological symptoms were observed in mice inoculated intracranially with the reporter WNV. The reporter WNV expressing mCherry will facilitate research into WNV replication in mouse brains.
  • Necroptosis of neuronal cells is related to the neuropathology of tick-borne encephalitis.
    Dai Tsujino; Kentaro Yoshii; Misa Kajiyama; Yuji Takahashi; Naoya Maekawa; Hiroaki Kariwa; Shintaro Kobayashi
    Virus research, 321, 198914, 198914, 2022年09月03日, ［査読有り］, ［国際誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）, Tick-borne encephalitis virus (TBEV) is a zoonotic virus that causes tick-borne encephalitis (TBE) in humans. Infections of Sapporo-17-Io1 (Sapporo) and Oshima 5-10 (Oshima) TBEV strains showed different pathogenic effects in mice. However, the differences between the two strains are unknown. In this study, we examined neuronal degeneration and death, and activation of glial cells in mice inoculated with each strain to investigate the pathogenesis of TBE. Viral growth was similar between Sapporo and Oshima, but neuronal degeneration and death, and activation of glial cells, was more prominent with Oshima. In human neuroblastoma cells, apoptosis and pyroptosis were not observed after TBEV infection. However, the expression of the necroptosis marker, mixed lineage kinase domain-like (MLKL) protein, was upregulated by TBEV infection, and this upregulation was more pronounced in Oshima than Sapporo infections. As necroptosis is a pro-inflammatory type of cell death, differences in necroptosis induction might be involved in the differences in neuropathogenicity of TBE.
  • ダニ媒介性脳炎の治療法開発に向けた血液脳関門透過性分子の研究
    福田 美津紀; 深野 紗代; 小林 進太郎; 前川 直也; 高橋 侑嗣; 平野 港; 苅和 宏明; 今内 覚; 好井 健太朗
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 165回, [F1P, 12], (公社)日本獣医学会, 2022年09月
    日本語
  • ダニ媒介性脳炎の治療法開発に向けた血液脳関門透過性分子の研究
    福田 美津紀; 深野 紗代; 小林 進太郎; 前川 直也; 高橋 侑嗣; 平野 港; 苅和 宏明; 今内 覚; 好井 健太朗
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 165回, [F1P, 12], (公社)日本獣医学会, 2022年09月
    日本語
  • Analysis of the relationship between replication of the Hokkaido genotype of Puumala orthohantavirus and autophagy.
    Kazuma Tamiya; Shintaro Kobayashi; Kentaro Yoshii; Hiroaki Kariwa
    Virus research, 318, 198830, 198830, 2022年05月28日, ［査読有り］, ［最終著者］, ［国際誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）, Hantaviruses are potentially fatal zoonotic pathogens of the family Hantaviridae. No human infection by the Hokkaido genotype of Puumala orthohantavirus (PUUV-Hok) has been reported. However, other PUUV genotypes cause hemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS) in humans. Autophagy is a highly conserved lysosomal degradation process in eukaryotic cells that affects the replication of various viruses. In this study, we examined the role of autophagy in PUUV-Hok replication. PUUV-Hok infection induced the expression of LC3-II, an autophagosome marker, and the nucleocapsid protein (NP) of PUUV-Hok was colocalized with punctate structures of LC3. Inhibition of autophagy using an siRNA for Atg5, an autophagy-related gene, increased the replication of PUUV-Hok, whereas an autophagy inducer decreased its replication. Inhibition of lysosomal degradation increased the expression of NP and LC3-II. In summary, autophagy was induced by PUUV-Hok infection, which inhibited PUUV-Hok replication in a manner related to the degradation of the NP in lysosomes.
  • Y-shaped RNA secondary structure of a noncoding region in the genomic RNA of tick-borne encephalitis virus affects pathogenicity.
    Shoko Nishiyama; Minato Hirano; Memi Muto; Mao Kambara; Naoto Ito; Shintaro Kobayashi; Hiroaki Kariwa; Kentaro Yoshii
    Microbiology and immunology, 66, 5, 234, 237, 2022年05月, ［査読有り］, ［国際誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）, Tick-borne encephalitis virus (TBEV) is a zoonotic virus that causes encephalitis in humans. Various deletions have been reported in a variable region of the 3' untranslated region of the TBEV genome. This study analyzed the role of a Y-shaped secondary structure in the pathogenicity of TBEV by using reverse genetics. Deletion of the structure increased the mortality rate of virus-infected mice but did not affect the virus multiplication in cultured cells and organs. The results indicate that the secondary structure is involved in the regulation of TBEV pathogenesis.
  • Characterization of tick-borne encephalitis virus isolated from tick infesting dog in central Hokkaido in 2018.
    Yuji Takahashi; Shintaro Kobayashi; Ryo Nakao; Hiroaki Kariwa; Kentaro Yoshii
    Ticks and tick-borne diseases, 13, 2, 101900, 101900, 2022年03月, ［査読有り］, ［国際誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）, Tick-borne encephalitis virus (TBEV) is a zoonotic virus belonging to the genus Flavivirus of the family Flaviviridae, causing meningitis or meningoencephalitis in humans. TBEV is widely distributed across the Eurasian northern regions, including Japan. Dogs have been reported to be sentinel hosts of TBEV in endemic areas, but studies of ticks infesting dogs are limited in Japan. This study isolated a novel TBEV strain from a tick (Ixodes ovatus) collected on a dog from central Hokkaido. Whole-genome sequencing revealed that the isolated strain belonged to the Far Eastern subtype of TBEV and was classified under a different subcluster of other Japanese isolates. Nanporo-18-44 showed growth properties similar to those of Oshima 5-10 both in vitro and in vivo. The pathogenicity of both viruses was similar in mice infected intracerebrally, however they showed a distinct distribution in the infected neurons of the mouse brain. Our results suggest that infections of humans and animals by unknown strains of TBEV exist in other areas of Japan. Further surveys including those conducted outside of Hokkaido, are required to elucidate the epidemiological risk of TBEV in Japan.
  • 5-Hydroxymethyltubercidin exhibits potent antiviral activity against flaviviruses and coronaviruses, including SARS-CoV-2.
    Kentaro Uemura; Haruaki Nobori; Akihiko Sato; Takao Sanaki; Shinsuke Toba; Michihito Sasaki; Akiho Murai; Noriko Saito-Tarashima; Noriaki Minakawa; Yasuko Orba; Hiroaki Kariwa; William W Hall; Hirofumi Sawa; Akira Matsuda; Katsumi Maenaka
    iScience, 24, 10, 103120, 103120, 2021年10月22日, ［査読有り］, ［国際共著］, ［国際誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）, Newly emerging or re-emerging viral infections continue to cause significant morbidity and mortality every year worldwide, resulting in serious effects on both health and the global economy. Despite significant drug discovery research against dengue viruses (DENVs) and severe acute respiratory syndrome coronavirus-2 (SARS-CoV-2), no fully effective and specific drugs directed against these viruses have been discovered. Here, we examined the anti-DENV activity of tubercidin derivatives from a compound library from Hokkaido University and demonstrated that 5-hydroxymethyltubercidin (HMTU, HUP1108) possessed both potent anti-flavivirus and anti-coronavirus activities at submicromolar levels without significant cytotoxicity. Furthermore, HMTU inhibited viral RNA replication and specifically inhibited replication at the late stages of the SARS-CoV-2 infection process. Finally, we demonstrated that HMTU 5'-triphosphate inhibited RNA extension catalyzed by the viral RNA-dependent RNA polymerase. Our findings suggest that HMTU has the potential of serving as a lead compound for the development of a broad spectrum of antiviral agents, including SARS-CoV-2.
  • A novel nairovirus associated with acute febrile illness in Hokkaido, Japan.
    Fumihiro Kodama; Hiroki Yamaguchi; Eunsil Park; Kango Tatemoto; Mariko Sashika; Ryo Nakao; Yurino Terauchi; Keita Mizuma; Yasuko Orba; Hiroaki Kariwa; Katsuro Hagiwara; Katsunori Okazaki; Akiko Goto; Rika Komagome; Masahiro Miyoshi; Takuya Ito; Kimiaki Yamano; Kentaro Yoshii; Chiaki Funaki; Mariko Ishizuka; Asako Shigeno; Yukari Itakura; Lesley Bell-Sakyi; Shunji Edagawa; Atsushi Nagasaka; Yoshihiro Sakoda; Hirofumi Sawa; Ken Maeda; Masayuki Saijo; Keita Matsuno
    Nature communications, 12, 1, 5539, 5539, 2021年09月20日, ［査読有り］, ［国際共著］, ［国際誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）, The increasing burden of tick-borne orthonairovirus infections, such as Crimean-Congo hemorrhagic fever, is becoming a global concern for public health. In the present study, we identify a novel orthonairovirus, designated Yezo virus (YEZV), from two patients showing acute febrile illness with thrombocytopenia and leukopenia after tick bite in Hokkaido, Japan, in 2019 and 2020, respectively. YEZV is phylogenetically grouped with Sulina virus detected in Ixodes ricinus ticks in Romania. YEZV infection has been confirmed in seven patients from 2014-2020, four of whom were co-infected with Borrelia spp. Antibodies to YEZV are found in wild deer and raccoons, and YEZV RNAs have been detected in ticks from Hokkaido. In this work, we demonstrate that YEZV is highly likely to be the causative pathogen of febrile illness, representing the first report of an endemic infection associated with an orthonairovirus potentially transmitted by ticks in Japan.
  • Inactivation of SARS-CoV-2 by povidone-iodine products: implications for effective mouth rinsing and gargling
    Hiroaki Kariwa; Hirofumi Sawa; Shintaro Kobayashi
    The Japanese Journal of Veterinary Research, 69, 3, 183, 187, 2021年09月, ［査読有り］, ［筆頭著者, 責任著者］, ［国内誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • DsRNA Sequencing for RNA Virus Surveillance Using Human Clinical Samples.
    Takuma Izumi; Yuhei Morioka; Syun-Ichi Urayama; Daisuke Motooka; Tomokazu Tamura; Takahiro Kawagishi; Yuta Kanai; Takeshi Kobayashi; Chikako Ono; Akinari Morinaga; Takahiro Tomiyama; Norifumi Iseda; Yukiko Kosai; Shoichi Inokuchi; Shota Nakamura; Tomohisa Tanaka; Kohji Moriishi; Hiroaki Kariwa; Tomoharu Yoshizumi; Masaki Mori; Yoshiharu Matsuura; Takasuke Fukuhara
    Viruses, 13, 7, 2021年07月06日, ［査読有り］, ［国際誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）, Although viruses infect various organs and are associated with diseases, there may be many unidentified pathogenic viruses. The recent development of next-generation sequencing technologies has facilitated the establishment of an environmental viral metagenomic approach targeting the intracellular viral genome. However, an efficient method for the detection of a viral genome derived from an RNA virus in animal or human samples has not been established. Here, we established a method for the efficient detection of RNA viruses in human clinical samples. We then tested the efficiency of the method compared to other conventional methods by using tissue samples collected from 57 recipients of living donor liver transplantations performed between June 2017 and February 2019 at Kyushu University Hospital. The viral read ratio in human clinical samples was higher by the new method than by the other conventional methods. In addition, the new method correctly identified viral RNA from liver tissues infected with hepatitis C virus. This new technique will be an effective tool for intracellular RNA virus surveillance in human clinical samples and may be useful for the detection of new RNA viruses associated with diseases.
  • Development of a highly specific serodiagnostic ELISA for West Nile virus infection using subviral particles.
    Keisuke Maezono; Shintaro Kobayashi; Koshiro Tabata; Kentaro Yoshii; Hiroaki Kariwa
    Scientific reports, 11, 1, 9213, 9213, 2021年04月28日, ［査読有り］, ［最終著者］, ［国際誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）, West Nile virus (WNV), a member of the Japanese encephalitis virus (JEV) serocomplex group, causes lethal encephalitis in humans and horses. Because serodiagnosis of WNV and JEV is hampered by cross-reactivity, the development of a simple, secure, and WNV-specific serodiagnostic system is required. The coexpression of prM protein and E protein leads to the secretion of subviral particles (SPs). Deletion of the C-terminal region of E protein is reported to affect the production of SPs by some flaviviruses. However, the influence of such a deletion on the properties and antigenicity of WNV E protein is unclear. We analyzed the properties of full-length E protein and E proteins lacking the C-terminal region as novel serodiagnostics for WNV infection. Deletion of the C-terminal region of E protein suppressed the formation of SPs but did not affect the production of E protein. The sensitivity of an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) using the full-length E protein was higher than that using the truncated E proteins. Furthermore, in the ELISA using full-length E protein, there was little cross-reactivity with anti-JEV antibodies, and the sensitivity was similar to that of the neutralization test.
  • TMPRSS11D and TMPRSS13 Activate the SARS-CoV-2 Spike Protein.
    Mai Kishimoto; Kentaro Uemura; Takao Sanaki; Akihiko Sato; William W Hall; Hiroaki Kariwa; Yasuko Orba; Hirofumi Sawa; Michihito Sasaki
    Viruses, 13, 3, 2021年02月28日, ［査読有り］, ［国際誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）, Severe acute respiratory syndrome coronavirus-2 (SARS-CoV-2) utilizes host proteases, including a plasma membrane-associated transmembrane protease, serine 2 (TMPRSS2) to cleave and activate the virus spike protein to facilitate cellular entry. Although TMPRSS2 is a well-characterized type II transmembrane serine protease (TTSP), the role of other TTSPs on the replication of SARS-CoV-2 remains to be elucidated. Here, we have screened 12 TTSPs using human angiotensin-converting enzyme 2-expressing HEK293T (293T-ACE2) cells and Vero E6 cells and demonstrated that exogenous expression of TMPRSS11D and TMPRSS13 enhanced cellular uptake and subsequent replication of SARS-CoV-2. In addition, SARS-CoV-1 and SARS-CoV-2 share the same TTSPs in the viral entry process. Our study demonstrates the impact of host TTSPs on infection of SARS-CoV-2, which may have implications for cell and tissue tropism, for pathogenicity, and potentially for vaccine development.
  • ウエストナイルウイルス感染の特異性の高い新規血清診断系の開発
    前園 佳祐; 小林 進太郎; 好井 健太朗; 苅和 宏明
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 163回, 253, 253, (公社)日本獣医学会, 2020年10月
    日本語
  • 抗核蛋白質抗体を用いた各種ハンタウイルス抗原の新規検出法の確立
    三橋 健斗; 小林 進太郎; 好井 健太朗; 吉松 組子; 苅和 宏明
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 163回, 253, 253, (公社)日本獣医学会, 2020年10月
    日本語
  • ウエストナイルウイルス感染で認められるユビキチンの蓄積に関わるウイルス因子の特定
    小林 進太郎; 川上 怜子; 好井 健太朗; 苅和 宏明
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 163回, 261, 261, (公社)日本獣医学会, 2020年10月
    日本語
  • siRNAによるダニ媒介性フラビウイルスの増殖抑制の検討
    深野 紗代; 小林 進太郎; 苅和 宏明; 好井 健太朗
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 163回, 261, 261, (公社)日本獣医学会, 2020年10月
    日本語
  • Characterization of tick-borne encephalitis virus isolated from a tick in central Hokkaido in 2017.
    Yuji Takahashi; Shintaro Kobayashi; Mariko Ishizuka; Minato Hirano; Memi Muto; Shoko Nishiyama; Hiroaki Kariwa; Kentaro Yoshii
    The Journal of general virology, 101, 5, 497, 509, 2020年05月, ［査読有り］, ［国際誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）, Tick-borne encephalitis virus (TBEV) is a zoonotic virus in the genus Flavivirus, family Flaviviridae. TBEV is widely distributed in northern regions of the Eurasian continent, including Japan, and causes severe encephalitis in humans. Tick-borne encephalitis (TBE) was recently reported in central Hokkaido, and wild animals with anti-TBEV antibodies were detected over a wide area of Hokkaido, although TBEV was only isolated in southern Hokkaido. In this study, we conducted a survey of ticks to isolate TBEV in central Hokkaido. One strain, designated Sapporo-17-Io1, was isolated from ticks (Ixodes ovatus) collected in Sapporo city. Sequence analysis revealed that the isolated strain belonged to the Far Eastern subtype of TBEV and was classified in a different subcluster from Oshima 5-10, which had previously been isolated in southern Hokkaido. Sapporo-17-Io1 showed similar growth properties to those of Oshima 5-10 in cultured cells and mouse brains. The mortality rate of mice infected intracerebrally with each virus was similar, but the survival time of mice inoculated with Sapporo-17-Io1 was significantly longer than that of mice inoculated with Oshima 5-10. These results indicate that the neurovirulence of Sapporo-17-Io1 was lower than that of Oshima 5-10. Using an infectious cDNA clone, the replacement of genes encoding non-structural genes from Oshima 5-10 with those from Sapporo-17-Io1 attenuated the neuropathogenicity of the cloned viruses. This result indicated that the non-structural proteins determine the neurovirulence of these two strains. Our results provide important insights for evaluating epidemiological risk in TBE-endemic areas of Hokkaido.
  • Amino acid 159 of the envelope protein affects viral replication and T-cell infiltration by West Nile virus in intracranial infection.
    Shintaro Kobayashi; Chisato Kaneko; Ryoko Kawakami; Rie Hasebe; Hirofumi Sawa; Kentaro Yoshii; Hiroaki Kariwa
    Scientific reports, 10, 1, 7168, 7168, 2020年04月28日, ［査読有り］, ［最終著者］, ［国際誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）, West Nile virus (WNV) is an important cause of viral encephalitis in birds and animals, including humans. Amino acid 159 of the envelope (E) protein is reportedly implicated in the different levels of neurovirulence in mice infected with WNV NY99 or Eg101. We investigated the role of amino acid 159 of the E protein in the pathogenesis of WNV infection. We produced recombinant WNV with the structural proteins of the NY99 or Eg101 strain (NY-WT or EgCME-WT) and mutant viruses with substitutions of amino acid 159 of the E protein (NY-E-V159I or EgCME-E-I159V). The NY-WT and NY-E-V159I or EgCME-WT and EgCME-E-I159V titers in culture supernatant were similar. The mortality rate and viral titer in the brains of mice inoculated intraperitoneally with NY-WT or NY-E-V159I were also similar. In contrast, the mortality rate and viral titer in the brains of mice inoculated intracranially with EgCME-E-I159V were significantly higher than those of mice inoculated with EgCME-WT. The numbers of CD3-positive and CD8-positive T cells were greater in brains inoculated with EgCME-E-I159V than in those inoculated with EgCME-WT. Therefore, amino acid 159 of the E protein modulates the pathogenicity of WNV by affecting viral replication and T-cell infiltration in the brain.
  • Meeting report: Eleventh International Conference on Hantaviruses.
    Jan Clement; Clas Ahlm; Tatjana Avšič-Županc; Jason Botten; Kartik Chandran; Colleen B Jonsson; Hiroaki Kariwa; Jonas Klingström; Boris Klempa; Detlev H Krüger; Herwig Leirs; Dexin Li; Mifang Liang; Alemka Markotić; Anna Papa; Connie S Schmaljohn; Nicole D Tischler; Rainer G Ulrich; Antti Vaheri; Cecilia Vial; Richard Yanagihara; Piet Maes
    Antiviral research, 176, 104733, 104733, 2020年04月, ［招待有り］, ［国際共著］, ［国際誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）, The 2019 11th International Conference on Hantaviruses (ICH 2019) was organized by the International Society for Hantaviruses (ISH), and held on September 1-4, 2019, at the Irish College, in Leuven, Belgium. These ICHs have been held every three years since 1989. ICH 2019 was attended by 158 participants from 33 countries. The current report summarizes research presented on all aspects of hantavirology: ecology; pathogenesis and immune responses; virus phylogeny, replication and morphogenesis; epidemiology; vaccines, therapeutics and prevention; and clinical aspects and diagnosis.
  • Review on counter measures to coronavirus disease 2019 (COVID-19) pandemic, May 2020
    Taishi Kidaka; Sithumini M.W. Lokupathirage; Bungiriye Devinda Shameera Muthusinghe; Boniface Lombe Pongombo; Christida Estu Wastika; Zhouxing Wei; Shizuka Yoshioka; Mayumi Ishizuka; Yoshihiro Sakoda; Hiroaki Kariwa; Norikazu Isoda
    Japanese Journal of Veterinary Research, 68, 3, 133, 150, 2020年, ［査読有り］
    研究論文（学術雑誌）
  • West Nile virus capsid protein inhibits autophagy by AMP-activated protein kinase degradation in neurological disease development.
    Shintaro Kobayashi; Kentaro Yoshii; Wallaya Phongphaew; Memi Muto; Minato Hirano; Yasuko Orba; Hirofumi Sawa; Hiroaki Kariwa
    PLoS pathogens, 16, 1, e1008238, 2020年01月, ［査読有り］, ［最終著者］, ［国際誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）, West Nile virus (WNV) belongs to the Flaviviridae family and has emerged as a significant cause of viral encephalitis in birds and animals including humans. WNV replication directly induces neuronal injury, followed by neuronal cell death. We previously showed that accumulation of ubiquitinated protein aggregates was involved in neuronal cell death in the WNV-infected mouse brain. In this study, we attempted to elucidate the mechanisms of the accumulation of protein aggregates in the WNV-infected cells. To identify the viral factor inducing the accumulation of ubiquitinated proteins, intracellular accumulation of ubiquitinated proteins was examined in the cells expressing the viral protein. Expression of capsid (C) protein induced the accumulation, while mutations at residues L51 and A52 in C protein abrogated the accumulation. Wild-type (WT) or mutant WNV in which mutations were introduced into the residues was inoculated into human neuroblastoma cells. The expression levels of LC3-II, an autophagy-related protein, and AMP-activated protein kinase (AMPK), an autophagy inducer, were reduced in the cells infected with WT WNV, while the reduction was not observed in the cells infected with WNV with the mutations in C protein. Similarly, ubiquitination and degradation of AMPK were only observed in the cells infected with WT WNV. In the cells expressing C protein, AMPK was co-precipitated with C protein and mutations in L51 and A52 reduced the interaction. Although the viral replication was not affected, the accumulation of ubiquitinated proteins in brain and neurological symptoms were attenuated in the mouse inoculated with WNV with the mutations in C protein as compared with that with WT WNV. Taken together, ubiquitination and degradation of AMPK by C protein resulted in the inhibition of autophagy and the accumulation of protein aggregates, which contributes to the development of neurological disease.
  • Serological evidence of Zika virus infection in non-human primates in Zambia.
    Christida E Wastika; Michihito Sasaki; Kentaro Yoshii; Paulina D Anindita; Bernard M Hang'ombe; Aaron S Mweene; Shintaro Kobayashi; Hiroaki Kariwa; Michael J Carr; William W Hall; Yuki Eshita; Yasuko Orba; Hirofumi Sawa
    Archives of virology, 164, 8, 2165, 2170, 2019年08月, ［査読有り］, ［国際共著］, ［国際誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）, Zika virus (ZIKV) circulation occurs between non-human primates (NHPs) in a sylvatic transmission cycle. To investigate evidence of flavivirus infection in NHPs in Zambia, we performed a plaque reduction neutralization test (PRNT) to quantify neutralizing antibodies. PRNT revealed that sera from NHPs (African green monkeys and baboons) exhibited neutralizing activity against ZIKV (34.4%; 33/96), whereas a PRNT for yellow fever virus using NHP sera showed no neutralization activity. ZIKV genomic RNA was not detected in splenic tissues from NHPs, suggesting that the presence of anti-ZIKV neutralizing antibodies represented resolved infections. Our evidence suggests that ZIKV is maintained in NHP reservoirs in Zambia.
  • Epidemiological survey of tick-borne encephalitis virus infection in wild animals on Hokkaido and Honshu islands, Japan
    Jamsransuren, Dulamjav; Yoshii, Kentaro; Kariwa, Hiroaki; Asakawa, Mitsuhiko; Okuda, Kei; Fujii, Kei; Fukumoto, Shinya; Umemiya-Shirafuji, Rika; Sasaki, Motoki; Matsumoto, Kotaro; Yamaguchi, Emi; Ogawa, Haruko; Imai, Kunitoshi
    Japanese Journal of Veterinary Research, 67, 2, 163, 172, 2019年05月, ［査読有り］, ［国内誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • Serological survey of severe fever with thrombocytopenia syndrome virus infection in Sika deer and rodents in Japan
    Tapiwa Lundu; Kentaro Yoshii; Shintaro Kobayashi; Shigeru Morikawa; Toshio Tsubota; Naoaki Misawa; Daisuke Hayasaka; Hiroaki Kariwa
    Japanese Journal of Veterinary Research, 66, 1, 21, 28, Hokkaido University, 2018年, ［査読有り］, ［最終著者］, ［国内誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • Targeting of severe fever with thrombocytopenia syndrome virus structural proteins to the ERGIC (endoplasmic reticulum Golgi intermediate compartment) and Golgi complex.
    Tapiwa Lundu; Yoshimi Tsuda; Ryo Ito; Kenta Shimizu; Shintaro Kobayashi; Kentaro Yoshii; Kumiko Yoshimatsu; Jiro Arikawa; Hiroaki Kariwa
    Biomedical research (Tokyo, Japan), 39, 1, 27, 38, Biomedical Research Press, 2018年, ［査読有り］, ［最終著者］, ［国内誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）, Severe fever with thrombocytopenia syndrome phlebovirus (SFTSV) is a newly emerged phlebovirus identified in China, Japan, and South Korea. Phlebovirus glycoproteins (GP) play a key role in targeting viral structural components to the budding compartments in the ER-Golgi intermediate compartment (ERGIC) and Golgi complex. However, the role of SFTSV GP in targeting structural proteins to the ERGIC and Golgi complex remains unresolved. In this study, we show that SFTSV GP plays a significant role in targeting RNA-dependent RNA polymerase (L) and nucleocapsid protein (NP) to the budding sites. Confocal microscopy was used to investigate the subcellular localization of SFTSV structural proteins. In SFTSV-infected cells, GP and L localized to the ER, ERGIC and Golgi complex, whereas NP localized to the ERGIC and Golgi complex. In addition, GP colocalized with L and NP in infected cells. In cells singly transfected with GP, L or NP, GP localized to the same subcellular compartments as in infected cells. However, L or NP alone did not localize to the ER, ERGIC, or Golgi complex. Cotransfection experiments showed that GP altered the localization of L to the ERGIC and Golgi complex but not that of NP. Interestingly, plasmid-expressed NP fused with a hemagglutinin tag localized to the ERGIC and Golgi complex when expressed in SFTSV-infected cells and colocalised with GP, suggesting that GP plays a role in the subcellular localization of L and NP in infected cells. Thus, the SFTSV structural components start to assemble at the ERGIC to Golgi complex. GP is required for transporting L and NP to the ERGIC and Golgi complex. In addition, targeting of NP requires interaction with other factors besides GP.
  • Escape of Tick-Borne Flavivirus from 2'-C-Methylated Nucleoside Antivirals Is Mediated by a Single Conservative Mutation in NS5 That Has a Dramatic Effect on Viral Fitness.
    Ludek Eyer; Hirofumi Kondo; Darina Zouharova; Minato Hirano; James J Valdés; Memi Muto; Tomas Kastl; Shintaro Kobayashi; Jan Haviernik; Manabu Igarashi; Hiroaki Kariwa; Marketa Vaculovicova; Jiri Cerny; Rene Kizek; Andrea Kröger; Stefan Lienenklaus; Milan Dejmek; Radim Nencka; Martin Palus; Jiri Salat; Erik De Clercq; Kentaro Yoshii; Daniel Ruzek
    Journal of virology, 91, 21, 2017年11月01日, ［査読有り］, ［国際誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • Dendritic transport of tick-borne flavivirus RNA by neuronal granules affects development of neurological disease.
    Minato Hirano; Memi Muto; Mizuki Sakai; Hirofumi Kondo; Shintaro Kobayashi; Hiroaki Kariwa; Kentaro Yoshii
    Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 114, 37, 9960, 9965, 2017年09月12日, ［査読有り］, ［国際誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • A novel reverse genetics system for production of infectious West Nile virus using homologous recombination in mammalian cells.
    Shintaro Kobayashi; Kentaro Yoshii; Minato Hirano; Memi Muto; Hiroaki Kariwa
    Journal of virological methods, 240, 14, 20, 2017年02月, ［査読有り］, ［国際誌］
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • [Rodent associated hantaviruses and hantavirus infections].
    Hiroaki Kariwa
    Uirusu, 67, 1, 25, 32, 2017年, ［査読有り］, ［国内誌］
    日本語, 研究論文（学術雑誌）, Hantaviruses belongs to the genus Hantavirus in the family Bunyaviridae are maintained in rodents and infects to humans by inhalation of the aerosol of infected rodent excreta. In this article, the epidemiology of hantavirus infection and the special relationship between rodent and hantavirus are described. Hantavirus infections include hemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS) and hantavirus cardiopulmonary syndrome (HCPS). HFRS is characterized high fever, hemorrhage, and renal disorder. HFRS is distributed in East Asia, Europe, and Russia. While HCPS is characterized acute respiratory dysfunction and cardiogenic shock. The distribution of HCPS is limited in North and South Americas. In Japan's neighboring countries, such as Russia, China, and Korea, large numbers of HFRS patients are reported in association with multiple hantaviruses. In Japan, hantavirus infection has not been reported since 1985 but grey red-backed vole (Myodes rufocanus bedfordiae) inhabiting Hokkaido maintain one of the hantaviruses. Coevolution between hantavirus and host may have been occurred during a long period. The endemic areas of hantavirus infection are strongly associated with the distribution of host animal carrying pathogenic hantaviruses.
  • Targeting of severe fever with thrombocytopenia syndrome virus structural proteins to the ERGIC (endoplasmic reticulum Golgi intermediate compartment) and Golgi complex.
    Lundu T; Tsuda Y; Ito R; Shimizu K; Kobayashi S; Yoshii K; Yoshimatsu K; Arikawa J; Kariwa H
    Biomed Res-Tokyo, 78, 8, 1453, 1460, 2017年, ［査読有り］
    英語
  • HokkaidoウイルスとPuumalaウイルスの遺伝子再集合体の作出とその性状解析
    岩崎 里菜; 真田 崇弘; 好井 健太朗; 苅和 宏明
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 157回, 439, 439, (公社)日本獣医学会, 2014年08月, ［査読有り］
    日本語
  • 初代培養マウス脳細胞を用いた脳炎フラビウイルスの増殖機構の解析
    平野 港; 好井 健太朗; 境 瑞樹; 長谷部 理絵; 苅和 宏明
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 156回, 302, 302, (公社)日本獣医学会, 2013年08月, ［査読有り］
    日本語
  • 極東型ダニ媒介性脳炎ウイルスの強毒化に関わるウイルス側因子の特定
    境 瑞紀; 好井 健太朗; 寸田 祐嗣; 横澤 香菜; 平野 港; 苅和 宏明
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 156回, 303, 303, (公社)日本獣医学会, 2013年08月, ［査読有り］
    日本語
  • 新世界ハンタウイルス感染のためのハンタウイルス組み換え核蛋白を用いた血清型鑑別ELISA法の開発
    駒 貴明; 吉松 組子; 垂石 みどり; 宮下 大輔; 遠藤 理香; 清水 健太; 安田 俊平; 天田 貴子; 瀬戸 隆; 村田 亮; 吉田 喜香; 苅和 宏明; 高島 郁夫; 有川 二郎
    北海道医学雑誌, 88, 1, 35, 35, 2013年01月
    日本語, 研究論文（学術雑誌）
  • ダニ媒介性フラビウイルスによる中枢神経系障害に関わるウイルス因子の同定
    好井 健太朗; 寸田 祐嗣; 境 瑞紀; 苅和 宏明; Holbrook Michael; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 154回, 264, 264, (公社)日本獣医学会, 2012年08月, ［査読有り］
    日本語
  • 極東型ダニ媒介性脳炎ウイルスの強毒化に関わるウイルス側因子の特定
    境 瑞紀; 好井 健太朗; 横澤 香菜; 苅和 宏明
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 154回, 264, 264, (公社)日本獣医学会, 2012年08月, ［査読有り］
    日本語
  • ダニ媒介性フラビウイルスのインターフェロンアンタゴニスト作用の解析
    鶴田 征太郎; 好井 健太朗; 境 瑞紀; 苅和 宏明
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 154回, 264, 264, (公社)日本獣医学会, 2012年08月, ［査読有り］
    日本語
  • 新たに分離されたHokkaidoウイルスの性状解析
    真田 崇弘; 尾崎 由佳; 瀬戸 隆弘; 中尾 桃子; Saasa Ngonda; 吉松 組子; 有川 二郎; 好井 健太朗; 苅和 宏明
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 154回, 265, 265, (公社)日本獣医学会, 2012年08月, ［査読有り］
    日本語
  • 人と動物の共通感染症最前線 9 2008年北海道におけるダニ媒介性脳炎ウイルスの分離と性状解析
    好井健太朗; 山崎翔子; 持舘景太; 苅和宏明; 高島郁夫
    獣医畜産新報, 1090, 377-378, 2012年05月01日
    日本語
  • 日本国内におけるダニ媒介性脳炎の血清疫学調査 (特集 人と動物の共通感染症最前線(8))
    好井 健太朗; 持舘 景太; 苅和 宏明
    獣医畜産新報, 64, 10, 801, 803, 文永堂出版, 2011年10月
    日本語
  • ダニ媒介性脳炎ウイルスのE蛋白糖鎖は哺乳動物細胞におけるウイルス粒子分泌に影響する
    柳原 なつみ; 好井 健太朗; 後藤 明子; 伊川 綾恵; 石塚 万里子; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    北海道獣医師会雑誌, 55, 8, 415, 415, (公社)北海道獣医師会, 2011年08月, ［査読有り］
    日本語
  • 2008年北海道で分離されたダニ媒介性脳炎ウイルスOshima 08-AS株の病原性解析
    山崎 翔子; 好井 健太朗; 真田 崇弘; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    北海道獣医師会雑誌, 55, 8, 416, 416, (公社)北海道獣医師会, 2011年08月, ［査読有り］
    日本語
  • 2008年北海道で分離されたダニ媒介性脳炎ウイルスOshima 08-AS株の病原性解析
    山崎 翔子; 好井 健太朗; 真田 崇弘; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 152回, 255, 255, (公社)日本獣医学会, 2011年08月, ［査読有り］
    日本語
  • 野生マウス由来Oas遺伝子座導入コンジェニックマウスにおけるダニ媒介性脳炎ウイルスの神経病原性の解析
    好井 健太朗; 森藤 可南子; 永田 典代; 佐々木 宣哉; 苅和 宏明; 安居院 高志; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 152回, 256, 256, (公社)日本獣医学会, 2011年08月, ［査読有り］
    日本語
  • ダニ媒介性脳炎ウイルスのE蛋白糖鎖は哺乳動物細胞におけるウイルス粒子分泌に影響する
    柳原 なつみ; 好井 健太朗; 石塚 万里子; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 152回, 256, 256, (公社)日本獣医学会, 2011年08月, ［査読有り］
    日本語
  • エゾヤチネズミ(Myodes rufocanus)の腎臓由来細胞系の確立とHokkaidoウイルス分離への応用
    真田 崇弘; 瀬戸 隆弘; 尾崎 由佳; Ngonda Saasa; 好井 健太朗; 苅和 宏明
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 152回, 256, 256, (公社)日本獣医学会, 2011年08月, ［査読有り］
    日本語
  • ダニ媒介性脳炎 (特集 ヒトと家畜・ペット・野生動物の感染症--口蹄疫から学ぶ) -- (野生動物と動物由来感染症)
    苅和 宏明; 好井 健太朗; 高島 郁夫
    公衆衛生, 75, 1, 36, 38, 医学書院, 2011年01月
    日本語
  • 2008年北海道におけるダニ媒介性脳炎ウイルスの分離と性状解析
    山崎 翔子; 好井 健太朗; 持舘 景太; 村田 亮; 真田 崇弘; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 150回, 247, 247, (公社)日本獣医学会, 2010年09月, ［査読有り］
    日本語
  • ダニ媒介性脳炎ウイルスのE蛋白の糖鎖付加がウイルス性状に与える影響
    柳原 なつみ; 好井 健太朗; 後藤 明子; 伊川 綾恵; 石塚 万里子; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 150回, 248, 248, (公社)日本獣医学会, 2010年09月, ［査読有り］
    日本語
  • ダニ媒介性脳炎ウイルスSofjin株の感染性cDNAの構築
    高野 絢子; 大森 優紀; 好井 健太朗; 横澤 香菜; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 150回, 248, 248, (公社)日本獣医学会, 2010年09月, ［査読有り］
    日本語
  • ダニ媒介性脳炎/オムスク出血熱のキメラウイルスの作成と性状解析
    好井 健太朗; 寸田 祐嗣; 苅和 宏明; Holbrook Michael; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 150回, 248, 248, (公社)日本獣医学会, 2010年09月, ［査読有り］
    日本語
  • メキシコ由来のハンタウイルスに対するモノクローナル抗体の作出と各種ハンタウイルスに対する反応性の検討
    吉田 喜香; 苅和 宏明; 真田 崇弘; Saasa Ngonda; 瀬戸 隆弘; 吉松 組子; 有川 二郎; 好井 健太朗; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 150回, 249, 249, (公社)日本獣医学会, 2010年09月, ［査読有り］
    日本語
  • Puumalaウイルスを感染させたシリアンハムスター(Mesocricetus auratus)の感染動態の解析
    真田 崇弘; 苅和 宏明; 谷川 洋一; Nur Hardy Abu Daud; 瀬戸 隆弘; 永田 典代; 吉松 組子; 有川 二郎; 好井 健太朗; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 150回, 252, 252, (公社)日本獣医学会, 2010年09月, ［査読有り］
    日本語
  • 人と動物の共通感染症最前線 7 ウエストナイルウイルスの鳥類における増殖性と極東ロシアでの抗体調査
    村田亮; 好井健太朗; 苅和宏明; 高島郁夫
    獣医畜産新報, 1064, 208-209, 2010年03月01日
    日本語
  • ダニ媒介性脳炎〜日本における流行の現状について〜
    好井健太朗; 苅和宏明; 高島郁夫
    北海道獣医師会雑誌, 54, 1, 2-7, 2010年01月10日
    日本語
  • 日本国内におけるダニ媒介性脳炎の血清疫学調査
    持舘 景太; 好井 健太朗; 大森 優紀; 千葉 裕美子; 村田 亮; 真田 崇弘; 前田 潤子; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 148回, 236, 236, (公社)日本獣医学会, 2009年09月, ［査読有り］
    日本語
  • 極東ロシアの野鳥におけるウエストナイル熱の血清疫学調査と中和試験の評価
    村田 亮; 橋口 和明; 好井 健太朗; 野田 寛; 伊川 綾恵; 原田 祐里; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 148回, 236, 236, (公社)日本獣医学会, 2009年09月, ［査読有り］
    日本語
  • ダニ媒介性脳炎ウイルスSofjin株のレプリコンの構築
    高野 絢子; 大森 優紀; 好井 健太朗; 石塚 万里子; 村田 亮; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 148回, 236, 236, (公社)日本獣医学会, 2009年09月, ［査読有り］
    日本語
  • オムスク出血熱ウイルスの感染性cDNAの構築
    好井 健太朗; 苅和 宏明; 高島 郁夫; Holbrook Michael
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 148回, 237, 237, (公社)日本獣医学会, 2009年09月, ［査読有り］
    日本語
  • メキシコの野生げっ歯類が保有するハンタウイルスの遺伝子解析
    吉田 喜香; 苅和 宏明; 高野 絢子; 戸谷 理詩; 宮下 大輔; Ngonda Saasa; 瀬戸 隆弘; 真田 崇弘; 吉川 佳佑; 好井 健太朗; 吉松 組子; 有川 次郎; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 148回, 237, 237, (公社)日本獣医学会, 2009年09月, ［査読有り］
    日本語
  • 日本国内におけるダニ媒介性脳炎の血清疫学調査
    持舘 景太; 好井 健太朗; 大森 優紀; 千葉 裕美子; 村田 亮; 真田 崇弘; 前田 潤子; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    北海道獣医師会雑誌, 53, 8, 111, 111, (公社)北海道獣医師会, 2009年08月, ［査読有り］
    日本語
  • 極東ロシアの野鼠からのハンタウイルスの分離と人におけるウイルス感染状況の調査
    吉川 佳佑; 苅和 宏明; 瀬戸 隆弘; 真田 崇弘; 石塚 万里子; 吉松 組子; 有川 二郎; Ivanov Leonid; Slonova Raisa; 好井 健太朗; 高島 郁夫
    北海道獣医師会雑誌, 53, 8, 112, 112, (公社)北海道獣医師会, 2009年08月, ［査読有り］
    日本語
  • 極東ロシアのげっ歯類からのハンタウイルスの分離とウイルス遺伝子の性状解析
    吉川 佳佑; 苅和 宏明; 瀬戸 隆弘; 真田 崇弘; 石塚 万里子; 吉松 組子; 有川 二郎; Ivanov Lenid; 好井 健太朗; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 147回, 260, 260, (公社)日本獣医学会, 2009年03月, ［査読有り］
    日本語
  • ウエストナイル熱の血清診断法の評価と極東ロシアにおける疫学調査
    村田 亮; 橋口 和明; 好井 健太朗; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 146回, 225, 225, (公社)日本獣医学会, 2008年09月, ［査読有り］
    日本語
  • 多種類のハンタウイルス血清型の検出が可能な抗原検出法の開発
    真田 崇弘; 苅和 宏明; 瀬戸 隆弘; 谷川 洋一; 宮下 大輔; 吉松 組子; 有川 二郎; 好井 健太朗; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 146回, 225, 225, (公社)日本獣医学会, 2008年09月, ［査読有り］
    日本語
  • ウイルス様粒子を用いたダニ媒介性脳炎の新たな診断法の開発
    千葉 裕美子; 伊川 綾恵; 好井 健太朗; 大森 優紀; 村田 亮; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 146回, 226, 226, (公社)日本獣医学会, 2008年09月, ［査読有り］
    日本語
  • ダニ媒介性脳炎ウイルスの中空ウイルス様粒子のワクチンへの応用
    大森 優紀; 伊川 綾恵; 川上 和江; 好井 健太朗; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 146回, 226, 226, (公社)日本獣医学会, 2008年09月, ［査読有り］
    日本語
  • SARSコロナウイルスのNおよびM蛋白質の粒子形成における機能解析
    中内 美名; 藤井 寛子; 苅和 宏明; 前田 秋彦; 好井 健太朗; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 145回, 204, 204, (公社)日本獣医学会, 2008年03月, ［査読有り］
    日本語
  • ウエストナイルウイルスのE蛋白上糖鎖が宿主内におけるウイルス増殖に与える影響
    村田 亮; 好井 健太朗; 苅和 宏明; 江下 優樹; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 145回, 205, 205, (公社)日本獣医学会, 2008年03月, ［査読有り］
    日本語
  • Arch Virol
    Nakamura, I; Yoshimatsu, K; Lee, B. H; Okumura, M; Taruishi, M; Araki, K; Kariwa, H; Takashima, I; Arikawa, J
    Development of a serotyping ELISA system for Thailand virus infection., 153, 1537, 1542, 2008年
  • ウエストナイルウイルスのE蛋白上糖鎖付加がウイルス増殖に与える影響
    村田 亮; 好井 健太朗; 原田 祐里; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 144回, 127, 127, (公社)日本獣医学会, 2007年08月, ［査読有り］
    日本語
  • ダニ媒介性脳炎ウイルスのウイルス様粒子およびその組換え発現プラスミドを抗原とした針無加圧式注射によるワクチン接種の有効性の検討
    大森 優紀; 伊川 綾恵; 川上 和江; 好井 健太朗; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 144回, 128, 128, (公社)日本獣医学会, 2007年08月, ［査読有り］
    日本語
  • レプリコンを利用したウエストナイルウイルスとダニ媒介性脳炎ウイルスのキメラウイルス様粒子の作製
    原田 祐里; 好井 健太朗; 伊川 綾恵; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 142回, 121, 121, (公社)日本獣医学会, 2006年08月, ［査読有り］
    日本語
  • 家畜と野生動物における人と動物の共通感染症 齧歯類とハンタウイルス感染症
    苅和宏明; 谷川洋一; 萩谷友洋; LOKUGAMAGE Kumari; LOKUGAMAGE Nandadeva; DAUD Nur Hardy Bin Abu; 好井健太朗; 高島郁夫
    獣医畜産新報, 59, 1021, 633-638, 638, 文永堂出版, 2006年08月01日
    日本語
  • ウイルス様粒子を用いたフラビウイルスの粒子形成機構の解析,および診断法・予防法開発への応用
    好井 健太朗; 後藤 明子; 小原 真弓; 川上 和江; 伊川 綾江; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 141回, 73, 73, (公社)日本獣医学会, 2006年03月, ［査読有り］
    日本語
  • ダニ媒介性脳炎ウイルス組み換え蛋白を用いたELISA法による野鼠血清スクリーニング法の開発
    伊川 綾恵; 好井 健太朗; 川上 和江; 後藤 明子; 小原 真弓; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 140回, 147, 147, (公社)日本獣医学会, 2005年08月, ［査読有り］
    日本語
  • 人獣共通感染症 日本と極東ロシアのダニ媒介性脳炎ウイルスの系統解析と病原性
    高島 郁夫; 早坂 大輔; 後藤 明子; 好井 健太朗; 苅和 宏明
    ウイルス, 55, 1, 35, 44, 日本ウイルス学会, 2005年06月, ［査読有り］
    日本語
  • 人と動物の共通感染症の最前線 2 東アジアの人とげっ歯類におけるハンタウイルス感染の疫学的研究
    有川二郎; 吉松組子; KUMPERASART Sanit; THANG Truong Thua; 荒木幸一; LEE Byoung‐Hee; KRUGER Detlev H; 苅和宏明; 高島郁夫
    獣医畜産新報, 1005, 326, 328, 2005年04月01日
    日本語
  • 野生げっ歯類からのハンタウイルス抗原検出用ELISAの開発
    谷川 洋一; 苅和 宏明; 萩谷 友洋; Lokugamage Nandadeva; Lokugamage Kumari; 舘 敦史; 好井 健太朗; 吉松 組子; 有川 二郎; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 139回, 185, 185, (公社)日本獣医学会, 2005年03月, ［査読有り］
    日本語
  • フラビウイルスのウイルス粒子分泌におけるユビキチン-プロテアソーム系の関与
    好井 健太朗; 後藤 明子; 川上 和江; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 138回, 129, 129, (公社)日本獣医学会, 2004年08月, ［査読有り］
    日本語
  • 日本におけるハンタウイルス感染の動物伝染病学的及び疫学的研究(Epizootiological and epidemiological study of hantavirus infection in Japan)
    Lokugamage Nandadeva; 苅和 宏明; 好井 健太朗; 舘 敦史; 安藤 秀二; 福島 博; 土屋 公幸; 岩崎 琢也; 吉松 組子; 有川 二郎; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 138回, 130, 130, (公社)日本獣医学会, 2004年08月, ［査読有り］
    英語
  • タイリクヤチネズミから分離されたPuumala型近縁ハンタウイルスの遺伝子解析
    谷川 洋一; 苅和 宏明; Lokugamage Nandadeva; 萩谷 友洋; Lokugamage Kumari; 舘 敦史; 好井 健太朗; 岩佐 真宏; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 138回, 130, 130, (公社)日本獣医学会, 2004年08月, ［査読有り］
    日本語
  • Amur型ハンタウイルス糖蛋白の哺乳類細胞での発現と抗原性解析
    舘 敦史; 苅和 宏明; Lokugamage Kumari; Lokugamage Nandadeva; 谷川 洋一; 好井 健太朗; 吉松 組子; 有川 二郎; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 138回, 131, 131, (公社)日本獣医学会, 2004年08月, ［査読有り］
    日本語
  • ダニ媒介性脳炎ウイルス組み替え蛋白を用いたELISAによる野ネズミ血清スクリーニング法の開発
    川上 和江; 好井 健太朗; 後藤 明子; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 137回, 114, 114, (公社)日本獣医学会, 2004年03月, ［査読有り］
    日本語
  • repliconを利用したフラビウイルスのキメラウイルス様粒子の作成
    好井 健太朗; 早坂 大輔; 後藤 明子; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 137回, 114, 114, (公社)日本獣医学会, 2004年03月, ［査読有り］
    日本語
  • ダニ媒介性脳炎ウイルスのE蛋白の糖鎖修飾がウイルス粒子分泌に与える影響
    後藤 明子; 好井 健太朗; 小原 真弓; 植木 智隆; 水谷 哲也; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 137回, 115, 115, (公社)日本獣医学会, 2004年03月, ［査読有り］
    日本語
  • 50 C6/36細胞(ヒトスジシマカ由来)のJNKの活性化はアポトーシスを抑制する
    水谷 哲也; 江下 俊樹; 赤穂 芳彦; 三好 洋嗣; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    衛生動物, 55, 56, 56, 日本衛生動物学会, 2004年
    日本語
  • ダニ媒介性脳炎ウイルスの感染性cDNAクローンを用いた病原性解析
    植木 智隆; 早坂 大輔; 後藤 明子; 好井 健太朗; 水谷 哲也; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 136回, 176, 176, (公社)日本獣医学会, 2003年09月, ［査読有り］
    日本語
  • ダニ媒介性脳炎ウイルスのrepliconおよびpackaging systemの構築
    好井 健太朗; 早坂 大輔; 後藤 明子; 水谷 哲也; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 136回, 257, 257, (公社)日本獣医学会, 2003年09月, ［査読有り］
    日本語
  • ダニ媒介性脳炎ウイルスのエンベロープ糖蛋白の糖鎖欠損がウイルス粒子形成に与える影響
    後藤 明子; 好井 健太朗; 小原 真弓; 植木 智隆; 水谷 哲也; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 135回, 156, 156, (公社)日本獣医学会, 2003年03月, ［査読有り］
    日本語
  • A06 ヒトスジシマカ由来の C6/36 細胞におけるウエストナイルウイルスの感染防御 : ウイルス感染における JNK シグナル伝達の役割
    水谷 哲也; 小林 正之; 江下 優樹; 白戸 憲也; 赤穂 芳彦; 三好 洋嗣; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    衛生動物, 54, 24, 24, 日本衛生動物学会, 2003年
    日本語
  • ダニ媒介性脳炎ウイルスのウイルス粒子放出抑制に関する解析
    好井 健太朗; 後藤 明子; 小原 真弓; 植木 智隆; 早坂 大輔; 水谷 哲也; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 134回, 195, 195, (公社)日本獣医学会, 2002年08月, ［査読有り］
    日本語
  • ダニ媒介性脳炎ウイルス神経侵入性弱毒変異株のマウス体内での動態
    後藤 明子; 好井 健太朗; 早坂 大輔; 水谷 哲也; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 134回, 195, 195, (公社)日本獣医学会, 2002年08月, ［査読有り］
    日本語
  • 北海道におけるダニ媒介性脳炎ウイルスの血清疫学調査
    小原 真弓; 好井 健太朗; 後藤 明子; 早坂 大輔; 水谷 哲也; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 134回, 195, 195, (公社)日本獣医学会, 2002年08月, ［査読有り］
    日本語
  • Evaluation of European tick-borne encephalitis virus vaccine against recent Siberian and far-eastern subtype strains
    Daisuke Hayasaka; Akiko Goto; Kentaro Yoshii; Tetsuya Mizutani; Hiroaki Kariwa; Ikuo Takashima
    Vaccine, 19, 32, 4774, 4779, 2001年09月
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • Truncated hantavirus nucleocapsid proteins for serotyping Hantaan, Seoul, and Dobrava hantavirus infections.
    Araki K; Yoshimatsu K; Ogino M; Ebihara H; Lundkvist A; Kariwa H; Takashima I; Arikawa J
    Journal of clinical microbiology, 39, 2397, 2404, 7, 2001年07月, ［査読有り］
  • Epidemiology and epizootiology of hantavirus infection in Japan.
    Arikawa J; Yoshimatsu K; Kariwa H
    Japanese journal of infectious diseases, 54, 95, 102, 3, 2001年06月, ［査読有り］
  • Distribution and characterization of tick-borne encephalitis viruses in Siberia and far-eastern region
    Daisuke Hayasaka; Leonid Ivanov; Galina N. Leonova; Akiko Goto; Kentaro Yoshii; Tetsuya Mizutani; Hiroaki Kariwa; Ikuo Takashima
    J. Gen. Virol., 82, Pt6, 1319, 1328, Society for General Microbiology., 2001年06月
    英語, 研究論文（学術雑誌）, In this study, tick-borne encephalitis (TBE) viruses from Siberia and far-eastern Asia were characterized in order to determine virus subtype distribution. TBE viruses were isolated from ticks (Ixodes persulcatus) collected in the far-eastern (Khabarovsk and Vladivostok) and Siberian (Irkutsk) regions of Russia in 1999. Phylogenetic analysis showed that isolates formed distinct clusters of far-eastern and Siberian subtypes. There was also a minor difference in antigenicity between the Irkutsk isolates and other TBE virus strains, as demonstrated by the reactivity of monoclonal antibodies. Amino acid alignments of the E gene showed that the Irkutsk isolates had a single amino acid change at position 234 (Q or H); this amino acid position is considered to be a 'signature' of Siberian subtype TBE viruses. Strains isolated in Irkutsk also exhibited equivalent or somewhat higher virulence in mice compared with far-eastern TBE virus isolates. All viruses isolated in this study (i.e. far-east Asian and Siberian isolates) have 3' non-coding regions (NCRs) of almost the same length, which contrasts with the various sizes of 3'NCRs of other TBE viruses strains reported previously. The data presented in this study show that the 3'NCR is uniform among TBE viruses isolated from Siberia and far-eastern Asia and that the 3'NCR is essential for TBE virus growth in tick and/or rodent host cells.
  • Characterization of in vitro and in vivo antiviral activity of lactoferrin and ribavirin upon hantavirus
    Michael E. Murphy; Hiroaki Kariwa; Tetsuya Mizutani; Hiroki Tanabe; Kumiko Yoshimatsu; Jiro Arikawa; Ikuo Takashima
    J Vet Med Sci., 63, 6, 637, 645, 社団法人日本獣医学会, 2001年06月
    英語, 研究論文（学術雑誌）, 牛のラクトフェリン(LF)とリバビリン(Rbv)の抗ハンタウイルス活性の作用機序を解析した.ハンタウイルスのフォーカス形成はウイルス接種前に400μl/mlのLFを37℃で1時間処理すると,対照に比べ15%にまで低下した.ウイルス接種後に100μl/mlのRbvを作用するとフォーカス形成は対照の2.5%まで阻害された.LF前処理とRbv後処理の併用は完全にフォーカス形成を阻害した.ウイルスの糖蛋白(G2)とヌクレオキャプシド(NP)の合成はLF前処理細胞において24時間目までは阻害がみられたが,48時間後にはほとんど対照と同程度まで到達した.さらに,LFは24時間目まではウイルスの放出を阻害したが,48時間後には阻害は見られなかった.一方,Rbvはウイルス蛋白の合成,プラス鎖とマイナス鎖のウイルスRNAの合成を阻害した.Rbvは感染24時間目以降のウイルス放出をも阻害した.これらの成績はLFはウイルスの細胞への吸着を阻害するのに対し,RbvはウイルスのRNA合成を阻害することを示唆している.LFとRbvのin vivoの実験では,ハンタウイルスを接種したマウスの7%しか生存しない乳飲みマウスの系でLFのウイルス接種前投与とRbvの接種後投与の効果について検討した.LFの40と160mg/kgの接種前一回投与は生存率をそれぞれ70%と15%に上昇させ,LFの2回前投与ではそれぞれ94%と85%まで上昇した.Rbvの25と50mg/kgの接種前投与は生存率をそれぞれ68%と81%に上昇させた.このことはLFとRbvはin vivoにおけるハンタウイルス感染にも有効であることを示している.
  • ダニ媒介性脳炎(TBE)ウイルスシベリア型及び極東型の病原性の比較とワクチンの効果
    早坂 大輔; 後藤 明子; 好井 健太朗; 水谷 哲也; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 131回, 121, 121, (公社)日本獣医学会, 2001年03月, ［査読有り］
    日本語
  • ダニ媒介性脳炎ウイルス組み換え蛋白の作成と抗原性状の解析
    好井 健太朗; 早坂 大輔; 後藤 明子; 水谷 哲也; 苅和 宏明; 高島 郁夫
    日本獣医学会学術集会講演要旨集, 131回, 121, 121, (公社)日本獣医学会, 2001年03月, ［査読有り］
    日本語
  • Epidemiology of tick-borne encephalitis (TBE) and phylogenetic analysis of TBE viruses in Japan and Far Eastern Russia
    Ikuo Takashima; Daisuke Hayasaka; Akiko Goto; Hiroaki Kariwa; Tetsuya Mizutani
    Jpn J Infect Dis., 54, 1, 1, 11, 2001年01月
    英語
  • アルボウイルス感染症の疫学
    高島 郁夫; 早坂 大輔; 苅和 宏明
    日本獣医師会雑誌, 53, 12, 793, 799, 日本獸医師会, 2000年12月20日
    日本語
  • In vitro antiviral activity of lactoferrin and ribavirin upon hantavirus
    Michael E. Murphy; Hiroaki Kariwa; Tetsuya Mizutani; Kumiko Yoshimatsu; Jiro Arikawa; Ikuo Takashima
    Arch. Virol., 145, 8, 1571, 1582, 2000年08月
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • The mechanism of actinomycin D-mediated increasing of Borna disease virus (BDV) RNA in persistently BDV-infected cells
    Tetsuya Mizutani; Hisae Inagaki; Mitsuhiro Tada; Daisuke Hayasaka; Michael E. Murphy; Toshiyoshi Fujiwara; Jun-ichi Hamada; Hiroaki Kariwa; Ikuo Takashima
    Microbirol. Immunol., 44, 7, 597, 603, 2000年07月
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • Characterization of monoclonal antibodies against Hokkaido strain tick-borne encephalitis virus
    Kimiyo Komoro; Daisuke Hayasaka; Tetsuya Mizutani; Hiroaki Kariwa; Ikuo Takashima
    Microbiol Immunol., 44, 6, 533, 536, Center for Academic Pub. Japan, 2000年06月
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • Detection of hantaviral antibodies among patients with hepatitis of unknown etiology in Japan
    Hiroaki Kariwa; Kumiko Yoshimatsu; Kouichi Araki; Chayama K; Kumada H; Michiko Ogino; Ebihara H; Michael E. Murphy; Tetsuya Mizutani; Ikuo Takashima; Jiro Arikawa
    Microbiol Immunol., 44, 5, 357, 362, Center for Academic Pub. Japan, 2000年05月
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • Phylogenetic and virulence analysis of Tick-borne encephalitis viruses from Japan and Far East Russia
    Daisuke Hayasaka; Yoshiyuki Suzuki; Hiroaki Kariwa; Leonid Ivanov; Vladimir Volkov; Vladimir Demenev; Tetsuya Mizutani; Takashi Gojobori; Ikuo Takashima
    J. Gen. Virol., 80, Pt12, 3127, 3135, Society for General Microbiology, 1999年12月
    英語, 研究論文（学術雑誌）, We have previously reported that tick-borne encephalitis (TBE) is endemic in a specific area of Hokkaido, Japan. In Oshima, the southern part of Hokkaido, TBE virus was isolated from sentinel dogs, ticks and rodents in 1995 and 1996. To identify when these TBE viruses emerged in Hokkaido, the times of divergence of TBE virus strains isolated in Oshima and far-eastern Russia were estimated. TBE virus was isolated in Khabarovsk in 1998 and the nucleotide sequences of viral envelope protein genes of isolates from Oshima and Khabarovsk were compared. From the synonymous substitution rate of these virus strains, the lineage divergence time of these TBE virus strains was predicted phylogenetically to be about 260–430 years ago. Furthermore, the virulence of TBE virus isolates from Oshima and Khabarovsk were compared in a mouse model. The results showed that the isolates possessed very similar virulence in mice. This report provides evidence that the Oshima strains of TBE virus in Hokkaido emerged from far-eastern Russia a few hundred years ago and this explains why these strains possess virulence similar to the TBE viruses isolated in Russia.
  • Enhancement of Borna Disease Virus Transcription in Persistently Infected Cells by Serum Starvation
    Tetsuya Mizutani; Hisae Inagaki; Daisuke Hayasaka; Hiroaki Kariwa; Ikuo Takashima
    Journal of Veterinary Medical Science, 61, 7, 831, 834, 1999年07月, ［査読有り］
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • Enhancement of Borna disease virus transcription in persistently infected cells by serum starvation
    Tetsuya Mizutani; Hisae Inagaki; Daisuke Hayasaka; Hiroaki Kariwa; Ikuo Takashima
    J. Vet. Med. Sci., 61, 7, 831, 834, 社団法人日本獣医学会, 1999年07月
    英語, 研究論文（学術雑誌）, ボルナ病ウイルス(BDV)が持続感染しているMDCK細胞(MDCK/BDV)をウシ胎児血清を含まない培地中で培養すると, BDVの転写産物が増加することがノーザンプロット解析により明らかとなった. 特に, キャップとポリAを持たない1.9-kbのRNAは他のmRNAに比べて増加していた. このように, BDVの転写量の増加が細胞の増殖停止の影響を受けることがわかったが, N-カドヘリンによる細胞接着とは関係していなかった. 細胞の増殖を停止させてBDVの転写量を増加させる方法は, 本ウイルスの転写の機構を解明するために有効な手段になるであろう.
  • 腎症候性出血熱
    苅和宏明; 水谷哲也; 高島郁夫
    「最新医学」 6月増刊号, 54, 1425, 1431, 1999年06月
    日本語
  • Protection against tick-borne encephalitis virus isolated in Japan by active and passive immunization
    Nobuyuki Chiba; Mihoro Osada; Kimiyo Komoro; Tetsuya Mizutani; Hiroaki Kariwa; Ikuo Takashima
    Vaccine, 17, 11-12, 1532, 1539, 1999年03月
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • A Serosurvey of Borna Disease Virus Infection in Wild Rats by a Capture ELISA
    Koji Tsujimura; Tetsuya Mizutani; Hiroaki Kariwa; Kumiko Yoshimatsu; Michiko Ogino; Yuko Morii; Hisae Inagaki; Jiro Arikawa; Ikuo Takashima
    Journal of Veterinary Medical Science, 61, 2, 113, 117, 1999年02月, ［査読有り］
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • Single-step reverse transcriptase polymerase chain reaction for detection of Borna disease virus RNA in vitro and in vivo
    T Mizutani; M Ogino; Y Nishino; T Kimura; H Inagaki; D Hayasaka; H Kariwa; Takashima, I
    JAPANESE JOURNAL OF VETERINARY RESEARCH, 46, 4, 165, 169, 1999年02月, ［査読有り］
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • Pathogenicity of tick-borne encephalitis virus isolated in Hokkaido, Japan in mouse model
    Nobuyuki Chiba; Takuya Iwasaki; Tetsuya Mizutani; Hiroaki Kariwa; Takeshi Kurata; Ikuo Takashima
    Vaccine, 17, 7-8, 779, 787, 1999年02月
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • A serosurvey of Borna disease virus infection in wild rats by a capture ELISA
    Koji Tsujimura; Tetsuya Mizutani; Kumiko Yoshimatsu; Michiko Oginio; Yuko Morii; Hisae Inagaki; Jiro Arikawa; Hiroaki Kariwa; Ikuo Takashima
    J. Vet. Med. Sci., 61, 2, 113, 117, 社団法人日本獣医学会, 1999年02月
    英語, 研究論文（学術雑誌）, 近年, ボルナ病ウイルス(BDV)はヒトを含む多様な動物種に感染していることが明らかにされたが, 標準化したBDV感染の血清診断法がなく, 病原巣動物については不明のままである. そこでBDVp40蛋白質に対するモノクローナル抗体(MAb)を用いて, 非特異反応の低い血清診断法としてCapture ELISAを開発した. 本法は非特異反応を抑えることができ, IFA法と同様の検出感度であったので, 簡便に多数の検体を処理できると考えられた. そこで, 実験的にBDVを感染させたラットと北海道渡島管区上磯町内で捕獲されたドブネズミ血清106検体の抗BDV抗体のスクリーニングを行った. 実験感染ラットでは感染後2週目から陽性抗体の検出が可能となったが, ドブネズミ血清では明らかな抗体陽性例を確認できなかった.
  • Transcriptional control of Borna disease virus (BDV) in persistently BDV-infected cells
    T Mizutani; H Inagaki; D Hayasaka; S Shuto; N Minakawa; A Matsuda; H Kariwa; Takashima, I
    ARCHIVES OF VIROLOGY, 144, 10, 1937, 1946, 1999年, ［査読有り］
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • Reverse transcriptase-nested polymerase chain reaction for detecting p40 RNA of Borna disease virus, without risk of plasmid contamination
    Tetsuya Mizutani; Yoshii Nishino; Hiroaki Kariwa; Ikuo Takashima
    J. Vet. Med. Sci., 61, 1, 77, 80, 公益社団法人 日本獣医学会, 1999年01月
    英語, 研究論文（学術雑誌）, Several methods for the detection of Borna disease virus (BDV) RNA have been reported, one being the reverse transcription-nested polymerase chain reaction (RT-nested PCR) method. However, due to the possibility of contamination of the cloned DNA in a reaction tube, false-positive results might be obtained by RT-nested PCR. To detect only BDV RNA without anxiety of contamination, we developed an RT-nested PCR system using "mRNA selective PCR kit". Using this system, cDNA of BDV p40 in the plasmid (up to 5 × 107 molecules) was not amplified. BDV specific sequence was amplified from total RNA (more than 50 pg) of MDCK/BDV cells, which were persistently infected with BDV. These results indicate that this mRNA selective RT-nested PCR system can specifically amplify target RNA as distinguished from plasmid contaminated.
  • ダニ脳炎の疫学調査とワクチンによる予防法の確立に関する研究
    高島郁夫; 有川二郎; 苅和宏明; 根占哲也
    北海道の研究開発, 1998, 95, 100, 1998年12月
    日本語
  • A single-tube RT-PCR method for the detection of Borna disease viral genomic RNA.
    Mizutani T; Ogino M; Nishino Y; Kimura T; Kariwa H; Tsujimura K; Inagaki H; Takashima I
    The Japanese journal of veterinary research, 46, 2, 73, 81, 2-3, 1998年11月, ［査読有り］
    英語, For detecting Borna disease virus (BDV) genomic stranded RNA, single-tube reverse transcription-polymerase chain reaction (St RT-PCR) was developed to equal the sensitivity of RT-nested PCR but with reduced risk of contamination. BDV-genomic stranded RNA was synthesized in vitro using plasmid cDNA of BDV p24 region as a template and RNA was also extracted from BDV-persistently infected MDCK (MDCK/BDV) cells. Both RNAs were amplified by St RT-PCR in which a single round of RT and a single round of PCR were performed in the same tube. Ten copies of synthesized RNA could be amplified by St RT-PCR, indicating that St RT-PCR method is as sensitive as the ordinary RT-nested PCR method. Furthermore, this method was applied to quantify the exact copy number of genomic RNA in MDCK/BDV cells. Signals were obtained from the samples containing more than 1 pg total cellular RNA. From the results, approximately 100 copies of BDV genomic RNA exist in one MDCK/BDV cell. BDV genomic RNA from the in vivo RNA samples using St RT-PCR, indicating this method is applicable for the epidemiological study of BDV without contamination.
  • Inhibition of Borna disease virus replication by Ribavirin in persistently infected cells
    Tetsuya Mizutani; Hisae Inagaki; Koichi Araki; Hiroaki Kariwa; Jiro Arikawa; Ikuo Takashima
    Arch. Virol., 143, 10, 2039, 2044, 1998年10月
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • Antigenic characterization of Hantaan and Seoul virus nucleocapsid proteins expressed by recombinant baculovirus: Application of a truncated protein, lacking an antigenic region common to the two viruses, as a serotyping antigen
    M Morii; K Yoshimatsu; J Arikawa; GZ Zhou; H Kariwa; Takashima, I
    JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY, 36, 9, 2514, 2521, 1998年09月, ［査読有り］
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • Urine-associated horizontal transmission of Seoul virus among rats
    H Kariwa; M Fujiki; K Yoshimatsu; J Arikawa; Takashima, I; N Hashimoto
    ARCHIVES OF VIROLOGY, 143, 2, 365, 374, 1998年, ［査読有り］
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • Laboratory of Public Health
    Takashima, I; H Kariwa; T Mizutani
    JAPANESE JOURNAL OF VETERINARY RESEARCH, 45, 3, 176, 177, 1997年11月, ［査読有り］
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • Experimental Chlamydia psittaci infection of Japanese quail
    Takashima, I; M Hiyoshi; H Kariwa; R Mukaiya; N Hashimoto
    MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY, 40, 4, 265, 270, 1996年, ［査読有り］
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • Modes of Seoul virus infections: persistency in newborn rats and transiency in adult rats.
    Kariwa H; Kimura M; Yoshizumi S; Arikawa J; Yoshimatsu K; Takashima I; Hashimoto N
    Archives of virology, 141, 12, 2327, 2338, 12, 1996年, ［査読有り］
  • Production of recombinant hantavirus nucleocapsid protein expressed in silkworm larvae and its use as a diagnostic antigen in detecting antibodies in serum from infected rats.
    Yoshimatsu K; Arikawa J; Yoshida R; Li H; Yoo YC; Kariwa H; Hashimoto N; Kakinuma M; Nobunaga T; Azuma I
    Laboratory animal science, 45, 641, 646, 6, 1995年12月, ［査読有り］
  • Evidence for the existence of Puumula-related virus among Clethrionomys rufocanus in Hokkaido, Japan.
    Kariwa H; Yoshizumi S; Arikawa J; Yoshimatsu K; Takahashi K; Takashima I; Hashimoto N
    The American journal of tropical medicine and hygiene, 53, 222, 227, 3, 1995年09月, ［査読有り］
  • Characterization of the mode of Hantaan virus infection in adult mice using a nested reverse transcriptase polymerase chain reaction: transient virus replication in adult mice.
    Kariwa H; Kamimura M; Arikawa J; Yoshimatsu K; Takashima I; Hashimoto N
    Microbiology and immunology, 39, 1, 35, 41, 1, 1995年, ［査読有り］
    英語
  • Enhancement of infectivity of hantavirus in cell culture by centrifugation.
    Kariwa H; Arikawa J; Takashima I; Isegawa Y; Yamanishi K; Hashimoto N
    Journal of virological methods, 49, 2, 235, 244, 2, 1994年09月, ［査読有り］
  • Comparison of nucleotide sequences of M genome segments among Seoul virus strains isolated from eastern Asia.
    Kariwa H; Isegawa Y; Arikawa J; Takashima I; Ueda S; Yamanishi K; Hashimoto N
    Virus research, 33, 1, 27, 38, 1, 1994年07月, ［査読有り］
  • KINETICS AND CROSS-REACTIVITY OF THE VIRUS-SPECIFIC ANTIBODY-FORMING-CELLS IN MICE DURING PRIMARY AND SECONDARY INFECTION WITH JAPANESE ENCEPHALITIS-VIRUS AND RELATED FLAVIVIRUSES
    JG GARCIA; TAKASHIMA, I; H KARIWA; N HASHIMOTO
    JOURNAL OF VIROLOGICAL METHODS, 48, 1, 31, 41, 1994年06月, ［査読有り］
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • Epizootiological studies of hantavirus infection among urban rats in Hokkaido, Japan: evidences for the persistent infection from the sero-epizootiological surveys and antigenic characterizations of hantavirus isolates.
    Arikawa J; Ito M; Yao JS; Kariwa H; Takashima I; Hashimoto N
    The Journal of veterinary medical science / the Japanese Society of Veterinary Science, 56, 1, 27, 32, 1, 1994年02月, ［査読有り］
    英語, ドブネズミにおけるハンタウイルス感染の流行病学的研究を, 北海道内の1ごみ埋め立て処分場に棲息する感染ドブネズミ集団を対象に実施した. 1983年から1988年まで本処分場で合計11回の調査を継続し, 合計279例のドブネズミを捕獲し, 血清を得た. 抗体陽性例(IFA抗体価1:32倍以上)はいずれの調査時にも得られ, 陽性例は6ヵ月齢以上の成熟例では128例中94例(73.4%)で, 幼若例での151例中23例(15.2%)に比べ有意に高い, 明瞭な年齢依存性の感染が確認された, 抗体陽性ドブネズミの肺組織から1983年には1株(KI-83-262), 1985年には2株(KI-85-1, -2), 1988年には4株(KI-88-4, -11, -15, -24)のハンタウイルスが分離された. 分離ウイルスの感染性は, ウイルス分離例から得られた血清によってin vitroの試験で中和されるにもかかわらず, それらの抗原性は, 分離年次にかかわらず免疫血清や単クローン性抗体を用いたIFA法では全く, また中和試験でもわずかしか変化は認められなかった. 以上の成績からハンタウイルスはドブネズミ中で抗原性を変化させずに持続感染していることが明らかになった.
  • Application of a recombinant baculovirus expressing hantavirus nucleocapsid protein as a diagnostic antigen in IFA test: cross reactivities among 3 serotypes of hantavirus which causes hemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS).
    Yoshimatsu K; Arikawa J; Kariwa H
    The Journal of veterinary medical science / the Japanese Society of Veterinary Science, 55, 6, 1047, 1050, 6, 1993年12月, ［査読有り］
    英語, 組み換えバキュロウイルスを用いてSeoul virus SR-11株の核蛋白(NP)を昆虫細胞中に発現させ, 間接蛍光抗体(IFA)法の診断抗原として応用した. 本細胞はハンタウイルス共通抗原を発現し, 腎症候性出血熱の原因となる3種の血清型のウイルスに対する抗体を検出した. 実験感染マウスと感染ドブネズミ血清の抗体価測定の結果, 本抗原は, 従来の感染Vero細胞と同等の感度と特異性を有し, 効果的で安全な代替であることが示された.
  • IMPROVED SENSITIVITY IN THE ANTIBODY-FORMING CELL ASSAY FOR JAPANESE ENCEPHALITIS-VIRUS IN MICE BY OPTIMAL FIXATION OF CELLS AND AVIDIN-BIOTIN COMPLEX (ABC) IMMUNOCYTOCHEMISTRY
    J GARCIAGARCIA; TAKASHIMA, I; H KARIWA; N HASHIMOTO
    JOURNAL OF IMMUNOLOGICAL METHODS, 157, 1-2, 259, 267, 1993年01月, ［査読有り］
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • EFFECT OF NEUTRALIZING MONOCLONAL-ANTIBODIES ON HANTAAN VIRUS-INFECTION OF THE MACROPHAGE P388D1-CELL LINE
    JS YAO; J ARIKAWA; H KARIWA; K YOSHIMATSU; TAKASHIMA, I; N HASHIMOTO
    JAPANESE JOURNAL OF VETERINARY RESEARCH, 40, 2-3, 87, 97, 1992年09月, ［査読有り］
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • DEVELOPMENT AND APPLICATION OF PROTEIN-G ANTIBODY-ASSAY FOR THE DETECTION OF ANTIBODY TO HANTAVIRUS
    H KARIWA; J ARIKAWA; TAKASHIMA, I; N HASHIMOTO
    JOURNAL OF VIROLOGICAL METHODS, 37, 3, 345, 354, 1992年06月, ［査読有り］
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • ANTIBODY-DEPENDENT ENHANCEMENT OF HANTAVIRUS INFECTION IN MACROPHAGE CELL-LINES
    JS YAO; H KARIWA; TAKASHIMA, I; K YOSHIMATSU; J ARIKAWA; N HASHIMOTO
    ARCHIVES OF VIROLOGY, 122, 1-2, 107, 118, 1992年, ［査読有り］
    英語, 研究論文（学術雑誌）
  • ドブネズミにおける腎症候性出血熱ウイルス感染の疫学的研究
    苅和宏明; 有川二郎; よう健勝; 高島郁夫; 橋本信夫
    北海道獣医師会雑誌, 35, 3, 69, 74, 1991年03月
    日本語
■ その他活動・業績
■ 書籍等出版物
  • Animal viruses
    Transworld Research Network, 2010年
  • SARS
    Transworld Research Network, 2006年
  • Hantaviruses and Hantavirus infections
    Times New Roman, 2003年
■ 主な担当授業
  • 感染症学特別研究Ⅰ, 2024年, 博士後期課程, 国際感染症学院
  • 獣医公衆衛生学特論, 2024年, 博士後期課程, 獣医学院
  • 感染症学特別演習, 2024年, 博士後期課程, 国際感染症学院
  • 獣医公衆衛生学特論, 2024年, 博士後期課程, 国際感染症学院
  • 感染症学特別研究ⅡA, 2024年, 博士後期課程, 国際感染症学院
  • 人獣共通感染症対策専門特論, 2024年, 博士後期課程, 国際感染症学院
  • 感染症学特別研究ⅡB, 2024年, 博士後期課程, 国際感染症学院
  • 衛生学, 2024年, 学士課程, 医学部
  • 獣医公衆衛生学, 2024年, 学士課程, 獣医学部
  • 獣医疫学, 2024年, 学士課程, 獣医学部
  • アドバンスト演習, 2024年, 学士課程, 獣医学部
  • アドバンスト演習, 2024年, 学士課程, 獣医学部
  • アドバンスト演習, 2024年, 学士課程, 獣医学部
  • 畜産食品衛生学, 2024年, 学士課程, 農学部
  • 人獣共通感染症学, 2024年, 学士課程, 獣医学部
  • 獣医公衆衛生学実習, 2024年, 学士課程, 獣医学部
  • アドバンスト演習, 2024年, 学士課程, 獣医学部
■ 所属学協会
  • 人と動物の共通感染症研究会
  • 獣医疫学会
  • 日本ウイルス学会
  • 日本獣医学会
  • 日本獣医公衆衛生学会
  • The Japan Society of Veterinary Epidemiology
  • The Japanese Society for Virology
  • The Japanese Society of Veterinary Science
  • The Japanese Society of Veterinary Public Health
■ 共同研究・競争的資金等の研究課題
  • イムノクロマトグラフィーによるダニ媒介性脳炎の新規血清診断法の開発
    科学研究費助成事業
    2024年04月01日 - 2027年03月31日
    苅和 宏明; 小林 進太郎
    日本学術振興会, 基盤研究(C), 北海道大学, 24K13434
  • 野生鳥獣類に由来するウイルス性人獣共通感染症の診断法開発と比較疫学的研究
    科学研究費助成事業 基盤研究(B)
    2013年04月01日 - 2017年03月31日
    苅和 宏明; 有川 二郎; 好井 健太朗; 森松 組子
    本研究では、近年国内外で問題となっているウイルス性人獣共通感染症のうち、重篤化しやすく致死率も高いハンタウイルス感染症、ダニ媒介性脳炎、およびウエストナイル熱について簡便な診断法の開発を試みた。ハンタウイルスの核蛋白質抗原とし、様々なげっ歯類の抗体検出が可能なELISAとイムノクロマトグラフィー法を開発した。IgGもしくはStrep-tagを付加したダニ媒介性脳炎ウイルスのウイルス様粒子 (SPs) を用いた抗体検出用のELISAを開発した。相同組換えを利用した、安定性の高いウエストナイルウイルスのリバースジェネティック法を開発した。
    日本学術振興会, 基盤研究(B), 北海道大学, 研究代表者, 競争的資金, 25304040
  • 近隣地域からの侵入が危惧されるわが国にない感染症の発生予防に関する研究
    厚生労働科学研究費補助金
    2013年04月 - 2016年03月
    苅和 宏明
    厚生労働省, 研究代表者, 競争的資金
  • フラビウイルス脳炎の病態におけるウイルス抵抗性遺伝子ＯＡＳの役割
    科学研究費助成事業 若手研究(B)
    2012年04月01日 - 2014年03月31日
    好井 健太朗; 苅和 宏明
    フラビウイルスには人獣共通感染症の原因ウイルスが多く属しており、その中にはヒトや家畜に重篤な脳炎を引き起こす病原体もある。本研究では、フラビウイルス特異的抵抗性遺伝子であるOas1bを正常に発現するコンジェニックマウスを使用することで、脳炎のより詳細な病態解析が可能なことを示した。さらに、ダニ媒介性フラビウイルスの高病原性化には、哺乳動物への適応により生じる3'非翻訳領域の変異が重要であることを明らかにした。
    日本学術振興会, 若手研究(B), 北海道大学, 24780293
  • 海外からの侵入が危惧される野生鳥獣媒介性感染症の疫学、診断・予防法等に関する研究
    厚生労働科学研究費補助金
    2010年04月 - 2013年03月
    苅和 宏明
    厚生労働省, 研究代表者, 競争的資金
  • わが国とアメリカ大陸のウイルス性人獣共通感染症の流行阻止のための研究
    科学研究費補助金
    2009年04月 - 2013年03月
    苅和 宏明
    日本学術振興会, 研究代表者, 競争的資金
  • わが国とアメリカ大陸のウイルス性人獣共通感染症の流行阻止のための研究
    科学研究費助成事業 基盤研究(B)
    2009年 - 2012年
    苅和 宏明; 有川 二郎; 好井 健太朗; 森松 組子; 高島 郁夫
    メキシコのげっ歯類から3種類の新規ハンタウイルスを検出した。各種ハンタウイルス感染の検査に応用可能な抗体検出法を開発した。メキシコのハンタウイルスのヌクレオキャプシド(NP)に対して作出されたモノクローナル抗体6種類のうち5種類はげっ歯類を宿主とするハンタウイルスに対して広く反応した。ウエストナイルウイルスのE蛋白上の糖鎖の有無がニワトリのヒナにおける病原性発現に大きな影響を与えることが判明した。
    日本学術振興会, 基盤研究(B), 北海道大学, 21405035
  • ウイルス抵抗性遺伝子OASを介したフラビウイルス特異的感染防御機構の解析
    科学研究費助成事業 若手研究(B)
    2010年 - 2011年
    好井 健太朗; 高島 郁夫; 苅和 宏明; 安居院 高志
    感染症に対する宿主側の自然免疫による防御機構において、オリゴアデニル酸合成酵素(OAS)は重要な働きを持つ。中でもげっ歯類のOAS遺伝子ファミリーのOas1bはフラビウイルス感染を特異的に防御する。本研究では、このOas1bによるフラビウイルス特異的な感染防御機構を解析することで、OASがフラビウイルスの感染時におけるウイルスの排除や病態形成に重要な役割を果たしていることを示した。
    日本学術振興会, 若手研究(B), 北海道大学, 22780268
  • 国内で発生のないベクター媒介性感染症の疫学診断法等の研究
    厚生労働科学研究費補助金
    2007年04月 - 2010年03月
    苅和 宏明
    厚生労働省, 研究代表者, 競争的資金
  • 日本に侵入する危険性の高い北米産ウイルス性人獣共通感染症の疫学的研究
    科学研究費補助金
    2004年04月 - 2008年03月
    苅和 宏明
    日本学術振興会, 研究代表者, 競争的資金
  • 齧歯類におけるハンタウイルス持続感染成立機構(感染免疫担当細胞の機能)の解析
    科学研究費助成事業 基盤研究(B)
    2006年 - 2008年
    有川 二郎; 森松 組子; 遠藤 理香; 苅和 宏明; 森松 組子; 苅和 宏明; 垂石 みどり
    ハンタウイルスは持続感染齧歯類が感染源となる人獣共通感染症でヒトに腎症候性出血熱やハンタウイルス肺症候群という重篤な疾病を引き起こす。齧歯類は血中に高い中和抗体を保有しつつ不顕性にウイルスを排泄し続けるというきわめて特徴的な持続感染を成立させている。本研究では齧歯類におけるウイルス特異的CTL抑制を中心とする免疫抑制を介したハンタウイルス持続感染成立機構の詳細を明らかにすることを目的とする。
    日本学術振興会, 基盤研究(B), 北海道大学, 18300136
  • 日本と北ユーラシアのウイルス性人獣共通感染症の比較疫学的研究
    科学研究費助成事業 基盤研究(A)
    2005年 - 2008年
    高島 郁夫; 苅和 宏明; 前田 秋彦; 有川 二郎; 橋本 信夫
    近年、国内外で問題となっているウイルス性人獣共通感染症のうち、侵入または流行の危険性があり、重篤に経過し致死率が高いウエストナイル熱、ダニ媒介性脳炎およびハンタウイルス感染症について診断法を開発し、疫学調査を実施し、分離ウイルスの性状解析を行った。
    ウエストナイルウイルスと日本脳炎ウイルスの遺伝子鑑別診断法としてリアルタイムPCR法を開発した。さらに準ウイルス粒子とウイルス様粒子を用いた血清学的な鑑別診断法を開発した。極東ロシアの野鳥の中和抗体を測定したところ、91羽中15羽(16.5%)にウエストナイル特異的な中和抗体が検出されたことから、極東ロシアの野鳥間にウエストナイルウイルスの流行していることが示唆された。
    ダニ媒介性脳炎については準ウイルス粒子を用いたヒトおよび野ネズミ用の抗体検出ELISA を開発した。本ELISAを用いて国内各地の野ネズミ血清について抗体調査を実施したところ、島根県の野ネズミ58検体中2検体がダニ媒介性脳炎ウイルス特異抗体陽性となり、新しいウイルス汚染地が特定された。
    ハンタウイルス感染症では、ウイルス核タンパクを対象にしたヒトおよび野ネズミの抗体検出ELISA および抗原検出ELISAを開発した。この抗体検出ELISAを用いてタイのレプトスピラ感染症を疑われた患者に、ハンタウイルス抗体陽性例を検出したため、ハンタウイルス感染症と症状の関連が示唆された。ロシアのボルガ川流域のサマラ市において、野ネズミの疫学調査を行い、流行中のウイルスはPuumala型のハンタウイルスであることを明らかにした。北海道の中川町と当別町においてエゾヤチネズミの疫学調査を行い、ハンタウイルスの野ネズミ集団内では、オスがメスよりも有意に高い感染率を示すことを明らかにした。
    日本学術振興会, 基盤研究(A), 北海道大学, 17255009
  • 日本に侵入する危険性の高い北米産ウイルス性人獣共通感染症の疫学的研究
    科学研究費助成事業 基盤研究(B)
    2004年 - 2007年
    苅和 宏明; 高島 郁夫; 有川 二郎; 吉松 組子
    本研究では、日本国内に侵入または流行の危険性の高いウエストナイル熱とハンタウイルス感染症について、診断法を開発するとともに、疫学調査を実施した。
    1)ウエストナイル熱の診断法開発:ウエストナイルウイルス感染の日本への侵入を監視するため、抗ウエストナイルウイルス抗体の検出法として微量中和法や阻害ELISA法を開発した。
    2)ロシア国内で捕獲された鳥類におけるウエストナイルウイルスの感染調査:ロシアウラジオストック近郊のハンカ湖とハバロフスク北部のアニュイ川河畔で捕獲された98例の鳥類の腎臓からReal-time PCRによりウエストナイルウイルスの遺伝子検出を行ったが、いずれの検体からもウイルス遺伝子は検出されなかった。しかし、微量中和法により血清の得られた91例中うち15例から抗ウエストナイルウイルス抗体が検出され、極東ロシアで野鳥においてウエストナイルウイルスの感染のあることが示唆された。極東ロシアからは日本に渡り鳥が多数飛来することから、今後わが国におけるウエストナイル熱の防疫体制の強化が強く望まれる。
    3)メキシコのげっ歯類におけるハンタウイルス感染症の疫学調査:北アメリカ産ハンタウイルスのS遺伝子を標的としたRT-PCRによる遺伝子検出法を開発した。そこでメキシコ国内で捕獲されたげっ歯類213例の肺からRNAを抽出し、RT-PCRによりハンタウイルス遺伝子の検出を試みたところ、21例からウイルス遺伝子が検出された。これらの遺伝子の検出された個体の21例中19例では抗体も検出された。したがって、これまでハンタウイルスの流行が明らかにされていなかったメキシコにおいて、げっ歯類にハンタウイルスが感染していることが判明した。
    日本学術振興会, 基盤研究(B), 北海道大学, 16405034
  • 動的構造解析法によるプリオンの構造と異常型への変遷機構の解明
    科学研究費助成事業 基盤研究(B)
    2005年 - 2006年
    稲波 修; 堀内 基広; 苅和 宏明; 稲葉 睦; 桑原 幹典
    BSEやCJDなどのプリオン病では、構造異常を呈する異常型プリオンタンパク質(PrPSc)が正常型PrPCと相互作用し、その高次構造を異常型に変換させ、病態を引き起こすと考えられている。このPrPの構造変化機構には、酸性エンドソームが関与していると考えられている。本研究ではsite-directed spin labeling (SDSL)法を用い、αヘリックス1(H1)の裏側、βシート1(S1)とβシート2(S2)の3つのpH感受性領域をESRによる解析で見出した。近年、molecular dynamics (MD) simulationを用いた研究により、酸性pHが引き起こすPrPSc様のβ-sheet-rich構造への転換にアスパラギン酸177(Dl77)とヒスチジン186(H186)が重要な役割を持つと報告されたが、実際には実験的な証明はなされていない。本研究ではさらにD177とR163が形成する塩橋とH176とH186の2つのヒスチジン残基について、β-sheet2(S2)のpH感受性に対する影響をSDSL-ESR法で解析した。その結果、D177が形成する塩橋の形成がS2の中性付近でのβシート構造の維持に重要であることが明らかとなったが、近傍のH176の存在がこの構造安定性にも重要であることが見いだされた。また、H186のCJD変異についてはS2の構造安定化には寄与しておらず、βシート領域以外の別の構造変化がPrps^cの形成の引き金となることが示唆された。以上の結果は、D178Nといったアミノ酸の突然変異で発症する遺伝性CJDやFFIは、S2の構造変化が引き金となりPrPScが形成されると考えられる。また、本研究では、シングルラベルしたプリオンタンパク質にパルスESR法を適応することにより、低pHあるいは塩酸グアニジンにより誘導されるプリオン凝集体で見られる距離情報を得ることが出来ることも見いだした。これは将来、他種類のシングルラベルしたプリオンタンパク質に適応することにより、異常型プリオンの構造情報を得ることが出来る方法として期待できるものである。
    日本学術振興会, 基盤研究(B), 北海道大学, 17380178
  • 日本と極東ロシアの野生げっ歯類を病原巣動物とする人獣共通感染症の比較疫学的研究
    科学研究費補助金
    2001年04月 - 2004年03月
    苅和 宏明
    日本学術振興会, 研究代表者, 競争的資金
  • わが国のげっ歯類を病原巣動物とするウイルス性人獣共通感染症の疫学的研究
    科学研究費補助金
    2001年04月 - 2004年03月
    苅和 宏明
    日本学術振興会, 研究代表者, 競争的資金
  • 西ナイルウイルスの日本上陸に備えた、蚊における新しい感染防御システムの開発
    科学研究費助成事業 基盤研究(C)
    2003年 - 2004年
    水谷 哲也; 江下 優樹; 苅和 宏明; 倉根 一郎
    本研究の目的は、蚊の発育におけるJNKの生物学的機能を明らかにするとともに、JNKの機能を阻害することにより蚊の発育を抑制する方法を確立し、新しい殺虫剤の開発のための基礎研究を行なうことにあった。
    平成15,16年度の研究から以下のことが明らかになった。
    1.JNKの阻害剤(SP600125)をヒトスジシマカの1齢幼虫に暴露することにより、発育を阻害することに成功した。蚊の培養細胞では、JNKは抗アポトーシスの働きをしていることを確認した。
    2.リポポリサッカライド(LPS)を蚊の細胞に添加することにより、JNKの活性化が観察され、抗細菌ペプチドをコードしていると考えられる新規遺伝子を発見した。
    3.JNKの機能を幼虫で評価するために、siRNAによる機能阻害方法について検討した。3齢幼虫にsiRNAをマイクロインジェクションすることにより成虫になる割合を激減させることに成功したが、多くの幼虫に施すことは不可能であった。そこで、市販のトランスフェクション試薬を検討したが、マイクロインジェクションに勝る方法を発見することはできなかった。導入方法については引き続き検討を行なっている。
    4.放線菌から採取された種々のキチナーゼの阻害剤を含むと思われる培養液中で1齢幼虫を飼育し、2種類の培養液で発育が阻害された。阻害物質をコードする遺伝子を同定している。
    本研究から、ヒトスジシマカの幼虫においてJNKが重要な働きをしていることが明らかとなった。また、キチナーゼを阻害することも発育阻害に重要なことが明らかとなった。
    日本学術振興会, 基盤研究(C), 国立感染症研究所, 15580270
  • 西ナイル熱ウイルスなどのフラビウイルス感染症の診断法、疫学および予防法
    科学研究費助成事業 基盤研究(A)
    2002年 - 2004年
    高島 郁夫; 苅和 宏明; 森田 公一; 只野 昌之; 竹上 勉; 江下 優樹; 水谷 哲也
    本研究において、日本に存在しているかまたは侵入の可能性のあるフラビウイルス感染症の流行予防のための診断法の開発、病原性の解明および蚊の調査に関する研究を実施して以下の成果を得た。
    1.診断法の開発
    1)ウエストナイル熱について、RT-PCR RFLP法、リアルタイムPCR法およびRT-LAMP法による遣伝子診断法を開発した。この方法によると簡便な設備により、ウエストナイルウイルスと日本脳炎ウイルスおよびウエストナイルウイルス株間の簡別診断が可能となった。
    2)ダニ媒介性脳炎の迅速な血清診断法として、ウイルス株粒子を用いたヒト用のIgGおよびIgM-ELISA法を開発した。
    2.病原性の解明
    1)ウエストナイルウイルスの神経侵襲性毒力がウイルスエンベロープ蛋白への糖鎖付加により決定されることを明らかにした。
    2)ダニ媒介性脳炎ウイルスの神経侵襲性毒力は、ウイルスエンベロープ蛋白の1個のアミノ酸の置換により電荷が陽性に変化することにより低下することが示された。
    3)ダニ媒介性脳炎ウイルスの感染性cDNAクローンを用いた解析により、NS5とエンベロープ蛋白における各々一ヶ所のアミノ酸変異が神経毒力の低下に相乗的に作用していることが示唆された。
    3.蚊の調査
    1)ウエストナイルウイルスに対する、日本産蚊4種アカイエカ、イナトミシオカ、ヒトスジシマカの感受性、およびアカイエカの媒介能を証明した。
    2)ウエストナイルウイルス・デングウイルス媒介蚊ヒトスジシマカのJNKタンパクの機能を解析した。
    日本学術振興会, 基盤研究(A), 北海道大学, 14206036
  • 組換え可溶性外被蛋白を用いたハンタウイルスワクチンおよび迅速診断キットの開発
    科学研究費助成事業 基盤研究(B)
    2001年 - 2003年
    森松 組子; 小野 恵利子; 森松 正美; 苅和 宏明; 有川 二郎
    1.CAG promotorを用いて発現させた組み換えハンタウイルスエンベロープ蛋白が細胞融合活性を持つことを明らかにした。ハンタウイルスの中和エピトープの中央に細胞融合関連エピトープが位置することから、この組み換え蛋白が中和エピトープを保持していることが示された。また、同時に核蛋白抗原もCAG promotorを用いて発現させることに成功し、エンベロープ蛋白との相互作用について検討した。その結果核蛋白はエンベロープ蛋白の発現と輸送を押さえる可能性があること。この二つの蛋白のみではウイルス様粒子は形成されないことが示された。
    2.CAG promotorを用いて発現させた組み換えハンタウイルスエンベロープ蛋白を用いて、外皮のみがハンタウイルスエンベロープ蛋白であり、内部が不稔のvesicular stomatitis virus (VSV)であるPseudotype VSV (VSVΔG^*HTN)を作製し、迅速で安全な中和抗体測定システムを構築した。また、分泌型の組み換えハンタウイルスエンベロープ蛋白を抗原としてマウスへ免疫し、中和抗体の誘導の可否を検討した。その結果、中和抗体は誘導されなかった。そのため、次にVSVΔG^*HTN粒子を抗原としてワクチネーションを試みた。その結果、免疫されたマウスにはエンベロープ蛋白に対する抗体の上昇が確認された。さらにこのマウスに攻撃接種したところ、核蛋白に対する抗体の上昇、および活性はほとんど見られず、感染が防御されたと考えられた。以上のことから、エンベロープ蛋白をウイルス様にパッケージングすることで、感染防御活性を有する抗体応答が得られることが分かった。これらの結果から、この組み換え蛋白を用いた安全なワクチン開発の可能性が示された。
    日本学術振興会, 基盤研究(B), 北海道大学, 13556046
  • 日本と極東ロシアの野生げっ歯類を病原巣動物とする人獣共通感染症の比較疫学的研究
    科学研究費助成事業 基盤研究(B)
    2001年 - 2003年
    苅和 宏明; 有川 二郎; 水谷 哲也; 高島 郁夫; 岩崎 琢也
    本研究ではげっ歯類を病原巣動物とする人獣共通感染症のうち、ハンタウイルス感染症とダニ媒介性脳炎を対象に主にげっ歯類を中心に疫学調査を行い、両感染症の極東ロシアにおける感染状況を明らかにすることを試みた。
    これまでに本研究により極東ロシアのウラジオストック周辺で捕獲されたハントウアカネズミがヒトに重症型の腎症候性出血熱(HFRS)を引き起こす新型のハンタウイルス(Amurウイルス)を保有していることが判明した。ハントウアカネズミは中国や韓国、および北海道にも分布することから、東アジアでハントウアカネズミによって媒介されるHFRSが発生していることが示唆された。極東ロシアで検出されたAmurウイルスに近縁のウイルス(H5とB78株)が中国のHFRS患者から分離されていることから、これらの中国由来株の遺伝子性状と抗原性状について解析を行い、H5とB78株のSとM遺伝子全長の塩基配列を明らかにした。これら中国由来株と極東ロシアのAmurウイルスの核蛋白のアミノ酸配列はそれぞれ98%以上の高い一致率を示した。また中国株のウイルスの抗原性はこれまで知られていたHantaan型と明らかに異なることが判明した。ダニ媒介性脳炎ウイルスの北海道分離株であるOshima5-10株をプラック精製して、大型のプラックを形成する細胞馴化株を得た。本株の遺伝子解析の結果、ウイルス糖蛋白上の糖付加部位のアミ.ノ酸が変異して糖鎖が失われたことが明らかになった。さらにこの株はマウスに対して親株よりも非常に弱い病原性しか示さないことから、糖鎖の付加がウイルスの毒力に関連することが示された。
    日本学術振興会, 基盤研究(B), 北海道大学, 13575029
  • わが国のげっ歯類を病原巣動物とするウイルス性人獣共通感染症の疫学的研究
    科学研究費助成事業 基盤研究(C)
    2001年 - 2003年
    苅和 宏明; 有川 二郎; 水谷 哲也; 高島 郁夫; 福島 博; 土屋 公幸
    本研究ではげっ歯類を病原巣動物とする人獣共通感染症のうち、ハンタウイルス感染症とダニ媒介性脳炎を対象に主にげっ歯類を中心に疫学調査を行い、両感染症の日本における感染状況を明らかにすることを試みた。
    まず、北海道、宮崎県、富山県、島根県、でげっ歯類の捕獲調査を行い、捕獲されたげっ歯類についてハンタウイルス抗体の検出を試みた。北海道では捕獲されたげっ歯類のうち、,エゾヤチネズミとドブネズミで抗体が検出された。特に千歳空港で捕獲されたエゾヤチネズミと小樽港のドブネズミに抗体が検出されたことから、空港と港湾でのネズミ類の防除対策の強化が必要と考えられた。北海道のエゾヤチネズミが保有するウイルスを分離するために、様々な動物にウイルスを接種して最適な動物種を探索したところ、スナネズミが実験動物の中でも最も感受性が高かった。そこで、スナネズミにエゾヤチネズミの材料を接種して2回継代し、さらに培養細胞に接種したところ、接種細胞中にウイルス抗原とウイルス遺伝子が検出され、分離に成功したことが確認された。さらに本ウイルスのS遺伝子とM遺伝子の全長の塩基配列の決定により、それぞれの遺伝子がコードする核蛋白と糖蛋白のアミノ酸配列が明らかになった。本ウイルスの核蛋白と糖蛋白のアミノ酸配列は最も近縁と考えられていたヨーロッパのPuumalaのウイルスとそれぞれ5%と10%の相違があり、本ウイルスが独立したウイルス型に属するものと考えられた。
    また、ダニ媒介性脳炎の抗体測定にはこれまで中和試験が主に使用されてきたが、危険度の高い生きたウイルスを用いたことや、時間がかかるなどの欠点があった。そこで、ウイルス遺伝子を含まない非感染性のウイルス様粒子(VLP)を作出し、VLPを用いたELISAを開発した。本法により、ダニ媒介性脳炎患者の抗体を安全で迅速に検出することが可能になった。
    日本学術振興会, 基盤研究(C), 北海道大学, 13660311
  • SARSコロナウイルスのウイルス粒子形成機構に関する研究
    2003年
    競争的資金
  • Study on the mechanism of virion formation of SARS-coronavirus
    2003年
    競争的資金
  • ダニ媒介脳炎の鑑別診断法とワクチンの開発に関する研究
    科学研究費助成事業 基盤研究(B)
    2000年 - 2002年
    高島 郁夫; 高橋 健一; 水谷 哲也; 苅和 宏明; 倉田 毅; 根占 哲也
    本研究では北海道で近年発見されたダニ媒介脳炎(TBE)の具体的予防対策のために、安全で簡便な血清診断法を開発し、血清疫学調査によりウイルス汚染地を特定した。さらに近年ロシア等の流行地で流行しているウイルス株に対する市販のワクチンの効果を評価した。
    まずTBEウイルス渡島株に対して単クローン性抗体(Mab)を作出しこれらMabを用いた蛍光抗体法により、迅速なウイルス同定法を確立した。次に1999年〜2000年にロシアのハバロフスク市周辺、ウラジオストック市周辺およびイルクーツク市周辺で採集したマダニ類からウイルスを分離して遺伝子解析を行った。ハバロフスクおよびウラジオストックから分離されたTBEウイルス株はすべて極東型と同定された。一方イルクーツクからのウイルス株はすべてシベリア型と同定された。TBEウイルス極東型株とシベリア型株に対するヨーロッパ型TBEウイルスワクチンの効果を判定した。ワクチン接種者は極東型およびシベリア型TBEウイルスに対して良好な中和抗体応答を示した。さらにマウスにおけるワクチン効果を判定したところ、ワクチン接種マウスは両ウイルス株の攻撃に対して有意な防御を示した。従ってTBEウイルスヨーロッパ型ワクチンは現在シベリアと極東地区に流行しているTBEウイルスに有効であることが判明した。遺伝子工学的手法により、TBEウイルスのウイルス様粒子(VLP)を作出し、ELISAによるTBEの血清診断に応用した。IgM-ELISAにより極東ロシアのTBE患者血清を用いて調べたところ、敏感度と特異性に優れた方法であることが判明した。
    日本学術振興会, 基盤研究(B), 北海道大学, 12556051
  • 日本で分離されたダニ媒介脳炎ウイルスの病原性と起源に関する研究
    科学研究費助成事業 基盤研究(B)
    1999年 - 2001年
    高島 郁夫; 高橋 健一; 岩崎 琢也; 苅和 宏明; 水谷 哲也; 丸山 務
    本研究ではダニ媒介脳炎の予防対策の資料とするため、北海道におけるウイルス汚染地の特定、マウスを用いた北海道株の病原性の評価およびヨーロッパ型ワクチンの北海道ウイルス株に対する効果判定について検討を加えた。さらに北海道株の分岐時代を極東型との系統学的な比較により推定した。またシベリア地域に分布するウイルス株の亜型を明らかにした。
    ダニ媒介性脳炎(TBE)ウイルス北海道Oshima株はマウスにおいて他のTBEウイルス株と共通の病原性を示した。北海道におけるTBEウイルスの汚染地はウマとイヌの血清疫学調査によって渡島、檜山、胆振および後志の道南4支庁に及ぶことが判明した。エゾアカネズミとエゾヤチネズミからTBEウイルスが分離されたことから、これらの野ネズミがTBEウイルスの病原性動物と推定された。北海道と極東ロシアで分離されたTBEウイルスの系統樹解析を実施した。北海道株は極東型と判明した。さらに同義置換率の解析からこれらのウイルスの進化速度を算出し、分岐年代を推定したところ、北海道と極東株は260〜430年前に分岐したと推定された。シベリアと極東ロシアに分布するTBEウイルス株の性状を解析した。この結果極東型ウイルスに加え新しいシベリア型ウイルスの存在が明かとなった。ヨーロッパ型のTBEウイルスワクチンの効果をマウスでの防禦試験とヒトでの中和抗体産生能で調べた。本ワクチンはTBEウイルス北海道株、極東株およびシベリア株に有効であることが判明した。
    日本学術振興会, 基盤研究(B), 北海道大学, 11460143
  • 実験用小動物から微量部分採血された血清を用いた感染症血清診断法の確立に関する研究
    科学研究費助成事業 基盤研究(B)
    1999年 - 2001年
    有川 二郎; 森松 組子(吉松 組子); 苅和 宏明; 佐藤 浩; 高倉 彰
    1.ハンタウイルス抗体測定用の抗原として、大腸菌とバキュロウイルスを発現ベクターとしてハンターン型、ソウル型およびドブラバ型のそれぞれの核蛋白抗原の発現に成功し、いずれも、ELISA法診断用抗原として利用が可能である活性と量が得られることが判明した。
    2.バキュロウイルス発現ベクターによって、核蛋白のN末端50アミノ酸を削除した抗原を発現させてELISAへ応用すると、血清型鑑別抗原として応用可能であることが、患者血清および感染げっ歯類血清を用いて確認された。
    3.マウス肝炎ウイルス(MHV)核蛋白コード遺伝子をイーストの系で発現することに成功した。培養上清中の発現のピークは培養後72時間であった。しかし、ELISAにおける反応性が低く、発現系および核蛋白内の発現部位の再検討が今後の課題である。
    4.リンパ球性脈絡髄膜炎(LCM)ウイルス国内分離株及びプロトタイプ株の核蛋白コード領域遺伝子をクローニングし、全長、C末領域および中間領域の3つの領域についてそれぞれCOS細胞での発現に成功した。それぞれの両域抗原の診断的有用性の検討が今後必要である。
    5.LCMウイルス核蛋白発現バキュロウイルスを国立感染症研究所から分与を受け、その抗原性を検討した。その結果、感染Sf9細胞はIFA抗原として、また、Tm5細胞にて増殖させたウイルスはELISA抗原に適していることが判明した。本抗原と両診断法を用いて、わが国のマウス動物実験施設、延べ1,117施設由来9,840検体を対象に血清のスクリーニングを行った結果、ELISAは大量検体処理のためのスクリーニング試験に、IFAはその結果の確認試験に有用であることが示された。
    日本学術振興会, 基盤研究(B), 北海道大学, 11558096
  • 本邦と極東ロシアのげっ歯類におけるハンタウイルスの比較疫学的研究
    科学研究費補助金
    1998年04月 - 2000年03月
    苅和 宏明
    日本学術振興会, 研究代表者, 競争的資金
  • ハンタウイルスの病原性の分子生物学的解析
    科学研究費助成事業 基盤研究(B)
    1999年 - 2000年
    有川 二郎; 森松 組子; 苅和 宏明; 高島 郁夫; 森川 茂
    1.中国側研究分担者の所属研究機関を訪問し中国では地域的に強毒と弱毒のハンタウイルスが流行している可能性が示唆された。また、中国におけるワクチン開発の現状と有効性について情報を得た。さらに各国流行株と中国株の遺伝子の相互関係の解析ならびに血清型鑑別診断法の技術交流を行った。
    2.スロバキア研究分担者の研究所を訪問し、欧州におけるハンタウイルス遺伝子解析に関する情報交換と技術習得を行った。
    3.日本側研究協力者を米国側研究分担者の研究所に派遣しレセプター解析と遺伝子再集合ウイルス作製のための情報交換と技術交流を行った。
    4.日本側研究協力者を米国Wisconsin大学獣医学部に派遣しcDNAから人工的にハンタウイルスを合成するための基礎的技術の習得を行った。
    5.ヘルシンキ大学、Vaheri博士から北欧流行ハンタウイルスの病原性規定因子についての研究打ち合わせを行うと同時に、当該研究分野の他の研究者と共に情報交換を行った。
    6.東南アジア流行ウイルスとの比較を目的にウイルス株および患者と感染動物の血清の取得の可能性について情報交換を行った。
    7.ハンタウイルスの感染がGalNacを特異的に認識するレクチンであるDBAとSBAによって増強されること、ならびに感染過程でのウイルスと細胞膜の融合には細胞側の因子が関与することを明らかにした。
    8.マウスへの病原性が末梢組織での増殖効率が高いことが関連し、エンベロープ蛋白の単一アミノ酸の変異が規定していることを明らかにした。
    9.遺伝子再集合ウイルス作成のためにウイルス遺伝子の発現をMとS遺伝子について完了した。また、転写、複製機構解明のためのミニゲノムを作成した。今後、それら遺伝子発現蛋白とミニゲノムの発現の確認が課題である。
    日本学術振興会, 基盤研究(B), 北海道大学, 11694228
  • ハンタウイルスの中枢神経系及び免疫系組織における持続感染成立機構解析に関する研究
    科学研究費助成事業 基盤研究(A)
    1998年 - 2000年
    有川 二郎; 森川 茂; 苅和 宏明; 森松 組子
    1.ハンタウイルスの感染効率が、N-アセチルガラクトサミン結合性レクチン(DBAとSBA)を添加することにより約10倍増強され、細胞表面上のレセプター又はその近傍にあるN-アセチルガラクトサミンとウイルスをレクチンが架橋することにより吸着効率が増強するためと考えられた。
    2.ハンタウイルス感染後、細胞融合を惹起する細胞株と起こさない細胞株の確立に成功し、ハンタウイルスエンベロープ蛋白が引き起こす感染細胞融合には細胞側因子も関与していることを明らかにした。
    3.強毒株感染マウスでは脳へのウイルスの到達が弱毒株に比べ4-5日早いことがその後の全身感染の拡大と致死的転帰につながるものと考えられた。
    4.強毒株は脳微小管内皮細胞と腹腔マクロファージにおいて弱毒株よりも高い増殖率を示したが、神経芽腫細胞では両ウイルスに差は認められなかったことからウイルスの病原性には末梢の標的細胞での増殖率が関連していると考えられた。
    5.強毒と弱毒ハンタンウイルス間で遺伝子分節の交換された遺伝子再集合ウイルスを作成し、病原性と関連するウイルス側の要因を解析した結果、Mセグメント遺伝子中のアミノ酸変異(515番目アミノ酸、IleからThr)が病原性に関連し、Lセグメントも部分的に関連することが明らかになった。
    6.強毒株感染SCIDマウスに、感染3週後のBALB/cマウス由来脾臓細胞を移入したところ、感染3週目に移入した場合、移入4日目から著しい体重減少が一過性に認められ、免疫関連の病原性発現機構が確認された。
    7.ハンタンウイルスの核蛋白遺伝子(S分節)とエンベロープ蛋白遺伝子(M分節)をクローニングし、哺乳動物細胞(293T細胞)で高率に発現させることに成功した。
    8.Lセグメントの発現系の確立を目的にLセグメントRNA全長のクローニングに成功した。今後、この発現の有無について検討を加える予定である。
    日本学術振興会, 基盤研究(A), 北海道大学, 10306019
  • 本邦と極東ロシアのげっ歯類におけるハンタウイルスの比較疫学的研究
    科学研究費助成事業 基盤研究(C)
    1998年 - 1999年
    苅和 宏明; 水谷 哲也; 有川 二郎; 高島 郁夫; 吉松 組子
    我が国や極東口シアにおいてハンタウイルスの疫学調査を行い、以下のことが明らかになった。
    1.実験的に作出した感染ラットの尿中にウイルスが排泄され、この尿を感受性ラットに経鼻的に滴下することにより感染が成立すること、さらに尿接種によって感染したラットの尿からもウイルスが検出されたことから、尿を介した経鼻伝播で本ウイルスが自然界で維持されうることが明らかになった。
    2.パキュロウイルスで様々なハンタウイルスの核蛋白を発現させ、これらを抗原に用いたELISA法を開発した。本法により、抗体保有が判定できるばかりでなく、血清を異なった抗原に反応させることで、感染したハンタウイルスの型までも類推することが可能となった。
    3.ハンタウイルス肺症候群(HPS)患者の体内のウイルス量を測定するために定量的PCR法を開発した。このPCR法により、HPSの急性期には高力価のウイルスが血中に存在するが、感染の回復期にはウイルスはもはや血中から消失することが明らかにされた。
    4.複数の血清診断法を用いて、我が国のヒトにおける大規模なハンタウイルスの血清疫学調査を行った。健常者では抗体保有者は全く存在しないにもかかわらず、原因不明の肝炎患者においては約2〜3%の患者がハンタウイルス抗体を保有することが判明した。これにより、本邦でも一般の市民にハンタウイルスの感染があることが明らかになった。
    5.極東口シアのウラジオストックでげっ歯類の捕獲調査を行い、日本の北海道と同じくエゾヤチネズミがハンタウイルスに感染していることが明らかになった。また、日本には生息していないセスジネズミも抗体を保有しており、極東ロシアにおいて強毒のHantaan型のハンタウイルスの存在が示唆された。また、ヨシハタネズミからウイルス遺伝子が検出され、塩基配列の解読を行ったところ、まったく新しい型のハンタウイルスであることが、判明した。
    日本学術振興会, 基盤研究(C), 北海道大学, 10660296
  • フラビウイルスの疫学的研究
    1999年
    競争的資金
  • Epidemiological study of flaviviruses
    1999年
    競争的資金
  • 野生げっ歯類を病原巣とする人畜共通伝染病の診断法、予防法および疫学に関する研究
    科学研究費助成事業 基盤研究(A)
    1996年 - 1998年
    高島 郁夫; 丸山 務; 森田 千春; 金子 賢一; 有川 二郎; 苅和 宏明; 小川 益男
    1. ダニ媒介脳炎の成績:ウマ、イヌおよび野ネズミの血清を用いた疫学調査を実施したところ、ウイルスの汚染地は道南の4支庁を中心に広範に分布していることを明らかにした。ダニ媒介脳炎の患者発生地区で採集したヤマトマダニ600匹から2株のウイルス分離に成功した。さらに、エゾアカネズミ11匹中1匹とエゾヤチネズミ79匹中1匹からダニ媒介性脳炎ウイルスを分離した。先に犬から分離したダニ媒介脳炎ウイルスのOshima株の病原性をマウスモデルで検討したところ、本ウイルス株はダニ媒介脳炎ウイルスに共通する神経侵襲性を示した。オーストリア産のダニ媒介脳炎ウイルスワクチンはOshima株に有効なことがマウスの実験感染とヒトの中和抗体産生で証明された。
    2. ハンタウイルス感染症の成績:遺伝子学的手法を用いたハンタウイルスの血清診断法を確立するために、バキュロウイルス発現ハンタウイルス組み換え蛋白を用いたELISA法を開発し、実験用ラットを対象としたスクリーニングテストとして実用化した。
    3. Q熱の成績:Q熱リケッチア(Coxiella burnetii)の日本分離株は、16SrRNAの塩基配列が,株間で99.4%と高い相同性を示し、これらは1属1種であることが確認された。さらに野外にはモルモットに対して病原性の異なるI相菌が存在することが明らかになった。
    4. その他の人畜共通伝染病の成績:エルシニア属菌、サルモネラ属菌、紅班熱リケッチアに野ネズミが高率に汚染していることが明らかになった。
    日本学術振興会, 基盤研究(A), 北海道大学, 08306018
  • 北海道で発生したウイルス性ダニ脳炎の診断法、予防法および疫学に関する研究
    科学研究費助成事業
    1995年 - 1997年
    高島 郁夫; 苅和 宏明
    1.ダニ脳炎患者の発生と診断;1993年、道南の上磯町の酪農家の主婦が重篤な脳炎に羅患した。この症例につき中和抗体の測定を実施したところ急性期と回復期の組血清でダニ脳炎のロシア春夏脳炎ウイルスに有意の抗体価の上昇を示し、日本脳炎ウイルスには抗体価が低いままであった。このことから本症例はダニ脳炎ウイルスの感染によるものと診断された。
    2.イヌを歩哨動物にした疫学調査とウイルス分離;1995年4月から7月まで患者発生地区においてダニ脳炎ウイルス抗体陰性のイヌを歩哨動物として放し飼いにして抗体変動を調べ血液からのウイルス分離を試みた。10頭のイヌの中3頭の血液からウイルスが分離された。
    3.マダニからのウイルス分離;患者発生地区において1996年5月から6月にかけてマダニ類を植生上から旗ずり法にて採集し種に同定後、ウイルス分離を試みた。採集マダニの中ヤマトマダニが最優先種であった。600匹のヤマトマダニを20匹を1プールとしてウイルス分離に供したところ、2株のウイルスが分離されマダニの最小感染率は0.33%(2/600)と計算された。
    4.ノネズミからのウイルス分離;患者発生地区で1995年と1996年に捕獲したノネズミからウイルス分離を実施したところ、1995年のアカネズミ11匹中1匹と1996年のエゾヤチネズミ79匹中1匹から計2株のウイルスが分離された。
    5.分離ウイルスの性状解析;上記で分離されたウイルスは単クローン性抗体を用いた蛍光抗体法によりダニ脳炎ウイルスと同定された。さらにウイルスエンベロープ蛋白遺伝子の核酸塩基配列を解析した結果、北海道分離株はダニ脳炎のうちロシア春夏脳炎ウイルス型であることが判明した。
    6.ウマとイヌを用いた北海道におけるダニ脳炎ウイルス汚染地の特定;北海道の14支庁からウマとイヌの血清を集め抗体調査を実施したところ、ダニ脳炎の汚染地が渡島、檜山、後志及び胆振の4支庁に及んでいることが判明した。
    これらの成績からロシア春夏脳炎型のダニ脳炎ウイルスが北海道の南部に広範に分布していることが明らかなった。さらに本ウイルスがヤマトマダニとノネズミの間で維持されていることが判明した。
    日本学術振興会, 基盤研究(B), 北海道大学, 07456138
  • わが国の野性げっ歯類におけるハンタウイルスの感染調査と新型ハンタウイルスの分離
    科学研究費補助金
    1995年04月 - 1996年03月
    苅和 宏明
    日本学術振興会, 研究代表者, 競争的資金
  • 腎症候性出血熱ウイルス感染の血清診断法と検査システムの確立に関する研究
    科学研究費助成事業
    1994年 - 1996年
    有川 二郎; 高倉 彰; 杉山 和良; 吉松 組子; 苅和 宏明; 橋本 信夫
    1.バキュロウイルス発現ハンタウイルス組み換え核蛋白(Bac.HTN-NP)を用いたELISAとWestern blotting法による感度と特性を感染細胞を抗原とする従来のIFA法と比較・検討した。ラット、ヒト血清いずれにおいても感度はIFA法と同等であった。しかし、陰性血清におけるバックグランドの発色のレベルが比較的高く、発色の程度から肉眼判定するには問題点が残った。
    2.上記1.で明らかとなったバックグランド発色は、抗原の精製の不十分さが原因と考えられた。しかし、Bac.HTN-NPは、ELISA抗原として使用するための穏やかな条件下では可溶化されづらくこれ以上の精製が困難でることが判明した。そこで、次に、大腸菌中に同様のHTN-NPを発現させる系を構築した。この系では発現蛋白にビオチンが融合蛋白として結合しているためにアビジンを用いてcapture ELISAを確立した。
    3.本capture-ELISAの実験諸条件を検討し、至適抗原固相化時間ならびに抗原濃度を決定した。この条件下で本ELISAはIFAに比べ安全で同等の検出感度と特異性を有することが示され実験用ラット等を対象とする標準スクリーニングにも応用可能であると考えられた。
    4.Bac.HTN-NPをWestern blotting法に応用した場合、感度はラット血清、ヒト血清いずれにおいてもIFA法とほぼ同等であった。しかし、陰性血清群を用いた特異性の検討では、IFA法で非特異反応や紛らわしい蛍光像を示す検体でもWestern blotting法では非特異反応が全く認められなかった。すなわち、Western blotting法は、IFA法に比べ特異性が高いことが判明し、確定診断法として有用であると考えられた。
    5.今後、本法のキット化のための基礎的条件の決定が必要である。
    日本学術振興会, 基盤研究(A), 北海道大学, 06558112
  • 免疫アジュバントの経口、経鼻投与による幼若個体の非特異的ウイルス感染防御能の増強
    科学研究費助成事業
    1994年 - 1996年
    有川 二郎; 谷口 孝喜; 苅和 宏明; 喜田 宏; 東 市郎; 橋本 信夫
    免疫機能の未成熟な幼若個体への免疫アジュバントの投与によって、免疫力の賦活化を試み、そのウイルス感染症からの回復に及ぼす効果の解析を目的とし以下の成績を得た。
    1.呼吸器急性感染症、消化器急性感染症および全身感染症モデルとしてそれぞれセンダイウイルス、ロタウイルス、ハンタンウイルスおよびヘルペスウイルスと主に幼若マウスの組み合わせで実験感染系を確立した。
    2.免疫アジュバントとしてMDP-Lys(L18)を選択し、経口、経鼻、経直腸、皮下ルートでの投与法を確立した。
    3.センダイウイルスと成熟BALB/cマウス8(5週齢)の組み合わせでは、MDP-Lys(L18)をウイルス接種の-1から-3日に皮下、経鼻、経口、経直腸のいずれのルートで投与しても肺組織中でのウイルス増殖が抑制され有意な生残率の上昇が認められた。特に、経直腸ルートの投与でも呼吸器感染に対する防御効果の増強が注目される。
    4.消化器急性感染症のモデル:ロタウイルスと哺乳マウス(BALB/c、生後10日齢)の組み合わせではMDP-Lys(L18)をウイルス接種の-1から-2日に皮下、経口、経直腸のいずれのルートで投与しても下痢の発症数の有意な低下、下痢症状の軽減およびウイルス増殖の抑制が観察された。
    5.ハンタンウイルス(腎症候性出血熱、Hantaan76-118株)と哺乳マウス(BALB/c、生後1日齢)の組み合わせではウイルス接種-1から+7日にMDP-Lys(L18)の皮下接種でのみにより有意の生残率上昇が観察された。
    6.以上の成績は、免疫アジュバントによって粘膜共通免疫系全体の賦活化の可能性を示唆するものである。今後さらに免疫機能増強の定量的評価必要であると考えられる。さらに、粘膜共通免疫系を利用してワクチン抗原に対する特異免疫増強をも同時に免疫アジュバントによってさらに増強する試みも必要となろう。
    日本学術振興会, 基盤研究(B), 北海道大学, 06454716
  • ハンタウイルスの生態学的研究
    1990年
    競争的資金
  • Ecological study of hantaviruses
    1990年
    競争的資金