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吉田 磨仁 (ヨシダ キヨヒト)
| 地球環境科学研究院 環境生物科学部門 生態遺伝学分野 | 特任助手 |
研究者基本情報
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J-Global ID■ 研究キーワード・分野
研究キーワード研究分野■ 担当教育組織
研究活動情報
■ 論文- Effects of Aerobic Growth on the Fatty Acid and Hydrocarbon Compositions of Geobacter bemidjiensis Bem(T)
Akio Ueno; Satoru Shimizu; Mikako Hashimoto; Takumi Adachi; Takako Matsushita; Hidetoshi Okuyama; Kiyohito Yoshida
JOURNAL OF OLEO SCIENCE, 66, 1, 93, 101, 2017年01月, [査読有り]
英語, 研究論文(学術雑誌) - Bacterial Long-Chain Polyunsaturated Fatty Acids: Their Biosynthetic Genes, Functions, and Practical Use
Kiyohito Yoshida; Mikako Hashimoto; Ryuji Hori; Takumi Adachi; Hidetoshi Okuyama; Yoshitake Orikasa; Tadashi Nagamine; Satoru Shimizu; Akio Ueno; Naoki Morita
MARINE DRUGS, 14, 5, 2016年05月, [査読有り]
英語 - Occurrence of trans monounsaturated and polyunsaturated fatty acids in Colwellia psychrerythraea strain 34H
Mikako Hashimoto; Yoshitake Orikasa; Hidenori Hayashi; Kentaro Watanabe; Kiyohito Yoshida; Hidetoshi Okuyama
JOURNAL OF BASIC MICROBIOLOGY, 55, 7, 838, 845, 2015年07月, [査読有り]
英語, 研究論文(学術雑誌) - Structural Confirmation of a Unique Carotenoid Lactoside, P457, in Symbiodinium sp Strain nbrc 104787 Isolated from a Sea Anemone and its Distribution in Dinoflagellates and Various Marine Organisms
Takahiro Wakahama; Aitor Laza-Martinez; Ahmad Iskandar Bin Haji Mohd Taha; Hidetoshi Okuyama; Kiyohito Yoshida; Kazuhiro Kogame; Koichiro Awai; Masanobu Kawachi; Takashi Maoka; Shinichi Takaichi
JOURNAL OF PHYCOLOGY, 48, 6, 1392, 1402, 2012年12月, [査読有り]
英語, 研究論文(学術雑誌) - Polytene chromosomal maps of 11 Drosophila species: The order of genomic scaffolds inferred from genetic and physical maps
Stephen W. Schaeffer; A. Un Bhutkar; Bryant F. McAllister; Muneo Matsuda; Luciano M. Matzkin; Patrick M. O'Grady; Claudia Rohde; Vera L. S. Valente; Montserrat Aguade; Wyatt W. Anderson; Kevin Edwards; Ana C. L. Garcia; Josh Goodman; James Hartigan; Eiko Kataoka; Richard T. Lapoint; Elena R. Lozovsky; Carlos A. Machado; Mohamed A. F. Noor; Montserrat Papaceit; Laura K. Reed; Stephen Richards; Tania T. Rieger; Susan M. Russo; Hajime Sato; Carmen Segarra; Douglas R. Smith; Temple F. Smith; Victor Strelets; Yoshiko N. Tobari; Yoshihiko Tomimura; Marvin Wasserman; Thomas Watts; Robert Wilson; Kiyohito Yoshida; Therese A. Markow; William M. Gelbartt; Thomas C. Kaufman
GENETICS, 179, 3, 1601, 1655, 2008年07月
英語 - Evolution of genes and genomes on the Drosophila phylogeny
Andrew G. Clark; Michael B. Eisen; Douglas R. Smith; Casey M. Bergman; Brian Oliver; Therese A. Markow; Thomas C. Kaufman; Manolis Kellis; William Gelbart; Venky N. Iyer; Daniel A. Pollard; Timothy B. Sackton; Amanda M. Larracuente; Nadia D. Singh; Jose P. Abad; Dawn N. Abt; Boris Adryan; Montserrat Aguade; Hiroshi Akashi; Wyatt W. Anderson; Charles F. Aquadro; David H. Ardell; Roman Arguello; Carlo G. Artieri; Daniel A. Barbash; Daniel Barker; Paolo Barsanti; Phil Batterham; Serafim Batzoglou; Dave Begun; Arjun Bhutkar; Enrico Blanco; Stephanie A. Bosak; Robert K. Bradley; Adrianne D. Brand; Michael R. Brent; Angela N. Brooks; Randall H. Brown; Roger K. Butlin; Corrado Caggese; Brian R. Calvi; A. Bernardo de Carvalho; Anat Caspi; Sergio Castrezana; Susan E. Celniker; Jean L. Chang; Charles Chapple; Sourav Chatterji; Asif Chinwalla; Alberto Civetta; Sandra W. Clifton; Josep M. Comeron; James C. Costello; Jerry A. Coyne; Jennifer Daub; Robert G. David; Arthur L. Delcher; Kim Delehaunty; Chuong B. Do; Heather Ebling; Kevin Edwards; Thomas Eickbush; Jay D. Evans; Alan Filipski; Sven Findeiss; Eva Freyhult; Lucinda Fulton; Robert Fulton; Ana C. L. Garcia; Anastasia Gardiner; David A. Garfield; Barry E. Garvin; Greg Gibson; Don Gilbert; Sante Gnerre; Jennifer Godfrey; Robert Good; Valer Gotea; Brenton Gravely; Anthony J. Greenberg; Sam Griffiths-Jones; Samuel Gross; Roderic Guigo; Erik A. Gustafson; Wilfried Haerty; Matthew W. Hahn; Daniel L. Halligan; Aaron L. Halpern; Gillian M. Halter; Mira V. Han; Andreas Heger; LaDeana Hillier; Angie S. Hinrichs; Ian Holmes; Roger A. Hoskins; Melissa J. Hubisz; Dan Hultmark; Melanie A. Huntley; David B. Jaffe; Santosh Jagadeeshan; William R. Jeck; Justin Johnson; Corbin D. Jones; William C. Jordan; Gary H. Karpen; Eiko Kataoka; Peter D. Keightley; Pouya Kheradpour; Ewen F. Kirkness; Leonardo B. Koerich; Karsten Kristiansen; Dave Kudrna; Rob J. Kulathinal; Sudhir Kumar; Roberta Kwok; Eric Lander; Charles H. Langley; Richard Lapoint; Brian P. Lazzaro; So-Jeong Lee; Lisa Levesque; Ruiqiang Li; Chiao-Feng Lin; Michael F. Lin; Kerstin Lindblad-Toh; Ana Llopart; Manyuan Long; Lloyd Low; Elena Lozovsky; Jian Lu; Meizhong Luo; Carlos A. Machado; Wojciech Makalowski; Mar Marzo; Muneo Matsuda; Luciano Matzkin; Bryant McAllister; Carolyn S. McBride; Brendan McKernan; Kevin McKernan; Maria Mendez-Lago; Patrick Minx; Michael U. Mollenhauer; Kristi Montooth; Stephen M. Mount; Xu Mu; Eugene Myers; Barbara Negre; Stuart Newfeld; Rasmus Nielsen; Mohamed A. F. Noor; Patrick O'Grady; Lior Pachter; Montserrat Papaceit; Matthew J. Parisi; Michael Parisi; Leopold Parts; Jakob S. Pedersen; Graziano Pesole; Adam M. Phillippy; Chris P. Ponting; Mihai Pop; Damiano Porcelli; Jeffrey R. Powell; Sonja Prohaska; Kim Pruitt; Marta Puig; Hadi Quesneville; Kristipati Ravi Ram; David Rand; Matthew D. Rasmussen; Laura K. Reed; Robert Reenan; Amy Reily; Karin A. Remington; Tania T. Rieger; Michael G. Ritchie; Charles Robin; Yu-Hui Rogers; Claudia Rohde; Julio Rozas; Marc J. Rubenfield; Alfredo Ruiz; Susan Russo; Steven L. Salzberg; Alejandro Sanchez-Gracia; David J. Saranga; Hajime Sato; Stephen W. Schaeffer; Michael C. Schatz; Todd Schlenke; Russell Schwartz; Carmen Segarra; Rama S. Singh; Laura Sirot; Marina Sirota; Nicholas B. Sisneros; Chris D. Smith; Temple F. Smith; John Spieth; Deborah E. Stage; Alexander Stark; Wolfgang Stephan; Robert L. Strausberg; Sebastian Strempel; David Sturgill; Granger Sutton; Granger G. Sutton; Wei Tao; Sarah Teichmann; Yoshiko N. Tobari; Yoshihiko Tomimura; Jason M. Tsolas; Vera L. S. Valente; Eli Venter; J. Craig Venter; Saverio Vicario; Filipe G. Vieira; Albert J. Vilella; Alfredo Villasante; Brian Walenz; Jun Wang; Marvin Wasserman; Thomas Watts; Derek Wilson; Richard K. Wilson; Rod A. Wing; Mariana F. Wolfner; Alex Wong; Gane Ka-Shu Wong; Chung-I Wu; Gabriel Wu; Daisuke Yamamoto; Hsiao-Pei Yang; Shiaw-Pyng Yang; James A. Yorke; Kiyohito Yoshida; Evgeny Zdobnov; Peili Zhang; Yu Zhang; Aleksey V. Zimin; Jennifer Baldwin; Amr Abdouelleil; Jamal Abdulkadir; Adal Abebe; Brikti Abera; Justin Abreu; St Christophe Acer; Lynne Aftuck; Allen Alexander; Peter An; Erica Anderson; Scott Anderson; Harindra Arachi; Marc Azer; Pasang Bachantsang; Andrew Barry; Tashi Bayul; Aaron Berlin; Daniel Bessette; Toby Bloom; Jason Blye; Leonid Boguslavskiy; Claude Bonnet; Boris Boukhgalter; Imane Bourzgui; Adam Brown; Patrick Cahill; Sheridon Channer; Yama Cheshatsang; Lisa Chuda; Mieke Citroen; Alville Collymore; Patrick Cooke; Maura Costello; Katie D'Aco; Riza Daza; Georgius De Haan; Stuart DeGray; Christina DeMaso; Norbu Dhargay; Kimberly Dooley; Erin Dooley; Missole Doricent; Passang Dorje; Kunsang Dorjee; Alan Dupes; Richard Elong; Jill Falk; Abderrahim Farina; Susan Faro; Diallo Ferguson; Sheila Fisher; Chelsea D. Foley; Alicia Franke; Dennis Friedrich; Loryn Gadbois; Gary Gearin; Christina R. Gearin; Georgia Giannoukos; Tina Goode; Joseph Graham; Edward Grandbois; Sharleen Grewal; Kunsang Gyaltsen; Nabil Hafez; Birhane Hagos; Jennifer Hall; Charlotte Henson; Andrew Hollinger; Tracey Honan; Monika D. Huard; Leanne Hughes; Brian Hurhula; M. Erii Husby; Asha Kamat; Ben Kanga; Seva Kashin; Dmitry Khazanovich; Peter Kisner; Krista Lance; Marcia Lara; William Lee; Niall Lennon; Frances Letendre; Rosie LeVine; Alex Lipovsky; Xiaohong Liu; Jinlei Liu; Shangtao Liu; Tashi Lokyitsang; Yeshi Lokyitsang; Rakela Lubonja; Annie Lui; Pen MacDonald; Vasilia Magnisalis; Kebede Maru; Charles Matthews; William McCusker; Susan McDonough; Teena Mehta; James Meldrim; Louis Meneus; Oana Mihai; Atanas Mihalev; Tanya Mihova; Rachel Mittelman; Valentine Mlenga; Anna Montmayeur; Leonidas Mulrain; Adam Navidi; Jerome Naylor; Tamrat Negash; Thu Nguyen; Nga Nguyen; Robert Nicol; Choe Norbu; Nyima Norbu; Nathaniel Novod; Barry O'Neill; Sahal Osman; Eva Markiewicz; Otero L. Oyono; Christopher Patti; Pema Phunkhang; Fritz Pierre; Margaret Priest; Sujaa Raghuraman; Filip Rege; Rebecca Reyes; Cecil Rise; Peter Rogov; Keenan Ross; Elizabeth Ryan; Sampath Settipalli; Terry Shea; Ngawang Sherpa; Lu Shi; Diana Shih; Todd Sparrow; Jessica Spaulding; John Stalker; Nicole Stange-Thomann; Sharon Stavropoulos; Catherine Stone; Christopher Strader; Senait Tesfaye; Talene Thomson; Yama Thoulutsang; Dawa Thoulutsang; Kerri Topham; Ira Topping; Tsamla Tsamla; Helen Vassiliev; Andy Vo; Tsering Wangchuk; Tsering Wangdi; Michael Weiand; Jane Wilkinson; Adam Wilson; Shailendra Yadav; Geneva Young; Qing Yu; Lisa Zembek; Danni Zhong; Andrew Zimmer; Zac Zwirko; David B. Jaffe; Pablo Alvarez; Will Brockman; Jonathan Butler; CheeWhye Chin; Sante Gnerre; Manfred Grabherr; Michael Kleber; Evan Mauceli; Iain MacCallum
NATURE, 450, 7167, 203, 218, 2007年11月
英語, 研究論文(学術雑誌) - Molecular cloning and characterization of Drosophila ornithine aminotransferase gene
KM Yoshida; N Juni; SH Hori
GENES & GENETIC SYSTEMS, 72, 1, 9, 17, 1997年02月
英語, 研究論文(学術雑誌) - N. Juni, T. Awasaki, K. Yoshida and S. H. Hori : "The Om(1E) mutation in Drosophila ananassae causes compound eye overgrowth due to tom retrotransposon-driven overexpression of a novel gene", Genetics, 143 : 1257-1270 (1996)*
N Juni; T Awasaki; K Yoshida; SH Hori
GENETICS, 143, 3, 1257, 1270, 1996年07月
英語, 研究論文(学術雑誌) - T. Awasaki, N. Juni and K. M. Yoshida : "An eye imaginal disc-specific transcriptional enhancer in the long terminal repeat of the tom retrotransposon is responsible for eye morphology mutations of Drosophila ananassae", Mol. Gen. Genet., 251(2) : 161-・・・
T Awasaki; N Juni; KM Yoshida
MOLECULAR & GENERAL GENETICS, 251, 2, 161, 166, 1996年05月
英語, 研究論文(学術雑誌) - RETROTRANSPOSON-INDUCED ECTOPIC EXPRESSION OF THE OM(2D) GENE CAUSES THE EYE-SPECIFIC OM(2D) PHENOTYPE IN DROSOPHILA-ANANASSAE
K YOSHIDA; N JUNI; T AWASAKI; Y TSURIYA; N SHAYA; SH HORI
MOLECULAR & GENERAL GENETICS, 245, 5, 577, 587, 1994年12月
英語, 研究論文(学術雑誌) - Retrotransposon-induced ectopic expression of cut causes the Om(1A) mutant in Drosophila ananassae.
T Awasaki; N Juni; T Hamabata; K Yoshida; M Matsuda; Y N Tobari; S H Hori
Genetics, 137, 1, 165, 74, 1994年05月, [査読有り], [国際誌]
英語, Optic morphology (Om) mutations in Drosophila ananassae map to at least 22 loci scattered throughout the genome. They are semidominant, neomorphic, nonpleiotropic, and are associated with the insertion of a retrotransposon, tom. The Om(1A) gene, which is cytogenetically linked to the cut locus, was cloned using a DNA fragment of the cut locus of Drosophila melanogaster as a probe. Three of the eight alleles of Om(1A) examined have insertion of the tom element within a putative cut region. The gamma-ray-induced revertants of Om(1A) are accompanied with cut lethal mutations and rearrangements within the cut coding region. In the eye imaginal discs of the Om(1A) mutants, differentiation of photoreceptor clusters is suppressed, abnormal cell death occurs in the center and the cut protein is expressed ectopically. D. melanogaster flies transformed with a chimeric cut gene under the control of a heat-inducible promoter show excessive cell death in the region anterior to the morphogenetic furrow, suppressed differentiation to photoreceptor clusters and defect in the imaginal eye morphology when subjected to temperature elevation. These findings suggest that the tom element inserted within the Om(1A) region induces ectopic cut expression in the eye imaginal discs, thus resulting in the Om(1A) mutant phenotype. - A Novel Fluorescent Method for in situ Hybridization.
KAGIYAMA NAOTO; YOSHIDA KIYOHITO; HAMABATA TAKASHI; JUNI NAOTO; AWASAKI TAKESHI; FUJITA SATOSHI; MOMIYAMA MASAYOSHI; KONDOH YASUMITSU; YOSHIDA MICHIHIRO C.; HORI SAMUEL H.
ACTA HISTOCHEMICA ET CYTOCHEMICA, 26, 5, 441, 445, JAPAN SOCIETY OF HISTOCHEMISTRY AND CYTOCHEMISTRY, 1993年
英語
- 細菌における長鎖多価不飽和脂肪酸の膜リン脂質への転移メカニズムの研究
橋本美佳子; 折笠善丈; 吉田磨仁, 日本生物工学会大会講演要旨集, 67th, 242, 242, 2015年09月25日
日本生物工学会, 日本語 - ポリクローナル抗体を用いた細菌由来の多価不飽和脂肪酸合成酵素の検出
牛膓健司; 橋本美佳子; 堀内綾乃; 横山愛; 吉田磨仁; 折笠善丈, 日本生物工学会大会講演要旨集, 67th, 96, 96, 2015年09月25日
日本生物工学会, 日本語 - Brevibacillusを用いたドコサヘキサン酸合成遺伝子の発現
橋本美佳子; 堀内綾乃; 吉田磨仁; 奥山英登志; 花方寛; 水上誠; 宮内明; 折笠善丈, 日本生物工学会大会講演要旨集, 66th, 29, 29, 2014年08月05日
日本生物工学会, 日本語 - 高度好冷菌Colwellia psychrerythraea strain34Hの脂肪酸
橋本美佳子; 折笠善丈; 吉田磨仁; 林秀則; 奥山英登志, 極域科学シンポジウム講演予稿集(CD-ROM), 5th, ROMBUNNO.OB,12GATSU3NICHI,10:50, 2014年
日本語 - 細菌の長鎖多価不飽和脂肪酸合成酵素遺伝子
吉田磨仁; 奥山英登志; 折笠善丈, オレオサイエンス, 13, 5, 211, 219, 2013年05月01日
1996年に海産魚類に由来する細菌からエイコサペンタエン酸(EPA)の合成に関わる遺伝子(pfa)が初めてクローニングされた。これは深海のサンプルから単離された好冷菌がEPA やドコサヘキサエン酸(DHA)などの長鎖多価不飽和脂肪酸(LCPUFA)をもち,それが細菌の低温,高水圧への適応に関わると報告されてからおおよそ10年後のことである。LCPUFA合成に関わるpfa遺伝子は通常pfaA-pfaEの5つの遺伝子からなる。この遺伝子群はポリケチド合成に関わる遺伝子と部分的に相同であり,多機能酵素タンパク質をコードする。現在,EPAまたはDHA合成に関わるpfa遺伝子とも大腸菌での異種発現が可能である。現在pfa遺伝子はデータベースの検索によって,低温環境に関わらず,熱帯・亜熱帯の海洋環境に由来する細菌に広く分布することが明らかになっている。しかし,面白いことに典型的なpfa遺伝子はγ-プロテオバクテリアに属する限られた属の細菌にのみ分布する。最近の研究によってpfa遺伝子はoleA-oleD遺伝子と共存することによって超長鎖多価不飽和炭化水素であるヘントリアコンタノナエン(C31:9)の合成に関わることが明らかにされている。さらに,pfa遺伝子とole遺伝子はLCPUFAはもたないが,C31:9をもつ絶対嫌気性菌にも存在することから,pfa遺伝子の本来の存在意義はC31:9の合成にあるとも考えられる。本総説ではLCPUFA合成に関わるpfa遺伝子の構造についてまとめ,pfa遺伝子の細菌における分布と,実用的利用の可能性について述べる。, 公益社団法人 日本油化学会, 日本語 - Identification of the Om(1J)Su gene, a suppressor of tom-induced Om mutations in Drosophila ananassae
Kiyohito Yoshida; Monica L. Acosta, GENES & GENETIC SYSTEMS, 85, 6, 432, 432, 2010年12月
英語, 研究発表ペーパー・要旨(国際会議) - Identification of the Om(1J)Su gene, a suppressor of tom-induced Om mutations in Drosophila ananassae
Kiyohito Yoshida; Monica L. Acosta, GENES & GENETIC SYSTEMS, 84, 6, 440, 440, 2009年12月
英語, 研究発表ペーパー・要旨(国際会議) - アナナスショウジョウバエのOm(1E)突然変異: レトロトランスポゾンtomの挿入によってひきおこされる複眼の増生
従二直人; 浜端崇; 吉田磨仁; 粟崎健; 堀浩, 日本遺伝学会大会プログラム・予稿集, 66th, 1994年 - アナナスショウジョウバエの複眼形態突然変異Omと転移因子tomの関係について
粟崎健; 従二直人; 吉田磨仁; 堀浩, 日本遺伝学会大会プログラム・予稿集, 66th, 1994年 - アナナスショウジョウバエの複眼形態突然変異Om(2C)遺伝子のクローニング
中村英明; 粟崎健; 従二直人; 吉田磨仁; 堀浩, 日本遺伝学会大会プログラム・予稿集, 65th, 1993年 - 転移因子tomにより引き起こされるアナナスショウジョウバエの複眼形態突然変異,Om(1A)突然変異の解析
粟崎健; 従二直人; 松田宗男; 吉田磨仁; 堀浩; 戸張よし子, 日本遺伝学会大会プログラム・予稿集, 65th, 1993年 - DNASE I-HYPERSENSITIVE SITES AROUND THE G6PD CODING REGION IN DROSOPHILA-MELANOGASTER
K YOSHIDA; SH HORI, JAPANESE JOURNAL OF GENETICS, 62, 6, 567, 568, 1987年12月
日本語, 研究発表ペーパー・要旨(国際会議)
- 環境科学研究基礎論, 2024年, 修士課程, 環境科学院
- 生態遺伝学特論Ⅱ, 2024年, 修士課程, 環境科学院
- 細胞生物学概論, 2024年, 学士課程, 理学部
- ISP生物科学実習Ⅰ・a, 2024年, 学士課程, 理学部
- ISP生物科学実習Ⅰ・b, 2024年, 学士課程, 理学部
- 遺伝学実習, 2024年, 学士課程, 理学部
- 遺伝学実習, 2024年, 学士課程, 総合教育部
- 環境生物学Ⅱ, 2024年, 学士課程, 理学部
- 英語演習, 2024年, 学士課程, 全学教育
■ 共同研究・競争的資金等の研究課題
- ナミテントウの翅鞘斑紋パターン形成に関与する遺伝子の分離固定
科学研究費助成事業
1998年 - 1999年
吉田 磨仁
ナミテントウ(Harmonia axyridis)は,生態学,応用昆虫学の研究材料として古くから注目されてきた。本種の翅鞘斑紋は遺伝的多型の例として知られ、赤地型、二紋型、四紋型、多紋型などが知られている。遺伝学的研究によれば、斑紋を支配する遺伝子は30以上知られており、これらの遺伝子はすべて同じかもしくはきわめて近接した遺伝子座の複対立遺伝子であると考えられている。本研究では斑紋形式のメカニズムの解明の第一歩として、斑紋形成に関わる遺伝子の探求を以下の2つの方法で試みた。
鱗翅目昆虫では、Distal-less(Dll)遺伝子が斑紋を形成する翅始原組織の細胞群で発現していることが明らかになっている。そこでDll遺伝子が、ナミテントウにおいても斑紋状に発現している可能性について調査した。組織学的観察の結果、翅原基の形成は4齢虫期に開始することが明らかになったので、4齢幼虫、前蛹、蛹期の翅原基でのDll遺伝子の発現をチョウのDll蛋白に対する抗体を用いて調べた。その結果、4齢虫期の翅原基においてはこの遺伝子は翅の縁の沿って発現しており、斑紋状には発現していなかった。従ってナミテントウではDll遺伝子は、斑紋形成には直接は関与していないと考えられた。
次に、斑紋形成に関与する遺伝子を単離することを目的に、翅原基に特異的なcDNAライブラリーを作成することにした。まず、4齢、前蛹、蛹の各段階の翅原基からcDNAライブラリーを作成した。次に、前蛹のcDNAから4齢のcDNAと共通に存在するものをハイブリダイゼーションを利用して除去、前蛹期に発現が始まる遺伝子のcDNAとした。また、前蛹のcDNAと蛹のcDNAとに共通するものを除去し、蛹期に発現が減少する遺伝子のcDNAとした。以上の結果、10個の遺伝子が分離された。これらのcDNAの塩基配列を決定し、ホモロジー検索をした結果、これまで知られている遺伝子と高い相同性は示されなかった。今後、得られたcDNAを用いて本種翅始原組織における発現場所を調べ、これらの遺伝子が斑紋形成に関係しているかどうかを明らかにしたい。
日本学術振興会, 奨励研究(A), 北海道大学, 10740349 - ショウジョウバエの動く遺伝子による突然変異誘発機構の研究
1995年
競争的資金 - Genetic analysis of the transposon in Drosophila
1995年
競争的資金 - 正の調節作用を有する欠損型P因子の作用機序
科学研究費助成事業
1992年 - 1993年
堀 浩; 吉田 磨仁
近年、我々が見出したキイロショウジョウバエのG6PD高活性突然変異では、G6PD転写領域直前に609塩基及び1154塩基よりなる欠損型P因子(コアP因子及び、KP因子)が挿入することによって、G6PD遺伝子の転写上昇が起こっている。この機構を主としてin vitro転写系を用いて明らかにした。その結果、次のような知見が得られた。1.[コアP-KP]DNAはその挿入の向き、G6PD遺伝子との距離に関らず転写を促進することから、[コアP-KP]DNAはG6PD遺伝子のエンハンサーとして働いている。2.エンハンサー領域を同定するために、様々な領域を欠失させた[コアP-KP]DNAをG6PD遺伝子上流に挿入し、転写促進の効果を調べた結果、コアP内の80bp領域とKP内の2つの領域が転写促進に関与していた。3.ゲルシフト解析により、これら3つの領域に結合する核蛋白質が存在していた。4.一方、[コアP-KP]DNAをactin 5C遺伝子上流に挿入しても転写促進は起こらなかった。この事から、G6PD遺伝子のプロモーターの一部が[コアP-KP]から成るエンハンサーと相互作用していると予想された。5.そこで、様々なG6PDプロモーター領域をactin 5C遺伝子上流につないだfusion DNAを作成し、[コアP-KP]DNAエンハンサー挿入によりこのDNAの転写が促進されるか否かを調べた結果、転写の促進にはG6PD遺伝子転写開始点周辺の20bpDNAの存在が必要であることが分かった。この領域はハウスキーピング遺伝子の発現調節に重要と考えられている配列と強いホモロジーを示す。
以上の結果は、複数の動く遺伝子の組み合わせが新たな転写調節配列を作り得ることを示しており、動く遺伝子が遺伝子発現に及ぼす影響は従来考えられているより多様であり、単純に「動く遺伝子=selfish DNA」と結論は出来ないことを示唆している。
日本学術振興会, 一般研究(C), 北海道大学, 04640590 - 蛍光基質を用いた微量核酸検出法の開発
科学研究費助成事業
1990年 - 1991年
堀 浩; 吉田 麿仁; 吉田 廸弘; 白浜 晴久; 高木 信夫
組換えDNA技術を用いた遺伝子構造および機能の研究はラジオアイソト-プの使用量を飛躍的に増加させ,RI施設の狹隘化,汚染廃棄物の蓄積など様々な問題をひき起している。本研究の目的はRIを用いずに遺伝子の研究が行えるような方法の開発にある。既に非RI法としていくつかの方法が欧米で開発され実用段階に入ってはいるが,我々は既存の方法とは異る蛍光法を採用し全く別の角度よりこの問題に取組んでいる。採用した方法はデイゴキシゲニンで標識したDNAに,アルカリ性フォスファタ-ゼをつけた抗体を結合させ,酵素活性を蛍光基質を用いて可視化するという方法である。そのためには酵素と反応して不溶性となり蛍光を発する基質を新たに合成する必要がある。現在までにクマリン誘導体26種,ペリレン誘導体7種,フルオレシン誘導体5種,ナフト-ル誘導体46種,その他2種,合計86種の蛍光物質を合成し,(1)480〜500nm以上の長波長域に蛍光を示し,(2)反応後フィルタ-に沈着し,(3)比蛍光強度が高い,という三点に関してスクリ-ニングを行った。その結果,3ーHydroxyーNー2ーbiphenylylー2ーnaphthalenecarboxamide(HNPP)が最良の蛍光基質であることが判った。これを用いるとスポットテストで10fg(既存法の最高感度),サザンハイブリダイゼ-ションにより70fgのDNAを検出出来る。また,解像度,所要時間,反応のモニタ-,デ-タ-の保存,リプロ-ブの容易さ,試薬の安定性など要求される全ての点で他の非RI法より優れていることが実証された。
日本学術振興会, 試験研究(B), 北海道大学, 02559002
